转染试剂使用注意事项.doc
Lipofectamine 2000细胞转染实验步骤 注意事项
Invitrogen阳离子转染试剂Lipofectamine 2000细胞转染实验步骤注意事项2010-07-10 16:16Invitrogen的细胞转染试剂：Lipofectamine 2000Lipofectamine 2000是最为人熟知的转染产品之一。
已知可为517种细胞（见下面连接地址）提供高转染效率（表达转基因细胞的百分数）和活性（细胞抽提物中转入基因的酶产物活性）。
特点两个关键性特点使得Lipofectamine 2000试剂的转染步骤快速简便：（1）DNA-阳离子脂质体试剂的复合体可以直接加入到细胞培养基中，有血清也不怕（2）转染后不需要除去Lipofectamine 2000试剂，无需换培养基操作流程事实上Lipofectamine系列产品操作流程都是又快又简单：稀释DNA 以及Lipofectamine 2000，混合2种稀释液保温20分钟，加入培养细胞中孵育24－96小时检测结果。
下面是Invitrogen提供的详细流程和注意事项。
转染前一天，胰酶消化细胞并计数，细胞铺板，使其在转染日密度为90%。
细胞铺板在0.5ml含血清，不含抗生素的正常生长的培养基中。
对于每孔细胞，使用50μl无血清培养基（如OPTI-MEMⅠ培养基）稀释0.8μg-1.0μg DNA。
对于每孔细胞，使用50μl OPTI-MEMⅠ培养基稀释1μl-3μl LIPOFECTAMINE 2000试剂。
Lipofectamine 2000稀释后保温5分钟（在30分钟内同稀释的DNA 混合。
保温时间过长会降低活性。
）注意：即使Lipofectamine 2000使用OPTI-MEMⅠ稀释，细胞也可以使用D-MEM培养。
如果D-MEM做为Lipofectamine 2000的稀释液，必须在5分钟内同稀释的DNA混合。
混合稀释的DNA（第2步）和稀释的Lipofectamine 2000（第3步）。
在室温保温20分钟。
细胞培养转染技术的使用注意事项
细胞培养转染技术的使用注意事项细胞培养转染技术是生物学、医学研究中常用的一种技术手段，它通过引入外源DNA或RNA分子到目标细胞中，实现对细胞功能的改变和基因表达的调控。
在进行细胞培养转染技术时，需要注意以下几个方面的事项，以确保实验结果的准确性和可重复性。
1.选择合适的细胞株和培养条件在进行细胞培养转染技术之前，需要选择适合的细胞株和培养条件。
不同细胞株对转染方法的适用性有差异，因此要根据实验目的选择合适的细胞株。
此外，要做好细胞的预处理工作，保证细胞的健康状况和培养环境的稳定性。
2.选择合适的转染试剂和方法在细胞培养转染技术中，选择合适的转染试剂和方法是非常重要的。
常见的转染试剂包括化学试剂、病毒载体和电穿孔等，每种方法都有其优缺点和适用范围。
在选择转染试剂时，要考虑到实验目的、细胞类型，以及试剂对细胞的毒性影响等因素。
同时，要根据实验需要选择合适的转染方法，如瞄准细胞核或质粒转染等。
3.优化转染条件转染过程中的能量和试剂浓度等条件对转染效率有重要影响。
因此，需要进行一系列的优化实验，以确定最佳的转染条件。
可以尝试不同的试剂浓度、转染时间和培养温度等参数，以提高转染效率并减少毒性和非特异性效应。
4.合理设计实验对照组在进行细胞培养转染技术时，应合理设计对照组。
对照组是用来验证实验结果的重要组成部分，它通常包括阴性对照组和阳性对照组。
阴性对照组是指未转染或使用空载体转染的细胞，用以排除实验结果中的背景噪音和非特异性效应。
阳性对照组是指已知有效的转染试剂或方法，用来验证实验的可行性和准确性。
5.合理设计实验时间和重复次数在进行细胞培养转染实验时，需要合理安排实验时间和重复次数。
通常情况下，要在不同时间点收集样本并进行分析，以确定转染效果的持久性和稳定性。
此外，为了提高实验结果的准确性和可靠性，建议进行适当的重复实验，统计分析结果的差异性。
6.正确选择检测方法和时间在转染后，需要通过合适的方法检测目标基因或蛋白的表达情况。
转染试剂使用说明书
210102
1ml
1. 2. 3. 4. 5. 6.
适用范围及特点： 适应于众多原代培养细胞和转化细胞株的基因转染 适用于瞬时转染和稳定转染 适应于贴壁细胞和悬浮细胞转染 转染效率高且稳定，在有无血清存在的细胞培养基中均能获得高效率转染 细胞毒性低 转染程序简单，转染实验可以在半小时内完成
产品储存： GenFectinTM (1.0mg/ml) 在室温下运输，试剂到时请即存放于 4℃，在 4℃可存放
2. 3).
配制转染工作液： （ 6 孔板或 35 mm 平皿， 2 ml 培养液） 取 5~8μ g DNA （起始用量 5μ g） ，加入稀释液中至总体积为 100μ l，轻轻混匀，室 温放置。
4).
先将 GenFectin TM 涡旋振荡混匀。取 GenFectinTM 1~4μ0μl，轻轻混匀，室温放置 5 分钟。
8).
