基因工程大实验报告
基因工程复原实验报告
基因工程复原实验报告实验目的：本实验旨在通过基因工程技术复原目标基因的DNA序列，并验证复原的DNA序列是否与目标基因的DNA序列一致。
实验原理：基因工程是一项利用生物技术对基因进行修饰、编辑或复原的技术。
在本实验中，我们使用了PCR技术进行目标基因的复原。
PCR（聚合酶链反应）是一种通过DNA聚合酶酶活性实现的体外DNA复制技术。
PCR技术的步骤包括DNA变性、引物结合和扩增。
首先，将包含目标基因的DNA样品变性，使双链DNA解链成两条单链DNA。
然后，设计两对引物，其中一对称为前向引物，另一对称为反向引物。
这两对引物分别与目标基因的两个末端互补，并在PCR反应中起到定位作用。
引物结合步骤是将引物与单链DNA互补配对，形成DNA引物-模板复合物。
接下来，通过加入DNA聚合酶和适当的反应缓冲液，将复合物暴露于适宜的温度下，使DNA聚合酶在引物模板复合物的作用下开始合成新的DNA链。
这个过程是以引物为模板，由DNA聚合酶从3'端向5'方向合成DNA链，产生两条互补的新DNA链。
这个循环被多次重复进行，每次循环会使目标DNA 的数量扩增一倍。
最后，通过凝胶电泳分析PCR产物。
在凝胶电泳实验中，DNA片段会根据其大小在电场作用下向正电极方向迁移，用染料染色后可以可视化分析。
实验步骤：1. 准备实验所需试剂和仪器。
2. 提取目标基因的源DNA样本。
3. 设计并合成适合的引物。
4. 设置PCR反应条件，并进行PCR反应。
根据目标基因的大小和要扩增的目标数量合理调整PCR反应体系中的模板DNA、引物和酶的浓度。
5. 将PCR产物进行凝胶电泳分析。
将电泳所需试剂配置好，将PCR产物与DNA分子量标准品一同加载到琼脂糖凝胶中进行电泳，电泳结束后观察结果。
6. 提取目标基因的PCR产物。
7. 进行目标基因PCR产物的测序分析，验证复原的DNA序列是否与目标基因的DNA序列一致。
实验结果与讨论：根据电泳分析结果和测序分析的数据，我们可以判断复原实验是否成功，并验证目标基因的DNA序列是否与目标基因的DNA序列一致。
基因工程 实验报告
基因工程实验报告学号姓名1实验目的（1）学习并掌握基因工程操作技术中最常用的载体质粒DNA的提取方法。
（2）学习琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理和方法，检测质粒DNA的浓度与分子量。
（3）了解PCR的基本原理，掌握PCR的基本操作技术。
（4）学习利用限制性内切酶切割DNA的方法，并通过电泳检测酶切的效果。
（5）学习DNA重组技术中的核心步骤，DNA片段之间的体外连接方法。
（6）学习制备感受态细胞并将体外重组DNA引入受体细胞的技术。
（7）掌握利用蓝白斑筛选出转化子的方法。
2 实验原理2.1质粒DNA提取的原理菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时，双链DNA氢键断裂，DNA双螺旋结构遭破坏而发生变性，但由于质粒DNA分子量相对较小，且呈环状超螺旋结构，即使在高碱性pH条件下，两条互补链也不会充分分离，当加入中和缓冲液调时，变性质粒DNA又恢复到原来的构型；而线性的大分子量的细菌染色体DNA则不能复性，与细胞碎片、蛋白质、SDS等形成不溶性复合物。
当加入中和溶液后，质粒DNA能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；变形的蛋白质和DNA呈絮状，离心时可以沉淀下来。
碱裂法获得的质粒DNA 经过苯酚、氯仿抽提，RNA酶消化和乙醇沉淀除去残余的蛋白质和RNA，所得纯化的质粒DNA可满足实验要求。
2.2 PCR扩增功能基因的原理将反应体系(模板DNA、引物1、引物2、Mg2+、4种dNTP和Taq DNA聚合酶)置于高温(94℃)下变性，使模板双链DNA解链为两条单链。
在低温(37~65℃)下退火，使引物与模板链3’端结合，形成部分双链DNA。
在中温(~72℃)下，通过Taq DNA聚合酶使引物从5’端向3’端延伸，随着4种dNTP的掺入合成新的DNA互补链，完成第一轮变性、退火和聚合反应循环。
反复进行这种变性、退火和聚合反应循环，可使两端引物限定范围内的DNA 序列以指数形式扩增。
循环的次数主要取决于模板的浓度，从理论上将一个目的DNA分子经20轮扩增后，可达106。
基因工程实验报告
基因工程实验报告一、实验目的：本实验旨在掌握基因工程的基本操作技能，了解DNA的提取、PCR扩增和基因克隆等基本实验过程，并通过实际操作检测转基因植物的存在。
二、实验原理：1.DNA提取：采用传统的CTAB法提取植物基因组DNA，目的是获得待测植物样品中的基因组DNA。
2.PCR扩增：选用合适的引物，利用PCR技术将待测基因扩增出来。
PCR反应中需要设置阳性对照、阴性对照和试验样品，以确定PCR扩增结果的可靠性。
3.基因克隆：将PCR扩增得到的目标基因与质粒载体进行连接，再将重组质粒导入大肠杆菌进行转化培养，最后通过酶切和测序等方法验证目标基因的克隆成功与否。
三、实验步骤：1.DNA提取：将待测植物样品加入CTAB提取缓冲液中，酶解并脱脂植物细胞，通过乙酰酚/氯仿法提取总DNA。
2. PCR扩增：设计合适的引物，进行PCR反应。
反应条件通常为94℃预变性5min，然后循环20-35次，每次循环包括94℃变性30s、56-68℃退火30s、72℃延伸1-2min，最后72℃延伸10min。
3.基因克隆：将PCR扩增得到的目标基因进行酶切，并与质粒载体进行连接，然后转化大肠杆菌进行培养。
通过PCR重放大和酶切验证目标基因是否成功克隆。
4.验证目标基因：通过测序等方法对目标基因进行验证，判断基因克隆是否成功。
四、实验结果与分析：1.DNA提取：从待测植物样品中成功提取到总DNA，并进行酶切分析，可见DNA带状条带。
