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免疫学概论第4章抗体PPT课件
免疫学概论第4章抗体ppt 课件
• 抗体的概述 • 抗体的结构 • 抗体的产生与类别 • 抗体的应用 • 总结与展望
01
抗体的概述
抗体的定义
抗体（Antibody）：指B淋巴细胞或记忆B细胞在抗原刺激下，经一系列活化、增殖、 分化后形成的浆细胞分泌出来的一类能与相应抗原特异性结合的免疫球蛋白。
免疫调节
抗体可调节机体免疫应答，用于治疗免疫相关疾病，如风湿性关 节炎、系统性红斑狼疮等。
被动免疫
将含有抗体的免疫血清或免疫球蛋白注入机体，使机体获得特异 性免疫力。
抗体在免疫学研究中的应用
01
02
03
抗原定位
通过抗体标记抗原，研究 抗原在细胞或组织中的定 位和分布。
免疫细胞功能研究
抗体可用来研究免疫细胞 的活化、分化、凋亡等过 程，有下产生的一种蛋白质，具有高度的特异性，能够与相 应的抗原结合，发挥免疫效应。
抗体的类型
IgG
IgM
IgA
IgE
免疫球蛋白G，是血清中含量最 高的抗体类型，也是唯一能够 通过胎盘的抗体类型。它具有 抗菌、抗病毒、抗毒素等作用， 是机体重要的防御机制。
免疫球蛋白M，是初次免疫应 答中最早产生的抗体类型，主 要存在于血液中。它具有抗菌、 抗病毒、抗毒素等作用，但效 价较低。
疾病的抗体药物，提高治疗效果和降低副作用。
03
免疫治疗和免疫调控
抗体在免疫治疗和免疫调控方面具有广阔的应用前景，未来将进一步探
索其在肿瘤、感染性疾病、自身免疫性疾病等领域的应用。
THANKS
感谢观看
合物，进而发挥免疫效应。
激活补体
抗体能够与抗原结合后激活补 体系统，通过补体的级联反应 ，发挥溶解和杀伤作用。
• 抗体的概述 • 抗体的结构 • 抗体的产生与类别 • 抗体的应用 • 总结与展望
01
抗体的概述
抗体的定义
抗体（Antibody）：指B淋巴细胞或记忆B细胞在抗原刺激下，经一系列活化、增殖、 分化后形成的浆细胞分泌出来的一类能与相应抗原特异性结合的免疫球蛋白。
免疫调节
抗体可调节机体免疫应答，用于治疗免疫相关疾病，如风湿性关 节炎、系统性红斑狼疮等。
被动免疫
将含有抗体的免疫血清或免疫球蛋白注入机体，使机体获得特异 性免疫力。
抗体在免疫学研究中的应用
01
02
03
抗原定位
通过抗体标记抗原，研究 抗原在细胞或组织中的定 位和分布。
免疫细胞功能研究
抗体可用来研究免疫细胞 的活化、分化、凋亡等过 程，有下产生的一种蛋白质，具有高度的特异性，能够与相 应的抗原结合，发挥免疫效应。
抗体的类型
IgG
IgM
IgA
IgE
免疫球蛋白G，是血清中含量最 高的抗体类型，也是唯一能够 通过胎盘的抗体类型。它具有 抗菌、抗病毒、抗毒素等作用， 是机体重要的防御机制。
免疫球蛋白M，是初次免疫应 答中最早产生的抗体类型，主 要存在于血液中。它具有抗菌、 抗病毒、抗毒素等作用，但效 价较低。
疾病的抗体药物，提高治疗效果和降低副作用。
03
免疫治疗和免疫调控
抗体在免疫治疗和免疫调控方面具有广阔的应用前景，未来将进一步探
索其在肿瘤、感染性疾病、自身免疫性疾病等领域的应用。
THANKS
感谢观看
合物，进而发挥免疫效应。
激活补体
抗体能够与抗原结合后激活补 体系统，通过补体的级联反应 ，发挥溶解和杀伤作用。
临床免疫学抗原抗体反应
第二章抗原抗体反应本章考点1概.述2抗.原抗体反应原理3抗.原抗体反应的特点4抗.原抗体反应的影响因素5抗.原抗体反应的类型第一节抗原抗体反应原理抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇（表位）和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。
这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的。
除两者分子构型高度互补外，抗原表位和抗体超变区必须密切接触，才有足够的结合力。
