植物组培快繁实验室学时优秀课件

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《植物组织培养实验》PPT课件

《植物组织培养实验》PPT课件
• 6-BA:1mg/mL(溶于少量1N盐酸后以蒸馏 水定容)。
• NAA:1mg/mL(先用少量95%乙醇溶解后
以蒸馏水定容)。
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三、作业:
• (一) 一般可将MS培养基分为哪四个部分?分别含有几 种试剂?各种试剂的浓度(mg/L)如何?
• (二) 如需配制MS培养基的20×的贮备液I量为500 mL、 100×的贮备液II、III和IV各100 mL以及BA和NAA(浓度为 1 mg/mL)各50 mL,则应分别称取多少量的各种试剂? 注意要点有哪些?
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(二)用洗衣粉水(1~2角匙洗衣粉/100 ml水)等 浸洗上述植物材料约5 min,再用自来水冲净洗衣粉水。 这是进一步减少污染的处理。
同时配制消毒液:50%次氯酸钠溶液。
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• (三) 将接种用具、无菌水等从80℃烘箱中或直接从 高压灭菌器中取出,置于超净工作台上。打开超净工 作台中的紫外灯,在进行紫外线灭菌处理至少30 min 后关掉紫外灯。
•目的与要求:
熟悉MS培养基的组成,掌握 贮备液的配制方法.
•实验步骤:
称量 定容。
分别溶解
混合
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一,MS培养基的组成
1、大量成分→贮备液I mg/L
NH4NO3 KNO3 CaCl2 2H2O 40
1650 1900
4
MgSO4 7H2O
370
KH2PO4
170
00mL.
配制20倍浓度贮备液5
• (二)操作人员坐到超净台前,用浸有70%酒精的棉球擦 超净台面、操作者手等部分。
• (三)点燃酒精灯,从装有无菌苗的培养瓶中取出无菌 苗,置于无菌的培养皿中的无菌滤纸上,用灭过菌的刀 和镊子配合操作,从叶柄处切下,将所有叶片去除,只 留下近茎部的一小段叶柄。

大学课程植物组织培养14章快繁--组培课件

大学课程植物组织培养14章快繁--组培课件
●离体无性繁殖是在人工控制的无菌条件下,使植物在人工培养 基上繁殖的技术,跟常规的繁殖方法相比它是一种微型操作过程 ,因此,有时就直接称之为微繁
●离体无性繁殖是在人工控制的无菌条件下,使植物在人工培养 基上繁殖的技术,跟常规的繁殖方法相比它是一种离体的、无性 的繁殖、微型的操作过程。
● 整个植物组织培养技术体系中除“离体授粉”外都可以称为 离体无性繁殖方法。
非洲紫罗兰
风信子
四季秋海棠
特点:繁殖系数高。
叶插法 非洲紫罗兰用常规
,每片叶只能产生几个或十几个芽,但在组培条
件下可一次形成几十至几百个芽,一年可以培养成千上万个小植株,遗传稳定
性较好,但继代次数有限。培养物继代一定次数以后,不定芽形成能力即减弱,
需要重新起始无菌培养物,此外,不定芽需要进行生根培养才能形成真正的植
(2)外植体的取材部位和大小、生理状态。
离体植株增殖的几条途径:
(1)腋芽增殖 通过外源激素调整(特别是细胞分裂素的使用),最大可能
解除顶端优势,促进侧芽萌发。 其特点是:培养方法简单,能高度保持遗传稳定性,能长期
继代繁殖。目前采这一方式快速繁殖的植物有石竹、马铃薯、甘 薯、草莓、葡萄、月季等。这一繁殖方式需要严格控制激素浓度, 以防止产生愈伤组织。
该途径一般为遗传转化、无性系筛选、原生质体融合等植物离 体遗传重组技术的下游步骤。
一般不采用这一方法作为快繁途径(不稳定、费时、费力)。
3 影响快繁效果的几个因素: (1)植物种类、品种 (2)基本培养基 (3)激素 (4)培养条件(温度、光照) (4)生根、练苗处理
四 木本植物离体快繁 (1)一般情况下比草本植物困难
三 快繁的一般程序及几种途径 1 快繁的一般程序

