分子生物学重组DNA技术试题word精品
分子生物学大实验习题及解答(精)
分子生物学大实验习题及解答一、名词解释1、genome;2、基因芯片;3、持家基因;4、Operon;5、感受态细胞;6、逆转录酶;7、PCR技术;8、转化;9、重组DNA技术;10、基因沉默;11、hnRNA;12、复制子;13、反义RNA;14、衰减子;15、拟基因;16、RNA编辑;17、颠换;18、拓扑异构酶;19、变性;20、转座子二、基础理论单项选择题1、DNA连接酶的作用为()A、合成RNA引物B、将双螺旋解链C、去除引物、填补空隙D、使双螺旋DNA链缺口的两个末端连接2、DNA复制中RNA引物的主要作用是( )。
A、引导合成冈奇片段B、作为合成冈奇片段的模板C、为DNA合成原料dNTP 提供附着点D、激活DNA聚合酶3、下列哪一种蛋白不是组蛋白的成分()A、 H1B、H2A 、H2BC、 H3、H4D、 H54、DNA的变性:()A、包括双螺旋的解旋B、可以由低温产生C、是可逆的D、是磷酸二酯键的断裂5、转录需要的原料是:()A、 dNTPB、 dNDPC、 dNMPD、 NTP6、在原核生物复制子中以下哪种酶除去RNA引发体并加入脱氧核糖核甘酸:A、DNA聚合酶ⅢB、 DNA聚合酶ⅡC、DNA聚合酶ⅠD、外切核酸酶MFl7、下真核生物复制起始点的特征包括()A、富含GC区B、富含AT区C、 Z DNAD、无明显特征8、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质()A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同B、分子大小不同C、分子极性不同D、溶解度不同9、DNA复制时不需要以下哪种酶?()A、 DNA指导的DNA聚合酶B、RNA指导的DNA聚合酶C、拓扑异构酶D、连接酶10、1、证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎链球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。
这两个实验中主要的论点证据是:()A、从被感染的生物体内重新分离得到DNA,作为疾病的致病剂B、DNA突变导致毒性丧失C、生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能D、DNA是不能在生物体间转移的,因此它一定是一种非常保守的分子11、利用自己的位点专一重组酶把自己从寄主基因组中的一个地方移到另一个地方的遗传元件叫()A、启动子B、转座子C、T-DNAD、顺反子12、原核DNA合成酶中()的主要功能是合成前导链和冈崎片段A、DNA聚合酶ⅠB、DNA聚合酶ⅡC、DNA聚合酶ⅢD、引物酶13、在基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒以便于重组和筛选。
分子生物学习题库与参考答案
分子生物学习题库与参考答案一、单选题(共49题,每题1分,共49分)1.可以实现体细胞克隆的技术是:A、基因编辑B、聚合酶链式反应C、诱导多能干细胞D、体细胞核移植正确答案:D2.在PCR反应中,引物与模板的结合温度约为:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案:B3.大肠杆菌对于基因克隆的主要作用是:A、提供连接酶B、合成引物C、表达目的蛋白D、作为宿主正确答案:D4.将单链DNA合成双链的酶是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、裂解酶D、RNA聚合酶正确答案:B5.可以增加靶标DNA拷贝数的技术是:A、PCRB、电泳C、测序D、印迹杂交正确答案:A6.在Southern杂交中起探针作用的是:A、DNAB、RNAC、载体D、引物正确答案:A7.编码氨基酸顺序信息的DNA序列称为:A、启动子B、基因C、外显子D、启动密码子正确答案:B8.