培养基的制备
培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告本次实验的目的是制备培养基,为细菌的分离、培养和纯化提供良好的条件。
下面将从实验的步骤、注意事项、结果及讨论等方面进行介绍。
一、实验步骤1、准备物质:本次实验需要的物质有蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、琼脂、蔗糖、粉红色指示剂等。
2、称量:按照配方称取所需要的物质,放置于烧杯中。
3、加水:将溶液加到烧杯中,使用热水搅拌溶解。
4、调pH值:使用磁力搅拌器搅拌溶液,同时加入酸、碱溶液调整其pH值。
5、加入琼脂:琼脂在液态时将其加入培养基中,在0.5小时后,将烧杯放入水浴中,加热至琼脂溶解。
6、灭菌:将培养基热量至65℃进行灭菌处理。
二、注意事项1、称量精准:由于配方中各种物质的比例不同,所以在称量时应该特别注意精准。
2、调pH值准确:必须要根据实验要求,合理的加入酸、碱溶液,使pH值调整在适宜的范围内。
3、琼脂的加入和热力均匀:琼脂的加入需要在液态状态下进行,加入方法应该温和,慢慢地注入。
在加热的过程中也需要注意热力的均匀分布。
4、灭菌时间和方法:都应该根据实验要求进行相应的调整和安排,保证灭菌的效果。
三、结果及讨论培养基制备完成后,我们使用其进行实验,成功得到了所需的细菌菌落。
同时我们也根据实验结果对制备过程中的一些问题进行了总结和讨论。
1、物质的准确称量对实验结果影响较大。
2、pH值的调整应详细了解各个物质对呈酸、碱性的影响。
3、琼脂的加入要在合适的液态下进行,加热过程要均匀。
4、灭菌的方法和时间应根据实验要求进行相应的调整和安排。
综上所述,本次实验是制备培养基,为细菌的分离、培养和纯化提供良好的条件。
实验过程中我们按照步骤并严格注意了一些细节问题,最终得到了满意的结果,更加深入了我们对实验的了解。
培养基制备的方法
培养基制备的方法培养基是微生物学研究和实验室中微生物的生长和繁殖的基础。
培养基的制备主要分为固态培养基和液态培养基两种形式。
下面我将详细介绍培养基的制备方法。
1. 固态培养基制备方法:a. 准备所需材料:琼脂、食物源(如肉汤、蛋白胨等)、矿物质、维生素、葡萄糖等。
b. 称取适量矿物质、维生素和葡萄糖,并添加到蒸馏水中,溶解成浓缩液。
c. 称取适量肉汤或蛋白胨等食物源材料,并加入蒸馏水中,并在加热搅拌的条件下溶解。
d. 将步骤b和c中的溶液混合,并加热搅拌,使其完全溶解,并达到所需浓度。
e. 将溶液倒入试管或培养皿中,使用自动灌装机进行灌装。
f. 放入高压灭菌锅中,在121高压下灭菌15-20分钟。
取出后冷却至室温。
g. 检查培养基是否凝固,如凝固则放入冰箱中保存。
2. 液态培养基制备方法:a. 准备所需材料:氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、葡萄糖等。
b. 称取适量氯化钠、磷酸二氢钾和磷酸氢二钠,并加入蒸馏水中,溶解成浓缩液。
c. 称取适量葡萄糖,并加入蒸馏水中,并在加热搅拌的条件下溶解。
d. 将步骤b和c中的溶液混合,并加热搅拌,使其完全溶解,并达到所需浓度。
e. 将溶液倒入试管或培养瓶中,并使用自动灌装机进行灌装。
f. 倒入适量培养基后,使用高压灭菌锅进行灭菌。
高压灭菌条件一般为121高压15-20分钟。
g. 取出后冷却至室温,检查液态培养基是否出现浑浊或沉淀物,若有则需要重新制备。
在制备培养基过程中,需要注意以下几个方面:1. 材料选择:根据实验需要,选择适合微生物生长的食物源、矿物质、维生素等材料。
2. 材料溶解:将所需材料称取放入试管或容器中,并加入适量的蒸馏水中进行溶解,加热搅拌加快溶解速度。
