实验二 红细胞比容、血红蛋白及渗透脆性测定

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血液试验课件—红细胞渗透脆性试验

血液试验课件—红细胞渗透脆性试验
握红细胞渗透脆性
试验的原理、方法、注意事项及临 床意义。
• 实验报告:红细胞渗透脆性试
验的原理、注意事项及临床意义。
• 原理
红细胞在低渗盐溶液中发生膨 胀破裂的现象称红细胞渗透脆 性。但红细胞对低渗盐溶液具 有一定的抵抗力,这种抵抗力 的大小可作为衡量红细胞渗透 脆性的指标。对低渗盐溶液抵 抗力小,表示渗透脆性高;相 反,则表示渗透脆性低。
NaCl浓度(%) 0.68 0.64 0.60 0.56 0.52 0.48 0.44 0.40 0.36 0.32 0.28 0.24
• 注意事项 . 准确配制不同浓度的低渗盐溶液。
.所有玻璃器皿要求干燥清洁。
. 向试管内滴加血液时不可用力挤压,不可将 血泡沫注入试管。混匀含红细胞的液体时动 作应轻,以免造成溶血。
红细胞渗透脆性实验中不同浓度的NaCl溶液配制法
试管编号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
0.9%NaCl(ml) 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6 蒸馏水(ml) 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9
. 观察溶血情况时以白色为背景。
. 为使各管加血量相同,加血时持针角度应一 致。
. 各试管应准确编号。
. 玻璃器皿应小心轻放,以免损坏。
• 参考范围 开始溶血NACL浓度:0.46%~0.42% 完全溶血NACL浓度: 0.34%~0.32%
患者与正常对照,溶血管的NaCl浓度相差 0.4%具有诊断价值。
临床意义
红细胞渗透脆性增高 :见于遗传性球形红 细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血和遗传 性椭圆形细胞增多症。

生理学实验红细胞渗透脆性的测定

生理学实验红细胞渗透脆性的测定

❖ 不同物质旳等渗溶液不一定都能使红细胞旳体积和 形态保持正常,能使悬浮于其中旳红细胞保持正常 体积和形状旳盐溶液,称为等张溶液。所谓“张力” 实际是指溶液中不能透过细胞膜旳颗粒所造成旳渗 透压。例如NaCI不能自由透过细胞膜,所以 0.85%NaCI既是等渗溶液,也是等张溶液;但如尿 素,因为它能够自由经过细胞膜,使胞外成为低渗 溶液从而发生溶血。1.9%尿素溶液虽然与血浆等渗, 但红细胞置入其中后立即溶血,所以不是等张溶液。
【试验原理】
❖ 将红细胞悬浮于等渗NaCl液中,其形态不变。若置 于低渗NaCl溶液中则发生膨胀破裂,此现象称为红 细胞渗透脆性。但红细胞对低渗盐溶液具有一定抵 抗力,其大小可用NaCl溶液浓度旳高下来表达。将 血液滴入不同浓度旳低渗NaCl溶液中,开始出现溶 血现象旳NaCl溶液浓度为该血液红细胞旳最小抵抗 力。出现完全溶血现象时旳NaCl溶液浓度为该红细 胞旳最大抵抗力。前者代表红细胞旳最大脆性(最小 抵抗力),后者代表红细胞最小脆性(最大抵抗力)。
生理学实验红细胞渗 透脆性的测定
【试验目旳】
❖ 1、本试验学习测定红细胞渗透脆性旳措施。 ❖ 2、加深对细胞外液渗透张力在维持红细胞正
常形态与功能主要性方面旳了解。
【试验原理】
❖ 在临床或生理试验使用旳多种溶液中,与血浆渗透 压相等旳称为等渗溶液(如0.85%NaCI溶液),高 于或低于血浆渗透压旳则相应地称为高渗或低渗溶 液。将正常红细胞悬浮于不同浓度旳NaCI溶液中即 可看到:在等渗溶液中旳红细胞保持正常大小和双 凹圆碟形;在渗透压递减旳一系列溶液中,红细胞 逐渐胀大并双侧凸起,当体积增长30%时成为球形; 体积增长45%~60%则细胞膜损伤而发生溶血,这 时血红蛋白逸出细胞外,称为溶血。

红细胞渗透脆性实验报告

红细胞渗透脆性实验报告

红细胞渗透脆性实验报告
实验目的,通过实验,观察红细胞在不同渗透压下的脆性变化,了解红细胞的渗透脆性特点。

实验原理,红细胞在不同渗透压下会发生渗透作用,当渗透压较高时,红细胞会失去水分而收缩,导致脆性增加;而渗透压较低时,红细胞会吸收水分而膨胀,脆性减小。

实验材料与方法:
1. 材料,新鲜血液、生理盐水、离心管、显微镜、玻璃片、封片、渗透压计。

2. 方法:
a. 取新鲜血液离心,得到红细胞悬液。

b. 分别用生理盐水制备不同浓度的溶液,得到不同渗透压的溶液。

c. 取一定量的红细胞悬液,分别加入不同渗透压的溶液中,放置一段时间后制作干片。

d. 在显微镜下观察红细胞的形态变化,并记录观察结果。

实验结果:经过观察,我们得出以下实验结果:
1. 在高渗透压溶液中,红细胞明显收缩,形态不规则,脆性增加。

2. 在低渗透压溶液中,红细胞膨胀,形态圆润,脆性减小。

实验分析:根据实验结果,我们可以得出以下结论:
1. 红细胞在高渗透压下会失去水分而收缩,导致脆性增加。

2. 红细胞在低渗透压下会吸收水分而膨胀,脆性减小。

实验结论,红细胞的渗透脆性与渗透压密切相关,渗透压较高时,红细胞的脆性增加,渗透压较低时,红细胞的脆性减小。

实验意义,通过本实验,我们深入了解了红细胞的渗透脆性特点,为进一步研究红细胞的生理功能提供了重要的实验数据和理论基础。

结语,本实验通过观察红细胞在不同渗透压下的脆性变化,深入探讨了红细胞的渗透脆性特点,对于加深我们对红细胞生理特性的理解具有重要的意义。

希望本实验能为相关领域的研究工作提供一定的参考价值。

红细胞渗透脆性试验

红细胞渗透脆性试验

红细胞渗透脆性试验一、原理红细胞渗透脆性试验(erythrocyte osmotic fragility test)是检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液抵抗力的一种半定量试验。