可以自我复制的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、miRNA正确答案:B9.DNA聚合酶在PCR反应过程中不需要的元素是:A、铜离子B、镁离子C、锰离子D、钾离子正确答案:A10.启动子序列通常位于:A、转录起始点上游B、编码区C、基因内含子D、终止子上游正确答案:A11.可以直接导入植物细胞的方法是:A、阳离子脂质体法B、农杆菌法C、微粒射击法D、电穿孔法正确答案:B12.DNA的组成单位是:A、氨基酸B、核苷酸C、核糖D、脱氧核糖正确答案:B13.农杆菌可以将T-DNA转入植物细胞的原因是:A、具有连接酶B、具有限制性内切酶C、具有转座子D、可以与植物细胞膜融合正确答案:C14.DNA测序中的Sanger方法利用了:A、引物延伸终止B、核酸杂交C、蛋白质切割D、荧光标记正确答案:B15.可以用于克隆目的基因的载体是:A、慢病毒B、质粒C、线性DNA分子D、mRNA正确答案:B16.属于真核生物的模型生物是:A、小鼠B、酵母C、果蝇D、以上所有正确答案:D17.可以将质粒DNA转入宿主细胞的是:A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、显微注射器D、电穿孔仪正确答案:C18.可以直接将外源基因导入植物细胞的是:A、电穿孔法B、微注射法C、生物炮法D、农杆菌法正确答案:D19.检测蛋白质的方法不是:A、Western印迹B、质谱C、Northern印迹D、免疫印迹正确答案:C20.对DNA进行切割的酶类包括:A、分裂酶B、连接酶C、制限酶D、聚合酶正确答案:C21.可以直接检测蛋白质的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Western blotD、Southern blot正确答案:C22.提供能量驱动翻译反应的化学键是:A、糖苷键B、磷酸酯键C、硫磷键D、氢键正确答案:B23.编码线粒体蛋白质的基因主要位于:A、细胞质DNAB、线粒体DNAC、细胞核DNAD、质粒DNA正确答案:B24.下列DNA酶类能切断磷酸二酯键的是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、替代酶D、制限酶正确答案:D25.在制备重组DNA时,使用琼脂糖的目的是:A、提供营养B、连接DNA段C、物理分离片段D、催化连接反应正确答案:C26.是mRNA而不是tRNA或rRNA的特征是:A、可翻译成蛋白质B、可与核糖体结合C、含有多肽链D、富含无义密码子正确答案:A27.对蛋白表达的后翻译调控方式是:A、剪接体B、RNA编辑C、蛋白质水解D、磷酸化正确答案:C28.编码tRNA的基因位于:A、线粒体B、核糖体C、细胞核D、细胞质正确答案:C29.单克隆抗体技术利用的真核细胞是:A、诱导的多能干细胞B、杆状病毒感染的淋巴细胞C、转化的肿瘤细胞D、融合瘤细胞正确答案:D30.原核生物基因组中不含有的序列是:A、终止子B、编码区C、启动子D、外显子正确答案:D31.制备cDNA文库常用的反转录酶来源于:A、大肠杆菌B、反刍动物C、艾滋病毒D、枯草杆菌正确答案:C32.编码氨基酸的三联密码所在的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、盖帽RNA正确答案:C33.参与DNA复制的关键酶是:A、RNA聚合酶B、连接酶C、DNA聚合酶D、选择酶正确答案:C34.编码rRNA的基因通常组织成:A、基因簇B、可变剪接体C、假基因D、反义基因正确答案:A35.编码 rRNA 的基因位于:A、线粒体DNAB、质粒DNAC、细胞核DNAD、细胞质DNA正确答案:C36.将DNA上的遗传信息转录为RNA的过程称为:A、翻译B、转录C、复制D、修复正确答案:B37.PCR技术依赖的关键酶是:A、连接酶B、聚合酶C、裂解酶D、制限酶正确答案:B38.编码氨酰tRNA合成酶的RNA是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNA正确答案:B39.可以实现定点诱变的技术是:A、CRISPR/Cas9B、ZFNsC、TALENsD、以上均可正确答案:D40.