临床免疫学检验
临床免疫学与检验
疫苗研发需要经过临床前研 究、临床试验和生产许可等 多个阶段，以确保疫苗的安
全性和有效性。
疫苗的种类包括减毒活疫苗、 灭活疫苗、基因工程疫苗等， 每种疫苗都有其独特的优缺点
和应用范围。
自身免疫性疾病治疗
自身免疫性疾病是指机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害所引起的疾 病。
临床免疫学与检验
• 临床免疫学概述 • 临床免疫学基础知识 • 临床免疫学应用 • 临床免疫学与检验技术 • 临床免疫学与检验的挑战与前景01临床免源自学概述定义与特点定义
临床免疫学是一门研究免疫系统在维持健康和疾病发生发展过程中作用的学科， 涉及免疫系统的组织结构、功能机制以及与临床医学的交叉应用。
常见的免疫诊断方法包括抗体检测、抗原检测、 细胞免疫检测等，可用于感染性疾病、自身免 疫性疾病、肿瘤等的诊断。
免疫诊断的优点包括灵敏度高、特异性强、可 重复性好等，但也存在一些局限性，如对某些 疾病可能存在假阳性或假阴性结果。
免疫治疗
免疫治疗是指利用免疫系统对疾病进 行干预的治疗方法，其目的是激活或 调节机体免疫反应，以达到控制和消 除疾病的目的。
02 03
疾病治疗与预防
临床免疫学不仅为疾病的特异性免疫治疗提供理论基础和实践指导，还 为疫苗研发和预防接种提供科学依据，有助于预防和控制传染病的发生 和传播。
个体化医疗
随着免疫疗法和免疫调节剂的不断发展，临床免疫学在个体化医疗中发 挥着越来越重要的作用，为患者提供更加精准和有效的治疗方案。
临床免疫学的发展历程
抗体
识别和结合抗原，激活补体、促进吞噬等效 应。
补体
通过级联反应溶解靶细胞或增强吞噬作用。
细胞因子
调节免疫细胞的分化、增殖和功能，参与炎 症和组织损伤修复。
临床免疫学检验技术-01-第一章 概论
第三节 免疫学技术的发展与临床免疫检验
一、免疫学技术的发展历程
经典免疫学技术
• 免疫凝集试验 • 免疫沉淀试验 • 补体结合试验
现代免疫学技术
• 标记免疫学技 术（特异性及 敏感性提高）
自动化免疫学技术
• 自动化免疫分 析仪（反应进 行加快）
（一）经典免疫学技术
1. 免疫凝集试验 （1）直接凝集试验： 1）肥达试验 2）外斐试验 3）交叉配血凝集试验 （2）间接凝集试验： 1）间接血凝试验 2）胶乳凝集试验 3）自身红细胞凝集试验
总结
免疫器官
中枢免疫器官：骨髓、胸腺 外周免疫器官：淋巴结、脾脏、粘膜伴随淋巴组织
免
淋巴细胞：T细胞、B细胞、NK细胞
疫
系 统
免疫细胞
免疫辅助细胞：单核巨噬细胞、树突状细胞、中性粒细 胞、肥大细胞等
免疫分子
免疫球蛋白 补体系统 细胞因子 黏附分子 人类白细胞分化抗原
四、免疫与免疫应答
免疫（immunity）是机体识别和排斥抗原性异物的一 种生理功能。
重点提示
1、免疫系统组成及功能 2、免疫学检验技术的的发展
第一节 免疫学基础简介
免疫学（immunology）
免疫学是研究免疫系统的结构与功能，并通过对其在免 疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究，探 讨有效的免疫措施，实现以防病、治病为目的的一门现代医 学学科
免疫系统（immune system）
1960
学者
贡献
J.Bordet
补体与溶菌活性
H.Durham，M.von Gruber
特异凝集反应
G.Widal，A．Sicad
肥达试验
R.Kraus
临床免疫学检验
临床免疫学检验临床免疫学检验是一种透过检验身体免疫系统的功能状态来诊断和治疗人体免疫疾病的医学检验技术。
它主要应用于检测人体免疫功能的变化，例如免疫缺陷、自身免疫性疾病、过敏反应等。
其检测结果成为了判断疾病是否存在、发展过程和预后的重要依据。
一、临床免疫检查所涉及的项目1、全血细胞计数：包括白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、血小板等。
白细胞计数对疾病监测有重要意义，其异常值可能暗示某些疾病的存在，如感染、免疫疾病、白血病等。
2、单个抗体检测：单个抗体检测用于检测某个特定的抗体，例如细菌感染、病毒感染、肿瘤标志物等。
3、自身抗体检测：自身抗体检测用于检测人体免疫系统对自身组织或成分的免疫反应。
例如自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等。
4、流式细胞术：流式细胞术通过检测细胞表面标志物和细胞内物质，可以识别不同的细胞类型，例如白细胞分化、肿瘤细胞的识别等。
5、免疫固定电泳：免疫固定电泳是一种检测血清蛋白质的方法，其主要应用于鉴定血清蛋白质成分的变化，例如蛋白质异常增加、某些种类蛋白质缺失等，以及某些疾病的辅助诊断。
