DB33-T 625.3-2007 无公害豆芽 第3部分6-苄基腺嘌呤残留量和4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定
关于豆芽生产过程中禁止使用6-苄基腺嘌呤等物质的公告（2015年第11号）
关于豆芽生产过程中禁止使用6-苄基腺嘌呤等物质的公告
（2015年第11号）
国家食品药品监督管理总局农业部国家卫生和计划生育委员会关于豆芽生产过程中禁止使用6-苄基腺嘌呤等物质的公告（2015年第11号）
根据《中华人民共和国食品安全法》、《中华人民共和国农产品质量安全法》等相关法律的规定，现就豆芽生产经营中禁止使用6-苄基腺嘌呤等物质的有关事项公告如下：
一、6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、赤霉素等物质作为低毒农药登记管理并限定了使用范围，豆芽生产不在可使用范围之列，且目前豆芽生产过程中使用上述物质的安全性尚无结论。
为确保豆芽食用安全，现重申：生产者不得在豆芽生产过程中使用6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、赤霉素等物质，豆芽经营者不得经营含有6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、赤霉素等物质的豆芽。
二、凡在豆芽生产和经营过程中违反上述规定的，由食品药品监管、农业等相关部门依照法律法规予以处理。
特此公告。
食品药品监管总局农业部国家卫生计生委
2015年4月13日。
食品药品监管总局办公厅关于经营者经营芽苗类蔬菜中含6-苄基腺嘌呤等物质处置有关问题的复函
食品药品监管总局办公厅关于经营者经营芽苗类蔬菜中含6-苄基腺嘌呤等物质处置有关问题的复函
文章属性
•【制定机关】国家食品药品监督管理总局(已撤销)
•【公布日期】2016.03.04
•【文号】食药监办食监二函〔2016〕144号
•【施行日期】2016.03.04
•【效力等级】部门规范性文件
•【时效性】现行有效
•【主题分类】食品安全
正文
总局办公厅关于经营者经营芽苗类
蔬菜中含6-苄基腺嘌呤等物质处置有关问题的复函
食药监办食监二函〔2016〕144号福建省食品药品监督管理局：
你局《关于如何处置经营者经营芽苗类蔬菜中含6-苄基腺嘌呤等物质的请示》（闽食药监食流〔2016〕4号）收悉。
经商农业部门，现函复如下：
一、《关于豆芽生产过程中禁止使用6-苄基腺嘌呤等物质的公告》（食品药品监管总局、农业部、国家卫生计生委公告2015年第11号）（以下简称《公告》）现行有效，应当继续严格执行。
二、《绿色食品芽苗类蔬菜》（NY/T 1325-2015）为农业部发布的标准。
农业部认为，《公告》规定豆芽生产者不得在豆芽生产过程中使用6-苄基腺嘌呤，豆芽经营者不得经营含有6-苄基腺嘌呤的豆芽。
在修订《绿色食品芽苗类蔬菜》时，为落实《公告》规定，增加了绿色食品芽苗类蔬菜中6-苄基腺嘌呤的限量指标，参照《食品中6-苄基腺嘌呤的测定高效液相色谱法》（GB/T 23381—2009）
定量检出限0.02mg/kg,规定了绿色食品芽苗类产品中的6-苄基腺嘌呤限量值为0.02mg/kg，与《公告》要求一致，目的是防止非法添加。
食品药品监管总局办公厅
2016年3月4日。
部分不合格项目小知识
附件3部分不合格项目小知识一、不合格项目小知识1、二氧化硫残留量二氧化硫（以及焦亚硫酸钾、亚硫酸钠等添加剂）对食品有漂白和防腐作用，是食品加工中常用的漂白剂和防腐《食品安全国家标准食剂，使用后均产生二氧化硫的残留。
品添加剂使用标准》（GB 2760-2014）中规定，干制蔬菜中二氧化硫残留量应≤0.2g/kg,酱腌菜中二氧化硫残留量应≤0.1g/kg。
人体摄入的少量二氧化硫和亚硫酸盐会迅速以硫酸盐形式排出体外, 因此二氧化硫和亚硫酸盐的系统性毒性低。
但对二氧化硫有过敏反应的人（如哮喘病患者等），则会出现气喘、头痛或恶心等过敏症状。
因此过敏体质等人群应向食物供应者清楚说明自己的情况和需要，进食后如感到不适，应立即就医。
2、亚硝酸盐亚硝酸盐是一类无机化合物的总称，主要包括亚硝酸钠和亚硝酸钾。
亚硝酸盐作为护色剂和防腐剂，可以使肉制品呈现鲜艳的红色，也能够抑制肉毒梭菌的生长和繁殖，因此，被广泛应用于肉制品加工中。
根据《中华人民共和国卫生部国家食品药品监督管理局公告》（2012年第10号）中规定，餐饮服务单位禁止使用食品添加剂亚硝酸盐（亚硝酸钠、亚硝酸钾）。
亚硝酸盐进入血液后可将血液中的低血红蛋白氧化成高血红蛋白，且在酸性条件下（如胃液中）易与胺类物质发生反应，生成亚硝基化合物。
亚硝基化合物是最主要的化学致癌物之一，一次性食用过多或者误用亚硝酸盐均可引起急性中毒。
3、铝的残留量铝作为食品添加剂硫酸铝钾的重要成分，经常会添加在食物中作为膨松剂或稳定剂。
《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》（GB 2760-2014）中规定，油炸面制品中的铝的残留量应≤100mg/kg，粉丝、粉条中的铝的残留量应≤200mg/kg。
铝有一定的慢性毒性，经常摄入铝超标的食品，在体内可造成铝的蓄积，轻者会使食欲减退，引起贫血，重者会表现为神经毒性，使人运动失调、记忆力衰退等。
4、苯甲酸及其钠盐苯甲酸及其钠盐是食品工业中常见的一种防腐保鲜剂，对霉菌、酵母和细菌有较好的抑制作用。
北京市食品药品监督管理局关于印发《工业化豆芽生产许可证审查细则(2014版)》的通知
北京市食品药品监督管理局关于印发《工业化豆芽生产许可证审查细则(2014版)》的通知文章属性•【制定机关】北京市食品药品监督管理局•【公布日期】2014.08.27•【字号】•【施行日期】2015.01.01•【效力等级】地方规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】食品安全正文北京市食品药品监督管理局关于印发《工业化豆芽生产许可证审查细则（2014版）》的通知各相关企业，各区县局，局机关各处室，各直属分局，各直属事业单位：《工业化豆芽生产许可证审查细则（2014版）》已于2014年8月18日经市局2014年第32次局长办公会议审议通过，现予印发，自2015年1月1日起正式实施，请遵照执行。
自2015年1月1日起，本市豆芽生产企业未取得食品生产许可，不得生产销售豆芽。
北京市食品药品监督管理局2014年8月27日工业化豆芽生产许可审查细则（2014版）一、发证产品范围及申证单元实施生产许可证管理的豆芽是指以筛选后的绿豆、大豆等豆类为原料，经洗豆、杀菌、浸豆、机械控温培育、机械清洗、预冷、包装等工序工业化生产的豆芽。
在生产许可证证书（正本、副本以及附页）上应注明获证产品名称、申证单元以及产品品种明细，即其他食品〔豆芽（工业化生产）〕。
