《饲料添加剂凝结芽孢杆菌》
凝结芽孢杆菌对肉鸡肠道形态和菌群的影响
收稿日期:2020-10-14作者简介:蒋磊(1986—),男,讲师,硕士,研究方向:动物营养与饲料.基金项目:安徽省高校自然科学研究重点项目(KJ2017A654);安徽省高校人文社科重点项目(SK2019A0913);安徽省高校教师创新团队项目(2019cxtd040);宿州职业技术学院畜牧兽医专业带头人(2020yjzydtr18).凝结芽孢杆菌对肉鸡肠道形态和菌群的影响蒋磊1,苏绍辉1,陈杰2(1.宿州职业技术学院动物科学系,安徽宿州234000;2.安徽海大饲料有限公司,安徽池州247100)摘要:为研究凝结芽孢杆菌对肉鸡肠道形态和菌群数量的影响,选取1日龄817肉鸡120只,随机分为3组,对照组饲喂基础日粮,抗生素组添加50mg·kg -1金霉素和5mg·kg -1黄霉素,凝结芽孢杆菌组添加300mg·kg -1凝结芽孢杆菌制剂,试验期49d.结果显示:(1)与对照组相比,添加凝结芽孢杆菌可显著提高十二指肠和空肠内淀粉酶、胰蛋白酶活性,提高绒隐比,但对隐窝深度无显著影响,增加盲肠内乳酸杆菌、双歧杆菌数量,减少大肠杆菌、沙门氏菌数量;(2)与抗生素组相比,饲粮添加凝结芽孢杆菌对肉鸡肠道的绒隐比、盲肠的菌群数量的改善效果更显著.说明饲粮中添加凝结芽孢杆菌能提高肠道消化酶活性,改善肉鸡肠道形态和盲肠菌群的结构组成,其效果优于饲用抗生素.关键词:凝结芽孢杆菌;抗生素;消化酶;绒毛高度;盲肠菌群中图分类号:S831.5文献标志码:A文章编号:1673-3118(2021)02-0048-060引言2018年农业农村部发布《关于开展兽用抗菌药使用减量化行动试点工作的通知》,指出到2020年底将全面禁止饲料中添加抗生素.开发抗生素替代品,让畜禽吃上“绿色食品”,俨然成为现阶段迫在眉睫的工作.凝结芽孢杆菌是一类产乳酸的革兰氏阳性菌,属破壁菌门,兼性厌氧,具有耐高温、胃酸、胆盐等良好的抗逆性,已列入《饲料添加剂品种目录(2013)》[1].有研究表明,凝结芽孢杆菌具有调控畜禽消化道微生态区系平衡,维持肠道形态结构[2];合成分泌多种活性因子,提高营养成分的消化吸收;刺激免疫器官生长发育,提高机体抗病力[3];广谱抗菌能力,增强细胞免疫和体液免疫水平等方面优势[4].目前,凝结芽孢杆菌在817肉鸡生产应用中研究较少,本文研究了凝结芽孢杆菌处理前后817肉鸡肠道结构、消化酶活性、菌群数量的变化,旨在评价凝结芽孢杆菌替代抗生素的作用效果,为开发凝结芽孢杆菌替代抗生素的应用提供理论参考.1材料与方法1.1试验材料凝结芽孢杆菌为粉剂,购自郑州益富源生物有限公司,其中活菌总数≥5.0×108CFU·g -1;试验动物为第35卷第2期2021年4月白城师范学院学报Journal of Baicheng Normal UniversityApr.Vol.352021No.2蒋磊,等:凝结芽孢杆菌对肉鸡肠道形态和菌群的影响第2期817肉鸡,由合作企业养殖场提供.1.2试验设计选取1日龄817肉鸡120只,随机分为3组,对照组饲喂基础日粮;抗生素组在基础日粮中添加50mg·kg-1金霉素和5mg·kg-1黄霉素;凝结芽孢杆菌组在基础日粮中添加300mg·kg-1杆菌制剂.试验期49d,采用多层笼养,常规免疫,基础日粮组成及营养水平如表1所示.表1基础日粮组成及营养水平日粮组成玉米/%豆粕/%豆油/%面粉/%玉米蛋白粉/%磷酸氢钙/%氯化钠/%石粉/%维生素预混料/%微量元素预混料/%1~21日龄60.7825.001.005.005.001.100.351.450.020.3022~49日龄60.4321.005.505.005.001.000.351.400.020.30营养水平代谢能/(MJ·kg-1)粗蛋白/%粗脂肪/%钙/%有效磷/%蛋氨酸/%赖氨酸/%蛋+胱氨酸/%1~21日龄12.3221.073.480.830.290.431.260.8022~49日龄13.3218.998.340.790.270.441.210.77注:每千克维生素预混料:VA15000IU,VD31000IU,VE40mg,VK3mg,VB12mg,VB25mg,VB64g,泛酸20mg,烟酸30mg,生物素0.2mg;每千克微量元素预混料:铁80mg,锌40mg,锰40mg,铜8mg,碘0.2mg,硒0.15mg.1.3指标测定1.3.1肠道消化酶活性试验期末从每组中随机抽取10只接近平均体重的肉鸡断颈致死,取十二指肠、空肠中段内容物0.5g,离心取上清液,采用试剂盒(南京建成生物工程研究所提供)测定胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性. 1.3.2肠道形态结构取十二指肠、空肠中段肠道于福尔马林中固定,脱水、包埋、切片处理,苏木素-伊红(HE)染色,测量绒毛高度、隐窝深度,并计算绒隐比.1.3.3盲肠菌群数量取左侧盲肠内容物0.5g,通过生理盐水进行倍比稀释到10-6,测定菌群数量.利用平板计数法测定乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌的数量.1.4数据处理数据用Excel2010处理,SPSS17.0进行方差分析和多重比较,结果以均值±标准差表示,p<0.05表示差异显著.2结果分析2.1凝结芽孢杆菌对肉鸡肠道消化酶活性的影响由表2可知,十二指肠消化酶活性:与对照组相比,抗生素组胰蛋白酶活性显著提高,凝结芽孢杆菌组淀粉酶和胰蛋白酶活性均显著提高(p<0.05),而脂肪酶活性差异不显著(p>0.05),凝结芽孢杆菌组和抗生素组3种消化酶活性差异不显著(p>0.05).空肠消化酶活性:与对照组相比,抗生素组胰蛋白酶49白城师范学院学报第35卷活性显著提高(p<0.05),凝结芽孢杆菌组淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶活性分别提高了17.45%、20.17%和13.46%,差异均显著(p<0.05);与抗生素组相比,凝结芽孢杆菌组均无显著性差异(p>0.05).表2各处理组肉鸡肠道消化酶活性单位:U·mL-1项目十二指肠空肠淀粉酶胰蛋白酶脂肪酶淀粉酶胰蛋白酶脂肪酶对照组18.42±1.62b278.69±23.77b79.73±5.8767.11±4.98b216.37±20.41b94.31±7.17b抗生素组19.97±1.48ab333.71±28.88a79.27±4.1874.25±7.18ab267.52±21.10a99.71±5.13ab凝结芽孢杆菌组21.54±1.46a326.97±25.81a80.80±6.6278.82±6.04a260.01±23.55a107.00±6.88a注:不同字母表示差异显著(p<0.05),相同或无字母表示差异不显著(p>0.05),下同.2.2凝结芽孢杆菌对肉鸡肠道形态结构的影响由表3可知,十二指肠形态结构:与对照组相比,抗生素组绒毛高度、隐窝深度无显著性差异(p>0.05),凝结芽孢杆菌组绒毛高度、绒隐比分别提高了14.74%和22.90%,差异显著(p<0.05),而隐窝深度无显著性差异(p>0.05);凝结芽孢杆菌组与抗生素组的各指标差异结果与对照组一致.空肠形态结构:与对照组相比,抗生素组和凝结芽孢杆菌组隐窝深度均无显著性差异(p>0.05),凝结芽孢杆菌组绒毛高度、绒隐比分别提高了12.71%和10.56%,差异显著(p<0.05),而抗生素组则显著降低(p<0.05).表3各处理组肉鸡肠道形态结构项目十二指肠空肠绒毛高度/μm隐窝深度/μm绒毛高度/隐窝深度绒毛高度/μm隐窝深度/μm绒毛高度/隐窝深度对照组1380.55±91.49b241.51±25.125.72±0.24b1182.87±79.61b164.33±15.387.20±0.16b抗生素组1301.92±78.27b238.37±22.715.46±0.17b996.24±74.18c172.68±18.625.77±0.13c凝结芽孢杆菌组1584.02±101.11a225.43±31.227.03±0.29a1333.25±91.42a163.79±17.137.96±0.22a2.3凝结芽孢杆菌对肉鸡盲肠菌群的影响由表4可知,与对照组相比,抗生素组盲肠4种菌群数量均显著降低(p<0.05),凝结芽孢杆菌组乳酸杆菌、双歧杆菌数量分别增加了8.19%和9.86%,大肠杆菌、沙门氏菌数量分别减少了10.74%和29.00%,差异均显著(p<0.05);与抗生素组相比,凝结芽孢杆菌组沙门氏菌数量差异显著(p<0.05),而大肠杆菌数量无显著性差异(p>0.05).