2.PCR扩增：通过PCR扩增，得到了目标基因的特异性条带，并且也验证了阳性对照和阴性对照的准确性。
3.基因克隆：通过酶切和重放大等方法验证了目标基因的成功克隆。
4.验证目标基因：通过测序结果，确认目标基因与已知序列一致，说明基因克隆成功。
五、实验结论：通过本实验，我们掌握了基因工程的基本操作技能，成功进行了DNA提取、PCR扩增和基因克隆等实验过程，并通过测序等方法验证了目标基因的克隆成功。
基因工程实验报告
基因工程实验报告摘要：提取小麦的总的RNA通过RT—PCR扩增出GAPDH截短体基因ｃDNA，ＰＣＲ扩增ｃDNA获得大量目的基因，对目的基因和表达载体p ＧＥＸ４Ｔ－１进行双酶切，通过电泳分离条带胶回收酶切的目的基因和载体，然后载体和目的基因连接构建表达载体，重组载体转入大肠杆菌top10中大量复制目的基因；提取质粒，转入大肠杆菌bl21，通过ＩＰＴＧ诱导目的基因的表达；通过ＳＤＳ染色和Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交检验目的蛋白是否表达。
实验流程：小麦幼苗总ＲＮＡ提取ＲＴ＿ＰＣＲ扩增目的基因表达载体构建表达菌株转化（ｔｏｐ１０）从ｔｏｐ１０转入ＢＬ２１诱导表达Ｗｅｓｅｒｎ杂交一．目的基因的获得１．小麦总ｒｎａ的提取（Ｔｒｉｚｏｌ法）１在研钵中加入液氮，再将小麦剪成小片段在液氮中磨成粉末，用液氮预冷的钥匙取１００ｕｌ粉末于已加入１ｍｌ的ｔｒｉｚｏｌ的ＥＰ管中，充分混匀。
２室温放置５ｍｉｎ，然后加入２ｏｏｕｌ的氯仿，剧烈震荡。
３１２０００ｒｐｍ离心１０分钟，取上清于新的ＥＰ管，加入500ul异丙醇，温和颠倒，室温放置10分钟，12000rpm离心10分钟。
4小心弃上清，加入75%乙醇，混匀，4度12000rpm离心5分钟。
5重复46弃上清，室温干燥5-10分钟，用30uldepc溶解rna。
2.rna电泳检测是否提取出rna（10ulrna+1ul buffer）图中出现明显的亮的条带的即表示提取出rna，其中我们提取的rna比较少条带不明显，可能是操作过程中被污染，所以在提取rna是一定要注意防止rna降解，因为空气中随处都是rna酶，所以要带上手套，快速操作，尽量不要暴露在空气中，使用处理过的试管，器材。
3.RT-PCR扩增目的基因cDNA3.1 rna反转录Total RNA 6ulOligo dt primer 1ulH2o 5ul65℃5min,补加下列试剂5×reaction buffer 4ulRibolock rnase inhibitor 1ul10mM dntp mix 2ulRevertaid m-mulv reverse transcripase 1ul42℃ 60min70℃ 5min3.2 PCR扩增目的基因（表达引物扩增 25ul)2×pcr mix 12.5ul 95℃1mincDNA 1ul 95℃10s引物GAPDH1-1 1ul 58℃ 20s 35cycle引物GAPDH1-2 1ul 72℃45sH2O 9.5ul 72℃10min通过图片的条带可以看出pcr扩增的产物；通过RT-PCR获得的目的片段，为连续表达的基因片段，去除了真核基因中的内含子序列，通过重组质粒载体的构建可以直接在宿主大肠杆菌中克隆和表达。
基因工程实验报告
基因工程实验报告引言基因工程是现代生物技术的一个重要分支，通过对生物体基因的修改和重组，可以创造出具有特定功能的生物体。
本次实验旨在探究基因工程在农业、医学等领域的应用，以及可能带来的潜在风险和争议。
实验方法1. 筛选目标基因：首先，我们在实验中选择了对叶绿体功能有重要影响的一个基因作为目标基因。
2. 基因克隆：通过PCR技术，将目标基因从细菌DNA中放大，然后将其插入载体DNA中。
3. 转化目标生物体：将重组的载体DNA转入植物叶片细胞中，借助几丁质体、热激冲击等方法促使基因转化成功。
4. 筛选阳性转化率：通过筛选培养基中的抗性选择制剂，筛选出转化成功的阳性细胞。
5. 验证目标基因的表达：通过PCR扩增和基因芯片技术验证目标基因在转化植物中的表达情况。
实验结果1. 实验结果显示：我们成功将目标基因插入到植物叶片细胞的染色体中，并且获得了一定比率的阳性转化植株。
2. 鉴定转化植株：对转化植株进行证实鉴定，确保目标基因已经整合到植株基因组中，且稳定表达。
3. 表达验证：通过PCR扩增和基因芯片分析，确定目标基因在转化植物中得到了表达，并且表达量较高。
4. 性状鉴定：对转化植物进行生长发育、形态结构、生理生化等方面的综合性状鉴定，结果显示转化植物与野生型无显著差异。
讨论基因工程技术的应用：本次实验展示了基因工程技术在农业生产中的应用前景，通过将具有耐逆性、抗病虫害等功能基因导入植物，可以提高植物的产量和抗逆性。
潜在风险和争议：但是，基因工程也伴随着一系列争议和风险，如转基因植物可能对环境造成影响，转基因食品可能对人体健康产生潜在影响，因此需要严格的监管和评估。
结论通过本次实验，我们成功地验证了基因工程技术的可行性，展示了其在农业和生命科学领域的广阔应用前景。
然而，我们也要看到基因工程技术所带来的潜在风险和争议，需要谨慎评估和监管。
基因工程是一把双刃剑，只有正确使用才能实现其最大的利益。
愿基因工程技术为人类带来更多福祉。
基因工程实训总结
《基因工程实训》总结报告实习总结第一天，我们是进行实验试剂的配置，以备实验过程中大家共同使用。
每组都有自己的任务，我们组是配置最后检测重组蛋白的制备SDS-PAGE电泳胶的试剂。
以及酵母划板培养。
试剂的配置是很关键的一步，如果没有依据要求配制试剂的话，可能会导致实验失败。
比如，最后一天在电泳时，样品一直都没有沉到点样孔底部，而marker却能沉下去，可能是因为sample buffer 的配置出了问题。
最终我们用了老师的buffer，效果有所改善。
却还是有上浮的迹象，也有可能是缓冲液的密度太大。
