骨髓细胞学检查常规
常用的骨髓细胞学检查方法
常用的骨髓细胞学检查方法
骨髓细胞学检查是一种常见的临床检查方法，主要用于诊断和鉴别诊断血液疾病、肿瘤、免疫缺陷等疾病。
以下是一些常用的骨髓细胞学检查方法：
1. 骨髓形态学检查：通过显微镜观察骨髓细胞形态、数量、比例等特征，可以诊断或排除各种血液疾病，如贫血、白血病、淋巴瘤等。
2. 骨髓免疫学检查：通过免疫学技术检测骨髓细胞表面的特定抗原，可用于识别和区分不同类型的白血病和淋巴瘤。
3. 骨髓染色体分析：通过染色体分析技术，可以检测出一些与血液疾病相关的染色体异常，如染色体易位、缺失等。
4. 骨髓核酸检测：通过PCR技术等检测骨髓中的基因变异、突变等，可以有效地诊断和监测一些血液疾病和肿瘤。
总之，骨髓细胞学检查是一项非常重要的诊断手段，能够帮助医生准确地诊断和鉴别诊断各种血液疾病，为患者提供更好的治疗和管理方案。
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骨髓细胞学检查规程
骨髓细胞学检查规程骨髓细胞学检查应抽取骨髓少量制成薄片。
采用骨髓小粒丰富、制片厚薄均匀的涂片，经瑞氏—姬姆萨混合染色后，于显微镜下检查细胞质和量的变化。
1标本采集1.1骨髓穿刺部位:一般在髂前上棘或髂后上棘穿刺,必要时可行胸骨穿刺.1.2 骨髓穿刺术成功的标志:抽吸骨髓液时患者感锐痛;抽吸物中有黄色的骨髓小粒;涂片中有骨髓细胞成分:巨核细胞、浆细胞、组织嗜碱细胞、成骨细胞、破骨细胞、肥大细胞、网状细胞、网状纤维等.1.3骨髓液外观:在正常人呈红色稍具粘稠性,稀薄的白色油滴状见于典型的再生障碍性贫血,暗红色血水样或棕红色碘酒样见于骨髓坏死时.1.4 骨髓涂片和染色:抽得骨髓液后,立即取其小粒部分,制备厚薄、长短适宜得涂片数张，同时作外周血涂片数张，瑞-姬氏染色后备检。
2瑞-姬氏染色原理瑞氏染液（伊红美蓝）是由伊红和美蓝混合组成的中性盐染料，其中伊红是酸性染料，其有色基团为阴离子（E-），美蓝是碱性染料，有色基团为阳离子（M+），这两种有色离子可以与细胞蛋白质选择性的吸附进而使细胞呈现不同的着色。
其中细胞核是由脱氧核糖核酸与强碱性的组蛋白、精蛋白等形成核蛋白，这种强碱性物质与酸性染料伊红有亲和力，故染成红色；但核蛋白中还有少量的弱酸性蛋白与美蓝起作用，只因其量太少而不显蓝色，故细胞核呈紫红色。
较幼稚细胞之胞浆和细胞核之核仁有酸性物质，与碱性染料美蓝有亲和力，故染成蓝色。
当酸碱性质各半时，则染成红蓝色或灰红色，即所谓多嗜性。
由于瑞氏染液使胞浆尤其是中性粒细胞的颗粒着色清晰，姬氏染液使有核细胞之胞核及成熟（无核）红细胞着色清晰。
故用此法可使核、浆都清晰。
3试剂3.1瑞氏-姬姆萨混合染色液：瑞氏染粉1g，姬氏粉1g，中性甘油3ml,甲醇600ml。
将全部染料放入研钵内，加少量甲醇慢慢研磨以染料全部溶解为度，在加甲醇混匀，加入甘油，倒入棕色瓶内保存。
3.2 PH 6.5磷酸盐缓冲液：1%磷酸二氢钾30ml，1%磷酸氢二钠20ml、加蒸馏水到1000ml。
骨髓细胞学检查
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一.骨髓细胞学检查的临床目的
1、诊断造血系统疾病，如：Acute leukemia
（AL）、Aplastic Anemia（AA）、 Multiple myeloma (MM)、Idiopathic thrombocytopenic purpura(ITP)等。 同时定期检查骨髓对分析疗效，判断疾 病预后亦有帮助。
骨髓穿刺：Bone marrow puncture
骨髓活检：Bone marrow biopsy
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骨髓穿刺的部位：
常选用的部位有： 髂前上棘、髂后上棘、 胸骨、腰椎棘突 骨髓穿刺的方法：
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骨髓穿刺的禁忌症：
1、血友病等凝血因子重度缺陷的疾 病。
2、穿刺部位局部有炎症，畸形及其
他病变时应避开或更换部位。
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（二）巨核细胞计数与分类
巨核细胞数正常值为每张涂片 （1.5×3.5cm）7-35个 巨核细胞数量增多或正常且伴有成熟障碍：见于 特发性血小板减少性紫癜 巨核细胞数量减少：见于再生障碍性贫血
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原幼巨核细胞增多：见于白血病、骨髓纤维化、