表4各处理组肉鸡盲肠菌群数量单位:lg(CFU·g-1)项目乳酸杆菌双歧杆菌大肠杆菌沙门氏菌对照组7.45±0.23b7.81±0.06b6.52±0.17a5.31±0.11a抗生素组6.67±0.10c6.26±0.21c5.73±0.07b4.48±0.14b凝结芽孢杆菌组8.06±0.17a8.58±0.16a5.82±0.11b3.77±0.09c5051蒋磊,等:凝结芽孢杆菌对肉鸡肠道形态和菌群的影响第2期3讨论3.1凝结芽孢杆菌对肉鸡肠道消化酶活性的影响研究显示,凝结芽孢杆菌可分泌淀粉酶、蛋白酶及多种非淀粉多糖酶,补充肠道内源酶的不足[5];产生维生素、氨基酸、促生长因子等多种促进其他益生菌(乳酸杆菌、双歧杆菌等)生长的物质,间接提高肠道消化酶的活性[6].Wang等[7]在日粮中添加2×106CFU·g-1凝结芽孢杆菌,结果显示,肉鸡十二指肠内胰蛋白酶和淀粉酶活性分别提高了23.84%和24.92%,而脂肪酶活性无明显变化.曾丽莉等[8]研究报道,肉鸭饲粮中添加200mg·kg-1和300mg·kg-1凝结芽孢杆菌均显著提高了十二指肠中淀粉酶和胰蛋白酶活性.但王劲松[9]研究表明,饲粮中添加凝结芽孢杆菌肉鹅十二指肠淀粉酶活性显著提高,但脂肪酶和胰蛋白酶活性无明显变化,这可能是由于凝结芽孢杆菌的添加量较低,对3种酶活性的影响不同导致的.付利芝[10]进行了证实,表明饲料中高浓度添加量均显著提高肉鸡十二指肠胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性.本研究结果显示,空肠内淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶活性均显著提高,这可能由于空肠的环境更适宜凝结芽孢杆菌的定植,其数量高于十二指肠,作用更显著.3.2凝结芽孢杆菌对肉鸡肠道形态结构的影响肠道的形态结构决定吸收能力,绒毛高度影响吸收面积,隐窝深度反映上皮细胞的增殖和成熟状况,通常绒毛高度提高或隐窝深度降低表明肠道分泌和吸收功能增强[11].刘聪等[12]研究表明,凝结芽孢杆菌可增加肉鸡十二指肠绒毛宽度,提高绒隐比.孙焕林等[13]研究显示,添加7.5×107CFU·g-1凝结芽孢杆菌,肉鸡空肠绒毛高度增加了13%,隐窝深度降低了11%.文献[2]在肉鸡饮水中添加凝结芽孢杆菌,结果显示,空肠绒毛高度显著增加,隐窝深度显著降低.本研究与前人研究结果基本一致,凝结芽孢杆菌可提高肉鸡十二指肠和空肠的绒毛高度、绒隐比,而对隐窝深度无明显影响,说明凝结芽孢杆菌可改善肉鸡小肠形态结构,通过增强机体营养物质的吸收,促进肠道的生长发育,尤其是绒毛发育.Wu等[14]在感染气荚膜梭菌肉鸡饲粮中添加凝结芽孢杆菌,显示试验组肠道损伤评分显著降低,黏膜完整性、绒毛高度和绒隐比均显著提高,与王政等[15]研究结论一致.表明凝结芽孢杆菌具有屏障功能,维持结构完整性,并对受损肠道有一定程度的恢复作用.3.3凝结芽孢杆菌对肉鸡盲肠菌群的影响家禽盲肠内定植的微生物数量最多,每克内容物中约有1011个[16],多样性较高,常作为菌群种类或数量的研究部位.在本试验条件下,与对照组相比,抗生素组肉鸡盲肠中4种微生物菌群数量均显著降低,说明饲用抗生素对肠道有益菌和致病菌的生长繁殖均具有抑制作用.有研究表明,凝结芽孢杆菌可发酵产生大量乳酸,抑制不耐酸致病菌的增殖;产生抗菌凝固素,杀灭大肠杆菌和沙门氏菌等多种革兰氏阳性(阴性)有害菌[17];分泌多种促生长因子,促进有益菌的繁殖,竞争性抑制致病菌的生长.姚晓红等[18]进行体外抑菌试验,表明凝结芽孢杆菌可明显抑制大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌等常见致病菌的增殖.赵娜等[19]研究显示,饲粮中添加3×105CFU·g-1凝结芽孢杆菌,42日龄肉鸡盲肠和回肠中大肠杆菌数量分别降低62%和29%,差异显著,与Bami等[20]研究结果一致.文献[2]在肉鸡饮水中添加凝结芽孢杆菌,结果显示,盲肠中乳酸杆菌数量显著提高,大肠杆菌显著降低.文献[12]研究显示,凝结芽孢杆菌降低了肉鸡盲肠中沙门氏菌的数量.本试验结果也表明凝结芽孢杆菌可提高肉鸡盲肠内有益菌数量,降低致病菌数量,效果优于饲用抗生素.52白城师范学院学报第35卷4结论在本试验条件下,饲粮中添加凝结芽孢杆菌显著增强49日龄肉鸡十二指肠和空肠内容物中淀粉酶、胰蛋白酶活性,提高空肠脂肪酶活性;提高十二指肠和空肠的绒毛高度、绒隐比;增加盲肠中乳酸杆菌、双歧杆菌数量,降低大肠杆菌、沙门氏菌数量.参考文献:[1]夏涛,王乙茹,刘元述,等.凝结芽孢杆菌在肉鸡养殖中应用效果及其作用机理研究进展[J].中国家禽,2019,41(3):39-43.[2]王政,张大伟,齐长海,等.凝结芽孢杆菌对白羽肉鸡生产性能及部分肠道微生物相关指标的影响[J].中国饲料,2016(7):31-34.[3]宫秀燕,韦明,蒋秋斐,等.凝结芽孢杆菌对肠炎沙门氏菌感染肉鸡生产性能和抗氧化功能的影响[J].中国畜牧杂志,2015,51(17):74-79,98.[4]林丽花,柯芙容,詹湉湉,等.凝结芽孢杆菌对黄羽肉鸡生产性能、血清生化指标及抗氧化功能的影响[J].动物营养学报,2014,26(12):3806-3813.[5]孙娜新,董玉兰,张根伟,等.鸡源凝结芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究[J].饲料研究,2014(5):60-63.[6]邹梅,黄友解,吴吉安,等.凝结芽孢杆菌的特点、作用机制及生物学功能[J].饲料研究,2017(2):1-5,18.[7]WANG 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intestinal morphology and flora of broilers,120one-day old817broilers were divided into three groups randomly,the broilers in control group were fed the basal diet,those in the antibiotic group were fed the basal diet supplemented with50mg·kg-1aureomycin and5mg·kg-1flavomycin,and those in the Bacillus coagulans group were fed the basal diet supplemented with 300mg·kg-1Bacillus coagulans for49days.The results shows as follows:(1)Compared with the control group,adding Bacillus coagulans can significantly increase the activity of amylase and trypsin in duodenum and jejunum,and increase the crypt ratio,but it has no significant effect on the depth of crypt,increasing the number of Lactobacillus and Bifidobacterium in cecum and reducing the number of Escherichia coli and Salmonella;(2)Compared with the antibiotic group,the effect of adding Bacillus coagulans on the improve⁃ment of intestinal clove ratio and the number of cecum flora in broilers is more significant.In conclusion,the supplementation of Bacillus coagulans can significantly increase the activities of digestive enzyme,improve intestinal morphology and the composition of cecal bacterial,and its effect is better than that of forage anti⁃biotics.Key Words:Bacillus coagulans;antibiotics;digestive enzyme;villus height;cecal bacterial(责任编辑:李玉波)。
《2024年饲用凝结芽孢杆菌的菌数检测方法研究进展》范文
《饲用凝结芽孢杆菌的菌数检测方法研究进展》篇一一、引言随着现代畜牧业的发展,饲用凝结芽孢杆菌作为一种重要的益生菌被广泛应用于动物饲料中。
其能够有效地改善动物肠道微生态平衡,提高饲料利用率,增强动物免疫力,对促进畜牧业的发展具有重要意义。
然而,为了确保饲用凝结芽孢杆菌的有效性和安全性,对其菌数的准确检测显得尤为重要。
本文将就饲用凝结芽孢杆菌的菌数检测方法的研究进展进行详细阐述。