第二天，我们进行了PCR扩增产物、琼脂糖凝胶电泳检测产物、HindⅢ和Xba I双酶切、含载体的DH5α扩大培养等操作。
从中我学到了PCR仪器程序设置的方法。
以及对其它现有操作技术进行巩固和提升。
第三天，我们从大肠杆菌中提取了质粒载体，并且对其进行双酶切，与同样双酶切的目的基因进行连接，以及挑单克隆酵母过夜培养。
双酶切可以极大的避免载体与目的基因自身环化，提高了连接的效率。
通过实验，我能够更好的理解书本上的理论知识。
第四天，连接产物转化大肠杆菌。
通过热激的方法使带有目的基因的载体进入大肠杆菌细胞中，因为DNA是吸附在细胞表面的，因此在热激过程中避免晃动过大。
同样的在实验过程中，我们会注意到平时书本上不会注明的小点，但这往往也是实验成败的关键因素之一。
第五天，酵母感受态的制备与转化细胞应该处于对数生长期，是感受态细胞制备与成功转化的关键。
我们在实验过程中，OD600一直都无法达到0.4~0.6的范围。
可能是培养基的配置出了问题，也有可能是分光光度计本身的仪器问题。
我们为了达到一定的细胞数量取了两倍体积的菌液。
第六天、第七天，提取重组质粒酶切鉴定与酵母单克隆过夜培养。
真核表达系统有蛋白质的加工修饰系统，可以得到有生物活性的蛋白质。
且酵母是分泌型的表达系统，不仅不易被细胞内蛋白酶降解还可以免去破碎细胞提取蛋白的麻烦。
基因工程实验报告
基因工程实验报告基因工程实验报告引言：基因工程是一门前沿的科学领域，通过对生物体的基因进行编辑和改造，已经在医学、农业、环境保护等领域取得了重大突破。
本实验旨在探索基因工程的原理和应用，并通过实验验证其可行性。
实验目的：本实验旨在通过基因工程技术将一种植物的抗虫基因转移到另一种植物中，以增强其抗虫能力。
通过此实验，我们希望验证基因工程在农业领域的潜力，为农作物的抗虫育种提供新的思路和方法。
实验方法：1. 选择目标基因：通过文献调研，我们选择了一种来源于大豆的抗虫基因。
2. 提取基因：使用PCR技术从大豆中提取目标基因的DNA序列。
3. 载体构建：将目标基因插入一个植物表达载体中，以便在目标植物中进行转基因。
4. 转基因：将植物表达载体导入目标植物细胞中，通过生物转化技术将目标基因导入目标植物的基因组中。
5. 筛选转基因植物：通过对转基因植物进行筛选和鉴定，确认是否成功将目标基因转移到目标植物中。
6. 抗虫性测试：将转基因植物和野生型植物分别暴露在虫害环境中，观察并比较它们的抗虫能力。
实验结果：经过实验，我们成功将大豆的抗虫基因转移到了目标植物中。
通过PCR技术和基因测序，我们确认了目标基因已经整合到目标植物的基因组中。
在抗虫性测试中，转基因植物表现出明显的抗虫能力，相比野生型植物，其受虫害程度明显降低。
讨论与分析：本实验结果表明，基因工程技术可以成功地将抗虫基因转移到目标植物中，从而提升其抗虫能力。
这为农作物的抗虫育种提供了新的思路和方法。
通过基因工程，我们可以将不同物种的有益基因导入到目标植物中，从而增强其抗虫性、抗病性等特性。
这对于农业生产的可持续发展和环境保护具有重要意义。
然而，基因工程也面临一些挑战和争议。
一方面，基因工程技术的应用需要谨慎，确保对环境和生态系统的影响可控。
另一方面，基因工程的伦理和道德问题也需要认真思考和讨论。
因此，在推动基因工程技术的发展和应用时，我们需要综合考虑科学、环境和社会的各种因素。
基因工程实验
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五、实验注意事项
1 用微波煮胶时，胶液的量不应超过三角瓶容量的 1/3，否则易溢出
2 煮好的胶应冷却至50℃左右时再倒，以免制胶板变 形，并减少漏胶的机会
加入等体积的氯仿， 12000rpm，离心5分钟，取上清
加入1/10体积的3MNaAc，加2倍体积的预冷的无水乙 醇，混匀。
置于-70℃冰箱约10min以上或者-20℃冰箱30min至 数个小时
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12000rpm离心15分钟（4℃），倒掉酒精，离心几秒，
用移液枪尽可能除去酒精
用0.5ml70 %酒精洗DNA沉淀一次，离心2分钟，倒掉 酒精
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当加入中性缓冲液调和时，变性的质粒 DNA又恢复到原来的构型，而染色体DNA 不能复性，它们之间交联形成不溶性网状 结构，并与细胞碎片、蛋白质、SDS等结 合沉淀下来。
通过离心沉淀，细胞碎片、染色体DNA 及大部分蛋白质等可被除去，而质粒DNA 及小分子量的RNA则留在上清液中。混杂 的RNA可用RNaseA消除。再用酚／氯仿 处理，可除残留蛋白质
真核生物的基因组DNA为双螺旋结构，在在碱性溶 液中，双链DNA氢键断裂，双螺旋结构遭破坏而发生 变形，而基因组DNA分子量相对较大，在碱性PH条 件下其线性的大分子量基因组DNA不能复性，而形成 缠连的网状结构与蛋白质等共沉淀。
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2 异丙醇和无水乙醇对核酸沉淀的优缺点 答：异丙醇和乙醇都能与与任意比例的水相混合。异 丙醇比较疏水，能很更好地沉淀核酸，乙醇可以去 盐，它比异丙醇更亲水，所以能去掉一些盐离子。 异丙醇沉淀量多，但杂质也多，增加了后续实 验风险。其优点为：所需容积小且速度快，适用于 浓度低，而体积大的DNA样品的沉淀。一般不需要 在低温条件下长时间放置。缺点为：易使盐类（如 NaCl、蔗糖）与DNA共沉淀；在DNA沉淀中异丙 醇难以挥发除去 乙醇是沉淀DNA乙醇是首选的有机溶剂，对盐 类沉淀少，DNA沉淀中所含的衡量乙醇易蒸发去处， 不影响以后的实验。在适当的盐浓度下，2倍样品 容积的95％乙醇可有效沉淀DNA。其缺点是总体积 较大。需在-20放置很长时间，30分钟-1小时，同 时DNA微溶于乙醇，使用乙醇沉淀会使部分DNA溶 解损失