生产许可证有效期为3年，其产品类别编号为：2801。
二、基本生产流程及关键控制环节（一）基本生产流程原料→筛选→洗豆→杀菌→浸豆→机械控温培育→采收→机械清洗→预冷→包装→成品（冷藏）（二）关键控制环节1.选料和清洗2.杀菌方式和时间3.机械控温培育时间、喷淋频次、温湿度控制4.生产加工中环境卫生控制5.成品的包装与贮藏条件三、必备的生产资源（一）生产环境工业化豆芽生产企业总使用面积应不少于4000平方米，其中生产车间使用面积不少于1000平方米。
豆芽生产企业选址、厂区环境、厂房和车间、设施与设备、卫生管理等整体条件应遵循GB 14881-2013《食品安全国家标准食品生产通用卫生规范》的要求。
豆芽中6-苄基腺嘌呤的研究现状
豆芽具有较高的营养价值，深受大家喜爱，因其价格低廉、爽口美味成为餐桌上最常见的蔬菜，它的质量安全对人们的身体健康有着重要影响。
随着媒体对毒豆芽事件的报道发现一些不法商贩为了提高豆芽产量、缩短生产周期，在豆芽生长过程中滥用添加剂，其中包括无根剂（主要成分为6-苄基腺嘌呤）严重影响了豆芽生产的总体安全水平，使其成为国内广受关注的食品安全问题之一。
毒豆芽是指在豆芽生产过程中非法添加对人体有害的工业原料、激素、农药、化学试剂、兽药、抗生素等，用来增加豆芽产量和改变外观，最后流入市场销售的豆芽，因添加对人体有害的物质，称为毒豆芽。
无根剂是一种广泛使用的添加于植物生长培养基的细胞分裂，主要成分为6-苄基腺嘌呤，简称6-BA，是目前国内外广泛使用的植物生长调节剂，用于诱导细胞分裂、调节细胞分化、延缓蛋白质和叶绿素的降解[1]。
1 豆芽概述1.1 豆芽简介豆类具有较高的营养价值，尤其是黄豆中含有大量的蛋白质，但吸收利用率较低，小部分人群大量食用后有时还会引起腹胀等现象。
以绿豆芽为例，有关科研数据显示：在良好生长条件下的绿豆芽，蛋白质分解为人体所需的氨基酸，其维生素C的含量可达绿豆原含量的7倍，维生素B2的含量增加2到4倍，吸收利用率提高了10%左右，引发胀气的棉子糖、鼠李糖等寡糖会被分解。
1.2 豆芽中的药物残留豆芽生产过程中滥用辅助剂的情况引起了广大消费者和国家的关注。
豆芽生产过程中添加的主要辅助剂品种较多，经多地抽样检测结果可知，残留超标的物质主要以农药为主，其次还有硫胺素和尿素等肥料以及头孢氨苄、诺氟沙星、青霉素等抗生素还有食品添加剂二亚硫酸钠。
豆芽中农药残留有很多潜在污染来源：①豆芽生产过程中农药的不规范使用是导致豆芽中产生农药残留的主要原因。
在监管力度不强、技术欠缺的情况下，一些豆芽生产商过量使用农药的情况十分普遍；②原料豆的污染。
豆子在种植过程中为了防止病虫害而使用农药，可导致原料豆中农药残留污染；③水体污染。
HPLC法测定豆芽中6-苄基腺嘌呤残留研究
HPLC法测定豆芽中6-苄基腺嘌呤残留研究李小平1,陈晓红1,姚浔平1,金米聪1,蒋经纬2(1.宁波市疾病预防控制中心,浙江宁波315010;2.宁波市卫生监督所,浙江宁波315010)李小平,陈晓红,姚浔平,等. HPLC法测定豆芽中6-苄基腺嘌呤残留研究[J].中国卫生检验杂志,2005,15(2):149-150,159 [摘要]目的：建立高效液相色谱法测定豆芽中6 -苄基腺嘌呤残留量的检测方法。
方法：豆芽样品经酸化甲醇提取，高速离心沉淀分离后,以甲醇+乙腈+0.1%醋酸(60+5+35)为流动相，采用ZORBAXSB C18柱(250 mm×4.6 mm×5μm)分离，UV267 nm检测，外标法定量。
结果：豆芽中6 -苄基腺嘌呤的线性范围在0～2.0 mg /L，回收率在81.3%～87.5%，RSD均小于6%，最低检出限为0.04 mg /kg。
结论：该方法具有快速、灵敏、简便、准确等优点，能满足实际工作的需要。
[关键词]高效液相色谱；豆芽；6 -苄基腺嘌呤Determination of 6-benzylaminopurine in bean-sprout by high performance liquid chromatography LiXiao-ping1, Chen Xiao-hong1, Yao Xun-ping1, JinMi-cong1, Jiang Jing-wei2(1.NingboMunicipalCenter for Disease Control and Prevention，Ningbo 315010，China；2.Ningbo Municipal Institute for Health Inspection and Supervision，Ningbo 315010，China)[Abstract]Objective：To establish an analytical method for determination of 6-benzylaminopurine(6 -BA)in bean–sprout by high performance liquid chromatography. Methods：Column：Zorbax SB C18column (250 mm×4.6 mm×5μm)，the mobile phase：CH3OH +CH3CN+0.1%HAC(60+5+35)，the flow rate：1.0 ml/min；the UV detector wavelength：267 nm. The bean-sprout samples were extracted by acidic CH3OH firstly and then perseverated by centrifugal precipitation. Results：The linear range was 0～2.0 mg /L and the limit of detection was 0.04 mg /kg. Extraction recoveries were between 81.3%～87.5%，RSD were less than 6%.Conclusion：Thismethod is found to be sensitive，fastand accurate.Therefore，itcan be successfully used for determination of6 -BA in bean -sprout.[Key words]Bean -sprout；6 -Benzylaminopurine；High performance liquid chromatography6-苄基腺嘌呤(6-benzylaminopurine)又称N-苄基腺苷，简科6-BA，分子式为C12H11N5，其结构式为，是一种人工合成的植物生长激素，对植物的生长、发育有着促进与调节作用，但如果人体过量摄入会刺激皮肤黏膜，并出现食道和胃黏膜损伤、恶心、呕吐等现象。
豆芽中6-苄基腺嘌呤检测