利用生物信息学分析推测基因功能的方法是:A、突变分析B、蛋白质互作C、序列比对D、同源建模正确答案:C41.可以改变染色体DNA序列的技术是:A、基因敲除B、基因转染C、基因沉默D、基因编辑正确答案:D42.下列不属于PCR反应体系的组成部分是:A、DNA模板B、聚合酶C、dNTPD、琼脂糖正确答案:D43.检测目的蛋白表达的方法不是:A、Southern blottingB、Western blottingC、Eastern blottingD、Northern blotting正确答案:A44.从cDNA库中可以获得的是:A、所有DNA片段B、编码区序列C、非编码区序列D、全部基因组序列正确答案:B45.可以直接克隆cDNA的是:A、质粒B、YACC、λ噬菌体D、人工染色体正确答案:A46.病毒载体导入宿主细胞的方法是:A、共转化B、显微注射C、电穿孔D、吸附感染正确答案:D47.可以识别启动子序列的转录因子是:A、β因子B、α 因子C、σ 因子D、Rho因子正确答案:C48.可以直接提取基因组DNA的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Southern blotD、盐析法正确答案:D49.基因敲除实验中所用对照组应为:A、目的基因缺失组B、野生型组C、质粒载体组D、siRNA处理组正确答案:B二、多选题(共35题,每题1分,共35分)1.PCR反应的原料不包括:A、引物B、载体酶C、聚合酶D、dNTPE、模板DNAF、琼脂糖G、无橡皮管封闭正确答案:BFG2.对DNA序列进行PCR扩增需要以下原料:A、模板DNAB、载体酶C、引物D、连接酶E、脱氧核苷三磷酸F、DNA聚合酶G、以上ACF正确答案:G3.质粒载体应具有下列哪些特征:A、大片段插入区B、可自主复制C、含有筛选位点D、与宿主互作E、含有克隆位点F、编码病毒蛋白G、低拷贝数正确答案:BCE4.在制备cDNA文库时需要用到的关键酶包括:A、连接酶B、PCR酶C、限制性内切酶D、RNA聚合酶E、反转录酶F、RNase HG、链化酶正确答案:EF5.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、mRNA前体E、单链RNAF、双链RNAG、环状RNA正确答案:B6.制备重组质粒的主要步骤是:A、载体线性化B、消化插入片段C、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆鉴定G、所有以上步骤正确答案:G7.对肿瘤基因组的检测可以应用:A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、Eastern印迹E、基因检测F、测序G、基因芯片正确答案:AEFG8.基因表达调控的机制包括:A、转录水平调控B、RNA水平调控C、翻译水平调控D、蛋白活性调控E、基因增幅F、肽链释放G、以上AD均可正确答案:G9.参与翻译过程的RNA包括:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNAE、snRNAF、反义RNAG、以上ABC均参与正确答案:G10.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、cDNAE、基因F、反义链G、互补链正确答案:B11.PCR反应的原料组成包含:A、模板 DNAB、上游引物C、下游引物D、DNA聚合酶E、脱氧核苷三磷酸F、缓冲液G、以上ABDEF正确答案:G12.基因敲入的方法可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9F、Cre-Lox重组系统G、反义RNA抑制正确答案:CDEF13.编码脱氧核糖的DNA单链为:A、编码链B、反义链C、互补链D、下游链E、正义链F、上游链G、载体链正确答案:B14.基因编辑技术包括:A、ZFNs技术B、TALENs技术C、CRISPR/Cas技术D、基因敲除E、RNAi技术F、慢病毒介导G、以上所有正确答案:ABC15.