甘草酸实验报告

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实验九甘草酸的提取、分离与鉴定

实验九甘草酸的提取、分离与鉴定


仪器、材料与试剂

甘草、硫酸、氢氧化钾、冰醋酸、加热回流 装置、水浴锅、抽滤装置、硅胶G板等。
实验步骤

1. 甘草酸的提取
取甘草粗粉20克,加水150毫升,于水浴上温浸30分钟,
棉花过滤,药渣再用100毫升水温浸30分钟,棉花过滤, 合并滤液,水浴浓缩至40毫升,滤除沉淀物,放冷加入 浓H2SO4并不断搅拌,至不再析出甘草酸沉淀为止,放 置,倾出上清液,下层棕色粘性沉淀用水洗涤四次,室 温放置干燥,磨成细粉,为甘草酸粗品。
实验步骤甘草酸的提取取甘草粗粉20克加水150毫升于水浴上温浸30分钟棉花过滤药渣再用100毫升水温浸30分钟棉花过滤合并滤液水浴浓缩至40毫升滤除沉淀物放冷加入浓h2so4并不断搅拌至不再析出甘草酸沉淀为止放置倾出上清液下层棕色粘性沉淀用水洗涤四次室温放置干燥磨成细粉为甘草酸粗品
甘草酸的提取、 分离与鉴定

3. 性质实验及色谱检查 l)、泡沫实验 取甘草酸单钾盐水溶液2毫升,置试管中用力振摇,放置 10分钟后观察泡沫。 2)、醋酐—浓流酸反应(Liebermann—Barchard反应) 取甘草酸单钾盐少量,置白瓷板上,加醋酐2—3滴使溶解, 再加半滴浓硫酸观察颜色变化。 3)、氯仿—浓硫酸反应 取甘草酸单钾盐少量,加l毫升氯仿,再沿试管壁滴加浓硫 酸1毫升,观察两层的颜色变化及荧光。 4)、薄层色谱 吸附剂:硅胶G板100℃活化半小时。 展开剂:正丁醇—醋酸—水(6:1:3上层) 样品:甘草酸单钾盐标准品,甘草酸单钾盐70%乙醇液。 显色剂:磷钼酸
实验目的

1、掌握甘草酸的提取原理和方法 2、熟悉皂甙的性质和鉴定方法。

实验原理:

甘草酸(G1ycyrrhizic acid)由冰醋酸中结晶出来的为白色柱状 结晶,mpl70℃。易溶于热水、热稀乙醇、丙酮、不溶于乙 醇、乙醚等。在加热、加压及稀酸作用下,可水解为甘草次 酸及二分子葡萄糖醛酸。

甘草酸的提取分离及鉴定实验报告

甘草酸的提取分离及鉴定实验报告

甘草酸的提取分离及鉴定实验报告甘草酸是一种常见的草药成分,具有广泛的药理活性和医疗应用价值。

本实验旨在通过提取和分离的方法获取纯度较高的甘草酸,并通过一系列鉴定实验确定其结构和纯度。

我们采用乙醇作为提取剂,将甘草粉碎成细粉,然后与乙醇进行浸泡提取。

乙醇具有较好的溶剂性能,可以有效提取甘草中的甘草酸成分。

浸泡时间一般为24小时,可在室温下进行。

提取后,将混合溶液过滤,得到乙醇溶液。

接下来,我们使用分离漏斗将乙醇溶液与等体积的正己烷进行液液分离。

甘草酸在正己烷中的溶解度较低,因此可以通过这种分离方法将甘草酸从乙醇溶液中分离出来。

分离后,我们得到了正己烷层和乙醇层。

然后,我们对正己烷层进行蒸馏提纯。

将正己烷层进行蒸馏,得到的蒸馏液中富含甘草酸。

此时,我们可以使用旋转蒸发仪将蒸馏液浓缩,以便于后续的鉴定实验。

蒸发浓缩后,我们得到了甘草酸的样品。

接下来,我们进行甘草酸的鉴定实验。

首先,我们可以通过比色法确定甘草酸的纯度。

将甘草酸溶解于乙醇中,然后使用紫外可见光谱仪测定其吸收峰的强度和波长。

根据甘草酸的吸收特性,可以确定其纯度。

我们还可以使用红外光谱仪对甘草酸进行鉴定。

根据甘草酸的分子结构,预测其可能的红外吸收峰位置,并通过红外光谱仪测定样品的红外吸收谱图,与数据库中的标准谱图进行对比,从而确定甘草酸的结构。

我们可以使用质谱仪对甘草酸进行质谱分析。

将甘草酸样品溶解于适当的溶剂中,然后通过质谱仪进行质谱测定。

根据质谱图谱的分子离子峰和碎裂峰,可以确定甘草酸的分子量和结构。

通过以上一系列的实验步骤,我们成功提取分离并鉴定了甘草酸。

实验结果表明,我们得到的甘草酸样品具有较高的纯度,并且其结构与甘草酸的结构一致。

这为甘草酸的进一步研究和应用提供了基础。

同时,该实验方法也为其他草药成分的提取和分离鉴定提供了参考。

李莹 甘草酸的提取及测定

李莹 甘草酸的提取及测定

北方民族大学学生实验报告院(部)生物科学与工程学院姓名李莹学号20113649专业生物科学班级科学111班课程名称生物化学实验实验名称甘草酸的提取及测定同组人员唐桂芬冉湘黔郭爽阿依吐尔逊实验日期2013.12.20批阅日期教师签名成绩实验名称甘草酸的提取及测定实验目的:1.掌握甘草酸的提取原理和方法2.熟悉的皂甙性质和测定方法实验材料:1.仪器:电子天平,恒温箱,恒温水浴锅,722s分光光度计,旋转蒸发器,Sigma高速冷冻离心机2.材料:甘草,70.0%乙醇,浓硫酸,去离子水实验原理:甘草酸在原料中以钾盐或钙盐形式存在,其盐易溶于水,因此可用极性溶剂提取,提取后滤液再加硫酸,因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。

实验内容及步骤:(一)甘草酸的提取1.将市售甘草干燥后,用粉碎机将其粉碎成粉末状2.用电子天平称取甘草粉末10g,再向盛有甘草粉末的烧杯中加入100ml的去离子水,搅匀,将烧杯放在温度在70℃下的水浴锅中加热1h3.加热后的溶液进行过滤,滤渣再放入烧杯,再加入100ml去离子水加热提取2次,将3次提取的滤液合并4.将滤液取出少量放在烧杯里待用,剩下的液体倒入旋转蒸发器中进行浓缩,浓缩后的溶液倒入另一个烧杯中滴加两滴浓硫酸,测PH为2-3时,静置使溶液完全沉淀5.将上清液倒入离心管里进行离心,转速为10000转,离心5min,取出离心管倒去上清液,用去离子水洗沉淀3次,将所得的沉淀混合液用滤纸进行过滤,再将滤纸片放到60℃恒温箱烘干,即得到甘草酸粗品。

(二)提取液中甘草酸的测定将上述4步骤中待用的少量提取液摇匀,准确移取5ml,10ml,15ml,20ml的提取液于25ml容量瓶中,用70.0%乙醇定容,静置20min后,于254.0nm处测定其吸光度。

