三细菌的分布与消毒灭菌.ppt
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细菌的分布与消毒灭菌
用途
主要用于不耐高温无菌的血清、毒素、抗生素、药液，以及空气的除菌 。
特点
仅能除去细菌，不能去除病毒、支原体、衣原体和有些L型细菌等。
促进菌体蛋白质变性或凝固，如酚类（高浓度）、醇类、重金属盐类（高浓度）等；
干扰细菌的酶系统和代谢，破坏蛋白与核酸的基团，如某些氧化剂、重金属盐类（低浓度） ；
损伤细菌的细胞膜，如酚类（低浓度）、表面活性剂、脂溶剂等。
巴氏消毒法：杀灭液体中的病原菌或特定微生物，不耐热成分不被破坏。61.1~62.8℃30min或71.1℃15~30s，一般用于酒类、牛乳等的消毒。
对牛乳或其他液态食品（如果汁及果汁饮料、豆乳、茶、酒及矿泉水等）
1
最大优点是既能杀死产品中的微生物，又能较好地保持食品品质与营养价值。
2
超高温杀菌 ：135～150℃和 2～8s
菌群失调症:由于菌群失调而出现临床症状.
二重感染:因菌群失调症往往是在抗菌药物治疗原有感染性疾病过程中产生的另一种新感染.
菌群失调:由于某种原因使正常菌群的种类.数量和比例发生较大幅度的改变,导致微生太失去平衡.
第二节 消毒与灭菌
无菌操作：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。
机制
(二)、化学消毒灭菌法
常用的化学消毒剂及防腐剂对人体组织 都有危害，所以只限于外用或环境消毒。
局限于：
表3-2 常用消毒剂
种类
使用浓度
用途
石炭酸
3-5%
地面、器具表面、皮肤消毒
乙醇
70-75%
皮肤、体温计消毒
高锰酸钾
0.1%
皮肤、尿道消毒
红汞
2%
皮肤、粘膜、小创伤消毒
硫柳汞
0.1%
灭菌_培训课件
第六页，共三十七页。
正常菌群(normal flora):
正常人的体表和同外界相通的口腔、 鼻咽腔、肠道、泌尿生殖道等腔道中都 寄居着不同种类和数量的微生物。当 人体免疫功能正常时，这些微生物对宿 主无害，有些对人还有利，是为正常微
生物群，通称正常菌群
第七页，共三十七页。
正常菌群对人体的有利作用
生物生长繁殖的方法
第十八页，共三十七页。
(三) 方法— 物理灭菌方法
１. 热
湿
煮沸法
力 灭 菌
热
流通蒸气法
灭 菌
高压蒸气灭菌法
法
间歇灭菌法
巴氏消毒法
干
热 灭 菌
焚烧和烧灼 干烤法
法
第十九页，共三十七页。
(三) 方法— 物理灭菌方法
① 煮沸消毒法：煮沸100℃经5－10 min。主要用于一般外科手术器械、胶管 和注射器等的消毒。
所有外科工作人员都应自觉地遵守这个法则： 一切与伤口或体内组织器官接触的物品必须是无 菌的。
②为防止疾病的传播，对传染病患者的排泄物 和实验废弃的培养物亦须进行灭菌或消毒处理。
第十六页，共三十七页。
（二） 消毒与灭菌的概念
1、灭菌(disinfection) ：杀死物体上所有 微生物的方法，包括病原微生物和非病原 微生物、细菌的繁殖体和芽胞。
(3) 改变细 菌细胞壁或 细胞膜的通 透性，如新 洁尔灭、肥 皂等
第二十九页，共三十七页。
2. 常用消毒剂的种类和用途
名称 石炭酸 来苏儿
乙醇
常用浓度
3%~5% 2％
70%~75%
用
途
器皿、排泄物消毒
皮肤消毒
皮肤、体温表消毒
升 汞 0.05~0.1% 非金属器皿浸泡
正常菌群(normal flora):
正常人的体表和同外界相通的口腔、 鼻咽腔、肠道、泌尿生殖道等腔道中都 寄居着不同种类和数量的微生物。当 人体免疫功能正常时，这些微生物对宿 主无害，有些对人还有利，是为正常微
生物群，通称正常菌群
第七页，共三十七页。
正常菌群对人体的有利作用
生物生长繁殖的方法
第十八页，共三十七页。
(三) 方法— 物理灭菌方法
１. 热
湿
煮沸法
力 灭 菌
热
流通蒸气法
灭 菌
高压蒸气灭菌法
法
间歇灭菌法
巴氏消毒法
干
热 灭 菌
焚烧和烧灼 干烤法
法
第十九页，共三十七页。
(三) 方法— 物理灭菌方法
① 煮沸消毒法：煮沸100℃经5－10 min。主要用于一般外科手术器械、胶管 和注射器等的消毒。
所有外科工作人员都应自觉地遵守这个法则： 一切与伤口或体内组织器官接触的物品必须是无 菌的。