制备重组DNA的步骤包括:A、载体选择B、插入DNA获得C、双酶切D、连接反应E、转化F、筛选G、以上全部正确答案:G16.参与制备cDNA文库的关键酶类有:A、连接酶B、限制性内切酶C、聚合酶D、反转录酶E、核酸酶F、RNase HG、以上DE正确答案:G17.制备重组质粒的关键步骤不包括:A、载体的选择B、消化载体及插入片段C、连接反应D、PCR扩增插入片段E、转化感受态细胞F、筛选重组克隆G、测序验证正确答案:D18.启动子序列的特征包括:A、定位于基因转录起始点上游B、通常为AT富集区C、具有内含子D、与编码区互补E、与编码区反向验配F、与编码区部分重叠G、保守性非常低正确答案:AB19.直接参与蛋白质翻译的分子包括:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、RNA聚合酶F、释放因子G、所有以上分子正确答案:BCDF20.制备重组质粒需要下列步骤:A、载体选择B、消化载体和插入DNAC、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆筛选G、以上全部正确答案:G21.检测mRNA的方法包括:A、Northern杂交B、Western印迹C、Southern印迹D、荧光in situ杂交E、实时定量PCRF、RNA序列表达谱分析G、以上ABDF正确答案:G22.启动子通常位于:A、翻译起始点上游B、转录终止点下游C、翻译终止点下游D、基因内含子E、编码区F、转录起始点上游G、终止子下游正确答案:F23.编码氨基酸序列信息的核酸为:A、DNAB、RNAC、mRNAD、tRNAE、rRNAF、cDNAG、质粒正确答案:C24.基因敲入的技术可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9系统F、Cre-Lox重组系统G、反义DNA正确答案:CDEF25.制备重组 DNA 需要以下技术:A、载体准备B、PCR 扩增插入片段C、引物设计D、双酶切连接E、宿主细胞转化F、筛选重组克隆G、以上全部正确答案:G26.编码氨基酸序列的核酸为:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、miRNAF、cDNAG、基因正确答案:B27.编码mRNA的DNA单链被称为:A、编码链B、上游链C、下游链D、正义链E、反义链F、互补链G、载体链正确答案:E28.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤不包括:A、模板变性B、引物与模板杂交C、新链延伸合成D、反向转录E、新链变性F、产物检测G、增幅后转化正确答案:D29.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤包括:A、模板预变性B、引物与模板退火C、新链延伸合成D、产物检测E、反义链合成F、连接酶反应G、以上全部正确答案:ABCD30.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案:C31.抑制基因在体细胞中的表达方法有:A、siRNAB、基因敲除C、反义RNAD、CRISPR/Cas9E、基因激活F、启动子激活G、剪切反应激活正确答案:ABD32.检测mRNA表达水平的技术是:A、北方印迹B、西方印迹C、南方印迹D、东方印迹E、In situ杂交F、免疫组化G、芯片杂交正确答案:AEG33.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA 上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案:C34.可以提高基因在异源表达载体中的表达水平的方法不包括:A、扩增子克隆B、终止子序列调控C、引入变位信号D、改良启动子序列E、引入选择标记F、优化文库构建方法G、优化编码序列正确答案:F35.可以提取基因组DNA的方法有:A、PCR扩增B、Northern印迹C、Southern印迹D、过滤法E、质谱法F、限制性酶切G、盐析法正确答案:CG三、判断题(共38题,每题1分,共38分)1.基因敲入可以使用双链DNA分子实现。