二、临床免疫检验的意义临床免疫学检验在筛选、诊断、治疗疾病、预测预后等方面有重要的意义。
1、疾病筛查：许多免疫学检查项目可以用于常见和罕见疾病的筛查。
例如，促甲状腺激素检查可以预先诊断甲状腺自身免疫疾病，抗心肌抗体和心肌肌原纤维蛋白抗体可以诊断心肌病，肝疾病特异性抗体可以确定患者是否感染肝炎病毒等。
2、疾病诊断：免疫学检查也可以用于特定疾病的诊断，如类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、白血病、骨髓增生异常综合征等。
3、治疗效果观察：对于特定的疾病或治疗方式，需要通过免疫学检查来了解患者的治疗效果，如慢性乙型肝炎治疗后的血清HBV DNA状态、各类肿瘤治疗后肿瘤标志物水平的变化、免疫调制药物治疗后CD4/CD8等细胞水平的变化等。
4、预后预测：免疫学检查还可以为临床预后预测提供指导，如系统性红斑狼疮患者抗双链DNA抗体和抗精氨酸胞浆蛋白抗体储量高则易发生肾脏损害，骨髓增生异常综合征患者骨髓造血功能可通过检查免疫球蛋白储量进行评估。
临床免疫学检验
一、名解带现象（前带、后带）：在等价带的前后，由于抗体和抗原过量，形成的沉淀物少，上清液中可测出游离的抗体或抗原，这种现象称为带现象。
当抗体过量时称为前带，抗原过量时称为后带。
凝集反应：是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载体与相应抗体（或抗原）特异性结合后，在适当电解质存在下，出现肉眼可见的凝集现象。
直接凝集反应：在适当电解质参与下，细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原直接与相应抗体结合出现肉眼可见的凝集现象，称为直接凝集反应。
间接凝集反应：将可溶性抗原（或抗体）先吸附于适当大小的颗粒性载体（如正常人O型红细胞、细菌、胶乳颗粒等）的表面，然后与相应抗体（或抗原）作用，在适当电解质存在条件下，出现特异性凝集现象，称为间接凝集反应或被动凝集反应。
Coombs试验：又称抗球蛋白试验，是抗球蛋白参与的间接血凝试验，用于检测抗红细胞不完全抗体。
不完全抗体多半是7S的IgG类抗体，能与相应的抗原牢固结合，但因其分子量较小，体积小，不能起到桥联作用，在一般条件下不出现可见反应。
利用抗球蛋白抗体作为第二抗体起桥联作用，连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，使红细胞凝集。
沉淀反应：是指可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现可见的沉淀现象。
高剂量钩状效应：抗原过量可引起高剂量钩状效应，即抗原过量致形成的IC分子小，发生再解离，浊度下降，光散射减少。
海德堡曲线理论：当抗体过量时，IC的形成随着抗原递增至抗原、抗体比例最适处达最高峰，沉淀反应最明显，称等价带，高峰区域左侧，抗体浓度过高，沉淀反应不明显，称前带；高峰区域右侧，抗原浓度过高，沉淀反应也不明显，称后带，这就是海德堡曲线理论。
包被：将抗体或抗原结合在固相载体上的过程称为包被。
封闭：由于包被过程中固相载体表面不能被抗体或抗原蛋白质完全覆盖，实验操作过程中加入的血清标本以及酶结合物中的蛋白质也会部分地非特异性吸附于固相载体表面，最终产生非特异性显色导致测定本底偏高，在这种情况下，需用1%-5%的牛血清白蛋白或5%-20%小牛血清再包被一次，消除此干扰，此过程称为封闭。
临床免疫学检验-第十三章细胞免疫学技术
Ficoll分离法
聚蔗糖-泛影葡胺分层液的制备
6%聚蔗糖溶液 (Ficoll溶液)密度1.020
34%泛影葡胺溶液 (Hypaque溶液)密度1.2
酸性磷酸酶测定 非特异性酶的测定
巨噬细胞功能检测
炭粒廓清试验
正常小鼠肝中枯否细胞可吞噬清除90% 炭粒，脾巨噬细胞约吞噬清除10%炭粒。据 此给小鼠定量静脉注射印度墨汁(炭粒悬液)， 间隔一定时间反复取静脉血，测定血中炭粒 的浓度，根据血流中炭粒被廓清的速度，判 断巨噬细胞的功能。
吞噬功能检测
鸡RBC
l液 密度1.135
细胞混悬液
高速离心 密
度
6小时
梯 度
低速离心 密 度 梯 度
死细胞残片和血小板 富含单核细胞的组分
富含淋巴细胞的组分 红细胞与粒细胞组分
淋巴细胞亚群的分离
T细胞和B细胞的分离
E花环分离法 尼龙棉分离法
E花环分离法
E受体
T
SRBC
B
E花环 T
离心
B
E花环
聚蔗糖-泛影
形成溶血空斑
可以检测致敏红细胞的各种抗原所对应的抗体,临 床应用比较广泛
反向空斑形成试验
反应物: 琼脂凝胶
SPA致敏的SRBC B细胞 补体 抗Ig抗体
形成溶血空斑
体外检测人类Ig分泌细胞的方法,与抗体的特异性 无关
酶联免疫斑点法
反应物:
包被在固相载体上的抗原 B细胞 酶标二抗
加底物显色
计数斑点形成细胞
临床免疫学检验.