豆芽中6-苄基腺嘌呤检测--科标检测科标化工分析检测中心通过市场调查和实验结果，发现豆芽中激素添加超标现象严重，其中以6-苄基腺嘌呤尤为普遍。
6-苄基腺嘌呤（6-benzylaminopurine）简称6-BA，分子式为C12H11N5，是目前国内外广泛使用的植物生长调节剂，用于诱导细胞分裂、调节细胞分化、延缓蛋白质和叶绿素的降解，其水溶液能使豆芽粗壮且无根。
人体摄入过量的6-BA会刺激皮肤黏膜，伤害食道和胃黏膜，出现恶心、呕吐等现象。
卫生部《关于〈食品添加剂使用标准〉(GB2760-2011)有关问题的复函》，国家质检总局决定从2011年11月14日起，各省质量技术监督局不再受理6-苄基腺嘌呤作为食品添加剂的生产许可申请，已批准的生产许可证书，由监管部门撤回并注销，并于2011年12月20日前完成。
科标化工分析检测中心可依照ISO、ASTM、DIN、GB、HB等标准完成食品、饲料、药品、纺织品、农业、高分子材料、生物产品、建筑材料以及微生物产品理化性能、力学性能、电气性能等测试。
中心通过了中国国家认证认可监督管理委员会和中国合格评定国家认可委员会的二合一（CMA、CNAS）实验室认证认可，能出具权威的第三方检测报告。
豆芽中6-苄基腺嘌呤检测(高效液相色谱法)一、实验原理科标化工分析检测中心参照国标GB/T23381-2009食品中6-苄基腺嘌呤高效液相色谱法，试样经粉碎后用甲醇溶液提取、浓缩、固相萃取小柱净化，反相液相色谱柱分离测定，紫外检测器检测，外标法定量分析。
二、仪器和试剂Thermo scientific高效液相色谱仪带紫外检测器，RE-52AA旋转蒸发仪，HH-4数显恒温水浴锅，LG10-24A高速台式离心机；甲醇为色谱纯试剂，实验用水为超纯水。
三、试验方法1、提取称取经匀浆机捣碎的豆芽约10g（精确到0.01g）于50ml离心管中，加入20ml甲醇，超声提取15min，4000r/min离心10min，上清液转入50ml梨形瓶中，样品再次用20ml甲醇超声提取15min，离心合并上清液，用旋转蒸发仪（不超过60℃）浓缩近干。
DB11_T379-2006豆芽中4-氯苯氧乙酸钠、6-苄基腺嘌呤、2,4-滴、赤霉素、福美双的测定
ICS 67.080.20DB B 31备案号：19170-2006北京市地方标准北京市质量技术监督局发布目 次前 言 (II)1 范围 (1)2 4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定 (1)3 6-苄基腺嘌呤残留量的测定 (3)4 2,4-滴（2,4-二氯苯氧乙酸）残留量的测定 (5)5 赤霉素残留量的测定 (7)6 福美双残留量的测定 (9)前 言本标准由通州区质量技术监督局提出。
本标准起草单位：北京市海淀区产品质量监督检验所（国家食品质量安全监督检验中心）。
本标准主要起草人：曹红、金瑛、刘艳琴、许华、王浩、田艳玲、林立。
豆芽中4-氯苯氧乙酸钠、6-苄基腺嘌呤、2,4-滴、赤霉素、福美双的测定1 范围本标准规定了豆芽中4-氯苯氧乙酸钠、6-苄基腺嘌呤、2,4-滴、赤霉素、福美双的测定方法。
本标准适用于豆芽中4-氯苯氧乙酸钠、6-苄基腺嘌呤、2,4-滴、赤霉素、福美双的残留量分析。
2 4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定2.1 原理试样中的4-氯苯氧乙酸钠用稀碱提取后，在酸性条件下用固相萃取柱将样品中的4-氯苯氧乙酸吸附，使其与基体干扰物分离，再用甲醇洗脱并用高效液相色谱法测定，以保留时间定性，外标法峰面积定量。
2.2 试剂与材料2.2.1 2.2.2 2.2.3 2.2.4 2.2.5 2.2.6 2.2.7 2.2.8 2.2.9 2.2.10 2.2.11 2.2.12 2.3.1 2.3.2 2.3.3 2.3.4 2.3.5 2.4.1 氢氧化钠（AR）。
盐酸（AR）。
磷酸（AR）。
冰醋酸（AR）。
甲醇（HPLC）。
氢氧化钠溶液（0.01 mol/L）：称取0.40 g 氢氧化钠，溶于水并稀释至1000 mL。
亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾[K 4Fe(CN)6 ·3H 2O]溶于少量水中，并用水稀释至100 mL。
乙酸锌溶液：称取22.0 g乙酸锌[Zn(CH 3COO)2]溶于少量水中，然后加入3 mL冰醋酸并加水稀释至100 mL。
6-苄基腺嘌呤残留量的方法研究
平均回收率 ８ ７ ． ７ ％， Ｒ Ｓ Ｄ值小于 ６ ％。
表 ３
３ ． ４ 旋转蒸发仪 Ｉ Ｋ Ａ。 ３ ． ５ 组织捣碎机 Ｉ Ｋ Ａ。 ３ ． ６ 纯 水 制 备 系 统 Ｍｉ ｌ ｌ ｉ — Ｑ。 ３ ． ７ 氮吹仪 Ｎ — Ｅ Ｖ Ａ Ｐ １ １ ２ 。 ４ 分 析 步 骤 ４ ． １ 试 样制 备。称取 捣碎混 匀 的豆 芽样 品 ５ ｇ（ 精 确至 ０ ． １ ｇ ） 于 ５ ０ ｍ ｌ 聚丙 烯离心管 中 ， 加入 １ ５ ｍ ｌ 酸 化 甲醇 溶 液 ， 用Ｕ ｈ ｒ ａ — Ｔ ｕ ｒ ｒ ａ ｘ 搅 拌器 混匀 ３ ｍ ｉ ｎ ， 然后 以 ８ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍ ｉ ｎ离心 ５ ｍ ｉ ｎ ， 上清 液转入 ５ ０ ｍ ｌ ５ ． ２ 在本试 验条件下 ， 线性 范 围为 ０ ￣ ０ ． １ ｍ ｇ ／ Ｌ， 豆 芽中 ６ 一 苄 基 腺 鸡心瓶 瓶 中， 样品再用 １ ５ ｍ ｌ 酸化 甲醇溶液 提取 ， 再次 离心 ， 合并 嘌呤的定量检测 限为 ０ ． ０ ５ ￣ ｇ ／ ｋ ｇ 。 上清液。上清液用旋转蒸发仪蒸发 ， 以去除 甲醇 ， 剩余水相以 ２ ｍ ｌ ／ ｍ ｉ ｎ的流 速 通 过 活 化 的 Ｏ Ｄ Ｓ — Ｃ １ ８小 柱 ，先 用 ３ ． ０ ｍ ｌ 水 洗 去 水 溶性 杂质后 ， 再用 甲醇洗脱 ， 吹干后 用流动 相定容 至 １ ． ０ ｍ ｌ ， 过 ０ ． ２ ｔ ｘ ｍ 有机膜滤过后 ， 供Ｌ Ｃ — Ｍ ｓ ／ Ｍｓ分 析 。 ４ ． ２ 标准溶液 系列 的配制。配制浓度为 Ｏ ｌ ￣ ｇ ／ Ｌ 、 ０ ． ５ ｔ ｘ ｇ ／ Ｌ 、 ５ ． ０ １ ｘ ｇ ／ Ｌ、
作性强 ， 回收率 高， 准确性 高， 能够满足 实际工作 需要 。 关 键词 ： 液 相 色谱 串联 质 谱仪 ； ６ － 苄基腺嘌呤 ； 方 法研 究
豆芽菜三个标准的比较分析
２００６年 １ 月，农业部发布了《中华人民共和国农 业行业标准 无公害食品 芽类蔬菜》（ＮＹ ５３１７－ ２００６）。该标准由农业部提出并归口，标准制定单位为 农业部蔬菜品质监督检验测试中心（重庆）和重庆市 农业科学研究院，于 ２００６ 年 ４ 月实施。
