复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量测定

验证性试验

实验十八复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲恶唑的含量测定

一、实验目的

1.掌握双波长法的基本原理。

2.掌握复方制剂不经分离直接测定各组分含量的方法。

3.熟悉紫外分光光度仪的使用。

二、仪器与试药

1.仪器

Mettler AL204电子天平 752型紫外－可见分光光度仪

研钵定量滤纸（直径10cm）胖肚移液管规格：25mL

容量瓶规格：25mL 、100mL 刻度移液管规格：10mL

2.试药

复方磺胺甲噁唑片规格：含磺胺甲噁唑（SMZ） 0.4g、甲氧苄啶（TMP） 0.08ｇ

95%乙醇氢氧化钠硫酸

三、实验原理

1.双波长分光光度法

（1）双波长分光光度法消除干扰吸收的基本原理

在干扰组分的吸收光谱上吸收系数相同的两个波长处，若被测组分的吸收系数有显著差异，则可用于消除干扰吸收，即直接测定混合物在此两波长处的吸收度之差值，该差值与被测物浓度成正比，而与干扰物浓度无关。

用数学式表达如下：ΔA（λ1λ2）=A a+b1-A a+b2=A a1-A a2+A b1-A b2

=ΔE.a C a.L+ΔE b.C b.L

若b为干扰物，所选波长λ1λ2处的E b相等，所以ΔE b=0

则ΔA混=ΔE a.C a.L与干扰物浓度无关。

（2）双波长法测定复方磺胺甲噁唑片中SMZ含量的原理

复方磺胺甲噁唑片是含磺胺甲基异噁唑（SMZ）及甲氧苄啶（TMP）的复方制剂。在0.1mol/L 氢氧化钠液中，SMZ在257nm波长处有一最大吸收峰，TMP在257nm和304nm波长处为等吸收点，而SMZ在这两波长处的吸收度差异大，见下图。所以测得样品在257nm和304nm波长处的吸收度差值ΔA与SMZ浓度成正比，与TMP浓度无关。

四、实验内容

1.工作曲线的制备

（1）标准贮备液的配制

分别精密称取磺胺甲基异噁唑对照品0.1g ，置100mL 容量瓶中，加入50m L 95%乙醇溶解后，以0.1mol/L 氢氧化钠液稀释至刻度，吸取10mL 置100mL 容量瓶中，以0.1mol/L 氢氧化钠液稀释至刻度，得标准贮备液（100μg /mL ）。

（2）SMZ 的标准曲线及回归方程制作

双波长法：取SMZ 标准贮备液（100μg/mL ）0，3，6，9，12，15mL 置100mL 容量瓶中，以0.1mol/L 氢氧化钠液稀释至刻度。以0.1mol/L 氢氧化钠液为空白，257nm 为测定波长，304nm 为参比波长，测得这两个波长处的吸收度之差值（ΔA ），以ΔA 为纵坐标，以浓度C 为横坐标，作标准曲线，并用最小二乘法回归得回归方程。

参考标准方程： ΔA=6.467×10-12

C S +0.002（C ：ug/mL ）

r=0.999，线性范围0—15ug/mL

2.复方磺胺甲噁唑片中SMZ 的含量测定

双波长法： 取本品20片，精密称定，研细，精密称取粉末适量（约相当于0.02gSMZ ），置于100mL 容量瓶中，加入95%乙醇50mL ，振摇10分钟，溶解，以0.1mol/LNaOH 液稀释至刻度。用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，精密量取5mL 续滤液于100mL 容量瓶中，以0.1mol/LNaOH 液稀释至刻度，即得。测定在257nm 和304nm 波长处的吸收度差值，按工作曲线回归方程系数计算含量。

计算：SMZ 标示量百分含量的计算

参考回归方程：△A=0.06467C+0.002 ml ug C S S /10467.6002

.02-⨯-∆A =

%100)

()(102510100100250%)(6⨯⨯⨯⨯⨯⨯⨯=g W g C g S 标示量称样量标示量平均片重

五、注意事项

测定时应注意，仪器的狭缝应小于1nm ，以保证单色光的纯度。操作过程中用对照品溶液核对等吸收点波长，且仪器波长的重现性应符合要求。

六、思考题

1.当确定参比溶液时，干扰物如TMP 溶液是否需要精确配制？为什么？

2.在选择实验条件时，是否应考虑赋形剂等辅料的影响？如何进行？

七、参考文献

《药物分析》.杭太俊主编.人民卫生出版社.第七版。