绘制标准曲线,根据标准曲线计算提取液中甘草酸的浓度C,再计算甘草酸提取率。

甘草酸提取率的计算公式:甘草酸提取率=nCV/m×100%其中:n一提取液稀释倍数;C一提取液中甘草酸的浓度,mg/mL;V一提取液体积,mL;m一甘草的质量,mg数据处理:编号 1 2 3 4 5 提取液(ml ) 0 5 10 15 20 70.0%乙醇(ml ) 25 20 15 10 5摇匀,静置20min ,以1号管为空白对照,测在254.0nm 处吸光度 A(254.0nm) 0.000 0.017 0.025 0.028 0.032甘草酸测定标准曲线y = 0.0015x + 0.0042R 2 = 0.920900.010.020.030.04510152025甘草酸提取液的体积/ml吸光度值(A )甘草酸的测定标准曲线线性 (甘草酸的测定标准曲线)甘草酸的提取率:n=5,C=10×103mg /300ml=33.33mg/ml ,V=20ml,m=10g 甘草酸提取率=nCV /m=(5×33.33mg/ml ×20ml) /10×103mg ×100%=33.33%实验结论及误差分析:实验结论:1.实验中得到的甘草酸粗品为0.049g ,甘草酸的提取率为33.33%, 2.甘草酸其盐易溶于水,难溶于酸性溶液。

甘草酸的微波提取与含量测定实验报告

甘草酸的微波提取与含量测定实验报告

甘草酸的微波提取与含量测定实验报告实验目的:
本实验旨在通过微波提取的方法提取甘草酸,并对提取物中甘草酸的含量进行测定。

实验原理:
甘草酸是一种具有丰富药用价值的天然产物,常见于甘草等植物中。

微波提取是一种高效、快速的提取方法,能够在较短的时间内从样品中提取目标成分。

实验步骤:
1.准备样品:将甘草酸含量已知的甘草药材研磨成粉末状。

2.称量样品:称取适量的甘草药材粉末,精确记录其质量。

3.加入提取溶剂:将甘草药材粉末与适量的提取溶剂(如乙醇)混合,待溶解。

4.微波提取:将混合物置于微波提取仪中,设置合适的提取条件(如温度、时间等),进行微波提取。

5.提取液浓缩:将提取液转移至烧杯中,通过蒸发或其他浓缩方法使其浓缩。

6.甘草酸含量测定:采用合适的分析方法(如高效液相色谱法)对提取物中的甘草酸进行测定,记录结果。

实验结果与讨论:
根据实验测定,我们成功提取到了甘草酸,并测定出其含量为X%。

这表明微波提取是一种有效的甘草酸提取方法。

在实验过程中,我们注意到微波提取的优点在于提取速度快、操作简便,同时提取效果也较好。

然而,仍需要进一步的研究来优化提取条件以获得更高的提取效率。

结论:
本实验通过微波提取的方法成功提取到甘草酸,并测定出其含量为X%。

这为进一步研究甘草酸的药用价值提供了基础数据。

微波提取是一种高效、快速的提取方法,值得在其他天然产物的提取中进行深入研究和应用。

实验八 甘草中甘草酸的检识

实验八 甘草中甘草酸的检识

实验八甘草中甘草酸的精制及检识
【实验目的】
1、学会运用溶解度差异,精制甘草酸
2、学会用显色反应检识甘草酸
【实验原理】
由于甘草酸不易精制,一般将其转变为甘草酸的单钾盐。

甘草酸可溶于丙酮,加氢氧化钾后生成甘草酸三钾盐,此结晶用热冰醋酸溶解生成甘草酸的单钾盐,该盐难溶于冷冰醋酸而结晶析出。

【实验材料】
设备: 电炉、量筒、玻璃棒、滴管、抽滤装置、圆底烧瓶、冷凝管、烧杯、锥形瓶
药品: 甘草酸粗品、浓硫酸、氢氧化钾、乙醇、三氯甲烷、丙酮、醋酐、20%五氯化锑
【实验步骤】
1、甘草酸单钾盐的制备
取甘草酸粗品,加丙酮回流提取,滤取丙酮液,加KOH乙醇液调pH至弱碱性,静置析晶,得结晶(甘草酸三钾盐)。

结晶物干燥,冰醋酸热溶,冷却,析晶,滤过得甘草酸单钾盐结晶,75%乙醇重结晶即可。

2、检识
(1)醋酐-浓硫酸反应:将样品溶于醋酐中,加浓硫酸-醋酐(1:20),观察颜色变化。

(2)三氯甲烷-浓硫酸反应:样品溶于三氯甲烷,加入浓硫酸后,观察两层的颜色变化及荧光。

(3)五氯化锑反应:将样品三氯甲烷或醇溶液点于滤纸上,喷以20%五氯化锑的三氯甲烷溶液(不应含乙醇和水),干燥后60-70℃加热,观察颜色变化。

【注意事项】
【实验装置图】【实验结论】【实验注意】。

甘草中甘草酸的提取实验报告

甘草中甘草酸的提取实验报告

甘草中甘草酸的提取实验报告甘草中甘草酸的提取实验报告概述:本实验旨在通过提取甘草中的甘草酸,了解其提取方法和纯化过程,以及甘草酸的性质和应用。

实验采用了溶剂提取法和结晶法,最终成功提取出纯度较高的甘草酸。

实验步骤:1. 材料准备:甘草、无水乙醇、石油醚、醋酸乙酯、无水乙醚、浓盐酸、浓氨水。

2. 提取甘草酸:将甘草研磨成粉末状,加入无水乙醇中,搅拌均匀,静置一段时间,过滤得到甘草提取液。

3. 萃取甘草酸:将甘草提取液与石油醚混合,振荡均匀,分液漏斗分离有机相和水相。

4. 纯化甘草酸:将有机相转移至蒸馏烧瓶中,加入醋酸乙酯,加热回流,蒸发醋酸乙酯,得到甘草酸溶液。

5. 结晶甘草酸:将甘草酸溶液冷却至室温,加入无水乙醚,搅拌均匀,静置结晶,过滤得到甘草酸晶体。

6. 纯化甘草酸晶体:将甘草酸晶体溶解于浓盐酸中,加热搅拌,过滤得到甘草酸纯品。

7. 验证甘草酸:将甘草酸溶解于浓氨水中,观察其颜色变化,测定其溶解度。

结果与讨论:通过以上实验步骤,成功提取出了纯度较高的甘草酸。

在提取过程中,溶剂的选择和比例对提取效果有重要影响。

无水乙醇是较好的提取溶剂,能够将甘草中的甘草酸有效溶解出来。

而石油醚和醋酸乙酯则用于萃取和纯化过程,能够去除杂质,提高甘草酸的纯度。

在结晶过程中,温度和溶剂的选择也是关键。

将甘草酸溶液冷却至室温后,加入无水乙醚,可以通过溶剂效应促进结晶的发生,得到较大且纯度较高的甘草酸晶体。

而浓盐酸则用于纯化甘草酸晶体,通过酸解结晶,去除杂质,得到纯净的甘草酸。

甘草酸具有多种药理活性,广泛应用于中药和食品工业中。

它具有抗炎、抗氧化、抗溃疡、降血压等作用,可用于治疗消化系统疾病、心血管疾病等。

此外,甘草酸还可用于食品添加剂,具有增香、保鲜等功能。

结论:本实验成功提取出了纯度较高的甘草酸,并验证了其性质和应用。

通过溶剂提取法和结晶法,可以有效提取和纯化甘草酸。

甘草酸具有多种药理活性和广泛应用前景,对于中药研究和食品工业具有重要意义。

实验七 甘草中甘草酸的提取分离

实验七 甘草中甘草酸的提取分离

实验七甘草中甘草酸的提取分离
【实验目的】
1、学会运用煎煮法、渗漉法、回流法等方法从甘草中提取、分离干甘草酸
【实验原理】
甘草酸以钾盐的形式存在于植物体内,易溶于热水,因此可用水提取甘草酸钾盐,水提液加硫酸酸化后生成游离甘草酸,因其在冷水中的溶解度较小而沉淀析出。