②为防止疾病的传播，对传染病患者的排泄物 和实验废弃的培养物亦须进行灭菌或消毒处理。
第十六页，共三十七页。
（二） 消毒与灭菌的概念
1、灭菌(disinfection) ：杀死物体上所有 微生物的方法，包括病原微生物和非病原 微生物、细菌的繁殖体和芽胞。
(3) 改变细 菌细胞壁或 细胞膜的通 透性，如新 洁尔灭、肥 皂等
第二十九页，共三十七页。
2. 常用消毒剂的种类和用途
名称 石炭酸 来苏儿
乙醇
常用浓度
3%~5% 2％
70%~75%
用
途
器皿、排泄物消毒
皮肤消毒
皮肤、体温表消毒
升 汞 0.05~0.1% 非金属器皿浸泡
细菌的分布与消毒灭菌 细菌的分布(病原生物学与免疫学课件)
（二） 细菌在正常人体的分布
02
生理意义
(1)生物拮抗作用 (2)免疫作用 (3)营养作用 (4)抗肿瘤作用 （5延缓衰老
（二） 细菌在正常人体的分布
03
正常菌群的病理作用
特定的条件下，原来在 正常情况下不致病的正常菌 群也能引起疾病，成为条件 致病菌．
主要原因
1）寄居部位发生改变 2）机体免疫力降低 3）菌群失调
细菌的分布
2.熟悉
正常菌群的的分布。
1.掌握
正常菌群、条件致病菌、菌群失调 的概念、正常菌群的生理意义。
3.了解
细菌在自然界 的分布、病原 生物危害程度 分级。
情景导入
临床上，外科手术、换药、 注射等医疗技术操作要求 严格执行消毒与灭菌制度， 遵循无菌原则。什么是无 菌？消毒与灭菌有何区别？ 有哪些方法？
（三）病原微生物危害程度分级
第一类
能够引起人类或者动物 非常严重疾病的微生物， 以及我国尚未发现或者已 经宣布消灭的微生物。
第三类
能够引起人类或者动物疾 病，但一般情况下对人、动物 或者环境不构成严重危害，传 播风险有限，实验室感染后很 少引起严重疾病，并且具备有 效治疗和预防措施的微生物。
第二类
水源被污染可引起多种 消化道传染病。
（一）细菌在自然界中的分布
03 细菌在空气中的分布
• 常见的病原菌有脑膜炎奈瑟菌、结核分 枝杆菌、溶血性链球菌、白喉棒状杆菌 、百日咳鲍特菌等
• 可引起伤口或呼吸道的感染。 • 培养基、生物制品、医药制剂以及手术
室等污染主要来源。
（二） 细菌在正常人体的分布
01
（一）细菌在自然界中的分布
01 细菌在土壤中的分布
土壤中微生物种类繁多，数 量庞大。土壤中的厌氧芽胞梭 菌如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆 菌、产气荚膜梭菌等。
实验三 细菌的分布消毒和灭菌ppt实用资料
1%石炭酸 点状生长、单个菌落（O） 取普通琼脂平板一个，打开盖暴露于空气中约15-30分钟，然后盖好，放37℃温箱孵育24小时后观察结果，计算有多少个菌落。 掌握常用的消毒和灭菌方法 丙组：不作任何加热处理 菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌 掌握常用的消毒和灭菌方法 化学消毒剂对细菌的影响 甲组：煮沸（100℃，5min） 菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌
掌握常用的消毒和灭菌方法
菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌
化学消毒对细菌的影响
乙组：高压灭菌法（121 ℃，20min）
化学消毒剂对细菌的影响
紫外线灭菌(8人一组)
掌握常用的消毒和灭菌方法
抑菌圈
鞭毛变异
变形杆菌
迁徙生长（H）
0.1%石炭酸 点状生长、单个菌落（O）
接种大 肠杆菌
班级、姓名/学号、 大肠 枯草
uv30’
培养箱
接种枯 草杆菌
抗生素的抗菌试验
• 4人一组 • 菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌
菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌
大肠杆菌1号、2号 丙组：不作任何加热处理
故紫外线常用于手术室、无菌室的空气消毒及物体表面消毒
• 密集划线 化学消毒剂对细菌的影响
• 观察细菌鞭毛的变异 • 熟悉生物因素对细菌的作用
空气中细菌的检查