基因工程实验报告
一、实验目的1. 学习并掌握基因工程的基本原理和操作技术；2. 熟悉基因克隆、表达、检测等实验操作；3. 培养实验操作技能和科学思维能力。
二、实验原理基因工程是利用分子生物学和生物化学原理，通过人工手段对生物的遗传物质进行改造，以达到改变生物特性、提高生物产量、生产新生物制品等目的的技术。
实验中主要涉及以下原理：1. 限制性核酸内切酶（Restriction endonuclease）：能够识别特定的核苷酸序列，并在该序列的特定位置切割DNA链；2. DNA连接酶（DNA ligase）：能够将两个DNA片段连接起来；3. 转化：将外源DNA片段导入受体细胞；4. 转录和翻译：将目的基因转录成mRNA，再翻译成蛋白质。
三、实验材料1. 质粒载体：pET-28a、pUC19等；2. 限制性核酸内切酶：EcoRI、HindIII等；3. DNA连接酶：T4 DNA连接酶；4. 转化试剂：钙离子、转染试剂等；5. 实验试剂：Tris-HCl缓冲液、NaCl、KCl、MgCl2、DNA模板、引物、dNTPs、PCR试剂等；6. 实验仪器：PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、离心机、移液器、超净工作台等。
四、实验步骤1. 设计实验方案：根据实验目的，设计实验步骤，包括目的基因的克隆、表达、检测等。
2. DNA提取：采用CTAB法提取质粒DNA。
3. 限制性核酸内切酶酶切：将质粒DNA和目的基因片段分别进行EcoRI、HindIII酶切，酶切产物进行电泳鉴定。
4. DNA连接：将酶切后的质粒DNA和目的基因片段进行连接，连接产物进行电泳鉴定。
5. 转化：将连接产物转化到大肠杆菌感受态细胞中，筛选阳性克隆。
6. 阳性克隆的鉴定：通过PCR、测序等方法对阳性克隆进行鉴定。
7. 重组质粒的提取：提取重组质粒，进行电泳鉴定。
8. 重组质粒的表达：将重组质粒转化到大肠杆菌表达系统中，进行诱导表达。
9. 目的蛋白的纯化：采用离子交换层析、亲和层析等方法对目的蛋白进行纯化。
华农基因工程实验报告
实验报告实验项目名称：基因工程综合实验实验项目性质：综合性实验所属课程名称：基因工程班级：11生物工程1班学号：秋叶指导老师：陈忠正实验完成时间：2014年5月11日目录：0.摘要 (3)1.前言 (3)2.实验材料和仪器 (3)2.1 实验材料2.2实验仪器.3.实验试剂 (4)3.1DNA提取所需试剂3.2 PCR实验所需试剂3.3 双酶切实验所需试剂4.实验步骤 (4)4.1 质粒DNA提取4.2 聚合酶链式反应（PCR）4.3 质粒DNA的双酶切分析4.4 琼脂糖凝胶制备5.实验结果与分析 (7)5.1质粒DNA提取所得凝胶电泳结果5.2 PCR扩增实验结果5.3质粒DNA的双酶切分析结果摘要：实验包括质粒DNA的提取、DNA的凝胶电泳、质粒DNA中靶基因的酶切分析及质粒DNA中重组进的靶DNA序列的PCR扩增。
通过本综合实验，帮助大家理解质粒DNA的提取原理、凝胶电泳中DNA分离的机理、限制性内切酶的工作原理及PCR是如何实现DNA扩增的，通过实验同时让同学掌握DNA 的提取技术、凝胶电泳技术、DNA酶切分析技术及靶基因的体外快速扩增技术，了解实验中出现的现象并学会分析与解决实验中出现的有关问题。
聚合酶链反应（PCR）是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火（复性）及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA 得以迅速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。
它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究，还可用于疾病的诊断或任何有DNA,RNA的地方．聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，简称PCR）又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。
关键词：凝胶电泳限制线内切酶DNA质粒1 前言本次实验对象为含有重组了1kb DNA片段的PET32.a表达质粒。
该表达质粒中长度约6kb。
首先采用离心破碎法破碎细胞，再使用碱裂解法提取质粒DNA。
基因工程实验报告的实验步骤
基因工程实验报告的实验步骤引言基因工程是一种通过改变生物体遗传物质的工艺来改变其性状的技术。
基因工程在医药、农业和环境保护等领域有广泛的应用。
本实验旨在通过简单的基因工程实验，介绍基因工程的基本原理和实验步骤。
材料与方法1.实验材料：-选择性培养基：含有特定抗生素、激素或其它附加物质的培养基，以选择或鉴别特定的细胞。
-质粒：小的DNA分子，通常用来将外源基因导入宿主细胞。
-酶：用于限制性内切酶切割DNA。
-细胞培养物：用于细胞培养和基因转染。
-DNA提取试剂盒：用于提取DNA。
-PCR试剂盒：用于DNA扩增。
-DNA凝胶电泳仪：用于分离DNA。
2.实验步骤：（1）提取DNAa.收集样本，如细菌培养物或植物叶片。
将样本细胞裂解并使用DNA提取试剂盒提取DNA。
b.检测DNA浓度和质量，并分装为合适的体积备用。
（2）DNA限制性酶切割a.根据研究目的选择正确的限制性酶。
将DNA与限制性酶一同加入反应管中，按照供应商说明的条件进行酶切反应。
b.将反应产物进行电泳分离，观察并记录DNA切割情况。
（3）DNA连接a.选择合适的酶切产物进行连接实验。
将DNA和相应酶与连接试剂进行反应，在恰当的温度下进行连接反应。
b.将反应产物进行电泳分离，观察并记录连接后的DNA条带。