２００６ 年 ６ 月，北京市质量技术监督局发布了北 京市地方标准— ——《豆芽安全卫生要求》（ＤＢ１１／３７７－ ２００６），于同年 ９ 月实施。
性和实用性。该标准去除了生产中不存在问题的检测 项目，根据当前豆芽生产中主要的问题，对检测项目 进行了优化。将检测的重点放在 ４－ 氯苯氧乙酸钠、６－ 苄基腺嘌呤、赤霉素和二氧化硫上，并制定了适度的 限量值。该标准明确规定 ２，４－Ｄ、多菌灵和百菌清不 得检出。这种检测项目和检测量值的限定，可以有效 规范豆芽安全生产，符合该标准要求的豆芽产品，可 以达到无公害蔬菜产品的要求。
该标准制定时间较早，根据无公害蔬菜安全标准 制定的思路，限定了无机砷、铅、镉、总汞、氟有害金 属、非金属元素和百菌清、多菌灵两种农药的最大残 留限量。在多批量豆芽检测中，有害金属、非金属元素 检出率较低，且 检 出 值 基 本 不 超 标 ；百 菌 清 、多 菌 灵 有 所 检 出 ，但 很 少 超 标 。 标准的制定，应从生产 实际出发，将上述检测项目列入标准，实 际 意 义 不 大 。 标 准 限 定 了 亚 硫 酸 盐 的 检 出 限 量 值 ，但对普 遍使用的 ＡＢ 粉，未予关注。而对在蔬菜生产中已禁 止使用的 ２，４－Ｄ，却给出了≤０．１ ｍｇ·ｋｇ－１ 的 限 量 值 。 鉴 于 ２，４－Ｄ 的潜在危害性，该项目的检出限量值有 待商榷。 4.2 《豆芽安全卫生要求》DB11/377-2006
— 13 —
产业市场
6-苄基腺嘌呤对黄豆芽生长的影响及其残留量测定
6-苄基腺嘌呤对黄豆芽生长的影响及其残留量测定黄少文;杨婕;孙远明;汤彦蔚;杨怀杰;柳春红【摘要】【目的】探讨不同浓度6-苄基腺嘌呤（6-BA）对黄豆芽生长的影响，并通过测定黄豆芽中6-BA残留水平对其安全性进行评价。
【方法】分别采用喷洒法和浸泡法培育黄豆芽，豆芽收获后测定其鲜重、轴长、轴径、发芽率和产率，并参照DB S22/003-2012食品安全地方标准，对豆芽及豆芽机内营养液的6-BA残留进行测定。
【结果】喷洒法中1.0 mg/L 6-BA处理组黄豆芽产率最高，为6.96，而浸泡法中5.0 mg/L 6-BA处理组黄豆芽产率最高，为7.15。
各处理组成熟黄豆芽样品中均未检出6-BA，而喷洒法中3.0 mg/L组豆芽机内营养液的6-BA残留随处理时间延长呈下降趋势，第3 d开始未检出6-BA。
【结论】适宜浓度的6-BA对豆芽生长有促进作用，且6-BA在豆芽培育过程中可逐渐降解以致消除，安全性较高。
%Objective]The effects of different concentrations of 6-Benzylaminopurine(6-BA) treatments on soybean sprouts growth were evaluated and the safety was measured by detecting the residues of 6-BA in soybean sprouts.[Method]Spraying and soaking methods were respectively used to cultivate soybean sprouts , and fresh weight , axis length, axis diameter, germination rate and yield were measured after cultivation. 6-BA residues were determined with reference to DB S22/003-2012 in bean sprouts and nutrient solution of 6-BA. [Result]The results showed that the best yield was 6.96 for 1.0 mg/L group in spraying method and the best yield in soaking method was 7.15 for 5.0 mg/L group. No 6-BA residue was detected in each group of bean sprouts. 6-BA was in downtrend in 3.0 mg/L group nutri-ent solution and no 6-BA residue wasdetected since the third day. [Conclusion]Suitable concentration of 6-BA has an positive effect on soybean sprouts growth. 6-BA could be degraded and eliminated in nurturing process of soybean sprouts, hence 6-BA is proved to be of high safety.【期刊名称】《南方农业学报》【年(卷),期】2015(000)002【总页数】5页(P255-259)【关键词】6-苄基腺嘌呤;黄豆芽;产率;残留【作者】黄少文;杨婕;孙远明;汤彦蔚;杨怀杰;柳春红【作者单位】华南农业大学食品学院，广州 510642;华南农业大学食品学院，广州 510642;华南农业大学食品学院，广州 510642;华南农业大学食品学院，广州510642;华南农业大学食品学院，广州 510642;华南农业大学食品学院，广州510642; 农业部农产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室，广州 510642【正文语种】中文【中图分类】R155.540 引言【研究意义】豆芽是由绿豆或黄豆发育而来，含有7种人体必需氨基酸及大量的蛋白质和多种维生素（Mostafa etal.，1987；Alonso et al.，1998，2000）。
DB33T无公害豆芽第2部分质量安全要求
DB33T无公害豆芽第2部分质量安全要求前言本部分3.2、5.3为强制性条款。
DB33/ 625—2007 《无公害豆芽》分为三个部分：——第1部分：生产技术规程；——第2部分：质量安全要求。
——第3部分：6-苄基腺嘌呤残留量和4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定。
本部分为DB33/ 625—2007《无公害豆芽》的第2部分。
本部分由浙江省农业厅提出并归口。
本部分起草单位：杭州市质量技术监督局、杭州市质量技术监督检测院、杭州市农业科学研究院、浙江省农业厅农作物治理局、杭州市农业局、杭州青山湖蔬菜食品、宁波市疾病预防操纵中心、杭州大典蔬菜本部分要紧起草人：芮昶、柴伟国、周华英、周滢、李康、杨新琴、郑军辉、陶礼明、李小平、李仙送、赵颖雷。