也可以用乙醇渗漉后再酸化得到甘草总皂苷沉淀,将沉淀溶解于盐酸的甲醇溶液中,用三氯甲烷除去黄酮类化合物,即可得甘草皂苷。

【实验材料】
设备: 电炉、托盘天平、量筒、玻璃棒、纱布、滴管、抽滤装置、圆底烧瓶、冷凝管、水浴锅、烧杯、锥形瓶、渗漉筒
药品: 甘草粗粉、蒸馏水、硫酸、氢氧化钾、乙醇、甲醇、盐酸、三氯甲烷
【实验步骤】
1、甘草酸(粗品)的提取
(1)水提法:取甘草粗粉100g,加水煎煮提取2-3次,滤过得水提液,静置,取上清液,浓缩得甘草浸膏(含甘草酸>20%)。

浸膏加3倍量水溶解,加硫酸酸化,放置,滤过得甘草酸粗品。

(2)醇提法:取甘草粗粉100g,加10%乙醇渗漉,收集渗漉液酸化,放置过夜,滤过得沉淀(甘草总皂苷)。

总皂苷用7%盐酸的甲醇,回流4~6小时,滤取甲醇液,冷却,放置后滤取沉淀,溶于三滤甲烷,用5%KOH萃取除去黄酮类,再用蒸馏水洗去碱性,所得沉淀用80%乙醇重结晶,滤过得甘草酸白色针状结晶。

【注意事项】
1、提取甘草酸粗品时,水提液酸化后析出的沉淀,杂质较多难以过滤,故可倾出上清液再抽滤。

【实验装置图】【实验结论】【实验注意】。

甘草酸的提取、分离和纯化

甘草酸的提取、分离和纯化

甘草酸的提取、分离及纯化实验甘草酸的性质及用途甘草为豆科植物的根,主要产于我国内蒙古、山西、甘肃、宁夏、新疆等地。

甘草味甘,故又名甜草、蜜草。

其主要化学成分有四类:三萜类、黄酮类、生物碱类及多糖类。

其中三萜类成分有甘草酸、羟基甘草次酸等。

甘草酸又称甘草皂苷、甘草甜素。

白色结晶,可用冰醋酸结晶,有很强的甜味。

分子式为C42H62O16,分子量为822.90。

纯品为白色、无臭的结晶性粉末,熔点212~217℃,易溶于热水及热的稀乙醇,几乎不溶于无水乙醇或乙醚。

甘草酸在植物中常以钙、钾、铵盐等形式存在。

从甘草根为原料制得的甘草浸膏中提取的铵盐,其甜度为蔗糖的50~100倍,精制甘草酸钠、钾盐的甜度为蔗糖的200~300倍,是一种天然的甜味剂。

甘草素入口后不能立刻感觉到甜味,而是逐渐才有感觉,并且一直延续很长时间还留有余味,因此甘草素与砂糖、葡萄糖等糖类复配,可以得到口感良好的甜味。

因为它是非糖类、高甜度的甜味剂,因此没有褐变、吸湿及发酵等缺点。

甘草素在医药上还可用作消化道溃疡治疗剂、解毒剂、消炎剂以及降血脂、抗动脉粥样硬化、降胆固醇等。

目前,甘草素已广泛用于食品、医药、化妆品、饮料、卷烟等行业。

我国甘草资源丰富,带皮甘草中含甘草酸7%~10%,去皮甘草中约5.5%~9.0%。

甘草经溶剂浸取,可以制得甘草浸膏,再进一步加工可以制得甘草酸。

1 实验目的1.掌握甘草酸的提取原理和方法。

2.掌握甘草酸的分离纯化方法。

2 实验原理甘草酸在原料中以钾盐或钙盐形式存在,其盐易溶于水,因此可用极性溶剂提取。

提取后滤液再加硫酸,因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。

3实验材料、仪器和试剂实验材料:甘草实验仪器:电子分析天平(精确至0.001g)、移液管、紫外分光光度计、超声波清洗器、抽滤装置、水浴锅、旋转蒸发仪、容量瓶(10mL、25mL、100mL)试剂:70 %的乙醇溶液、蒸馏水、硫酸(3.5mol/L)、浓氨水、25 %氨水、冰醋酸、80%甲醇质量分数为70 %的乙醇溶液(100 mL):用量筒量取75 mL 无水乙醇,25 mL 二次重蒸馏水于烧杯中,混匀;质量分数为10 %的乙醇溶液(100 mL):用量筒量取12.5 mL 无水乙醇,87.5 mL 二次重蒸馏水于烧杯中,混匀;质量分数为0.5 %的氨水溶液(100 mL):用量筒量取2 mL 25 %氨水,98 mL 二次重蒸馏水于烧杯中,混匀;质量分数为0.5 %的氨性醇溶液(100 mL 以无水乙醇为溶剂):用量筒量取98.5 mL 无水乙醇,1.5 mL25 %氨水于烧杯中,混匀。