急性ITP
颗粒型巨核细胞增加而产生血小板型减少：见于
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5.细胞涂片检查时，吸取的骨髓液滴在载玻
片上（要有斜度）应迅速推片，避免凝固。 推片数目应根据检查需要决定。 6.骨髓液涂片时，涂膜应厚薄适宜，细胞分 布均匀，同时应在玻片一端标记患者姓名
及日期，以防差错。
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二、骨髓涂片细胞学检查内容
1.骨髓有核细胞的增生程度，低倍镜下 检查。根据成熟红细胞与有核细胞的
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2.比值减低见于 ： （1）红系细胞增多时，如各种增生性贫血 （2）粒系细胞减少时，如粒细胞缺乏症
骨髓检验骨髓细胞学检验
临床意义
n 鉴别IDA与非IDA
n 诊断铁粒幼细胞性贫 血
n 诊断MDS-RARS
几种常见AL的细胞化学染色结果
POX SE NSE NSE+NaF ALP PAS
ALL
-
AML-wm
+~+++
-
++~+++
-~++
不被NaF抑制
增加
减少
+，粗颗粒或块状 -或+，弥漫性淡 红色
AMML
-~+
-~+
骨髓检验
主要内容
骨髓细胞学检查
n 细胞形态学 n 细胞化学染色 n 免疫表型分析 n 染色体分析 n 基因诊断
骨髓病理学检查
n 组织结构 n 免疫组织化学染色
骨髓检查流程
1.判断适应证 2.标本制备 3.镜检 4.分析
1.骨髓检查适应证
造血系统疾病 某些血液病及其相关疾病 某些寄生虫感染性疾病 恶性肿瘤骨髓转移 某些类脂质沉积病 待查
– 贫血原因待查 – 发热原因待查 – 淋巴结肿大原因待查 – 肝脾肿大原因待查 – 骨痛原因待查
唯一的禁忌证： 严重的凝血因子缺陷
2.标本制备
取材部位：髂后、髂前上棘、胸骨、棘 突、病灶部位
采集、涂片 染色：瑞氏（Wright）染色或瑞-姬
（Giemsa）混合染色
骨髓穿刺和活检针
骨髓穿刺部位
（AML-M5） – AEL：急性红白血病（AML-M6） – AMegL：急性巨核细胞白血病（AML-M7）
一些名词缩写介绍
ALL：急性淋巴细胞白血病 APL：急性早幼粒细胞白血病 CML：慢性髓性白血病 CLL：慢性淋巴细胞白血病 AA：再生障碍性贫血 PNH：阵发性睡眠性血红蛋白尿 MDS：骨髓增生异常综合征 IDA：缺铁性贫血 RARS：难治性贫血伴环形铁粒幼细胞增多
骨髓细胞学检测
出现中性颗粒 充满中性颗粒 充满中性颗粒
充满中性颗粒
1.粒细胞系统
四、血细胞的正常形态学特征
粒细胞胞质中四种颗粒的鉴别
大小 形态 颜色 数量 分布
非特异性颗粒 较中性颗粒粗大
大小不一 形态不一 紫红色
少量或中等量 分布不一、有时覆盖核上
中性颗粒 细小
大小一致 细颗粒状 淡红或淡紫红色
多 均匀
嗜酸性颗粒 粗大
五、血细胞的细胞化学染色
（二）中性粒细胞碱性磷酸酶染色
3.临床意义 （4）再生障碍性贫血时NAP活性增高；阵发性睡眠性血红蛋白尿症时活性减低。 （5）其他血液病：一些成熟淋巴细胞的肿瘤如慢性淋巴细胞白血病、骨髓增殖性肿瘤等NAP 活性中度增高。 （6）腺垂体或肾上腺皮质功能亢进，应用肾上腺皮质激素、ACTH、雌激素等NAP积分值可 增高。
细胞、破骨细胞及一些退化细胞，如Ferrata细胞（退化的未成熟中性粒细胞）。
五、血细胞的细胞化学染色
（一）髓过氧化物酶染色
1.原理 血细胞中的髓过氧化物酶（MPO）催化试剂中的联苯胺脱氢氧化并使其化学结构发生变化， 与试剂中亚硝基铁氰化钠结合形成稳定的蓝黑色的颗粒，沉着于细胞质中。 2.结果 （1）胞质中无蓝黑色颗粒者为阴性反应 （2）细小颗粒、分布稀疏者为弱阳性反应 （3）颗粒大而密集者根据程度定为阳性、强阳性反应
圆形
圆形
圆形
椭圆形、一侧 明显凹陷呈肾形、 呈带状、条状、
扁平或略凹陷 半月形等
枝杆状
常无
无
无
10～15μm 圆形
分叶（2～5叶） 无
染色质
细颗粒
开始聚集
聚集呈索块状
小块状
粗糙呈块状
粗块状
骨髓细胞学检查