但免疫球蛋白不都是抗体。
临床检测的血清免疫球蛋白
IgG1 IgG2 IgG3 IgG4 IgM IgA1 IgA2 IgD IgE 重链 1 2 3 4 1 2 主要存在形式 单体 单体 单体 单体 五聚体 单体、双体 单体 单体 经典途径活化补体 ++ + +++ +++ 穿过胎盘 +++ + ++ 结合吞噬细胞 +++ +++ + + + 结合肥大细胞和嗜 +++ 碱粒细胞 与 SPA 结合 + + + NK 细 胞 介 导 的 ++ ++ ADCC 免疫作用 抗感染、自身抗体 早期防 粘膜局部 B 细 I 型 胞成 御作用 免疫 超敏 熟标 反应 志
新生儿、婴幼儿由于体液免疫功能尚不成 熟，免疫球蛋白的含量较成人低，需按年 龄组进行分析与判断。 关于血清IgE和IgD的测定： 血清总IgE为0.13～0.92mg/L; 血清总IgD为0.6～2.0mg/L; IgE值升高多见于超敏反应性疾病,骨髓瘤 IgD值升高多见于骨髓瘤等。
异常免疫球蛋白检测：
临床免疫学检验 (clinical immunological test)
范畴(category)：
1、感染性疾病(infection disease) 2、自身免疫性疾病(autoimmune ～) 3、超敏反应性疾病 (hypersensitivity ～ ) 4、免疫缺陷/增殖性疾病
临床免疫学检验技术
三、酶联免疫吸附试验（enzyme-
linked immunosorbent assay,ELISA）
• 4.捕获法 用于测定特异性IgM类抗体。被检 血清中针对某抗原旳特异性IgM和IgG常同步 存在，为防止IgG旳干扰，一般采用捕获法 来测定IgM。先将已知特异性抗体（如抗人μ 链）包被于固相载体上，加待测人血清样本， 其中旳IgM（IgM分子相对于固相抗μ链又是 一种抗原）被固相抗μ链抗体特异性捕获， 形成IgM-抗IgM复合物。洗涤除去血清中旳 其他Ig和杂质；加特异性抗原试剂，该抗原 只与固相上旳特异性IgM结合。
三、酶联免疫吸附试验（enzymelinked immunosorbent assay,ELISA）
• 5. 生物素—亲合素ELISA（avidin—biotin— peroxi—dase complex，ABC-ELISA）是将生 物素（biotin）和亲合素(avidin)或链霉亲合素 (streptavidin,SA)引入ELISA旳措施。生物素是 一种小分子物质，经活化后可高比度旳偶联 抗体或抗原等大分子。亲合素（或链霉亲合 素）与生物素旳结合力极强，一分子亲合素 可与4个生物素分子结合。在反应系统中引入 生物素和酶标识亲合素，可将ELISA旳反应多 级放大，明显提升检测措施旳敏感性。
临床免疫学检验技术
一、概述
• 免疫学检验是研究免疫学技术及其在医学 检验领域应用旳一门学科。免疫检验技术 则要点论述各类免疫学技术旳基本原理、 措施类型和临床应用。19世纪末相继建立 了凝集试验、沉淀试验和补体结合试验等 三大经典血清学试验，用于检测病原微生 物旳抗原或抗体对传染病旳诊疗起到主要 作用。
三、酶联免疫吸附试验（enzymelinked immunosorbent assay,ELISA）
临床免疫学检验知识
治疗建议
根据具体疾病和病情严重程度，采用药物 治疗、免疫治疗、对症治疗等综合治疗措 施。同时，患者需保持良好的心态和信心 ，积极配合医生的治疗和建议。
05 移植免疫相关检测指标解 读
移植免疫基本概念及原理
移植免疫是指宿主对外来移植 物产生的特异性免疫应答。
移植免疫的基本原理包括供者 与受者之间的遗传差异、免疫 系统的识别和攻击以及移植物 抗原的释放和呈递。
自然杀伤细胞活性测定
51Cr释放法
利用放射性同位素标记靶细胞， 通过测定自然杀伤细胞对靶细胞 的杀伤作用释放出的放射性物质， 计算杀伤率。
流式细胞术
利用流式细胞仪检测自然杀伤细 胞与靶细胞结合后释放的荧光物 质或酶，以评估其杀伤活性。
MTT比色法
利用四甲基偶氮唑盐作为显色剂， 通过测定自然杀伤细胞对靶细胞 的杀伤作用导致的颜色变化，计 算杀伤率。
提示可能存在自身免疫性疾病，需结合临床表现和其他检查结果 进行综合判断。
检测结果阴性
不能完全排除自身免疫性疾病的可能，需结合其他因素进行考虑。
检测结果的变化趋势
可用于监测疾病的活动性和治疗效果。
预防措施和治疗建议