植物的快繁与脱毒培养PPT课件

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第2节 植物快速繁殖的应用
• 1.大量繁殖珍稀或名 贵植物
• 如:佛肚兰,卡特丽亚 兰等工厂化育苗
• 2.茎尖培养脱毒及脱 毒苗的培养
• 无菌苗 • 有毒苗 • 脱毒苗
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二,(茎尖培养)脱毒及其应用
• 1.病毒病及其危害 • 2.茎尖培养脱毒的原理 • 3.茎尖培养脱毒的过程 • 4.脱毒苗的鉴定和保存
– ②坏死,在叶片上常呈现坏死斑、坏死环和脉坏 死,在茎、果实和根的表面常出现坏死条等。
– ③畸形,器官变形,如茎间缩短,植株矮化,生
长点异常分化形成丛枝或丛簇,叶片的局部细胞
变形出现疱斑、卷曲、蕨叶及带化等。201.来自毒病的危害及症状 正常的番茄果
番茄厥叶,卷叶病毒
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番茄病毒病(植株)
俗称虾蕉、葱蕉或蕉公),病株一般 不抽花蕾,因近顶部叶片成束而得名。 是由病毒侵染植株而引起的, 是香蕉 致命病害,
蕉农称之为" 不治之症"。局部地区 蕉园发病率为2%~10%, 产量损失 30%~60%。
香蕉束顶病
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1.病毒病及其危害(续)
• (1)症状:花而不实 • 花叶型马铃薯病毒:退化,叶片卷缩,产量逐年下降,
到PVS,PVA,PVM,PVX
• 卷叶型马铃薯病毒:PLRV • 香蕉束顶病:叶片越来越短小,植株矮缩,叶硬
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1.病毒病及其危害
• 脱毒(virus elimination)培养: • 利用植物组织培养技术,脱除植物细胞中的
病毒,生产健康的无毒繁殖材料的过程。
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1.2.植物病毒病及其危害
• 定义:由植物病毒寄生引起的病害。
• 症状:
– ①变色,叶片的叶绿素形成受阻或积聚,从而产 生花叶、斑点、环斑、脉带和黄化等。花朵的花 青素也可因而改变,使花色变成绿色或杂色等,常 见的症状为深绿与浅绿相间的花叶症如烟草花叶 病。

植物的组织培养(上课用)PPT演示课件

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(四)培养
1、愈伤组织的培养
从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。 2周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白 色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时,恒温 箱的门应该关闭不必见光,因为在无光条件下愈 伤组织长的更快。2周后,培养基成分接近耗尽, 必须更换培养基,进行继代培养.
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2、愈伤组织的继代培养
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结合录像外植体灭菌与接种操作,谈谈组织培养污染的主 要途径及怎样预防污染?
1、外植体带菌 3、接种操作时带入
2、培养基及接种 器具灭菌不彻底
4、环境不清洁
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污染的预防措施
(一)防止外植体带菌 (二)保证培养基及接种器具彻底灭菌 (三)操作人员严格遵守无菌操作规程 (四)保证接种与培养环境清洁
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③当同时使用这两类激素时,两者用量的比 例影响植物细胞的发育方向。
生长素用量比细胞分 裂素用量
植物细胞的发育方向
比值高时
有利于根的分化、抑 制芽的形成
比值低时
有利于芽的分化、抑 制根的形成
比值适中时 促进愈伤组织的生长
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(4)环境因素: ( pH、温度、光照)等条
件也能影响植物组织培养。菊花组织培养,一
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不 同,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物 包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。
③、高等植物是光能自养型生物,为什么在植 物组织培养过程中还需要提供有机物培养基?
此时的组织或细胞为离体的,细胞所生活 的环境为液体有机物营养环境,而不能体现其 整个植物体的光能自养。
2、无菌操作要求
操作要在酒精灯火焰旁完成,每次使用器械后, 都需要用火焰灼烧灭菌,接种后立即盖好瓶盖。