骨髓细胞学检查骨髓细胞学检查应抽取骨髓少量制成薄片;采用骨髓小粒丰富、制片厚薄均匀的涂片,经瑞氏—姬姆萨混合染色后,于显微镜下检查细胞质和量的变化;试剂1)瑞氏染色液：瑞氏染粉18,置洁净干操的研钵内,加甘油,研磨片刻,使瑞氏染粉充分溶解,加甲醇约50ml,继续研磨片刻后,收集上层染液；残余部分再加甲醇50ml研磨：再收集上层染液,重复几次后,用甲醇冲洗研钵,倒入同一瓶内,最后加甲醇至500mi;开始几周应经常振摇染色液;染色液存放的时间越长,染色效果也越佳;此外,研磨时染粉内应先加甘油,、以免染粉在研磨过程中结成块,更易溶解;染粉未经研磨配成的染液不宜用作骨髓片染色;2)姬姆萨浓缩染液：将姬姆萨染粉3．8g放入纯甘油250ml中,置60℃水浴2小时,溶解后力口60℃预热的甲醇250m1混匀,于室温、棕色瓶内保存,配后数天即可使用,可长期保存;3)pH6．5磷酸盐缓冲液：磷酸二氢钾1．5g,磷酸氢二钠1．0g、加蒸馏水到5000ml;最后纠正pH6．5;4)姬姆萨稀释液：取姬姆萨溶液50m1,加pH6．5磷酸盐缓冲液到500ml,混匀;此液为姬姆萨应用液,可直接作涂片复染用;作瑞氏稀释液时,取此液10一20mL加蒸馏水至100ml,混匀即可;操作1．骨髓取材：取材部位有胸骨、棘突、髂骨前嵴或后嵴等;两岁以内小孩最好用胫骨,成人常取髂后上棘,此部位穿刺方便,病人也易接受．穿刺前要求严格消毒,杜绝细菌感染,除穿刺室紫外线消毒和皮肤消毒外,还应注意穿刺包和手套消毒时间有否过期;戴手套要熟练,避免手套接触来消毒物品;穿刺针进入髓腔时常有脱空感,吸取前针筒内应留有1m1左右的空隙,否则髓液很快进入针筒空隙而无法取出;针筒内若有水份也要用消毒纱布擦干,以免溶解细胞;吸液量一般控制在0．2m1左右;因吸量过多,易被外周血稀释;部分病人干抽或吸出量太少时,不要将针头立即拔出,可边抽边调节针头深浅,或边抽边缓慢外移针头,最后将针头内可能残留的髓液尽量推出、制片,以减少病人痛苦;2．涂片：选两块小粒较多、厚薄均匀的骨髓片,自然干燥后在较厚的头端髓膜上写上病人姓名、日期及“BM”标记;加瑞氏染色液8—12滴,用吸球吹吸并使其布满整张涂片,约半分钟后,加姬姆萨稀释液5-10滴,再用吸球吹吸气,使两液充分混匀,若有金黄色油膜出现,染色效果更佳;染色时间一般为10一20分钟,夏天可缩短些、冬天则可延长些;冲洗时应乎放玻片让流水缓慢冲洗;另外,因手拿玻片处可能会有染料残留,应更换手拿位置再予冲洗;染色太淡的涂片,可用姬姆萨稀释液复染3 分钟；着色太深时,可用瑞氏染液滴加于涂片上;立即冲洗即可;各实验室最好能摸索出自己的染色经验,尽量做到一次性染色成功;没有姬姆萨染液的单位,可用蒸馏水加少量天青或美蓝代替,但染色效果没有前者好;染好的涂片要自然干燥,切忌加热烘干,否则细胞退色而影响观察;3．染色选两块小粒较多、厚薄均匀的骨髓片,自然干燥后在较厚的头端髓膜上写上病人姓名、日期及“BM”标记;加瑞氏染色液8—12滴,用吸球吹吸并使其布满整张涂片,约半分钟后,加姬姆萨稀释液5-10滴,再用吸球吹吸气,使两液充分混匀,若有金黄色油膜出现,染色效果更佳;染色时间一般为10一20分钟,夏天可缩短些、冬天则可延长些;冲洗时应乎放玻片让流水缓慢冲洗;另外,因手拿玻片处可能会有染料残留,应更换手拿位置再予冲洗;染色太淡的涂片,可用姬姆萨稀释液复染3分钟；着色太深时,可用瑞氏染液滴加于涂片上;立即冲洗即可;各实验室最好能摸索出自己的染色经验,尽量做到一次性染色成功;没有姬姆萨染液的单位,可用蒸馏水加少量天青或美蓝代替,但染色效果没有前者好;染好的涂片要自然干燥,切忌加热烘干,否则细胞退色而影响观察;分析要点(1)骨髓片观察的内容:1)肉眼观察涂片有无骨髓小粒、脂肪滴制片、染色是否良好;2)低倍镜下观察骨髓增生情况主要分为5级,标本有否稀释,并计数全片的巨核细胞,了解有无特殊异常细胞;3)高倍镜下观察巨核细胞形态及巨核细胞分类计数一般被分类的巨核细胞应不少于25个,并进一步观察低倍镜下看到的可疑细胞;4)油镜下明确在低、高倍镜发现的异常或可疑细胞的性质,并作骨髓细胞分类和全面的细胞形态分析;骨髓细胞分类计数的正常范围较难制定;因为分析骨髓像是以骨髓细胞变化为基础,并结合临床表现和血像的综合性分析,不能只以单一的比例作为是否正常的标准;另外,个体差异、穿刺是否成功和分类部位等,都会影响细胞分类的结果;2正常骨髓主要指标及其分类原则：1．正常骨髓像主要指标：1 骨髓增生程度呈增生活跃;2 有核细胞量中等,小粒内细胞较丰富;3 涂片无脂肪滴,或在中老年者见少量脂肪滴;4 粒、红细胞比例约2—4：1,粒细胞可占50％,淋巴细胞约占20％小儿可高达40％,单核细胞、浆细胞、网状细胞一般＜3％;5 巨核细胞在1．5×3cm2涂片上可找到20—100只;若小于20只,排除因标本稀释原因外,可结合临床考虑巨核细胞减少;产血小板巨核细胞应不少于总巨核细胞的1／3,成按血小板易见到;6 嗜酸性粒细胞小于5％;嗜碱性粒细胞＜1％;7 原始细胞中,原故细胞和原红细胞均小于2％;8 偶尔可见内皮细胞、组织嗜碱细胞、组织嗜酸细胞、成骨细胞、破骨细胞和脂肪细胞等;2．