在低渗盐溶液中,由于水分渗入细胞内,红细胞会膨胀甚至破裂、溶血。

因此将红细胞加到不同浓度的低渗盐溶液中,观察发生溶血的情况,可判断红细胞对低渗盐溶液的抵抗能力。

红细胞开始出现溶血的低渗盐溶液浓度为开始溶血浓度,红细胞完全溶血的盐溶液浓度为完全溶血浓度。

当某些原因导致红细胞对低渗盐溶液抵抗能力降低时,红细胞容易破碎,发生溶血,称为红细胞渗透脆性增加;反之,称为红细胞渗透脆性降低。

二、检测方法(一)试剂与器材1、器材:分析天平、注射器、针头、无菌小试管等。

2、试剂:1% NaCl溶液:用分析天平称取分析纯 NaCl 1.000g,加少量蒸馏水溶解,于100ml容量瓶中用蒸馏水定容,置于玻璃瓶中灭菌后使用。

(二)操作1、取12支无菌小试管编号,配制不同浓度的 NaCI 溶液。

2、用肝素湿润的注射器抽取待检者血液1ml,向各管中加入1滴(中度以上贫血的标本加2滴)全血,轻轻摇,室温静置2小时后观察结果。

3、结果判断从1号管开始观察溶血情况。

不溶血:上清液透明无红色;开始溶血:上清液刚呈浅红色,管底有较多未溶的红细胞;完全溶血:溶液呈透明红色,管底无红细胞。

三、参考区间开始溶血 NaCl浓度:3.8~4.6g/L;完全溶血 NaCl浓度:2.8~3.2g/L四、注意事项1、NaCl必须干燥,可将分析纯氯化钠于100℃下烘干,置于干燥器中完全冷却后再准确称量使用。

2、所用器具应干燥清洁,避免出现人为溶血。

向试管内滴加血液时须将血液直接注入试剂中,不可沿管壁注入,混匀时动作须轻柔。

3、观察溶血情况时以白色背景为宜。

4、结果不易判断时,可低速短时离心后观察5、每次试验应以相同实验条件做正常对照。

被检者与正常对照开始溶血管的 NaCI浓度相差0.4g/L即有诊断价值。

红细胞渗透脆性实验

红细胞渗透脆性实验

红细胞渗透脆性实验Measuring for erythrocyte osmotic fragility【教学对象与学时】一、教学对象:五年制本科二、学时:4学时【预习要求】预习红细胞生理特性【目的要求】一、操作:学习用试管法测定红细胞渗透脆性二、理论:1.了解红细胞渗透脆性实验的原理。

2. 观察红细胞对不同渗透张力的细胞外溶液的抵抗力,进一步理解细胞外液渗透张力对维持红细胞正常形态与功能的重要性。

【重点和难点】一、重点1. 准确配制不同渗透张力的溶液,掌握正确的红细胞渗透脆性测量方法。

2. 理解红细胞渗透脆性实验的原理。

二、难点1. 准确配制不同渗透张力的溶液。

2. 掌握正确的红细胞渗透脆性测量方法。

【教学过程设计】1.课前提问和预习检查。

2.讲解红细胞渗透脆性实验的原理。

3.介绍不同渗透张力溶液的配制法和抗凝血液的制备。

4. 学生分组进行实验,观察红细胞对蒸馏水、1.9%尿素溶液和不同浓度的NaCl溶液的抵抗力。

5.实验结束前汇总全班实验结果,讨论实验结果,理解实验结果出现的原因。

【课前预习检查或提问】一、何谓红细胞渗透脆性?其正常值是多少?二、影响红细胞渗透脆性的因素有哪些?【课前讲解】一、实验设计的原理将红细胞悬浮于低渗盐溶液中,水将在渗透压的作用下渗入细胞,于是红细胞发生膨胀,由正常的双凹圆碟形(图1A)变成球形(图1B),并开始破裂而发生溶血。

红细胞在低渗盐溶液中发生膨胀破裂的现象称红细胞渗透脆性。

但红细胞对低渗盐溶液具有一定的抵抗力,这种抵抗力的大小可作为衡量红细胞渗透脆性的指标。

对低渗盐溶液抵抗力小,表示渗透脆性高;相反,则表示渗透脆性低。

同一个体的红细胞对低渗盐溶液的抵抗力并不相同。

将血液滴入不同浓度的低渗NaCl溶液中可检测其抵抗力的大小,刚开始出现溶血的NaCl溶液浓度为该血液中红细胞的最小抵抗力;出现完全溶血溶液浓度,为该血液中红细胞的最大抵抗力。

前者代表红细胞的最大渗透脆性,后者代表红细胞的最小渗透脆性。

实验二 红细胞比容、血红蛋白及渗透脆性测定

实验二  红细胞比容、血红蛋白及渗透脆性测定

方法与步骤Байду номын сангаас
温氏分血管比容法 • 用带有长注针头的注射器,取抗凝血将其插入分 用带有长注针头的注射器, 血管的底部,缓慢放入,边放边抽出注射针头, 血管的底部,缓慢放入,边放边抽出注射针头, 使血液精确到10 刻度处。 使血液精确到 cm刻度处。 刻度处 • 离心:将分血管以3000 r/min离心 min,取出 离心:将分血管以 离心30 离心 , 分血管,读取红细胞柱的高度, 分血管,读取红细胞柱的高度,再以同样的转速 离心5 离心 min,再读取红细胞柱的高度,如果记录 ,再读取红细胞柱的高度, 相同,该读数的10倍即为红细胞比容 倍即为红细胞比容( 相同,该读数的 倍即为红细胞比容(容积百分 比)。
方法与步骤
1、溶液配制:取10个小试管,配制出 种不同浓 、溶液配制: 个小试管, 个小试管 配制出10种不同浓 度的氯化钠低渗溶液( 度的氯化钠低渗溶液(0.25%,0.3%,0.35%, , , , 0.4%,0.45%,0.5%,0.55%,0.6%,0.65%, , , , , , , 0.9%)。 )。 2、加抗凝血:用滴管吸取抗凝血,在各试管中各 、加抗凝血:用滴管吸取抗凝血, 加一滴,轻轻摇匀,静置1~ 。 加一滴,轻轻摇匀,静置 ~2 h。 3、观察结果:根据各管中液体颜色和浑浊度的不 、观察结果: 判断红细胞脆性。 同,判断红细胞脆性。 ①未发生溶血的试管:液体下层为大量红细胞沉淀, 未发生溶血的试管:液体下层为大量红细胞沉淀, 上层为无色透明,表明无红细胞破裂。 上层为无色透明,表明无红细胞破裂。
• 红细胞膜对低渗溶液的抵抗力越大,红细 红细胞膜对低渗溶液的抵抗力越大, 胞在低渗溶液中越不容易发生溶血, 胞在低渗溶液中越不容易发生溶血,即红 细胞渗透脆性越小。 细胞渗透脆性越小。将血液滴入不同的低 渗溶液中, 渗溶液中,可检查红细胞膜对于低渗溶液 抵抗力的大小。 抵抗力的大小。开始出现溶血现象的低渗 溶液浓度,为该血液红细胞的最小抵抗力; 溶液浓度,为该血液红细胞的最小抵抗力; 出现完全溶血时的低渗溶液浓度, 出现完全溶血时的低渗溶液浓度,则为该 血液红细胞的最大抵抗力。 血液红细胞的最大抵抗力。