无公害豆芽第2部分：质量安全要求1 范畴本部分规定了豆芽的要求、试验方法、检验规则、包装、标签、标志、运输与贮存。
本部分适用于以大豆或绿豆为原料生产而成的豆芽。
2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本部分的引用而成为本部分的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓舞依照本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。
GB 2762 食品中污染物限量GB 2763 食品中农药最大残留限量GB/T 5009.33食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定GB/T 5009.34 食品中亚硫酸盐的测定GB/T 5009.105黄瓜中百菌清残留量的测定GB/T 5009.175 粮食和蔬菜中2，4-D残留量的测定GB/T 5009.188 蔬菜、水果中甲基托布津、多菌灵的测定GB 8855 新奇水果和蔬菜的取样方法GB 18406.1 农产品安全质量无公害蔬菜安全要求SN 0350 出口水果中赤霉素残留量检验方法DB33/T 325.3 无公害豆芽第3部分 6-苄基腺嘌呤残留量与4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定3 要求3.1 感官要求3.1.1 黄豆芽：呈自然浅黄色、固有豆香味和口感；无变色、萎蔫、霉烂、杂质和异味。
资料整理 6-ba的基本情况
1.豆芽质量安全的关键影响因素分析及对策：1.1 目前情况：本文做了大量的实验，进行数据分析，讨论得出了研究结果，一是运用气相色谱-质谱技术开展了豆芽中农药残留的检测分析工作，结果表明豆芽中马拉硫磷、对硫磷、甲拌磷、久效磷、甲胺磷、氧化乐果等农残合格率100%。
二是运用液相色谱-质谱联用技术开展了豆芽中的添加剂指标的检测分析工作，该方法采用有机溶剂盐析提取目标物和质谱负模式检测技术，有效提取目标物，去除杂质干扰，适合于市场样品实际检测，经检测6-苄基腺嘌呤与4-氯苯氧乙酸钠合格率分别为96.4%和76.7%。
三是运用原子荧光和微波消解前处理技术开展了豆芽中总砷的检测分析工作，经对市场35 个豆芽样品的实际检测，结果表明合格率为100%，未检出总砷超标的豆芽样品。
四是运用紫外可见分光光度法检测分析了豆芽中亚硝酸盐和亚硫酸盐的含量情况，其中亚硝酸盐合格率89.7%、亚硫酸盐合格率为53.2%，这两项指标是影响上市豆芽质量的主要因素，同时，从不同单位豆芽产品的检测结果来看，小作坊生产企业豆芽合格率整体较低，安全隐患较大，而品牌豆芽的质量相对较好。
综合分析各实验数据，本文找出了影响豆芽质量安全的主要指标，为生产质量管理、市场执法监督、群众放心消费提供了数据支持。
1.2 生产引入的污染物及危害1.2.1 生长调节剂的概述（主要作用、限制用量、物理性质、化学性质、作用机理、毒理范围）6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠俗称AB 粉，是豆芽生产使用的2 个主要添加剂，主要作用是促进豆芽生长、抑制长根，提高产量。
国家标准GB2760《食品添加剂使用卫生标准》规定豆芽中4-氯苯氧乙酸钠残留量小于 1.0mg/kg、6 苄基腺嘌呤残留量小于0.2mg/kg。
6-苄基腺嘌呤（6-Benzylaminopurne）分子式C12H11N5，相对分子质量225.25。
白色微针状结晶或类白色粉末，难溶于水，可溶于酸、碱，在酸性、碱性条件下均稳定。
豆芽中植物生长调节剂的残留及风险监测评估
豆芽中植物生长调节剂的残留及风险监测评估摘要以安徽省部分地区50家超市及农贸市场为采集点采集228组豆芽样品，对豆芽中4-氯苯氧乙酸、2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、吲哚乙酸、吲哚丁酸、6-苄基腺嘌呤（6-BA）、氯吡脲、多效唑、4-氟苯氧乙酸、噻苯隆、赤霉素、异戊烯腺嘌呤等11种常用植物生长调节剂进行检测分析。
结果表明，在被抽查的228组豆芽中，74组（占比32.46%）样品中检出植物生长调节剂，53组样品中4-氯苯氧乙酸超出定量限。
在检出的6种常用植物生长调节剂中4-氯苯氧乙酸的检出率最高，达到26.75%;6-BA检出率为21.05%;吲哚乙酸和赤霉素检出率均低于20%。
40.54%的样品中含有1种农药残留;52.70%的样品中检测含有2种农药残留;6.76%的样品中含有3种农药残留。
综上所述，豆芽的4-氯苯氧乙酸检出率较高，23.25%的样品超标，存在一定的安全风险。
关键词豆芽;植物生长调节剂;农药残留;风险监测评估中图分类号 TS207.53 文献标识码 A文章编号1007-5739（2020）06-0229-02開放科学（资源服务）标识码（OSID）Residue and Risk Assessment of Plant Growth Regulators in Be an SproutsSONG Xiao-wan SONG Xu-feng YAO-Kai（Anhui Zhongqing Inspection and Testing Limited Company，Hefei Anhui 230088）Abstract Collecting 228 groups of bean sprouts samples from 50 super markets and agricultural markets in some areas of Anhui Province，detected and analyzed 11 plant growth regulators（4-chlorophenoxyacetic acid，2，4-dichlorophenoxyacetic acid，indole-3-acetic acid，3-indolebutyric acid，6-benzylaminopurine，forchlorfenuron，paclobutrazol，4-fluorophenoxyacetic acid，thidiazuron，gibberellic acid and N6-（delta-2-isopentenyl）-adenine）in bean sprouts. The results showed that plant growth regulator were detected in 74 groups of samples（accounting for 32.46%）of 228 groups of bean sprouts that were spot-checked，4-chlorophenoxyacetic acid of 53 groups exceeded the limitof quantification.Among the 6 commonly used plant growth regulators，the detectable rate of 4-chlorophenoxyacetic acid was the highest，which was26.75%;the detectable rate of 6-benzylaminopurine was 21.05%;the detectablerate of indole-3-acetic acid and gibberellic acid were both below 20%. 