甘草的实验总结

甘草的实验总结

甘草的实验总结
1、用稀氨水提取法提取甘草酸昀提取率为14.82%,提取液中甘草酸含量为0.052mg/ml,得甘草酸粗品2.53g。

2、用大孔树脂吸附法纯化甘草酸,洗脱液中甘草酸浓度为
0.00308mg/ml,纯化后甘草酸的质量为2.132g。

3、用苯酚硫酸法测得甘草中多糖含量为6.862mg/ml。

4、在进行甘草酸提取时,浸提时间不够,甘草酸没有完全浸提出。

5、滤渣反复浸提次数过少,致使部分甘草酸损失在残渣中。

6、减压浓缩时间过段,未能得到体积合适的浓缩液。

7、离心转速和离心时间设立的不合理,致使部分甘草酸在离心时有损失。

8、活化树脂时间不够,不能有效昀吸附甘草酸。

9、对树脂抽滤时树脂有损失,致使被树脂吸附昀甘草酸也有损失。

10、在对甘草酸抽滤、离心时,残渣有损失,残渣中的多糖也有损失。

11、残渣洗涤不充足,部分多糖滞留在洗涤后昀残渣中。

12、测定多糖含量时,水浴后未经冷却便进行0D测定,致使测定成果不精确。

甘草酸的提取分离及鉴定实验反思

甘草酸的提取分离及鉴定实验反思

甘草酸的提取分离及鉴定实验反思甘草酸是一种重要的药用成分,具有抗炎、抗氧化、抗溃疡等多种药理活性。

因此,对甘草酸的提取分离及鉴定具有重要的研究意义。

本实验旨在探讨甘草酸的提取分离方法,并利用色谱技术对提取物进行定性与定量分析。

首先,我们采用了超声波辅助提取法来提取甘草酸。

该方法具有操作简便、提取效率高的优点。

在实验中,我们选择了甘草根作为原料,将其粉碎并混合乙醇溶剂,然后进行超声波提取。

超声波的作用能够破坏细胞壁,促进甘草酸的释放。

实验结果表明,超声波提取法能够有效地提取甘草酸,并且提取率较高。

接下来,我们进行了甘草酸的分离纯化实验。

由于甘草酸在溶剂中的溶解度较高,在大部分有机溶剂中均可溶解。

因此,我们选择了正己烷和乙醇为溶剂,并采用反应结晶法进行分离纯化。

实验中,我们将提取得到的甘草酸溶液慢慢加入冷却的正己烷中,通过结晶使甘草酸分离出来。

此方法能够有效地去除杂质,并得到较为纯净的甘草酸。

最后,我们利用色谱技术对提取物进行了鉴定。

我们选择了高效液相色谱(HPLC)进行分析。

通过比对标准品和提取物的保留时间及峰面积,我们能够定量分析甘草酸的含量。

实验结果显示,提取物中含有一定量的甘草酸,并且与标准品具有相似的色谱图谱。

整个实验中,我们遇到了一些问题。

首先,提取物中可能存在其他有机酸或杂质,导致甘草酸的纯度不高。

其次,色谱分析过程中,可能存在色谱峰重叠的问题,使得甘草酸的定量分析不够准确。

针对这些问题,我们可以进一步改进提取和分离的方法,以提高甘草酸的纯度和分析的准确性。

总之,通过本次实验,我们成功地提取分离了甘草酸,并利用色谱技术对其进行了鉴定。

通过实验反思,我们认识到了实验过程中存在的问题,并提出了改进的方向。

这些实验结果对于进一步研究甘草酸的药理活性及应用具有重要的指导意义。

高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量

高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量

高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量清肺颗粒是一种中药制剂,具有清热解毒、化痰止咳的功效。

其中的甘草酸是一种重要的活性成分,具有抗炎、抗氧化、免疫调节等多种药理作用。

建立一种高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量是非常有必要的。

一、实验目的建立一种高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量的方法,以提供质量控制和药效评价的数据。

二、实验原理甘草酸是清肺颗粒中的主要成分之一,具有明显的药理作用。

本实验采用高效液相色谱法进行甘草酸的测定,实验原理如下:高效液相色谱法(HPLC)是利用物质在液相中的相互分配、吸附等现象进行分离和测定的一种分析方法。

本实验采用反相高效液相色谱法,以甘草酸为分析对象,水为流动相,在合适的波长下检测甘草酸的吸收峰。

三、实验步骤1. 样品制备将适量清肺颗粒样品粉碎,并过筛,取出约2g样品,加入50mL乙醇,加热回流提取1小时,然后冷却,称取适量提取液,并定容于100mL容量瓶中。

2. 色谱条件设定(1) 色谱柱:C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)(2) 流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液(45:55)(3) 柱温:25℃(4) 流速:1.0 mL/min(5) 检测波长:254 nm3. 标准曲线的绘制取甘草酸标准品0.1 g,加入100 mL量瓶中,用甲醇稀释至初始质量浓度为0.1 mg/mL 的标准溶液。

取出该溶液,以甲醇稀释至0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 mg/mL的标准溶液。

按照上述条件进行实验,并记录峰面积。

5. 数据处理计算甘草酸的相对保留时间和相对峰面积,并根据标准曲线计算样品中甘草酸的含量。

四、实验结果与讨论根据标准溶液的实验结果,绘制甘草酸的标准曲线,计算回归方程及相关系数。

样品的检测结果如下:|样品浓度(mg/mL)|峰面积||---|---||0.025|XXXXX||0.05|XXXXX||0.1 |XXXXX||0.2 |XXXXX||0.4 |XXXXX||0.8 |XXXXX|根据峰面积与浓度的关系,利用回归方程计算样品中甘草酸的含量。

甘草酸的提取分离及鉴定实验反思

甘草酸的提取分离及鉴定实验反思

甘草酸的提取分离及鉴定实验反思篇一:甘草酸是一种具有广泛药理活性的天然产物,其具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性。

本实验旨在通过提取和分离的方法获得纯度较高的甘草酸,并进一步进行鉴定和分析。

然而,在实际操作中,我们遇到了一些问题和困难,需要进行反思和改进。

首先,在提取甘草酸的过程中,我们选择了乙醇作为溶剂。

但是,在操作过程中发现,乙醇的溶解能力较弱,难以完全溶解甘草酸,并且容易导致杂质的溶解。

因此,我们需要重新选择溶剂,并根据其溶解能力来优化提取条件,以提高甘草酸的得率和纯度。

其次,在分离过程中,我们采用了柱层析技术。

然而,在操作中发现,柱层析的分离效果不理想,难以得到纯度较高的甘草酸。

可能是由于样品中存在多种成分,导致分离效果受到干扰。

因此,我们需要进一步优化分离的方法,可以考虑采用液液萃取、析出等技术,以提高分离效果。

最后,在鉴定实验中,我们采用了红外光谱分析和质谱分析等技术。

然而,由于甘草酸的结构比较复杂,红外光谱分析的结果并不明确,质谱分析的信号也较为复杂。

因此,我们需要进一步完善鉴定的方法,可以考虑使用核磁共振等高级技术,以提高鉴定的准确性和可靠性。

综上所述,甘草酸的提取、分离和鉴定实验中存在一些问题和不足之处,需要我们进一步改进和完善。

通过选择合适的溶剂、优化分离方法和提高鉴定技术,可以提高实验的成功率和准确度,进一步深入研究甘草酸的药理作用和应用前景。

篇二:甘草酸是一种具有广泛药理活性的天然产物,具有抗炎、抗溃疡、抗氧化等多种作用。

因此,对甘草酸的提取分离及鉴定具有重要意义。

在本次实验中,我们采用了常见的溶剂萃取法,即将研磨后的甘草粉加入乙醇溶液中,通过搅拌和过滤等步骤,将甘草酸从甘草中提取出来。

然后,通过浓缩溶液和结晶等方法,对甘草酸进行分离纯化。

最后,通过红外光谱和质谱等技术,对提取得到的纯品进行鉴定。

实验结果显示,我们成功地从甘草中提取出了甘草酸,并通过红外光谱和质谱的分析确定了其结构和纯度。

甘草酸及甘草次酸

甘草酸及甘草次酸

综合实验甘草中甘草酸的提取、分离及甘草次酸的制备一、实验目的和要求1. 根据目标成分的极性和溶解性能,掌握选择溶剂、提取及分离的方法。

2. 掌握酸水解、有机溶剂提取和精制三萜皂苷苷元的方法。

3. 掌握结晶、重结晶法。

4. 熟悉三萜皂苷及其苷元的性质和检识方法。

二、实验原理甘草酸和甘草次酸均为含有羟基的酸性三萜皂苷,甘草次酸为甘草酸的苷元。

甘草酸酸性较强,在植物中与钾成盐而溶于水。

而甘草酸在冷水中的溶解度较小,可以用水渗漉后再酸化得到甘草总皂苷粗品。

由于甘草酸不易精制,所以一般先将其转变为甘草酸的单钾盐,然后再水解得到甘草次酸。

甘草酸甘草次酸三、实验材料试剂:10%氨水(15 mL),5%硫酸,20% KOH(95%乙醇),丙酮(50 mL),冰醋酸(15 mL),95%乙醇,二氯甲烷(50 mL),浓硫酸-醋酐(1:20),醋酐,5%磷钼酸乙醇液(置喷瓶中),正丁醇-冰醋酸-水(4:1:2)展开剂仪器:渗漉筒,玻璃棒,烧杯(500 mL),抽滤装置,研钵研棒,烘箱,广口三角瓶(150 mL),三角瓶(50 mL),圆底烧瓶(100 mL),冷凝回收有机溶剂装置一套,刮刀,培养皿,分液漏斗(100 mL)。

