复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量测定
实验六__双波长分光光度法测定 (1)
三、磺胺甲噁唑的测定 精密量取供试品溶液与对照 品溶液(1)，(2)各2mL，分别置 于100mL量瓶中，各加0.4％氧 化钠溶液稀释至刻度，摇匀。
取对照品溶液(2)的稀释液，以 257nm为测定波长（λ2），在304nm波长 附近(每间隔0.5nm)选择等吸收点波长为 参比波长(λ1)，要求ΔA＝Aλ2－Aλ1＝0。
Ax C x As C s Ax Cx Cs As
每片中含SMZ的毫克数
Ax Cs 100 W As W称 1000
m SMZ
Cs = 0.505mg/ml
W称=0.06960g
W=552.64mg
由于参比波长对测定影响较大， 故采用对照品溶液来确定。此波长 可因仪器不同而异，测定时应仔细 选择。
三、实验内容 1、供试品溶液的制备（教师准备） 取本品10片，精密称定，研细，精密 称取适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg 与甲氧苄啶10mg)，置于100mL量瓶 中，加乙醇适量，振摇15分钟使磺胺 甲噁唑与氧苄啶溶解，加乙醇至刻度， 摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶 液。
二、对照品溶液的制备（教师准备） 精密称取在105℃干燥至恒重的磺 胺甲噁唑对照品50mg与甲氧苄啶对 照品10mg，分别置于100mL瓶中， 各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀， 分别作为对照品溶液、b两组分共 存时，若要消除a组分的干扰测定b组 分，可在a组分的吸收光谱上选择两 个吸收度相等的两波长λ1和λ2，测定 混合物的吸光度差值。然后根据ΔA 值计算b的含量。
磺胺甲噁唑（SMZ）在257nm波长 处有最大吸收；甲氧苄啶（TMP）在此 波长吸收最小并在304nm波长附近有一 等吸收点，故选定257nm为SMZ的测定 波长（λ2），在304nm波长附近选择参 比波长（λ1）。
PPT-双波长分光光度法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量
3. 本法的主要误差来源何在？ 4. 在选择实验条件时，是否应考虑赋形剂等
辅料的影响？如何进行？ 5. 如果只测定磺胺甲恶唑，甲氧苄啶对照品
溶液的浓度是否需要准确配置？
E11c%m
10 M
o 物质在某一波长下的吸光系数 ，是物质对某一特定波长光吸
收能力的衡量；吸光系数越大 ，吸光能力越强，测定时灵敏 度越高。同一吸收物质在不同
。 波长下的E值是不同的
A是波长的函数，当LC=1 时，A＝E，可见吸光系数 也是波长的函数。
A AB 1
AA 1
AB 1
A 2
A 1
)lc
A
可见，在双波长分光光度法中吸光度的差值与干扰组
份B无关。
四 操作步骤
l 1）.对照品溶液的配制 精密称取105℃干燥至恒重的甲氧 苄啶对照品约10mg，用乙醇溶解并定容至100mL，精取 2.00mL置100mL量瓶中，用0.4%NaOH稀释至刻度，摇匀 。取在105℃干燥至恒重的磺胺甲恶唑对照品约50mg，精 密称定，同法配制溶液。
A 1
lc
A
B 1
lc
B
A AB 2
AA 2
AB 2
A 2
lc
A
B 2
lc
B
o 双波长分光光度法(双波长等吸收法)
当光谱重叠时，在其光谱中选择两波长，在选定的 波长处，干扰组分有相同的吸收；被测组分与干扰组 分的吸收有足够大的差别。则两波长处吸光度的差值 与被测组份的浓度成正比。
复方磺胺甲恶唑片
复方磺胺甲噁唑片【药品名称】通用名称：复方磺胺甲噁唑片英文名称：Compound Sulfamethoxazole T ablets【成份】本品每片中含磺胺甲噁唑（C10H11N3O3S）应为0.360-0.440g，含甲氧苄啶（C14H18N4O3）应为72.0-88.0mg【适应症】近年来由于许多临床常见病原菌对本品常呈现耐药，故治疗细菌感染需参考药敏结果，本品的主要适应症为敏感菌株所致的下列感染：1.大肠埃希杆菌、克雷伯菌属、肠...【用法用量】1.成人常用量治疗细菌性感染，一次甲氧苄啶160mg和磺胺甲唑800mg，每12小时服用1次。
治疗卡氏肺孢子虫肺炎一次甲氧苄啶3.75～5mg/kg，磺胺甲唑18.75～25mg/kg，每6小时服用1次。
成人预防用药：初予甲氧苄啶160mg和磺胺甲唑800mg，一日2次，继以相同剂量一日服1次，或一周服3次。
2.小儿常用量2月以下婴儿禁用。
治疗细菌感染，2个月以上体重40kg以下的婴幼儿按体重口服一次SMZ 20～30mg/kg 及TMP 4～6mg/kg，每12小时1次；体重≥40kg的小儿剂量同成人常用量。
治疗寄生虫感染如卡氏肺孢子虫肺炎，按体重一次口服SMZ 18.75～25mg/kg及TMP3.75～5mg/kg，每6小时1次。
慢性支气管炎急性发作的疗程至少10～14日；尿路感染的疗程7～10日；细菌性痢疾的疗程为5～7日；儿童急性中耳炎的疗程为10日；卡氏肺孢子虫肺炎的疗程为14～21日.【不良反应】1.过敏反应较为常见,可表现为药疹,严重者可发生渗出性多形红斑、剥脱性皮炎和大疱表皮松解萎缩性皮炎等；也有表现为光敏反应、药物热、关节及肌肉疼痛、发热等血清病样反应。
偶见过敏性休克。
2.中性粒细胞减少或缺乏症、血小板减少症及再生障碍性贫血。
患者可表现为咽痛、发热、苍白和出血倾向。
3.溶血性贫血及血红蛋白尿。
这在缺乏葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的患者应用磺胺药后易于发生,在新生儿和小儿中较成人为多见。
高效液相色谱法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的含量_熊久林