• 取普通琼脂平板一个，打开盖暴露于 空气中约15-30分钟，然后盖好，放 37℃温箱孵育24小时后观察结果，计 算有多少个菌落。
手指细菌的检查
• 用手指直接涂于普通琼指平板上，放37℃ 温箱孵育，24小时后观察结果，记录有多 少种不同特征的菌落。
煮沸与高压灭菌法
• 2人一组 • 菌液：大肠杆菌/枯草杆菌 • 甲组：煮沸（100℃，5min） • 乙组：高压灭菌法（121 ℃，20min） • 丙组：不作任何加热处理
掌握常用的消毒和灭菌方法
菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌
化学消毒对细菌的影响
乙组：高压灭菌法（121 ℃，20min）
化学消毒剂对细菌的影响
紫外线灭菌(8人一组)
掌握常用的消毒和灭菌方法
抑菌圈
鞭毛变异
变形杆菌
迁徙生长（H）
0.1%石炭酸 点状生长、单个菌落（O）
接种大 肠杆菌
班级、姓名/学号、 大肠 枯草
uv30’
培养箱
接种枯 草杆菌
抗生素的抗菌试验
• 4人一组 • 菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌
菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌
大肠杆菌1号、2号 丙组：不作任何加热处理
故紫外线常用于手术室、无菌室的空气消毒及物体表面消毒
• 密集划线 化学消毒剂对细菌的影响
• 观察细菌鞭毛的变异 • 熟悉生物因素对细菌的作用
空气中细菌的检查
• 取普通琼脂平板一个，打开盖暴露于 空气中约15-30分钟，然后盖好，放 37℃温箱孵育24小时后观察结果，计 算有多少个菌落。
手指细菌的检查
• 用手指直接涂于普通琼指平板上，放37℃ 温箱孵育，24小时后观察结果，记录有多 少种不同特征的菌落。
煮沸与高压灭菌法
• 2人一组 • 菌液：大肠杆菌/枯草杆菌 • 甲组：煮沸（100℃，5min） • 乙组：高压灭菌法（121 ℃，20min） • 丙组：不作任何加热处理
14-细菌的分布与消毒灭菌
4.需消毒的物品应洗刷干净放入消毒剂内浸 泡；
5.挥发性消毒液应存放有盖容器内。
（三）生物学方法
抗生素 噬菌体
思考题
解释：正常菌群、条件致病菌、菌群失调 菌群失调症、消毒、灭菌、无菌？
常用的湿热消毒灭菌方法有哪几种及主要 用途？
紫外线杀菌的原理及用途？ 化学消毒灭菌剂使用注意事项?
（三）空气中的细菌 真菌孢子、结核杆菌、白喉杆菌、脑膜炎
球菌、金葡菌、链球菌等
二.细菌在人体的分布 正常菌群： 存在于正常人体，在人体免疫功能正常时
对人体无害的微生物。
正常成人机体由1013细胞组成，人体携带的细菌 相当于人体细胞的10倍即，达1014。
眼结膜
白色葡萄球菌、干燥杆菌
人 体 内 正 常 菌 群 的 分 布
紫外线：波长200~300nm有杀菌作用。 265~266nm杀菌作用最强。机制：破坏细 菌的DNA结构致细菌死亡
过滤除菌：只能除掉大的细菌，病毒、支 原体等小的微生物不能除掉。常用于不耐 热的血清，抗毒素，生物药品等的除菌。
干燥与低温抑菌法： 低温可使细菌的新陈代谢减慢，故常用于
保存菌种。如冷冻真空干燥法是目前最好 的保存菌种的方法。
阴道
大肠杆菌、乳杆菌 白念珠菌、类白喉杆菌
非致病性分枝等
外耳道
葡萄球菌、类白喉杆菌 绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌
鼻咽腔
葡萄球菌、甲，丙型链球菌 肺炎球菌、奈氏菌、类杆菌等
表皮葡萄球菌 口腔
甲，丙型链球菌 类白喉杆菌、肺炎球菌 奈氏菌、乳杆菌、梭杆菌 螺旋体、放线菌、白念珠菌
皮肽
葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌 丙酸杆菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
一.概念：消毒、灭菌、无菌、防腐
5.挥发性消毒液应存放有盖容器内。
（三）生物学方法
抗生素 噬菌体
思考题
解释：正常菌群、条件致病菌、菌群失调 菌群失调症、消毒、灭菌、无菌？
常用的湿热消毒灭菌方法有哪几种及主要 用途？
紫外线杀菌的原理及用途？ 化学消毒灭菌剂使用注意事项?