（4）DNA扩增a.根据连接后的DNA序列设计引物，在PCR试剂盒中将DNA进行扩增反应。
b.将PCR反应产物进行电泳分离，观察并记录扩增结果。
（5）基因转染a.准备转染细胞，并将质粒导入细胞。
按照转染试剂盒说明进行操作。
b.观察转染细胞的表型变化，并进行相关分析。
结果与讨论在本实验中，我们成功完成了DNA提取、限制性酶切割、DNA连接、DNA扩增和基因转染的操作。
通过电泳分离，我们观察到了DNA切割、连接和扩增的结果。
此外，转染细胞的表型变化也支持基因导入的成功。
实验结论本实验展示了基因工程的基本步骤，并介绍了DNA提取、限制性酶切割、DNA连接、DNA扩增和基因转染等关键技术。
关于实验报告的总结(3篇)
第1篇一、实验背景本次实验是在我国某高校生物实验室进行的，旨在探究生物技术在基因工程领域的应用。
通过实验，了解基因工程的基本原理、操作方法以及在实际应用中的优势。
实验过程中，我们学习了DNA提取、PCR扩增、DNA连接、转化等关键技术，并成功构建了基因表达载体。
二、实验目的1. 掌握基因工程的基本原理和操作方法。
2. 熟悉DNA提取、PCR扩增、DNA连接、转化等关键技术。
3. 通过实验，了解基因工程在生物技术领域的应用前景。
三、实验内容1. DNA提取实验采用酚-氯仿法提取大肠杆菌DNA，通过离心、洗涤、溶解等步骤，获得纯净的DNA。
2. PCR扩增以提取的DNA为模板，设计特异性引物，进行PCR扩增。
通过优化反应条件，获得高质量的扩增产物。
3. DNA连接将PCR扩增产物与载体连接，构建基因表达载体。
实验中采用T4 DNA连接酶进行连接反应。
4. 转化将构建好的基因表达载体转化到受体细胞中，通过抗生素筛选，获得阳性克隆。
5. 阳性克隆的鉴定通过PCR、酶切等手段，对阳性克隆进行鉴定，确保基因表达载体构建成功。
四、实验结果与分析1. DNA提取通过酚-氯仿法提取大肠杆菌DNA，电泳结果显示DNA条带清晰，表明DNA提取成功。
2. PCR扩增PCR扩增产物经电泳检测，可见特异性条带，表明扩增成功。
3. DNA连接DNA连接反应产物经电泳检测，可见与载体大小相近的条带，表明连接成功。
4. 转化通过抗生素筛选，获得阳性克隆。
PCR鉴定结果显示，阳性克隆中含有目的基因。
5. 阳性克隆的鉴定通过PCR、酶切等手段，对阳性克隆进行鉴定，结果与预期相符，表明基因表达载体构建成功。
五、实验讨论1. 实验过程中，DNA提取、PCR扩增、DNA连接等步骤对实验结果至关重要。
在操作过程中，应严格按照实验步骤进行，确保实验结果的准确性。
2. 实验过程中，可能存在DNA降解、PCR扩增效率低等问题。
为提高实验成功率，可优化实验条件，如调整反应体系、反应时间等。
基因工程实验报告(终)华南理工大学
分子生物学实验报告(2011 -2012 学年第一学期)实验内容：基因工程综合实验实验时间：2012.10.28-2012.11.2 提交日期：2012 年11 月 5 日实验目的大肠杆菌表达包涵体蛋白的基因工程实验以一个目的基因片段的获得，表达和纯化和活性分析为主线，抓住蛋白和核酸两大主题，建立一个综合型和研究性的大实验教学体系，重视各项技术的衔接。
综合性实验旨在启迪严谨的科学思维和创新意识，提高对实验方法和实验技术的综合运用能力。
具体到每个实验的实验目的如下：1．掌握SDS碱裂解法小量制备质粒的原理和方法。
2．掌握高速离心机、微量移液器等常规仪器的正确使用。
3. 掌握分光光度法估算样品中DNA的浓度和纯度。
4. 熟悉紫外分光光度计的使用方法。
5．学习掌握DNA的琼脂糖凝胶电泳的原理和方法及其运用。
6.掌握用CTAB法小量制备大肠杆菌基因组DNA7.了解基因组DNA的其它提取方法8.了解酶切原理。
9.掌握酶切体系的建立原则。
10. 熟悉基因工程所用限制性内切酶的特点。
11.学习掌握外源DNA与质粒载体的重组连接技术12.掌握大肠杆菌感受态细胞的制备及转化的方法及技术。
13.熟练掌握用重组DNA转化感受态细胞的技术，为基因克隆打好基础14.学习掌握PCR技术的原理及基本操作15.学习考马斯亮蓝（Coomassie Brilliant Blue）法测定蛋白质浓度的原理和方法。
16.掌握蛋白质的SDS-PAGE电泳原理和操作技术及应用。
实验流程具体每日实验流程1、 10月28日，利用双酶切，DNA 琼脂糖凝胶电泳，胶回收，双酶切目的基因和载体连接过夜。
2、10月29日下午，大肠杆菌感受态细胞的制备与转化，涂平板和培养，先正放置半小时，再倒置培养过夜。
3、10月30日下午，挑阳性（含抗性基因）菌落，菌落PCR ，转板和液体培养菌体。
4、10月31日上午，转接培养，诱导表达，晚上，离心菌体，去上清，冰箱放置保存。
基因工程实验报告
基因工程实验技术实验报告百度ID：龍吟EX炫1 材料和方法1.1 实验材料1.1.1 实验对象实验室提供的小鼠；含pGEX 4T-1质粒的大肠杆菌BL21 (DE3)，大肠杆菌Top10。
1.1.2 试剂LB液体培养基，LB固体培养基，0.1% DEPC水，无水乙醇，氯仿，异丙醇，Trizol，Olig(dT)18，反转录缓冲液，dNTP，M-MULV反转录酶，RNA抑制剂，2×PCR Mix，Olig(dT)18引物，表达引物EB3、EB4，5×TBE缓冲液，10×Loading buffer，核酸染料Super Gel Red，琼脂糖，Bam H I，Sal I，Bam H I buffer，10×ligation缓冲液，T4 DNA连接酶，ddH2O，氨苄青霉素，IPTG，30%丙烯酰胺，1.5mol/L和0.5mol/L Tris-HCl，10% SDS，10%过硫酸铵溶液，染色液，脱色液，TEMED，Tween-20，DAB工作液、显色液，TIANGEN胶回收试剂盒，TIANGEN质粒提取试剂盒。