续表1序号保留时间t /min化合物名称分子式分子量相对含量(%)79.3213-octadecenoic acid(Z)(Z)-13-十八碳烯酸C 18H 34O 228221.6289.73octadecan oic acid 十八烷酸C 18H 36O 228433.46910.6210,13-octadecadienoic acid 10,13-十八碳二烯酸C 18H 32O 22800.131010.7910-noadecen oic acid 10-十九烯酸C 19H 36O 22960.091111.26noadecanoic caid 十九烷酸C 19H 38O 22980.281212.7211-eicosenoic acid 11-二十碳烯酸C 20H 38O 2310 2.101313.23eicosanoic acid 二十碳烷酸C 20H 40O 2312 1.771417.42docosanoic acid 二十二碳烷酸C 22H 44O 23400.18由表1可以看出,从中药材木鳖子中共鉴定出14种脂肪酸,占脂肪酸总含量的89.23%,其中饱和脂肪酸7种,占总脂肪酸含量的47.32%不饱和脂肪酸7种,占脂肪酸总量的41.91%。
3 讨论木鳖子中不饱和脂肪酸以亚油酸(19.85%)、(Z)-13-十八(碳)烯酸(21.62%)、11-二十(碳)烯酸(2.10%)为主。
近年来的研究表明不饱和脂肪酸对人体有降低血脂、胆固醇和血压,抗血栓、抗动脉硬化,预防心血管疾病,增强记忆力,预防老年痴呆症,防癌等多种作用[3]。
木鳖子是一种常见的中药,对中药木鳖子的研究已较深入,但对其脂肪酸的研究还未见报道。
本实验方法具有简单、准确、脂肪酸检出率高等优点,其结果将对木鳖子的深层次的开发和应用提供科学依据。
参考文献:[1] 宋立人,洪 恂,丁绪亮,等.现代中药大辞典,上册[M ].北京:人民出版社:349-351.[2] S.R..Heller ,G.W.A.M iline.EPA/NIH M ass Spectral date[M ].U .S.Washington D.C.,1978:1-4.[3] 周永红.火麻仁油中脂肪酸的GC-M S 分析[J ].中国油脂,2004,29(3):72-72.收稿日期:2004-11-12; 修订日期:2005-02-12作者简介:熊久林(1956-),男(汉族),湖北黄梅人,现任湖北省黄石市药品检验所副主任药师,主要从事药品检验工作.高效液相色谱法测定复方磺胺甲唑片中磺胺甲唑和甲氧苄啶的含量熊久林,孙仲葆,黎 源,马锦星,运 委,张 晶(湖北省黄石市药品检验所 435000)摘要:目的:建立同时测定复方磺胺甲唑片中磺胺甲唑和甲氧苄啶含量的高效液相色谱法。
复方磺胺甲恶唑的含量测定
高效液相色谱法测定复方磺胺甲噁唑片的含量［实验目的］1掌握高效液相色谱法测定复方磺胺甲噁唑片的含量的基本原理2掌握高效液相色谱仪的操作及注意事项［实验原理］结构特点：苯环（紫外吸收）、芳伯胺基（重氮化-偶合反应）、磺酰胺基上的活泼氢有一定酸性，可与碱成盐或与重金属离子反应。
分子式：C10H11N3O3S 分子质量：253.28。
本品为白色结晶性粉末。
熔点167℃，易溶于稀盐酸；氢氧化钠溶液或氨水，几乎不溶于水。
无臭，味微苦。
外标法是以待测组分的纯品作为对照品，以供试品中待测组分的峰面积或峰高进行定量分析，本实验采用峰面积进行定量。
分别精密量取一定量的对照品和供试品配制成溶液，分别进相同的体积的对照品溶液和供试品溶液，在完全相同的色谱条件下进行色谱分析，测定峰面积。
［实验仪器、试剂］仪器：75-4型紫外可见分光光度计 (上海分析仪器厂 )，高效液相色谱仪，色谱柱，超声波清洗仪，紫外吸收检测器，无油隔膜真空泵，抽滤装置，电子分析天枰，称量纸，研钵，容量瓶（100ml,50ml,25ml,10ml），漏斗，滤纸，烧杯，玻璃棒，移液枪试剂：复方磺胺甲噁唑片(山东新华制药股份有限公司 ,批号 0412073 )，甲氧苄啶，磺胺甲噁唑，甲醇（色谱纯）,水（超纯水），乙腈(色谱纯)，三乙胺 (色谱纯)，醋酸溶液（1→100），［实验步骤］1.色谱条件与系统适用性试验：填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂流动相：水-乙腈-三乙胺（799∶200∶1）（用醋酸溶液（1→100）调节pH值至5.9±0.1）检测波长：254nm流速：1.0mL/min进样量：20ul理论塔板数：按甲氧苄啶计算应不低于2000，甲氧苄啶与磺胺甲噁唑峰之间的分离度应大于 5.0。
甲氧苄啶峰与磺胺甲噁唑峰的拖尾因子均不得过2.0。
2.测定法2-1溶液的配制2-1-1对照品储备液的配制：取磺胺甲噁唑200mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。
二阶导数分光光度法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量
2. 4 样品的测定 取复方磺胺甲卟恶唑片 10 片 ,精
密称定 。研细后 ,精密称取适量 ,以无水乙醇溶解 , 配成浓度约为 100 μg·ml - 1 的溶液 ,过滤 。取续滤 液 ,以无水乙醇制成浓度约为 20 μg·ml - 1 的溶液 。
以无水乙醇为空白 ,在 220～400 nm 波长处绘制二
Determination of sulfamethoxazole in compound sulfamethoxazole tablets by secondary derivative spectrophotometry
Dai Min ( Yijishan Hospital ,Wannan Medical College ,Wuhu 241001)
The test f or bacterial endotoxins of infatmuli injection
Zhong Fuqing ,Zhu J iangxiang ( The Second Hospital of Jianghua ,Jianghua 425500)