40.54%of samples had one pesticide residues，52.70% of samples had two pesticide residues，6.76% of samples had three pesticide residues. In conclusion，4-chlorophenoxyacetic acid in bean sprouts had a relatively high detectable rate.23.25% of the samples exceeded the standard，and there was security risk.Key words bean sprouts;plant growth regulator;pesticide residues;risk assessment植物生长调节剂是人工合成的激素类化合物，具有促进植物细胞分裂与生长，起到提高作物产量以及改善产品品质的作用。
豆芽中添加6—苄基腺嘌呤的行为定性
豆芽中添加6—苄基腺嘌呤的行为定性作者：周浩来源：《中国检察官·经典案例版》2015年第02期一、基本案情2013年6月21日，犯罪嫌疑人江某A、江某B共同出资成立农产品有限公司。
同年7月，江某A聘请犯罪嫌疑人沈某某为生产豆芽菜的技术员。
同年7月24日起，农产品有限公司开始生产、销售豆芽菜，犯罪嫌疑人江某A和沈某某在明知国家已经禁止添加含有6-苄基腺嘌呤的农产品生长添加剂的情况下，仍然在豆芽菜的生产过程中添加AB液（主要成分为6-苄基腺嘌呤）。
犯罪嫌疑人江某A将上述生产好的豆芽菜予以销售。
从7月24日起至案发，该农产品有限公司共生产、销售豆芽菜800吨左右，销售总额约为人民币140余万元。
二、分歧意见第一种意见认为，三名犯罪嫌疑人的行为构成生产、销售有毒、有害食品罪。
从客观方面看，三名犯罪嫌疑人违法添加有毒、有害的食品添加剂，违反国家的禁止性规定。
从主观方面看，三人明知AB液系有毒有害的添加剂，仍然予以添加，主客观相一致，构成生产、销售有毒、有害食品罪。
第二种意见认为，三名犯罪嫌疑人的行为构成生产、销售伪劣产品罪。
理由在于国家已经出台了禁止添加6-苄基腺嘌呤的部门规章，而三名犯罪嫌疑人生产的产品违反了国家标准，系以次充好的伪劣产品。
第三种意见认为，三名犯罪嫌疑人的行为不构成犯罪。
理由是三名犯罪嫌疑人主观上虽然明知AB液为国家所禁止，客观上也添加了AB液，但AB液是否有毒、有害未经证实，因此，不应客观归罪。
三、评析意见笔者同意第三种意见。
（一）豆芽菜属于农产品还是食品从国家标准来看，《食品中农药最大残留限量》及《食品添加剂使用标准》均将豆芽菜归类为蔬菜-芽菜类，认为豆芽菜属于新鲜蔬菜，不属于加工蔬菜;从职能部门的规章来看，卫生部《关于制发豆芽不属于食品生产经营活动的批复》，国家质检总局《关于对豆芽生产环节监管意见的复函》及我省质量技术监督局《关于进一步明确食品生产环节及小作坊监管要求的指导意见》中均明确豆芽菜的监管部门应属农业部，而农业部第1490号公告亦明确，包括绿豆芽、黄豆芽等在内的芽菜类产品属于蔬菜。
豆芽中三种常见激素的高效液相色谱检测法
第 2期 彭 姝等 :豆芽中三种常见激素的高效液相色谱检测法
97
钠溶液 (0101 mol/L )作为提取剂 。将 2, 4 - D 转 化为钠盐 ,溶于水中 ,高速离心分离 ,上清液用磷 酸调 pH至 215,将钠盐还原成弱酸 2, 4 - D ,此时 2, 4 - D 从水相中析出 。有报道称可利用二氯甲 烷液 - 液萃取 ,但实际操作中发现该法乳化现象 比较严重 ,回收率不高 。故考虑先用蛋白沉淀剂 处理 ,后再通过液 - 液萃取提取 2, 4 - D ,提取度 比较高 ,但是多次萃取操作繁琐 、试剂消耗量大 。 而用 ODS - C18 SPE柱萃取 ,用水淋洗后再用流 动相洗脱 ,不仅具有较理想的净化效果和回收率 , 而且试剂消耗少 ,操作简单 、快捷 。2, 4 - D 为有 机弱酸 ,所以流动相体系应为酸性 ,以 pH 310为 佳 ,试用了冰乙酸和磷酸 ,结果冰乙酸对基线影响 较大 ,噪声较多 ,而磷酸较理想 。
酸化甲醇溶液 :每 100 m l甲醇 +水 ( 60 + 40, V /V )中加入乙酸 50μl,混匀 。
固相萃取小柱 : ODS - C18 SPE柱 ,用时先经 10 m l甲醇洗脱活化 ,再用 10 m l水洗去残留甲 醇 ,保持萃取柱湿润状态待用 。 21212 色谱条件 检测器 :紫外检测器 ;色谱柱 : kromasil C18 ( 25010 mm ×416 mm ×5 μm ) ; 柱 温 : 35℃;检测波长 : 267 nm;流动相 :甲醇 + 115% 磷酸溶液 (40 + 60) ;流速 : 110 m l/m in;进样量 : 10 μl。 21213 样品前处理方法 称取捣碎混匀的豆芽
资料整理 6-ba的基本情况
1.豆芽质量安全的关键影响因素分析及对策：1.1 目前情况：本文做了大量的实验，进行数据分析，讨论得出了研究结果，一是运用气相色谱-质谱技术开展了豆芽中农药残留的检测分析工作，结果表明豆芽中马拉硫磷、对硫磷、甲拌磷、久效磷、甲胺磷、氧化乐果等农残合格率100%。
二是运用液相色谱-质谱联用技术开展了豆芽中的添加剂指标的检测分析工作，该方法采用有机溶剂盐析提取目标物和质谱负模式检测技术，有效提取目标物，去除杂质干扰，适合于市场样品实际检测，经检测6-苄基腺嘌呤与4-氯苯氧乙酸钠合格率分别为96.4%和76.7%。
三是运用原子荧光和微波消解前处理技术开展了豆芽中总砷的检测分析工作，经对市场35 个豆芽样品的实际检测，结果表明合格率为100%，未检出总砷超标的豆芽样品。
四是运用紫外可见分光光度法检测分析了豆芽中亚硝酸盐和亚硫酸盐的含量情况，其中亚硝酸盐合格率89.7%、亚硫酸盐合格率为53.2%，这两项指标是影响上市豆芽质量的主要因素，同时，从不同单位豆芽产品的检测结果来看，小作坊生产企业豆芽合格率整体较低，安全隐患较大，而品牌豆芽的质量相对较好。
综合分析各实验数据，本文找出了影响豆芽质量安全的主要指标，为生产质量管理、市场执法监督、群众放心消费提供了数据支持。