二、传统菌数检测方法在过去,饲用凝结芽孢杆菌的菌数检测主要依靠传统的平板计数法。
该方法通过将样品稀释后,在特定培养基上培养,然后根据菌落的形成情况来估算菌数。
这种方法虽然操作简单,但耗时较长,且易受操作人员主观因素的影响,准确性有待提高。
三、现代菌数检测方法随着科技的发展,越来越多的现代检测技术被应用于饲用凝结芽孢杆菌的菌数检测。
1. 荧光定量PCR技术:该方法利用荧光染料与DNA结合的特性,通过定量PCR技术来检测特定基因的拷贝数,从而推算出菌数。
这种方法具有快速、准确、灵敏度高的优点,被广泛应用于菌数检测。
2. 生物传感器技术:生物传感器技术通过将生物识别元件与物理化学传感器相结合,实现对菌数的快速、实时检测。
该方法具有灵敏度高、操作简便、无需样品处理等优点。
3. 显微镜计数法:利用显微镜对样品中的菌体进行直接观察和计数。
这种方法可以直观地观察到菌体的形态和数量,但需要较高的技术水平和设备支持。
四、研究进展近年来,针对饲用凝结芽孢杆菌的菌数检测方法进行了大量的研究。
研究人员不断探索新的检测技术,以提高检测的准确性和效率。
例如,结合荧光定量PCR技术和生物传感器技术的综合检测方法被提出,这种方法可以在短时间内准确地检测出菌数,为饲用凝结芽孢杆菌的质量控制提供了有力支持。
此外,纳米技术在菌数检测中的应用也取得了显著的进展,如利用纳米材料制备的生物传感器具有更高的灵敏度和更快的响应速度。
五、未来展望未来,随着科技的不断进步,饲用凝结芽孢杆菌的菌数检测方法将更加完善和高效。
凝结芽孢杆菌抑菌性能的研究进展
凝结芽孢杆菌抑菌性能的研究进展■柳成东1赵平1王乙茹2王春羲3程志斌1*(1.云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201;2.达州职业技术学院,四川达州635001;3.昆明三正生物科技(集团)有限公司,云南昆明650217)作者简介:柳成东,硕士,研究方向为单胃动物营养与饲料科学。
通讯作者:程志斌,博士,副教授。
收稿日期:2021-03-10基金项目:国家自然科学基金[31860664];云南省重大科技专项[2018ZF012];云南省农业联合面上项目[2017FG001-067];云南省创新团队项目[2017HC030]摘要:文章综述了近年来益生菌凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans )在体内、体外抑菌性能的研究报道,旨在为饲用凝结芽孢杆菌替抗应用提供科学依据。
在较为全面的收集国内外相关凝结芽孢杆菌抑菌实验和实验数据的基础上,文章重点总结了三方面内容:①凝结芽孢杆菌抑菌性能评估的研究方法;②凝结芽孢杆菌牛津杯法抑菌作用(体外抑菌实验评估);③饲用凝结芽孢杆菌对畜禽肠道菌群的调控效果(体内抑菌实验评估)。
分析现有文献结果显示,牛津杯法是实验室评估凝结芽孢杆菌抑菌作用的主要方法。
牛津杯法抑菌实验报道显示:凝结芽孢杆菌对畜禽肠道有害菌、饲料源有害菌、商业饲用益生菌等3类指示菌的抑菌研究较多,但对肠道有益菌的抑制研究没有报道。
大量动物试验集中报道了饲用凝结芽孢杆菌对肠道大肠杆菌、乳酸杆菌总菌数的影响,极少涉及沙门氏菌、双歧杆菌影响的研究。
基于当前替抗饲料添加剂研发的实际需求,文章以抗生素为对照组,加快凝结芽孢杆菌体内、体外抑菌性能的系统评估研究,为凝结芽孢杆菌在饲料及养殖业的替抗应用奠定基础。
关键词:凝结芽孢杆菌;抑菌性能;体外抑菌实验评估;牛津杯法;体内抑菌试验评估;肠道菌群检测;研究进展doi:10.13302/ki.fi.2021.10.010中图分类号:S816.3文献标识码:A文章编号:1001-991X (2021)10-0058-07开放科学(资源服务)标识码(OSID ):Research Progress on Antibacterial Properties of a Probiotic Bacillus Coagulans LIU Chengdong 1ZHAO Ping 1WANG Yiru 2WANG Chunxi 3CHENG Zhibin 1*(1.College of Animal Science and Technology of Yunnan Agricultural University ,Yunnan Kunming 650201,China ;2.Dazhou Vocational and Technical College ,Sichuan Dazhou 635001,China ;3.Kunming Saturn Biotechnology Co .,Ltd .,Yunnan Kunming 650217,China )Abstract :In this paper,the antibacterial properties of probiotic Bacillus coagulans in vivo and in vitro in recent years were reviewed,in order to provide scientific basis for the application of the feed probiotics Bacillus coagulans as an antibiotics alternative.On the basis of comprehensive collection of in vivo and in vitro antibacterial test data of Bacillus coagulans ,three aspects were focused on this paper as follow⁃ings:①evaluation method of antibacterial properties of Bacillus coagulans ;②bacteriostatic effect of Ba⁃cillus coagulans by the oxford cup method (in vitro bacteriostatic evaluation);③bacteriostatic effect ofthe dietary supplementation of probiotics Bacilluscoagulans on intestinal flora of livestock and poul⁃try (in vivo bacteriostatic evaluation).Existing lit⁃eratures indicated that oxford cup method was the main in vitro method to evaluate the bacteriostatic effect of Bacillus coagulans ,which showed thatthree kinds of indicator bacteria including intesti⁃nal harmful bacteria,feed or feedstuff harmful bacteria,and commercial feed probiotics were 582020年7月1日我国饲料与养殖业全面实施饲料“减抗”“禁抗”以来,饲用益生菌等有效“替抗”饲料添加剂的研究越来越受到关注(程志斌等,2017;夏涛等,2018;王乙茹等,2020)。
饲用凝结芽孢杆菌在蛋禽生产中应用效果及其作用机理的研究进展
饲用凝结芽孢杆菌在蛋禽生产中应用效果及其作用机理的研究进展程志斌;赵桓;陈德近;沈先菊;王春【摘要】近年来,饲用益生菌凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)成为了我国安全饲料添加剂研发的热点,正被快速地应用于各类畜禽养殖生产中.然而,当前有关饲用凝结芽孢杆菌在蛋鸡、蛋鸭等蛋禽生产中的研究较少、科学试验报道不多.据此,本文较为全面收集了相关试验报道文献,综述了饲用凝结芽孢杆菌在蛋禽生产中的应用效果,并从改善蛋禽料蛋比、降低蛋禽死淘率、提高蛋壳质量等方面,分析了其可能的作用机理,旨在为饲用凝结芽孢杆菌这一新型饲用益生菌制剂在蛋禽生产中的快速推广应用,提供一定的科学依据.【期刊名称】《广东饲料》【年(卷),期】2018(027)011【总页数】4页(P34-37)【关键词】凝结芽孢杆菌;蛋禽;作用机理;研究进展【作者】程志斌;赵桓;陈德近;沈先菊;王春【作者单位】云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201;昆明三正生物科技(集团)有限公司,云南昆明650217;昆明三正生物科技(集团)有限公司,云南昆明650217;昆明三正生物科技(集团)有限公司,云南昆明650217;昆明三正生物科技(集团)有限公司,云南昆明650217;昆明三正生物科技(集团)有限公司,云南昆明650217【正文语种】中文【中图分类】S816.7近年来,饲用凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)作为一种新型、安全的饲料添加剂,逐步在我国蛋鸡、蛋鸭、鹌鹑等蛋禽养殖生产中开始应用。