（三）空气中的细菌 真菌孢子、结核杆菌、白喉杆菌、脑膜炎
球菌、金葡菌、链球菌等
二.细菌在人体的分布 正常菌群： 存在于正常人体，在人体免疫功能正常时
对人体无害的微生物。
正常成人机体由1013细胞组成，人体携带的细菌 相当于人体细胞的10倍即，达1014。
眼结膜
白色葡萄球菌、干燥杆菌
人 体 内 正 常 菌 群 的 分 布
紫外线：波长200~300nm有杀菌作用。 265~266nm杀菌作用最强。机制：破坏细 菌的DNA结构致细菌死亡
过滤除菌：只能除掉大的细菌，病毒、支 原体等小的微生物不能除掉。常用于不耐 热的血清，抗毒素，生物药品等的除菌。
干燥与低温抑菌法： 低温可使细菌的新陈代谢减慢，故常用于
保存菌种。如冷冻真空干燥法是目前最好 的保存菌种的方法。
阴道
大肠杆菌、乳杆菌 白念珠菌、类白喉杆菌
非致病性分枝等
外耳道
葡萄球菌、类白喉杆菌 绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌
鼻咽腔
葡萄球菌、甲，丙型链球菌 肺炎球菌、奈氏菌、类杆菌等
表皮葡萄球菌 口腔
甲，丙型链球菌 类白喉杆菌、肺炎球菌 奈氏菌、乳杆菌、梭杆菌 螺旋体、放线菌、白念珠菌
皮肽
葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌 丙酸杆菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
一.概念：消毒、灭菌、无菌、防腐
细菌的分布与消毒灭菌优秀课件
细菌的分布与消毒灭菌优 秀课件
第一节 细菌的分布
• 土壤:多为非病原菌,能形成芽胞的可存活数年。 • 水：来自土壤和动物排泄物，易引起消化系统
传染病。 • 空气：唾液、飞沫传染。人口密集的公共场所
或医院细菌种类和数量多，注意消毒。 • 无生命物体的表面和与外界相通的腔道中 • 正常人体：有生命物体的表面和与外界相通的
• 电离辐射
高速电子、X射线、γ射线
• 微波 波长1mm~1m
（三）滤过除菌法
• 滤过除菌法：用物理阻留的方 法将液体或空气中的细菌去除 以达到无菌的目的。主要用于 不耐高温的血清、抗毒素、抗 生素、药液等的除菌。
• 滤菌器：效能与滤孔大小、滤 器电荷有关
二 化学消毒灭菌法
➢消毒剂的种类：酚类、醇类、重金属盐类、
操作技术。
一 物理消毒灭菌法
➢热力灭菌法 ➢辐射杀菌法 ➢滤过除菌法
㈠物理消毒灭菌法
• 1、热力灭菌法
巴氏消毒法 湿热灭菌法煮沸法
流通蒸汽法(间歇灭菌法) 高压蒸汽灭菌法 121℃,103.4kPa,15-30分钟
焚烧 干热灭菌法 烧灼
干烤（160~170℃/2h）
同一温度下,湿热比干热效果好
巴氏消毒法:用较低温度杀灭液 体中的病原菌或特定微生物， 而仍保持物品中所需的不耐热 成分不被破坏的消毒方法。
正常菌群与条件致病菌
❖ 正常菌群：正常人体的体表以及与外界相通的腔 道黏膜上广泛存在着不同种类和一定数量的细菌。 这些细菌通常对人体是无害的，称为正常菌群。
❖ 正常菌群的生理学意义： 生物拮抗作用 营养作用 免疫作用 抗衰老作用
表皮葡萄球菌
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ件致病菌
▪ 寄居在人体一定部位的正常菌群相对稳定，但在特定
第一节 细菌的分布
• 土壤:多为非病原菌,能形成芽胞的可存活数年。 • 水：来自土壤和动物排泄物，易引起消化系统
传染病。 • 空气：唾液、飞沫传染。人口密集的公共场所
或医院细菌种类和数量多，注意消毒。 • 无生命物体的表面和与外界相通的腔道中 • 正常人体：有生命物体的表面和与外界相通的
• 电离辐射
高速电子、X射线、γ射线
• 微波 波长1mm~1m
（三）滤过除菌法
• 滤过除菌法：用物理阻留的方 法将液体或空气中的细菌去除 以达到无菌的目的。主要用于 不耐高温的血清、抗毒素、抗 生素、药液等的除菌。
• 滤菌器：效能与滤孔大小、滤 器电荷有关
二 化学消毒灭菌法
➢消毒剂的种类：酚类、醇类、重金属盐类、
操作技术。
一 物理消毒灭菌法
➢热力灭菌法 ➢辐射杀菌法 ➢滤过除菌法
㈠物理消毒灭菌法
• 1、热力灭菌法
巴氏消毒法 湿热灭菌法煮沸法
流通蒸汽法(间歇灭菌法) 高压蒸汽灭菌法 121℃,103.4kPa,15-30分钟