稳定转染时，于转染后 24~48 小时消化细胞分至 3~5 个培养皿中，加适当浓度的 相应抗生素（如 G418）筛选。
建议的起始转染条件 : 培养容器
96 孔板 24 孔板 6 孔板 35mm 培养皿 60mm 培养皿
转染前一天 接种细胞数
1-1.510 个 0.5-1 10 个 2-4 10 个 2-4 10 个 4-6 105 个
3.
GenFectinTM 在转染中不受血清影响，所以 GenFectinTM / DNA 复合物能直接加到 含血清的培养基中，但稀释 GenFectinTM 和 DNA 的缓冲液不能混有血清，因为 GenFectinTM 在制备 GenFectinTM / DNA 复合物之前可能会与血清中的蛋白质反 应，影响转染效率。
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PEI细胞转染液使用方法(标准版)
PEI细胞转染液是一种广泛应用于实验室的转染试剂，用于将外源DNA或RNA 转染到细胞中。
以下为PEI细胞转染液的标准使用方法：一、准备工作1. 细胞：选择合适的细胞类型，如HEK293、CHO等。
确保细胞状态良好，密度适中。
2. 转染试剂：PEI细胞转染液。
3. 外源DNA或RNA：需转染的基因或表达载体。
4. 实验器材：离心机、显微镜、培养皿、移液器等。
二、操作步骤1. 细胞培养：将细胞接种于适当的培养皿中，用含适当抗生素的培养基培养细胞。
将培养皿放入37℃、5% CO₂的培养箱中，进行细胞培养。
2. 转染液制备：根据实验要求，将PEI细胞转染液按照一定比例稀释。
一般情况下，可以使用10倍稀释的PEI细胞转染液。
3. 转染操作：（1）将稀释后的PEI细胞转染液与外源DNA或RNA混合均匀。
（2）用移液器将混合液滴加到细胞培养皿中，注意不要直接将液体倒在细胞上，以免破坏细胞。
（3）将培养皿轻轻摇晃，使转染液与细胞充分接触。
然后将培养皿放入培养箱中，继续培养。
4. 转染后处理：转染后的细胞需要继续培养，观察转染效果。
根据实验要求，可使用荧光显微镜、实时定量PCR等方法检测转染效果。
三、注意事项1. 操作过程中，应确保实验器材干净无菌，避免污染。
2. 转染过程中，应控制转染液的浓度和滴加速度，避免对细胞造成过度刺激。
3. 转染后，注意观察细胞状态，如出现异常情况，应立即处理。
4. 实验过程中，应遵循实验室安全规定，确保人身安全。
以上为PEI细胞转染液的标准使用方法。
实际操作过程中，可能因实验条件、细胞类型等因素而有所调整。
在实际应用中，请根据具体情况进行操作。
EndoFectin-CHO 转染试剂 说明书
EndoFectin™-CHO 转染试剂■ 产品概述：EndoFectin™ CHO 转染试剂是一种具有专利的阳离子聚合物试剂，它能与核酸形成复合物，并使该复合物进入哺乳动物细胞。
EndoFectin™ CHO 转染试剂专为转染CHO 细胞，并构建稳定的细胞系而设计。
即使在有血清存在的情况下，它仍然能高效的将核酸导入细胞。
GeneCopoeia 公司提供的 EndoFectin™ CHO 转染试剂有如下优点：• 优越的转染效率• 重组蛋白的高表达水平• 与含血清的培养基相兼容• 低细胞毒性• 易于操作■ 成分及储存条件：• 每管含有经过滤除菌的EndoFectin™ CHO 转染试剂• EndoFectin™ CHO 转染试剂 可于常温下运输。
4-8℃密闭保存。
该试剂在4-8℃的条件下，可保持稳定至少12个月。
■ 质量控制：每批EndoFectin™ CHO 均经过转染测试。
我们将eGFP 表达质粒(GeneCopoeia Catalog No. EX-EGFP-Lv01)用EndoFectin™ CHO 转染试剂转入subconfluent HEK-293 细胞。
转染16小时后，超过95%的细胞表达eGFP 。
■ 实验开始前的注意事项：质粒的质量：请务必使用高质量转染级无内毒素的质粒。
通过260nm 光吸收测定DNA 浓度，260nm/280nm 比值确定DNA 纯度（比值应该在1.8~2.0的范围之内）。
如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。
细胞的条件：使用适当保存和经常传代的健康细胞。
确保培养基没有被细菌，真菌或支原体污染。
如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。
■ 瞬时转染方法：1. 接种细胞1转染前一天，用胰酶消化细胞并计数。
调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，总体积如表1所示。
每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。