《植物组织培养与快繁技术》PPT课件第1 - 质量工程

《植物组织培养与快繁技术》PPT课件第1 - 质量工程

2.奠基阶段(30年代中至50年代末):这 一阶段植物组织培养得到了迅速的发展,广泛运 用于生物学和农业生产。
经典的工作有:
• 1934年美国的植物生理学家White培养番茄的根 建立了活跃的无性系并能继代培养,在以后的 28 年间转接了 1600 代仍能生长。 1939 年他们首 先发现了B族维生素对植物生长的意义 • 1955 年, Miller 等首次从鲱鱼精子中分离得到 细胞分裂素,定名为激动素(Kinetin)
• 外植体: 用于组织培养的离体材料称为外植体 (explant)。 • 初代培养:外植体的第一次培养 • 继代培养:初代培养后的培养体转移到 新鲜的培养基中,并反复的多次移植、 培养,统称为继代培养。
• 愈伤组织:原指植物在受伤以后于伤
口表面长出来的一团无特定结构和功
能的细胞团,组织培养中则指在人工
二、植物组织培养的基本技术
• 洗涤技术:玻璃器皿洗涤、塑料器皿洗涤 • 灭菌技术(培养基、培养用具灭菌):湿 热灭菌、干热灭菌、过滤灭菌、化学灭菌、 辐射灭菌等。
• 无菌操作技术:无菌室的消毒、材料的消 毒、接种等
三、 植物组织培养的步骤:
组织培养流程图
第三章 植物离体快速无性繁殖
和无病毒植株的培养
一、植物离体快速无性繁殖
(一)快速繁殖的概念
植物的快速繁殖又称微繁,指
将来自优良植株的茎尖,腋芽,叶片, 鳞片等器官、组织和细胞进行离体培 养,在短期内获得大量的遗传性一致 的个体的方法。
2. 快速繁殖的优越性:
(1)快速繁殖、短期满足大量需求 • 组织培养的最大优点在于短期内能用较少的材料 繁殖大量优质种苗,具有用材少、周期短、速度 快等特点。由于可人为控制培养条件,根据不同 植物不同离体部位的不同要求而提供不同的培养 条件,因此生长快,往往10—40天即为一生长周 期。所以,虽然植物组织培养需一定的设备及能 源消耗,但由于植物材料能按几何级数大量繁殖 生产,故还是成本低廉,利于工厂化生产,能及 时提供规格整齐一致的优质、无病菌的植物种苗。

植物的组织培养课件

植物的组织培养课件

应用领域与前景展望
要点一
应用领域
植物组织培养技术已广泛应用于快速繁殖、无病毒苗培育 、种质资源保存、次生代谢产物生产、基因工程等方面。 例如,通过植物组织培养技术可以快速繁殖名贵花卉、果 树等经济作物;培育无病毒苗可以提高作物产量和品质; 利用植物细胞培养生产次生代谢产物如紫杉醇等具有重要 药用价值的化合物。
选用高效外植体
选择生长旺盛、再生能力强的 外植体,提高诱导率和增殖倍 数。
引入新技术
如微繁殖技术、胚胎培养技术 等,降低实验成本和提高实验
效率。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
培养箱
提供恒定的温度、湿度和光照 条件,用于植物组织的培养。
高压灭菌器
对培养基、器械等进行高温高 压灭菌处理,确保无菌操作。
显微镜及成像系统
观察植物组织生长情况,记录 实验数据。
实验室安全管理与操作规范
实验室安全制度
制定并执行实验室安全管理制度,确保实验 人员遵守安全规定。
无菌操作规范
遵守无菌操作原则,避免污染培养物。
06 植物组织培养技术应用实 例分析
快速繁殖优质种苗技术
实验室条件下的无菌操作
利用植物组织培养技术,在实验室内进行无菌操作,可以快速繁 殖出大量优质种苗。
缩短繁殖周期
通过组织培养技术,可以缩短植物的繁殖周期,提高繁殖效率。
保持优良品种特性
组织培养繁殖可以保持母株的优良性状,避免品种退化。
脱毒苗生产技术
营养物质和添加剂对增殖分化的影响
营养物质
植物组织培养需要充足的营养物质,包括碳源、氮源、无机盐、维生素等。这些营养物质为细胞提供 能量和合成物质的原料,对细胞的增殖和分化具有重要影响。