ABSTRACT OBJECTIVE: To inspect on t he feasibility of bacterial endotoxin test for infatmuli injection. METHODS : Inhibition and enhancement test & contrast test . RESUL TS : The test was not disturbed by t hese samples ,as was t he same as rabit test . CONCL U2 SIONS : Infatmuli injectio could be tested wit h t he tachypleus amebocyte lysate t hat sentivity was 0. 5 EU·ml - 1 . KEY WORDS infatmuli injection ,tachypleas amebocyte lysate ,bacterial endotoxin
实验六 双波长分光光度法测定
每片中含SMZ的毫克数
∆Ax Cs × ×100 ×W ∆As = W称 ×1000
mSMZ
Cs = 0.505mg/ml W称=0.06960g W=552.64mg
由于参比波长对测定影响较大， 故采用对照品溶液来确定。此波长 可因仪器不同而异，测定时应仔细 选择。
取对照品溶液(2)的稀释液，以 取对照品溶液(2)的稀释液，以 257nm为测定波长（λ ），在304nm波长 257nm为测定波长（λ2），在304nm波长 附近(每间隔0.5nm)选择等吸收点波长为 附近(每间隔0.5nm)选择等吸收点波长为 参比波长( 参比波长(λ1)，要求∆A＝Aλ2－Aλ1＝0。 要求∆
每片含SMZ： 每片含SMZ：360~440mg(Chp 2000)
二、基本原理 当吸收光谱重叠的a、b两组分共 存时，若要消除a组分的干扰测定b组 分，可在a组分的吸收光谱上选择两 个吸收度相等的两波长λ1和λ2，测定 混合物的吸光度差值。然后根据∆A 值计算b的含量。
磺胺甲噁唑（SMZ）在257nm波长 处有最大吸收；甲氧苄啶（TMP）在此 波长吸收最小并在304nm波长附近有一 等吸收点，故选定257nm为SMZ的测定 波长（λ2），在304nm波长附近选择参 比波长（λ1）。
再在λ 再在λ2与λ1两波长处分别测定供试品 溶液的稀释液与对照品溶液(1)稀释液 溶液的稀释液与对照品溶液(1)稀释液 的吸收度，求出各自的吸收度差值 (先检查仪器波长是否 准确。
五、思考题 1．双波长分光光度法测定复方制剂有 何优点? 2．应用双波长分光光度法应如何选择 测定波长和参比波长?
三、实验内容 1、供试品溶液的制备（教师准备） 取本品10片，精密称定，研细，精密 称取适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg 与甲氧苄啶10mg)，置于100mL量瓶 10mg) 100mL 中，加乙醇适量，振摇15分钟使磺胺 甲噁唑与氧苄啶溶解，加乙醇至刻度， 摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶 液。
复方磺胺甲恶唑片中间产品质量标准
依据：《复方磺胺甲噁唑片质量标准》，产品质量的稳定性考察。
内容：
1颗粒
1.1性状：本品为白色颗粒。
1.2检查
水分：应为1.0%～4.0%（快速水分测定法）。
1.3含量测定：本品每克中含磺胺甲噁唑（C10H11N3O3S）应为0.712～0.827g，含甲氧
苄啶（C14H18N4O3）应为140.4～167.3㎎。
2素片
2.1性状：本品为白色片。
2.2检查
2.2.1 重量差异：±4.5%。
2.2.2 崩解时限：不得过13分钟。
3分装
3.1 装量差异：50片/瓶，不允许有误差。
3.2 封口质量：封口处应严密。
4包装：贴签端正（允许偏差≤2mm）；装量准确，每件装量应为：50片×300瓶；
封口严密、牢固；产品批号、生产日期、有效期印字清晰，内外一致；打包端正
（打包带上下偏差不得过1㎝），松紧适度。
复方磺胺甲恶唑片中SMZ的含量测定
ΔA A1 A2 A3 A4 A5 A6
ΔA为纵坐标 C为横坐标
最小二乘法回归得回归方程 参考标准方程： ΔA=6.467×10-12CS+0.002
r=0.999 线性范围0—15ug/mL
2、复方磺胺甲噁唑中SMZ的含量测定
本品20片，研细
W
置100ml量瓶 精密称定约 0.02gSMZ
加95%乙醇 50ml溶解
值，该差值与被测物浓度成正比，而与干扰物浓度 无关。
用数学式表达如下：
ΔA（λ1λ2）=Aa+b1 - Aa+b2 =Aa1-Aa2+Ab1-Ab2 =ΔE.aCa.L+ΔEb.Cb.L
b为干扰物，波长λ1λ2处的Eb相等，ΔEb=0 ΔA混=ΔEa.Ca.L,与干扰物浓度无关
双波长法测定 复方磺胺甲噁唑片中SMZ含量的原理
紫外测定线性关系：配置系列浓度对照液（n≥5） A（0.2-0.8）；r=0.9996（n=5）,截距应接近于零 。
实验说明
0.1mol/LNaOH自己配置
每人均做两份供试品，紫外测定每个数据平 行测定两次，做好记录
仪器分配（测定样品选择相同型号的仪器）
波长 257nm
实验室 505
一、实验目的
掌握双波长分光光度法的基本原理 掌握复方制剂不经分离直接测定各组分含量
的方法 熟悉紫外分光光度仪的使用
二、仪器与试药
仪器
Mettler AL204电子天平 752型紫外-可见分光光度仪 胖肚移液管 规格：25mL 研钵 定量滤纸（直径10cm） 容量瓶 规格：25、100 mL
记录
磺胺甲恶唑片测定记录
编号
A257 A304
复方磺胺甲恶唑片中间产品检验操作规程
目的：为检验复方磺胺甲噁唑片中间产品规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。
范围：适用于复方磺胺甲噁唑片中间产品的检验。
职责：检验员，检验室主任对本规程实施负责。
规程：1 性状：本品为白色片.2 鉴别：2.1 试剂与仪器2.1.1 稀盐酸 2.1.2 0.1mol/L亚硝酸钠溶液2.1.3 碱性B-萘酚试液 2.1.4 稀硫酸2.1.5 甲醇 2.1.6 氯仿-甲醇-二甲基酰胺(20:2:1)2.1.7 碘试液 2.1.8 硅胶GF254薄层板2.1.9 烧杯、量筒、试管 2.1.10 微量进样器2.1.11 层析缸 2.1.12 漏斗、漏斗架2.1.13 电炉2.2 项目与步骤2.2.1 取本品细粉适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg)，显芳香第一胺的鉴别反应：取供试品约50mg，加稀释盐酸1ml，必要时缓缓煮沸便溶解，放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性B-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到桔红色,为符合规定。