分子生物学试题及答案(整理版)3篇
分子生物学试题及答案(整理版)第一篇:DNA结构与特性1. DNA的全称是什么?DNA的全称是脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid)。
2. DNA是由哪些基本单元组成的?DNA由四种不同的碱基组成,称为腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)。
3. DNA含有一条还是两条互补的链?DNA是由两条互补的链组成的,它们以双螺旋形式交织在一起。
4. DNA的双螺旋结构是由哪些部分组成的?DNA的双螺旋结构是由磷酸基团、脱氧核糖糖基和碱基三部分组成的。
5. DNA的碱基配对方式是什么?每个碱基都能与哪些其他碱基配对?DNA的碱基配对方式是A-T、C-G,即腺嘌呤与胸腺嘧啶互补,鸟嘌呤与胞嘧啶互补。
6. DNA的链方向是什么?DNA的两条链是相对方向相反的,即它们是“头对头”地排列在一起的。
7. DNA的复制方式是什么?该过程用哪种酶?DNA的复制方式是半保留复制,即每条新合成的DNA链都包含一个旧链和一个新链。
该过程用DNA聚合酶完成。
8. DNA序列编码的是什么?DNA序列编码的是生物体遗传信息的载体,包括基因和非编码区域。
9. DNA在哪些生物体中被发现?DNA存在于所有有细胞核和一些原核生物的细胞中。
10. DNA是如何被发现的?DNA是由克里克和沃森在1953年通过X射线晶体学研究得到的。
这项研究揭示了DNA的双螺旋结构,正式开启了分子生物学的新篇章。
第二篇:基因表达调控1. 什么是基因表达?基因表达是指基因信息从DNA转录为RNA,再转化为蛋白质的过程。
2. 基因表达是否受到调控?为什么?基因表达是受到调控的。
因为不同的细胞类型和不同的时期需要不同的基因表达模式来维持生命活动。
3. 给出三种调控基因表达的方式。
调控基因表达的方式有:转录水平调控、RNA后转录水平调节和转化水平调控。
4. 什么是启动子?在哪里找到它?启动子是一段DNA序列,位于转录开始位点上游,通常是几百个碱基对。
(完整版)分子生物学》试题及答案
《分子生物学》考试试题B课程号:66000360 考试方式:闭卷考试时间:一、名词解释(共10题,每题2分,共20分)1. SD 序列2. 重叠基因3.ρ因子4.hnRNA5. 冈崎片段、6. 复制叉(replication fork)7. 反密码子(anticodon):8. 同功tRNA9. 模板链(template strand)10. 抑癌基因二、填空题(共20空,每空1分,共20分)1.原核基因启动子上游有三个短的保守序列,它们分别为____和__区.2.复合转座子有三个主要的结构域分别为______、______、________。
3.原核生物的核糖体由_____小亚基和_____大亚基组成,真核生物核糖糖体由_____小亚基和_______大亚基组成。
4.生物界共有___个密码子,其中__ 个为氨基酸编码,起始密码子为__ _______;终止密码子为_______、__________、____________。
5. DNA生物合成的方向是_______,冈奇片段合成方向是_______。
6.在细菌细胞中,独立于染色体之外的遗传因子叫_______。
它是一种_______状双链DNA,在基因工程中,它做为_______。
三.判断题(共5题,每题2分,共10分)1.原核生物DNA的合成是单点起始,真核生物为多点起始。
( )2.在DNA生物合成中,半保留复制与半不连续复制指相同概念。
( )3.大肠杆菌核糖体大亚基必须在小亚基存在时才能与mRNA结合。
( )4.密码子在mRNA上的阅读方向为5’→ 3’。
( )5.DNA复制时,前导链的合成方向为5’→ 3’,后随链的合成方向也是5’→ 3’。
()四、简答题(共6题,每题5分,共30分)1.简述三种RNA在蛋白质生物合成中的作用。
2.蛋白质合成后的加工修饰有哪些内容?3.简述人类基因组计划的主要任务。
4.简述现代分子生物学的四大研究热点。