植物组织培养【优质PPT】

植物组织培养【优质PPT】

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2、植物组织培养技术的初步形成(1930-1960年)
1933年,我国植物生理学家李继侗培养银杏胚胎,并发现银杏胚乳提取 液可促进离体胚的生长。
1937年,White发现B族维生素对离体根培养的重要性。并指出IAA对植 物生长发育的控制起重要作用。
1937,1938年,Gantheret在培养基中加入上述生长因子,使得柳树形成层 诱导形成的愈伤组织连续生长。Nobecomt对烟草种间杂种茎段的形成层细 胞培养也得到了类似的结果。
(3)液体培养(Liquid Culture):震荡、旋转或静置培 养。
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固体培养: 液体培养
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三、植物组织培养技术的理论基础
植物细胞的全能性(Plant cellular totipotency)
从理论上讲,植物体的每个生活细胞都具有该 植物体的全部遗传信息,在特定的离体培养条件 下,具有发育成完整植株的潜在能力。
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3、植物组织培养技术的发展(1960年以后)
1960年,Morel利用兰花茎尖培养对兰花进行营养繁殖;
1962年,Murashige和Skoog开发出最著名的Murashige和Skoog培养基 (MS基本培养基),并被后来广泛采用的基本培养基。
1964年,印度人Guha和Maheshwari利用曼陀罗花粉培养获得第一例 单倍体植株。从而开辟了单倍体育种技术。
细胞团培养
茎尖分生组织培养 原生质体培养
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矮牵牛茎尖离体培养培养
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大蒜根尖培养及植株

