实验一 生物组织中还原糖

实验一生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定

一、实验原理：

该实验中，对三类化合物的鉴定都是根据它们的特定颜色反应进行的。当质量浓度为0.1 g／ml的氢氧化钠溶液(氢氧化钾溶液亦可)与质量浓度为

0.05g／m1的硫酸铜溶液混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。

Cu(OH)2与葡萄糖等可溶性还原糖共热，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。因此，利用该反应，可证明样液中含可溶性还原糖。

苏丹Ⅲ是可以对脂肪染色的试剂，因此，当含有大量油滴的植物细胞用苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下可看到细胞内橘黄色的颗粒。

蛋白质分子中含有很多肽键，因而能与双缩脲试剂发生反应生成紫色的络合物。若在组织样液中加入双缩脲试剂后，有紫色反应，则证明其中含有蛋白质。

二、实验目的：

初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。

三、实验材料：

1、做可溶性还原糖的鉴定实验，还原糖的含量、生物组织中有色素会影响实验结果及其观察的最重要因素。因此要选用可溶性还原糖含量高、白色或近于白色的植物组织，其中以苹果、梨最好。也可用白色的甘蓝叶、白萝卜替代(不能选西瓜)。

2、做脂肪的鉴定实验时，所用材料一要脂肪含量高，二要有一定大小才能做徒手切片，花生种子符合该实验的要求。将花生种子经过3～4小时的浸泡使其变软，有利于切成薄片；但浸泡时间也不宜过长，否则切片时易碎裂，切不成薄片。

3、做蛋白质的鉴定实验，一般选用蛋白质含量较高的大豆（豆浆）或鸡蛋清。

四、试剂配制：

1、斐林试剂：甲液——质量浓度为0.1 g／ml的氢氧化钠溶液(10克的氢氧化钠加水至100ml即成)；乙液——质量浓度为0.05g／ml的CuSO4溶液

(5g硫酸铜加水至100m1充分溶解即成)。甲、乙试剂千万要分开放，不可混合。在实验过程中，将4～5滴乙液滴入2ml甲液中现混现用。

2、苏丹Ⅲ溶液：将0.1g苏丹Ⅲ干粉溶于100ml体积分数为95％的酒精溶液中，待全部溶解后即成。

3、双缩脲试剂：A液——质量浓度为0.1 g／ml的氢氧化钠溶液(可使用斐林试剂甲液)。B液——质量浓度为0．01g／mi的硫酸铜溶液(称取1 g硫酸铜加水至100ml充分溶解后即成)。

五、注意事项：

1．选材必须是可溶性还原糖，蔗糖不是还原糖不能用；一般淀粉又是不溶性糖且无还原性也不能用。因此，选择理想的生物材料是本实验成败的关键。要充分理解教材中选用特定材料的意图。

2．本实验的三类有机物的鉴定，均依据特定的颜色反应。所以在实验中应特别注意观察鉴定试剂加入前后的颜色变化，加深印象并做好记录。

3．在对可溶性还原糖鉴定的过程中，使用的斐林试剂要现配现用，混合均匀后一次加入。在水浴加热时，试管底部不要触及烧杯底部，以防止试管受热不匀而爆裂；加热时，试管口也不要朝向自己或他人，防止沸腾的溶液冲出试管造成烫伤。

4．在对脂肪进行鉴定时，切出符合要求的薄切片是实验结果能否满意的关键。要多按教材要求练习徒手切片技术(特别注意切片时的安全)。

5．在对蛋白质进行鉴定时，若使用蛋清，必须按要求稀释。实验样液要留出一份作为对照，便于最后进行比较。

实验二用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质流动

一、实验原理

高等绿色植物的叶绿体存在于细胞质的基质中。叶绿体一般是绿色的，扁平的椭圆形或球形，可以用高倍显微镜观察它的形态和分布。

活细胞中的细胞质处于不断流动的状态。观察细胞质的流动，可用细胞质基质中的叶绿体的运动作为标志。

二、目的要求

1.初步掌握高倍显微镜的使用方法。

2. 观察叶绿体的形态分布。

3. 通过在显微镜下的实际观察，理解细胞质的流动是一种生命现象。

三、材料用具

菠菜叶（或藓类的叶）新鲜的黑藻。

四、仪器试剂

显微镜，载玻片，盖玻片，滴管，镊子，刀片，培养皿，台灯，铅笔。

五、方法步骤

（一）制作菠菜叶片临时装片

1 . 取材取菠菜叶稍带些叶肉的下表皮，放入盛有清水的培养皿中。

2. 制片往载玻片中央滴一滴清水，用镊子夹新取的叶，放入水滴中，盖上盖玻片。

（二）用显微镜观察叶绿体

1. 用低倍镜观察。

2. 用高倍镜观察。注意细胞内的叶绿体的形态和分布情况。（三）制作黑藻叶片临时装片

3. 供观察用的黑藻，事先应放在光照，室温条件下培养。

4. 将黑藻从水中取出，用镊子从新鲜枝上取一片幼嫩的小叶，将小叶放在载玻片的水滴中，盖上盖玻片。

（四）用显微镜观察细胞质流动

5. 用低倍镜观察用高倍镜观察。

6. 用高倍镜观察用高倍镜观察，注意叶绿体随着细胞质流动，仔细看看每个细胞中细胞质流动的方向是否一致。

六、结论

将观察到的现象和得出的结论，填写在实验报告册上。

七、讨论

1. 细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？为什么？

2. 叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系？

3. 植物细胞的细胞质处于不断流动的状态，这对于活细胞完成生命活动有什么意义？

实验三观察植物细胞的有丝分裂

一、实验目的

1.观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。

2.初步掌握制作洋葱根尖有丝分裂装片的技能。

3.初步掌握绘制生物图的方法。

二、实验原理

在植物体中，有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞，高等植物细胞有丝分裂的过

程，分为分裂间期和分裂期的前期、中期、后期、末期。可以用高倍显微镜观察植物细胞的

有丝分裂的过程，根据各个时期细胞内染色体（或染色质）的变化情况，识别该细胞处于有

丝分裂的哪个时期，细胞核内的染色体容易被碱性染料着色。

三、材料用具

洋葱根尖、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、培养皿、铅笔、质量分数为15%的盐酸、

体积分数为95%的酒精、质量分数为0.01g/ml的龙胆紫（或紫药水）

四、实验过程（见书Ｐ39）

1．洋葱根尖的培养（提前3—4天）

2．解离：5min

3．漂洗: 10min

4．染色: 5min

5．制片

6．镜检

五、注意

1．解离充分是实验成功的必备条件。解离充分，组织才能分散，细胞也不会重叠。

2 ．漂洗时间一定要足够，否则细胞染不上色。

3 ．染色时，染液的浓度和染色时间必须掌握好。特别是染色不能过深，否则镜下一片紫色，无法观察。

六、讨论

1．制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么？谈谈你自己的

2．在观察清楚有丝分裂各个时期的细胞以后，绘出洋葱根尖细胞有丝分裂的简图，并标明时期。