焚烧 干热灭菌法 烧灼
干烤（160~170℃/2h）
同一温度下,湿热比干热效果好
巴氏消毒法:用较低温度杀灭液 体中的病原菌或特定微生物， 而仍保持物品中所需的不耐热 成分不被破坏的消毒方法。
正常菌群与条件致病菌
❖ 正常菌群：正常人体的体表以及与外界相通的腔 道黏膜上广泛存在着不同种类和一定数量的细菌。 这些细菌通常对人体是无害的，称为正常菌群。
❖ 正常菌群的生理学意义： 生物拮抗作用 营养作用 免疫作用 抗衰老作用
表皮葡萄球菌
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ件致病菌
▪ 寄居在人体一定部位的正常菌群相对稳定，但在特定
细菌的分布与消毒灭菌(共10张PPT)
为菌群失调症。由于这些疾病往往是在抗菌药物治疗原
有感染疾病过程中产生的另一种新感染，所以，临床又
称二重感染。
二、消毒灭菌
• 1.消毒：杀死物体上病原微生物的方法，并不一定 能杀死含芽孢的细菌或非病原微生物。 2.灭菌： 杀死物体上所有微生物（包括细菌的芽孢） 的方法。 3.防腐：抑制体外细菌生长繁殖的方法。 4.无菌： 不存在任何活的微生物。 5.无菌操作： 防止细菌进入人体或其他物品的操作 技术。
• (一)、细菌在自然界的分布
• 1.土壤中的细菌 • 2.水中的细菌 • 3.空气中的细菌
（二）细菌在正常人体的分布
•
1.细菌在正常人体的分布概况
•
2.人体正常菌群及意义
（1）正常菌群的概念：正常人体的体表及与外界相通 的口腔、鼻咽腔、肠道及泌尿生殖道等腔道中，都存在 着不同种类和数量的微生物。在情况下，这些微生物对 人体无害，是人体的正常微生物群，称为正常菌群。
③干烤：干烤箱，加热至160~170℃，2 h。适用于
高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品。
• 2.电磁波辐射杀菌法
• (1) 日光与紫外线
（2）电离辐射
• 3．滤过除菌法
（二）化学消毒灭菌法
消毒剂能影响细菌的化学组成、结构和生理活动 从而发挥防腐、消毒甚至灭菌的作用。主要用于人体 体表、医疗器械和周围环境的消毒。影响消毒剂作用 的因素有：
菌群当寄居部位入发生改变或免疫功能低下时可引起疾
病，这些细菌称为条件致病菌。
•
消毒和灭菌的方法主要有热力灭菌法、电磁波辐射
杀菌法、滤过除菌及化学消毒剂的使用，常用的有高压
蒸汽灭菌法、煮沸法、紫外线照射和化学消毒剂的使用
等。
解释消毒、灭菌、防腐、无菌及无菌操作的概念
有感染疾病过程中产生的另一种新感染，所以，临床又
称二重感染。
二、消毒灭菌
• 1.消毒：杀死物体上病原微生物的方法，并不一定 能杀死含芽孢的细菌或非病原微生物。 2.灭菌： 杀死物体上所有微生物（包括细菌的芽孢） 的方法。 3.防腐：抑制体外细菌生长繁殖的方法。 4.无菌： 不存在任何活的微生物。 5.无菌操作： 防止细菌进入人体或其他物品的操作 技术。
• (一)、细菌在自然界的分布
• 1.土壤中的细菌 • 2.水中的细菌 • 3.空气中的细菌
（二）细菌在正常人体的分布
•
1.细菌在正常人体的分布概况
•
2.人体正常菌群及意义
（1）正常菌群的概念：正常人体的体表及与外界相通 的口腔、鼻咽腔、肠道及泌尿生殖道等腔道中，都存在 着不同种类和数量的微生物。在情况下，这些微生物对 人体无害，是人体的正常微生物群，称为正常菌群。
③干烤：干烤箱，加热至160~170℃，2 h。适用于
高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品。
• 2.电磁波辐射杀菌法
• (1) 日光与紫外线
（2）电离辐射
• 3．滤过除菌法
（二）化学消毒灭菌法
消毒剂能影响细菌的化学组成、结构和生理活动 从而发挥防腐、消毒甚至灭菌的作用。主要用于人体 体表、医疗器械和周围环境的消毒。影响消毒剂作用 的因素有：
菌群当寄居部位入发生改变或免疫功能低下时可引起疾
病，这些细菌称为条件致病菌。
•
消毒和灭菌的方法主要有热力灭菌法、电磁波辐射
杀菌法、滤过除菌及化学消毒剂的使用，常用的有高压
蒸汽灭菌法、煮沸法、紫外线照射和化学消毒剂的使用
等。
解释消毒、灭菌、防腐、无菌及无菌操作的概念