2. 准备DNA/EndoFectin™复合物GeneCopoeia Inc.19520 Amaranth DriveGermantown, Maryland 20874USATel: 301-515-6982; 1-866-360-9531Fax: 301-515-6983Web: GeneCopoeiaTMExpressway to Discovery用于转染核酸到哺乳动物细胞产品套装编号： Z0103储存条件：4℃－8℃保存 产品编号Z01030A Z01030BZ01030C （A*5）包装规格1mL 0.5mL 5 mL地址:广州高新技术产业开发区广州科学城掬泉路3号广州国际企业孵化器D 区8楼，510663客服电话*************电子信箱:********************网址:该产品仅限于实验科学研究用，若有任何单位或个人将该产品用于临床诊断、治疗等其他国家专门规定的特殊用途，本公司概不承担任何责任。
lip3000转染说明书
Lip3000转染说明书一、引言本说明书旨在提供关于使用Lip3000进行转染实验的详细步骤和操作注意事项。
Lip3000是一种常用的基因转染试剂，适用于各种细胞类型的转染，无论是质粒DNA转染还是RNA干扰实验。
本转染试剂的使用方法简单且高效，能够快速将外源基因导入到细胞内。
在进行Lip3000转染实验之前，请阅读本说明书并仔细按照步骤进行操作。
二、实验材料•Lip3000转染试剂•承载目标基因的质粒DNA（或RNA）•细胞培养基•细胞培养器具（离心管、无菌培养皿等）•离心机•PCR仪（或其他适用于转染验证的仪器）三、实验步骤1. 细胞预处理在进行转染之前，首先需要对待转染细胞进行预处理。
以下是一般的细胞预处理步骤：1.将细胞培养在含有适宜培养基的培养皿中，以确保细胞处于最佳状态。
2.细胞密度应达到80%~90%的收缩。
注意不要使细胞超过90%的收缩，否则会影响转染效率。
3.在转染前，将培养皿中的培养基抽去，并用预暖的PBS洗涤细胞，以确保细胞表面不含有培养基或其他干扰物。
2. 转染操作请按照以下步骤进行转染操作：1.将Lip3000转染试剂放在室温下静置10分钟，使其回到室温并充分混匀。
2.在一个无菌离心管中，将转染试剂按照以下比例混合：–将500μl Opti-MEM培养基加入离心管中；–加入2.5μl Lip3000试剂，轻轻混匀；–静置20分钟，使转染试剂和培养基充分结合。
3.将预处理后的细胞培养皿中的PBS抽去，加入稀释后的Lip3000转染试剂。
注意：转染试剂的添加量需根据细胞的情况进行优化，典型的转染试剂与细胞的最佳比例为2:1。
4.搅拌培养皿或转动培养皿，使转染试剂均匀分布在培养皿上的细胞中。
5.保持培养皿平放，在37°C的细胞培养箱中孵育转染混合液4至6小时。
细菌转染时间的长短根据细胞的特性和转染效果进行调整。
3. 转染验证与后续处理待转染时间到达后，即可以进行转染效果的验证。
英格恩entranster转染试剂说明书
英格恩entranster转染试剂说明书一、产品概述英格恩 Entanster 转染试剂是一种用于转染外源 DNA/RNA 到细胞内的试剂。
它是经过优化的化学试剂组合，可以将外源 DNA/RNA 高效地传递到各种细胞中，并促进其定向表达。
本试剂适用于体外转染实验和基因工程研究，具有高转染效率、低细胞毒性、简单易用等优点。
二、试剂成分英格恩 Entanster 转染试剂主要成分包括转染缓冲液和转染增强剂。
转染缓冲液中包含有机溶剂、非离子表面活性剂等，用于稳定 DNA/RNA与转染剂的结合。
转染增强剂含有具有阴离子表面活性剂、脂质、蛋白质等物质，可以提高细胞膜通透性和转染效率。
三、使用说明1.储存和稀释：试剂应储存于-20℃的冰箱中，保持干燥和避光。
使用前需要将试剂溶解在适当体积的转染缓冲液中，最佳稀释比例为1：9、溶液需充分混匀，离心并去除任何沉淀物。
2.样品准备：在转染前，将目标DNA/RNA溶解在适当的缓冲液中，浓度通常在0.1-1μg/μL最佳。
确保样品充分溶解并无明显沉淀。
3.转染操作：对于已经培养至适当倍数的细胞，将细胞用预先暖和的转染缓冲液洗涤一次，并去除缓冲液。
将转染缓冲液和溶解好的目标DNA/RNA混合，稍微搅拌均匀。
与此同时，将适量的转染增强剂加入到混合物中，充分混合。
然后将混合物直接滴加到细胞上，并轻轻摇晃培养板以确保混合物均匀分布。
4.培养和检测：将含有转染混合物的培养板放回恒温培养箱中，保持恒定的温度和CO2浓度。
培养时间和温度根据需要进行调整，通常在24-48小时后可以进行下一步实验或观察。
四、注意事项1.试剂需保存在干燥、阴凉、避光的环境中，避免结冰或暴露在高温环境中。
2.操作中需佩戴手套并遵循生物安全实验操作规范。
3.使用前需充分摇匀试剂瓶，确保所有试剂成分充分混合均匀。
4.转染缓冲液中的有机溶剂可能对一些细胞有毒性，因此在选择试剂时应参考相关文献或尝试不同的浓度和时间，以确定最佳条件。
Lipofectamine 2000细胞转染实验步骤 注意事项