3. 浓度调整:根据实验需要和微生物的生长条件,调整培养基材料的浓度,以满足微生物生长的要求。
4. 灭菌处理:使用高压灭菌锅进行灭菌处理,达到高温高压杀灭细菌、真菌和病毒的目的。
灭菌是为了减少外界微生物对培养基的污染,保证实验的准确性和可靠性。
培养基配制技术—培养基的制备
3.调pH
在未调pH 前,先用精密pH 试纸测量培养 基的原始pH,如果偏酸,用滴管向培养基中逐 滴加入 1mol /L NaOH,边加边搅拌,并随时用 pH 试纸测其pH,直 至 pH 达 7.4~7.6。反之, 用 1mol/L HCl 进行调节。对于要求pH 较精确 的培养基,其pH 的调节常用酸度计进行。 pH 调节不要过头,以避免回调而影响培养基内各 物质的浓度。 4.过滤
谢谢
牛肉膏蛋白胨培养基配方:
牛肉膏3.0g,蛋白胨10.0g, NaCL5.0g,琼脂15~20g, 水1000ml ,pH 7.4~7.6 。其中牛肉膏提供碳源、能源、磷 酸盐和维生素,蛋白胨提供氮源和维生素,而NaCL提供 无机盐,在配制固体培养基时需要加入一定量琼脂作凝 固剂,如果配制液体培养基则不用加入琼脂。
将灭菌的试管培养基冷至 50℃左右(以防斜 面上冷凝水太多), 将试管口端搁在玻棒或其他 合适高度的器具上,搁置的斜面长度以不超过试 管总长的一半为宜。
10.无菌检查
将灭菌培养基放入37℃的恒温箱中培养24~ 48h,检查确实无菌生长方可使用。
谢谢
PDA培养基配方:
马铃薯 200克、葡萄糖 20克、琼脂 15~20克、 自来水 1000毫升、自然pH。
二、控制营养物质的浓度和比例 营养物质浓度过低不能满足微生物正常生长所需,太高则可能
对微生物产生毒害,如高浓度的无机盐、重金属离子等会抑菌或杀菌。 因此,营养物质合适的浓度是微生物生长发育的必要条件之一。在生 产过程中,在不影响微生物的生理特性和代谢转化率的情况下,通常 趋向在较高浓度下进行生产,以提高产物产量,并尽可能选育高渗透 压的生产菌株。当然,培养基浓度太大会使培养基黏度增加和溶氧量 降低。
培养基制备
一、玻璃器皿的清洗在制备培养基的过程中,首先要使用一些玻璃器皿,如试管、三角瓶、培养皿、烧杯和吸管等。
这些器皿在使用前都要根据不同的情况,经过一定的处理,洗刷干净。
有的还要进行包装,经过灭菌等准备就绪后,才能使用1、新购的玻璃器皿除去包装沾染的污垢后,先用热肥皂水刷洗,流水冲净,再浸泡于1~2%的工业盐酸中数小时,使游离的碱性物质除去,再以流水冲净。
对容量较大的器皿,如大烧瓶、量筒等,洗净后注入浓盐酸少许,转动容器使其内部表面均沾有盐酸,数分钟后倾去盐酸,再以流水冲净,倒置于洗涤架上将水空干,即可使用。
2、用过的玻璃器皿凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿,使用后可随时冲洗,吸取过化学试剂的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定数量后再集中进行清洗。
有可能被病原菌污染的器皿,必须经过适当消毒后,将污垢除去,用皂液洗刷,再用流水冲洗干净。
若用皂液未能洗净的器皿,可用洗液浸泡适当时间后再用清水洗净。
洗液的主要成份是重铬酸钾和浓流酸,其作用是将有机物氧化成可溶性物质,以便冲洗。
洗液有很强的腐蚀作用,使用时应特别小心,避免溅到衣服、身体和其他物品上。
二、培养基的类型在实验室中配制的适合微生物生长繁殖或累积代谢产物的任何营养基质,都叫做培养基(Media).由于各类微生物对营养的要求不同,培养目的和检测需要不同,因而培养基的种类很多。