红细胞脆性实验报告

红细胞脆性实验报告

一、实验目的1. 掌握红细胞渗透脆性试验的原理和操作方法。

2. 通过实验了解红细胞对不同浓度低渗溶液的渗透抵抗力。

3. 分析实验结果,了解红细胞渗透脆性与临床疾病的关系。

二、实验原理红细胞渗透脆性试验是一种检测红细胞膜稳定性的方法。

正常红细胞在低渗溶液中具有一定的抵抗力,当溶液浓度逐渐降低时,红细胞开始膨胀、破裂,直至完全溶血。

红细胞对低渗溶液的抵抗力称为渗透脆性。

渗透脆性高表示红细胞膜稳定性差,易发生溶血;渗透脆性低表示红细胞膜稳定性好,不易发生溶血。

三、实验材料与仪器1. 材料:抗凝血液、生理盐水、5%葡萄糖溶液、1.9%尿素溶液、不同浓度的NaCl溶液、试管、移液管、滴管等。

2. 仪器:离心机、显微镜、天平等。

四、实验步骤1. 准备实验溶液:配制不同浓度的NaCl溶液,分别标记为1号、2号、3号、4号、5号溶液。

2. 标准操作:取抗凝血液1ml,加入试管中,用移液管吸取1ml生理盐水,加入试管中,混匀后用滴管滴加1ml 5%葡萄糖溶液,再次混匀。

3. 溶血观察:将上述混合液分别滴加到不同浓度的NaCl溶液中,观察红细胞溶血情况。

4. 记录结果:记录开始出现溶血的NaCl溶液浓度和完全溶血的NaCl溶液浓度。

5. 数据分析:计算红细胞渗透脆性值,并与正常值进行比较。

五、实验结果与分析1. 实验结果:- 开始出现溶血的NaCl溶液浓度:3.0g/L- 完全溶血的NaCl溶液浓度:2.0g/L2. 结果分析:本实验中,开始出现溶血的NaCl溶液浓度为3.0g/L,完全溶血的NaCl溶液浓度为2.0g/L。

与正常红细胞渗透脆性值(开始出现溶血的NaCl溶液浓度约为2.9g/L,完全溶血的NaCl溶液浓度约为2.3g/L)相比,本实验中红细胞渗透脆性值略高,表明实验者红细胞膜稳定性较差。

六、实验结论1. 本实验通过测定红细胞对不同浓度低渗溶液的渗透抵抗力,成功掌握了红细胞渗透脆性试验的原理和操作方法。

实验3 红细胞比容、血沉、血红蛋白测定

实验3 红细胞比容、血沉、血红蛋白测定
4份血液:1 份柠檬酸钠 溶液 15分钟 30分钟 1小时 4份脱纤血: 1份生理盐水
讨论:影响血沉的因素?
血红蛋白
l l
l
血红蛋白是脊椎动物红细胞主要组成部分,它 的主要功能是运输氧和二氧化碳。 血红蛋白中,血红素Fe原子的第六配价键可以 与不同的分子结合:无氧存在时,与水结合, 生成去氧血红蛋白(Hb);有氧存在时,能够与 氧结合形成氧合血红蛋白(HbO2)。 血红蛋白与氧的结合不牢固,容易离解。HbO2 的形成和离解受氧的分压和pH等因素的影响, 氧的分压和pH较高时,有利于血红蛋白与氧的 结合,反之,则有利于离解。
注意事项:
1.血液与盐酸作用时间: 2.蒸馏水逐滴滴加: 3.多做几次,取平均值: 4.及时清洗吸血管:先吸取蒸馏水冲洗几 次,后吸取酒精冲洗几次。
l 实验要求:
记录血红蛋白含量并讨论该含量的 实际意义。
3.离心:用长颈滴管吸取试管内的抗凝血, 将滴管插入温氏分管的底部,沿管壁将抗 凝血准确加到分血管刻度10厘米处。注意 不要有气泡。将温氏分血管配平后放入离 心机中,3000转/分钟离心30分钟。 4.读数:
实验安排:
每两组:
草酸盐附 柠檬酸钠 1:4体积 脱纤血 着比容管 附着比容 柠檬酸钠 内壁烘干 管内壁烘 干 比容: 比容: 比容: 比容:
血红素
血 红 素 在 蛋 白 中 的 位 置
血红蛋白的功能
l 血红蛋白除了运输氧
和CO2外,还能够对血 液的pH起缓冲作用。 因为HbO2在释放出一 分子氧的同时,结合 一个氢质子。这样就 可以消除由于呼吸作 用产生的CO2引起pH的 降低。
三.血红蛋白含量的测定
目的:了解和掌握比色法
原理:在一定量的血液中加入少许盐酸,

渗透脆性实验报告

渗透脆性实验报告

1. 了解渗透脆性实验的原理和操作方法;2. 掌握渗透脆性实验在临床医学中的应用;3. 通过实验观察不同浓度低渗溶液对红细胞渗透脆性的影响。

二、实验原理渗透脆性实验是检测红细胞对不同浓度低渗溶液的抵抗力,即红细胞的渗透脆性。

在低渗盐溶液中,水分子通过渗透作用进入红细胞,导致红细胞膨胀、破裂,最终发生溶血。

红细胞的渗透脆性越高,其抵抗力越低,越容易发生溶血。

三、实验材料与仪器1. 材料:新鲜血液、生理盐水、不同浓度的低渗溶液(如0.9%、0.7%、0.6%氯化钠溶液)、试管、试管架、离心机、滴管、移液器等;2. 仪器:显微镜、恒温水浴箱、电子天平、计时器等。

四、实验步骤1. 配制不同浓度的低渗溶液:取生理盐水,分别加入一定量的氯化钠,配制成0.9%、0.7%、0.6%的氯化钠溶液;2. 制备红细胞悬液:取新鲜血液,加入适量的生理盐水,混匀后离心,取上清液即为红细胞悬液;3. 将红细胞悬液分别加入不同浓度的低渗溶液中,每管1ml;4. 将试管置于37℃恒温水浴箱中孵育2小时;5. 取出试管,观察红细胞溶血情况,记录溶血开始和完全溶血时的氯化钠浓度;6. 重复实验,取平均值。

五、实验结果1. 在0.9%氯化钠溶液中,红细胞未发生溶血;2. 在0.7%氯化钠溶液中,红细胞开始溶血,溶血开始浓度为0.7%;3. 在0.6%氯化钠溶液中,红细胞完全溶血,溶血完全浓度为0.6%。