Invitrogen阳离子转染试剂Lipofectamine 2000细胞转染实验步骤注意事项2010-07-10 16:16Invitrogen的细胞转染试剂：Lipofectamine 2000Lipofectamine 2000是最为人熟知的转染产品之一。
已知可为517种细胞（见下面连接地址）提供高转染效率（表达转基因细胞的百分数）和活性（细胞抽提物中转入基因的酶产物活性）。
特点两个关键性特点使得Lipofectamine 2000试剂的转染步骤快速简便：（1）DNA-阳离子脂质体试剂的复合体可以直接加入到细胞培养基中，有血清也不怕（2）转染后不需要除去Lipofectamine 2000试剂，无需换培养基操作流程事实上Lipofectamine系列产品操作流程都是又快又简单：稀释DNA 以及Lipofectamine 2000，混合2种稀释液保温20分钟，加入培养细胞中孵育24－96小时检测结果。
下面是Invitrogen提供的详细流程和注意事项。
转染前一天，胰酶消化细胞并计数，细胞铺板，使其在转染日密度为90%。
细胞铺板在0.5ml含血清，不含抗生素的正常生长的培养基中。
对于每孔细胞，使用50μl无血清培养基（如OPTI-MEMⅠ培养基）稀释0.8μg-1.0μg DNA。
对于每孔细胞，使用50μl OPTI-MEMⅠ培养基稀释1μl-3μl LIPOFECTAMINE 2000试剂。
Lipofectamine 2000稀释后保温5分钟（在30分钟内同稀释的DNA 混合。
保温时间过长会降低活性。
）注意：即使Lipofectamine 2000使用OPTI-MEMⅠ稀释，细胞也可以使用D-MEM培养。
如果D-MEM做为Lipofectamine 2000的稀释液，必须在5分钟内同稀释的DNA混合。
混合稀释的DNA（第2步）和稀释的Lipofectamine 2000（第3步）。
在室温保温20分钟。
FuGENE HD 转染试剂简明操作指导说明书
FuGENE®HD转对于表格中未列出的细胞，采用以下步骤进行实验后，可寻找到适用于您所研究细胞的最佳质粒与转染试剂的配比：FuGENE®HD 转染试剂简明操作步骤II. 准备实验所需的细胞、试剂及耗材：•细胞：在合适的培养条件下（建议采用无抗生素培养基，可以含任意比例的血清），实验前细胞系培养至长满60%-80%，原代细胞培养至适当的时间；•转染试剂：使用前，将转染试剂放至室温，颠倒混匀(FuGENE®HD转染试剂储存于4℃，如不慎将FuGENE®HD冰冻，融化后可能会看到不溶物。
这时可将试剂短暂升温至37℃，颠倒混匀后不溶物消失)；•质粒：携带报告基因或荧光蛋白的质粒，用于计算转染效率;•无菌、无血清培养基：用于配制质粒与转染试剂的混合物；•无菌的枪头、离心管，超净工作台等。
简易流程图培养细胞至60%-80%融合度配制质粒与转染试剂的混合物混合物加入培养的细胞中检测，计算转染效率I I I.操作步骤1.将无血清培养基预热至室温，按下表的比例配制质粒与转染试剂的混合物：FuGENE®HD与质粒DNA的比例4:1 3.5:13:1 2.5:12:1 1.5:1培养基100μl100μl100μl100μl100μl100μl质粒2μg2μg2μg2μg2μg2μg FuGENE®HD8μl7μl6μl5μl4μl3μl注意：FuGENE®HD应直接加入培养基中，不用沾到离心管的管壁上2.混合物室温静置10-15 min。
3.将混合物滴加至培养的细胞中，96孔板每孔加入5µl，其他孔板的加入量可以按照右侧的表格进行计算。
摇晃或吹打混匀。
继续培养24-48 hr。
4.检测转染效率。
进行报告基因检测或计数表达绿色荧光蛋白的细胞数目，确定最佳的质粒与转染试剂的比例。
注：FuGENE®HD转染试剂对细胞几乎没有毒性，遇到特别难转染的细胞，希望提高转染效率时，可以将混合物的加入量加倍至10μl/孔或15μl/孔（96孔板，其他培养板按培养面积放大）。
lipo293转染试剂说明书
Lipo293转染试剂是一种高效的转染试剂，特别适用于贴壁生长的HEK293、HEK293T、HEK293A、293FT等293系列细胞的转染。
以下是Lipo293转染试剂的使用说明书：适用范围：Lipo293转染试剂适用于贴壁生长的HEK293、HEK293T、HEK293A、293FT等293系列细胞的转染。
转染步骤：（1）准备转染试剂和DNA：按照推荐的DNA用量，将DNA溶解在无菌水中，然后与Lipo293转染试剂按照1:1的比例混合。
（2）细胞处理：将细胞按照推荐的培养条件在细胞培养箱中培养至适宜的密度。
（3）转染：将DNA-Lipo293复合物与细胞混合，并轻轻摇晃，使复合物均匀分布。
（4）培养：将转染后的细胞继续培养，期间注意观察细胞的生长状态。
注意事项：（1）使用高质量的DNA：为了获得最佳的转染效果，建议使用高质量的DNA。
（2）细胞密度和状态：转染前，细胞需要处于良好的生长状态，密度适宜。
（3）保存条件：Lipo293转染试剂应保存在4℃或-20℃的条件下，避免反复冻融。
（4）过敏反应：对于过敏体质的用户，建议在使用前进行皮肤过敏试验。