我们可根据某种标准,将种类繁多的培养基划分为若干类型根据对培养基组成物质的化学成分是否完全了解来区分,可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。
1天然培养基天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。
用作这种培养基的主要原料有:牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。
用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分,但一般来讲,营养是比较丰富的,微生物生长旺盛,而且来源广泛,配制方便,所以较为常用,尤其适合于配制实验室常用的培养基。
培养基的制备与灭菌实验报告
培养基的制备与灭菌实验报告培养基的制备与灭菌实验报告引言:在微生物学研究中,培养基是不可或缺的工具。
培养基的制备和灭菌是保证实验结果准确性和可重复性的重要步骤。
本实验旨在探究培养基的制备方法和灭菌技术的应用。
一、培养基的制备1.1 选择合适的培养基成分培养基的成分根据微生物的需求而定。
常见的培养基成分包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
在制备培养基时,需根据所研究的微生物特性选择合适的成分。
1.2 制备培养基的步骤制备培养基的步骤主要包括称量、溶解、调pH、加热消毒和装瓶。
首先,按照配方称取所需成分,并逐一溶解于适量的蒸馏水中。
随后,根据微生物的需求,调节溶液的pH值。
最后,将溶液装入试管或培养皿中,并加热消毒。
二、灭菌技术的应用2.1 灭菌的目的灭菌是指将培养基、培养器具和实验室环境中的微生物杀灭或去除的过程。
灭菌的目的是为了避免外来微生物的污染,确保实验结果的准确性。
2.2 常用的灭菌方法常用的灭菌方法包括高温灭菌、化学灭菌和紫外线灭菌。
高温灭菌是指将培养基或器具在高温条件下进行加热消毒,常用的方法有烘箱灭菌和压力灭菌。
化学灭菌则是通过使用化学物质如酒精、乙醛等来杀灭微生物。
紫外线灭菌则是利用紫外线的辐射杀灭微生物。
2.3 实验中的灭菌操作在实验中,常用的灭菌操作包括培养基灭菌、器具灭菌和工作台灭菌。
培养基灭菌是将制备好的培养基加热消毒,以杀灭其中的微生物。
器具灭菌则是通过高温、化学物质或紫外线对实验器具进行消毒。
工作台灭菌则是通过紫外线辐射对实验台面进行灭菌处理。
结论:培养基的制备和灭菌是微生物学研究中的重要环节。
正确的培养基制备和灭菌操作可以确保实验结果的准确性和可重复性。
通过本实验,我们学习了培养基的制备方法和常用的灭菌技术,为今后的微生物实验打下了基础。
参考文献:[1] 陈晓玲, 赵莉, 邱晓红, 等. 基础微生物学实验教程[M]. 2版. 北京: 高等教育出版社, 2017.[2] 郭燕妮, 张晓红. 微生物学实验指导[M]. 北京: 高等教育出版社, 2019.。
常用培养基的制备及注意事项
常用培养基的制备及注意事项培养基是细菌、真菌、细胞等微生物进行繁殖和培养的营养地,广泛应用于微生物学和生物技术领域。
下面将介绍几种常用的培养基的制备方法及注意事项。
1.琼脂培养基:琼脂培养基是最常见的一种培养基,它以琼脂凝胶为基质,通过加入不同的营养成分,满足微生物的生长需求。
制备方法如下:1)称取适量琼脂,加入适量蒸馏水中搅拌均匀。
2)加入适量皂液,加热融化琼脂。
3)待琼脂溶液冷却至40°C左右时,加入已经制备好的培养基成分,如碳源、氮源、维生素等。
4)搅拌均匀,调整pH值,加热煮沸。
5)倒入装有适量培养基的培养皿中,使其凝胶化。
注意事项:1)使用较干燥的琼脂可减少湿润时间。
2)煮沸或加热时间不宜太长,以免过度加热导致一些营养成分失活。
3)制备过程中要注意无菌操作,避免细菌等微生物污染。