2.2.2 取本品的细粉适量(约相当于甲氧苄啶50mg)，加稀硫酸10ml微热溶解后，放冷、滤过、滤液加碘试液0.5ml，即生成棕褐色沉淀，为符合规定。
2.2.3 取本品的细粉适量(约相当于磺胺甲噁唑0.2g)，加甲醇10ml，振摇，滤过，取滤液作为供试品溶液，另取磺胺甲噁唑0.29g、甲氧苄啶40mg，加甲醇10ml溶解，作为对照溶液；照薄层色谱法 (SOP-QC-304-00)试验，吸取上述两种溶液各5ml，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以氯仿-甲醇-二甲基甲酰胺(20：2：1)为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯(254nm)检视，供试品溶液所显两种成分的主斑点的位置应与对照溶液的主斑点相同为符合规定。
3 检查：3.1 试剂与仪器3.1.1 电子天平（万分之一克） 3.1.2 片剂崩解仪3.1.3 片剂脆碎度仪 3.1.4 吹风机3.2 项目步骤3.2.1 崩解时限:取本品6片,照崩解时限检查法(SOP-QC-330-00) 检验，应在15分钟内全部崩解，如有1片崩解不完全，应另取6片用样方法复试，全部崩解完全为符合规定。
复方磺胺甲实验报告
一、实验目的1. 掌握双波长法测定复方磺胺甲恶唑片含量的原理和方法。
2. 了解复方磺胺甲恶唑片的质量分析。
3. 提高实验操作技能和数据处理能力。
二、实验原理本实验采用双波长法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量。
在一定的条件下，磺胺甲恶唑在特定波长下有最大吸收，而其他成分在此波长下无吸收或吸收较小。
通过比较样品和对照品的吸光度，可以计算出样品中磺胺甲恶唑的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 复方磺胺甲恶唑片- 磺胺甲恶唑对照品- 磺胺甲恶唑对照品储备液- 磺胺甲恶唑对照品溶液- 稀释剂2. 实验仪器：- 721分光光度计- 电子天平- 磁力搅拌器- 离心机- 量筒- 容量瓶- 移液管四、实验步骤1. 样品溶液的制备- 称取适量复方磺胺甲恶唑片，置于100ml容量瓶中。
- 加入适量稀释剂，超声溶解。
- 定容至刻度，摇匀。
2. 对照品溶液的制备- 称取适量磺胺甲恶唑对照品，置于100ml容量瓶中。
- 加入适量稀释剂，超声溶解。
- 定容至刻度，摇匀。
3. 吸收度测定- 在721分光光度计上，以稀释剂为空白，分别测定样品溶液和对照品溶液在特定波长下的吸光度。
- 记录数据。
4. 样品含量计算- 根据对照品溶液的吸光度，计算磺胺甲恶唑对照品溶液的浓度。
- 根据样品溶液的吸光度，计算样品中磺胺甲恶唑的含量。
五、实验结果与分析1. 样品溶液和对照品溶液的吸光度测定结果如下：| 溶液类型 | 吸光度 || -------- | -------- || 样品溶液 | 0.475 || 对照品溶液 | 0.502 |2. 样品含量计算结果如下：样品中磺胺甲恶唑的含量 = (样品溶液吸光度 / 对照品溶液吸光度) × 对照品溶液浓度× 样品质量 / 样品溶液体积样品中磺胺甲恶唑的含量= (0.475 / 0.502) × 0.1 × 0.1 / 1 = 0.0945六、实验结论本实验采用双波长法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量，结果表明，该方法操作简便、准确可靠。
复方磺胺甲恶唑片的全检
方法名称：复方磺胺甲恶唑片—磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的测定—高效液相色谱法
【应用范围】：该方法采用高效液相色谱法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的含量。
该方法适用于复方磺胺甲恶唑片。
【方法原理】：供试品加甲醇稀释，最终用流动相定量稀释后，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长240nm处检测磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的吸收值，计算出其含量。
复方磺胺甲噁唑片的全检
【性状】本品为白色片。
【规格型号】100s
【主要成份】本品为复方制剂，每片含活性成份磺胺甲恶唑0.4g和甲氧苄啶80mg。
1.甲氧苄啶：化学名：5[(3,4,5-三甲氧基苯基)甲基]-2,4-嘧啶二胺分子式：C14H18N4O3 分子量：290.32
2.磺胺甲恶唑：化学名：3-对氨基苯磺酰
【简介/商品功效】近年来由于许多临床常见病原菌对本品常呈现耐药，故治疗细菌感染需参考药敏结果，本品的主要适应症为敏感菌株所致的下列感染： 1.大肠埃希杆菌、克雷伯菌属、肠杆菌属、奇异变形杆菌、普通变形杆菌和莫根菌属敏感菌株所致的尿路感染。 2.肺炎链球菌或流感嗜血杆菌所致2岁以上小儿急性中耳炎。 3.肺炎链球菌或流感嗜血杆菌所致的成人慢性支气管炎急性发作。 4.由福氏或宋氏志贺菌敏感菌株所致的肠道感染、志贺菌感染。 5.治疗卡氏肺孢子虫肺炎，本品系首选。 6.卡氏肺孢子虫肺炎的预防，可用已有卡氏肺孢子虫病至少一次发作史的患者，或HIV成人感染者,其CD4淋巴细胞计数≤200/mm3或少于总淋巴细胞数的20％。 7.由产肠毒素大肠埃希杆菌（ETEC）所致旅游者腹泻。
【磺胺甲噁唑的鉴别】芳香第一胺的鉴别反应
取本品的细粉适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg),加稀盐酸1ml,必要时缓缓加热煮沸溶解,放冷,加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴,滴加碱性的β-萘酚试液,观察变化.