北京普利莱基因技术有限公司DOTAP真核细胞转染试剂使用说明说明书
DOTAP真核细胞转染试剂使用说明C1510描述：DOTAP是一种阳离子脂质体，可与DNA或RNA形成稳定的转染复合物进入细胞，并将核酸释放入细胞内。
它以可靠性和高效性著称，是广泛使用的商品化转染试剂。
我们的DOTAP真核细胞转染试剂是由DOTAP 和中性辅助脂质以特定比例融合制备而成的单层脂质体悬液。
这种制备方法增加了脂质体对真核细胞转染的高效性、广谱性、低毒性和可靠性，并使试剂在4°C储存至少稳定12个月。
DOTAP可高效转染多种细胞，甚至在低浓度血清环境也可工作良好。
它属于可被生物降解的脂质体因而细胞毒性明显降低，其转染效率高于Sigma公司的DOTAP单体转染试剂，与Invitrogen的LipofectAMINE相当，但其价格仅相当同类试剂的1/3。
转染时只需将稀释的DOTAP试剂与DNA溶液混合并室温放置15分钟即可加入细胞。
1ml DOTAP可转染100-500µg DNA或50-100只35mm培养皿或250-1000孔24孔板细胞。
颜色：清亮或略呈白色胶体溶液。
储存：4°C储存12个月。
切勿冻存。
适用：将DNA、RNA、寡聚核苷酸转入真核细胞。
适用于大多数传代或原代细胞。
转染步骤：以生长于24孔板的一个孔内的贴壁细胞为例，使用其它规格培养皿参见表一。
细胞准备：转染前一天传0.5-2x105细胞于24孔板内，加1ml正常培养基培养。
在光镜下观察细胞，当细胞群覆盖培养瓶皿生长表面的85-95%时，为DOTAP转染的最佳时机。
这通常需要18-24小时，但依细胞类型和接种量而变。
注意：传代时接种过多的细胞，100%长满的细胞的转化效率明显降低制备转染复合物：对特定细胞类型来说，应该优化加入DNA(µg)和DOTAP(µl)比率和绝对量，参见后面附表。
推荐DNA和DOTAP 的初始比例为1:4。
DNA(µg)：DOTAP(µl)＝1:2～1:8转染实际上是人为造成细胞对外源物质的高摄取状态，因此过量摄入DNA和转染试剂将导致细胞毒性而降低转染效率。
imax转染说明书
imax转染说明书IMAX转染说明书一、产品介绍IMAX转染是一种高效、可靠的基因转染试剂，用于将外源基因导入靶细胞内。
IMAX转染试剂采用了先进的纳米技术，能够将基因材料快速而有效地送入细胞。
此试剂适用于多种细胞类型，包括哺乳动物细胞、鸟类细胞、昆虫细胞等。
二、使用方法1. 预处理细胞：将细胞均匀分散在培养皿中，培养至80%的密度。
2. 添加IMAX转染试剂：按照所需转染细胞数量的1:2比例，将IMAX转染试剂与培养基混合均匀，静置15分钟。
3. 转染：将转染混合液均匀滴加到预处理的细胞上，轻轻摇晃培养皿，使转染混合液均匀分布。
4. 培养：将含有转染细胞的培养皿放回培养箱中，继续培养细胞。
根据不同的实验目的，培养时间可在24小时至72小时之间。
5. 分析：根据实验需要，可以通过荧光显微镜观察转染效果，或使用其他方法进行验证。
三、注意事项1. IMAX转染试剂仅供科研使用，严禁用于人体或动物临床治疗。
2. 使用前请仔细阅读说明书，并按照规定操作，避免交叉污染和误操作。
3. 转染时，转染混合液应均匀滴加到细胞上，避免产生气泡或水珠，以确保转染效果。
4. 不同细胞类型对转染试剂的敏感性不同，建议进行细胞类型的优化实验，以获得最佳转染效果。
5. 转染后的细胞应及时进行培养，避免过度培养导致细胞死亡或转染效果下降。
6. 转染试剂应存放在干燥、阴凉的地方，避免阳光直射或高温环境，保证试剂的稳定性和使用寿命。
四、优势和应用领域1. 高效转染：IMAX转染试剂采用纳米技术，能够高效地将基因材料导入细胞内，提高转染效率。
2. 适用广泛：IMAX转染试剂适用于多种细胞类型，可用于基因功能研究、基因治疗、细胞工程等领域。
3. 低细胞毒性：IMAX转染试剂具有低细胞毒性，不会对细胞的生长和代谢产生明显影响。
4. 稳定性好：IMAX转染试剂经过严格的质量控制，具有良好的稳定性和一致性。
IMAX转染试剂是一种优质的基因转染试剂，能够在科研领域为研究人员提供强有力的工具。
siRNA-mate 转染试剂使用步骤及说明 (2)
siRNA-mate 转染试剂使用步骤及说明产品介绍与其它转染试剂比较，siRNA-mate 转染效率高、细胞存活率高、毒性小。
可广泛用于瞬时和稳定转染，也可以应用于蛋白表达和基因功能的研究。
转染试剂保存在4℃，有效期2 年。
重要提示1. 细胞的状态：转染时贴壁细胞的密度以30 - 50%为佳，而且转染时细胞应处在生长旺盛的对数生长期。
细胞密度过高和细胞传代数过高会影响转染效果。
2. siRNA 的质量：使用高纯度的siRNA 也是转染成功的关键。
在转染前需确定siRNA 的含量和纯度，实验过程中需要使用DEPC 处理过的耗材和试剂，注意避免RNase 污染。