预防措施
保持健康的生活方式，避免感染、环境 污染等诱发因素，定期进行体检和筛查 。
VS
测定B淋巴细胞分泌细胞因子的水平，如白 介素-4、白介素-6等，以评估B细胞功能。
巨噬细胞功能评价方法
1 2
吞噬功能试验
通过测定巨噬细胞吞噬颗粒物质的能力，评价其 吞噬功能。
杀菌功能试验
检测巨噬细胞对细菌的杀伤能力，反映其抗感染 功能。
3
细胞因子检测
测定巨噬细胞分泌细胞因子的水平，如肿瘤坏死 因子、白介素-1等，以评估其功能。
临床常用免疫学检验
免疫学检验
2.Ig含量增高：
多克隆性增高，见于各种慢性感染、慢性肝病、某些自身免疫病，如 SLE、RA、SS等；也见于寄生虫疾病、结节病等。
1
单克隆性增高，又称 “M”蛋白，主要见于免疫增殖性疾病，如多发性骨髓瘤、重链病、轻链病，巨球蛋白血症等。
2
免疫学检验
〖注意事项〗 Ig水平与年龄、性别有一定的关系，Ig 含量因检测方法不同而有差别，各地区参考值也不相同，在判断结果时应综合考虑。如有“M 蛋白”，可进一步作血清或尿液免疫电泳，检测轻链和重链。
免疫学检验
第一章 免疫功能检验 (Immunological Function Test) 免疫功能检验分为细胞免疫功能检验和体液免疫功能检验，对于了解患者的免疫状态，以及细胞的各种功能，为深入研究和认识机体免疫系统的生理、病理改变，阐明某些疾病的发病机制和临床诊断与治疗将提供有利的信息。下面简单介绍临床常用的一些免疫检验项目。
免疫学检验
CAP检测系统 〖原理〗CAP，一个很小的塑料帽状物，其内置有多孔性、弹性和亲水性的纤维素粒，此粒多孔，吸咐了更多的变应原，加入血清，血清中的sIgE就会和变应原结合，再加入酶标抗人IgE，再加入荧光显色系统，在荧光分光光度计上测定荧光强度，计算机提供相应软件，自动计算出结果。报告sIgE含量。
*
免疫学检验
三. 特异性IgE抗体（sIgE)的检测 过敏患者的血清中存在着具有变应原特异性的IgE 称之为特异性IgE,如对牛奶过敏者则有针对牛奶变应原的IgE；对蒿草花粉过敏者，则有针对该花粉的IgE，该抗体只能与该变应原特异性结合。
sIgE的测定在变态反应体外诊断中占有重要地位。在呼吸疾病中，过敏性哮喘，过敏性鼻炎，职业性哮喘等患者血清中均能检出 sIgE。sIgE检测方法有许多种，目前临床上常用的有ELISA，FEIA，免疫印迹等。随着sIgE测定技术的完善，此项测定已日趋商品化，开发了各种检测系统，如CAP过敏原检测系统，Master过敏原检测系统，Px过敏原检测系统等，这些测定系统包括了仪器、试剂、计算机软件处理系统。国内目前应用最多的是CAP检测系统。
临床免疫学检验名词解释
临床免疫学检验名词解释
临床免疫学检验是指通过检测人体免疫系统的功能和异常状态来帮助诊断和治疗疾病的一种检验方法。
免疫学检验可以通过测定血清中的抗体、抗原、免疫球蛋白等免疫相关分子来评估人体对病原体的免疫应答，以及对自身组织的免疫反应。
这些检验可以用于诊断感染性疾病、自身免疫性疾病、过敏反应以及肿瘤等疾病。
常见的临床免疫学检验包括ELISA（酶联免疫吸附试验）、免疫荧光法、免疫电泳等。
通过这些检验，医生可以更准确地判断疾病的类型和程度，从而制定更有效的治疗方案。
临床免疫学检验方法常见影响因素有哪些
临床免疫学检验方法常见影响因素有哪些免疫学检验是目前医疗机构常用的一种检测、诊断手段，在疾病诊治、病情评估、预后分析等方面具有重要的作用，能够实现定性定量检测，且方法繁多，如化学发光免疫、放射免疫等。
因此保证免疫学检验结果的准确性十分必要。
但是临床免疫学检验极易受到其他因素的影响，导致检验结果不准确，本文对常见的影响因素进行介绍。
1.什么是临床免疫学检验？医学检验是一门建立在科学实验基础上的重要学科，也被称作实验室医学，是实验室科学技术与临床医学相结合的一门专业。
随着现代医学的发展，免疫检验在医学检验占据重要的地位。
免疫检验技术发展迅速，临床免疫学检验已成为一种重要、基础的检查项目。
例如抗原抗体反应的相关检测，主要指免疫组化，免疫组化便是使用标记的特异性抗体，在组织细胞原位，通过抗原抗体反应的酶底物的显色反应，实现对细胞中抗原的定位、定性检测，十分常用。
另外也包括免疫荧光、血凝抑制、放射免疫等多种检测手段，放射免疫适用于激素等微量物质的检测。
免疫细胞检测也是临床免疫学检验的主要项目，其中细胞毒试验较为常用，多用于免疫移植、排斥反应及病毒感染等方面的研究。