1.2 生产引入的污染物及危害1.2.1 生长调节剂的概述（主要作用、限制用量、物理性质、化学性质、作用机理、毒理范围）6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠俗称AB 粉，是豆芽生产使用的2 个主要添加剂，主要作用是促进豆芽生长、抑制长根，提高产量。
国家标准GB2760《食品添加剂使用卫生标准》规定豆芽中4-氯苯氧乙酸钠残留量小于 1.0mg/kg、6 苄基腺嘌呤残留量小于0.2mg/kg。
6-苄基腺嘌呤（6-Benzylaminopurne）分子式C12H11N5，相对分子质量225.25。
白色微针状结晶或类白色粉末，难溶于水，可溶于酸、碱，在酸性、碱性条件下均稳定。
超高效液相色谱-串联质谱法测定豆芽中7种药物残留
超高效液相色谱-串联质谱法测定豆芽中7种药物残留刘春生;罗海英;冼燕萍;王斌;王莉;罗东辉;郭新东【摘要】建立了甲醇超声提取,分散固相萃取净化技术(QuEChERS)净化,超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)检测豆芽中7种药物(咪鲜胺、头孢氨苄、诺氟沙星、6-苄氨基嘌呤、赤霉酸、2,4-二氯苯氧乙酸和4-氯苯氧乙酸)残留的方法.样品用含0.1％甲酸的甲醇溶液超声提取,QuEChERS(PSA+C18)净化,在UPLC-MS/MS的电喷雾正、负离子分段扫描和多反应监测(MRM)模式下检测,以保留时间和特征离子对定性,外标法定量.结果表明,7种待测物在0.4～100 μg/L范围内线性关系良好;方法定量限(S/N=10)为2.0～5.0 μg/kg;添加水平为2.0～50 μg/kg时,平均回收率在80.7％～115％之间;相对标准偏差(RSD,n=6)为2.6％～13.5％.本方法具有前处理简单、结果准确、回收率高等特点,可以应用于豆芽中7种药物残留的日常监测.【期刊名称】《质谱学报》【年(卷),期】2014(035)004【总页数】9页(P302-310)【关键词】豆芽;药物残留;分散固相萃取净化技术(QuEChERS);超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)【作者】刘春生;罗海英;冼燕萍;王斌;王莉;罗东辉;郭新东【作者单位】广州质量监督检测研究院,国家加工食品质量监督检验中心(广州),广州市食品安全检测技术重点实验室,广州市食品安全风险动态监测与预警研究中心,广东广州510110;广州质量监督检测研究院,国家加工食品质量监督检验中心(广州),广州市食品安全检测技术重点实验室,广州市食品安全风险动态监测与预警研究中心,广东广州510110;广州质量监督检测研究院,国家加工食品质量监督检验中心(广州),广州市食品安全检测技术重点实验室,广州市食品安全风险动态监测与预警研究中心,广东广州510110;广州质量监督检测研究院,国家加工食品质量监督检验中心(广州),广州市食品安全检测技术重点实验室,广州市食品安全风险动态监测与预警研究中心,广东广州510110;广州质量监督检测研究院,国家加工食品质量监督检验中心(广州),广州市食品安全检测技术重点实验室,广州市食品安全风险动态监测与预警研究中心,广东广州510110;广州质量监督检测研究院,国家加工食品质量监督检验中心(广州),广州市食品安全检测技术重点实验室,广州市食品安全风险动态监测与预警研究中心,广东广州510110;广州质量监督检测研究院,国家加工食品质量监督检验中心(广州),广州市食品安全检测技术重点实验室,广州市食品安全风险动态监测与预警研究中心,广东广州510110【正文语种】中文【中图分类】O657.63豆芽是人们喜食的一种传统的物美价廉的蔬菜。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
DB33-T 625前言DB33/ 625－2007《无公害豆芽》分为三个部分：——第1部分：生产技术规程；——第2部分：质量安全要求；——第3部分：6-苄基腺嘌呤残留量和4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定。
本部分为DB33/ 625－2007《无公害豆芽》第3部分。
本部分的附录A和附录B为资料性附录。
本部分起草单位：浙江省疾病预防控制中心、宁波市疾病预防控制中心、杭州市质量技术监督检测院、浙江省农业厅农作物管理局、宁波市卫生监督所、宁波市五龙潭蔬菜食品有限公司、宁波市质量技术监督局。
无公害豆芽第3部分：6－苄基腺嘌呤残留量和4－氯苯氧乙酸钠残留量的测定第一法豆芽中6-苄基腺嘌呤残留量的测定——LC-MS/MS法1 范围本方法规定了豆芽中6-苄基腺嘌呤的测定方法。
本方法适用于豆芽中6-苄基腺嘌呤的测定。
本方法检出限为1×10-6 mg/kg。
2 原理豆芽中残留的6-苄基腺嘌呤经酸化甲醇提取，反相柱分离，电喷雾离子化（ESI）和多离子反应监测（MRM）方式进行定量测定。
以试样峰的保留时间、母离子（m/z: 226.20[M+H]+）与子离子(226.20>91.0, 226.20>147.90)定性，以子离子(226.20>91.0)峰面积外标法定量。
3 试剂除非另有规定，仅使用分析纯试剂、蒸馏水或去离子水。
3.1 乙酸。
3.2 乙腈（HPLC）。
3.3 甲醇（HPLC）。
3.4 50%的甲醇水溶液。
3.5 酸化甲醇：每100 mL甲醇中加入乙酸50μL，混匀。
3.6 标准溶液的配置：3.6.1 标准储备溶液精密称取6-苄基腺嘌呤（含量＞98.0％）0.1000g于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，作为标准储备溶液。
此标准储备溶液每毫升相当于1.0 mg 6-苄基腺嘌呤。
标准使用液用甲醇稀释至每毫升含1μg的6-苄基腺嘌呤。
在4℃冰箱中储存，有效期1个月。
3.6.2 标准工作溶液3.6.2.1 空白豆芽萃取液制备选择在生产过程中未添加6-苄基腺嘌呤的豆芽菜。
按5.1 试样处理方法提取，经0.22μm有机滤膜过滤。
必要时使用LC-MS/MS分析，以确定在6-苄基腺嘌呤出峰处不存在干扰。
3.6.2.2 标准工作溶液系列配制准确吸取标注使用液1μL、2μL、4μL、6μL、8μL、10μL于进样瓶中，加空白豆芽萃取液（3.6.2.1）至1 mL。
配制成浓度依次为1 ng/mL、2ng/mL、4 ng/mL、6 ng/mL、8 ng/mL、10 ng/mL的标准溶液系列，供LC-MS/MS分析。
4 仪器4.1 组织捣碎机。
4.2 天平（精度0.01和0.0001g）。
4.3 高效液相色谱-电喷雾-串联四极杆质谱（LC-ESI-MS/MS）。