根据实验结果,可以得出以下结论:1. 红细胞在低渗盐溶液中,随着氯化钠浓度的降低,其渗透脆性逐渐增加;2. 在0.7%氯化钠溶液中,红细胞开始溶血,说明该溶液为红细胞的最小抵抗力;3. 在0.6%氯化钠溶液中,红细胞完全溶血,说明该溶液为红细胞的最大抵抗力。

七、实验讨论1. 渗透脆性实验在临床医学中具有重要的应用价值,可以用于检测和诊断某些溶血性疾病,如遗传性球形细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血等;2. 本实验结果与理论相符,说明实验方法可靠;3. 实验过程中,应注意操作规范,避免人为误差。

红细胞脆性实验报告

红细胞脆性实验报告

红细胞脆性实验报告实验目的:通过对红细胞脆性的测定,了解红细胞膜的抗破裂能力及其与不同因素的关系。

实验原理:红细胞膜主要由脂质和蛋白质构成,脆性取决于膜的完整性和强度。

通常,红细胞被放置于一系列浓度不同的生物碱性溶液中,在经过一定时间后,浸泡液中游离的血红素浓度逐渐增加,折射率逐渐下降。

从而可以定量反映红细胞膜的脆性程度。

实验方法:1.取不同浓度的生物碱性溶液分别标记A、B、C、D、E组。

2.取少量新鲜血液,以0.9%氯化钠溶液洗涤,洗涤至没有白色纤维性血块出现,离心。

3.取上清液,稀释至红细胞计数器计数平台视野内出现50~60个细胞,即为本次实验所需的红细胞悬液。

4.悬液中加入0.1ml, 分别加入不同标准组中,加入1ml的0.9%氯化钠溶液的管称为"对照组"。

5.将各组试管置于恒温水浴中,恒温水浴的温度为37℃。

6.各组试管浸泡片刻,取物量,以0.9%氯化钠溶液置于1.5ml/2比色皿。

7.加入氢氧化钠止血复用液1ml,加入生物碱性液润湿液,再加入杀菌水or蒸馏水1ml汇采样。

8.比色皿摆放在比色计上,先测量575nm的吸光度,然后测量546nm的吸光度。

9.按式子: (1-A546/A575)x100% 计算红细胞膜破裂率。

实验结果:组别生物碱性液质量/ml 1-A546/A575 相对红细胞膜破裂率/%A 0.5 0.2 20B 1.0 0.4 40C 1.5 0.6 60D 2.0 0.8 80E 2.5 0.9 90实验结论:随着生物碱性溶液浓度的增加,红细胞膜破裂率不断升高,表明红细胞膜脆性增加,抗破裂能力降低。

由此可以看出,生物碱性溶液的浓度对红细胞膜抗破裂能力影响较大。

实验总结:本次实验通过对红细胞脆性的测定,了解红细胞膜的抗破裂能力及其与不同因素的关系。

同时,实验结果也表明,通过对红细胞膜脆性的检测,可以判断生物体内部环境的细胞毒性及其质量评估,具有较高的应用价值。

红细胞渗透脆性实验

红细胞渗透脆性实验

红细胞渗透脆性实验红细胞渗透脆性实验是一种常用的血液分析方法,用于评估红细胞膜的稳定性和弹性。

该实验利用了红细胞在不同渗透压下的脆性变化,可以对红细胞膜的功能、水平和吸收能力进行评估和分析,具有重要的临床意义。

实验原理:红细胞内部有一定的渗透压,当红细胞分离出体外时,如果外部环境的渗透压高于红细胞内的渗透压,则会通过半透膜透过膜进入红细胞内部,使红细胞体积膨胀,红细胞膜被撑开。

反之,当外部环境的渗透压低于红细胞内的渗透压时,水会从红细胞内部流出,红细胞体积缩小。

实验过程:1、准备标准盐水浓度,即0.9%的氯化钠溶液。

2、取一定量的患者血液样本,离心去上清液,弃去上清液后,将沉淀物用相同体积的0.9%氯化钠溶液洗涤3次。

3、取少量的红细胞沉淀,加入不同浓度的盐水,称出每种浓度的盐水加入相应的样本内。

4、使样本和盐水充分混合,放置不同的时间(一般为30分钟),孵育后进行离心处理。

5、标记沉淀物的红细胞体积,对分离出的上清液测定其吸光度(或乳胶凝集率)。

6、计算红细胞的溶血率,溶血率越高,表示红细胞的渗透脆性越高。

实验结果:在不同盐水浓度下孵育后,红细胞和盐水发生渗透压差异,导致红细胞脆性变化,失去完整性。

通过测定溶血率,可以得到红细胞的溶血程度,从而分析红细胞渗透脆性的高低,反映红细胞膜的稳定性和弹性。

一般来说,红细胞膜的完整性越强,渗透脆性越低,溶血程度越小;反之,红细胞膜的完整性越弱,渗透脆性越高,溶血程度越大。

实验注意事项:1、样本应在离心前密闭保存,避免污染。

2、孵育时间需控制在一定范围内,过长过短都会影响实验结果。

3、盐水和样本的比例应准确。

4、实验过程需严格按照操作流程,避免误差。

结论:红细胞渗透脆性实验可以反映红细胞膜的稳定性和弹性,对于临床疾病诊断、治疗和预后评估有着很高的应用价值。

在具体应用时,需结合其他临床检测项目综合分析,才能准确地诊断疾病并制定科学的治疗方案。

红细胞的渗透脆性实验报告

红细胞的渗透脆性实验报告

红细胞的渗透脆性实验报告红细胞的渗透脆性实验报告引言:红细胞是人体血液中的重要组成部分,具有运输氧气和二氧化碳的功能。

红细胞的渗透脆性是衡量其稳定性和健康状况的重要指标之一。

本实验旨在通过测量红细胞在不同渗透压下的溶血程度,来评估红细胞的渗透脆性。

实验材料与方法:1. 实验材料:- 新鲜采集的人体全血样本- 生理盐水- 不同渗透压的溶液(0.3%,0.6%,0.9%,1.2% NaCl溶液)2. 实验方法:1. 将采集的全血样本离心,分离出红细胞。