抗原抗体反应可分为两个阶段：第一阶段为抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶段反应快，仅需几秒至几分钟，但不出现可见反应；第二阶段为可见反应阶段，这一阶段抗原抗体复合物在适当温度、电解质和补体影响下，出现沉淀、凝集、细胞溶解、补体结合介导的肉眼可见的反应，此阶段反应慢，往往需要数分钟至数小时。
在血清学反应中，以上两阶段往往不能严格分开，往往受反应条件（如温度、电解质、抗原抗体比例等）的影响。
（一）抗原抗体结合力抗原抗体是一种非共价的结合，不形成共价键，需要四种分子间引力参与。
1静.电引力：又称库伦引力。
是因抗原、抗体带有相反电荷的氨基与羧基基团间相互吸引的能力，这种吸引力的大小和两个电荷间的距离平方成反比。
两个电荷距离越近，静电引力越大；2范.德华引力：这是原子与原子、分子与分子相互接近时分子极化作用发生的一种吸引力，是抗原、抗体两个大分子外层轨道上电子相互作用时，两者电子云中的偶极摆动而产生的引力。
这种引力的能量小于静电引力；3氢.键结合力：是供氢体上的氢原子与受氢体上氢原子间的引力。
其结合力较强于范德华引力；4疏.水作用力：水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。
当抗原表位和抗体超变区靠近时，相互间正负极性消失，周围亲水层也立即失去，从而排斥两者间的水分子，使抗原抗体进一步吸引和结合。
疏水作用力是这些结合力中最强的，因而对维系抗原抗体结合作用最大。
图10抗原与抗体的结合力（二）抗原抗体的亲和性和亲和力亲和性指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而存在的引力，它是抗原抗体间固有的结合力。
免疫学 抗原ppt课件(共22张PPT)
T cell epitope
☆颗粒性抗原强于可溶性抗原
刺激性 超抗原 （superantigen, SAg ）
☆颗粒性抗原强于可溶性抗原 第四节 抗原的分类
表位(epitope)
某些抗原物质，只需要极低浓度〔1-10ng/ml）
分子量越大免疫原性越强
②抗原性(antigenicity)
清除异物防止再感染 第四节 抗原的分类 ☆颗粒性抗原强于可溶性抗原
反应性
交叉反应〔cross-reaction）
第二节 影响抗原免疫原性的因素
T cell epitope
异物性是免疫原的核心
表位(epitope)
T cell epitope
第三章 抗原
（antigen ,Ag）
1.表位(epitope)
❖ 决定抗原特异性的特殊化学基团又称 抗原决定基(antigen determinant)
T、B细胞表位
B cell epitope
T cell epitope
Antigenic peptides degrade
Native protein
T cell epitope
❖共同抗原〔common antigen）
❖交叉反应〔cross-reaction）
Ab1 Ag1
Ag2
交叉反应
第四节 抗原的分类
Hapten and carrier
二硝基苯
二硝基酚-蛋白
第二节 影响抗原免疫原性的因素
一、异物性
❖异物性是免疫原的核心 ❖异物的类型
❖在①胚异胎种期物质未与免疫活性
❖②同种异体物质
❖细③胞自充身分抗原接触过的物质
二、理化性状
分子量越大免疫原性越强
抗原抗体反应知识讲义PPT(63张)
特异性示意图
*交叉反应(cross reaction) 两种不同的抗原 物质具有部分相同或类似结构的抗原决定簇
(共同抗原)，则可与彼此相应的抗体反应。
二、比例性（proportionality）
*最适比:是指抗原与抗体发生可见反应，需遵循 一定的量比关系，只有当二者浓度比例适当时， 才出现可见反应。
1．抗原决定簇又称表位（epitope），是指抗原性物质 表面决定该抗原特异性的特殊化学基团，是免疫应答和免 疫反应具有特异性的物质基础。
2．抗原决定簇是很小的，其大小相当于相应抗体的 结合部位，它们可由5-7个氨基酸、单糖或核苷酸残基组成。
3．抗原结合价：是指能与抗体分子结合的抗原决定 簇的总数。每一种半抗原可理解为单一的抗原决定簇，而 天然抗原含有很多不同的抗原决定簇，它是带有大量多种 "天然"半抗原的大分子。