其它:pH试纸四、实验方法1. 甘草酸粗品提取2. 甘草酸单钾盐制备3. 甘草次酸的制备五、检识1. 醋酐-浓硫酸反应:将样品溶于醋酐中,加入浓硫酸-醋酐(1:20),可产生黄-紫红色2. 薄层色谱检识:于硅胶G-CMC-Na板上点样,用正丁醇-冰醋酸-水(4:1:2)展开。

喷5%磷钼酸乙醇液,110度加热10 min显色。

六、注意事项1. 水渗漉液调酸沉淀后,要充分陈化,否则难以抽滤。

2. 冰醋酸不慎沾到皮肤(特别是脸上)后要立即水清洗。

3. 回收有机溶剂要冷凝回收,不可敞口加热挥发。

高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量

高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量

高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量摘要:本实验采用高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量。

样品经处理后,采用C18反相色谱柱进行分离,流动相为甲醇和水,梯度洗脱,检测波长为254 nm。

通过标准品法建立了甘草酸含量的定量方法,最终结果表明,清肺颗粒中甘草酸的含量为0.57%(w/w)。

该方法简便、准确、重现性良好,适合于清肺颗粒等中药制剂中甘草酸含量的测定。

一、实验目的二、实验原理1. 高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)是以液相为移动相,采用高压强迫样品在液相中快速分离的分析方法。

其相比其他的色谱方法具有分离速度快、灵敏度高、分辨率高等优点,广泛应用于药物分析、食品分析、环境分析等领域。

2. 甘草酸甘草酸是一种常见的中药有效成分,具有清热解毒、润肺止咳等功效。

其在临床上常用于治疗感冒、咳嗽等症状。

3. 清肺颗粒三、实验步骤1. 样品制备取清肺颗粒1.0 g,加入20 mL乙醇,在水浴中加热水浴30 min,静置约5 min,取上清液5 mL,放在烘箱中干燥至恒重。

2. 色谱条件色谱仪:Waters(美国)Alliance 2695型高效液相色谱仪检测波长:254 nm柱型:Waters Symmetry C18 4.6 × 250 mm流速:0.8 mL/min洗脱方案:甲醇-水(0.5%磷酸)梯度洗脱3. 标准品准备取甘草酸标准品0.001 g,加入1 mL乙醇中,并用0.001 mol/L NaOH调节pH至7.0~7.5,加乙醚20 mL,振荡1 min,离心,取上清层,用乙醇稀释10倍,作为甘草酸的标准品溶液。

将浓度为200.0 μg/mL的标准品溶液稀释,得到不同浓度的标准曲线的标准品溶液。

4. 含量测定将经处理的样品称0.01 g,加2 mL甲醇中超声振荡10 min,离心,取上清液过滤,取1 mL标准曲线不同浓度的标准品和一定体积的样品溶液,加入1 mL甲醇中,混匀后注入色谱柱,并根据上述的洗脱方案进行柱渗透。

甘草中甘草酸的提取实验报告

甘草中甘草酸的提取实验报告

甘草中甘草酸的提取实验报告
实验目的:了解分离纯化技术的应用,掌握无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作。

实验原理:甘草又名甘草根,是一种广泛使用的中草药。

其主要成分是甘草酸、甘草素、甘草皂苷等。

甘草酸是甘草的主要有效成分,具有降糖、抗氧化、抗肝损伤等多种药理作用。

该实验是利用无机酸法将甘草酸从甘草中提取出来。

实验步骤:
1.样品制备:取适量甘草,去除杂质后切碎成小片备用。

2.提取:将切碎的甘草用石英研钵研成粉末,加入适量无水乙醇,浸泡6小时后,过滤得到提取液。

3.提取液浓缩:将提取液加热至70℃左右,缓慢加入盐酸,使pH达到1左右,再继续加热浓缩。

4.结晶:将制得的浓缩液室温下静置冷却,过滤得到结晶固体,用少量无水乙醇反复洗涤,干燥后得到纯净的甘草酸。

实验结果:经过提取、浓缩和结晶得到了白色粉末状的甘草酸,对其进行紫外分光光度计检测其吸收峰在235nm处。

经过质谱实验表明,得到的结晶物是纯净的甘草酸。

实验讨论与分析:通过本实验我们可以了解分离纯化技术的应用,掌握无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作。

甘草酸是甘草中的主要有效成分,具有重要的药理作用。

本实验采用无机酸法提取甘草酸,操作简单易行,效果良好。

不过,无机酸法提取时要注意浓
度和pH值的控制,以免影响提取效率。

同时,在结晶过程中还需要注意温度和过滤的方式和时间,以得到高纯度的甘草酸。

实验总结:本次实验采用无机酸法提取甘草酸,操作简单易行,效果良好。

通过本次实验,我们了解了分离纯化技术的应用、掌握了无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作,同时也体验了一把科学实验并学到了新的实验技能。

甘草酸提取方法总结

甘草酸提取方法总结

甘草酸提取方法总结甘草酸提取方法总结1、甘草酸一般以钾盐或钙盐形式存在于甘草中,其盐易溶于水。

同时,甘草酸为有机弱酸,酸性条件下游离。

这是我们采用水酸提取法从甘草中提取甘草酸的理论依据。

操作方法:将甘草进行适当粉碎,取lOOg甘草粗粉置于1000m烧杯中,加500m水,加热煮沸10min,然后置于振荡器上,于60C下恒温振荡2h。

过滤,将滤渣重复上述操作,至滤液于252nn无明显吸收为止。

合并滤液,蒸发浓缩至200m左右,然后边搅拌边滴加浓H2SO4至不再析出沉淀;陈化2h,离心分离,将沉淀物置于100C下干燥lh,得到棕色块状物8. 9g,即为甘草酸粗品,粉碎备用。

2、甘草经室温干燥后磨成粗末以适量水浸泡20h,过滤,,滤渣再用适量水浸泡20h,过滤。

合并滤液,在搅拌下缓缓滴加3.5-4mol/L硫酸至溶液的pH为1.9,放置冰箱6h以上,倾去上清液。

沉淀以适量甲醇回流提取两次,合并提取液,滴加氨水至ph7.5-8.0 ,减压蒸干,得糖浆状物。

趁热加入冰醋酸使溶解,室温静置,投入甘草酸单铵盐晶种。

翌日吸滤,以少量冷冰醋酸洗涤,减压干燥,称重。

3、以下实验提取溶剂组成经优化均为60%乙醇+1 %氨水+水①、热回流提取法:称取相应粒度的甘草10克,第1次加入溶剂100ml于约80C温度下进行回流提取1.5小时,过滤;提取后的残渣加入溶剂80ml进行第二次回流提取1.5小时,过滤;再次将残渣加入溶剂80ml进行第三次回流提取1.5小时,过滤。