3. 血清的影响：在制备siRNA-mate和siRNA 形成复合体过程中不能添加血清，建议用OPTIMEM 或其他无血清培养基（如DMEM、RPMI-1640 等）稀释siRNA 和转染试剂，以达到复合物形成的最佳效果。
但是，在随后的转染过程中，血清的存在并不影响复合体的转染效果。
4. 转染试剂的用量：对于一定量的siRNA 建议尝试按照推荐剂量的siRNA-mate 转染试剂进行优化，以确定最佳的转染效率。
以24 孔板为例，每10pmol siRNA 可使用0.5 μl，1 μl，1.5 μl 和2 μl 转染试剂作为初步实验条件。
操作流程（24 孔板）以24孔板为例，若要检测基因沉默的效果，推荐最低siRNA 终浓度10 nM；若要在显微镜下从荧光强度看转染效率，因荧光信号被检测到需要一定的敏感度，推荐siRNA 终浓度50 nM。
遵循以下操作方法可以高效地将siRNA 转染贴壁和悬浮培养的多种真核细胞。
但是对某些特殊的细胞系和培养条件，或特殊应用等，也许需要单独特别优化。
A. 细胞铺板贴壁细胞数量：在转染实验之前的18 - 24 个小时，在每个孔的500 μl 生长培养基中加入1.5 - 3.5 × 104 个细胞（确保转染时细胞密度在30- 50%）。
细胞转染(Entranster)注意事项
细胞转染注意事项
1.如为贴壁生长细胞，一般要求在转染前一日，必须应用胰酶处理成单细胞悬液，重新接种于培养皿或瓶，转染当日的细胞密度以70-90%（贴壁细胞）或
2×106-4×106细胞/ml（悬浮细胞）为宜，最好在转染前4h换一次新鲜培养液。
2.用于转染的质粒DNA必须无蛋白质，无RNA和其他化学物质的污染，OD260/280比值应在1.8以上。
3.培养基中的血清
在开始准备DNA和阳离子脂质体试剂稀释液时要使用无血清的培养基，因为血清会影响复合物的形成。
其实，只要在DNA-阳离子脂质体复合物形成时不含血清，在转染过程中是可以使用血清的。
4.培养基中的抗生素
抗生素是影响转染的培养基添加物。
这些抗生素一般对于真核细胞无毒，但阳离子脂质体试剂增加了细胞的通透性，使抗生素可以进入细胞。
这降低了细胞的活性，导致转染效率降低。
这时候可以选择英格恩生物的Entranster转染试剂，非脂质体试剂，培养基可加抗生素，避免了细胞染菌。
5.设置阳性对照和阴性对照。
6.一般在转染24-48h，靶基因即在细胞内表达。
根据不同的实验目的，24-48h 后即可进行靶基因表达的检测实验。
7.如若建立稳定的细胞系，则可对靶细胞进行筛选，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物，常用的真核表达基因载体的标志物有潮霉素和新霉素等。
neofect转染试剂说明书中文
NeoFect是一种用于将DNA或RNA转染到真核细胞中的转染试剂。
以下是一个简化的、假设性的NeoFect转染试剂说明书的中文翻译，请注意，这不是官方翻译，仅供参考。
实际使用时，请参考随产品附带的正式说明书和安全数据表（SDS）。
---NeoFect转染试剂说明书【产品名称】通用名：转染试剂商品名：NeoFect【成分】主要成分为阳离子脂质体，用于促进核酸分子与细胞膜的融合。
【性状】本品为透明至微浑浊的液体，通常以小瓶或多孔板包装。
【适应症】用于科研实验中，将DNA或RNA高效转染到哺乳动物细胞中，以进行基因表达、基因沉默、基因编辑等研究。
【使用方法】1. 准备待转染的细胞和核酸溶液（DNA或RNA）。
2. 根据实验设计，将适量的NeoFect转染试剂加入无血清培养基中，轻轻混匀。
3. 将核酸溶液加入含有NeoFect的培养基中，轻轻混匀，室温孵育15-30分钟。
4. 将混合物加入到细胞培养皿中，轻轻摇晃使混合均匀。
5. 根据细胞类型和实验目的，孵育一定时间后更换为完全培养基继续培养。
【不良反应】本品仅供实验室使用，不适用于临床治疗。
【禁忌】对本品成分过敏者禁用。
【注意事项】1. 使用前请检查试剂是否清澈，如有沉淀或颜色变化请勿使用。
2. 避免反复冻融，分装后请立即使用。
3. 使用过程中请遵守实验室安全操作规程，佩戴适当的个人防护装备。
4. 请在无RNA酶和DNA酶的环境中操作RNA转染实验。
5. 转染效率受多种因素影响，如细胞状态、核酸浓度、孵育时间等，建议优化实验条件。
【贮藏】存放于4°C冰箱中，避免冷冻。
【有效期】请参考包装标签上的说明。
【生产批号】见包装标签。
【生产企业】（请填写生产企业名称和联系方式）---以上信息仅供参考，实际使用时请遵循产品附带的正式说明书和安全数据表（SDS）的内容。
在操作前，务必了解所有相关的安全和健康信息。
转染试剂使用注意事项