观察骨照片应注意的事项：1 对介于上、下两阶段的同一系细胞,应按划下不划上的原则分类;对分类曲线出现不明原因的畸形分布时,介于上、下阶段的细胞可适当调整其阶段性；2 一般病人的骨髓片中,偶见或为疑似的原始单核细胞、原始淋巴细胞小儿除外及原始浆细胞,可不作报告或归于原始粒细胞中,以减少分类出现的混乱;3 骨髓细胞分类计数不应少于200个,否则分类误差太大,较难反映细胞的其实分布情况;4 书写报告时要对粒、红、巨三系细胞比例、形态变化分别描写,有特殊变化的情况,尤其对临床诊治有价值的细胞应另加说明;骨髓报告的结论应结合临床和其他实验室检验加以考虑,对尚不明确的结果只须描写看到的内容,不要任意下结论;5 骨髓片若出现下列情况,则提示标本全部或部分稀释;无骨髓小粒或有少量骨髓小粒,小粒内细胞丰富,但涂片有核细胞量减①少;②外周血中血小板量正常或增多,但涂片巨核细胞量减少;③成熟阶段粒细胞比例明显增高,而有核细胞量却减少;当怀疑骨髓有转移性肿瘤时,不管涂片是否稀释,应看完所有涂片,尤其要6注意涂片的头尾及两侧部位,是否有成堆排列的肿擅细胞;常见血液病骨髓像诊断要点：1缺铁性贫血IDA：成熟红细胞体积偏小,幼红细胞呈现核固缩和胞浆量少及着色偏蓝等核老、浆幼的核浆发育不平衡现象;外铁明性,含内铁细胞减少;此类贫血最常见,临床上常有胃病、痔疮和月经多等病史;2巨幼细胞性贫血MA：成熟红细胞体积偏大,可见巨大的红细胞,幼稚红细胞常呈核染色质疏松、浆量增多、着色偏红等核幼、浆老的核浆发育不平衡现象;且可找到巨大晚幼粒和杆状核粒细胞,分叶核粒细胞分叶也偏多;巨核细胞核分叶增多,但不出现多个小核的巨核细胞,巨核细胞浆内易见由核染色质脱落下来的核小体该类细胞约占巨核细胞20—30％;临床上常有胃肠手术、营养不良和妊娠等情况;外周血像常出现3系减少;3溶血性贫血HA：骨髓幼红细胞显着增生,其总比例常大于50％,但以中、晚幼红细胞增生为主,并可见球形红细胞、椭圆形红细胞等特殊形态的变化;此病临床资料对诊断尤为重要,病人常出现黄疽、尿胆原和间接胆红素增高,网织红细胞常大于5％;急性溶血时,外周血像可出现幼红细胞;抗人球蛋白试验和酸溶血试验常出现阳性;4再生障碍性贫血AA：骨髓小粒呈空架状,脂肪球增多;粒、红、巨三系细胞减少,其中以巨核细胞减少更为明显,成熟淋巴细胞比例相对增高,网状细胞、浆细胞、嗜碱组织细胞常偏多;血像3系减少,但脾脏不肿大;5骨髓增生异常综合征MDS：红细胞可见多核、核碎裂及巨幼样变,成熟粒细胞分叶减少或增多,粒细胞脑浆颗粒减少或无或过大而多,核浆发育不平衡;易见多个小核的颗粒巨核细胞和微小型巨核细胞;此类病人外周血像易见幼稚红细胞和幼稚粒细胞,成熟单核细胞常增多;临床抗贫血治疗效果差;诊断MD3后,按骨髓和外周血像中原始细胞多少,有否环状铁粒幼红细胞可分为难治性贫血RA、难治性贫血伴环状铁粒幼红细胞增多RAS、伴原始细胞增多的难治性贫血RAEB、转化中原始细胞片增多的难治性贫血RABBT4型,至于授性粒单细胞性白血病CMMl已属白血病可不再列入MDS;RA：外周血原始细胞无或＜1％,骨髓原始细胞＜5％;RAS：同RA,但骨髓中环形铁粒幼细胞,为铁粒细胞的15％以上;RAEB：外周血原始细胞＜5％,骨髓原始细胞5-20％;良AEBT：外周血原始细胞＞5％,骨髓原始细胞20、30％;6慢性粒细胞性白血病CML：粒系极度增生,以晚幼粒细胞和杆状粒细胞增生为主,嗜碱性粒细胞易见;血片中白细胞增多并出现中、晚幼粒细胞,嗜碱性粒细胞比例增高;临床上出现乏力,巨脾等;碱性磷酸酶NAP 积分明显减低;7慢性淋巴细胞性白血病CLL：成熟淋巴细胞明显增多,其比例占50％以上;原始和幼稚的淋巴细胞少见,不出现异型淋巴细胞;其他各系细胞增生情况不一;血像白细胞增高,成熟淋巴细胞明显增多;发病年龄较大,常伴有乏力、脾脏肿大;8急性淋巴细胞性白血病ALL：区分是ALL还是急性非淋巴细胞性白血病ANLL,对临床用药和病人的预后有重要意义,因此,报告时应慎重;ANLL可分为M0、M1、M2、M3、M4、 M5、 M6和M7等亚型; M0为极低分化的髓性白血病,其诊断与M7一样要结合免疫标记和电镜、组化;ALL分L1、L2、L3 3亚型,其各亚型特点见表;与急非淋巴细胞相比,原始和幼稚淋巴细胞体积小,胞浆量少,较透明,无颗粒及奥氏小体,核染色质粗,排列致密,着色深紫红色,核仁小而少,组织化学染色的POX或SB阳性率＜3％;此型白血病以儿童多见,预后较好;9急性粒细胞性白血病AGL：原始粒细胞、异常早幼粒细胞或中性中幼粒细胞显着增多;其白血病细胞浆较丰富,着色灰蓝,可见较粗大的非特异性颗粒单核细胞的颗粒常较细小,易见粗大奥氏小体;核染色质粗颗粒状,排列较规则;核仁清晰,数目1—4个;急性粒细胞性白血病又分为Ml、 M：包括M：．