细菌的分布与及消毒灭菌
大肠埃希菌*
乳酸杆菌 大肠埃希菌* B群链球菌
表皮葡萄球菌 粪链球菌 甲型和丙型链球菌 类白喉杆菌 消化链球菌 耻垢分枝杆菌 解脲脲原体
消化链球菌 产黑色素普氏菌 阴道加德纳菌 甲型和丙型链球菌 脆弱类杆菌 类白喉杆菌 解脲脲原体 白假丝酵母菌
Medical microbiology
02
物理消毒灭菌法 化学消毒灭菌法 影响消毒灭菌效果的因素
巴 氏 消 毒 法：61.1-62.8℃ 30 min or 71.7℃ 15-30sec 煮 沸 消 毒 法：100℃ 5min - 10min 流通蒸汽消毒法：100℃ 15min - 30min 间歇蒸汽灭菌法：100℃ 15min - 30min 37℃过夜（3次） 高压蒸汽灭菌法：103.4kPa（121.3℃）15min - 20min
粘膜：1%硝酸银、3%过氧化氢、0.1%高锰酸钾等 皮肤：2%碘酊、70%酒精、2%红汞、2%碘伏 手： 2%来苏儿、2%碘酊、70%酒精、84消毒液 饮水: 氯气、漂白粉 空气: 甲醛熏蒸、紫外线 病人的排泄物：等量的20%漂白粉、5%石炭酸或2% 来苏儿 环境：病人居住的房间、地面、墙壁（过氧乙酸喷洒） 厕所（生石灰）
Medical microbiology
2 消毒与灭菌
物理学方法
热
辐
滤
力
射
过
灭
杀
除
菌
菌
菌
法
法
法
超
低
声
温
波
干
燥
杀
抑
菌
菌
法
法
常用消毒灭菌的方法
化学方法
熏
浸
喷
擦
中护微生物实验3细菌分布检查与消毒灭菌实验
4.常用消毒灭菌器及除菌滤器介绍
高压蒸汽灭菌器 干烤箱（干热灭菌器） 滤器
三、药物敏感实验（纸片法）
方法：
1. 取琼脂平板一个用记号笔在平板底部标记贴抗生素纸片的位置。 2. 点燃酒精灯。用棉签蘸取菌液，在琼脂平板上密集而均匀地涂布。 3. 待培养基稍干后，无菌操作用镊子分别取抗生素纸片按标记位置贴
因此可逐渐扩散到周围的培养基中其浓度将随与纸片距离的增加而逐渐降低从而形成了以纸片为中心药物浓度逐渐减小的浓度剃度
中护微生物实验3细菌分布检查与消 毒灭菌实验
实验目的
1.学会不同部位细菌的检查方法。 2.掌握常用的消毒灭菌方法及其仪器的使用。 3.了解药敏实验的结果及意义。
实验内容与方法
2.咽喉部细菌的检查
(1)咽喉拭子法：
材料：血平皿、咽拭子 方法：
1. 用干净棉签咽部取材； 2. 将取得样本以分区划线形式接种在血平皿上； 3. 37℃ 温箱内孵育24小时后观察结果。
(2)咳碟法
• 取血平板一个，将盖打开，置于距口腔10厘 米处，用力咳嗽数次，然后盖好，置37度温 箱培养18-24小时观察结果。
3.紫外线杀菌实验
材料：琼脂平板、细菌培养物、灭菌长方形纸片 方法： 取普通琼脂平板一个，密集画线接种大肠埃希菌。 用无菌镊子把灭菌长方形纸片贴于平板表面中央。 打开平皿盖的2/3，置于紫外灯下距离约20-30厘米
处照射30分钟， 除去纸片，盖好平皿盖，置37度温箱培养24小时观察
结果。 原理：损伤DNA，阻止DNA的复制
3. 37℃ 温箱内孵育24小时后观察结果。 意义：为临床针对性合理用药提供依据
药敏试验
抑菌圈消消毒 Nhomakorabea毒
前
后
细菌的分布、消毒灭菌
伴生 commensalism 互生 mutualism 寄生 parasitism 2. 佶抗 antagonism
(二) 机会致病菌和医源性感染
(opportunist and nosocomial infection)
机会致病菌：opportunist
医源性感染：nosocomial infection
正常菌群(normal flora) Colonization: 人的皮肤表面： 1012 ， 口腔： 1010 ， 胃肠道：1014
口腔正常菌群的形成： 1. 出生时无菌，随着母亲的第一次喂食，细菌
开始定居; 2. 在出牙之前（6-9月），Streptococcus salivarius
为优势菌，占98%； 3. 随着出牙， S. mutans 和 S. Sanguis（血）
开始定居，厌养菌定居于牙垠与牙根的空隙 中，口腔菌群趋于复杂。 4. 到青春期，类杆菌及螺旋体开始定居
口腔正常菌群的作用： 1． 占领口腔，使其它微生物不能定居 2． 合成营养物质 3． 刺激交叉抗病原体免疫 4． 产生细菌素、脂肪酸、过氧化物