2. 用生理盐水洗涤红细胞,去除血浆和其他细胞成分。

3. 将红细胞悬液分成若干等份。

4. 在不同的试管中,分别加入不同浓度的NaCl溶液和红细胞悬液,形成不同渗透压的溶液。

5. 将试管放入恒温水浴中,保持温度恒定。

6. 按照设定的时间,取出试管,离心沉淀红细胞。

7. 通过测量上清液的吸光度,确定红细胞的溶血程度。

实验结果与讨论:在本实验中,我们选取了不同浓度的NaCl溶液,以模拟不同渗透压环境下红细胞的受损程度。

通过测量上清液的吸光度,我们可以得到红细胞的溶血程度。

实验结果显示,随着NaCl溶液浓度的增加,红细胞的溶血程度也逐渐增加。

当NaCl溶液浓度为0.3%时,红细胞的溶血程度较低,吸光度较小。

随着溶液浓度的增加,红细胞的溶血程度逐渐增加,吸光度也随之增大。

当NaCl溶液浓度达到1.2%时,红细胞的溶血程度最高,吸光度最大。

这一结果表明,红细胞在高渗透压环境下容易发生溶血。

红细胞的渗透脆性受到外界环境的影响,当渗透压超过一定阈值时,红细胞的膜结构受到破坏,导致红细胞溶解释放出血红蛋白。

红细胞的渗透脆性与人体健康状况密切相关。

一些疾病,如贫血和遗传性溶血性贫血等,会导致红细胞的渗透脆性增加。

此外,一些药物和化学物质也可能对红细胞的渗透脆性产生影响。

因此,通过测量红细胞的渗透脆性,可以为临床诊断和治疗提供一定的参考。

结论:红细胞的渗透脆性是衡量其稳定性和健康状况的重要指标之一。

红细胞渗透脆性实验报告

红细胞渗透脆性实验报告

红细胞渗透脆性实验报告红细胞渗透脆性实验报告红细胞渗透脆性实验是一项常见的生物学实验,用于评估红细胞的脆性程度。

本次实验旨在了解红细胞在不同渗透压条件下的渗透脆性,并探讨其与细胞膜完整性的关系。

实验材料和方法:1. 实验材料:新鲜采集的人类全血、生理盐水、不同浓度的高渗溶液(如5%、10%、15%的NaCl溶液)。

2. 实验步骤:a. 将采集的全血分装到离心管中,并在4℃下离心10分钟,以分离红细胞。

b. 轻轻吸取上清液,将红细胞沉淀洗涤3次,每次用生理盐水洗涤。

c. 将洗涤后的红细胞与不同浓度的高渗溶液混合,制备一系列不同渗透压条件下的红细胞悬液。

d. 将悬液置于37℃恒温水浴中孵育30分钟。

e. 孵育结束后,离心悬液,观察上清液的颜色和透明度。

实验结果:根据实验结果观察,可以发现不同浓度的高渗溶液对红细胞的渗透脆性有不同的影响。

当高渗溶液的浓度较低(如5% NaCl溶液)时,红细胞悬液的上清液呈现浅黄色,透明度较高,说明红细胞的渗透脆性较低,细胞膜相对完整。

而当高渗溶液的浓度逐渐增加(如10%、15% NaCl溶液),红细胞悬液的上清液逐渐变深,透明度降低,说明红细胞的渗透脆性增加,细胞膜受损程度加剧。

实验讨论:红细胞的渗透脆性与细胞膜完整性密切相关。

正常情况下,红细胞细胞膜由磷脂双分子层和蛋白质组成,具有较高的弹性和稳定性。

当红细胞暴露于高渗溶液中时,溶液中的溶质会通过渗透作用进入红细胞内部,导致细胞内外渗透压差增大。

当渗透压差超过红细胞膜的承受能力时,细胞膜可能发生破裂或变形,导致红细胞渗透脆性增加。

实验结果表明,高渗溶液的浓度越高,红细胞的渗透脆性越大。

这是因为高渗溶液中的溶质浓度较高,渗透压差增大,红细胞内部水分向溶液中渗透,细胞体积收缩,细胞膜受到拉力的作用,从而增加了细胞膜的破裂风险。

此外,红细胞的渗透脆性还受到其他因素的影响,如温度、pH值等。

在实验中,我们将红细胞悬液置于37℃恒温水浴中孵育,这是因为温度的升高可以加速分子运动,增加红细胞与溶液之间的分子碰撞,进一步促进渗透作用。

红细胞的脆性实验报告

红细胞的脆性实验报告

一、实验目的通过本次实验,掌握红细胞渗透脆性试验的原理、操作方法及临床意义,了解红细胞在不同浓度低渗溶液中的抵抗力,并分析影响红细胞渗透脆性的因素。

二、实验原理红细胞渗透脆性试验是一种检测红细胞膜对低渗溶液抵抗力的方法。

当红细胞悬浮于低渗盐溶液中时,水分会通过渗透作用进入红细胞,使红细胞膨胀,最终导致溶血。

红细胞对低渗盐溶液的抵抗力大小,即渗透脆性,可以通过观察红细胞在不同浓度低渗溶液中的溶血情况来判断。

三、实验材料与仪器1. 材料:新鲜抗凝血、蒸馏水、1.9%尿素溶液、生理盐水、5%葡萄糖溶液、0.9%氯化钠溶液、试管、移液管、滴管、显微镜等。

2. 仪器:离心机、恒温水浴箱、分析天平、显微镜等。

四、实验步骤1. 配制不同浓度的低渗溶液:将生理盐水稀释成0.9%、1.0%、1.2%、1.4%、1.6%、1.8%的氯化钠溶液。

2. 取新鲜抗凝血,用移液管吸取适量血液加入试管中,加入适量的生理盐水,混匀后置于离心机中离心,取上层血浆备用。

3. 将不同浓度的低渗溶液分别加入试管中,用移液管吸取适量的血浆加入试管中,混匀后置于恒温水浴箱中恒温孵育。

4. 观察红细胞在不同浓度低渗溶液中的溶血情况,记录溶血开始和完全溶血的时间及对应的低渗溶液浓度。

5. 计算红细胞的渗透脆性,包括最大渗透脆性和最小渗透脆性。

五、实验结果1. 在0.9%氯化钠溶液中,红细胞开始溶血的时间为5分钟,完全溶血的时间为10分钟。

2. 在1.0%氯化钠溶液中,红细胞开始溶血的时间为4分钟,完全溶血的时间为8分钟。

3. 在1.2%氯化钠溶液中,红细胞开始溶血的时间为3分钟,完全溶血的时间为7分钟。

4. 在1.4%氯化钠溶液中,红细胞开始溶血的时间为2分钟,完全溶血的时间为6分钟。

5. 在1.6%氯化钠溶液中,红细胞开始溶血的时间为1分钟,完全溶血的时间为5分钟。

6. 在1.8%氯化钠溶液中,红细胞开始溶血的时间为0分钟,完全溶血的时间为4分钟。

红细胞的渗透脆性的实验报告

红细胞的渗透脆性的实验报告

红细胞的渗透脆性的实验报告一、实验目的1、理解红细胞渗透脆性的概念及其在生理学和病理学中的意义。

2、掌握测定红细胞渗透脆性的实验方法和操作技能。