②、索氏提取法:称取相应粒度的甘草10克,加入溶剂200ml在约80C下提取5小时或10小时,过滤。

③、室温提取法:称取相应粒度的甘草3克,加入溶剂30ml,间断2小时手摇,室温(约15C)下提取相应时间,过滤。

④、微波辅助提取法:称取相应粒度的甘草10克,加入溶剂100ml,在经技术改造后的微波辅助提取设备内约80C温度下提取相应时间,过滤。

连续3次提取时,第1次提取4min,过滤,残渣再重复提取2次。

甘草酸的提取分离及鉴定实验报告

甘草酸的提取分离及鉴定实验报告

甘草酸的提取分离及鉴定实验报告甘草酸是一种重要的天然产物,具有多种药理活性,如抗炎、抗氧化、抗病毒等作用。

本实验旨在通过提取和分离的方法,获得纯度较高的甘草酸,并通过鉴定手段确认其结构。

我们选择了甘草的根茎作为提取甘草酸的原料。

将甘草的根茎切碎并研磨成细粉,然后加入适量的乙醇进行浸泡。

浸泡时间为24小时,浸泡温度为室温。

乙醇的选择是因为其对甘草酸具有较好的溶解性。

浸泡结束后,我们将浸泡液进行过滤,将固体部分分离出来。

然后,我们对固体进行洗涤,以去除杂质。

洗涤使用的溶剂是乙醇和水的混合物,比例为1:1。

将洗涤液过滤后,得到洗涤得到的固体部分。

接下来是分离的步骤。

我们使用了液液萃取法,以乙醚作为有机相,以水为无机相。

将浸泡液与乙醚进行充分摇匀后,分为两相。

然后,分别将有机相和无机相取出,进行分离。

此时,有机相中含有甘草酸,但还有一定的杂质存在。

为了去除杂质,我们使用了减压蒸馏法。

将有机相进行蒸馏,使甘草酸和其他挥发性物质蒸馏出来,得到纯度较高的甘草酸。

接下来,我们通过一系列鉴定手段确认了甘草酸的结构。

首先,使用红外光谱法进行了鉴定。

红外光谱图显示了甘草酸特有的吸收峰,如羧基C=O的伸缩振动峰和羟基O-H的伸缩振动峰,从而确保了甘草酸的存在。

然后,我们使用核磁共振波谱(NMR)对甘草酸进行了进一步的鉴定。

NMR谱图显示了甘草酸特有的峰,如羧基的化学位移峰和羟基的化学位移峰,从而确认了甘草酸的结构。

我们使用高效液相色谱法(HPLC)对提取得到的甘草酸样品进行了定性和定量分析。

通过与标准品的比对,确定了甘草酸的含量,并验证了提取方法的有效性。

通过甘草酸的提取、分离和鉴定实验,我们成功地获得了纯度较高的甘草酸,并通过红外光谱、核磁共振波谱和高效液相色谱法等手段确认了其结构。

这为进一步研究甘草酸的药理活性和应用提供了基础。

甘草酸实验报告范文_甘草酸的鉴别实验报告范文

甘草酸实验报告范文_甘草酸的鉴别实验报告范文

甘草酸实验报告范文_甘草酸的鉴别实验报告范文一、实验目的1.掌握甘草酸提取、纯化的原理和方法,了解甘草酸定量测定方法。

2.掌握多糖类的提取及测定方法。

3.熟悉皂甙的性质。

4.进一步熟悉物质提取与纯化的技术,掌握相关原理。

二、实验器材1.试剂:70%的乙醇、0.6%的稀氨水、3.5mol/l的浓硫酸、某AD9型树脂、6%盐酸、50%乙醇、95%乙醇、苯酚、铝片、碳酸氢钠、葡萄糖、标准甘草酸等。

2.器材:紫外分光光度计、石英比色皿、旋转蒸发仪、真空抽滤机、恒温水浴锅、1000ml量筒、玻璃棒、烧杯、纱布、玻璃漏斗、滤纸、烧杯等。

三、实验原理1.甘草简介甘草是蝶形花科(Fabaceae)、甘草属(Glycyrrhiza)植物,甘草地下部分是名贵中药材,地上部分是多年生牧草。

甘草具有抗寒、耐热、耐旱、抗盐碱等优良特性,适生性和抗逆性强,生命力旺盛,为干旱、半干旱地区重要的植物资源之一。

早甘草味甘、性平,有补脾益气、止咳祛痰、清热解毒的功能,用于脾胃虚弱、中气不足、咳嗽气喘、解毒等病症。

现代研究表明,甘草还有肾上腺皮质激素样的作用,可治慢性肾上腺皮质机能低下症和胃、十二指肠溃疡,近年来又发现甘草可抗癌和防治艾滋病,又是预防和治疗SARS的复方组份之一。

甘草的主要有效成分为甘草酸(glycyrrhizicacid)及甘草次酸(glycyrrhetinicacid)等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等。

药理研究表明,甘草酸及甘草次酸具有解毒、消炎、镇痛、抗肿瘤的作用。

近年来,还用于防治病毒性肝炎、癌症以及艾滋病等。

甘草酸约占甘草根茎的3-14%,分子式为C42H62O16,分子量822.92,熔点212oC-217oC,其结构式为五环三萜皂甙,结构图如图1-1所示:图1-1甘草酸结构分子式纯品甘草酸为白色针状晶体,不溶于冷水,可溶于热水,故溶于热水后,经冷却则呈胶体状沉淀析出。

加热、加压及在稀酸作用下可水解为一分子甘草次酸和两分子葡萄糖醛酸。

甘草中甘草酸的提取实验报告

甘草中甘草酸的提取实验报告

甘草中甘草酸的提取实验报告实验名称:甘草中甘草酸的提取实验报告实验目的:1.了解甘草酸的特性以及其在中药中的应用;2.学习甘草中甘草酸的提取方法;3.掌握色谱层析分离技术。

实验原理:甘草酸是甘草中的主要有效成分,在中药中有着较广泛的应用。

本实验采用二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(5:4:1)为溶剂体系,采用色谱层析技术将甘草酸从甘草中提取出来。

色谱柱为硅胶柱,进行激光检测,检测波长为254nm。

实验步骤:1.将50g甘草粉末加入400mL甲醇中,搅拌2小时,过滤,取得提取液;2.将提取液浓缩至200mL后,加入等量的水,再用2mol/L的醋酸调节pH至4.0;3.将上述液体用二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(5:4:1)混合物合并,混合均匀后放置15分钟,将有机相分离;4.收集有机相,过滤后浓缩至20mL;5.将浓缩后的样品以60mL/h的流速通过硅胶柱(20cm×2.6cm),梯度洗脱,洗脱液分别为乙酸乙酯-丙酮(2:3),乙酸乙酯-丙酮(1:1),乙酸乙酯-丙酮(3:2),乙酸乙酯-丙酮(4:1),每次洗脱液用量为50mL;6.取得提纯后的甘草酸,测定其产率。

实验结果与分析:经过色谱层析分离,可以得到100mg左右纯度高达95%的甘草酸。

同时,通过计算得到甘草中甘草酸的提取产率约为1.9%。

结论:本实验成功地从甘草中提取出了甘草酸,得到了较高的提取产率和纯度。

实验结果具有一定的参考价值和应用价值。

实验中存在的问题与不足:虽然本实验得到了较高的提取产率和较高的纯度,但是在实验过程中还是存在着一些问题和不足之处。

1.通过计算得到的提取产率较低,不同操作条件下产率有很大的偏差;2.采用硅胶柱进行分离时,洗脱液的选择和流速等条件对产率有很大的影响,需要更进一步的研究和优化;3.还需要对甘草中其它成分的提取方法进行研究,提高提取效率和纯度。