然而,到目前为止,有关饲用凝结芽孢杆菌在蛋禽生产中应用的试验报道并不多见。
因此,为了促进饲用凝结芽孢杆菌这一新型饲用益生菌在蛋禽养殖中的推广应用,本文较为全面地收集了相关蛋禽方面的试验文献及其结果,综述了饲用凝结芽孢杆菌在蛋禽生产中的应用效果及其可能的作用机理。
1 凝结芽孢杆菌概述关于凝结芽孢杆菌最早的记录出现在1915年Hammer B.W.发表的论文中,1932年由著名细菌学家霍洛威茨·瓦尔沙文(L.M.Horowitz-Wlassowa)和诺沃泰·罗经(N.W.Nowotelnow)分析鉴定,将其正式命名为凝结芽孢杆菌,归为芽孢杆菌属的乳酸菌。
凝结芽孢杆菌的生物学功能及其在畜禽生产中的应用
动物营养学报2020,32(3):1076⁃1083ChineseJournalofAnimalNutrition㊀doi:10.3969/j.issn.1006⁃267x.2020.03.013凝结芽孢杆菌的生物学功能及其在畜禽生产中的应用安济山㊀胡睿智㊀杨㊀玲㊀贺建华∗(湖南农业大学动物科学技术学院,长沙410128)摘㊀要:凝结芽孢杆菌是一种产乳酸的芽孢杆菌,除了具有肠道内乳酸菌和双歧杆菌的双重功效之外,还具有芽孢杆菌属的高抗逆性㊂诸多研究表明,其作为饲料添加剂,凝结芽孢杆菌具有调节动物肠道功能紊乱㊁维持肠道微生态平衡㊁提高机体免疫能力和生产性能等多方面的功效㊂因此,本文主要综述了凝结芽孢杆菌的生物学功能㊁作用机理以及国内外关于凝结芽孢杆菌在畜禽生产中的应用效果,以期为凝结芽孢杆菌在畜禽健康养殖和安全生产中的应用提供有效参考㊂关键词:凝结芽孢杆菌;乳酸;高抗逆性;生物学功能;作用机理;畜禽生产中图分类号:S816.7㊀㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀㊀文章编号:1006⁃267X(2020)03⁃1076⁃08收稿日期:2019-08-31基金项目:湖南省双一流建设专项(kxk201801004)作者简介:安济山(1999 ),男,新疆哈密人,硕士研究生,研究方向为动物营养与饲料科学㊂E⁃mail:1484737060@qq.com∗通信作者:贺建华,教授,博士生导师,E⁃mail:jianhuahy@hunau.net㊀㊀凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)于20世纪初在酸败牛奶中被首次发现[1]㊂经几十年来的研究,国内外对其益生特性及安全性已取得权威性认可,现已被中国农业部列为可直接饲用于畜禽生产的新型饲料添加剂㊂相比于胃肠道内固有的重要的乳酸菌和双歧杆菌,凝结芽孢杆菌不仅兼具二者的双重功效,同时,还具备芽孢杆菌属高抗逆性㊁强黏附性㊁分泌消化酶㊁产抑菌物质㊁易于培养与贮存稳定等独特优势[2-3]㊂㊀㊀诸多研究报道表明,作为新型微生态制剂,凝结芽孢杆菌具有调控动物肠道健康等多种生物学功能,主要体现在调节肠道功能紊乱㊁维持肠道菌群平衡㊁改善肠道形态结构㊁增强机体免疫能力㊁促进营养物质吸收代谢以及提高生产性能等方面[4-6],不仅有力地改善了畜禽亚健康与养殖环境污染状况,而且有效避免了饲喂抗生素所带来的药物残留和耐药性等问题,即顺应了当下畜牧养殖业 限抗 和 禁抗 的趋势㊂因此,结合国内外关于凝结芽孢杆菌的研究结果,对凝结芽孢杆菌的生物学功能㊁作用机理及其在畜禽生产中的应用效果作一综述,以期为凝结芽孢杆菌在畜禽生产中更合理的应用提供有效参考㊂1 凝结芽孢杆菌的生理特性㊀㊀凝结芽孢杆菌为厚壁菌门芽孢杆菌属,是兼性厌氧型革兰氏阳性菌,其活化的营养细胞呈杆状(长2.5 5.0μm,宽0.6 1.0μm),且两端钝圆,端生芽孢,无鞭毛,具有一定的运动性,菌落形态呈不透明白色且表面突出的圆形形状[1]㊂凝结芽孢杆菌为嗜热同型乳酸发酵菌,最适生长温度为30 50ħ,最适pH为6.6 7.0,主要以淀粉类原料为碳源发酵,无氧无灭菌处理可分解糖类生成高光学纯度的L(+)-乳酸[7]㊂此外,发酵培养基中碳源㊁氮源和生长因子(主要为生物素和硫胺素)限制其发酵率㊁产芽孢率及乳酸浓度[8]㊂㊀㊀凝结芽孢杆菌的特性主要体现在以下几方面:1)安全性:除了具备益生菌制剂众多优点之外,经毒理学和抗生素耐药性试验证明,其不同于3期安济山等:凝结芽孢杆菌的生物学功能及其在畜禽生产中的应用其他芽孢杆菌携带肠毒素和呕吐毒素基因,同时无致诱变和致畸变以及遗传毒性效应,并对所有抗生素具有一定的敏感性,且不携带抗生素耐药性基因[9-11]㊂2)抗逆性:其芽孢体状态具有耐胃酸㊁耐胆盐㊁耐高温高压㊁复活率高等特性,是顺利通过胃肠道系统的重要保障,并且具有满足颗粒饲料加工条件㊁降低杂菌污染系数和延长货架期等优势,且可提高饲料品质[12-13]㊂3)黏附性:根据置换肠道致病菌试验表明,其对肠道上皮细胞具有较强的黏附力,是益生作用的重要前提条件[9,14]㊂4)抑菌性:其具有较广的抗菌谱,在代谢繁殖过程中所分泌的L(+)-乳酸与凝固素等抑菌物质共同抑制肠道内多种革兰氏阳性/阴性致病菌[15-16],降低动物肠道发病率㊂5)产水解酶性:其分泌多种消化酶和酶促因子,可降解植物饲料中复杂碳水化合物和消除抗营养因子等[17]㊂2㊀凝结芽孢杆菌的生物学功能及机理2.1㊀抑制有害菌增殖,维持肠道菌群稳态㊀㊀肠道菌群是激活和维持肠道生理功能的重要因素,菌群失调将直接导致动物机体生理功能性障碍,进而引发各种疾病㊂凝结芽孢杆菌并非动物体肠道内固有微生物,其以高抗逆性的活性芽孢体顺利通过胃酸和消化酶的双重作用进入肠道 定居 ,并迅速消耗肠道中的游离氧,创造可促进厌氧型有益菌如乳酸菌和双歧杆菌增殖的低氧环境,同时抑制需氧型致病菌和腐败微生物的生长,减少产气荚膜梭菌数量[18-19]㊂王政等[20]报道,饮水中添加高剂量的凝结芽孢杆菌显著增加了肉鸡盲肠食糜中乳酸菌数量,显著减少了大肠杆菌类致病菌数量㊂Donskey等[21]研究发现,凝结芽孢杆菌可显著降低小鼠肠道内耐万古霉素肠球菌的数量,同时,证明凝结芽孢杆菌具有改善抗生素引起的肠道菌群紊乱和相关疾病的优势菌株㊂诸多研究发现,凝结芽孢杆菌不同于传统乳酸菌或芽孢杆菌,以戊糖㊁己糖为碳源发酵生成高化学纯度与光学纯度的L(+)-乳酸[22],并且有利于人体和动物吸收,能在小肠上皮细胞表面形成一层生物屏障,阻止有害病菌的附着,同时调节肠道环境pH,创造有利于益生菌增殖的酸性环境,对嗜碱性致病菌有拮抗作用[15]㊂有研究发现,凝结芽孢杆菌可产生抑菌素物质,对肠道内革兰氏阳性或阴性致病菌有显著抑制作用[23-24]㊂此外,在体外肠道模拟试验中,再次证明凝结芽孢杆菌对肠道李斯特菌㊁金黄色葡萄球菌㊁大肠埃希氏菌㊁沙门氏菌和副溶血性弧菌等病原菌有显著溶解作用,其机理可能是产生的凝固素溶解病原菌细胞膜,导致胞内氨基酸㊁无机盐离子等泄露失活[25]㊂㊀㊀综上,凝结芽孢杆菌在肠道内通过抑制病原菌黏附㊁生物夺氧和产生L(+)-乳酸与抑菌素共同拮抗病原菌的异常增殖,促进有益菌群的生长发育,进而改善肠道菌群结构,营造健康肠道环境㊂2.2㊀改善肠道形态结构,调节肠道吸收代谢㊀㊀肠道形态结构的完整性是保证动物对营养物质消化吸收的重要条件㊂诸多研究表明,凝结芽孢杆菌可以改善动物肠道的形态结构,进而提高饲料利用率和动物生产性能[26-27]㊂Wu等[28]报道,饲粮中添加凝结芽孢杆菌可极显著降低感染产气荚膜梭菌肉鸡肠道损伤评分,并显著提高肠黏膜完整性㊁小肠绒毛高度和绒隐比㊂这与在断奶仔猪肠道损伤模型上的应用研究结果一致,而且可以显著增强肠道上皮细胞间紧密连接蛋白闭锁蛋白(Occludin)㊁闭合蛋白-1(Claudin⁃1)和闭锁小带蛋白-1(ZO⁃1)的mRNA表达,从而恢复肠道通透性,防御病原菌感染,减少腹泻[29-30],其机理可能与抑制肠道黏膜免疫相关信号通路跨膜Toll样受体(Toll⁃likereceptors,TLR)⁃4和细胞内NOD样受体(nucleotidebindingoligomerizationdo⁃main⁃likereceptors,NLR)⁃2激活核转录因子-κB(nuclearfactor⁃κB,NF⁃κB)转录促炎细胞因子有关[31]㊂以上研究结果充分证明凝结芽孢杆菌能促进动物肠道形态发育,维持肠黏膜完整性屏障功能㊂凝结芽孢杆菌同其他芽孢杆菌一样,在消化道中分泌多种胞外酶,如α-淀粉酶㊁脂酶㊁蛋白酶㊁木聚糖酶和纤维素酶等,有效降解和消除饲粮中难以被消化的植物性碳水化合物㊁抗营养因子,以乳酸菌的功能提高钙㊁磷㊁维生素D的吸收利用,从而提高饲料转化率㊁动物生产(产蛋)性能和降低料重比(料蛋比)[32-34]㊂此外,凝结芽孢杆菌还能产生多种代谢产物如氨基酸㊁维生素㊁短链脂肪酸(乙酸㊁丁酸)和促生长因子等,为动物机体提供营养的同时,协同其他有益菌促进小肠蠕动,减少肠