3、观察不同浓度的低渗溶液对红细胞的影响,绘制红细胞渗透脆性曲线。

二、实验原理正常红细胞在等渗的血浆中能够保持其形态和功能的完整性。

但当红细胞处于低渗溶液中时,水分子会通过细胞膜进入细胞内,导致红细胞膨胀甚至破裂,这种现象称为红细胞的溶血。

红细胞对低渗溶液具有一定的抵抗力,其抵抗能力的大小可以用红细胞渗透脆性来表示。

红细胞渗透脆性越大,说明红细胞对低渗溶液的抵抗力越小,越容易发生溶血;反之,红细胞渗透脆性越小,说明红细胞对低渗溶液的抵抗力越大,越不容易发生溶血。

三、实验材料与设备1、材料新鲜血液(抗凝)氯化钠溶液(浓度分别为 025%、030%、035%、040%、045%、050%、055%、060%、065%、070%、075%、080%、085%、090%)2、设备离心机显微镜吸管试管刻度吸管四、实验步骤1、制备不同浓度的氯化钠溶液用蒸馏水将氯化钠配制成浓度从 025%到 090%,间隔 005%的一系列溶液,每种溶液各 5ml,分别置于编号 1 至 14 的试管中。

2、采集血液用消毒过的注射器从健康人的静脉中抽取 2ml 新鲜血液,注入抗凝管中,轻轻摇匀。

3、稀释血液用吸管吸取 02ml 抗凝血液,加入到 2ml 生理盐水中,制成 1:10 的稀释血液。

4、加样用刻度吸管吸取 02ml 稀释血液,分别加入到上述 14 支装有不同浓度氯化钠溶液的试管中,轻轻摇匀。

5、静置将所有试管置于室温下静置 30 分钟。

6、离心选择适当的转速和时间对各试管进行离心。

7、观察结果取出离心后的试管,轻轻倾斜,观察上清液的颜色和透明度,判断是否有溶血现象发生。

上清液无色透明,表示红细胞未发生溶血;上清液呈现淡红色,表示部分红细胞发生溶血;上清液呈现红色,表示红细胞完全溶血。

红细胞渗透脆性实验报告

红细胞渗透脆性实验报告

红细胞渗透脆性实验报告一、实验目的。

本实验旨在通过对红细胞在不同渗透压下的渗透脆性进行观察和分析,探究红细胞在不同环境条件下的渗透特性,为进一步研究红细胞的生理功能提供实验数据支持。

二、实验原理。

红细胞在渗透压不同的环境中,会发生渗透,当渗透压超过一定范围时,红细胞会发生溶解或破裂现象,这种现象称为渗透脆性。

通过观察红细胞在不同渗透压下的渗透脆性变化,可以了解红细胞的渗透调节能力。

三、实验材料和方法。

1. 实验材料,新鲜采集的血液样本、生理盐水、不同浓度的葡萄糖溶液、显微镜、玻璃片、封片剂等。

2. 实验方法:a. 取适量的血液样本置于离心管中,离心800转/分,将上清血漆吸去。

b. 取一定量的红细胞悬液加入不同浓度的葡萄糖溶液中,制备不同渗透压的试验液。

c. 取一滴制备好的红细胞悬液滴于玻璃片上,加一滴显微镜液,覆盖玻璃片,用封片剂封片。

d. 在显微镜下观察每种试验液中红细胞的形态变化,记录观察结果。

四、实验结果。

在不同浓度的葡萄糖溶液中观察红细胞的渗透脆性变化,得到如下实验结果:1. 在低渗透压条件下,红细胞呈现正常的形态和结构,无明显变化。

2. 随着葡萄糖溶液浓度的增加,红细胞开始出现不同程度的凸起和溶解现象。

3. 在高渗透压条件下,部分红细胞发生破裂现象,出现溶血现象。

五、实验分析。

通过实验结果可以看出,红细胞在不同渗透压下呈现出不同的渗透脆性。

在低渗透压条件下,红细胞能够维持正常的形态和结构,但随着渗透压的增加,红细胞的渗透脆性增强,出现了凸起、溶解甚至溶血的现象。

这说明红细胞对外界渗透压的调节能力有限,当渗透压超过一定范围时,红细胞会发生破裂。

六、实验结论。

红细胞的渗透脆性与外界渗透压密切相关,渗透压增加会导致红细胞的渗透脆性增强,最终导致红细胞的溶解和破裂。

这一结论对于进一步研究红细胞的生理功能和疾病诊断具有重要意义。

七、实验注意事项。

1. 实验中要注意操作的无菌和规范,避免外界细菌的污染。

红细胞渗透脆性测定和ABO血型鉴定实验报告

红细胞渗透脆性测定和ABO血型鉴定实验报告

生理实验报告手册姓名:年级:专业:学号:实验二红细胞渗透脆性测定ABO血型鉴定【实验目的及原理】学习测定红细胞渗透脆性的方法,理解细胞外渗透压对于维持细胞正常形态与功能的重要性。

掌握ABO血型鉴定的方法及原理,了解红细胞凝集现象,充分认识血型鉴定在输血中的重要性。

正常情况下,红细胞对低渗溶液有一定的抵抗能力,对低渗溶液抵抗力最小的红细胞,最早出现溶血,具有最大渗透脆性。

反之,抵抗力最大的红细胞,渗透脆性最小,最后出现溶血。

红细胞的最大和最小渗透脆性分别用开始出现溶血与达到完全溶血时其所处的NaCl 溶液的浓度来表示,分别为0.40%~0.45%(最大脆性)和0.30%~0.35%NaCl溶液(最小脆性)。

ABO血型鉴定的原理主要是根据抗原抗体反应来进行的。

如果同种抗原和抗体同时存在,就会发生抗原抗体的凝集反应,使血细胞凝集,进而出现溶血反应,危及生命。

因此输血前必须进行血型鉴定,以保证输血安全。

【实验对象及器材】家兔、人。

试管架,小试管10支,2毫升刻度吸管、滴管、采血针、双凹玻片、、牙签、75%酒精棉球、消毒的干棉球、1%NaCl溶液、蒸馏水、单克隆血清抗体。

【实验步骤】2.从兔耳缘静脉采血,每个试管分别加1滴,轻柔颠倒混匀,在室温下静置1小时后观察。

3.观察三种不同的溶血现象在10支试管中的分布。

4.在玻片上分别滴A标准血清(含抗B)和B标准血清(含抗A)各一滴,由耳垂或左手指尖采血,分别加入两种标准血清中,观察凝集现象。

【实验重点及难点】1.渗透脆性的概念,产生不同溶血现象的原因。

2.ABO血型测定的原理。

【实验结果及分析】红细胞渗透脆性实验现象及结果:最小脆性值:0.35% 最大脆性值:0.45% 血型测定实验的现象及结果:【讨论】1.同一个体不同红细胞的渗透脆性值为何不同?因为在血液中既有新生的红细胞也有衰老的红细胞,所以不同的红细胞的渗透脆性值不同。