应速度快，几秒钟或几分钟即可完成，但不 出现肉眼可见反应。
第二阶段为可见阶段，表现为凝集、沉淀、
补体结合等反应，本阶段有两个特点，一是 反应进行慢，需要几分钟、几十分钟或更长。 其二是受电解质、温度、酸碱度等多种因素 影响。
二、基本条件：
结合力 亲和力和亲合力 亲水胶体转化为疏水胶体
一、抗原抗体结合力
• 当抗原与抗体结合后，表面电荷减少，水化 层变薄；而且由于抗原抗体复合物形成后， 与水接触的表面积减少，由亲水胶体转化为 疏水胶体。
• 在电解质作用下，各疏水胶体之间靠拢，形 成可见的抗原抗体复合物。
亲水胶体转化为疏水胶体示意图
转化
NaCl
亲水胶体
疏水胶体
可见反应
第二节 抗原抗体反应的特点
特异性 比例性 可逆性 阶段性
絮状沉淀试验
免疫学课件第16章 基于抗原-抗体反应的免疫学试验技术
基于抗原-抗体反应的免疫 学试验技术
抗原与相应抗体的特异性结合反应称为 抗原抗体反应。
抗原抗体反应既可在体内作为体液免疫 应答的效应机制自然发生；
也可在体外作为免疫学实验结果的出现。
在体内，可表现为溶菌、杀菌、促进吞 噬或中和毒素等作用，有时亦可引起免 疫病理损伤；
在体外，依相应抗原物理性状（颗粒状 或可溶性）以及反应的条件（电解质、 补体等）不同，可出现凝集、沉淀、细 胞溶解和补体结合等反应。
在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光 素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受激发光的 照射而发出明亮的荧光（黄绿色或桔红色），可以 看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体 的性质、定位，以及利用定量技术测定含量。
免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶 的高效催化作用有机结合的一种方法。
它以酶作为标记物，与抗体或抗原联结，相 应的抗原或抗体作用后，此时加入酶作用的 底物，通过酶的催化作用，使无色的底物水 解、氧化或还原反应，形成有色的可见物质， 表面酶存在，进一步证明了相应抗原和抗体 的反应。
免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理，先 将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物， 再用这种荧光抗体（或抗原）作为分子探针检查细 胞或组织内的相应抗原（或抗体）。
① 单向免疫扩散； ② 双向免疫扩散； ③ 火箭免疫电泳； ④ 对流免疫电泳； ⑤ 免疫电泳；
1、直接补体结合试验； 2、间接补体试验；
四、中和反应 1、病毒中和试验； 2、毒素中和试验；
用荧光素、放射性核素或酶等示踪物质标记 的抗体（或抗原）进行抗原-抗体反应，标记
物与抗体（或抗原）的化学联结不会改变抗 体（或抗原）的免疫学特性，同时标记物的 特性依然存在，使检测灵敏度大大提高，可 以对微量物质进行定性、定量或定位检测。
抗原与相应抗体的特异性结合反应称为 抗原抗体反应。
抗原抗体反应既可在体内作为体液免疫 应答的效应机制自然发生；
也可在体外作为免疫学实验结果的出现。
在体内，可表现为溶菌、杀菌、促进吞 噬或中和毒素等作用，有时亦可引起免 疫病理损伤；
在体外，依相应抗原物理性状（颗粒状 或可溶性）以及反应的条件（电解质、 补体等）不同，可出现凝集、沉淀、细 胞溶解和补体结合等反应。
在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光 素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受激发光的 照射而发出明亮的荧光（黄绿色或桔红色），可以 看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体 的性质、定位，以及利用定量技术测定含量。