分子生物学DNA重组考试卷模拟考试题.docx
《DNA 重组》 考试时间:120分钟 考试总分:100分遵守考场纪律,维护知识尊严,杜绝违纪行为,确保考试结果公正。
1、自然情况下,在同一基因两个稍微不同拷贝(等位基因)间发生重组的过程中,一个等位基因经过()过程会被另一等位基因代替。
( ) 2、通过()基因重组,游动DNA 序列和一些病毒可进入或离开一条目的染色体。
( ) 3、()中,基因交换发生的同源DNA 序列间,最常见是发生在同一染色体的两个拷贝。
( ) 4、在交换区域,一个DNA 分子的一条链与另一个DNA 分子的一条链相互配对,在两个双螺旋间形成一个。
( ) 姓名:________________ 班级:________________ 学号:________________--------------------密----------------------------------封 ----------------------------------------------线-------------------------5、同过(),两个单链的互补DNA分子一起形成一个完全双链螺旋,人们认为这个反应从一个慢的()步骤开始。
()6、大肠杆菌的染色体配对需要(),它与单链DNA结合并使同源双链DNA 与之配对。
()7、一般性重组(同源重组)的主要中间体是(),也用它的发现者名字命名为()。
()8、重组通常从DNA()处开始。
()9、负责把RNA转录成互补DNA分子的()酶可以解释由()引起的永久性基因转变。
()10、利用自己的位点专一重组酶把自己从寄主基因组中的一个地方移到另一地方的遗传元件叫(),也叫作()。
()11、酵母的Tyl元件是一种(),它的转座需一段完整RNA转录物的合成,这个转录物又被复制成一个双螺旋DNA,随后被整合到一个新的染色体位置。
()12、F质粒的IS元件使F质粒与大肠杆菌染色体之间发生同源重组,产生一个()细菌。
重组DNA技术的基本工具 练习题
重组DNA技术的基本工具1.下列关于几种酶作用的叙述,不正确的是()A.DNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接B.RNA聚合酶能与基因的特定位点结合,催化遗传信息的转录C.一种限制酶能识别多种核苷酸序列,并切割出多种目的基因D.DNA聚合酶能把单个脱氧核苷酸分子连接成一条DNA单链2.下列关于如图所示黏性末端的说法错误的是()A.甲、乙、丙黏性末端是由不同的限制性内切核酸酶催化产生的B.甲、乙具有相同的黏性末端,可形成重组DNA分子,但甲、丙之间不能C.DNA连接酶作用位点在b处,催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键D.切割甲的限制性内切核酸酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子3.质粒是基因工程最常用的载体,下列关于质粒的说法正确的是()A.质粒在宿主细胞内都要整合到染色体DNA上B.质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型细胞器C.基因工程使用的质粒一般含有标记基因和一个至多个限制酶识别位点D.质粒上碱基之间数量存在A+G=U+C4.在基因工程中使用的载体有很多种类型,其中有一种穿梭载体,它不仅具有细菌质粒的复制原点,还有真核细胞的自主复制序列,在细菌中主要用于克隆和扩增目的基因,在酵母菌中主要用于基因表达分析。
下列相关叙述错误的是()A.穿梭载体在细菌和酵母菌中都能够复制B.穿梭载体中通常插入抗生素合成基因,便于进行目的基因的筛选C.在细菌中进行克隆利用了细菌生理结构简单、生长繁殖快的优点D.在酵母菌中的基因表达产物可被酵母菌中相应的细胞器进行修饰加工5.下列有关细菌质粒的叙述,正确的是()A.质粒是存在于细菌细胞中的一种颗粒状的细胞器B.质粒是细菌细胞中能自我复制的小型环状DNA分子C.质粒只有在进入受体细胞后在宿主细胞内才能复制D.细菌质粒的复制过程一定是在受体细胞外独立进行6.限制酶MunⅠ和限制酶Eco RⅠ的识别序列及切割位点分别是5′—C↓TTAAG—3′和5′—G↓AATTC—3′。