1.1.3 仪器高速冷冻离心机，核酸电泳设备，PCR扩增仪，恒温水浴锅，凝胶成像系统，蓝光切胶仪，无菌操作台，恒温摇床，蛋白电泳设备，电转移设备，移液枪1.2 方法1.2.1 实验材料的处理对小鼠进行处死，解剖并取出肝脏组织，备用。
1.2.2 Trizol法提取总RNA将组织剪成小块在液氮中磨成粉末，取50～100mg加入已盛有1ml Trizol离心管中，轻轻混合以排除气体，再充分混匀；室温放置5min，然后加入200μl氯仿，盖紧离心管，并剧烈摇荡15秒钟；12,000rpm离心10min，取上层水相到新的离心管中，加入500μl异丙醇，温和颠倒混匀。
室温放置10min后12,000rpm离心10min；小心地弃去上清液，加入1ml DEPC水配制的75%乙醇，颠倒混匀，12,000rpm离心5min，再重复一次上述操作；弃去上清液，室温或真空干燥3～5min，后用30μl DEPC水溶解RNA。
基因工程实验报告
基因工程实验报告指导老师：* * *学号：2007083*****姓名：* * *班级：07生物技术班海南师范大学生命科学学院07级2010-10-25实验一植物总DNA的提取、纯化实验目的：掌握从植物的组织（细胞）中提取DNA的方法实验原理：十六烷基三乙基溴化铵（CTAB）是一种去污剂，可溶解细胞膜，它能与核酸形成复合物。
在高盐浓度条件下，核酸以稳定形式与去污剂CTAB络合于溶液中，当降低溶液浓度到一定程度时，CTAB与核酸的复合物从溶液中沉淀下来，通过离心就可将该复合物同蛋白质、多糖类物质分开，然后将CTAB溶于高盐溶液，再加入乙醇使核酸沉淀，CTAB溶于乙醇中。
仪器、材料与试剂主要仪器：水浴锅、离心机、研钵、涡旋仪主要试剂和材料：CTAB（十六烷基三乙基溴化铵）裂解液：2%CTAB（W/V）、20 mmol EDTA(pH8.0)、100 mmol Tris-HCl (pH8.0)、1.4 mol NaCl氯仿：异戊醇（24：1）。
异丙醇，无水乙醇。
TE缓冲液：10mmol/L Tris-HCl(pH8.0)、1mmol/L EDTA实验步骤1. 取2g左右的嫩叶子放入预冷的研磨中，第一次加入较多的液氮，开始先慢慢磨开后研磨中待液氮量较少时快速磨动，如发现液氮挥发完迅速加入液氮（加入时动作要轻，防止粉末溅起），重复两次。
2. 将粉末加入预冷1.5mlEP管中（约1/3）后，加入事先700ul65℃水浴的2%CTAB和30ul室温β-巯基乙醇（剧毒），轻轻摇动混匀。
放入65℃水中水浴40min，每10min取出震荡使沉淀散开。
3. 取出后冷却至室温，加入氯仿/异戊醇（24：1，V/V）至满管（加药品千万注意别让药品污染桌面及手上，有必要可带面罩），剧烈震荡后12000rpm离心10min，取上清加入500µl 氯仿/异戊醇12000rpm 离心10min。
4. 取上清至预冷600µl 异丙醇和20µl 3M KAc中置于-20℃冰箱中15-20min。
基因工程实验报告模板
《基因工程实验》报告姓名学号分院(系)生物与化学工程分院专业班级生物技术08级1班指导教师王进波一、实验项目名称：质粒载体DNA的提取二、实验时间：2011年9月日三、实验目的：用小四号字，汉字用宋体，英文字母及阿拉伯数字用Times New Roman字体，行间距1.5倍；段前0.5行，段后0行。
（注：格式要求在正式报告中删除）四、实验步骤：用小四号字，汉字用宋体，英文字母及阿拉伯数字用Times New Roman字体，行间距1.5倍；段前0.5行，段后0行。
（注：格式要求在正式报告中删除）五、实验结果与讨论：用小四号字，汉字用宋体，英文字母及阿拉伯数字用Times New Roman字体，行间距1.5倍；段前0.5行，段后0行。
本部分内容应当是报告的重点，各位同学在写报告时，一定要将结果写清楚，无论成功还是失败，都必须展开讨论；同组的同学实验结果可以相同，但讨论是绝不可以雷同的！！！（注：格式要求在正式报告中删除）提醒各位同学（正式报告中应当删除该部分提醒内容）：（1）报告必须严格按照格式要求，打印完成。
（2）请各位同学于9月15日前完成报告，由课代表或班长将报告交到NE206办公室。
（3）严禁抄袭，每个人的讨论部分是绝不允许雷同的！一、实验项目名称：目的基因的PCR扩增二、实验时间：2011年9月日三、实验目的：用小四号字，汉字用宋体，英文字母及阿拉伯数字用Times New Roman字体，行间距1.5倍；段前0.5行，段后0行。
（注：格式要求在正式报告中删除）四、实验步骤：用小四号字，汉字用宋体，英文字母及阿拉伯数字用Times New Roman字体，行间距1.5倍；段前0.5行，段后0行。
（注：格式要求在正式报告中删除）五、实验结果与讨论：用小四号字，汉字用宋体，英文字母及阿拉伯数字用Times New Roman字体，行间距1.5倍；段前0.5行，段后0行。
本部分内容应当是报告的重点，各位同学在写报告时，一定要将结果写清楚，无论成功还是失败，都必须展开讨论；同组的同学实验结果可以相同，但讨论是绝不可以雷同的！！！（注：格式要求在正式报告中删除）提醒各位同学（正式报告中应当删除该部分提醒内容）：（1）报告必须严格按照格式要求，打印完成。
基因工程原理与应用研究报告
基因工程原理与应用研究报告摘要：基因工程是一门利用生物技术手段对生物体遗传物质进行改造的科学。
本研究报告探讨了基因工程的原理和应用领域，并分析了其带来的潜在影响。
基因工程为医学、农业和环境保护等领域带来了巨大的突破和机遇。
引言：基因工程是在DNA分子水平上的科学，它使得科学家能够选择和操作生物体的基因序列。
通过改变基因组成，基因工程提供了许多潜在的应用领域，如医学、农业和环境保护等。
在本研究报告中，我们将探究基因工程的原理以及其在各个领域的应用。
一、基因工程原理：基因工程的核心是改变生物体的遗传物质，从而产生期望的性状或功能。