双波长法测定复方磺胺甲恶唑含量
双波长法测定复方磺胺甲噁唑含量一、目的1.掌握复方制剂的分析特点及赋形剂的干扰与排除方法。
2.掌握双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑与甲氧苄啶含量的原理与方法。
二、实验内容1.供试品溶液的制备取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg （20片平均片重的8分之一）与甲氧苄啶10mg（20片平均片重的8分之一）)，置于100ml量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟磺胺甲口恶唑与甲氧苄啶溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2.对照品溶液的制备精密称取105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑对照品50mg（按原料药95%含量计）与甲氧苄啶对照品10mg（按原料药95%含量计），分置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液(1)与对照品溶液(2)。
3.磺胺甲噁唑的测定精密量取供试品溶液与对照品溶液(1)、(2)各2ml，分置100ml量瓶中，各加0.4％氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀。
取对照品溶液(2)的稀释液；以257nm 为测定波长(λ2)，在304nm波长附近(每间隔0.5nm)选择等吸收点波长为参与波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0。
再在λ2与λ1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(1)的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值(△A)，计算，即得。
4.甲氧苄啶的测定精密量取上述供试品溶液与对照品溶液(1)(2)各5ml，分置100ml量瓶中，各加盐酸-氯化钾溶液[取盐酸液(0.1mol/L)75ml与氯化钾6.9g，加水至1000ml 摇匀] 稀释至刻度，摇匀。
取对照品溶液(1)的稀释液，以239.0nm为测定波长(λ2)，在295nm波长附近(每间隔0.2nm)选择等吸收点波长为参比波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0。
再在λ2与λ1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(2)的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值(△A)，计算，即得。
UV法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的含量
２．１对照品溶液的制备精密称取在１０５℃干燥至恒重的磺胺甲嗯唑对照品５０ｎａｇ与甲氧苄啶对照品１０ｍｇ，分别置１００ｍＬ量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液…和对照品溶液‘“。
２．２供试品溶液的制备取该药１０片。
研细，精密称取适量（约相当于磺胺甲嚼唑５０ｍｇ与甲氧苄啶１０ｍｇ），置１００ｍＬ量瓶中，加乙醇适量，振摇１５ｒａｉｎ，使磺胺甲嚼唑与甲氧苄啶溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
２．３阴性对照溶液的制备按处方组成比例，制得不含磺胺甲嗯唑与甲氧苄啶的空白样品，按２．２项下方法制备阴性对照溶液。
２．４测定波长的选择原理本试验采用双波长等吸收点法分别测定磺胺甲嚼唑和甲氧苄啶。
以磺胺甲嚼唑为例，说明测定波长的选择原理。
在０．４％氢氧化钠溶液中，磺胺甲嚼唑的入…为２５７ｎｍ，在这一波长处甲氧苄啶也有吸收，而且位于其最小吸收波长（ｘ。
．。
）处。
由甲氧苄啶的ｕＶ吸收睦线可选择其等吸收点在３００ｉｌｍ附近。
这样，以２５７ｈｉｌｌ为测定波长（ｋ），用甲氧苄啶对照品的稀溶液，选择其等吸收点波长（入，，在３０４ａｍ附近，每间隔０．２ｎｍ，测定吸收值，予以选定）为参比波长，则对于甲氧苄啶，在此条件下，△Ａ＝Ａ、。
一Ａ、：＝０。
所以，在此条件下，测定磺胺甲唔唑和甲氧苄啶混合物时，△Ａ与磺胺甲噫唑的浓度成正比，甲氧苄啶的干扰已消除。
２．５样品的测定２．５．１磺胺甲嚼唑精密量取上述供试品溶液与对照品溶液¨一１各２ｍＬ，分别置于１００ｍＬ量瓶中，各加０．４％氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，用分光光度法，取对照品旧１的稀释液，以２５７ｎｍ为测定波长（ｋ），在３０４ｎｍ附近（每间隔０．２ａｍ）选择等吸收点波长为参比波长（入．），要求△Ａ＝Ａ、。
一Ａｎ＝０，再在ｘ：与入。
波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液…的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值（△Ａ），计算。
即得。
实验六复方磺胺甲恶唑片含量测定
实验六复方磺胺甲恶唑片含量测定一、实验原理磺胺甲恶唑是一种广谱抗菌药物，在临床上被广泛应用。
为了保证其药效，需要严格控制其含量。
本实验使用紫外分光光度法测定样品中复方磺胺甲恶唑的含量。
紫外分光光度法是利用化合物吸收紫外光的特性来测定化合物的浓度的方法。
在特定波长下，化合物分子吸收能量，产生吸收峰。
对于复方磺胺甲恶唑，其吸收峰波长为266nm。
因此可以通过测定吸光度值来计算复方磺胺甲恶唑的浓度。
二、实验仪器与药品仪器：紫外分光光度计三、实验步骤1、称取严密瓶装的复方磺胺甲恶唑片20片，粉碎并混匀。
2、取粉末约0.5g，置于50ml量瓶中，加入50ml甲醇溶液，摇匀，振荡30分钟，放置10分钟。
如样品不易溶解，可适当加热。
3、用甲醇溶液配制出复方磺胺甲恶唑的标准曲线。
取不同浓度的复方磺胺甲恶唑溶液，用25ml量瓶定容至刻度，得到不同浓度的溶液。
4、打开紫外分光光度计电源，进行预热。
5、向紫外分光光度计分光计分别加入甲醇，并进行零点校准。
6、取适量复方磺胺甲恶唑样品溶液，置于1cm医用玻璃比色皿中，放在紫外分光光度计的样品池中，测量吸光度值。
7、利用标准曲线计算复方磺胺甲恶唑在样品中的含量。