道内胺类有毒物质的堆积,改善肠道代谢环境,调节消化吸收功能[35-36]㊂此外,凝结芽孢杆菌分泌的β-半乳糖苷酶可以催化乳糖为葡萄糖和7701㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报32卷半乳糖,缓解人体乳糖不耐受症状[37]㊂综上所述,凝结芽孢杆菌通过改善肠道形态结构㊁维持肠道黏膜完整性和分泌多种消化酶与代谢物质共同刺激小肠蠕动,促进营养物质的消化吸收,从而提高动物生产性能㊂2.3㊀增强抗氧化能力,调节机体免疫功能㊀㊀免疫系统是动物对病原体应答的反应系统,而抗氧化系统是免疫相关细胞功能正常的重要保障,因此,机体免疫功能基于平衡的抗氧化系统而建立㊂㊀㊀抗氧化酶的活性反映机体抗氧化能力,丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量反映机体脂质过氧化损伤程度㊂诸多研究报道表明,凝结芽孢杆菌能显著提高机体血清和肝脏抗氧化酶活性并降低MDA含量,减少自由基对机体细胞的损害,从而抑制由活性氧诱导的氧化应激和疾病[18,38-39]㊂在体外抗氧化试验中发现,凝结芽孢杆菌产生的由4种单糖聚合而成的胞外多糖(ex⁃opolysaccharide,EPS)具有较强的清除自由基和降低MDA含量的能力[40]㊂Yu等[38]研究报道,凝结芽孢杆菌可显著提高鲫鱼血清超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)㊁谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSH⁃Px)㊁过氧化物酶2(peroxiredoxin2,Prx2)活性和谷胱甘肽(glutathi⁃one,GSH)含量,降低血清MDA含量,其机理可能与上调核因子E2相关因子2(nuclearfactorE2⁃re⁃latedfactor2,Nrf2)转录有关,进而提高抗氧化酶基因表达㊂宫秀燕等[41]研究表明,饲粮中添加凝结芽孢杆菌可缓解沙门氏菌感染肉鸡氧化应激的趋势,可极显著提高肉鸡血清总抗氧化能力(totalantioxidantcapacity,T⁃AOC)和过氧化氢酶(cata⁃lase,CAT)㊁SOD活性,抑制MDA的生成,降低氧化应激损伤,其机理可能与其降低肠道pH㊁分泌抗菌物质或维生素等有关,以激活剂的功能刺激机体分泌抗氧化酶㊂㊀㊀据诸多研究报道表明,凝结芽孢杆菌可增强动物肠黏膜屏障功能,促进T㊁B淋巴细胞增殖分化,刺激辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)分泌细胞因子以及增强自然杀伤细胞(nat⁃uralkillercell,NK)与吞噬细胞的活力,以提高体液免疫和细胞免疫水平[5,42-43]㊂Sudha等[44]在脂多糖诱导小鼠巨噬细胞(RAW264.7)炎症反应中添加凝结芽孢杆菌,能显著减少促炎因子的分泌,缓解炎症反应,其机理是通过抑制NF⁃κB转录和环氧合酶(cyclo⁃oxygen⁃ase,COX)⁃2活性,降低了促炎细胞因子的含量㊂也有研究表明,在环磷酰胺引起小鼠免疫缺陷和链霉素引起肠道失调综合征模型中,凝结芽孢杆菌显著改善了肠道形态结构(尤其是恢复上皮细胞通透性),增加了T淋巴细胞㊁脾淋巴细胞和巨噬细胞数量,进而提高了肠黏膜屏障与免疫功能[45]㊂邢冠润等[46]研究发现,凝结芽孢杆菌可显著提高产蛋后期蛋鸡血清免疫球蛋白A(immunoglobulin,Ig)A㊁IgG㊁白细胞介素(interleukin,IL)⁃2㊁IL⁃4㊁IL⁃10㊁肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor,TNF⁃α)及小肠黏膜分泌性免疫球蛋白A(secretoryimmunoglobulinA,sIgA)含量㊂胸腺㊁脾脏和法氏囊等免疫器官指数可反映禽类免疫状况㊂宫秀燕等[47]报道,凝结芽孢杆菌能缓解产气荚膜梭菌感染肉鸡坏死性肠炎趋势,并极显著提高免疫器官指数,促进T㊁B淋巴细胞的增殖,其机理可能是所分泌的有益物质作为抗原刺激并促进免疫器官的生长发育㊂Xu等[48]也研究发现,凝结芽孢杆菌不仅可以显著提高黄羽肉鸡胸腺㊁脾脏和法氏囊等免疫器官指数,而且通过提高十二指肠TLR4㊁干扰素-α(interferon⁃α,IFN⁃α)和黑色素瘤分化相关抗原5(melanomadif⁃ferentiation⁃associatedgene5,MDA5)的mRNA表达,刺激肠道先天免疫功能,增加肠黏膜分泌阳性sIgA数量㊂此外,凝结芽孢杆菌可以提高水产动物血清溶菌酶(lysozyme,LZY)活性㊁非特异性免疫指标及对副溶血性弧菌抗病性[18,49]㊂综上,凝结芽孢杆菌可维持肠道黏膜屏障正常功能,增强抗氧化系统,激活机体先天免疫与适应性免疫活力,从而有效抵抗由活性氧和疾病等导致的机体生理功能性障碍㊂3㊀凝结芽孢杆菌在畜禽生产中的应用3.1㊀在家禽生产中的应用㊀㊀凝结芽孢杆菌在家禽中可作为免疫调节剂使家禽抵御病害,缓解疾病或病菌感染引起的生长抑制和生理功能性障碍[50-51]㊂Wu等[28]研究发现,饲粮中添加4ˑ1010CFU/kg凝结芽孢杆菌可有效缓解由产气荚膜梭菌导致的肉鸡坏死性肠炎症,可显著改善肠道形态结构,并可显著提高空肠黏膜sIgA和LZY的mRNA表达以及肠碱性磷酸酶活性㊂也有研究报道,凝结芽孢杆菌可显著缓87013期安济山等:凝结芽孢杆菌的生物学功能及其在畜禽生产中的应用解产气荚膜梭菌和沙门氏菌感染的肉鸡肠道病变趋势,并显著提高血清T⁃AOC和SOD㊁CAT㊁GSH⁃Px活性及免疫器官指数,并显著降低料重比和致病菌数量[41,47],与刘聪等[52]的研究结果相似㊂李嘉懿等[39]研究发现,在蛋鸡饲粮中添加100mg/kg凝结芽孢杆菌可显著提高血清抗氧化酶活性,并显著降低血清甘油三酯和肝脏中粗脂肪含量,有效预防产蛋高峰期和后期脂肪肝综合征㊂Xu等[48]在肉鸡饲粮中添加200mg/kg凝结芽孢杆菌,发现其可显著提高十二指肠绒隐比和阳性sIgA数量,增强肠道黏膜屏障功能㊂以上研究充分表明,凝结芽孢杆菌可以提高家禽抗氧化能力,增强肠道免疫功能,对多种致病菌所致的疾病具有显著的免疫效果㊂因此,可以推测凝结芽孢杆菌提高家禽免疫能力是通过改善肠黏膜屏障功能,提高机体整体免疫水平,增加肠道受损部位免疫因子表达量,有效抵抗病原性感染及缓解感染后病变趋势,从而保障家禽健康和生产水平㊂㊀㊀此外,许多研究表明,凝结芽孢杆菌对肉禽㊁蛋禽的生产性能具有不同程度的影响[32,53]㊂Bami等[54]研究报道,饲粮中添加100mg/kg凝结芽孢杆菌可改善肉鸡回肠产乳酸菌群数量,显著提高体增重㊁饲料转化率,显著降低料重比,并改善胴体以及肉质性状,降低肝脏㊁腹部脂肪和肉中硫代巴比妥酸值,这与前人研究结果[55]相似㊂也有研究表明,凝结芽孢杆菌可有效缓解热应激引起肉鸡料重比的升高,与对照组相比,可显著降低血清皮质酮㊁总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量[56],有效防御动脉粥样硬化,提高生产性能㊂另有研究表明,凝结芽孢杆菌可显著提高肉禽小肠绒毛高度㊁绒隐比,改善盲肠内乳酸菌与大肠杆菌的比例,增强肠道消化酶的活性[48,57-58]㊂蛋禽的产蛋性能与料蛋比是评价蛋禽生产性能的重要指标㊂邢冠润等[46]报道,在产蛋后期蛋鸡基础饲粮中添加3.33ˑ106CFU/g凝结芽孢杆菌可显著提高其肠道消化酶活力,促进免疫器官发育,并显著提高血清中IgA㊁IgG㊁IL⁃2㊁IL⁃4㊁IL⁃10㊁TNF⁃α和sIgA的mRNA表达或分泌,降低料蛋比㊁腹泻率及血清干扰素-γ(interferon⁃γ,IFN⁃γ)含量;另发现凝结芽孢杆菌通过促进性腺激素释放和卵巢上繁殖相关受体基因的表达,提高产蛋性能[34]㊂黄遵锡等[59]的研究与其结果相似,而且发现凝结芽孢杆菌可显著提高产蛋高峰期蛋鸡饲粮中钙㊁磷㊁蛋白质和氨基酸的吸收代谢,从而提高产蛋率㊁蛋品质㊂在其他蛋禽品种也得到相似的结果[60-61]㊂因此,可推测凝结芽孢杆菌主要通过提高家禽先天免疫与适应性免疫,改善肠道形态结构,增强消化酶活性,促进营养物质吸收代谢,从而实现肉禽㊁蛋禽生产性能的提高㊂然而,有学者认为凝结芽孢杆菌对蛋禽产蛋性能和蛋品质无显著影响[62-63]㊂这可能与试验动物品种和饲喂阶段不同有关,也可能与凝结芽孢杆菌的来源与添加剂量有关,还需进一步研究论证㊂3.2㊀在家畜生产中的应用㊀㊀诸多研究表明,饲粮添加不同水平凝结芽孢杆菌或含凝结芽孢杆菌复合添加剂具有提高仔猪免疫能力和生产性能的作用[64-65]㊂Adami等[27]报道,饲粮中添加1.0ˑ1010CFU/kg凝结芽孢杆菌,与对照组和添加80mg/kg杆菌肽锌组相比,可显著提高仔猪平均日增重㊁饲料转化率,显著降低粪便中肠球菌和大肠杆菌数量㊂Wu等[26]㊁余魁等[29]在21日龄断奶仔猪基础饲粮中分别添加2.0ˑ106㊁2.0ˑ107CFU/g凝结芽孢杆菌,相比