和M2b亚型、 M：包括M3n和M：b亚型3型; M,的骨馈原始粒细胞≥90％非红系分类,即NEC;M2l的骨髓原始粒细胞＞30一＜90％NEC,单核细胞＜20％,早幼粒及其以下各阶段细胞＞10％;M2b以异常中性中幼粒细胞增生为主,该类细胞核浆发育不平衡,可见核仁,数量＞30％,原始或早幼阶段细胞也同时增多;M”的早幼粒细胞布满粗大的非特异性颗粒,该类细胞大小不一,核形态不规则,可见内、外浆;M3b的早幼粒细胞布满细小的非持异性颗粒,形态变化同M30;该类白血病细胞数量＞30％NEC, POX或SB染色常强阳性;10急性单核细胞性白血病AMOL：该型的白血病细胞脑浆丰富,着色灰蓝,可有细小、散在颗粒,奥氏小体较细长,核形态不规则,有外折内切现象,核染色质呈细沙状,排列成疏松租网状,着色偏淡;核仁较大,数量少;根据白血病细胞分化程度,又可分为M5t和M5b型; M50的骨髓原始单核细胞＞80％NEC,为未分化型; Msb的骨髓原始单核细胞＜80％NEC,但原始和幼稚单核细胞＞30％NEC,为部分分化型;与粒细胞区别的组织化学染色是非特异性脂酶NSE阳性,且受氟化钠NaF抑制,而粒细胞的NSE阴性或弱阳性且不受NaF抑制;11真性红细胞增多症PV：红系增生活跃,幼红细胞形态正常,各期幼红细胞比值可有不同程度的增高, Hb＞180 g／L,红细胞量＞7×1012/L;皮肤和粘膜呈暗红色,脾肿大;12红白血病M6：骨髓中红系＞50％,且伴有形态学的异常,骨髓中原始粒细胞或原始、幼稚单核细胞＞30％NEC；若外周血中原始粒细胞或原始、幼稚单核细胞＞5％,骨髓原始粒细胞或原幼单核细胞＞20％ NEC；单纯原始红细胞,早幼红细胞显着增多者;13巨核细胞白血病M7：骨髓原始巨核细胞＞30％, 该类细胞为原粒或原淋细胞大小,胞浆丰富,常有伪足状突起;此型易与ALL混淆,诊断时要结合电镜组化和免疫标记测定;14粒细胞缺乏症：粒细胞显着减少,早期阶段,中性粒细胞可示“左移”现象;典型发作时,各阶段的中性粒细胞极度减少,但各阶段的红、巨两系细胞常无明显改变;临床上常伴有感染、高热等症状;外周血中性粒细胞极度减少或消失;15粒细胞减少症：粒系统增生不良,成熟障碍,部分粒细胞可出现空泡、中毒性颗粒;外周血中性粒细胞绝对值常在1—1．8×109/L之间;可由感染、化学或物理损伤、造血系统疾病、巨脾、胶原性疾病等所致;16原发性或免疫性血小板减少性紫癜ITP：骨髓巨核细胞量明显增多,少数病人可正常或轻度减少;产血细胞;瘤细胞分布常为弥漫性的,可引起广泛的骨路破坏和骨髓功能抑制,故有核细胞量常偏少;临床上常有骨痛史,X 片示骨质虫蚀样改变;并免疫球蛋白测定异常,成熟红细胞在涂片上呈串钱状排列,血沉明显加快,部分病人尿中可检出本周蛋白;17急性粒、单核细胞性白血病AMML：此白血病同时含有原始或早幼粒细胞和原始或幼稚单核细胞;根据两系血小板巨核细胞比例减低,病人常出现脾肿大、血小板抗体增高、皮肤有出血点等;18传染性单核细胞增多：骨髓中可见淋巴细胞稍增多,有少量异形淋巴细胞;主要表现在血片中成熟淋巴细胞在40一90％之间,其中多数细胞为胞浆增多,并有空泡的异形淋巴细胞,该类细胞易误认为单核细胞或原始细胞,但其核的变化小于胞浆的变化,结合临床上有发热、脾肿大及以青少年多见等,可作出判断;19脾功能亢进：骨髓增生明显活跃,粒、红、巨3系均示明显增生,粒系成熟障碍,巨核细胞系的产血小板巨核细胞减少,晚幼红细胞比例偏高,外周血有两系或三系减少,脾脏肿大;20骨髓纤维化：骨髓有核细胞偏少,骨髓和血片中均可见到泪滴状红细胞,骨髓穿刺时常为干抽,临床上脾明显肿大,贫血,外周血易见幼稚红细胞和幼稚粒细胞;此病诊断应结合骨髓活检;21纯红细胞再生障碍性贫血PRAA：幼红细胞显着减少,常小于5％,但粒系和巨核细胞系无明显异常;外周血中单纯红细胞减少或血红蛋白降低,白细胞和血小板多正．常或略低,网织红细胞明显减低;此病常与免疫功能紊乱有关;22多发性骨髓瘤MM：原始浆细胞、幼稚浆细胞或成熟浆细胞明显增多,该类细胞为恶性的浆细胞,即骨髓瘤的白血病细胞比例不一,又分M4a、M4b、M4c、M4EO4型;m4a是以原始和早幼粒细胞为主,原始单核细胞加幼稚单核细胞＞20％NEC； M4b以原始、幼稚单核细胞增生为主,原始．