双元表达载体

双元表达载体

与共整合载体(cointegrating vector) 相对，binary vector 指转化由两个载体来完成，相容。vir基因在实现T-DNA转移过程中，没有与T-DNA在同一质粒上。

小Ti质粒含T-DNA区，而缺少vir区的质粒，比如，pBIN19, pBI121

带vir区的质粒主要功能是利用vir基因的作用，激活T-DNA 的转移。比如常用农杆菌菌株LBA4404，其中带有这种T-DNA缺失而保留vir的质粒pAL4404.

也就是说，在转化时农杆菌中是有两个质粒了？

另，野生型的Ti质粒是不是vir 和T－DNA都有了？

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双元表达载体系统主要包括两个部分

一部分为卸甲Ti质粒，这类Ti质粒由于缺失了T－DNA 区域，完全丧失了致瘤作用，主要是提供Vir基因功能，激活处于反式位置上的T－DNA的转移。

另一部份是微型Ti质粒(Mini-Ti plasmid)，它在T－DNA左右边界序列之间提供植株选择标记如NPTII基因以及Lac Z基因等。

双元载体系统的构建的原理是Ti质粒上的Vir基因可以反式激活T－DNA 的转移。与共整合载体所不同的是，它不依赖两个质粒之间的同源序列，不需要共整合过程就能在农杆菌内独立复制。

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双元载体系统又叫二元载体系统，是指农杆菌中用于把Ｔ－ＤＮＡ区域转入受体细胞的双质粒系统。其中一个质粒带有毒性基因，另一质粒带有改造过的Ｔ－ＤＮＡ区域，用于携带外源基因。

我们一般构建的载体通常都是在一类实验材料中进行，当试验需要不同的实验材料时就需要双元载体来介导了，本人表述欠缺给你举个例子吧：做转基因植物是用到binary vector非常正常的，首先要拿到目的片段，这一系列的操作肯定也是在载体中进行的，这里的载体因为都是在细菌中进行的，所以只用一元载体就可以了，当我们把目的片段往植物中导入时，就需要用到双元载体了，现将载体在菌体中扩增，数量达到以后再介导到植物中，常用的就是农杆菌介导（构建的载体质粒在农杆菌中可以随菌体一起扩增），然后进入到植物体内后再通过双元载体中的转导序列将目的片段融合到植物基因组中，所以双元载体有两套不同的筛选因子，在菌体中用一种，在植物中用一种！