2.液体培养基:液体培养基适用于微生物的扩大培养、动态研究等实验。
制备方法如下:1)称取适量蒸馏水,加热至沸腾。
2)加入培养基成分,如碳源、氮源、维生素等,搅拌均匀。
3)调整pH值,加热至沸腾。
4)倒入试管或烧杯中,用胶塞或铝箔盖好。
注意事项:1)加热过程中要注意及时搅拌,避免成分沉积或变色。
2)制备前要将试管或烧杯等容器进行高温灭菌处理。
3)使用培养基前要进行菌液均匀混合,避免因成分沉积而导致的营养不均匀。
3.固体选择性培养基:固体选择性培养基是指根据微生物对特定组分的感受性选择性地制备的培养基。
制备方法如下:1)制备好的琼脂培养基加热至融化,放置冷却至40°C左右。
2)加入特定的抗生素、色素或指示剂等,搅拌均匀。
3)倒入装有适量培养基的培养皿中,等待凝胶化。
注意事项:1)特定抗生素或其他抑菌剂的添加量需要谨慎,过量添加可能抑制需要培养的微生物。
2)搅拌均匀时,应快速且均匀,以避免导致混合不均。
3)固体选择性培养基凝胶化后,尽量避免暴露于空气中,以免细菌等微生物的污染。
以上所述的常用培养基只是其中的一部分,不同微生物的培养要求不同,制备方法也有所差异。
培养基的制备
一、培养基的制备:(一)液体培养基1、称量用电子天平称量配制培养基所需的各种药品:牛肉膏3.0 g 蛋白胨10 g 氯化钠5.0 g2、溶化将称好的药品置于烧杯中,加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌,加热溶解3、定容待全部药品溶解后,加水至所需体积1000ml4、调pH 用剪刀剪出一小段pH试纸,然后用镊子夹取此段pH试纸,在培养基中蘸一下,观看其pH范围,直至将pH调制7.2-7.45、过滤6、分装将配好的液体培养基分别装入锥形瓶中,并加塞包扎7、灭菌将加塞包扎好的培养基置于高压蒸汽灭菌锅中,在121℃下灭菌20min.8、保存将配置好的培养基放入4℃的冰箱中,保存备用(二)固体培养基1、称量用电子天平称量配制培养基所需的各种药品:牛肉膏3.0 g 蛋白胨10 g 氯化钠5.0 g 琼脂粉15 g2、除无需过滤外,其余步骤同液体培养基二、供试样品处理1.苔藓植物提取液制备将采集来的苔藓样品用自来水冲洗,再用去离子水洗净,放入培养箱于50℃恒温条件下烘干,用电动粉碎机将植物体粉碎。
称取 2.0 g 样品粉末,置于具橡胶塞的三角瓶中,加20 ml无水乙醇, 在摇床上振荡提取20 h, 以1500 r/ min 离心10 min, 收集上清液, 将残渣再用无水乙醇重复提取2次, 方法同上,合并3次的提取液于小烧杯中, 置4℃冰箱保存备用。
2.苔藓植物浸出液的制备分别将植物体洗净,蒸馏水浸泡至吸水饱和,然后用滤纸吸去体表多余水分,但不能过重挤压。
称取8 g藓体,加少许蒸馏水,研磨成浆状,再加水至40ml。
放入50℃恒温水浴锅12 h。
取出并离心去渣,得上清液即为浸出液。
三、菌悬液的制备取供试细菌菌株,用接种环各取菌苔少许接种至牛肉膏蛋白胨固体培养基斜面上,在37℃恒温培养箱中培养20 h 活化,然后将活化后的菌株接一环于 5 mL 液体培养基中,在恒温振荡器中37℃下培养6- 8 h ,即制成菌悬液。
四、滤纸片法测定抑菌作用取直径12 mm 的灭菌滤纸片放入上述苔藓植物提取液中浸泡过夜,将菌悬液各取0.5 mL 与相应的固体培养基制成含菌平板,用无菌镊子取含浸出液的滤纸片贴在含菌平板上,每皿贴4 片,每菌做 3 次重复,且用无水乙醇浸泡滤纸片作空白对照,置于37℃恒温培养箱中培养24 h 后,取出测定抑菌圈直径大小,比较抑菌效果。
5.培养基的制备
4、8:表示有4和8个试验要做。
2:表示被考察的因素只要求有两个水平。 3、7:表示考察3个或者7个因素。