免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶 的高效催化作用有机结合的一种方法。
它以酶作为标记物，与抗体或抗原联结，相 应的抗原或抗体作用后，此时加入酶作用的 底物，通过酶的催化作用，使无色的底物水 解、氧化或还原反应，形成有色的可见物质， 表面酶存在，进一步证明了相应抗原和抗体 的反应。
免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理，先 将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物， 再用这种荧光抗体（或抗原）作为分子探针检查细 胞或组织内的相应抗原（或抗体）。
① 单向免疫扩散； ② 双向免疫扩散； ③ 火箭免疫电泳； ④ 对流免疫电泳； ⑤ 免疫电泳；
1、直接补体结合试验； 2、间接补体试验；
四、中和反应 1、病毒中和试验； 2、毒素中和试验；
用荧光素、放射性核素或酶等示踪物质标记 的抗体（或抗原）进行抗原-抗体反应，标记
物与抗体（或抗原）的化学联结不会改变抗 体（或抗原）的免疫学特性，同时标记物的 特性依然存在，使检测灵敏度大大提高，可 以对微量物质进行定性、定量或定位检测。
第一章抗原抗体反应讲解学习
三、亲水胶体转化为疏水胶体
抗体和大多数抗原同属蛋白质。在通常的 血清学反应条件下均带有负电荷，使极化 的水分子在其周围形成水化层，成为亲水 胶体，因此蛋白质不会自行凝集出现沉淀。 当Ag与Ab结合后，表面电荷减少，水化层 变薄；而且由于Ag-Ab复合物形成后，与水 接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏 水胶体。此时在电解质(如NaCl)的作用下， 使各疏水胶体之间进一步靠拢、沉淀，形 成可见的Ag-Ab复合物。
抗原抗体结合力示意图
l. 静电引力
➢ 抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧 基基团之间相互的引力，称为静电引力， 又称库伦引力。
➢例如，抗体分子上带电荷的碱性氨基酸的 游离氨基(-NH3+)和酸性氨基酸的游离羧基 (-COO-)可与抗原分子上带相反电荷的对应 基团相互吸引。这种引力的大小与两个相 互作用基团间的距离平方成反比。
2.范德华引力
➢ 抗原和抗体相互接近时，由于分子的极 化作用而出现的引力，称范德华引力。
➢结合力的大小与两个相互作用基团的极化 程度的乘积成正比、与它们之间距离的 7 次方成反比，键能约为4.2-12.5kJ/moL。 这种引力的能量小于静电引力。
3.氢键结合力
➢ 供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引 力。在抗原抗体反应中，羧基、氨基和 羟基是主要供氢体，而羧基氧、羧基碳 和肽键氧等原子是主要受氢体。
➢氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离 的6次方成反比，键能约20.9kJ/mol。
4.疏水作用力
➢ 两个疏水基团在水溶液中相互接触时，由 于对水分子排斥而趋向聚集的力称为疏水 作用力，或称为疏水键。
➢当抗原抗体反应时，抗原决定簇与抗体上 的结合点靠近，互相间正、负极性消失， 由静电作用形成的亲水层立即失去，从而 促进抗原与抗体的相互吸引而结合。疏水 作用力在抗原抗体反应中的结合是很重要 的。提供的作用力最大，约占总结合力的 50%。
第三章抗原ppt课件
第二篇 抗原与免疫分子
第三章 抗原 Antigen，Ag
一、抗原的概念和特性
（一） 抗原 是指能诱导免疫系统发生免疫应答，
产生抗体或效应T细胞（致敏T细胞）， 并能与相应抗体或效应T细胞在体内或体 外发生特异性反应的物质，称之为抗原。
1. 免疫原性（immunogenicity）
指抗原分子能诱导免疫应答的特性。
三、特异性和交叉反应
特异性（specificity）是指物质间的相 互吻合性或针对性、专一性。
抗原特异性 是指抗原只能与相应抗体或 受体（BCR/TCR）互补结合的特性。