(完整)植物组培高效快繁技术ppt精品PPT资料精品PPT资料

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• 植物非试管高效快繁技术植物非试管高效快繁技术 是介于扦插和组培技术之间的一种植物快繁技术。
原理和方法
传统扦插:
由于生产所需条件简单, 不能对环境做较大改变,受环 境条件限制大,具有明显的季 节性,不能进行周年繁苗。
组培:
密封的试管或三角瓶作为培 养场所, 这是组培存在弊端的 根源所在, 也是形成严格消毒 杀菌等繁琐技术体系的必要所 在。透气差,再加上不透气的琼 脂培养基, 使根系缺氧造成根 量少而弱; 这些局限因子的存 在导致玻璃化苗的产生, 炼苗 成活率低, 移栽困难与感染病 菌造成死苗的现象。
细胞工程
Cell engineering
植物非试管高效快繁技术
Technique of Efficient & Rapid Non-test tube Plant Cloning
目录
技术简介
植物非试管高效 快繁技术的特点
植物非试管快速 繁殖的流程
植物非试管高效快 繁技术产业化市场 前景
一、技术简介
6、多数植物利用植物非试管高效快繁技术培养到第2代 以后,4~11天即可获得完整再生植株,再生植株率达 90%以上,真正实现了高效快繁。
有些科属植物生根繁殖情况特殊,如鸡毛松、云杉、红豆杉、油 樟、岩桂、中国兰草、牡丹等生根持续时间较长。但仍然比试管 快繁和常育苗要快,综合快繁效率要高。
7、技术步骤少,所用时间短,极大地节约了综合生产成 本和提高了人员的生产效率。从微型材料开始繁殖,可 直接培育出在自然条件下生长的植株,不需任何移栽, 对多数植物仅需要15-60天的培育即可用于生产栽培, 而且植株均表现开花结果早,丰产性好。
背景
• 近40年来,真正面对大多数生产上急需、量大、价 格低廉的无性繁殖(vegetative propagation)种苗, 有些科属植物生根繁殖情况特殊,如鸡毛松、云杉、红豆杉、油樟、岩桂、中国兰草、牡丹等生根持续时间较长。
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设备:无菌操作室安装有紫外 灯和空调,工作台和搁架,还有超 净工作台和整套灭菌接种仪器、药 品等。
3、培养室
功能:对接种到培养瓶等器皿中 的植物离体材料进行控制条件下的培 养。
要求:约需10-20平方米左右。应 保持清洁和适度干燥;安装排风窗和 换气扇等培养室的换气装置;配置适 宜的培养架,并安装日光灯照明。
尘建筑材料。 – 实验室内安装的洗手池、下水道的位置要适宜,不得对
培养带来污染。 – 实验室应有消防火栓、报警装置等安全设施。
+ 组织培养实验室布局的总体要求
+
功能齐全
+
布局合理
+
环境清洁
+
易于灭菌
植物组织培养实验室设计实例
基本实验室布局平面图
搁 水槽 架


4.0m 架


电 炉

准备室 4.5m
+ 为了保证玻璃器皿的洁净干燥,还需要电热鼓风干燥 箱(烘箱) 。
贮存室
+ 贮存室用以对各类器皿和用具的存放和保管。
+ 植物组织培养需要较多的玻璃器皿,而且生产中使用 数量有一定的周期性,宜用专门房间和专门货架、货 柜等贮存,以免破损、脏污。
化学实验室或培养基配制室
+ 化学实验室主要用来完成培养基配制的各个环节的工作,如 药品的称量、溶解、培养基的配制和分装等。
+ 要有较大的平面工作台或实验台,低温冰箱或冰柜,各种橱 架、药品柜及化学药品,各种型号玻璃器皿或其他器皿,各 种型号的天平和称量器具,酸度计和搅拌器,蒸馏水器、离 子交换系统或其他过滤渗透系统。
灭菌室
+ 灭菌室用于对培养基、玻璃器皿及接种工具的灭菌。
+ 一般采用医用或微生物研究用的手提式高压蒸汽灭菌锅 ,或大型的立式、卧式高压灭菌锅。灭菌室室内应装备 水、电、煤气等有关设备,墙壁宜防潮湿、耐高温。另 要配备钟表和计时器。
+ 标准的植物组织培养实验室应该包括:
– 洗涤室 – 贮存室 – 灭菌室 – 化学实验室或培养基配制室 – 无菌室或接种室 – 培养室 – 观察与鉴定室 – 主要对组织培养用的玻璃器皿、塑料器皿和其 他实验用具进行清洗。
+ 房间要配备自来水管、水池或水槽、工作台和各种清 洗器具的洗涤试剂,地面要光滑坚硬,要求有很好的 排水设施。
植物组培快繁实验室学时
植物组培快繁实验室的设计
新建组培室地址的选择: 1、首先要保证水电供应; 2、为节省能源,充分利用自然光,实验室应向南建设,
使采光面积和时数达到最大; 3、对于商业性实验室,交通条件是否便利是一个应该考
虑因素。 4、组培室最好避免建立在繁忙的交通线的附近; 5、避免与温室、微生物实验室、昆虫实验室、种子或其
无菌室或接种室
+ 接种室应该保证洁净、无菌。 + 目前多用超净工作台来代替这种要求严格的接种室。除超
净工作台外,应配备接种用的酒精灯、各种医用镊子、解 剖刀、手术刀、接种针、贮藏70%酒精棉球的广口瓶、试 管架和载物台等工具。
设备:1-2盏紫外灯、灭菌后的工作服、 拖鞋、口罩。
(二)辅助实验室
1、细胞学实验室 功能:对培养材料进行细胞学鉴定和研究, 由制片室和显微观察室组成。 要求:明亮、清洁、干燥、防止潮湿和灰 尘污染。 2、生化分析实验室 功能:培养细胞产物为主要目的的实验室, 应建立相应的分析化验实验室,随时对培养 物成分进行取样检查。大型次生代谢物生产, 还需有效分离实验室。
冰箱
药 品 及 仪 器 柜
无菌台
无菌台
无菌室
缓冲室
3.0m