佶抗细菌
正常菌群与宿主的生态关系
(Ecologic relationship) 1. 共生 synbiosis
病源与非病源的微生物及芽胞。 灭菌后的物品为无菌(asepsis)状态。
防腐(antisepsis)─ 用物理或化学的方法防止和抑制
微生物 的生长繁殖, 称为防腐或抑菌。
消毒剂与防腐剂的区别在于tics： microbicidal 但必须对皮肤及黏膜无害 Preservatives： static agents 通常用于食物，食入无毒。 Disinfectants： Microbicidal 不一定杀芽孢。
(二) 机会致病菌和医源性感染
(opportunist and nosocomial infection)
机会致病菌：opportunist
医源性感染：nosocomial infection
正常菌群(normal flora) Colonization: 人的皮肤表面： 1012 ， 口腔： 1010 ， 胃肠道：1014
口腔正常菌群的形成： 1. 出生时无菌，随着母亲的第一次喂食，细菌
开始定居; 2. 在出牙之前（6-9月），Streptococcus salivarius
为优势菌，占98%； 3. 随着出牙， S. mutans 和 S. Sanguis（血）
开始定居，厌养菌定居于牙垠与牙根的空隙 中，口腔菌群趋于复杂。 4. 到青春期，类杆菌及螺旋体开始定居
口腔正常菌群的作用： 1． 占领口腔，使其它微生物不能定居 2． 合成营养物质 3． 刺激交叉抗病原体免疫 4． 产生细菌素、脂肪酸、过氧化物
佶抗细菌
正常菌群与宿主的生态关系
(Ecologic relationship) 1. 共生 synbiosis
病源与非病源的微生物及芽胞。 灭菌后的物品为无菌(asepsis)状态。
防腐(antisepsis)─ 用物理或化学的方法防止和抑制
微生物 的生长繁殖, 称为防腐或抑菌。
消毒剂与防腐剂的区别在于tics： microbicidal 但必须对皮肤及黏膜无害 Preservatives： static agents 通常用于食物，食入无毒。 Disinfectants： Microbicidal 不一定杀芽孢。
三细菌的分布及消毒灭菌.ppt
二、消毒灭菌仪器参观
高压蒸汽灭菌器 干热灭菌箱 煮沸消毒器 过滤除菌器
三、化学消毒剂的抑菌作用
菌种: 大肠杆菌、金葡菌 培养基: 普通琼脂平板 化学消毒剂 : 2.5% 碘酒
0.1% 新洁尔灭 2% 红汞 2% 龙胆紫
四、药物敏感试验
五、细菌的分布
1.咽喉部的细菌检 查—血琼脂培养基
实验三 细菌的分布及消毒灭菌
常用消毒灭菌的方法
物理因素 热力：干热、湿热（巴氏消毒法、 煮沸法、压力蒸汽灭菌灯……） 辐射杀菌法：紫外线、电离辐射、微波 滤过除菌法 干燥与低温抑菌法
化学与生物因素 化学消毒剂抑菌试验 抗菌药物抑菌实验（药敏实验）
一、紫外线杀菌试验
金葡菌
枯草杆菌
紫外灯下照射30min
3.边缘： 4.表面：光滑（粗糙）、隆起（平坦）、干燥（湿润） 5.透明度： 6.颜色
细菌生长现象观察
金黄色葡萄球 菌
枯草芽胞杆 菌
用途
琼脂斜面培养基
液体培养基
半固体培养基 琼脂平板上菌落
大小 形态 边缘 表面 颜色 透明度
2.土壤——庖肉基 3.空气、手指等细菌
的检查——普通琼 脂平板
细菌生长现象观察
金黄色葡萄球 菌Leabharlann 枯草芽胞杆 菌用途
琼脂斜面培养基
液体培养基
半固体培养基 琼脂平板上菌落
大小 形态 边缘 表面 颜色 透明度
细菌在液体培养基中的生长现象
细菌在半固体培养基中的生长现象
细菌菌落形态观察
1.大小：1mm（小）， 2-3mm（中）， 3mm（大） 2.形状：
细菌的分布
菌素可抑制痢疾杆菌生长；唾液链球 菌产生的H2O2抑制脑膜炎球菌生长。
④免疫作用： 微生物具有免疫原性、促分裂和佐 剂的作用。可剌激机体免疫系统发育 和成熟。
2、正常菌群转化为条件病原菌
• 条件致病菌：凡属正常菌群的微生物，由于 机体抵抗力降低、寄居部位的改变或因数 量改变等情况而引起疾病者。
①机体免疫机能低下：如大面积烧伤，过度疲劳， 受凉，长期患消耗性疾病。