（一ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ抗原表位 1、概念： 表位（epitope）:抗原分子中决定抗原
特异性的特殊化学基团. 抗原结合价：
2、抗原决定基的类型
而不存在于相应组织正常细胞或其他肿
瘤细胞表面的抗原。
如黑色素瘤、结肠癌。
2. 肿瘤相关抗原
是指不为肿瘤细胞所特有的，在正常
细胞上也可微量表达的抗原分子。由于该类抗
原在细胞癌变时数量明显增高，而无严格的肿
瘤特异性，故称肿瘤相关抗原。
胚胎性抗原 如甲胎蛋白
病毒诱发的肿瘤抗原
如：EB病毒与鼻咽癌、Burkitt淋巴瘤
（toxoid） （三）动物免疫血清（immune serum （四）异嗜性抗原（heterophilic antigen） （五）同种异型抗原（alloantigen） （六）自身抗原（autoantigen） （七）肿瘤抗原（tumor antigen）
1. 肿瘤特异性抗原
是指只存于某种肿瘤细胞表面，
人乳头瘤病毒与宫颈癌
乙肝病毒与原发性肝癌
六、超抗原（supper antigen, SAg）
第三章 抗原 Antigen，Ag
一、抗原的概念和特性
（一） 抗原 是指能诱导免疫系统发生免疫应答，
产生抗体或效应T细胞（致敏T细胞）， 并能与相应抗体或效应T细胞在体内或体 外发生特异性反应的物质，称之为抗原。
1. 免疫原性（immunogenicity）
指抗原分子能诱导免疫应答的特性。
三、特异性和交叉反应
特异性（specificity）是指物质间的相 互吻合性或针对性、专一性。
抗原特异性 是指抗原只能与相应抗体或 受体（BCR/TCR）互补结合的特性。
（一ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ抗原表位 1、概念： 表位（epitope）:抗原分子中决定抗原
特异性的特殊化学基团. 抗原结合价：
2、抗原决定基的类型
而不存在于相应组织正常细胞或其他肿
瘤细胞表面的抗原。
如黑色素瘤、结肠癌。
2. 肿瘤相关抗原
是指不为肿瘤细胞所特有的，在正常
细胞上也可微量表达的抗原分子。由于该类抗
原在细胞癌变时数量明显增高，而无严格的肿
瘤特异性，故称肿瘤相关抗原。
胚胎性抗原 如甲胎蛋白
病毒诱发的肿瘤抗原
如：EB病毒与鼻咽癌、Burkitt淋巴瘤
（toxoid） （三）动物免疫血清（immune serum （四）异嗜性抗原（heterophilic antigen） （五）同种异型抗原（alloantigen） （六）自身抗原（autoantigen） （七）肿瘤抗原（tumor antigen）
1. 肿瘤特异性抗原
是指只存于某种肿瘤细胞表面，
人乳头瘤病毒与宫颈癌
乙肝病毒与原发性肝癌
六、超抗原（supper antigen, SAg）
2章抗原抗体 Microsoft PowerPoint 演示文稿 (1)
Fab片段与抗原表位的结合能力。用结合常数K反应出亲和
力的大小。越大亲和力越高。
抗体
抗体
抗原 高亲和力
抗原 低亲和力
抗原抗体的亲和力示意图
多价抗体与抗原分子间的结合能力称为亲合力(avidity)。
Ag
Ig-Fab 亲和力
Ag
IgG 亲合力
Ag
IgM
亲合力
抗原抗体的亲和力和亲合力示意图
第二节 抗原抗体反应的特点
位
抗A抗体
特异反应与交叉反应示意图
交叉反应 特异反应 交叉反应
3.免疫学检验中也利用交叉反应进行诊断 变形杆菌与立克次氏体有相同的抗原表位，用变形杆菌代
替立克次氏体作为抗原来检测怀疑斑疹伤寒病人血清进行凝 集实验，称为外-斐(Weil-Felix)实验。
交叉反应可影响血清学诊断的准确性。
二、可逆性 抗原抗体结合是分子表面的非共价结合，形成的复合 物在一定条件下可以解离，称之为可逆性。
单价抗原与抗体结合无网格形成
二.抗体 1.抗体的来源
家兔抗体，等价带较宽，适用于做诊断试剂。 马抗体等价带较窄（等价带较窄对抗原抗体的比例要求较 高）一般做免疫治疗。 单克隆抗体不用于凝集或沉淀反应。
2.浓度 抗体浓度适宜。 过大过小都会影响抗原抗体复合物的形成。
3.亲和性 抗体的亲和性又称之为亲和力。 再次应答所产生抗体(IgG)的平均亲和力高于初次免