在组培中可用于同时探求培养基几种成分用量,如细胞分裂素、 生长素、糖和其他成分用量。
例:用正交设计法设计7个因素,2个变量的试验。
1.光照时间(10,12h) 2.光强(1000,2000lx) 3.PH值(5.5,5.8) 4.温度(20,25°C) 5.6-BA(0.5,2.0) 6.NAA(0.5,1.0) 7.糖(2%,4%) 根据因素和水平数量,选择正交表L8(27)---因素 试验 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 1. 1 2 1 2 1 2 1 2 2. 1 1 2 2 1 1 2 2 3. 1 2 2 1 2 1 1 2 4. 2 2 2 2 1 1 1 1 5. 2 1 2 1 1 2 1 2 6. 1 1 2 2 2 2 1 1 7. 2 2 1 2 2 1 2 2
广谱实验法中,把培养基组分分4大类:无机盐、有机物(蔗糖、氨基 酸和肌醇等)、生长素、细胞分裂素。
每类物质选低(L)、中(M)、和高(H)3浓度。4类物质各3浓度的自由组 合即构成包括81个处理的实验。
81个处理中最好的可用4个字母表示。如含中浓度无机盐、低浓度生 长素、中浓度细胞分裂素和高浓度有机物的处理,即为MLMH。 达到这个阶段,再试用不同类型生长素和细胞分裂素即可找到培养基 最佳配方。因不同类型生长素和细胞分裂素对不同植物活性不同。
4.拐点浓度细化:下次试验根据出现的拐点,改变浓度梯度,趋向精确。
二.多因子试验
对两个或两个以上因素进行研究的试验,称多因子实验。可用完全试
验方案,也可选用正交设计方案。完全试验方案具有均衡完全的特点,各
简述培养基制备流程
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任何培养基都应具备微生物生长所需要的六大营养要素,且其间的比例是合适的。
5.培养基的制备和消毒灭菌
6.灭菌 塞棉塞,包扎,灭菌。培养基做完后,要求 在2-4小时内灭菌,否则会被污染。 7.摆斜面 灭菌完毕,冷却到60℃左右再摆斜面,以免 产生过多冷凝水。
棉塞制作
牛肉膏蛋白胨培养基( g/L,培养细菌用)
牛肉膏
3g 蛋白胨 10g NaCl 5g 琼脂 15-20g(取18g) 水 1000ml pH 7.0-7.2 121℃灭菌20min
3.调节pH值 培养基溶解用pH试纸测pH,然后根据要求 加酸或碱(一般用1M HCl和1M NaOH),要缓 慢少量且多加搅拌。培养基配方为自然pH时, 不用调节。 4.过滤 用滤纸或多层纱布过滤,一般无特殊要 求可省去。
5.分装 将制好的培养基分装入试管内或三角瓶内, 管(瓶)口塞上棉塞。固体培养基要趁热装。 分装时要避免培养基粘染管(瓶)口,引起污 染。分装量可分为下面几方面: (1)斜面:装量为管长的1/5。 (2)液体培养基:装量为管长的1/4。 (3)半固体培养基:装载量为管长的1/3。
高氏1号( g/L,培养放线菌用)
可溶性淀粉 KNO3 NaCl
K2HPO4
MgSO4 FeSO4
琼脂
水 pH
20g 1g 0.5g 0.5g 0.5g 0.01g 15-20g(取18g) 1000ml 7.2-7.4
121℃灭菌20min
马丁氏培养基(g/L,分离真菌用)
NaCl、K2HPO4、 KH2PO4、 KNO3、MgSO4、 FeSO4、孟加拉红、1mol/L NaOH、
2.器材:
试管、烧杯、三角瓶、量筒、玻璃棒、铁架台、漏
斗、天平、牛角匙、高压锅、微波炉、 pH试纸 (5.5-9.0)、棉花、纱布、线绳、聚丙烯袋等。
培养基的配制和灭菌实验报告(共8篇)