四、实验数据及计算1、标准曲线的制备制备3组复方磺胺甲恶唑溶液，分别为0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.3mg/ml。
将每组溶液分别加入紫外比色皿中，测量其吸光度值，并制作标准曲线。
复方磺胺甲恶唑浓度（mg/ml）吸光度值0.1 0.1280.2 0.2510.3 0.377标准曲线如下图所示：2、样品的测定取测定样品1.0ml，加入甲醇定容至10.0ml，混匀，测量其吸光度值。
根据标准曲线计算得到样品中复方磺胺甲恶唑的浓度。
5、结果与分析本实验使用紫外分光光度法测定复方磺胺甲恶唑片的含量，结果显示样品中复方磺胺甲恶唑的含量为0.16mg/ml。
根据国家药典标准，每片复方磺胺甲恶唑片中复方磺胺甲恶唑的含量应在0.114mg~0.126mg之间。
双波长法测定复方磺胺甲恶唑含量
双波长法测定复方磺胺甲恶唑含量The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020双波长法测定复方磺胺甲噁唑含量一、目的1.掌握复方制剂的分析特点及赋形剂的干扰与排除方法。
2.掌握双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑与甲氧苄啶含量的原理与方法。
二、实验内容1.供试品溶液的制备取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg（20片平均片重的8分之一）与甲氧苄啶10mg（20片平均片重的8分之一）)，置于100ml量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟磺胺甲口恶唑与甲氧苄啶溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2.对照品溶液的制备精密称取105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑对照品50mg（按原料药95%含量计）与甲氧苄啶对照品10mg（按原料药95%含量计），分置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液(1)与对照品溶液(2)。
3.磺胺甲噁唑的测定精密量取供试品溶液与对照品溶液(1)、(2)各2ml，分置100ml量瓶中，各加％氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀。
取对照品溶液(2)的稀释液；以257nm为测定波长(λ2)，在304nm波长附近(每间隔选择等吸收点波长为参与波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0。
再在λ2与λ1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(1)的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值(△A)，计算，即得。
4.甲氧苄啶的测定精密量取上述供试品溶液与对照品溶液(1)(2)各5ml，分置100ml量瓶中，各加盐酸-氯化钾溶液 [取盐酸液L)75ml与氯化钾6.9g，加水至1000ml摇匀] 稀释至刻度，摇匀。
取对照品溶液(1)的稀释液，以为测定波长(λ2)，在295nm波长附近(每间隔选择等吸收点波长为参比波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0。
双波长分光光度法测定复方磺胺甲恶唑片中两组分的含量
空白 溶剂 ； 甲氧苄啶 的测定波长 为 ２ ３ ９ ｎ ｍ ， 参 比波长为 ２ ９ ３ ｎ ｌ ｎ ， 以盐酸一 氯化钾溶 液作 为 Ｔ Ｍ Ｐ的空 白溶剂。结果
磺胺 甲嗯唑浓度在 ２—１ ０ ・ Ｉ Ｉ ｌ ｌ Ｉ １ 之间 ， 甲氧苄啶浓度在 ０ ． ２～１ ． ０ Ｉ ， ｔ ｇ・ ｍ ｌ － １ 之 间， 符合 比尔定律 ， 浓度与吸 收
ＷＡ ＮＧ Ｌ ｅ — ｔ ｉ ｎ ｇ ＧＵ Ｏ
— ｑ ｉ ｎＬ ＩＫ ｅ
（ Ｔ ａ ｉ ｓ ｈ ａ ｎ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ， Ｔ ａ ｉ ａ ｎ ２ ７ １ ０ １ ６， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｉ ｔ ｖ ｅ ： Ａ ｄ ｕ ａ ｌ ｗ ａ ｖ ｅ ｌ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍ ｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｓ ｕ ｌ ｆ ａ ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｘ ａ ｚ ｏ ｌ ｅ ａ ｎ ｄ ｔ ｒ ｉ ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｐ ｉ ｆ ｍ ｉ ｎ ｃ ｏ ｍ ｐ ｏ ｕ ｎ ｄ ｓ ｕ ｌ ｆ ａ ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｘ —
２ ７ １ ０ １ ６ ） （ 泰山医学院药学院 ， 山东 泰安
摘要 ： 目的 建立复方磺胺 甲嗯 唑片中磺胺 甲嗯唑和 甲氧苄啶含量测定 的双 波长分光光 度法。方法 采用双 波长分光光度法测定。磺胺 甲嗯唑的测定波长为 ２ ５ ７ ｎ ｍ， 参比波长为 ３ ０ ５ ｎ ｉ ｎ ， 以０ ． ４ ％ 氢氧化钠溶液作 为 Ｓ Ｍ Ｚ的
中图 分 类 号 ： Ｒ ９ １ ７ 文献标识码 ： Ａ 文章 编 号 ： １ ０ ０ ４ － ７ １ １ ５ （ ２ ０ １ ６ ） １ ２ — １ ３ ３ ６ － ０ ４ ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ４ － ７ １ １ ５ ． ２ ０ １ ６ ． １ ２ ． ０ ０ ７
荧光光度法测定复方磺胺甲恶唑片中的磺胺甲恶唑含量_何树芸 (1)
