盐酸普鲁卡因半数致死量_LD50的测定

启动微机，运行BL-410程序，进入其数据处理选项， 再进入半数有效量选项。

一次输入各组剂量、动物总数、动物死亡数等相关 数据。

单击“计算”按钮，计算LD50等参数。
【注意事项】

给药剂量准确 小鼠腹腔注射 脱臼处死实验用过小鼠
【思考题】
1.测定LD50有何药理意义？
2.为何选择测定LD50作为衡量药物 毒性大小的指标?
C母 D 等容注射量
药液配制的具体步骤：
预试中Dm=344mg/kg， Dn=141mg/kg，算出r=1.25，小鼠的平均体 重为20g，每组10只，用药量为0.1ml/10g=10ml/kg
C母
D 等容注射量
C1=344mg/kg / 10ml/kg=34.4mg/ml
每组药液量=每组动物总重×用药量=200g×0.1ml/10g=2ml
【实验材料】

实验动物：小白鼠，体重18～２２g，♀♂各半，
实验前禁食12h,不禁水。

实验器材：计算机（BL-410机能实验系统）、电 子秤、注射器、小鼠笼。

实验药品：盐酸普鲁卡因 （Procaine hydrochloride）
【实验步骤】

预备实验
1．探索剂量范围：根据经验或文献，通过实验找出100%死亡的最小剂
(3)申报新药过程中必须提供的药理学资料
盐酸普鲁卡因产生毒性作用的原理:

盐酸普鲁卡因是一种局部麻醉药，当被大量吸收后会产
生全身性毒性反应，主要表现为枢神经系统先兴奋后抑
制，初期表现为眩晕、烦躁不安、肌肉震颤，进而发展为
神经错乱、惊厥、昏迷、呼吸抑制等。患者可因呼吸衰竭 而死亡。

LD50的测定方法有很多。如：目测机率单位法、 加权机率单位法(Bliss 法)、寇氏法、序贯法等。
量及0%死亡的最大剂量。此即上下限剂量（Dm，Dn）。
2．确定组数、计算各组剂量：

组数（n）：5组 按公式求公比r:
r
n 1
r=1.25
D D
m n
按公比求各组剂量：D1，D2，…,Dn，其中D1= Dn=最小剂量、
D2= D1·r ,…，Dn= Dn-1·r, Dm
3．配制等比稀释溶液：要求各小鼠给药容积一样，一般0.1ml/10g， 按下列公式计算浓度：

Bliss 法是目前推荐使用的方法。此法对剂量分 组无严格要求，不需要剂量组有0%和100%死亡率， 是目前公认最准确的测定方法。但本法计算繁琐， 故现多采用计算机程序计算。

我国卫生部规定，Bliss法是作为新药LD50测定评 定必须采用的方法。
实验部分 【实验目的】
1.掌握药物的半数致死量测定的意义、方法、计算过程。 2.了解药物给药后动物所产生的毒性反应及其严重程度。
剂量 （ml/10g）
0.12 0.11 0.10 0.091 0.082
动物数 （只）
10 10 10 10 10
死亡数 （只）
死亡率 （%）
小鼠的腹腔注射方法
抓好后将小鼠保持头低位
4.实验观察30min后进行数据统计 5.计算LD50及其95%可信限 采用Bliss法程序计算各参数步骤：
1号液 2号液 3号液 4号液 5号液
2ml
1号
2ml
2号
2ml
3号
2ml
4号
2ml
5号
【实验步骤】

正式实验
1．分组编号:取小鼠50只，随机分成5组，每组10只，♀♂各半。
2．计算给药：由腹腔注射给药。
3．观察记录：记录小鼠给药后反应，死亡时间，统计死亡数，列 下表：
结果记录表 组别
1 2 3 4 5
药物半数致死量(LD50)的测定
药理学实验
特殊毒性试验（致畸、致癌、 致突变） 毒性试验
长期（慢性）毒性试验
急性毒性试验：1～7d

半数致死量（lethal dose 50%, LD50）：是指能够
引起试验动物一半死亡的药物剂量，通常用药物致死剂量
的对数值表示。

测定LD50意义
(1)是衡量药物毒性大小的指标，评价药物优劣的重要参数 (2)评价药物安全性---治疗指数 TI=LD50/ED50