• 2.微生物的种类与数量：同种消毒剂对不同微生物的杀 菌效果不同。如结核杆菌对酸、碱的抵抗力 比其他的 菌强；70%乙醇可杀死一般细菌繁殖体，但不能杀灭细 菌芽胞。因此，必须根据消毒对象选择合适的消毒剂。
• 3.环境中有机物的影响：消毒环境中如有有机物存在， 如血清、脓汁、痰、粪便等，可与消毒剂结合而影响杀 中的细菌
抹 布 和 砧 板 上 的 细 菌
针头上的细菌
• 细菌种类多，繁殖 快，适应环境的能力 强，是自然界中分布最 广泛的一群微小生物。
微生物在自然界中的分 布可概括为：
“无孔不入， 无处不有”
本章提要： ➢ 第一节 细菌的分布 ➢ 第二节 消毒与灭菌 ➢ 第三节 生物安全
• 自然界中，以土壤的含菌量（种类）最 多，土壤素有“天然培养基”之称。土 壤也是一切自然环境中细菌的总发源地， 也是人类利用细菌的主要来源
• 在肥沃的土壤中，每克土壤含菌量达几 十亿-几仟亿（沙漠含菌量仅10万/g）。
• 细菌在土壤各层分布不均：表面含菌量 少；距表面10-20cm土壤含菌量最多
• 菌群失调症：指严重的菌群失调使机 体发生功能紊乱表现出明显临床症状 者。菌群失调症又叫菌群交替症（二 次感染）。
• 菌群失调经常发生而菌群失调症则少 见。患二重感染的机体抵抗力很弱， 细菌对抗菌素药物不敏感，治疗难度 大，应严加预防，避免发生。
④免疫作用： 微生物具有免疫原性、促分裂和佐 剂的作用。可剌激机体免疫系统发育 和成熟。
2、正常菌群转化为条件病原菌
• 条件致病菌：凡属正常菌群的微生物，由于 机体抵抗力降低、寄居部位的改变或因数 量改变等情况而引起疾病者。
①机体免疫机能低下：如大面积烧伤，过度疲劳， 受凉，长期患消耗性疾病。
• 2.微生物的种类与数量：同种消毒剂对不同微生物的杀 菌效果不同。如结核杆菌对酸、碱的抵抗力 比其他的 菌强；70%乙醇可杀死一般细菌繁殖体，但不能杀灭细 菌芽胞。因此，必须根据消毒对象选择合适的消毒剂。
• 3.环境中有机物的影响：消毒环境中如有有机物存在， 如血清、脓汁、痰、粪便等，可与消毒剂结合而影响杀 中的细菌
抹 布 和 砧 板 上 的 细 菌
针头上的细菌
• 细菌种类多，繁殖 快，适应环境的能力 强，是自然界中分布最 广泛的一群微小生物。
微生物在自然界中的分 布可概括为：
“无孔不入， 无处不有”
本章提要： ➢ 第一节 细菌的分布 ➢ 第二节 消毒与灭菌 ➢ 第三节 生物安全
• 自然界中，以土壤的含菌量（种类）最 多，土壤素有“天然培养基”之称。土 壤也是一切自然环境中细菌的总发源地， 也是人类利用细菌的主要来源
• 在肥沃的土壤中，每克土壤含菌量达几 十亿-几仟亿（沙漠含菌量仅10万/g）。
• 细菌在土壤各层分布不均：表面含菌量 少；距表面10-20cm土壤含菌量最多
• 菌群失调症：指严重的菌群失调使机 体发生功能紊乱表现出明显临床症状 者。菌群失调症又叫菌群交替症（二 次感染）。
• 菌群失调经常发生而菌群失调症则少 见。患二重感染的机体抵抗力很弱， 细菌对抗菌素药物不敏感，治疗难度 大，应严加预防，避免发生。
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Hale Waihona Puke 验内容Xi’an Ｍedical University
一、细菌的分布检查 二、物理消毒灭菌法 三、化学消毒剂的抑菌试验 四、抗生素敏感试验：录像、分析
微免教研室
实验报告
Xi’an Ｍedical University
1、记录并分析紫外线杀菌试验的结果。 2、记录并分析煮沸消毒试验的结果。
实验三 细菌的分布与消毒灭菌
西安医学院 病原生物学与免疫学教研室
目的要求
Xi’an Ｍedical University
熟悉几种物理消毒灭菌法的原理、用途及注 意事项。 熟悉几种常用化学消毒剂的抑菌作用作用原 理、适用范围、浓度及注意事项。 熟悉抗生素敏感试验及其实际意义。 了解细菌在自然界及正常人体的分布情况。
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思考讨论
Xi’an Ｍedical University
常用的消毒灭菌方法有那些? 药敏试验的临床意义是什么?
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