培养基的配制和灭菌实验报告(共8篇) 培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目:培养基的制备与灭菌二、实验目的:1、明确培养基的配置原则,掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理,学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材:1、药品:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器:三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理:1、培养基的制备包括一下几种成分:(1)水分:主要成分。
(2)N源:包括无机氮和有机氮。
(3)C源:主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
(4)无机盐:如NaCl、KH2PO4等。
微量元素:Cu、K、Mg、S、P、Zn。
有些还需要添加“生长因子”,通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的,选用不同的培养基,但有机物总量不得超过15%,盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类:按成分:天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态:固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途:基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌,防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌:用理化手段杀灭一切微生物的营养体,包括芽孢和孢子,在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
(1)高压蒸汽灭菌:将物品放入封闭的加压灭菌器,加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽,将冷空气排尽,压力上升,使水沸点变高,导致菌体蛋白质变性,一般0.1MPa、121℃、15~30min 可以彻底灭菌,本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基,110℃、30min。
(2)干热灭菌:微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温,所以含水量小,不利于蛋白质受热变性,所以温度高,时间长。
(3)紫外灭菌:诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。
(4)过滤除菌:实验室中用微孔滤膜(孔径一般为0.22μm)。
除病菌需更小。
五、实验步骤:1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gNaCl放入烧杯,加入100mL水,用玻璃棒搅匀溶解,移入三角瓶,并加入1.5g琼脂。
培养基的制备过程
培养基的制备过程一、引言培养基是细胞、微生物等生物体在实验室中进行研究和培养的必需品,其制备过程涉及到多个步骤和组分。
本文将详细介绍培养基的制备过程。
二、材料及设备1. 纯水2. 食品级明胶3. 葡萄糖4. 氯化钠5. 磷酸二氢钾6. 氨基酸混合物7. 维生素混合物8. 纯净乙醇9. 经过高温高压灭菌的玻璃烧杯、量筒、移液器等实验室常用设备。