几乎无游离的抗原或抗体。 ③抗原过量：后带现象(postzone)。
沉
淀
物
抗体过剩带
形 成
prezone
量
①
等价带
equivalence zone
②
抗原过剩带 postzone
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一个抗体结合点与一个抗原表位间的结合强度。 “（single point－－－ single point ）” 亲和力用平衡常数表示：K=K1 / K2
即：结合常数/解离常数 K值越大，亲和力越高， 与抗原的结合越牢固
亲合力 指整个抗体分（子与a抗vi原d表ity位）之间结合的
强度
“all points-------all points”
与抗体的结合 价直接相关。 亲合力高， 与抗原结合 牢固不易解离。
Avidity
• The overall strength of binding between an Ag with many determinants and multivalent Abs
Keq =
104
Affinity
106 Avidity
生引力，其作用取决于分子空间构型，如：凹
槽与凸起互补，抗原与抗体，酶与底物。能量
小于静电引力。
（3）氢键结合力（hydrogen bounding force）
指供氢体氢原子与受氢体原子之间的
引力—“氢键桥梁” ，能量大于范德华引力。
4.疏水作用力 （ hydrophobic force ）
指疏水基团间排斥水分子，相互聚集 的
目的 掌握:
1.抗原抗体反应原理及特点。 2.带现象、前带、后带、亲合力、
亲和力概念。 熟悉:
影响抗原抗体反应的因素。 了解:
免疫学检测的类型。
概念：抗原抗体反应是指抗原抗体的特 异性结合反应
杀菌、溶菌、调理、中和毒素 体内
免疫病理损伤—超敏反应、免疫性疾病等
体外：凝集、沉淀、溶细胞、中和毒素、补体结合等 曾称：serological reaction
学好临床免疫检验，必须掌握“一个 核心，三个要素与四个标记”。
一个核心： 抗原抗体反应 (Antigen-antibody interaction) •三个要素：抗原、抗体和免疫细 胞
•四个标记：酶标记技术、放射免疫标记 技术、荧光素标记技术与化学发光标记 技术。
第二章抗原抗体反应 （antigen-antibody reaction）
Ab/Ag过剩 过剩方的结合价得不到饱和，大多数游离存在，只形 成小分子复合物（不可见）。
网格学说（图）
切记！！！！
确定 Ag/Ab的浓度非常重要，即在实验中需 对Ag/Ab进Байду номын сангаас适当的 ，稀释调整二者的比 例，产生可见反应。
一般原则：固定 低含量（ Ag/Ab ）的浓度， 稀释 含量高的 (Ab / Ag)。
McAb:不宜用于凝集和沉淀反应。
浓度：相对Ag而言，比例要和适，故实验前 需滴定，以求最适Ag与Ab比例。
特异性与亲合力：关键因素，选择特异性 与亲合力高的Ab。
二、环境因素
（一）电解质 作用：中和胶体表面电荷，破坏水化层， 使Ag-Ab聚集。 常用：8.5g/L NaCl溶液，缓冲液、Ca2+、 Mg2+等。 注意：盐析（salting）即电解质浓度过高 引起的非特异性蛋白质沉淀。
1010 Avidity
第二节 抗原抗体反应的特点
一、特异性（specificity）
概念：一种抗原只能与其相应的抗体结合起反应（eg.）
分子基础：Ag-AD HVR-Ab空间结构高度互补
VH和VL各具三个HVR与AD互补
免检中常用已知Ag 查 未知Ab ，反之亦然。
意义 相对性：当抗原之间有相同或相似结构的AD时
本章内容：
§1 抗原抗体反应的原理 §2 抗原抗体反应的特点 §3 影响抗原抗体反应的因素 §4 免疫学检测的类型
第一节 抗原抗体反应的原理
基本原理：
特异性（AD----HVR）
结合力(4种)
可见性（凝集、沉淀、溶血等）
2.范德华引力（Van der Waals forces）
分子间（或原子间)相互接近，分子极化产
（二）酸碱度
• Ag、Ab多为蛋白质，具两性电离特性，有其故 有的PI , pH过高或过低均可影响Ag、Ab反应。