暴露资料,故难以与环境致病因子进行综合分析.本研究对我国食管癌高发的河南省林州市食管癌标本中p 53基因第五外显子进行了DNA 序列测定,突变发生率为20%,突变大多发生在G ∶C 碱基对,G ∶C ※A ∶T 的置换最多,占5/9,A ∶T ※T ∶A 的颠换占3/9,G ∶C ※C ∶G 的占1/9.从突变类型看,10个突变中9个为点突变,1个为插入突变,与文献报道基本一致.突变位点较分散,可能与该地区多种危险因素暴露有关.这一结果与我室前期研究相吻合[4].既往宏观流行病学研究发现,食管癌家族史、食用酸菜不仅是林州市食管癌的危险因素,也与p 53蛋白高表达密切相关[5].我们的研究结果显示,p 53基因第五外显子突变与性别、年龄无关,与食管癌家族史、吸烟也未见关联,可能与本研究分组后样本量尚少有关.但与食用酸菜有明显联系,其OR 值为5.95(1.13～31.26).酸菜中含有包括亚硝酸胺在内的多种致癌的亚硝基化合物,p 53基因突变可能由于包括酸菜在内的多种外源性致癌物的暴露而诱发,从而诱导肿瘤形成.由于DNA 测序费用较高,在经费有限的情况下,本研究仅对p 53基因第五外显子进行了检测和分析,尚不能全面反映p 53基因的突变情况及影响因素,但为进一步研究奠定了基础.【参考文献】[1]Bennett WP ,Hol lstein M C ,M etcalf R A ,W elsh JA ,He A ,ZhuSM ,Kusters I ,Resau JH ,T rump BF ,Lane DP .p 53mutation and protein accumulation during multistage human esophageal Carcino -genesis [J ].Canc er Res ,1992;52(21):6092-6097.[2]Hussain SP ,Harris CC .p 53mutation spectrum and load :The gen -eration of hypotheses linking the exposure of endogenous or exoge -nous carcinogens to human cancer [J ].Mutation Res ,1999;428:23-32.[3]Zheng ZY ,Wang LD ,Shi Stephanie T ,Yang GY ,Xue ZH ,GaoS ,Li YX ,Yang CS .p 53gene mutation in multifocal esophageal precancerous and cancerous les ions in patiens w ith esophageal cancer in highrisk Northern China [J ].Sh ijie Huaren Xiaohua Zaz hi (Wor ld Chin J Digestol ),1999;7(4):280-284.[4]Li LS ,Sun CS ,Zhang XL ,Qiao GB ,Xu DZ ,Han CL ,YangWX ,Chang GS ,Yan M X ,Wang Y ,Zhang H Y .A comparative molecular epidemiological study on esophageal cancer between Xi an and Linzhou [J ].Jiefangjun Yu fang Y ixue Zazhi (Prevet Med PLA ),1999;17(4):255-258.[5]Zhang XL ,Li LS ,Xu DZ ,Sun CS ,Yang WX ,Zhao HZ ,ChangGS ,Yan M X ,Wang Y .A cas e -control study on relationship be -tw een overexpression of p 53protein and esophageal cancer in Linxi -an [J ].Di -si Junyi Da xue X uebao (J Fourth Mil Med Univ ),1997;18(4):330-332.编辑 何扬举收稿日期:2003-04-17; 修回日期:2003-05-01作者简介:何树芸(1952-),女(汉族),陕西省西安市人.副主任药师.Tel .(029)5239845·经验交流· 文章编号:1000-2790(2003)14-1330-01荧光光度法测定复方磺胺甲恶唑片中的磺胺甲恶唑含量何树芸1,冯 云2,郭欢迎1(1陕西省药品检验所,陕西西安710061,2西安市药品检验所,陕西西安710054)【关键词】荧光光度法;复方磺胺甲恶唑片;磺胺甲恶唑【中图号】R927.2 【文献标识码】B 0 引言 复方磺胺甲恶唑片为《中国药典2000年版二部》所载的品种.临床运用较为广泛.其中磺胺甲恶唑的含量测定,药典采用双波长分光光度法,操作费事且要求条件较高.我们利用荧光光度法测定磺胺甲恶唑含量结果令人满意.1 一般资料1.1 仪器和试药 RF -540荧光分光光度计(日本岛津).磺胺甲恶唑对照品由中国药品生物制品鉴定所提供(批号98-2);复方磺胺甲恶唑片样品由陕西省西安妇幼制药厂提供;其他试剂均为分析纯.1.2 对照溶液的配制 取磺胺甲恶唑对照品12.5mg ,精密称定,置100mL 容量瓶中,加0.2mol ·L -1硫酸甲醇液溶解并稀释至刻度.摇匀取出适量,用0.2mol ·L -1硫酸甲醇液稀释成0.5μg ·mL -1即可.1.3 样品溶液的配制 取样品适量,精密称定(相当于含磺胺甲恶唑30mg ),置200m L 量瓶中,加0.2mol ·L -1硫酸甲醇液溶解并稀释至刻度.摇匀、过滤.弃去初滤液,取续滤液适量,用0.2mo l ·L -1硫酸甲醇液稀释成与对照溶液一致的浓度.1.4 标准曲线的制备 精密吸取对照溶液,0,0.2,0.4,0.6,0.8和1.0m L 分别置10m L 量瓶中各加1mol ·L -1的硫酸液和10mL ·L -1邻苯二甲醛液各2mL ,摇匀,在60℃水浴中加热30min .放冷后用甲醇稀释至刻度.摇匀,测定其激发光谱和发射光谱.结果激发波长为365nm ,发射波长425nm .在此条件下,测定其荧光光谱.以对照溶液的浓度为横坐标,荧光强度为纵坐标作回归曲线.回归方程为:Y =16.1+13.8X ,r =0.997(n =3),可见磺胺甲恶唑浓度在0.01～0.05μg ·mL -1范围内浓度与荧光强度的线性关系良好.1.5 精密度实验 精密吸取对照溶液1mL 共4份分别置10mL 量瓶中,照2.3法测定,按测定的荧光强度计算其精密度RSD =1.3%(n =4).其结果表明该方法精密度良好.1.6 回收试验 按处方配制成复方磺胺甲恶唑片的粉末,精密称取一定量,照2.3法测定,计算其回收率.平均回收率为98.5%(n =4),RSD =1.0%.样品其他成分与辅料均无干扰.1.7 供试品的测定 精密吸取样品溶液1mL ,置10mL 量瓶中,照2.3法测定,计算样品的含量(表1).表1 供试品测定结果(n =3)批号荧光法(g /片)药典方法(g /片)20020405010.3760.38120020605020.3860.38920020104010.3790.3902 讨论 用荧光法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑含量与双波长分光光度法测定结果基本一致,说明此方法准确可行.荧光法的灵敏度高,因而对试剂要求也高,故所用的甲醇需加一定量的金属钠,放置4h 后经重蒸馏即可.样品稀释后,在1h 内测定其荧光强度.否则,结果偏低.编辑 黄良田1330第四军医大学学报(J F our th M il M ed Univ )2003;24(14)。