以下是基因工程的主要原理：1. DNA克隆：DNA克隆是将目标DNA片段插入到携带载体的DNA中，通过重组DNA技术将其复制并扩增，从而获得大量同一DNA片段的过程。
2. 基因编辑：通过特定的核酸酶，如CRISPR-Cas9系统，可以实现精确的基因组编辑。
科学家能够选择性地删除、插入或修改生物体的基因序列，以达到所需的目的。
3. 基因递送：基因递送是将外源的基因材料引入到目标生物体中的过程。
常用的方法包括病毒载体介导的基因传递和基因枪。
二、基因工程的应用：基因工程在许多领域都具有广泛的应用。
以下是几个主要领域的案例研究：1. 医学应用：基因工程在医学领域的应用涵盖了基因治疗、生物药物生产和疾病诊断等方面。
通过改变人体细胞的基因组，科学家可以治疗一些遗传性疾病，如囊性纤维化和遗传性失明。
此外，基因工程还推动了生物药物，如工程细胞生产的胰岛素的生产。
2. 农业应用：基因工程在农业领域的应用可以提高农作物的产量、抗性和营养价值。
转基因作物，如抗虫和除草剂耐受的转基因作物已经广泛种植，并取得了显著的成果。
通过基因工程技术，农作物能够在遭受病害和环境压力时更强大和适应性更好。
3. 环境应用：基因工程在环境保护方面也发挥了重要作用。
例如，通过使用转基因微生物，科学家能够更有效地清除环境中的污染物，如石油和有毒化学物质。
基因工程研究报告
基因工程研究报告摘要：本研究报告旨在探讨基因工程领域的最新进展和相关问题。
首先，介绍了基因工程的定义、发展历程和应用领域。
然后，讨论了基因工程在农业、医学和环境保护等方面的应用，以及相关的伦理和安全问题。
最后，对基因工程的未来发展进行了展望，并提出了进一步研究的建议。
1. 引言基因工程是一种通过改变生物体的遗传信息来实现特定目的的技术。
它的发展历程可以追溯到20世纪70年代，随着DNA重组技术的出现，基因工程进入了快速发展的阶段。
目前，基因工程已经广泛应用于农业、医学、工业和环境等领域。
2. 基因工程的应用2.1 农业领域基因工程在农业领域的应用主要集中在改良作物品种和提高农作物产量方面。
通过转基因技术，科学家们可以向作物中引入抗虫、抗病、耐旱等有益基因，从而提高作物的抗性和适应性。
2.2 医学领域基因工程在医学领域的应用主要包括基因治疗和生物药物生产。
基因治疗是一种通过修复或替代患者体内缺陷基因来治疗遗传性疾病的方法。
生物药物生产则利用基因工程技术大规模生产具有治疗效果的蛋白质药物，如重组胰岛素和重组人生长激素等。
2.3 环境保护基因工程在环境保护领域的应用主要包括生物降解和生物修复。
通过改造微生物的基因，科学家们可以使其具有降解有害物质的能力，从而实现对环境污染物的清除。
此外，基因工程还可以用于修复受到污染的土壤和水体。
3. 伦理和安全问题基因工程的广泛应用也引发了一系列伦理和安全问题。
例如，转基因作物可能对生态环境产生不可预测的影响，基因治疗可能引发严重的副作用，基因工程技术的滥用可能导致人类基因组的不可逆变化等。
因此，必须加强对基因工程研究和应用的监管，确保其在伦理和安全方面的合理性和可行性。
4. 基因工程的未来发展基因工程领域仍然存在许多挑战和机遇。
未来，我们可以预见基因工程技术将更加精确和高效，基因编辑技术如CRISPR将得到更广泛的应用，基因工程将在更多领域发挥重要作用，如人类基因组编辑、人工合成生物体等。
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基因工程综合实验报告
A型产气荚膜梭菌α毒素基因克隆及表达
班级生物工程081班
姓名盖雪
学号08771029
指导教师高凤山
实验时间2011.10.10-10.14
成绩
一、实验原理
二、主要试剂
DNA Ligation Kit Ver.2.0; Eco RI、Bam HI限制性内切酶；含15%甘油的
0.1mol/L CaCl2，20-30mL。
无菌;0.1mol/L CaCl2 , 20-30mL ；50%甘油（无菌，保存菌种用，50mL）4×25mL LB液体培养基(现配现用)，卡那霉素（Kan）100mg/mL配2mL（过滤），X-gal 二甲基甲酰胺配成20mg/mL 配2mL; IPTG 24mg/mL, 配2mL（需过滤）;蛋白Marker; 0.5M EDTA,pH8.0; 溴化乙锭溶液(EB) （贮存浓度：10mg/mL，使用浓度0.5µg／mL）
三、仪器设备
紫外成像系统，高速冷冻离心机，恒温震荡培养箱，高压灭菌锅，冰箱，水浴锅，微波炉，电炉子，试管架，tube 架，试管，瓶塞，锥形瓶，胶板，电泳槽（包括琼脂糖凝胶和SDS-PAGE），电泳仪，培养皿，移液枪，枪头（各种规格），玻璃涂棒，记号笔，标签纸，卫生纸，水漂（水浴用），试纸，称量纸，一次性手套，酒精灯，火柴，药勺，搅拌子，量筒，烧杯，镊子，tip, tube(1.5mL, 2mL) 五、实验步骤
(一)准备工作
LB培养基配制；LB固体培养基配置；接菌（制备感受态用）
1）LB固体配制
配制固体培养基100mL
加入蒸馏水100mL溶解，用2mol/L NaOH调pH值至7.4，121℃灭菌20min。
灭菌结束后，待温度降至80℃以下时，方能取出，在超净台上，当培养基凉至50-60℃时，迅速加入Kan 30μL（若氨苄，加100ul），摇匀，倒板(4个)。
凝固后放入4℃冰箱。
2）LB液体配制
配制100mL液体LB培养基
加入蒸馏水100mL溶解，用2mol/L NaOH调pH值至7.4。
然后分装，每管5mL，每人分装2管，一共12管；另外分装30mL LB与三角瓶中，余下的LB在原三角瓶中与试管等一起高压，121℃，20min。
高压后，将剩余三角瓶中的LB分装至1.5mL tube中，每管800μL LB (共10个)。
在时间允许的情况下，将高压后的LB试管加入卡那，每管1.5μL。