除此之外，FCM流式细胞术能够对细胞分选、周期及凋亡的分析。
以上所提到内容均在临床免疫学检验中十分常见。
1.临床免疫学检验方法常见影响因素有哪些？临床免疫学检验已成为医学检验的基础项目，具有较高的准确性，但是实际检验过程中仍然会受到其他因素的影响，如标本因素、人为因素以及仪器设备因素等，本文对此进行分析。
标本因素。
标本主要指进行临床免疫学检验的原材料，如果标本本身或者前期处理存在一定的问题，必然会对最终的检验结果造成影响。
对目前免疫学检验方法进行分析，当标本中存在嗜异性抗体、补体、溶血等情况，必然会对检验结果造成影响。
例如类风湿因子中的IgM IgG能与免疫检验中的捕获抗体结合，导致检验结果出现假阳性的问题。
针对这一问题，检验人员可在检验前采用风湿因子吸附剂进行吸附，减少类风湿因子对临床免疫学检验造成的影响。
临床免疫学检验
临床免疫学检验一、免疫球蛋白检测•概念：免疫球蛋白（Ig）是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称。
由浆细胞产生，存在于机体的血液、体液、外分泌液和某些细胞的膜上。
（一）分类•按重链性质分:IgG、IgA、IgM、IgD 、 IgE、IgG•于出生后三个月开始合成， 3—5岁接近成人水平。
IG是血液中含量最高的Ig，占血清总Ig的75%—80%，是抗感染的主要抗体。
是唯一能通过胎盘的抗体。
IgA：分为分泌型和血清型，分泌型的合成和分泌部位在肠道、呼吸道、乳腺、唾液腺和泪腺，血清型占总Ig的10—20%。
IgM：是分子量最大的Ig。
占血清Ig的5-10%。
是个体发育过程中最早出现的抗体，在胚胎发育晚期的胎儿即能产生IgM。
在机体受抗原刺激后，是最先产生的抗体。
IgM是血管内抗感染的主要抗体。
IgE:是正常人血清中含量最少的Ig。
约0.1—0.9mg/L。
占总血清Ig的0.02%，为亲细胞抗体。
参与Ⅰ型超敏反应,与变态反应、寄生虫病及皮肤过敏有关。
（四）临床意义⒈免疫球蛋白增高•（1）单克隆免疫球蛋白增高（M蛋白血症）IgG、IgA 、IgD 或IgE增高。
见于：多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症.淋巴样异常增生性疾病等。
•（2）多克隆免疫球蛋白增高•①感染：特别是慢性感染如细菌、寄生虫、螺旋体感染，IgG、IgM增高②自身免疫性疾病：SLE以IgG、IgA或IgG、 IgM增高多见，类风关以IgM增高为主③慢性肝病：IgG、 IgA 、IgM可增高，慢活肝IgG、IgM增高明显⑶IgD增高：见于IgD型多发性骨髓瘤、妊娠末期、大量吸烟者•⑷IgE增高：见于IgE型多发性骨髓瘤、变态反应性疾病、寄生虫病及皮肤过敏、急慢肝、肾综⒉免疫球蛋白减少IgG＜6.0g/L，IgM、IgA＜0.4g/L（1）先天性：见于先天性无丙种球蛋白血症、先天无胸腺症•（2）获得性：见于大量蛋白丢失性疾病：肾综、剥脱性皮炎中毒性骨髓病、白血病、淋巴网状系统肿瘤：淋巴瘤、霍奇金病长期使用免疫抑制剂⑶Ig减少易引起反复感染•IgG缺乏：易患化脓性感染•IgM 缺乏：易患革兰氏性阴败血症•IgA缺乏：易患呼吸道感染二、血清M蛋白检测⏹ M蛋白是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的，具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子或其分子片段。
临床免疫学检验(名解及答题)
临床免疫学检验【名词解释】1、enzyme immunoassay（EIA）酶免疫分析技术，是以酶标记的抗体（抗原）作为主要试剂，将酶高效催化反应的专一性和抗原抗体反应的特异性相结合的一种免疫标记检测技术。
2、colloidal gold immunoassay胶体金免疫技术，是以胶体金作为示踪标记物或显色剂，应用于抗原抗体反应的一种标记免疫测定技术。
3、immunoblot test（IBT）免疫印迹试验，是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的技术。
4、precipitation reaction沉淀反应，指可溶性抗原与相应抗体在适当的条件下发生特异性结合而出现可见的沉淀现象。