于对照组,2组均显著提高肠道抗氧化酶SOD和CAT活性,促进肠道黏膜细胞的增殖与更新以及紧密连接蛋白OccludinmRNA表达水平,降低空肠隐窝深度㊁二胺氧化酶活性和MDA含量,而2.0ˑ107CFU/g凝结芽孢杆菌可显著降低血清胆固醇含量㊁谷氨酰胺转肽酶活性且缓解肠道氧化应激损伤㊂同时,蒲俊宁等[33]在饲粮中添加复合添加剂(3000g/t苯甲酸㊁400g/t凝结芽孢杆菌和400g/t牛至油)也得到了与其相似的效果,并且显著上调仔猪空肠黏膜sIgA㊁营养物质转运载体钠-葡萄糖共转运载体1㊁寡肽转运蛋白1㊁Claudin⁃1㊁Occludin㊁黏液蛋白2等mRNA表达水平,从而维持肠道黏膜屏障完整性,促进营养物质的吸收,有效缓解由大肠杆菌攻毒引起的腹泻㊂因此,可推测仔猪生产性能提高的机理可能是凝结芽孢杆菌定植于未发育完全仔猪肠道内,改善肠道形态结构,维持肠道黏膜完整性,调节肠道菌群平衡,促进养分转运载体与抗氧化酶基因的表达,从而达到提高免疫力和生产性能的效果㊂4㊀小㊀结㊀㊀综上所述,凝结芽孢杆菌在畜禽生产中具有改善肠道微生态环境㊁调节营养物质吸收代谢㊁提9701㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报32卷高机体免疫力以及生产性能等功效㊂然而,现阶段仍然存在一些有待进一步解决的问题:1)虽然在畜禽生产应用中取得了较理想的效果,但针对不同动物品种㊁不同生长阶段的最适添加量与添加方式还需进一步的研究总结;2)针对不同来源菌株的特性和作用机制还需进一步探索研究,以便发掘凝结芽孢杆菌与其他绿色添加剂配伍使用的潜在生物学功能,有助于为凝结芽孢杆菌在畜禽生产中的应用提供有效的理论依据,推动当下畜牧行业新时代㊁新模式的发展㊂参考文献:[1]㊀SARLESWB,HAMMERBW.ObservationsonBa⁃cilluscoagulans[J].JournalofBacteriology,1932,23(4):301-314.[2]㊀HYRONIMUSB,LEMARRECC,SASSIAH,etal.Acidandbiletoleranceofspore⁃forminglacticacidbacteria[J].InternationalJournalofFoodMicrobiolo⁃gy,2000,61(2/3):193-197.[3]㊀MIDHUNSJ,NEETHUS,VYSAKHA,etal.Antag⁃onismagainstfishpathogensbycellularcomponents/preparationsofBacilluscoagulans(MTCC⁃9872)andit 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凝结芽孢杆菌生物学特性、益生机制及其生物学功能
凝结营养体代谢产物以 L-乳酸为主,降低胃部及后肠道 pH值,抑制有害菌和腐败菌的生长繁殖。同时分泌抗菌肽类 抑菌物质,抑制大肠杆菌、产气荚膜梭菌等,起到调节菌群结构 的功能[9],有助于幼龄动物肠道优势菌群的定植,减少营养性 腹泻。 23 代谢产酶
凝结芽孢生长 过 程 中 分 泌 多 种 消 化 酶 [10],能 通 过 生 物 酶 解作用促进大 分 子 营 养 的 降 解,有 助 于 动 物 对 饲 料 营 养 的 消 化。此外,乳酸、乙酸等物质易与钙、磷等形成有机矿物盐[11], 提升畜禽对无机微量元素的吸收利用。 24 强化先天免疫力
周映华等在断奶仔猪日粮中添加凝结芽孢杆菌,结果显示 试验组平均日增重显著高于对照组,料肉比指标较对照组提高 了 8.96%。Chen等在生长育肥猪日粮中添加凝结芽孢杆菌, 也得到类似的结果,证实其生产性能得到显著提高 。 [13]
黄遵锡等在产蛋高峰期蛋鸡日粮中添加凝结芽孢杆菌,不 合格蛋的比例显著降低,料蛋比指标较对照组下降了 4.37%, 改善了蛋鸡生产性能[14]。谢丽曲等在樱桃谷肉鸭日粮中加入
凝结芽孢杆菌以芽孢体形态与食物一同进入胃肠道,能在
葡萄糖等萌发剂的 作 用 下 快 速 变 为 营 养 细 胞 [8]。 其 兼 性 厌 氧 的特性,可在有氧环境中快速生长繁殖,约 30min即可繁殖 1 世代。通过迅速消耗游离氧气,创造胃肠道的无氧环境,有助 于乳杆菌、双歧杆菌的生长定植。 22 产酸及抑菌素
添加凝结芽孢杆菌对生长猪生产性能的影响
添加凝结芽孢杆菌对生长猪生产性能的影响杨保和;程志斌;白华毅;王桂瑛;李亚平;窦舒民;王春;廖国周;王雪峰;李云辉【摘要】选择72日龄、平均体重30.2±0.3 kg的杜×长×大商品阉公猪200头,分为4个处理组:处理组1(无抗生素、无凝结芽孢杆菌),处理组2(单一添加金霉素60 ppm),处理组3(单一添加凝结芽孢杆菌250 ppm),处理组4(同时添加金霉素60 ppm和凝结芽孢杆菌250 ppm),研究饲用凝结芽孢杆菌对生长猪生长性能的影响.试验结果表明,末体重、平均日增重、料肉比等3个指标,处理组2和处理组3之间差异不显著(P>0.05),处理组4显著优于处理组1(P<0.05).平均日采食量指标,4个处理组之间差异不显著(P>0.05).试验结果表明,生长猪日粮中添加饲用凝结芽孢杆菌2.5×106 cfu g-1(全价配合饲料),能够完全替代饲用金霉素,并且能保障生长猪的正常生长性能.【期刊名称】《饲料博览》【年(卷),期】2018(000)002【总页数】4页(P5-8)【关键词】凝结芽孢杆菌;生长猪;生产性能【作者】杨保和;程志斌;白华毅;王桂瑛;李亚平;窦舒民;王春;廖国周;王雪峰;李云辉【作者单位】云南快大多畜牧科技有限公司,云南玉溪653100;云南农业大学,昆明650201;云南农业大学,昆明650201;云南农业大学,昆明650201;昆明三正生物科技(集团)有限公司,昆明650217;云南快大多畜牧科技有限公司,云南玉溪653100;昆明三正生物科技(集团)有限公司,昆明650217;云南农业大学,昆明650201;云南农业大学,昆明650201;云南省西双版纳州勐腊县农业和科技局,云南勐腊666300【正文语种】中文【中图分类】S816.7;S828中国农业部颁布的《饲料添加剂品种目录(2013)》将凝结芽孢杆菌正式列入饲用微生态制剂,并规范应用于生长育肥猪、肉鸡和水产养殖动物[1-4]。
凝结芽孢杆菌的研究进展
凝结芽孢杆菌的研究进展凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)是一种产生血凝素的芽孢杆菌,具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化和调节免疫功能等多种生理活性。
近年来,人们对凝结芽孢杆菌的研究越来越多,尤其在其生理特性、应用领域以及产业化发展方面取得了一系列重要的进展。
首先,研究人员对凝结芽孢杆菌的生理特性进行了深入研究。
凝结芽孢杆菌具有较高的耐热性和耐酸性,能够在广泛的温度和酸碱条件下存活和繁殖。
此外,凝结芽孢杆菌还具有快速生长速度和较高的芽孢产量,为其产业化应用提供了基础。
其次,凝结芽孢杆菌在食品和饲料领域的应用得到了广泛关注。
凝结芽孢杆菌能够抑制多种致病菌的生长,对食品和饲料的保质期具有显著的延长作用。
同时,凝结芽孢杆菌还能够产生多种有益物质,如淀粉酶、蛋白酶和维生素等,有助于提高饲料的营养价值。
因此,凝结芽孢杆菌在食品和饲料添加剂中的应用前景广阔。
此外,凝结芽孢杆菌在制药和医疗领域也具有重要的应用价值。
凝结芽孢杆菌具有较高的抗菌活性,能够抑制多种致病菌的生长,特别是对耐药菌具有较好的抑制作用。
此外,凝结芽孢杆菌还能够产生抗氧化物质,对人体的保健具有较好的作用。
因此,在制药和医疗领域,凝结芽孢杆菌被广泛用于抗生素的研发和生产、生物制剂的开发以及保健品的生产等方面。
最后,凝结芽孢杆菌的产业化发展也取得了重要的进展。
大规模的凝结芽孢杆菌发酵工艺已经建立,有效地解决了菌种的扩繁和纯化等关键技术难题。
目前,已经有多家企业将凝结芽孢杆菌纳入到其产品线中,并推出了具有市场竞争力的产品。
此外,凝结芽孢杆菌的菌种资源也得到了充分的保护和利用,为其进一步的产业化应用提供了坚实的科学基础。
综上所述,凝结芽孢杆菌作为一种具有多种生理活性的菌种,在其生理特性、应用领域以及产业化发展方面取得了一系列重要的进展。
未来,随着对凝结芽孢杆菌的进一步研究和应用,相信其在食品、医药和其他领域的应用前景将更加广阔。
凝结芽孢杆菌的研究进展
凝结芽孢杆菌的研究进展01-21益生菌凝结芽孢杆菌是近年来国内外学者的研究热点。
凝结芽孢杆菌具有与乳酸杆菌、双歧杆菌一样的调节肠道内菌群平衡、促进营养物质代谢和利用、提高免疫力等保健特性,凝结芽孢杆菌形成的芽孢具有耐高温、耐酸和耐胆盐等高抗逆性特点。
凝结芽孢杆菌作为新型微生态制剂,在畜牧业、水产养殖业、医药、保健和食品行业被广泛应用。
作者在此简单概述凝结芽孢杆菌的理化性质以及在工业生产、养殖业以及临床等方面的应用进展。