粒细胞和早幼粒细胞＞20％NEC； M4c的原始细胞既具有粒系细胞特征又具有单核细胞特征的细胞＞30％NEC,此型细胞形态较难识别,要结合免疫标记测定； M4EO除上述特征外,嗜酸性粒细胞占5—30％;23骨髓转移性肿瘤：以成堆出现的肿瘤细胞为特征,该类细胞核染色质疏松,有核仁,脑浆量多少不一,但胞界常不清;转移到骨髓的神经母细胞瘤,可见菊花状排列;此类病人的骨韶有核细胞量常明显减少或伴标本稀释,可找到坏死成分,个别病人涂片需找许多张才能发现堆集的肿瘤细胞;临床上常有骨痛、低热和消瘦等病史;24恶性组织细胞病：除可找到较多吞噬细胞、淋巴样、单核样组织细胞外,还可见到巨大的恶性组织细胞和多核巨组织细胞,该类细胞体积大可达30-40um,胞浆多,着色深蓝,核大,染色质粗、着色深紫红色,核仁大;血3系减少,持续高热,脾肿大; NAP积分减低;部分恶性组织细胞要与大恶性淋巴细胞瘤相鉴别;25其他不明原因发热的病人骨髓像：常以反应性骨髓像报告之;主要特征有粒细胞成熟障碍,毒性变；网状细胞增多,有时可见少量吞噬型网状细胞和淋巴样、单核样组织细胞；易见浆细胞、单核细胞;特殊情况下,可找到疟原虫或伤寒特征细胞等;此类病人常为各类微生物细菌、病毒、立克次体等感染或免疫系统疾病所致,控制病因后,骨髓像可自然好转;个别病人的发热可能是恶性淋巴瘤所致,但可找到淋巴母细胞或淋巴瘤细胞,但其诊断应结合病理活检再确定;。
骨髓细胞形态学检查
[骨髓象]
（1）增生极度活跃或明显活跃，粒红比 例↑↑ （2）某一系细胞极度增生，但以中幼以 下为主。 （3）红系受抑制； （4）巨核正常或 ↑↑，晚期↓ 慢粒会在晚期发生急变
三、骨髓增生异常综合症（MDS）
主要表现：
难治性贫血 外周血细胞减少而骨髓增生增多 成熟和幼稚细胞形态异常 又有人称之为白血病前期、难治性贫血等。
[骨髓象]
（1） （ 2） （ 3） （4） 增生明显活跃或极度活跃 一系或两系原始细胞明显增多，≥30％ 其他系细胞受抑制 急淋：蓝细胞多见 急粒、急单 见 Auer小体 急性红白血病见巨幼红细胞
（一）分型
1、 临床分型：急性白血病 慢性白血病 特殊类型白血病
2、
MICM分型法
M—Morphology 形态学 I—Immunology 免疫学 C—Cytogenetics 细胞遗传学 （以细胞染色体为基础） M—Molecular biology 分子生物学
谢 谢
骨 髓 细 胞 形 态 学 检 查
第 一 军 医 大 学 珠 江 医 院 刘 兰 平
一、 骨髓细胞形态学检查 的临床应用
（一）临床应用： 1、诊断造血系统疾病及非造血系统疾病 明确诊断： 各型白血病、多发性骨髓瘤、巨幼细 胞性贫血、ITP、恶性组织细胞病、 铁粒幼细胞性贫血、尼曼-匹克病、 原发性转移癌、黑热病或疟疾等。
4) 红系增生良好： a.占有核细胞的20%左右 b. 各阶段比例适当； c．形态无明显异常或红细胞形态大致正 常。 5) 淋巴细胞及单核细胞系统百分率、 形态无异常（主要是成熟细胞） 6）浆细胞系统百分率、形态无异常
（主要是成熟细胞）
7) 巨核细胞 a.数量/全片：7-35个； b.各阶段情况正常； c.血小板形态正常。 8)其他细胞: 网状细胞及组织嗜碱细胞等未见异常。 9)无特殊细胞及寄生虫。
骨髓细胞学检验
骨髓细胞学检验第一节骨髓细胞检查步骤一、骨髓取材（一）穿刺部位目前骨髓穿刺部位有胸骨、腰椎棘突、髂骨等处，以髂骨前上棘、后上棘穿刺术最常见。
2 岁以下小儿主张胫骨穿刺。
由于穿刺部位不同，取材可能有明显差异。
如再障贫血往往髂骨首先受损，棘突次之，胸骨增生最好；黑热病检查利－杜体以腰椎穿刺阳性率较高；恶性组织细胞症以胸骨穿刺阳性率较高。
因此必要时多部位穿刺以便能全面了解骨髓情况。
（二）骨髓液抽取量以0．2 ml 为佳，抽量过多，易被血液稀释，失去诊断意义。
二、骨髓涂片制备用推片蘸取有骨髓渣的骨髓液少许（若看上去很浓，蘸量少些；如稀，可多蘸些），尽量将骨髓渣蘸上，放于载玻片右端，将骨髓液迅速沿玻片与推片接触面扩散成一均匀的骨髓液粗线。
然后将玻片与推片成30 ～45°角（骨髓液较浓时，角度小些，推的速度慢些；较稀时，角度大些，速度快些），自右向左用力均匀地向前滑动推之，直至玻片尾部。
立即将涂好的骨髓片在空气中来回摇动，使之快干，以免细胞皱缩而形态变异。
三、涂片染色标本染色一般选用混合染色法（瑞氏－姬姆萨复合染色法）1．染液的配制瑞氏染料1．0g姬姆萨染料0．3g甲醇（分析纯）500 ml将全部染料放入研钵中，加少量甲醇，慢慢研磨片刻，吸出上层染液。
再加入少量甲醇，继续研磨后吸出上液。
如此反复几次，使染料全部溶解于500 ml 甲醇。
收集于洁净的棕色瓶中，每天早、晚各振摇3 分钟，共5 天，存放1 周即可使用。
新配染料染色效果较差，放置时间愈长，染色效果愈好，但须盖严瓶以免甲醇挥发或氧化成甲酸。