4.4 均质机（速度范围： 6,000－24,000 rpm）。
4.5 离心机(最高转速:15,000 RPM)。
5 分析步骤5.1 试样处理称取豆芽样品500g用食物粉碎机粉碎后，取5g样品（精确至0.01g）于50 mL聚丙烯离心管中，加入10 mL酸化甲醇，用均质机匀质3 min,10000 rpm离心10min，上清液转入50 mL容量瓶中，样品再用10 mL 酸化甲醇重复提取一次。
合并上清液，用水定容至刻度，摇匀，吸取2mL于10容量瓶中，用50%甲醇水溶液定容至刻度，摇匀，经0.2μm 滤膜过滤，供LC-MS/MS分析。
5.2 色谱参考条件色谱柱：Waters SunFire C18柱（2.1mm×150mm，5μm颗径）。
流动相A：水（0.1%甲酸）。
流动相B：甲醇（0.1%甲酸）。
流速：0.30 mL/min。
进样量： 10 uL。
柱温：35℃。
离子化方式ESI+。
毛细管电压 (kV) 3.00。
锥孔电压 (V) 57。
RF Lens 1 35.0。
Aperture (V) 0.0。
RF Lens 2 0.3。
源温度(℃) 120。
脱溶剂温度(℃) 350。
锥孔反吹气流 (L/Hr) 50。
脱溶剂气流 (L/Hr) 454。
LM 1 Resolution 12.0。
HM 1 Resolution 12.0。
离子能量 1 0.5。
LM 2 Resolution 12.0。
HM 2 Resolution 12.0。
离子能量 2 1.0。
光电倍增管 (V) 650。
碰撞池气压(mbar) 3.03e-3。
5.4 测定准确吸取10.0μL标准系列溶液和试样溶液注入液相色谱-质谱联用仪中，按照本标准5.2和5.3项条件进行检测，以保留时间及子离子226.20>91.0，>147.90进行定性，以子离子226.20>91.0的峰面积外标法定量。
参见附录A 。
5.5 结果计算按外标法计算试样中6-苄基腺嘌呤的含量。
见下式：10001000⨯⨯⨯=m f A X式中：X —试样中6-苄基腺嘌呤的含量，mg/kg ；A —试样中定量子离子面积对应的6-苄基腺嘌呤的质量，μg； f —试样的稀释倍数； m —试样的取样量，g 。
计算结果表示到三位有效数字。
6 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果绝对差值不得超过算术平均值的20%。
附录 A（资料性附录）226.20>91.0，>147.90子离子流图226.20>91.0，>147.90子离子流见图A.1。
图A.1 226.20>91.0，>147.90子离子流图第二法 4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定1 范围本方法规定了豆芽中4-氯苯氧乙酸钠的测定方法。
本方法适用于豆芽中4-氯苯氧乙酸钠的测定。
本方法检出限为0.10 mg/kg。
2 原理豆芽中的4-氯苯氧乙酸钠用稀碱提取，酸化后用乙醚萃取，高效液相色谱紫外检测器测定，保留时间定性，外标法定量。
3 试剂除非另有规定，仅使用分析纯试剂、蒸馏水或去离子水。
3.1 氢氧化钠。
3.2 盐酸。
3.3 乙醚。
3.4 甲醇（HPLC）。
3.5 冰醋酸。
3.6 氢氧化钠溶液（0.01mol/L）：称取0.40g 氢氧化钠，溶于水并稀释至1000 mL。
3.7 盐酸溶液（1：1）：取100mL盐酸，加水稀释至200mL。
3.8 氯化钠酸性溶液（40 g/L）：于100mL氯化钠溶液（40 g/L）中加1.0mL 盐酸酸化。
3.9 磷酸盐缓冲液（0.01mol/L）：称取1.56 g的磷酸二氢钠（NaH2PO4.2H2O）加水溶解，并定容至1000mL，用50%的H3PO4溶液调节pH至4.0。
3.10 4-氯苯氧乙酸标准溶液：精密称取4-氯苯氧乙酸(含量＞99.0%，中国医药集团上海化学试剂公司)0.1000g，用甲醇溶解并移入100mL容量瓶中，稀释至刻度。
此溶液每毫升相当于1.00mg4-氯苯氧乙酸。
在4℃冰箱中储存，有效期1个月。
临用时用甲醇稀释至每毫升相当于0.10mg4-氯苯氧乙酸。
4 仪器4.1 组织捣碎机。
4.2天平（精度0.01和0.0001g）。
4.3 超声波仪。
4.4 均质机（速度范围： 6,500 – 24,000 rpm）。
4.5 旋转蒸发仪。
4.6 酸度计。
4.7 高效液相色谱仪（带紫外检测器）。
5 分析方法5.1 样品处理称取经组织捣碎机捣碎的豆芽试样10g（精确至0.01g）于50 mL比色管中，加入30mL氢氧化钠（3.6），用均质机均质（10,000 rpm）混匀3min，8000r/min离心10min，上清液转入50mL容量瓶中，样品再用少量氢氧化钠（3.6）重复提取1次，离心后。
合并上清液，并用氢氧化钠（3.6）定容至刻度，摇匀。
取此液10.0mL于150 mL分液漏斗中，加盐酸溶液（3.7）2.0mL，用50mL乙醚（3.3）萃取3次，每次振摇1min，合并乙醚层，用5.0mL氯化钠酸性溶液（3.8）洗涤，弃去水层，乙醚层用旋转蒸发仪蒸至近干，用甲醇溶解并定容至1.0mL，过0.45μm滤膜后，供高效液相色谱分析。
5.2 标准曲线准确吸取每毫升相当于0.10mg 的 4-氯苯氧乙酸0.20mL 、0.50 mL 、1.00 mL 、2.00 mL 、4.00mL 于100 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度。
制成浓度依次为0.20mg/L 、0.50 mg/L 、1.00 mg/L 、2.00 mg/L 、4.00mg/L 的标准溶液，供高效液相色谱分析。
5.3 色谱参考条件色谱柱：ZORBAX SB C 18柱（ 4.6mm ×250mm × 5μm ）。
检测波长：228nm 。
流动相：甲醇+0.01mol/L 磷酸盐缓冲液（40+60）。
流速：1.0mL/min 。
柱温：30℃。
5.4 测定吸取10.0μL 标准使用液和试样液注入高效液相色谱仪，按照5.3项条件进行检测，以保留时间定性，标准曲线法定量。
5.5 结果计算按外标法计算试样中4-氯苯氧乙酸钠的含量。
见下式：12.110001000⨯⨯⨯⨯=m f A X式中：X —试样中4-氯苯氧乙酸钠的含量，mg/kg ；A —从标准曲线上求出的试样液中4-氯苯氧乙酸的质量，μg ； f —试样的稀释倍数； m —试样的取样量，g ；1.12—4-氯苯氧乙酸转换为4-氯苯氧乙酸钠的系数。
计算结果保留两位有效数字。
5.6 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。
附录 B(资料性附录)4-氯苯氧乙酸标准色图谱4-氯苯氧乙酸标准色图谱见图B.2。
图B.2 4-氯苯氧乙酸标准色图谱。