• 一般：pH6～8为宜，补体参与时pH7.2～7.4。 • 注意：自凝现象------即pH达到或接近颗粒性抗
原的PI时，引起的抗原非特异性自身凝集现象。
（三）温度—影响反应速度
一般：15～40 ℃为宜， 最适温度：37℃, 过高（>56）: Ag-Ab解离， Ag、Ab变性，
一般可溶性Ag稀释Ag ，颗粒性Ag，稀 释 Ab。
三、可逆性（reversibility）或表面性
1. Ag + Ab 一定条件 Ag —Ab（动态平衡）
解离
动态平衡公式:
[Ag] + [Ab]
K1 K2
[Ag-Ab]
K1:结合常数；K2：解离常数
四、阶段性
两个阶段
特异性结合
数秒～数分钟， 肉眼不可见
（共同抗原）
干扰结果 实验诊断
交叉反应（cross reaction） 如何解决？ 如何利用？
交叉反应（cross reactions）
两种不同 的抗原分 子具有相 同或类似 结构的抗 原表位， 可与彼此 相应的抗 血清发生 反应
抗原抗体交叉反应示意图
二、比例性 (proportionality)
力。作用力最强，占总结合力的50％。
抗原抗体结合力
• 大小都与两分子间的距离密切相关 • 只有两分子表面密切接触时，才能
产生足够的力使其结合 • 抗原与抗体之间高度的空间互补结
构恰好为这些结合力的发挥提供了 条件
结合力的大小
表示
亲和力 （affinity）
亲合力 （avidity）
亲和力（affinity）：
可见反应阶段
数分～数小时 肉眼可见
第三节 影响抗原抗体反应的因素
一、Ag/Ab自身因素 （一）Ag
理化性状：颗粒性Ag、可溶性Ag、 R型细菌Ag等出现不 同的Ag-Ab reaction.
AD的种类与数目：单价Ag
（二）Ab
R型Ab ：等价带宽， 易出现可见反应。 来源 H型Ab ：等价带窄，易出现前带或后带现象
指抗原抗体的量比关系，即只有当抗原抗 体的浓度比例适当时，才出现可见反应。
以沉淀反应为例（Ab量固定,Ag量递增）
图
Question： 等价带 前带 后带
Why?
抗原抗体反应比例性示意图
抗原多价，抗体双价 二者比例合适 Ag/Ab过剩
网格 学说
二者比例合适：
网格学说（图）
抗体的两个Fab段分别 结合两个Ag分子，相 互 交叉结合连接成巨大的 网格状立体聚合物， （可见）。
即：结合常数/解离常数 K值越大，亲和力越高， 与抗原的结合越牢固
亲合力 指整个抗体分（子与a抗vi原d表ity位）之间结合的
强度
“all points-------all points”
与抗体的结合 价直接相关。 亲合力高， 与抗原结合 牢固不易解离。
Avidity
• The overall strength of binding between an Ag with many determinants and multivalent Abs
Keq =
104
Affinity
106 Avidity
生引力，其作用取决于分子空间构型，如：凹
槽与凸起互补，抗原与抗体，酶与底物。能量
小于静电引力。
（3）氢键结合力（hydrogen bounding force）
指供氢体氢原子与受氢体原子之间的
引力—“氢键桥梁” ，能量大于范德华引力。
4.疏水作用力 （ hydrophobic force ）
指疏水基团间排斥水分子，相互聚集 的
目的 掌握:
1.抗原抗体反应原理及特点。 2.带现象、前带、后带、亲合力、
亲和力概念。 熟悉:
影响抗原抗体反应的因素。 了解:
免疫学检测的类型。
概念：抗原抗体反应是指抗原抗体的特 异性结合反应
杀菌、溶菌、调理、中和毒素 体内
免疫病理损伤—超敏反应、免疫性疾病等
体外：凝集、沉淀、溶细胞、中和毒素、补体结合等 曾称：serological reaction
学好临床免疫检验，必须掌握“一个 核心，三个要素与四个标记”。
一个核心： 抗原抗体反应 (Antigen-antibody interaction) •三个要素：抗原、抗体和免疫细 胞
•四个标记：酶标记技术、放射免疫标记 技术、荧光素标记技术与化学发光标记 技术。
第二章抗原抗体反应 （antigen-antibody reaction）