2．pH 6．4 ～6．8 磷酸盐缓冲液磷酸二氢钾（K H 2PO 4）6．64g磷酸氢二钠（Na2HP O 4）2．56g加少量蒸馏水溶解，用磷酸盐溶液调整pH ，加水至1000 ml 。
3．染色方法（1）标本平放，最好置于架起的双玻棒上；（2）甲醇固定3 分钟；（3）加染液3 ～5 滴覆盖整个涂片，静置1 分钟；（4）加染液1 ～1．5 倍的磷酸盐缓冲液，使两液混匀，染色约10 ～15 分钟；（5）冲洗涂片上的染液，冲洗后竖置于片架上自然干燥或用洁净吸水纸将水吸干。
骨髓细胞学检查概述
★综合临床资料及血、骨髓涂片的见，提出形 态学诊断意见：
（1）确定性诊断： 白血病、多发性骨髓瘤、巨幼细胞性贫血等。
（2）符合性诊断： 缺铁性贫血、原发性血小板减少性紫癜等。
（3）描述性诊断： 增生性贫血、感染性骨髓象、大致正常骨髓 象。
骨髓细胞学检查概述
一、骨髓细胞学检查的适应症 ●诊断造血系统疾病 ●助诊某些感染性疾病 ●助诊某些代谢性疾病 ●助诊转移癌
二、血细胞的生成、发育及形态特点 1、血细胞的生成（见彩图） 2、血细胞发育形态变化规律： （1）细胞大小及外形 ●大小：由大逐渐变小（巨核细胞相反）
●外形：由圆形变为不规则形 （红细胞始终呈圆形）
（5）淋巴细胞约占有核细胞的20%（小儿可 达40%），单核细胞<4%及浆细胞<3%，以成熟 细胞为主，形态无异常。
（6）巨核细胞7~35个/全片，以产血小板型 为 主。
（7）可见少量非造血细胞。 （8）无特殊细胞及寄生虫。 （二）血涂片检查
低倍、高倍镜下分类计数和观察白细胞、 红细胞、血小板形态。
四、骨髓细胞学检查）观察骨髓涂片及染色 （2）确定骨髓增生程度
骨髓增生程度 成熟红细胞：有核细胞 有核细胞%
常见原因
增生极度活跃 1
：1
50%以上 各类型白血病
`增生明显活跃 10
：1
10%以上 各类型白血症、增生性贫 血、ITP
增生活跃
20
：1
3.正常骨髓象：
（1）骨髓增生活跃。
（2）粒、红比值正常（2~4：1）。
（3）粒系占有核细胞的40%~60%，原粒<2%， 早幼粒<5%，中、晚幼粒各<15%，杆状核多于分 叶核，嗜酸粒<5%，嗜碱粒<1%，细胞形态无明 显异常。
骨髓细胞形态学检查
血细胞的细胞化学染色
细胞化学染色是以细胞形态学为基 根据化学反应的原理， 础，根据化学反应的原理，应用骨 髓涂片进行固定、化学反应显色、 髓涂片进行固定、化学反应显色、 复染等程序染色， 复染等程序染色，然后在光学显微 镜下观察细胞的化学成分及其变化 的一项检验方法。 的一项检验方法。
增生程度示意图
如何观察巨核细胞？ 如何观察巨核细胞？
观察以下方面：数量、成熟程度、 观察以下方面：数量、成熟程度、产血 小板功能及其形态（包括血小板形态） 小板功能及其形态（包括血小板形态） 。
如何观察有无异常细胞？ 如何观察有无异常细胞？
由于异常细胞的体积较大、 由于异常细胞的体积较大、形态特 故应观察涂片尾部、边缘、 殊，故应观察涂片尾部、边缘、骨 髓小粒周围。 髓小粒周围。如恶性组织细胞病的 异常组织细胞、转移癌细胞、 异常组织细胞、转移癌细胞、高雪 细胞、尼曼—皮克细胞等 皮克细胞等。 细胞、尼曼 皮克细胞等。
骨髓细胞形态学检查
华中科技大学同济医学院 协和医院检验科
血涂片的观察
骨髓涂片送检时需同时送检外周血涂片 观察以下内容： 。观察以下内容： 白细胞分类计数：需注意白细胞形态。 白细胞分类计数：需注意白细胞形态。 注意成熟红细胞的形态有无异常， 注意成熟红细胞的形态有无异常，如有 有核红细胞，以与计数100个白细胞所占 有核红细胞，以与计数 个白细胞所占 数值表示。 数值表示。 估计血小板数量及形态有无异常。 估计血小板数量及形态有无异常。 注意有无寄生虫等异常情况。 注意有无寄生虫等异常情况。
常用取材部位
髂后上棘（较易掌握分寸） 髂后上棘（较易掌握分寸） 髂前上棘（较易掌握分寸） 髂前上棘（较易掌握分寸） 胸骨（对向心性病变阳性率高， 胸骨（对向心性病变阳性率高， 有一定危险性） 有一定危险性） 胫骨粗隆（ 岁以下小儿 岁以下小儿） 胫骨粗隆（2岁以下小儿）
骨髓细胞学检查
大致正常骨髓象
• • • • • • • • • 骨髓有核细胞增生程度 增生活跃 粒红比值：2~4：1 粒细胞系统：40%~60% 红细胞系统：20% 淋巴细胞系统：20%，成熟 单核细胞系统：﹤4%，成熟 浆细胞系统： ﹤2%，成熟 巨核细胞：7~35个/1.5㎝*3㎝片膜 其他细胞：组织细胞、内皮细胞、肥大细胞、脂肪 细胞等偶见，分裂象细胞少见，不见寄生虫和异常 细胞 • 成熟红细胞、血小板及各种有核细胞形态正常
急 性 白 血 病 急性 早幼 白血 病 慢 性 粒 细 胞 白 血 病 慢性粒 细胞白 血 病、 类 白、
等
中毒等