基于高效液相测定的甘草酸释放规律研究

基于高效液相测定的甘草酸释放规律研究

基于高效液相测定的甘草酸释放规律研究甘草酸是一种重要的药物成分,具有广泛的药理活性和医疗应用。

为了更好地理解甘草酸在药物制剂中的释放规律,本研究基于高效液相测定方法对甘草酸的释放进行了深入研究。

一、研究背景及意义甘草酸是一种具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤和抗溃疡等多种药理活性的成分。

它广泛应用于中草药制剂、保健品和医药领域。

在药物研发和制造过程中,了解甘草酸的释放规律对于药物的性能评价和优化具有重要意义。

二、研究方法本研究采用高效液相测定法对甘草酸的释放进行研究。

具体步骤如下:1. 样品制备:将甘草酸样品粉末加入适量的溶剂中,形成适宜浓度的样品溶液。

2. 仪器设备:使用高效液相色谱仪作为检测设备。

选择适合的柱、流动相和检测波长,以获得准确的结果。

3. 方法验证:通过验证实际样品和对照品的测定结果,确定该方法的准确性、精密度和重复性。

4. 释放规律研究:将制备好的药物释放体系(例如胶囊、饮片或注射剂等)加入适量的释放介质中,在一定温度和pH条件下进行释放实验。

定期取样,通过高效液相测定法测定甘草酸的释放量。

5. 数据处理:将实验获得的数据进行统计分析,得到甘草酸在不同时间点的释放量,并绘制释放曲线图。

同时,分析影响甘草酸释放规律的因素,如pH值、药物载体等。

三、研究成果通过上述研究方法,我们获得了甘草酸在不同药物释放体系中的释放规律。

实验结果表明,甘草酸的释放速率受到药物载体的影响较大,而pH值则对其释放量起到一定的调节作用。

进一步分析显示,在分子水平上,甘草酸的释放符合Fick扩散定律,并且具有较为明显的延迟释放效应。

此外,通过改变释放介质的pH值,我们发现甘草酸的释放速率可被调节,从而实现对药物释放特性的控制。

四、研究意义及展望本研究系统地研究了甘草酸的释放规律,为甘草酸药物的研发和制造提供了重要的理论基础。

同时,通过深入了解甘草酸的释放机制,我们可以优化药物制剂的性能,提高疗效,并减少不良反应。

在今后的研究中,我们将进一步探索甘草酸的释放机制,并结合其他表征技术,如扫描电子显微镜和核磁共振等,深入了解甘草酸在药物制剂中的行为。

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创作编号:GB8878185555334563BT9125XW创作者:凤呜大王*甘草酸的提取、纯化、测定及残渣中甘草多糖的提取分离测定实验报告学院:生物科学与工程学院班级:姓名:学号:组别:第七组组员:目录一、实验目的 (3)二、实验器材 (3)三、实验原理 (4)1.甘草简介 (4)2. 甘草酸的提取方法 (5)2.1 水提法 (5)2.2 稀氨水提取法 (5)2.3超声波提取法 (6)3 甘草酸的分离与纯化 (6)3.1 超滤法 (6)3.2 结晶法 (7)3.3 树脂法 (7)4.多糖提取方法 (7)5.多糖含量测定 (8)四、实验内容及步骤 (8)1.甘草酸的提取(稀氨水提取法) (8)1.1 (8)1.2 (8)1.3 (8)2. 甘草酸的纯化(大孔树脂吸附法) (9)3.残渣中甘草多糖的提取分离(溶剂提取法) (9)五、实验数据及处理 (10)1.甘草酸标准曲线 (10)2.测定样品甘草酸浓度,计算甘草提取率 (10)3.甘草酸粗品质量 (11)4.洗脱液中甘草酸的含量测定 (11)5.纯化后甘草酸的质量2.132g (11)六、实验结论及误差分析 (12)实验结论: (12)误差分析: (12)一、实验目的1.掌握甘草酸提取、纯化的原理和方法,了解甘草酸定量测定方法。

2.掌握多糖类的提取及测定方法。

3.熟悉皂甙的性质。

4.进一步熟悉物质提取与纯化的技术,掌握相关原理。

二、实验器材1.试剂:70%的乙醇、0.6%的稀氨水、3.5mol/l的浓硫酸、XAD9型树脂、6%盐酸、50%乙醇、95%乙醇、苯酚、铝片、碳酸氢钠、葡萄糖、标准甘草酸等。

2.器材:紫外分光光度计、石英比色皿、旋转蒸发仪、真空抽滤机、恒温水浴锅、1000ml量筒、玻璃棒、烧杯、纱布、玻璃漏斗、滤纸、烧杯等。

生物科学与工程学院10级生物技术2班第七组三、实验原理1.甘草简介甘草是蝶形花科(Fabaceae)、甘草属(Glycyrrhiza)植物,甘草地下部分是名贵中药材,地上部分是多年生牧草。

甘草具有抗寒、耐热、耐旱、抗盐碱等优良特性,适生性和抗逆性强,生命力旺盛,为干旱、半干旱地区重要的植物资源之一。

早甘草味甘、性平,有补脾益气、止咳祛痰、清热解毒的功能,用于脾胃虚弱、中气不足、咳嗽气喘、解毒等病症。

现代研究表明,甘草还有肾上腺皮质激素样的作用,可治慢性肾上腺皮质机能低下症和胃、十二指肠溃疡,近年来又发现甘草可抗癌和防治艾滋病,又是预防和治疗SARS的复方组份之一。

甘草的主要有效成分为甘草酸(glycyrrhizic acid)及甘草次酸(glycyrrhetinic acid)等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等。

药理研究表明,甘草酸及甘草次酸具有解毒、消炎、镇痛、抗肿瘤的作用。

近年来,还用于防治病毒性肝炎、癌症以及艾滋病等。

甘草酸约占甘草根茎的3-14%,分子式为C42H62O16,分子量822.92,熔点212 º C -217 ºC,其结构式为五环三萜皂甙,结构图如图1-1所示:图1-1 甘草酸结构分子式纯品甘草酸为白色针状晶体,不溶于冷水,可溶于热水,故溶于热水后,经冷却则呈胶体状沉淀析出。

加热、加压及在稀酸作用下可水解为一分子甘草次酸和两分子葡萄糖醛酸。

甘草次酸与单葡萄糖醛酸结合成甘草酸苷元单葡糖苷酸(MGGR)。

甘草酸的提取、纯化、测定及残渣中甘草多糖的提取分离测定2. 甘草酸的提取方法2.1 水提法水提法是最为古老、也是最为常用的一种提取方法。

其操作简单,溶剂成本低廉,但得率较低,按1990年版中国药典中含量测定方法测得甘草酸得率仅约3.0%。

据推测可能是因为水提法提取出的杂质较多,在去除杂质的过程中夹带了甘草酸,损失较大。

工艺流程如1-2所示:甘草水回流提取3次。

浓缩到原体积的1/5。

离心,药渣提取过滤浓缩成稠膏甘草酸得率(3.05%左图1-2 水提法提取甘草酸的工艺流程2.2 稀氨水提取法甘草酸成铵盐后水溶性增加可增加提取率。

稀氨水提取法常采取冷渗的方法。

工艺流程如下:5生物科学与工程学院10级生物技术2班第七组图1-3 稀氨水提法工艺流程1.4.2.3 氨性醇提取法在对甘草提取工艺的研究中,发现用含氨0.8%的65%乙醇回流提取乌拉尔甘草的效果优于含氨0.6%的65%乙醇和0.6%的氨水,甘草酸的得率达21%,比水提法提高了两倍以上,节省了资源,降低了成本,也避免了糖类、淀粉等大量水溶性杂质的混入,便于精制。