转染试剂使用注意事项1.细胞密度：转染DNA（质粒）时，细胞密度为80-100%，转染RNA(siRNA或miRNA)时，细胞密度为60-80%，具体细胞密度必须结合考虑核酸种类、转染试剂种类和细胞生长密度极限；2.DNA用量：0.5-1ug/孔（以24孔板为例），具体用量根据转染效率检测实验确定；3.RNA用量：10-30 pmol/孔（以24孔板为例），具体用量根据转染效率检测实验确定；4.转染试剂的用量：转染试剂说明书推荐了一个使用范围，具体用量根据转染效率检测实验确定；5.根据转染效率检测实验确定核酸的用量及转染试剂的用量（核酸与转染试剂的比例关系），转染效率检测实验一般在24孔板中进行，其他格式的培养器皿请根据底面积的比例（表1）进行计算；6.转染试剂使用前才从4℃中取出，取用前，先短暂离心（转速达到3000RPM时即可停止），然后放在涡旋振荡器上点动混匀三次，每次持续1秒，混匀后短暂离心（转速达到3000RPM时即可停止），上述措施是为了混匀转染试剂，保证使用效果，使用后立即放回4℃保存；7.核酸和转染试剂分别用Opti-MEM（这是专用的转染稀释培养基，如果没有Opti-MEM，可以用细胞对应的基础培养基代替）稀释，稀释的核酸可以通过弹匀，吹打均匀，颠倒混匀或涡旋点动混匀（三次，每次持续1秒），稀释的转染试剂可以通过弹匀，颠倒混匀或涡旋点动混匀（三次，每次持续1秒），不可使用吹打均匀；混匀后均需短暂离心；8.把稀释的核酸和稀释的转染试剂复合混匀时，应该把稀释的核酸加入稀释的转染试剂中（顺序不可调转）；加入后立即进行（不要耽搁）弹匀或颠倒混匀（稀释的核酸和稀释的转染试剂一旦复合，转染复合物的形成立即启动，如果不及时混匀，所形成的转染复合物的效率就会很低），先不进行短暂离心，待所有的管子复合完毕后，在一起进行涡旋点动混匀三次，每次持续1秒，然后短暂离心；9.转染复合物孵育形成时尽量避光室温或37℃放置；10.如果进行RNA转染时，尽量使用无酶及灭菌处理的耗材；11.Opti-MEM用量参照转染说明书建议的用量；表1：资料仅供参考!!!。
M5 Hiper 高难阳离子转染试剂 使用说明书
M5 Hiper“转必得”高难阳离子转染试剂使用说明书产品名称单位货号M5 Hiper“转必得”高难阳离子转染试剂1ml MF979-01【储存条件】2-8℃储存，保质期两年【产品简介】“转必得”高难阳离子转染试剂是一种新型高效的阳离子聚合物。
它可以与核酸（包括质粒、siRNA、寡聚核苷酸）相互作用形成一种复合物将核酸转运到真核细胞内，适用于大部分真核细胞的细胞转染。
已经成功转染过的细胞系：HeLa、HEK293T、293T、HUVEC、HepG2、HEK293、CNE2、SW480、HEK293FT、HT29、Raw264.7、THP-1、HCT116【产品特性】大量试验测试表明，与常规转染试剂产品相比，“转必得”高难阳离子转染试剂具有以下优势：（1）转染效率较高。
（2）批次稳定，实验重复性好。
（3）对于贴壁细胞和悬浮细胞都适用。
（4）无明显细胞毒性。
（5）适用于siRNA细胞转染。
（6）“转必得”高难阳离子转染试剂适用于质粒共转染，慢病毒包装及感染实验。
【注意事项】1、转染前细胞应处于良好的生长状态，以对数生长期为佳，推荐细胞传代后12-24小时内、细胞密度为70-90%时进行转染；2、使用高质量的质粒有利于获得较高的转染效率，推荐使用无内毒素质粒抽提试剂盒抽提质粒，A260/A280比值为1.8～2.0，质粒浓度在300ng/μL以上；3、在配制转染试剂与质粒复合物时，需使用无血清、无抗生素的基础培养基作为溶剂，细胞培养孔中的完全培养基不影响细胞转染效率；4、在细胞转染实验中，根据细胞转染效率可适当调整质粒与转染试剂的用量比例，一般质粒的量（μg）与“转必得”高难阳离子转染试剂剂量(μL)使用比例在1:1～1:4之间，推荐比例为1:2；5、对于毒性比较敏感的细胞，建议转染4-6小时后，半量更换新鲜完全培养基；6、转染试剂如遇沉淀，轻轻摇动管身，至沉淀溶解即可使用；7、本产品仅限用于科学研究，不得用于临床诊断和治疗。
南京恩晶生物转染试剂操作方法
南京恩晶转染试剂操作方法一、操作步骤（以6孔板为例）1.转染前18-24小时使用完全培养基在6孔细胞培养板，每孔接种2ml 细胞培液（根据细胞培养条件，可含血清及抗生素），约为1-3×105个细胞，转染前细胞密度应达到70－90%。
若使用其他的培养板或培养皿，可以参照下表中提供的孔（或皿）表面积和体积相应的调整细胞接种数、EnoGeneFec™ 2000加量。
培养板表面积(cm2/孔or皿)可容纳培养基体积（ml/孔or皿）DNA（或其他核苷酸类成分）用量（µg）EnoGeneFec™2000用量待加的无血清、无抗生素的培养基体积96孔0.3 0.1-0.2 0.2μg溶于 20 μl培养基0.4-1.0 μl 溶于20 μl培养基50μl24孔 2 0.5 (0.2-)1 μg溶于25 μl 培养基2-5 μl 溶于 25μl培养基0.4ml12孔 4 1.0 (0.5-)2.0 μg溶于100 μl培养基4-10 μl 溶于100 μl培养基0.6ml6孔10 2.0 (1.0-)5.0 μg溶于100 μl培养基10-25 μl 溶于100 μl培养基0.8ml35 mm 10 2.0 (1.0-)5.0 μg溶于100 μl培养基10-25μl 溶于100 μl培养基0.8ml60mm 20 5ml (3.0-)10.0μg 溶于 500 μl培养基20-50μl 溶于500 μl培养基2.4ml10-cm 60 10ml (8.0-)20.0 μg 溶于 1.5ml培养基40-100μl 溶于800μl培养基6.4ml2. 转染复合物的制备：溶液A：将5µg质粒DNA（或其他核苷酸类成分）加入到100μl无血清、无抗生素的培养基，在1.5ml 无菌EP管中混匀后，室温放置5分钟。