减少- 再障、粒缺、急性造血停滞等。
单核系细胞 增多原单及幼单
急性单核或粒单细胞血病、慢 粒急单变
成熟单核
急性单核细胞白血 病病、慢性粒单细 胞白血病
淋巴系细胞 增多- 原淋及幼淋
粒 细 胞 系
红 细 胞 系 淋 巴
系
单 核 系 浆 细 胞
0.42 1..27 7.23 11.36 2.0 2 0.01 52.0 12.85 0.5 0.8 1.06 3.0 1.90 0.01 0.02 0.03 0.16 0.37 1.34 9.45 9.64 0.01 0.08 40.0 18.90 0.01 0.06 3.0 1.45 0.002 0.03 0.54
0.5 1.0 4.0 7.0 15.0 7.0
巨 核 细 胞 系
原始巨核细胞 幼稚巨核细胞 颗粒巨核细胞 产板巨核细胞 裸 核
4.20 % 58.30 % 37.50 % 1个
1.0
1.0 3.0 30.5 20.0
9.0
1.0
1. 骨髓增生明显活跃，粒红比例倒置。 2. 红系增生明显活跃占54.5%，以中晚幼阶 段为主。幼红细胞胞体较小、边缘不整齐， 胞质量少、偏蓝。核浆发育失衡呈核老浆幼 状。成熟红细胞体积较小、中央淡染区明显 扩大，多色性红细胞可见。红系分裂象较易 见。铁染色：外铁(—)内铁幼红细胞阳性率 3%， 3. 粒系增生活跃，比例相对减低占35.5%， 各阶段粒细胞比例和形态未见明显异常。 4. 巨核细胞全片计数见76个（增生明显活 跃），成蔟血小板可见，形态未见明显异 常。 5. 淋巴细胞比例相对减少，形态未见明显异常。 6. 单核细胞比例未见改变，形态未见明显异常。 7. 未见其他异常细胞和寄生虫。
骨髓细胞学检验报告
骨髓细胞学检验报告背景骨髓细胞学检验是一种常用的实验室检查方法，用于评估骨髓细胞的数量、形态和功能。
骨髓细胞学检验可以帮助医生确定和诊断多种疾病，特别是涉及造血系统的病变。
本次报告主要针对患者进行的骨髓细胞学检验结果进行分析和解读。
分析1.血细胞比例：–粒细胞比例：正常人的粒细胞（中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞）比例通常在40%至75%之间。
如果粒细胞比例高于正常范围，可能表示感染或炎症反应，而低于正常范围可能与骨髓功能抑制或骨髓疾病有关。
2.红细胞比例：–红细胞比例正常范围在40%至50%之间。
如果红细胞比例低于正常范围，可能表示贫血的存在，而高于正常范围可能与骨髓异常增殖性疾病有关。
3.血小板比例：–血小板比例正常范围在150×109/L至450×109/L之间。
如果血小板比例低于正常范围，可能表示血小板减少症或骨髓造血功能低下，而高于正常范围可能与骨髓增殖性疾病有关。
4.骨髓形态及异常情况：–骨髓细胞学检验还包括对骨髓内细胞的形态学观察，以便发现细胞的异常形态和其他可疑的病理改变。
根据细胞形态学的特点，可以判断是否存在骨髓异常增生、恶性转化或其他疾病的可能性。
结果根据本次骨髓细胞学检验结果，我们得出以下结论：1.血细胞比例：–粒细胞比例：患者的粒细胞比例为60%，处于正常范围内，暂无异常发现。
2.红细胞比例：–红细胞比例为45%，处于正常范围内，暂无异常发现。
3.血小板比例：–血小板比例为180×10^9/L，处于正常范围内，暂无异常发现。
4.骨髓形态及异常情况：–细胞形态学观察显示骨髓细胞形态正常，未发现异常细胞形态或其他可疑病理改变。
建议根据本次骨髓细胞学检验结果，目前没有发现明显异常。
然而，骨髓细胞学检验结果需要综合临床病史和其他检查结果进行综合分析。
建议患者继续进行定期的骨髓细胞学检验，以及密切关注身体状况的变化。
如果出现任何新的症状或异常，建议及时就医咨询专业医生以获取进一步评估和治疗建议。
骨髓细胞学检查
骨髓细胞学检查
骨髓细胞学检查是一种用于诊断血液疾病的检查方法。
它可检测骨髓中的细胞形态、数量、种类等信息，从而确定疾病的类型和严重程度。
骨髓细胞学检查的步骤包括采集骨髓样本、制作骨髓涂片、染色和镜检等。
通过镜检，医生可以观察到骨髓中的细胞形态和数量，根据这些信息进行诊断。
骨髓细胞学检查可以用于诊断多种血液疾病，如白血病、淋巴瘤、骨髓增生异常综合症等。
它也可以用于监测疾病的进展和治疗效果。
然而，骨髓细胞学检查并非万能的诊断方法，有时还需要结合其他检查方法一起使用。
此外，骨髓细胞学检查采集骨髓样本可能会带来一定的疼痛和不适，需要患者配合医生进行操作。
总之，骨髓细胞学检查是一种重要的诊断方法，对于血液疾病的诊断和治疗具有重要意义。
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