Ab/Ag过剩 过剩方的结合价得不到饱和，大多数游离存在，只形 成小分子复合物（不可见）。
网格学说（图）
切记！！！！
确定 Ag/Ab的浓度非常重要，即在实验中需 对Ag/Ab进Байду номын сангаас适当的 ，稀释调整二者的比 例，产生可见反应。
一般原则：固定 低含量（ Ag/Ab ）的浓度， 稀释 含量高的 (Ab / Ag)。
McAb:不宜用于凝集和沉淀反应。
浓度：相对Ag而言，比例要和适，故实验前 需滴定，以求最适Ag与Ab比例。
特异性与亲合力：关键因素，选择特异性 与亲合力高的Ab。
二、环境因素
（一）电解质 作用：中和胶体表面电荷，破坏水化层， 使Ag-Ab聚集。 常用：8.5g/L NaCl溶液，缓冲液、Ca2+、 Mg2+等。 注意：盐析（salting）即电解质浓度过高 引起的非特异性蛋白质沉淀。
1010 Avidity
第二节 抗原抗体反应的特点
一、特异性（specificity）
概念：一种抗原只能与其相应的抗体结合起反应（eg.）
分子基础：Ag-AD HVR-Ab空间结构高度互补
VH和VL各具三个HVR与AD互补
免检中常用已知Ag 查 未知Ab ，反之亦然。
意义 相对性：当抗原之间有相同或相似结构的AD时
本章内容：
§1 抗原抗体反应的原理 §2 抗原抗体反应的特点 §3 影响抗原抗体反应的因素 §4 免疫学检测的类型
第一节 抗原抗体反应的原理
基本原理：
特异性（AD----HVR）
结合力(4种)
可见性（凝集、沉淀、溶血等）
2.范德华引力（Van der Waals forces）
分子间（或原子间)相互接近，分子极化产
（二）酸碱度
• Ag、Ab多为蛋白质，具两性电离特性，有其故 有的PI , pH过高或过低均可影响Ag、Ab反应。
• 一般：pH6～8为宜，补体参与时pH7.2～7.4。 • 注意：自凝现象------即pH达到或接近颗粒性抗
原的PI时，引起的抗原非特异性自身凝集现象。
（三）温度—影响反应速度
一般：15～40 ℃为宜， 最适温度：37℃, 过高（>56）: Ag-Ab解离， Ag、Ab变性，
一般可溶性Ag稀释Ag ，颗粒性Ag，稀 释 Ab。
三、可逆性（reversibility）或表面性
1. Ag + Ab 一定条件 Ag —Ab（动态平衡）
解离
动态平衡公式:
[Ag] + [Ab]
K1 K2
[Ag-Ab]
K1:结合常数；K2：解离常数
四、阶段性
两个阶段
特异性结合
数秒～数分钟， 肉眼不可见
（共同抗原）
干扰结果 实验诊断
交叉反应（cross reaction） 如何解决？ 如何利用？
交叉反应（cross reactions）
两种不同 的抗原分 子具有相 同或类似 结构的抗 原表位， 可与彼此 相应的抗 血清发生 反应
抗原抗体交叉反应示意图
二、比例性 (proportionality)
力。作用力最强，占总结合力的50％。
抗原抗体结合力
• 大小都与两分子间的距离密切相关 • 只有两分子表面密切接触时，才能
产生足够的力使其结合 • 抗原与抗体之间高度的空间互补结
构恰好为这些结合力的发挥提供了 条件
结合力的大小
表示
亲和力 （affinity）
亲合力 （avidity）
亲和力（affinity）：
可见反应阶段
数分～数小时 肉眼可见
第三节 影响抗原抗体反应的因素
一、Ag/Ab自身因素 （一）Ag
理化性状：颗粒性Ag、可溶性Ag、 R型细菌Ag等出现不 同的Ag-Ab reaction.
AD的种类与数目：单价Ag
（二）Ab
R型Ab ：等价带宽， 易出现可见反应。 来源 H型Ab ：等价带窄，易出现前带或后带现象
指抗原抗体的量比关系，即只有当抗原抗 体的浓度比例适当时，才出现可见反应。
以沉淀反应为例（Ab量固定,Ag量递增）
图
Question： 等价带 前带 后带
Why?
抗原抗体反应比例性示意图
抗原多价，抗体双价 二者比例合适 Ag/Ab过剩
网格 学说
二者比例合适：
网格学说（图）
抗体的两个Fab段分别 结合两个Ag分子，相 互 交叉结合连接成巨大的 网格状立体聚合物， （可见）。