三点测交实验报告-成品

遗传学实验报告

题目：三点测交

班级：历生本

组员：董轲 201023130107

孙菲 201023130110

任晴 201023130119

实验时间： 2012年11月3日

教师签字：

目录

实验目的------------------------------------3实验原理------------------------------------3实验材料及用品------------------------------4实验步骤------------------------------------5注意事项------------------------------------5实验结果------------------------------------6实验分析------------------------------------7

实验目的：

1.掌握三点测交的原理及方法。

2.学习三点测交的数据统计处理及分析方法。

3.了解绘制遗传学图的原理和方法。

实验原理：

连锁交换定律：处在同一染色体上的两个或两个以上基因遗传时，联合在一起的频率大于重新组合的频率。重组类型的产生是由于配子形成过程中，同源染色体的非姊妹染色单体间发生了局部交换的结果。

三点测交：三点测交就是通过一次杂交和一次测交，同时确定三对等位基因（即三个基因位点）的排列顺序和它们之间的遗传距离，是基因定位的常用方法。主要过程是：用三显性纯合体和三隐性纯合个体杂交，获得三基因杂合体（F1），再使F1与三隐性基因纯合体测交，通过对测交后代表现型及其数目的分析，分别计算三个连锁基因之间的交换值，从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离。

现用野生型18号果蝇与突变型6号果蝇杂交，6号作母本，18号作父本。由于小翅(miniature)、白眼(white)、焦刚毛(singed)，由位于X染色体上的三个隐性基因m，w和sn

3决定。故得到的F1代中雌果蝇性状均为长翅、红眼和直刚毛，而雄果蝇性状均为小翅、白眼和焦刚毛。F1代中雌果蝇为三杂合体，雄果蝇为隐形纯合体。F1代雌雄果蝇自交，在产生配子的过程中，雌果蝇的两条X染色体发生交叉互换，可以产生8种配子，由于各基因间的距离不一样，产生的8中配子数目不等，而雄果蝇只产生2种配子，且无论哪种配子与雌果蝇产生的配子结合，后代的性状均与雌配子的基因型相吻合。通过对F3代果蝇性状的观察和计数可以推知三个基因间的距离。

如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因的单交换，那么预期的双交换频率应当等于两个单交换频率的乘积，但实际上观察到的双交换值往往低于预期值，因为每发生一次单交换，对它邻近位置也发生交换的机会产生影响，这叫干涉。一般用并发率表示干涉的大小。

实验材料及用品：

黑腹果蝇品系：野生型18号果蝇（+++）突变型6号果蝇（w sn3 m)

仪器：恒温培养箱、显微镜、解剖镜、培养瓶、棉花塞、麻醉瓶、

毛笔或解剖针、洁净的白瓷板。

试剂：乙醚等

实验步骤：

1.11月4日21:00将6号种蝇瓶中的成蝇全部杀死。

2.11月5日7:00选择处女蝇3只，

15:00选择处女蝇2只。

3.11月5日15:00交配6号♀×18号♂。

4.11月12日放亲本。

5.11月15日21:00 F1自交（1号瓶），

16日19:00 F1自交（2号瓶），

17日11:00 F1自交（3号瓶）。

6.11月23日16:30 1号瓶、2号瓶放亲本。

24日20:00 3号瓶放亲本。

7.11月26日出现F2代成蝇，观察并计数。

注意事项：

1.亲代杂交时母本要选6号，父本选18号，否则F1代杂交时还需要选择处女蝇，给实验带来不必要的麻烦。

2.亲代杂交时要选择处女蝇，F1自交时不需要处女蝇，选择处女蝇时要严格控制时间。

3.在培养瓶内出现蛹时（下一代果蝇羽化之前），一定要将亲本除去，否则混入下一代中，影响计数。

4.在选择果蝇进行杂交时，要将新培养瓶横放，将果蝇放到瓶壁上，等果蝇苏醒后，再将培养瓶竖立，以防止果蝇粘在培养基上，影响交配。

5.在选择杂交果蝇时，要轻度麻醉，以确保果蝇可以苏醒，不影响交配；在观察F2代性状并计数时，要重度麻醉，以免在观察计数过程中果蝇苏醒，影响计数。

6.F2代的计数时间不要超过13天，确保所计数的果蝇中没有F3代。

实验结果：

F2代性状观察表

实验分析：

1.F2 观察结果记录表：

根据表中的重组值可以绘出遗传学图：

m 、sn3 、W在X染色体上的相对位置

由图可知m 、sn3、W在X染色体上的相对位置和它们之间的图距。

2.计算并发率和干涉：

如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因的单交换。那么预期的双交换频率应等于两个单交换

频率的乘积。但实际上观察到的双交换频率往往低于预期值。因为每发生一次单交换，它邻近也发生一次交换的机会就减少一些，这叫做干涉。一般用并发率来表示干涉的大小。

并发率= （观察到的双交换率）/（两个单交换的频率的乘积）

=0.174

干涉率= 1 –并发率 = 0.826

3.各组之间的实验条件相同，但实验结果差距较大，也能是由于某些性状不易区分，而造成实验结果统计错误。

（注：可编辑下载，若有不当之处，请指正，谢谢!）