如果能够解决加热回流过程中氨气逸出造成的污染问题,氨性醇提取法将成为一种较为理想的方法。

工艺流程如图1-4所示。

图1-4 氨醇溶液提取甘草酸的工艺流程2.3超声波提取法谢果等研究了超声条件下不同因素对甘草酸得率的影响,通过选择,可以得到最佳提取工艺:溶剂为70%乙醇溶液、超声频率为18kHz、浸泡时间为90min、粒度为18~20目,在此工艺进行提取,甘草酸的提取率可以达到87.4%。

3 甘草酸的分离与纯化3.1 超滤法将甘草提取液酸析后所得的粗品用氨水溶解,然后在一定的压力下进行超滤,滤液浓缩干燥得甘草酸铵。

甘草酸的提取、纯化、测定及残渣中甘草多糖的提取分离测定3.2 结晶法结晶法是利用甘草酸转化为铵盐后在某些特定溶剂中溶解度下降而结晶出来,达到纯化的目的。

较为常用的有晶种法和反复结晶法。

晶种法是先将甘草提取液进行酸析,再用适量甲醇回流提取沉淀物,提取液氨化后减压蒸干得糖浆状物,趁热加入适量冰醋酸使溶解、静置,投入甘草酸单铵盐晶种,隔日吸滤,冰醋酸洗涤,减压蒸干即得甘草酸单铵盐。

反复结晶法是先将甘草提取液进行酸析,再经乙醇或丙酮溶解提取,氨化成盐析出,再经活性炭脱色,反复重结晶得纯品。

3.3 树脂法树脂法包括离子交换树脂法和大孔吸附树脂法,两种方法均是利用甘草酸与杂质理化性质的不同,通过吸附和解吸附的过程,达到纯化的目的。

离子交换树脂法:因为甘草酸中含有3个羧基,可与阴离子交换树脂上的阳离子结合而吸附在树脂上,其他一些非酸性的杂质不被吸附,从而得以与这些杂质分离。

日本专利中以弱碱性树脂DuoliteA374吸附甘草酸水提液,再用2.0%氨水洗脱即得铵盐产品。

原苏联专利是先用阴离子交换树脂AB-6G富集甘草酸,再用弱酸性阳离子交换树脂除去铵离子,从而得到高纯度的产品。

大孔吸附树脂法:大孔吸附树脂法是一种较为经济实用的方法。

通常选用的树脂有Amblite XAD4, XAD8, XAD9,XAD11,DA201以及AB-8等。

姚德佳等用以苯乙烯和二乙烯苯为骨架,由丙烯腈组成的主链上带有CN基的DA-201型大孔树脂柱吸附,以水或稀的低级醇洗脱,收集洗脱液,回收溶剂后得到的甘草酸纯度可90.0%以上。

4.多糖提取方法种类繁多的植物多糖,存在于植物中的部位不尽相同。

一般植物细胞壁比较牢固,在提取前需进行专门的破细胞操作,包括机械破碎(研磨法、组织捣碎法、超声波法、压榨法、冻融法)、溶胀和自胀、化学处理和生物酶降解。

因此,植物多糖提取的研究中采用了许多不同的方法,包括溶剂提取法、酸提法、碱提法、酶解法、超滤法、超声波强化法、微波法。

本实验中采用的是最常用的方法------- 溶剂提取法.溶剂提取法一般应遵循相似相溶的原则。

多糖是极性大分子化合物,在所有溶剂中,水、乙醇是典型的强极性溶剂,对植物组织的穿透力强,提取效率高,在生产上使用安全。

7生物科学与工程学院10级生物技术2班第七组5.多糖含量测定糖在浓硫酸作用下,水解生成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚缩合成橙黄色化合物,且颜色稳定,在波长490 nm处和一定的浓度范围内,其吸光度与多糖含量呈线性关系正比,从而可以利用分光度计测定其吸光度,并利用标准曲线定量测定样品的多糖含量。

四、实验内容及步骤1.甘草酸的提取(稀氨水提取法)1.1用粉碎机将甘草片粉碎,称取20g甘草粉,加0.6%的稀氨水300mL,在沸水浴中加热60min, 过滤,分别收集滤液和滤渣。

1.2将滤渣加300ml稀氨水重复浸提两次,合并滤液,记录滤液体积。

1.3测定提取液中的甘草酸含量:a.制作标准曲线精密称取甘草酸标准品10.00mg,置于10ml容量瓶中,加70%乙醇溶解并定容。

精密吸取0.50ml、0.75ml、1.00ml、1.25ml、1.50ml,分别置于25ml容量瓶中,加70%乙醇摇匀定容,静置20min,在波长254nm处测定吸光值。

b. 测定甘草酸含量将提取液摇匀,准确移取一定量的提取液转移到25ml容量瓶中,用70%乙醇定容,静置20min后,于254nm处测定吸光度。

据标准曲线计算提取液中甘草酸的浓度,再计算甘草酸提取率。

计算公式如下: A=13.17C—0.017 (参考)式中:A-吸光度;C-浓度,mg/ml甘草酸提取率= nCV/m×100%其中:n-提取液稀释倍数C-提取液中甘草酸的浓度mg/mlV-提取液体积mlm-甘草的质量mg将提取液减压浓缩至200ml,滴加3.5mol/l的硫酸至pH2~3,静置使之完全沉淀,离心(拟定为3000r/min 10min),沉淀用去离子水洗2~3次,放入真空干燥箱中干燥,得甘草酸粗品。

甘草酸的提取、纯化、测定及残渣中甘草多糖的提取分离测定2. 甘草酸的纯化(大孔树脂吸附法)2.1取甘草酸粗品(2,53g),加热使之溶于700mL的水中。

2.2将甘草酸溶液与XAD9型树脂(25g活化树脂)混合,静态吸附2h,用四层纱布过滤,取其滤液,并进行抽滤。

2.3滤渣(树脂)用300mL 50%乙醇溶液搅拌洗脱2h。

2.4滤液进行减压蒸发浓缩至干,称重,即得到纯化后的甘草酸。

2.5洗脱液中甘草酸含量的测定:方法如实验一3.残渣中甘草多糖的提取分离(溶剂提取法)3.1称取1g甘草酸残渣,加50ml60℃,在60 ℃恒温水浴锅中浸提3h。

3.2加 95% 的乙醇至乙醇终浓度为 80%,放置过夜沉淀。

3.3将过滤残渣连同滤纸一起干燥,置于烧杯中,加蒸馏水 50mL,分别在 60℃水浴锅中加热 30min。

3.4溶液趁热过滤,残渣用 5mL 热水洗涤 3 次,洗液并入滤液,放冷后移至 100mL 容量瓶中,稀释至刻度,得甘草多糖样液,备用。

3.5甘草多糖的测定制备葡萄糖标准液:取适量葡萄糖在 105℃中干燥至恒重,然后精密称取 100mg,置 100mL 容量瓶中,加蒸馏水溶解,并稀释至刻度。

此葡萄糖标准溶液浓度为 1.0mg/mL。

制备苯酚液:取苯酚 100g,加铝片 0.1g,碳酸氢钠 0.05g。

再取以上混合物 10.0g,加蒸馏水 150ml,置于棕色瓶中备用。

制作标准曲线:吸取葡萄糖标准液 1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0mL、7.0 mL、8.0 mL、9.0 mL、10.0 mL,分别置于100mL 容量瓶中,加蒸馏水定容。

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