溶液B：EnoGeneFec™ 2000在使用前请震荡混匀。
将10-25µl EnoGeneFec™ 2000加入到100μl 无血清、无抗生素的培养基中，在1.5ml无菌EP管中混匀，室温放置5分钟。
汉恒生物-LipoFiter转染试剂中文说明书
LipoFiter TM 转染试剂操作说明保存条件：4℃保存，一年有效（避免反复冻融）。
LipoFiter TM 简介LipoFiter TM 脂质体转染试剂( LipoFiter TM Liposomal Transfection Reagent )是一种适合于把质粒或其它形式的核酸,以及核酸蛋白复合物转染到培养的真核细胞中的高效阳离子脂质体转染试剂。
LipoFiter TM 优点1、转染效率高，重复性好，操作简单。
2、无明显细胞毒性，用LipoFiter TM 转染细胞后，对于大多数细胞72 小时内不更换培养液无明显细胞毒性。
3、LipoFiter TM 对于贴壁细胞和悬浮细胞都适用，并且可以用于稳定表达细胞株的筛选。
LipoFiter TM 使用说明1.细胞培养：以293T 细胞为例，转染前一天(20-24 小时) ~0.4×106 细胞(具体的细胞数量据细胞大小和细胞生长速度而定)铺到六孔板内，使第二天细胞汇合度（confluent）能达到约50%~70%。
注1：汉恒生物LipoFiter TM 对细胞毒性极小，因此无需通过增大细胞汇合度来抵抗转染试剂毒性，我们实验证明，50%~70% confluent 时细胞的转染效率可以达到最优。
注2：其它培养板或培养皿参考六孔板进行操作，其他培养介质如培养板，培养皿的详细细胞接1种数目请按照比例自行换算。
2.在进行下述转染步骤前，把六孔板每孔内换成新鲜细胞培养液。
培养液的体积约为2 ml。
注：其他培养介质培养液体积参见《各种培养介质下LipoFiter TM 转染DNA 详表》，抗生素、Glutamine 等对LipoFiter TM 转染并无影响。
如果LipoFiter 对目的细胞毒性较大，建议去除转染体系内的抗生素。
3.把LipoFiter TM 脂质体转染试剂轻轻混匀。
4.对于待转染的六孔板中一个孔的细胞，取一只洁净无菌离心管，加入4 μg 质粒DNA（其他培养介质DNA 用量参见附表）到250 μl DMEM 溶液，用枪轻轻吹打混匀。
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转染试剂使用注意事项
1.细胞密度：转染DNA（质粒）时，细胞密度为80-100%，转染RNA(siRNA
或miRNA)时，细胞密度为60-80%，具体细胞密度必须结合考虑核酸种类、转染试剂种类和细胞生长密度极限；
2.DNA用量：0.5-1ug/孔（以24孔板为例），具体用量根据转染效率检测实验
确定；
3.RNA用量：10-30 pmol/孔（以24孔板为例），具体用量根据转染效率检测实
验确定；
4.转染试剂的用量：转染试剂说明书推荐了一个使用范围，具体用量根据转染
效率检测实验确定；
5.根据转染效率检测实验确定核酸的用量及转染试剂的用量（核酸与转染试剂
的比例关系），转染效率检测实验一般在24孔板中进行，其他格式的培养器皿请根据底面积的比例（表1）进行计算；
6.转染试剂使用前才从4℃中取出，取用前，先短暂离心（转速达到3000RPM
时即可停止），然后放在涡旋振荡器上点动混匀三次，每次持续1秒，混匀后短暂离心（转速达到3000RPM时即可停止），上述措施是为了混匀转染试剂，保证使用效果，使用后立即放回4℃保存；
7.核酸和转染试剂分别用Opti-MEM（这是专用的转染稀释培养基，如果没有
Opti-MEM，可以用细胞对应的基础培养基代替）稀释，稀释的核酸可以通过弹匀，吹打均匀，颠倒混匀或涡旋点动混匀（三次，每次持续1秒），稀释的转染试剂可以通过弹匀，颠倒混匀或涡旋点动混匀（三次，每次持续1秒），不可使用吹打均匀；混匀后均需短暂离心；
8.把稀释的核酸和稀释的转染试剂复合混匀时，应该把稀释的核酸加入稀释的
转染试剂中（顺序不可调转）；加入后立即进行（不要耽搁）弹匀或颠倒混匀（稀释的核酸和稀释的转染试剂一旦复合，转染复合物的形成立即启动，如果不及时混匀，所形成的转染复合物的效率就会很低），先不进行短暂离心，待所有的管子复合完毕后，在一起进行涡旋点动混匀三次，每次持续1秒，然后短暂离心；
9.转染复合物孵育形成时尽量避光室温或37℃放置；
10.如果进行RNA转染时，尽量使用无酶及灭菌处理的耗材；
11.Opti-MEM用量参照转染说明书建议的用量；
表1：。