1凝结芽孢杆菌的理化性质凝结芽孢杆菌为芽孢杆菌属革兰氏阳性杆菌,端生芽孢,表面无鞭毛,多数菌两端钝圆,少数菌为短链状。
凝结芽孢杆菌的最适生长pH值为6.6~7.0,最适生长温度为45~50 ℃,可以分解糖类生成L-乳酸,为同型乳酸发酵菌。
凝结芽孢杆菌具有产L-乳酸、生成芽孢、兼性厌氧、耐酸等生理生化特征,经口服进入到肠胃后,具有益生保健特性。
产L-乳酸特征,使得肠道中的双歧杆菌等利用乳酸的有益菌能更好地生长与繁殖。
生成芽孢特征,可以更好地恢复胃肠道的微生态平衡,且所产芽孢使得凝结芽孢杆菌能够耐受胃液的低pH值环境。
兼性厌氧特征,使得凝结芽孢杆菌适宜在人体消化系统尤其是肠道等低氧环境下生长。
耐酸特征,则保证了凝结芽孢杆菌有85%的概率通过胃液在肠道存活生长。
但是由于凝结芽孢杆菌没有鞭毛,导致其粘附性较弱,无法在肠道中长期存活。
凝结芽孢杆菌在肠道中还会分泌大量有益物质,如淀粉酶、蛋白酶、B族维生素、氨基酸、短链脂肪酸和凝固素等,这些物质不仅有利于肠道消化吸收还能抑制有害细菌。
特别是凝固素,在60℃、pH值4~8的条件下处理90min 仍保持生物活性,且不受淀粉酶、酯酶和有机溶剂的影响。
因此,凝结芽孢杆菌对胃肠道炎症有一定的治疗作用。
凝结芽孢杆菌还具有很强的抗逆性,在高温、高渗和酸性环境下均保持较高的存活率,能有效穿过胃液环境(强酸和消化酶),在肠道生长,并发挥益生作用。
但在酸性环境中,凝结芽孢杆菌对热耐受性下降。
丁酸梭菌和凝结芽孢杆菌对犊牛腹泻的影响
犊牛通常指6月龄以内的小牛,在此阶段犊牛的消化和免疫系统尚未发育成熟,抵抗力较差,极易发生腹泻。
犊牛腹泻不仅会引起采食量下降、消化功能障碍等症状,影响犊牛生长,甚至引起死亡,对养殖场造成巨大的经济损失。
近年来,广大民众对食品安全关注度日益增高,为杜绝药物残留,我国已经宣布促生长类抗生素2020年底全部退出使用[1],抗生素的使用受到越来越多的限制。
益生菌类产品作为绿色安全的添加剂,受到了越来越多人的关注。
有研究表明,在饲料原料中添加丁酸梭菌、凝结芽孢杆菌、乳酸菌等益生菌类添加剂可有效降低犊牛腹泻的发生率,提高生长性能[2]。
丁酸梭菌作为动物体内的有益菌群,其代谢产物作为营养物质可直接被肠壁细胞吸收利用,促进肠道发育,维护肠道健康[3]。
凝结芽孢杆菌细胞壁中含有盐藻糖,该成分可以促进肠道发育,提升机体免疫力[4]。
本文对饲料中添加丁酸梭菌和凝结芽孢杆菌对犊牛腹泻的影响进行了探究,以期能为其在犊牛养殖上的应用提供参考。
1试验材料与方法1.1试验材料试验动物:本试验挑选同一栋舍体重相近的40头健康杂交4.5月龄犊牛备用。
试验于2021年5月1日—31日在某规模化牛场进行,自由采食和饮水,自然光照,每天清理舍内粪便,按照正常免疫程序进行疫苗免疫。
试验材料:丁酸梭菌和凝结芽孢杆菌产品由广州某生物科技有限公司提供,有效菌含量≥5×109CFU/g 。
1.2试验方法试验共分为两组,采取随机抽选的方式,每组随机抽取20头健康犊牛。
第一组为对照组,饲喂基础日粮。
第二组为试验组,在饲喂基础日粮的基础上补喂丁酸梭菌和凝结芽孢杆菌产品6g/d/头;试验于2020年5月份开始,饲养周期为30d 。
试验期间对照组和试验组在同一栋舍内进行,分栏饲养,每天固定时间饲喂3次,保证干净充足的饮水,清扫和消毒工作照常进行。
1.3检测指标及数据分析试验开始当天对试验犊牛进行称重,并准确记录初始体重,试验开始后,每天对犊牛的采食量和健康状况进行检测,认真观察试验犊牛的粪便状况,记录犊牛日均采食量。
凝结芽孢杆菌药敏实验的研究
的研究■柳成东1于晓东2王乙茹1程志斌1*白华毅1钱锦花3赵平1Phouthapane Vanhnaseng 4(1.云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201;2.大连市普兰店区星台动物卫生监督所,辽宁大连116200;3.玉溪农业职业技术学院,云南玉溪653100;4.老挝科技部生物技术与生态研究所,老挝万象2279)摘要:从我国农业农村部公告《饲料药物添加剂使用规范》中选取16种添加剂药物,根据他们在饲料中的实际添加量范围,配制了“低剂量、中剂量、高剂量”3个抑菌浓度,创新采用牛津杯法对一株凝结芽孢杆菌(菌株编号:YNAU 3127)进行药敏实验,药敏性判定标准依据抑菌圈直径(diame⁃ter of inhibition zone,DIZ )执行如下:“不敏感”,DIZ=0mm ;“中敏感”,0mm<DIZ≤16mm ;“敏感”,DIZ>16mm 。
结果显示:该株凝结芽孢杆菌对金霉素、土霉素、甲基盐霉素和莫能菌素,判定为“敏感”水平。
该菌对高剂量的盐霉素判定为“敏感”,而对低、中剂量的盐霉素只达到“中敏感”水平。
此外,该株凝结芽孢杆菌对实验中的其他药物“不敏感”。
研究表明:实验创新采用的牛津杯法,能够科学、准确、便捷地评估凝结芽孢杆菌的药敏性,完善了凝结芽孢杆菌在畜禽无抗养殖领域的关键应用技术。
关键词:凝结芽孢杆菌;药物饲料添加剂;药敏实验;牛津杯法;抑菌圈直径doi:10.13302/ki.fi.2020.14.008中图分类号:S815.32文献标识码:A 文章编号:1001-991X (2020)14-0035-05A drug sensitivity test of probiotic Bacillus coagulansLiu Chengdong,Yu Xiaodong,Wang Yiru,Cheng Zhibin,Bai Huayi,Qian Jinhua,Zhao Ping,Phouthapane VanhnasengAbstract :Drug sensitivity test on a probiotic Bacillus coagulans strain was conducted in this study.Six⁃teen antibacterial or antiparasitic drug from feed additives listed in “Specification for Use of Feed Drug Additives (Ministry of Agriculture and Rural Areas of China)”were chosen and formatted three dosages (low,middle,and high dosage)per each according on the recommended addition dosage range in animal completed feeds.A novel Oxford cup method was used to evaluated the inhibitory effects of these sixteen drugs on the probiotic Bacillus coagulans YNAU 3127due to the innovative sensitivity judgment stan⁃dard on the basis of the diameter of inhibition zone (DIZ).The sensitivity judgment standard was as fol⁃lows:①"Insensitive",DIZ=0mm;②"Medium sensitivity",0mm<DIZ≤16mm;③"Sensitive",DIZ>16mm.The results showed that aureomycin,terramycin,narasin and monensin were judged "Sensitive"to Bacillus coagulans YNAU 3127.High dosage of halomycin was judged "Sensitive"to the Bacillus co⁃agulans strain,while low and medium dosages of halomycin were judged "Medium sensitive"to the B acil⁃lus coagulan strain.In addition,the others antibiotics and antiparasitic drugs chosen in this test had noinhibitory effect on the Bacillus coagulans strain and were judged "Insensitive".In conclusion,the innovative Oxford cup method and sensitivity judgment standard adopted in this test can accu⁃rately evaluate the drug sensitivity on Bacillus co⁃agulans .Moreover,this test supplemented the key application technology of probitoic Bacillus coagu⁃lans in the antibiotic free breeding of livestock.Key words :Bacillus coagulans ;drug feed addi⁃tive ;drug sensitivity test ;Oxford cup method ;di⁃ameter of inhibition zone 作者简介:柳成东,硕士,研究方向为单胃动物营养与饲料科学。