拉 窗
培养架
培养架
架 培养室






3.5m
二、实验室组成
准备室
缓冲室 基本实验室 无菌操作室
实验室 组成
培养室 细胞生物学实验室
辅助实验室 温 室
生化分析实验室
(一)基本实验室
基本实验室 包括准备室、无 菌操作室、培养 室、缓冲间,是 组织培养实验所 必须具备的基本 条件。
他植物材料储藏室相邻,以免由于空气流通造成难以克 服的污染。
植物组织培养实验室的设计
新建组培室需考虑的问题: + 所从事的实验的性质,即是生产性的还是研究性的
,是基本层次的还是较高层次的; + 实验室的规模,规模主要取决于经费和实验性质。
植物组织培养实验室的设计
+ 植物组织培养实验室设计应遵守的原则: + 实验室设置的基本原则是:科学、高效、经济和实用。
1、准备室 功能:又叫化学实验室,进行一切与实验 有关的准备工作。 要求:最好有20平方米左右。要求宽敞明 亮、以便于放置多个实验台和相关设备,方 便多人同时工作;同时要求通风条件好,便 于气体交换;实验室地面应便于清洁,并应 进行防滑处理。
分类:(1)分体式-研究性 质实验室。(2)通间式-规模化 实验室。
设备:培养架、光照培养箱或人 工气候箱、边台用于拍摄培养物生长 状况,除湿机、显微镜、温湿度计、 空调等。
4、缓冲间
功能:是进入无菌室前的一个缓冲场地, 减少人体从外界带入的尘埃等污染物。工作 人员在此换上工作服、拖鞋,戴上口罩,才 能进入无菌室和培养室。
要求:缓冲间需3-5平方米,可建在准备 室外或无菌操作室外,应保持清洁无菌;备 有鞋架和衣帽挂钩,并有清洁的实验用拖鞋、 已灭菌过的工作服;墙顶用1-2盏紫外灯定时 照射,对衣物进行灭菌。
+ 一个组织培养实验室必须满足3个基本的需要:实验准备、 无菌操作和控制培养。
植物组织培养实验室的设计
– 保证绝对清洁 – 植物组织培养一般需要光照和控温,为节省能源,应充
分利用自然光,同时房间设计要便于控温。 – 实验室的设计按自然工作程序的先后安排成一条连续的
生产线,避免环节倒排。 – 实验室设置防止昆虫、鸟类、鼠类等动物进入的设施。 – 实验室内的地面、墙壁和顶棚等,要采用最小的产生灰
设备:准备室应具备工作台、 柜橱、水池、仪器、药品等。
2、无菌操作室
功能:也叫接种室,进行材料的立体无菌 操作。
要求:房间一般不宜过大,10-20平方米即 可。要求封闭性好,干燥清洁,能较长时间 保持无菌;地面及内墙壁都应采用防水和耐 腐蚀材料;地面要求平坦无缝;防止空气对 流。
一般新建实验室的无菌室在使 用之前应进行灭菌处理,处理方法 是甲醛和高锰酸钾熏蒸,并需定期 灭菌处理,还可用紫外线照射1-2h/ 周,或每次使用前照射10-30min。
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