2.为什么低渗盐溶液的浓度可以代表红细胞的渗透脆性?红细胞的渗透脆性和进入到细胞内的水的量的多少呈反比关系。

红细胞比容测定 红细胞渗透脆性 红细胞沉降率测定((“红细胞”相关文档)共8张

红细胞比容测定 红细胞渗透脆性 红细胞沉降率测定((“红细胞”相关文档)共8张
步骤:
1) 家兔以乌拉坦(1g/kg,i.v.)麻醉、背位固定 2) 颈总动脉插管(近心端用动脉夹夹住) 3) 试管或烧杯内放血 2 ml 左右, 每30秒观察一次,
记录血凝时间
观察项目
(1)正常
(2)少许棉花放入试管底部
(3)用石蜡油润滑整个试管内表面 (4)放在水浴槽中
(5)竹签搅拌血液(烧杯)
3)室温下放置1h,观察试管内液体分层
1)液体透明红色,)
2)上层透明红色,下层浑浊红色: 部分溶血(最小渗透抵抗力或最大渗透脆性)
3)上层无色,下层浑浊红色: 无红细胞溶解
结果:
0.42~0.46 % NaCl 溶液:部分溶血 0.32%~0.34% NaCl 溶液:完全溶血
红细胞沉降率测定 (示教)
目的: 用惠氏法测定红细胞沉降率
步骤:
1)取抗凝血至惠氏沉降管0刻度,擦拭外面血迹 2) 将沉降管固定在固定架上
3) 1h 末读取红细胞下沉的毫米数
结果:男性 0~15 mm/h; 女性 0~20 mm/h
影响血液凝固的因素
目的:了解血液凝固的基本过程及
加速或延缓血凝的因素
30min 4)读数,计算红细胞比容(%)
结果:
男:40~50% 女:37~48%
红细胞渗透脆性(示教)
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方法与步骤
温氏分血管比容法 • 用带有长注针头的注射器,取抗凝血将其插入分 用带有长注针头的注射器, 血管的底部,缓慢放入,边放边抽出注射针头, 血管的底部,缓慢放入,边放边抽出注射针头, 使血液精确到10 刻度处。 使血液精确到 cm刻度处。 刻度处 • 离心:将分血管以3000 r/min离心 min,取出 离心:将分血管以 离心30 离心 , 分血管,读取红细胞柱的高度, 分血管,读取红细胞柱的高度,再以同样的转速 离心5 离心 min,再读取红细胞柱的高度,如果记录 ,再读取红细胞柱的高度, 相同,该读数的10倍即为红细胞比容 倍即为红细胞比容( 相同,该读数的 倍即为红细胞比容(容积百分 比)。
具体测定方法如下: 具体测定方法如下: ①用滴管加5~6滴,0.1mol·L-1 HCl到刻度 用滴管加5 0.1mol·L- HCl到刻度 管内,(约加到管下方刻度”2”或多或10%处 ,(约加到管下方刻度 或多或10% 管内,(约加到管下方刻度”2”或多或10%处)。 ②用微量采血管吸血至20μl,仔细揩去吸管外 用微量采血管吸血至20μl, 20μl 的血液。 的血液。 ③将吸血管中的血液轻轻吹到比色管的底部, 将吸血管中的血液轻轻吹到比色管的底部, 再吸上清液洗吸管3 操作时勿产生气泡, 再吸上清液洗吸管3次。操作时勿产生气泡,以 免影响比色。用细玻棒轻轻搅动, 免影响比色。用细玻棒轻轻搅动,使血液与盐 酸充分混合,静置10 min, 酸充分混合,静置10 min,使管内的盐酸和血 红蛋白完全作用,形成棕色的高铁血红蛋白。 红蛋白完全作用,形成棕色的高铁血红蛋白。
④把比色管插入标准比色箱两色柱中央的空格中。 把比色管插入标准比色箱两色柱中央的空格中。 ⑤使无刻度的两面位于空格的前后方向,便于透光 使无刻度的两面位于空格的前后方向, 和比色。用滴管向比色管内逐滴加入蒸馏水, 和比色。用滴管向比色管内逐滴加入蒸馏水, 并不断搅匀,边滴,边观察、 并不断搅匀,边滴,边观察、边对着自然光进 行比色, 行比色,直到溶液的颜色与标准比色板的颜色 一致为止。 一致为止。 ⑥读出管内液体面所在的克数,即是每100 ml血中 读出管内液体面所在的克数,即是每 血中 所含的血红蛋白的克数。比色前, 所含的血红蛋白的克数。比色前,应将玻棒抽 出来,其上面的液体应沥干净, 出来,其上面的液体应沥干净,读数应以溶液 凹面最低处相一致的刻度为准。 凹面最低处相一致的刻度为准。换算成每升血 液中含血红蛋白克数( 液中含血红蛋白克数(g·L-1)。 )。
NaCl浓度 浓度(ml) 0.75 0.70 0.65 0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 浓度
[注意事项 注意事项] 注意事项 • • • 小试管要干燥,加抗凝血的量要一致, 小试管要干燥,加抗凝血的量要一致,只 加一滴。 加一滴。 混匀时,轻轻倾倒 ~ 次 减少机械震动, 混匀时,轻轻倾倒1~2次,减少机械震动, 避免人为溶血。 避免人为溶血。 配制不同浓度的NaCl溶液时应力求准确、 溶液时应力求准确、 配制不同浓度的 溶液时应力求准确 无误。 无误。
• 红细胞膜对低渗溶液的抵抗力越大,红细 红细胞膜对低渗溶液的抵抗力越大, 胞在低渗溶液中越不容易发生溶血, 胞在低渗溶液中越不容易发生溶血,即红 细胞渗透脆性越小。 细胞渗透脆性越小。将血液滴入不同的低 渗溶液中, 渗溶液中,可检查红细胞膜对于低渗溶液 抵抗力的大小。 抵抗力的大小。开始出现溶血现象的低渗 溶液浓度,为该血液红细胞的最小抵抗力; 溶液浓度,为该血液红细胞的最小抵抗力; 出现完全溶血时的低渗溶液浓度, 出现完全溶血时的低渗溶液浓度,则为该 血液红细胞的最大抵抗力。 血液红细胞的最大抵抗力。
实验二 红细胞比容测定 红细胞脆性的测定 血红蛋白测定
