常用光学显微镜

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常用光学显微镜
❖一、普通生物显微镜 ❖二、荧光显微镜 ❖三、暗视野显微镜 ❖四、倒置显微镜 ❖五、相衬显微镜 ❖六、偏光显微镜
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一、普通生物显微镜
普通生物显微镜具有不同规格的物镜、目镜、 聚光镜和光源等光学构件，它们通过镜筒、物镜转 换器、载物台、调焦装置和镜座等连接、固定和调 节，放大物体，观察物体的细微结构。根据目镜结 构的不同，有单目和双目之分。
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六、偏光显微镜
偏光显微镜是利用光的偏掁特性，对具有双折 射性（即可以使一束入射光经折射后分成两束折射 光）的晶体、液晶态物质进行观察和研究的光学仪 器。偏光显微镜可以观察到纤维丝、纺锤体、染色体、 活细胞的结晶或液晶态的内含物等的细微结构，可以 分析细胞、组织的变化过程。例如，正常细胞对偏振 光是左旋性的，许多肿瘤细胞却是右旋性的，通过偏 光显微镜观察标本的旋光性可以初步鉴别正常细胞与 肿瘤细胞。偏光显微镜更为广泛用于药物化学、无机 化学中各种结晶物质分析。
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偏光显微镜原理及结构
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相衬显微镜就是利用光的衍射和干涉现象，把 相位差变为振幅差，观察无色、透明、活细胞中的 微细结构。
相衬显微镜和普通显微镜的区别是用环状光阑
代替可变光阑，用带相位板的物镜代替普通物镜，
从而把看不到的相位差变为可观察的明暗（振幅差）
变化。
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相衬显微镜原理
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六、偏光显微镜
光是一种电磁波，电磁波是横波。 通常光源所发光的 振动面在各个方向上均匀分布的。这种光叫做自然光。光的 偏振现象可以借助于实验装置进行观察，P1、P2是两块同样 的偏振片。通过一片偏振片p1直接观察自然光（如灯光或阳 光），透过偏振片的光虽然变成了偏振光，但由于人的眼睛 没有辨别偏振光的能力，无法察觉。如果我们把偏振片P1的 方位固定，而把偏振片P2缓慢地转动，就可发现透射光的强 度随着P2转动而出现周期性的变化，而且每转过90°就会重 复出现发光强度从最大逐渐减弱到最暗；继续转动P2则光强 又从接近于零逐渐增强到最大。
标本
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激发光源 （汞灯）
照明光源
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三、暗视野显微镜
暗视野显微镜的聚光镜中央有档光片，使照明光线不直 接进入物镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜，因 而视野的背景是黑的，物体的边缘是亮的。利用这种显微镜 能观察到线距离小于0.1μm的微粒（普通光镜的分辨极限是 0.2μm ）。
暗视野显微镜观察到的物像只是物体的轮廓，不能分辨 细微结构。
目前检验工作中普遍使用双目显微镜，它有两 个目镜，可用双眼同时观察。使用双目显微镜时应 调整目镜间距以适应观察者瞳距，在重合视野中观 察物像。
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一、普通生物显微镜
单
双
目
目
显
显
微
微
镜
镜
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二、荧光显微镜
荧光显微镜是以紫外光或蓝紫光作为激发光 源来照射待检标本，通过荧光物质，放大观察细 微结构。
激发光源照射标本，滤色系统和光学系统形 成标本的荧光放大物像，在暗场下直接观察或摄 像观察。荧光显微镜可观察固定的标本，也可观 察活体荧光染色的标本。
使用要点：规范操作；观察的对象应有荧光； 光路中不能含有荧光杂质；正确使用激发汞灯； 观察者做好眼睛防护。
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落射式荧光显微镜
激发光选择滤片 阻断滤片 分色镜
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暗视野显微镜
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暗 视 野 显 微 镜 照 明 方 式
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四、倒置显微镜
目镜
设计倒置显微镜的目的是为了增加工作距离， 观察处于培养瓶或培养皿中的活体标本聚。光镜倒置显 微镜的物镜与照明系统颠倒，物镜在载物台之下， 照明系统在载物台之上。
物镜
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五、相衬显微镜
人眼通过颜色差异感知可见光波长变化，明暗 不同感知可见光波的振幅变化。但光波的相位变化 不能被肉眼观察到。光波通过透明的细胞时，虽然 细胞细微结构的折射率和厚度不同，但这种不同仅 使光波的相位发生变化，人眼无法观察。