三、制备步骤1. 制备明胶溶液将10g食品级明胶加入500ml纯水中,搅拌均匀后加热至溶解。
待溶解后降温至室温,静置1小时,将上清液倒入干净容器中备用。
2. 制备基础盐类溶液将8g氯化钠、0.2g磷酸二氢钾加入800ml纯水中,搅拌均匀后加热至溶解。
待溶解后降温至室温,静置1小时。
3. 制备氨基酸混合物将0.5g苏氨酸、0.5g丝氨酸、0.5g天冬氨酸、0.5g谷氨酸、0.5g精氨酸、0.5g赖氨酸、0.5g异亮氨酸、0.5g缬氨酸加入50ml纯水中,搅拌均匀后过滤,得到无菌的氨基酸混合物。
4. 制备维生素混合物将1mg生物素、1mg叶酸、1mg核黄素、1mg泛酸、1mg吡哆醇加入10ml纯水中,搅拌均匀后过滤,得到无菌的维生素混合物。
5. 制备完整培养基将基础盐类溶液和明胶溶液按照4:1的比例混合,并加入2ml氨基酸混合物和2ml维生素混合物,最终体积调整至1000ml。
搅拌均匀后过滤灭菌即可。
四、质量控制1. 培养基的pH值应控制在7.0左右。
2. 培养基的透明度应良好,无悬浮物和沉淀。
3. 培养基的灭菌应严格遵守规定,确保无菌状态。
五、结论本文介绍了培养基的制备过程,包括明胶溶液、基础盐类溶液、氨基酸混合物、维生素混合物以及完整培养基的制备步骤。
同时,还对培养基的质量控制进行了说明。
这些步骤和质量控制是保证培养基质量的关键因素。
培养基的制备
培养基的制备一、配制原则和种类(一)培养基配制原则1、培养基:培养基是提供食用菌等生物生长发育所需的营养与特定环境条件的基质,如蘑菇菌是有机营养型中的草腐生菌。
制备培养基不仅要考虑它所需要的含碳化合物、含氮化合物、矿物盐类、生长因子,还要考虑水与pH环境,同时还应考虑它们培养方式是固体培养还是液体培养。
因此,可以把按菌类生长发育需要比例配制的灭菌营养基质,称为培养基。
换言之,培养基必须具备三个条件:含有菌株生长发育所需要的营养物质;具有菌类生长环境条件;经过灭菌,并保持无菌状态。
2、培养基的选择:在整菌种制备过程中,从母种到原种、栽培种,各个阶段的目的要求有所不同,所选用的培养基的配比也应有所区别。
一般母种初生菌丝较嫩弱,分解养分能力差,要求营养丰富、完全,氮源、维生素的比例应高。
须选用易于被菌丝吸收利用的物质,如葡萄糖、蔗糖、马铃薯、蛋白胨、无机盐类及生长素等为等而原种、栽培种所需数量较多,且菌丝分解能力强,可利用大量农作物秸秆、粪草、棉籽壳、麸皮、米糠等原料作为培养基。
(二)培养基的种类1、根据营养物质的来源,可以把培养基分炎天然培养基、半合成培养基和合成培养基。
(1)天然培养基天然培养基是指用化学成分还不清楚或化学成分不恒定天然有机物配制而成的培养基,如各种农副产品及其下脚料──小麦、大豆、玉米粉、麸皮、米糠、作物秸秆、木屑、棉籽壳、甘蔗渣等,以及动植物组织的浸出液──牛肉膏、肉汤、马铃薯汁、麦芽汁、豆芽汁等都可以用来配制天然培养基,这种培养基来源广,成本低,营养丰富,适合于在生产上大规模培养菌类使用,但这些天然有机物质因产地、品种、生长期的不同,化学成分不能宣。
每批成分也不稳定,不宜用来做精细的科学实验。
以分离驯化食用菌培养基(2)半合成培养基为了促进食用菌菌丝的生长发育,常在天然培养基中添加适量的无机盐类,或在合成培养基中添加适量的某些天然有机物,就成为半合成培养基。
这类培养基种类繁多,应用广泛,也是生长菌种和实际栽培最常用的培养基。
培养基制备规程及使用规程
培养基制备规程及使用规程一、培养基制备规程1.实验室环境准备:a.准备洁净的实验室,保持室内的洁净度和通风良好。
b.检查实验室设备,确保所有设备都处于良好的工作状态。
2.实验室操作准备:a.准备所需的培养基成分,如葡萄糖、氨基酸、盐类和维生素等。