5、agglutination reaction凝集反应，指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载体与相应抗体（或抗原）特异性结合后，在适当电解质存在下，出现肉眼可见的凝集现象。
6、immunogen免疫原，指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
7、adjuvant （immunoadjuvant）佐剂（免疫佐剂），指预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答的类型的物质。
8、hapten半抗原，指仅有抗原性而无免疫原性的物质。
如多糖、多肽、类脂和核酸等物质。
9、monoclonal antibody（McAb）单克隆抗体，设法将单个B细胞分离出来加以增殖形成一个克隆群落，该B细胞克隆产生出针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，称为单克隆抗体。
10、Polyclonal antibody（PcAb）多克隆抗体，亦称免疫血清，用抗原以不同途径免疫动物，从动物血清中获取抗体，该类含有抗体的血清称为抗血清。
由于免疫动物的抗原往往具有多种抗原表位，可激活体内多个B细胞克隆产生针对抗原多种表位的混合抗体，因而抗血清也称为多克隆抗体。
11、tumor antigen肿瘤抗原，指细胞癌变过程中新出现的或异常表达的抗原物质。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
临床免疫学检验一、免疫球蛋白检测•概念：免疫球蛋白（Ig）是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称。
由浆细胞产生，存在于机体的血液、体液、外分泌液和某些细胞的膜上。
（一）分类•按重链性质分:IgG、IgA、IgM、IgD 、IgE、IgG•于出生后三个月开始合成，3—5岁接近成人水平。
IG是血液中含量最高的Ig，占血清总Ig的75%—80%，是抗感染的主要抗体。
是唯一能通过胎盘的抗体。
IgA：分为分泌型和血清型，分泌型的合成和分泌部位在肠道、呼吸道、乳腺、唾液腺和泪腺，血清型占总Ig的10—20%。
IgM：是分子量最大的Ig。
占血清Ig的5-10%。
是个体发育过程中最早出现的抗体，在胚胎发育晚期的胎儿即能产生IgM。
在机体受抗原刺激后，是最先产生的抗体。
IgM是血管内抗感染的主要抗体。
IgE:是正常人血清中含量最少的Ig。
约0.1—0.9mg/L。
占总血清Ig的0.02%，为亲细胞抗体。
参与Ⅰ型超敏反应,与变态反应、寄生虫病及皮肤过敏有关。
（四）临床意义⒈免疫球蛋白增高•（1）单克隆免疫球蛋白增高（M蛋白血症）IgG、IgA 、IgD 或IgE增高。
见于：多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症.淋巴样异常增生性疾病等。
•（2）多克隆免疫球蛋白增高•①感染：特别是慢性感染如细菌、寄生虫、螺旋体感染，IgG、IgM增高②自身免疫性疾病：SLE以IgG、IgA或IgG、IgM增高多见，类风关以IgM增高为主③慢性肝病：IgG、IgA 、IgM可增高，慢活肝IgG、IgM 增高明显⑶IgD增高：见于IgD型多发性骨髓瘤、妊娠末期、大量吸烟者•⑷IgE增高：见于IgE型多发性骨髓瘤、变态反应性疾病、寄生虫病及皮肤过敏、急慢肝、肾综⒉免疫球蛋白减少IgG＜6.0g/L，IgM、IgA＜0.4g/L（1）先天性：见于先天性无丙种球蛋白血症、先天无胸腺症•（2）获得性：见于大量蛋白丢失性疾病：肾综、剥脱性皮炎中毒性骨髓病、白血病、淋巴网状系统肿瘤：淋巴瘤、霍奇金病长期使用免疫抑制剂⑶Ig减少易引起反复感染•IgG缺乏：易患化脓性感染•IgM 缺乏：易患革兰氏性阴败血症•IgA缺乏：易患呼吸道感染二、血清M蛋白检测⏹M蛋白是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的，具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子或其分子片段。