凝结芽孢杆菌培养条件
凝结芽孢杆菌
用途
•1、对胃肠道炎症有一定治疗作用。
•2、调节动物消化道的微生态平衡。
•3、促进动物机体的消化作用。
•4、改善动物机体免疫功能, 提高抗病能力。
•5、促进动物生长、降低死亡淘汰率和饲料增重比。
•6、人体保健作用包括:提高消化道对膳食纤维的有效利用率,防止脂肪分子的过度吸收(降脂作用);减少患冠心病的危险;抗便秘;预防沙门氏菌、轮状病毒、副溶血弧菌等致病微生物引起的腹泻。
种子培养基:
酵母粉3g/L,蛋白胨5g/L,牛肉膏2g/L,MnSO40.005g/L,NaCl 2g/L,K2HPO4 3g/L,MgSO4 0.02g/L。
种子培养条件:
温度40℃,初始pH值为7.0,转速210r/min,装液量为30mL(250mL的三角瓶),接种量为6%(v/v),发酵时间48h。
发酵培养基:
麸皮4 %、豆粕粉1. 5 %、NaCl 0. 5%、K2HPO4 4%、MnSO4 30.8mg/ L, pH 7. 2~ 7. 4。
发酵条件:37 ℃,培养56 h。
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《饲料添加剂凝结芽孢杆菌》
河南省地方标准编制说明
一、编制的目的和意义
我国饲料添加剂品种目录(2013)中允许使用的微生物种类有34种,其中就包括凝结芽孢杆菌。
凝结芽孢杆菌的用途作为“动物保健促长剂”使用。
适用范围肉用仔鸡和生长育肥猪,说明其安全性,有效性、经济性和对环境的影响已通过了全国饲料评审委员会评审,并得到农业部批准。
美国FDA也已认为“普遍认为安全”的杆菌类。
且该芽孢杆菌在人类及动物生产上的应用研究已成热点,且效果显著。
凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans),革兰阳性菌,兼性厌氧,属于硬(或厚)壁菌门、芽孢杆菌纲、芽孢杆菌目、芽孢杆菌科、芽孢杆菌属关于凝结芽孢杆菌的最早记录见于Hammer B.W.在1915年发表的论文,Hammer从酸败的罐头牛奶中分离出该菌,并描述为新种。
乳酸菌是益生菌的一个大类,其中以乳杆菌、双歧杆菌最为大众熟知,但是乳杆菌、双歧杆菌的抗胃酸、抗胆盐和抗高温能力差,所以在功效发挥上很受限制。
凝结芽孢杆菌也是乳酸菌的一种,其具备芽孢菌和乳酸菌的双重特性,既可以生成芽孢又可以产生大量L-乳酸。
一般乳酸菌不耐热,温度60℃几乎不能存活,而凝结芽孢杆菌可产孢因而耐热性好(75℃高温下,粪肠球
菌、嗜酸乳杆菌等乳酸菌已经不能存活,而凝结芽孢杆菌依然存活,也就是说它比一般乳酸菌抗逆性强,又比一般芽孢菌的益生特性优良,被称为传统乳酸菌的换代产品,近年来成为益生菌研究中的热点。
研究发现,凝结芽孢杆菌TBC169能够分泌抗菌凝固素,有效抑制肠道内出血性大肠杆菌、痢疾志贺菌、金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌等有害菌的繁殖,同时能促进双歧杆菌的协同增殖,从而快速调节肠道菌群平衡。
基于该功能,凝结芽孢杆菌对抗生素相关性腹泻、伪膜性肠炎等消化道细菌感染疾病都有很好疗效。
凝结芽孢杆菌细胞表明有保水功能,能够锁住肠管中的水分,使粪便保持湿润;同时,凝结芽孢杆菌代谢产生乳酸,能够促进肠胃蠕动,恢复肠动力。
凝结芽孢杆菌TBC169能分泌产生40多种酶,与糖类、蛋白质、脂类、核酸的代谢及某些特定功能相关。
另外,其可以通过减少产道有害菌、促进粪便排出等途径减少毒素累积,从而解除肠毒素对肠道的毒害作用,恢复肠道消化酶的正常分泌,促进食物在肠道内的分解。
研究发现,凝结芽孢杆菌对右旋葡聚糖硫酸钠诱发的大鼠实验性溃疡性结肠炎,能显著地缩小溃疡面积,降低髓过氧化物酶活性,有明显的抗炎治疗作用。
因此,对慢性肠炎等肠道炎症性
疾病都有很好的作用。
据国外报道,将少量凝结芽孢杆菌添加于鸡饲料中或观赏动物饲料中,可以提高鸡或观赏动物的抗病能力,防止感染鸡瘟病和其他微生物引起的疾病,提高成活率。
此外,美国等国家所做的实验证实,凝结芽孢杆菌可使鸡肉、鸡蛋、牛奶中沙门氏菌等有害微生物的菌落个数大大下降,从而提高了肉、蛋、奶等食品的食用安全级别。
牛和猪等大牲畜经常喂食以含有凝结芽孢杆菌的饲料,不仅能提高纤维素类饲料的利用转化率,而且同样能防止大牲畜患病,提高肉、奶品质,并缩短出栏时间。
鉴于此,凝结芽孢杆菌的益生特性已得到业内人士的广泛认可。
目前国家及地方上还没有关于《饲料添加剂凝结芽孢杆菌》方面的标准,不适于当前农业标准化生产管理高效发展的需要。
为规范饲料添加剂的生产、销售和管理,保证产品质量,推进产品标准化管理,维护生产企业的合法权益,同时也是为了便于广大客户和相关部门对我们的产品进行监督,保护消费者利益,特制定本企业标准。
为了进一步认真贯彻执行《中华人民共和国标准化法》、《中华人民共和国产品质量法》、《饲料和饲料添加剂管理条例》和《饲料和饲料添加剂安全使用规范》,确保本企业产品的质量,维护消费者利益,使我公司产品在市场上具有较强的竞争力,必须加
强标准化工作,严格按标准的要求组织生产,特制定本企业标准。
二、任务来源及编制原则和依据
1、任务来源
《饲料添加剂凝结芽孢杆菌》由河南省兽药饲料监察所、河南省乘风动物保健技术研究所、河南智盛优品生物科技有限公司提出立项申请,根据河南省质量技术监督局印发的《河南省质量技术监督局关于下达2018年第二批河南省地方标准制修订计划的通知》(豫质监标发﹝2018﹞335),立项编号20182210062,由河南省兽药饲料监察所编写,河南省乘风动物保健技术研究所、洛阳希望生物科技有限公司、河南智盛优品生物科技有限公司参加起草。
2、编制原则和依据
饲料添加剂是畜牧业发展的物质基础,可以从源头上为畜产品质量和食物安全提供重要保障,对畜牧业可持续发展至关重要。
本标准编制遵循“科学、适度、可行”原则,既考虑前瞻性又顾及可行性,以实现凝结芽孢杆菌优质、安全和高效的目标,同时,充分听取各方的意见,确保标准可以作为指导生产的依据,能够获得高质量的苜蓿青贮料,与国际市场接轨。
本标准根据GB/T 1.1-2009《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写》进行起草。
同时根据科研单位研究数据、调研资料和企业推广应用情况,确定标准的指标设置和各项指标要
求,更加保障了标准的科学性、实用性和适用性。
三、编制过程
1、前期工作
本标准的起草由河南省兽药饲料监察所、河南省乘风动物保健技术研究所、洛阳希望生物科技有限公司近三年来等多方面调研,参与省、内外多家生产企业的标准起草、产品在实际生产过程中的实际应用,在日常工作中有意识地熟悉并能够准确掌握全省凝结芽孢杆菌的生产情况,注重收集总结相关生产数据。
为做好饲料添加剂凝结芽孢杆菌标准编制工作,组织召开了专家研讨会,收集了国内外饲料添加剂凝结芽孢杆菌的相关资料,做了大量生产调研工作。
2、成立标准起草工作小组
标准任务下达以后,为统筹部署安排标准的编制工作,成立了以郭芙蓉、杨灵杰等为主要负责人组成的标准起草工作小组,确定了总的工作方案,制定了起草计划。
工作小组在前期研究工作的基础上,对我省饲料添加剂凝结芽孢杆菌相关问题进行了系统总结和梳理,并查阅了大量的国内外文献资料,确定了标准基本框架和思路。
四、主要内容的确定
本标准的制订主要依据国家有关法律、法规及河南省地方标准管理办法、相关文献、科研数据、生产实践及经验。
1范围
本标准规定了凝结芽孢杆菌的质量标准及质量分级判定规则。
本标准适用于凝结芽孢杆菌为菌种经发酵、压滤、干燥制成的饲料添加剂凝结芽孢杆菌产品。
2规范性引用文件
给出规程中所引用的各种标准,并对所引标准的时效性做出规定。
五、与国家法律法规和强制性标准的关系
本标准严格遵守国家有关法律法规要求,符合《河南省标准化管理办法》、《饲料标签》GB 10648、《饲料卫生标准》GB 13078的规定,与国家现有产业政策和强制性标准不冲突。
六、标准实施的建议
1、本标准可以在河南省范围内推广应用;
2、建议《饲料添加剂凝结芽孢杆菌》标准通过审定后尽快发布实施,提高我省凝结芽孢杆菌生产水平和质量。
3、建议在实施《饲料添加剂凝结芽孢杆菌》过程中,对所发现的问题及时反馈,以利于规程的修订和完善。
《饲料添加剂凝结芽孢杆菌》标准起草小组
二〇一八年十二月。