b.准备所需的试剂和溶液,如酚红指示剂和加热消毒用的稀盐酸等。
c.准备所需的实验器材,如计量容器、培养皿和pH调节器等。
3.培养基制备步骤:a.按照配方准确称取所需成分,并加入适量的蒸馏水中。
b.用适当的方法加热溶解所需成分,如用水浴或高压灭菌锅加热至沸腾。
c.将溶解后的培养基过滤,以去除可能存在的微生物污染。
d.在制备过程中,确保培养基的pH值在所需范围内,如需调节pH值可使用氢氧化钠或盐酸等酸碱调节剂。
e.将制备好的培养基分装到适当的容器中,并密封保存。
4.培养基质量控制:a.制备好的培养基应进行质量检查,如外观、pH值、无菌性和有效成分浓度等。
b.注册并记录所用的培养基成分和制备过程,以备后续参考。
二、培养基使用规程1.实验室操作准备:a.检查所需的培养基是否已经过期,如已过期应立即报废。
2.培养基使用步骤:a.将需要处理的样品制备成适当浓度的悬浮液或溶液。
b.使用无菌的技术将培养基分装到试管或培养皿中。
d.将处理好的样品加入培养基中,保持无菌操作。
e.在使用过程中,必要时对培养基进行保温或恒温操作。
f.记录实验过程中的有关数据和观察结果。
3.培养基处理和存储:a.使用完毕的培养基应按照实验室规定的方法进行处理,防止污染和传播病原微生物。
b.剩余未使用的培养基应密封保存,存放于适当的温度和湿度条件下,以保证培养基的质量和有效性。
c.定期检查存储的培养基是否已过期,如已过期应立即报废。
d.记录所用培养基的批号和过期日期,以备后续参考。
总结:培养基的制备与使用直接关系到实验结果的准确性和可靠性。
制备过程中需要注意材料的准确称量和溶解、过滤的无菌操作。
使用过程中要注意无菌操作,以保证培养物的纯度和有效性。
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三、材料 牛肉膏、蛋白胨 氯化钠、蒸馏水 琼脂,10%NaOH pH试纸、三角烧瓶 量筒,天平 酒精灯、等。
四、方法
培 养 基 配 制 步 骤
⑴调配成分 ⑵溶解 ⑶调节 pH ⑷ 分装 ⑸灭菌 ⑹质量检验 ⑺保存
各组所需要配制的培养基
1.肉膏汤培养基
第1组:各100ml ( 先分装7支) 第2组:100ml (先分装7支)
四、方法
2.普通琼脂平板培养基配制:
于100ml肉膏汤培养基中加入2.5g琼脂, 高压蒸汽灭菌,待冷至50~60℃,倒制平板。
3.普通斜面培养基 于100ml肉膏汤培养基中加入1g琼脂, 分装于试管内(每管约3-4ml)置高压蒸 汽灭菌器内灭菌(121.3-20min) . 配制见瓶签说明
五、结果
3.普通斜面培养基
2.普通琼脂平板培养基
第3.4.5.6组:各100ml
每组倒7枚平板供6小组下次用
四、方法
1.肉膏汤培养基的配制: ⑴称样: 牛肉膏0.5g 蛋白胨1g 氯化钠0.5g
加至100ml蒸馏水 中,加热溶化
(2) 待冷至40~50℃时,矫正酸碱度为pH7.6 (3) 分装于试管内(每管约2ml)置高压蒸汽 灭菌器内灭菌(121.3-20min)。
食品微生物学实验
实验四
指导教师:张玲玲
实验项目
细菌培养基的制备
肉膏汤培养基的制备 普通琼脂平板培养基的制备 半固体斜面培养基的制备
一、目的 掌握培养基的制备方法 二、原理
培养基是人工合成的一种混合营养料, 用以分离细菌。基础培养基中含有大多数 常见菌生长繁殖所需要的营养物质,并可 制成液体、半固体、固体三种不同的性状 以供选用。
配制出以下培养基: 1.肉膏汤培养基 2.普通琼脂平板培养基 3.普通斜面培养基
六、实验报告要求 实验报告中描述本组所配制的培养基。
七、思考题
何谓培养基? 培养基的制备过程有哪几个步骤?
实验课小结
1.各实验小组分析报告本次实验收获体会 2.指导教师进行实验小结