M蛋白检测的临床意义⏹多发性骨髓瘤⏹巨球蛋白血症⏹重链病：α型、γ型、μ型⏹半分子病：一条重链+一条轻链⏹恶性淋巴瘤⏹良性M蛋白血症二、补体检测•补体是人或动物血清中的一组具有酶活性的糖蛋白，在机体免疫系统中发挥抗感染和免疫调节的作用，也参与免疫病理反应。
㈠CH50测定㈠CH50临床意义•主要反应补体经典激活途径的溶血功能，其结果与C1-C9各组分的量和活性均有关•增高见于：急性炎症、组织损伤•降低见于：①急、慢性肾小球肾炎②各种自身免疫病③感染性疾病④作为判断肝病严重程度的指标㈡C1q测定的临床意义⏹是补体经典途径激活的始动因素⏹增加：见于骨髓炎、类风关、痛风⏹降低：见于SLE、肾小球肾炎、肾病综合症、重度营养不良㈢C3测定的临床意义⏹补体中含量最高，是经典途径和旁路途径的关键物质，也是一种急性时相反应蛋白⏹增高见于：急性炎症或传染病早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、移植排异反应㈢C3测定的临床意义⏹降低见于：⑴补体合成能力降低：慢性肝病、肝坏死⑵补体合成原料不足：营养不良⑶补体消耗或丢失太多：急性肾小球肾炎链球菌感染后肾炎、狼仓性肾炎、SLE活动期、化疗后⑷先天补体缺乏•㈣C4测定的临床意义•增高：见于各种传染病、急性炎症（如急性风湿热、皮肌炎、关节炎等）和组织损伤等•降低：见于自身免疫性肝炎、狼仓性肾炎•SLE、类风关、IgA型肾病等•在SLE，C4的降低常早于其他补体成分，且缓解时较其他成分回升迟•㈤B因子测定的临床意义•主要反应补体旁路途径的溶血功能•增高：见于某些自身免疫性疾病、肾综、•慢性肾炎、恶性肿瘤•降低：见于肝病、急性肾小球肾炎、•自身免疫性溶贫•三、细胞免疫检测•免疫细胞•泛指执行机体免疫功能的各种细胞，主要包括T、B和NK 细胞等与免疫应答有关的细胞。
•不同的细胞群或亚群各有其不同的表面标志和功能，可反映机体的细胞免疫状态或功能••细胞免疫检测的应用•自身免疫性疾病、免疫缺陷病、肿瘤患者治疗前后细胞免疫功能的检测•骨髓移植和器官移植过程中免疫功能监护•感染性疾病和变态反应性疾病的免疫功能监测•某些疾病的发病机制研究••T细胞抗原标记：CD2、CD3、CD4、CD5 、CD7、CD8•B细胞抗原标记：CD10、CD19、CD20、CD21、CD22•髓系（粒-单系）抗原标记：CD11b、CD31-36、CD64、CD68、CD13、CD14、CD15、MPO•巨核系抗原标记：CD41a、CD41b、CD42b、CD61•干细胞抗原标记：CD34•祖细胞抗原标记：CD38•红细胞抗原标记；CD71、血型抗原A、H•非谱系抗原标记：HLA-DR急性白血病免疫分型分型基础：正常血细胞从多能干细胞分化、发育、成熟为功能细胞的过程中，细胞膜、细胞浆或胞核抗原的出现，表达增多与减少甚至消失与血细胞的分化发育阶段密切相关，而且表现出与细胞系列及其分化程度相关的特性。
这些细胞表面和细胞浆内的抗原随着分化成熟过程不断发生改变，称为造血细胞分化抗原。
分化抗原的表达与否可作为鉴别和分类血细胞的基础。
T淋巴细胞表面标志检测一、T淋巴细胞表面标志检测1. E玫瑰花结形成试验:CD2+2.T细胞分化抗原测定：CD3+、CD4+、CD8+免疫荧光法和流式细胞术临床意义：•自身免疫性疾病、免疫缺陷病、肿瘤患者治疗前后细胞免疫功能的检测•骨髓移植和器官移植过程中免疫功能监护•感染性疾病和变态反应性疾病的免疫功能监测•某些疾病的发病机制研究CD3+检测的临床意义：⏹总T淋巴细胞的重要标志⏹评价免疫缺陷症及白血病、淋巴瘤的分型诊断⏹自身免疫性疾病如SLE、类风湿关节炎等的免疫调节治疗⏹器官移植或骨髓移植时免疫监测及指导免疫抑制治疗CD3+CD4+检测的临床意义：⏹辅助、诱导T淋巴细胞的标志⏹机体免疫功能检测⏹白血病、淋巴瘤的分型诊断⏹免疫抑制治疗效果评价⏹病毒感染性疾病时常降低CD3+CD4+检测的临床意义：CD4+绝对计数是HIV（+）者/AIDS诊断和分型指标之一。