总结：需要灭菌的东西-液体培养基（试管、30mL三角瓶及剩余液体LB的三角瓶）-固体培养基、离心管（至少30个）、各种规格的枪头。
3）接菌
下午，接种BL21感受态于1管5mL培养基中，37℃震荡培养。
（二）感受态细胞制备、转化、重组菌接种
1）感受态细胞的制备
1.从大肠杆菌DE3平板上挑取一个单菌落接种于5mL LB液体培养基的试管
中，37℃振荡培养过夜。
2.取0.6mL菌体转接到含有30mL LB液体培养基的锥形瓶中，37℃振荡培养2
小时。
测定菌体的OD600，当数值位于0.4-0.5之间时，取出。
3.将菌液转移到2mL离心管中，冰上放置10min。
4.离心10min(4000r/min)，回收细胞。
5.倒出培养液，将管倒置1min以便培养液流尽。
6.用冰冷的0.1mol/L CaCl2约500μL悬浮沉淀，立即放在冰上保温30min。
7.0-4℃ 4000r/min,离心10min，回收细胞。
8.用冰冷的含有50%甘油的0.1mol/L CaCl2200μL悬浮细胞，（务必放在冰上）。
然后-80℃保存于冰箱。
2）转化步骤
1.取1μL质粒，加入到200μL的感受态细胞中，混匀，冰上放置30min
2.将管放到42℃热激90sec
3.结束后冰浴2min
4.每管加800μL的LB液体培养基，37℃培养1h(慢摇)
5.将适当体积（100μL）已转化的感受态细胞涂在含有氨苄素（30ug/mL）的培
养基上
6.倒置平皿37℃培养12-16h，出现菌落
3）接种重组菌接种一管，加5 L即可。
（三）提取质粒、制备琼脂糖凝胶、电泳
1) 提取质粒步骤
1.将5mL LB液体培养基加入到试管中，并加入1.5μL 卡那霉素，接种环取菌
（α毒素），37℃振荡培养过夜。
2.取1mL培养物倒入微量离心管中，6000r/min离心2min。
3.吸去培养液，使细胞沉淀尽可能干燥。
4.将细菌沉淀悬浮于100μL SolutionⅠ中，充分混匀，冰上放置10min。
5.加入200μL SolutionⅡ，盖紧管口，颠倒数次（10-20次）使混匀。
冰上放置
2min。
6.加入150μL溶液Ⅲ(冰上预冷), 盖紧管口，温和颠倒数次，使混匀。
冰上放置
2min。
12000r/min，离心5min，将上清转至另一试管中。
7.向上清中加入等体积酚：氯仿（1∶1）（去蛋白），反复混匀，12000r/min，
离心5min，将上清转移到另一离心管中。
8.向上清加入2倍体积的无水乙醇，混匀后，室温放置10min，12000r/min离
心5min，倒去液体，把离心管倒扣在吸水纸上，吸干液体。
9.用1mL 70%乙醇洗涤质粒DNA沉淀，振荡并离心，倒去上清液，真空抽干
或空气中干燥。
10.加入20μL TE缓冲液，其中含有20ug/mL的RNA酶，37℃水浴1h，然后-20℃
保存备用。
2)琼脂糖凝胶制备
1. 稀释50×TAE为1×TAE，1500mL
2. 称取1g琼脂糖，放于洁净的三角瓶中
3. 量取100mL 1×TAE溶解琼脂糖，并放入微波炉中加热2min
4.将梳子和平版洗干净，用纸擦干，将梳子装好，两边均放梳子，共制备两块胶
5.将配好的琼脂糖凝胶缓缓倒入胶槽中，注意不要留有气泡
6.冷却后拔出梳子，将胶放于4℃保存。
3)电泳
1.电泳时，将点样孔置于负极，样品与上样buffer按比例混合，每孔加样质粒2-3μL，然后100V，电泳35min
2.电泳结束后，取出胶，放入含有0.5ug/mL EB的TAE缓冲液中进行染色，30min 后凝胶成像仪下观察。
（四）诱导表达，提取质粒，酶切
1）诱导表达
IPTG，分子量240，配制母液为24mg/mL,
表达需要终浓度，1 m mol/L，则每个5 mL LB中需要50μL IPTG. （20个试管需要IPTG 1mL）
按照1~2%的量接种重组菌于5mL的LB 液体培养基中，接种前要加入Kan，每个管中加入1.5μL的Kan，然后37℃震荡培养，直至菌液OD600达到0.5左右，加入IPTG，每管加入50μL，继续震荡培养5-6小时。
2）酶切
37℃，3h
然后制备琼脂糖凝胶，电泳、照相。
（五）SDS-PAGE
1）配制分离胶
①固定胶板：用1mm 胶条将大小两块玻璃板隔开，用夹子固定。
②配制分离胶 (20mL)
迅速混匀，将分离胶加入到玻璃板之间，液面距小玻璃板顶端约1.5mL 时为止，然后胶上面加入一层双蒸水。
2. 5%浓缩胶的配制（10 mL ）
分离胶凝固后，倾去蒸馏水，用滤纸吸干残液，然后加入混匀好的浓缩胶至小玻璃板顶端，并插入梳子，凝固后小心拔出梳子。
3.样品制备 菌体样品1mL 经12000r/min 离心，沉淀用45μL TE 溶解，然后以加入5μL 10 ×上样缓冲液，并在100℃沸水中加热5min ，取出离心待用。
4.电泳 一孔加10μL 标准蛋白，一孔加样品。
将玻璃板凝胶放入电泳槽中，并在槽中加入电极夜，接通电源，电流调至1mA/孔，当样品进入分离胶时，调节电压使恒压在120V 。
当溴酚蓝移动到离底部约0.5mL 时，切断电源，停止电源。
将胶板从电泳槽中取出，小心从玻璃板上取下胶。
移去浓缩胶，将分离胶用考马斯亮蓝染色液染色。
5.凝胶用染色液染色2h ，脱色过夜，换保存液保存胶。
四、实验结果
质粒提取
双酶切
SDS-PAGE
五、分析和讨论
1、从图一分析中得出，因为无法看出有目的条带，所以无法确定转化时质粒是否转化进细胞内，可能的原因是转化时的各步操作的时间和手法没有把握好，或者是在点样的时候buffer 混得太少，点样的手法也有问题，或者因为是后染色效果不明显
2、从图二可以看出出现了目的条带，切目的条带的范围在目标范围内，说明质粒成功转化
3、从图三分析中的出，由于我们组没有设置对照组，所以不能明显分辨出是否表达
4、在操作过程中，应该注意在冰上操作，以保持细胞活性
5、转化时要严格按照转化时间进行试验
6、点样的时候注意不要捅破胶
7、先染色比后染色效果好。