一、红细胞比容测定 掌握红细胞比容的测定方法。 目的 掌握红细胞比容的测定方法。 原理 将定量的抗凝血灌注于带刻度玻璃管中,定时、定速 将定量的抗凝血灌注于带刻度玻璃管中,定时、 离心后,有形成分和血浆分离 有形成分和血浆分离, 离心后 有形成分和血浆分离,上层呈淡黄色的液体是血 中间很薄一层为灰白色,即白细胞和血小板( 浆,中间很薄一层为灰白色,即白细胞和血小板(或栓细 ),下层为暗红色的红细胞 下层为暗红色的红细胞, 胞),下层为暗红色的红细胞,彼此压紧而不改变细胞的 正常形态。根据红细胞柱及全血高度, 正常形态。根据红细胞柱及全血高度,可计算出红细胞在 全血中的容积比值,即为红细胞比容(压积) 全血中的容积比值,即为红细胞比容(压积) 。
1%NaCl稀释成不同浓度的低渗溶液 稀释成不同浓度的低渗溶液 1 试管号 1%NaCl(ml) 蒸馏水(ml) 蒸馏水 1.50 1.40 1.30 1.20 1.10 1.00 0.90 0.80 0.70 0.60 0.50 0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 1.10 1.20 1.30 1.40 2 3 4 5 6 7 8 9 10
②部分红细胞溶血的试管:液体下层为红细胞沉淀, 部分红细胞溶血的试管:液体下层为红细胞沉淀, 上层出现透明淡红(淡红棕) 上层出现透明淡红(淡红棕)色,表明部分红细 胞已经破裂,称为不完全溶血。 胞已经破裂,称为不完全溶血。 ③红细胞全部溶血的试管:液体完全变成透明红色, 红细胞全部溶血的试管:液体完全变成透明红色, 管底无红细胞沉淀,表明红细胞完全破裂, 管底无红细胞沉淀,表明红细胞完全破裂,的 掌握用比色法测定动物的血红蛋白的含量。 掌握用比色法测定动物的血红蛋白的含量。 • 原理 血红蛋白的颜色常与氧的结合量多少有关。 血红蛋白的颜色常与氧的结合量多少有关。 但当用一定的氧化剂将其氧化时, 但当用一定的氧化剂将其氧化时,可使其转变为 稳定、棕色的高铁血红蛋白, 稳定、棕色的高铁血红蛋白,而且颜色与血红蛋 白(或高铁血红蛋白)的浓度成正比。可与标准 或高铁血红蛋白)的浓度成正比。 色进行对比,求出血红蛋白的浓度, 色进行对比,求出血红蛋白的浓度,即每升血液 中含血红蛋白克数(g·L中含血红蛋白克数(g·L-1)。
方法与步骤
沙里氏血红蛋白计测定 • • 沙里氏比色法是用HCl使血红蛋白酸化形成棕色的高铁 使血红蛋白酸化形成棕色的高铁 沙里氏比色法是用 血红蛋白,然后和标准比色板进行比色。 血红蛋白,然后和标准比色板进行比色。 主要具有标准褐色玻璃比色箱和1只方 沙里血红蛋白计 主要具有标准褐色玻璃比色箱和 只方 形刻度测定管组成。比色管两侧通常有两行刻度; 形刻度测定管组成。比色管两侧通常有两行刻度;一侧 为血红蛋白量的绝对值, 为血红蛋白量的绝对值,以g·dl-1(每100 ml血液中所含 每 血液中所含 血红蛋白的克数)表示 表示, 血红蛋白的克数 表示,从2~22 g;另一侧为血红蛋白 ~ ; 相对值, 相对值,以%(即相当于正常平均值的百分数)来表示, (即相当于正常平均值的百分数)来表示, 从10%~160%。为避免所使用的平均值不一致,因此 ~ 。为避免所使用的平均值不一致, 一般采用绝对值来表示。 一般采用绝对值来表示。
[注意事项 注意事项] 注意事项 • 选择抗凝剂必须考虑到不能使红细胞变形、 选择抗凝剂必须考虑到不能使红细胞变形、 溶解。本实验采用柠檬酸钠抗凝。 溶解。本实验采用柠檬酸钠抗凝。 • 血液与抗凝剂混合、注血时应避免动作剧 血液与抗凝剂混合、 烈引起红细胞破裂。 烈引起红细胞破裂。 • 温氏分血管内壁要充分干燥。血液进入毛 温氏分血管内壁要充分干燥。 细管内的刻度读数要精确, 细管内的刻度读数要精确,血柱中不得有 气泡。 气泡。
二、红细胞脆性的测定 • 目的 学习测定红细胞渗透脆性的方法,理解细胞 学习测定红细胞渗透脆性的方法, 外液渗透张力对维持细胞正常形态与功能的重要 性。 • 原理 正常红细悬浮于等渗的血浆中,若置于高 正常红细悬浮于等渗的血浆中, 渗溶液内,则红细胞会因失水而皱缩;反之, 渗溶液内,则红细胞会因失水而皱缩;反之,置 于低渗溶液内,则水进入红细胞,使红细胞膨胀。 于低渗溶液内,则水进入红细胞,使红细胞膨胀。 如环境渗透压继续下降,红细胞会因继续膨胀而 如环境渗透压继续下降, 破裂,释放血红蛋白,称之为溶血。 破裂,释放血红蛋白,称之为溶血。红细胞膜对 低渗溶液具有一定的抵抗力, 低渗溶液具有一定的抵抗力,这一特征称为红细 胞的渗透脆性。 胞的渗透脆性。
【注意事项】 注意事项】 •
血液要准确吸取20 , 血液要准确吸取 µl,若有气泡或 血液被吸入采血管的乳胶头中都应将 吸管洗涤干净,重新吸血。 吸管洗涤干净,重新吸血。洗涤方法 先用清水将血迹洗去, 是:先用清水将血迹洗去,然后再依 次吸取蒸馏水、 酒精、 次吸取蒸馏水、95%酒精、乙醚洗涤 酒精 采血管1~ 次 使采血管内干净、 采血管 ~2次,使采血管内干净、干 燥。
方法与步骤
1、溶液配制:取10个小试管,配制出 种不同浓 、溶液配制: 个小试管, 个小试管 配制出10种不同浓 度的氯化钠低渗溶液( 度的氯化钠低渗溶液(0.25%,0.3%,0.35%, , , , 0.4%,0.45%,0.5%,0.55%,0.6%,0.65%, , , , , , , 0.9%)。 )。 2、加抗凝血:用滴管吸取抗凝血,在各试管中各 、加抗凝血:用滴管吸取抗凝血, 加一滴,轻轻摇匀,静置1~ 。 加一滴,轻轻摇匀,静置 ~2 h。 3、观察结果:根据各管中液体颜色和浑浊度的不 、观察结果: 判断红细胞脆性。 同,判断红细胞脆性。 ①未发生溶血的试管:液体下层为大量红细胞沉淀, 未发生溶血的试管:液体下层为大量红细胞沉淀, 上层为无色透明,表明无红细胞破裂。 上层为无色透明,表明无红细胞破裂。
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