HIV（+）者分型：一期：>500×106/L;二期：（200-499）×106/L；三期：<200×106/LCD3+CD8+检测的临床意义⏹抑制、杀伤性T淋巴细胞的标志⏹病毒感染性疾病时常增高CD4+/CD8+减低:常见于爱滋病、恶性肿瘤进行期及复发时CD4+/CD8+增高:在器官移植时预示可能发生排斥反应、自身免疫病•二、B淋巴细胞表面标志检测•1.B淋巴细胞膜表面免疫球蛋白测定：•SmIgM、SmIgD•免疫荧光法、流式细胞术•2.B淋巴细胞分化抗原检测：•CD10、CD19、CD20、CD21、CD22、CD40••二、B淋巴细胞表面标志检测•临床意义：•1.B淋巴细胞膜表面仅表达SmIgM则为未成熟B淋巴细胞，而同时表达SmIgM、SmIgD则为成熟B淋巴细胞•2.SmIg+细胞增多：慢淋、毛细胞性白血病、巨球蛋白血症•3.SmIg+细胞减低：体液免疫缺陷如丙种免疫球蛋白缺乏症等••二、B淋巴细胞表面标志检测•临床意义：•CD19为全部B淋巴细胞共有的表面标志•CD19增高见于B淋巴细胞系统的恶性肿瘤•CD19减低见于体液免疫缺陷病三、淋巴细胞亚群功能检测㈠淋巴细胞转化试验：1. 形态学方法：有丝分裂原：T淋巴细胞---植物血凝素、刀豆蛋白A、美洲商陆B淋巴细胞---美洲商陆、葡萄球菌A蛋白三、淋巴细胞亚群功能检测⏹临床意义：反映机体的细胞免疫功能水平，估计疾病的疗效和预后㈢NK细胞的免疫检测⒈数量检测——免疫荧光法、流式细胞术CD16+56⒉功能的检测——⏹NK细胞活性测定：酶释法、放射性核素法、免疫荧光法⏹抗体依赖性细胞介导的细胞毒（ADCC）测定：㈢NK细胞的免疫检测临床意义1. NK细胞活性增高：病毒感染早期、器官移植患者2. NK细胞活性减低：恶性肿瘤、AIDS、联合免疫缺陷病3.抗肿瘤疗效观察和预后评价4.免疫调节功能：释放IFN-γ、TNF-β等，增强抗感染和免疫监视能力第三节感染免疫检测一、血清抗链球菌溶血素“O”试验（P434）⏹链球菌溶血素“O”是A群溶血性链球菌产生的溶血外毒素，可刺激机体产生特异的抗链球菌溶血素“O”（ASO）一、血清抗链球菌溶血素“O”试验⏹临床意义1. 链球菌感染1周后ASO开始升高，4-6周达高峰，以后逐渐下降，在体内可持续存在数月甚至数年2. 增高见于：风湿性疾病、急性肾小球肾炎、扁桃体炎3正常人血清中可存在ASO二、伤寒和副伤寒沙门菌免疫检测1.肥达反应（WR）：利用伤寒和副伤寒沙门菌菌液为抗原，检测患者血清中有无相应抗体的一种凝集试验。
参考值:直接凝集法伤寒“H”＜1：160；“O”＜1：80。
副伤寒甲、乙、丙都＜1：80。
肥达反应的临床意义⏹WR阳性一般出现在伤寒发病后一周，阳性率10%；第二周上升为60-70%；第四周可达90%以上。
⏹单份血清抗体效价“O”＞1：80及“H”＞于1：160者有诊断意义；⏹若动态观察，WR持续超过参考值或较原效价升高4倍以上者更有价值。
⏹“O”不高，“H”升高见于预防接种后或非特异回忆反应⏹“O”升高，“H” 不高见于感染早期或其他沙门菌感染2.伤寒和副伤寒沙门菌抗体IgM测定参考值: ELISA法正常人为阴性或滴度＜1：20临床意义：发病后一周即可出现升高，有早期诊断价值，若其滴度＞1：20对诊断伤寒带菌者也有意义。
3．伤寒和副伤寒沙门菌可溶性抗原测定参考值：胶乳凝集法为阴性临床意义：阳性对确诊沙门菌感染更有重要意义三、梅毒螺旋体抗体检测（P438）⏹初筛试验（非特异性反应素）：快速血浆反应素试验（RPR）不加热血清反应素试验（USR）美国性病研究实验室实验（VDRL）⏹确诊试验（特异性抗体）：梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）⏹临床意义：R、RPR法：感染梅毒螺旋体后1-2周检出率为76％，二期梅毒为95-100%，晚期梅毒为70-95%，隐性感染期为70-80%，SLE、疟疾、结核、瘤型麻风病等可出现阳性反应。
可作定量，用于疗效观察。
2.筛选试验阳性的情况下必须做确认试验，阳性可肯定梅毒的诊断。
确诊试验灵敏度高，特异性强，不受药物治疗的影响，特异性抗体可持续数年甚至终身。
不能用于疗效观察。
四、TORCH试验⏹TO：刚地弓型虫⏹R：风疹病毒⏹C：巨细胞病毒⏹H：单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型⏹这组病毒常引起围产期感染，导致流产、早产、死胎和各种异常，目前已作为妇产科产前常规检查项目五、C反应蛋白（CRP）（P439）⏹能与肺炎链球菌C多糖发生反应的急性时相反应蛋白⏹细菌感染，尤其G-杆菌感染，CRP明显增高；病毒感染不增高或仅轻度增高⏹风湿热的疗效观察：急性期或活动期CRP增高可达200mg/L 静止期恢复正常。