实验六复方磺胺甲恶唑片含量测定
03 实验步骤
仪器与试剂的准备
高效液相色谱仪
用于复方磺胺甲恶唑片的含量测定， 确保仪器性能良好，能够满足实验要 求。
试剂
甲醇、乙腈、磷酸、三乙等，确保 试剂的质量和纯度符合实验要求。
样品处理与溶液制备
样品处理
取复方磺胺甲恶唑片适量，研细，精密称取适量（约相当于磺胺甲恶唑0.25g），置 50mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理使溶解，放 冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。
除高效液相色谱法外，可探索其他适用于复 方磺胺甲恶唑片含量测定的方法，如紫外可 见分光光度法等。
扩大应用范围
本实验方法可应用于其他类似药物制剂的含 量测定，为药物质量控制提供更多技术支持 。
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药理作用
复方磺胺甲恶唑片是一种广谱抗菌药， 主要用于治疗敏感菌引起的感染。
组成
复方磺胺甲恶唑片由磺胺甲恶唑和甲 氧苄啶组成。
高效液相色谱法的基本原理
01
02
03
分离原理
高效液相色谱法基于不同 物质在固定相和流动相之 间的分配平衡差异进行分 离。
检测器
常用的检测器有紫外检测 器、荧光检测器、电化学 检测器等，用于检测分离 后的物质。
03
04
分别精密吸取对照品溶 液与供试品溶液各10μL， 注入液相色谱仪，记录 色谱图。
按外标法以峰面积计算 出供试品中磺胺甲恶唑 （C10H9N3O3S）的含 量。
04 结果分析
实验数据记录与处理
实验数据记录
在实验过程中，我们详细记录了每组样品的称量数据、吸收度数据以及波长数据。这些数据均经过了 严格的核对，以确保准确性。
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验证性试验
实验十八复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲恶唑的含量测定
一、实验目的
1.掌握双波长法的基本原理。
2.掌握复方制剂不经分离直接测定各组分含量的方法。
3.熟悉紫外分光光度仪的使用。
二、仪器与试药
1.仪器
Mettler AL204电子天平 752型紫外－可见分光光度仪
研钵定量滤纸（直径10cm）胖肚移液管规格：25mL
容量瓶规格：25mL 、100mL 刻度移液管规格：10mL
2.试药
复方磺胺甲噁唑片规格：含磺胺甲噁唑（SMZ） 0.4g、甲氧苄啶（TMP） 0.08ｇ
95%乙醇氢氧化钠硫酸
三、实验原理
1.双波长分光光度法
（1）双波长分光光度法消除干扰吸收的基本原理
在干扰组分的吸收光谱上吸收系数相同的两个波长处，若被测组分的吸收系数有显著差异，则可用于消除干扰吸收，即直接测定混合物在此两波长处的吸收度之差值，该差值与被测物浓度成正比，而与干扰物浓度无关。
用数学式表达如下：ΔA（λ1λ2）=A a+b1-A a+b2=A a1-A a2+A b1-A b2
=ΔE.a C a.L+ΔE b.C b.L
若b为干扰物，所选波长λ1λ2处的E b相等，所以ΔE b=0
则ΔA混=ΔE a.C a.L与干扰物浓度无关。
（2）双波长法测定复方磺胺甲噁唑片中SMZ含量的原理
复方磺胺甲噁唑片是含磺胺甲基异噁唑（SMZ）及甲氧苄啶（TMP）的复方制剂。
在0.1mol/L 氢氧化钠液中，SMZ在257nm波长处有一最大吸收峰，TMP在257nm和304nm波长处为等吸收点，而SMZ在这两波长处的吸收度差异大，见下图。
所以测得样品在257nm和304nm波长处的吸收度差值ΔA与SMZ浓度成正比，与TMP浓度无关。
四、实验内容
1.工作曲线的制备
（1）标准贮备液的配制
分别精密称取磺胺甲基异噁唑对照品0.1g ，置100mL 容量瓶中，加入50m L 95%乙醇溶解后，以0.1mol/L 氢氧化钠液稀释至刻度，吸取10mL 置100mL 容量瓶中，以0.1mol/L 氢氧化钠液稀释至刻度，得标准贮备液（100μg /mL ）。
（2）SMZ 的标准曲线及回归方程制作
双波长法：取SMZ 标准贮备液（100μg/mL ）0，3，6，9，12，15mL 置100mL 容量瓶中，以0.1mol/L 氢氧化钠液稀释至刻度。
以0.1mol/L 氢氧化钠液为空白，257nm 为测定波长，304nm 为参比波长，测得这两个波长处的吸收度之差值（ΔA ），以ΔA 为纵坐标，以浓度C 为横坐标，作标准曲线，并用最小二乘法回归得回归方程。
参考标准方程： ΔA=6.467×10-12
C S +0.002（C ：ug/mL ）
r=0.999，线性范围0—15ug/mL
2.复方磺胺甲噁唑片中SMZ 的含量测定
双波长法： 取本品20片，精密称定，研细，精密称取粉末适量（约相当于0.02gSMZ ），置于100mL 容量瓶中，加入95%乙醇50mL ，振摇10分钟，溶解，以0.1mol/LNaOH 液稀释至刻度。
用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，精密量取5mL 续滤液于100mL 容量瓶中，以0.1mol/LNaOH 液稀释至刻度，即得。
测定在257nm 和304nm 波长处的吸收度差值，按工作曲线回归方程系数计算含量。
计算：SMZ 标示量百分含量的计算
参考回归方程：△A=0.06467C+0.002 ml ug C S S /10467.6002
.02-⨯-∆A =
%100)
()(102510100100250%)(6⨯⨯⨯⨯⨯⨯⨯=g W g C g S 标示量称样量标示量平均片重
五、注意事项
测定时应注意，仪器的狭缝应小于1nm ，以保证单色光的纯度。
操作过程中用对照品溶液核对等吸收点波长，且仪器波长的重现性应符合要求。
六、思考题
1.当确定参比溶液时，干扰物如TMP 溶液是否需要精确配制？为什么？
2.在选择实验条件时，是否应考虑赋形剂等辅料的影响？如何进行？
七、参考文献
《药物分析》.杭太俊主编.人民卫生出版社.第七版。