饲料中总磷测定

总磷测定

测定原理：

将试样中有机物破坏，使磷游离出来，在酸性溶液中，钒钼酸铵处理，生成黄色的磷-钒-钼酸复合体（(NH4)3PO4.NH4VO3.16MoO3），在波长420nm下进行比色测定。

此法测得结果为总磷量，其中包括动物难以吸收利用的植酸磷。

适用范围：

适用于配合饲料、浓缩饲料、预混料和单一饲料中总磷测定，测定磷含量0～20ug/mL。仪器设备：

1）实验室用样品粉碎机或研钵。

2）分样筛：孔径0.45mm（40目）。

3）分析天平：感量0.0001g。

4）分光光度计：有10mm比色皿，可在420nm下测定吸光度。

5）高温炉：可控制温度在550±20℃。

6）瓷坩埚：50ml。

7）容量瓶：50ml，100ml，1000ml。

8）滴定管：酸式，25或50ml。

9）刻度移液管：1.0，2.0，3.0，5.0，10ml。

10）凯氏烧瓶：125，250ml。

11）可调温电炉：1000W。

试剂：

分析中所用试剂除特殊要求外，均为分析纯，水为蒸馏水或同纯度水。

1）盐酸（化学纯）：1:1（V:V）水溶液。

2）浓硝酸（化学纯）。

3）钒钼酸铵显色剂：

称取偏钒酸铵1.25g，加硝酸250ml；另称取钼酸铵25g，加蒸馏水400ml溶解。在冷却的条件，将后者倒入前面的溶液，使两种溶液混合，加水定容至1000ml。避光保存，若生成沉淀，则不能继续使用。

4）磷标准液：

将磷酸二氢钾在105℃干燥1h，在干燥器中冷却后称取0.2195溶于蒸馏水，定量转入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即为50ug/mL的磷标准溶液。测定步骤：

（1）灰化：称样2～5g左右（精确至0.0001g），置于30mL坩埚中，电炉上（或高温炉300℃）低温炭化至无烟后，550±20℃灼烧灰化3h（可测灰分含量）。

（2）消化：冷却后，加入1:1 HCl 10mL和浓HNO3数滴，小心煮沸（在电砂炉上加热消化）约10min。

（3）定容：用热蒸馏水洗涤坩埚和滤纸，将消化后溶液过滤并转移到100mL容量瓶，

冷却至室温，定容，摇匀，即为试样分解液。

（4）测定：取试样分解液约1～10mL（磷含量50～750ug）于50mL容量瓶中，加入钒钼酸铵显色剂10mL，定容至刻度，空白调零，测定吸光度。

标准曲线绘制：

吸收此标准溶液0，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0，12.0，14.0mL盛入50mL容量瓶，加显色剂10mL，用蒸馏水稀释至刻度。此时容量瓶中磷浓度为0，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0，12.0，14.0µg/mL。静置20min，比色。建立磷浓度与吸光度标准曲线。

计算公式：

查对磷标准曲线，计算磷浓度，换算植酸磷含量。

公式：

其中，

Y，吸光度；

K，斜率；

X，由磷标准曲线查得的磷浓度µg/mL；

W，待测样品中磷百分含量，%；

V0，比色时所用容量瓶容积，mL；

V1，试样分解液总体积，mL；

V2，移取试样分解液体积，mL。

M，试样质量，g。