分子生物学复习题第八章重组DNA技术
分子生物学复习题第八章重组DNA技术第八章重组DNA技术一、选择单选1、下列哪项不属于生物工程?A. PCR技术B.重组DNA技术C.蛋白质工程D.酶工程E.细胞工程2、重组DNA技术中所用的限制酶是哪类?A.Ⅰ型限制酶B.Ⅱ型限制酶C.Ⅲ型限制酶D.Ⅳ型限制酶E.Ⅴ型限制酶3、可以利用蓝白筛选法筛选用pUC转化的重组DNA克隆,是因为pUC包含以下哪种元件?A.复制起点B. amp RC.acZ'D.多克隆位点MCSE.调节基因lacI4、关于λ噬菌体,以下叙述错误的是A.基因组DNA的部分序列并非溶原性生长所必需B.基因组DNA感染大肠杆菌后形成闭环结构C.在溶原性生长时进行滚环复制D.复制时形成多联体结构E.其转化的细菌经过培养形成噬菌斑5、pBR322质粒包含两个抗性基因:氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,据此可以利用哪种方法筛选重组DNA克隆?A.α互补B. PCRC.插入失活D.核酸分子杂交E.蓝白筛选6、制备重组DNA首先要制备目的DNA,要保证目的DNA的量和纯度能满足重组要求。
常用的制备方法不包括A.PCR扩增B.从组织细胞分离基因组DNAC.化学合成D.逆转录合成cDNAE.限制酶截取7、第一种应用于临床的重组蛋白是A.基因工程疫苗B.基因工程抗体C.激素D. 生长因子E.细胞因子8、在重组DNA技术中,目的DNA与载体在体外连接的过程称为DNA的体外重组。
体外重组的方法不包括:A.加人工接头连接B.加同聚物尾连接C.互补黏端连接D.连接E.平移连接9、重组DNA的宿主细胞有原核细胞和真核细胞。
用于制备基因文库的宿主细胞主要是A.哺乳动物细胞B.大肠杆菌C.酵母D.枯草杆菌E.昆虫细胞10、哪种方法要求宿主细胞必须是感受态细胞?A.CaCl2法B.病毒感染法C.脂质体载体法D.显微注射法E.穿刺法11、蓝白筛选属于筛选重组DNA克隆方法的哪种?A.PCR分析B.插入失活分析C.核酸分子杂交分析D.酶切分析E.免疫分析12、重组DNA技术领域常用的质粒DNA是A. T病毒基因组DNA的一部分B. 细菌染色体外的独立遗传单位C. 细菌染色体DNA的一部分D. 真核细胞染色体外的独立遗传单位E. 真核细胞染色体DNA的一部分13、某限制性内切核酸酶切割5’…GGGGGG▼AATTCC…3’序列后产生A. 5’突出末端B. 5’或3’突出末端C. 5’及3’突出末端D. 3’突出末端E. 平末端14、“克隆”某一目的DNA的过程不包括A. 重组DNA分子导人受体细胞B. 外源基因与载体的拼接C. 基因载体的选择与构建D. 筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞E. 表达目的基因编码的蛋白质15、关于基因文库及其构建,以下叙述错误的是A.基因文库包括基因组文库和cDNA文库B.构建基因组文库常用的克隆载体是λ噬菌体、粘粒和酵母人工染色体系统C.目前构建的cDNA文库可以包含一种生物基因组所含的全部编码序列D.真核生物cDNA文库中的目的基因可以在原核细胞内表达活性产物E.构建cDNA文库要用到逆转录酶多选:1、用目的DNA和质粒制备重组DNA,下列哪些工具酶是必需的?A.DNA聚合酶B.核酸酶C.连接酶D.限制酶E.修饰酶2、影响限制酶切割效率的因素有那些?A.底物纯度B.底物甲基化程度C.底物结构D.反应温度E.反应体系组成3、哪些因素会降低限制酶的特异性?A.高浓度限制酶B.高浓度甘油C.低离子强度D.用Mn2+取代Mg2+E.高pH值4、限制酶的应用非常广泛,包括:A.DNA重组B.质粒改造C. DNA杂交D.探针制备E.基因定位5、关于重组DNA技术使用的DNA 连接酶A.用以将目的DNA与载体共价连接成重组DNAB.包括大肠杆菌DNA连接酶和T4 DNA连接酶C.大肠杆菌DNA连接酶需要NAD,而T4 DNA连接酶需要ATPD.大肠杆菌DNA连接酶用于连接切口或互补黏端E.T4 DNA连接酶用于连接互补黏端或平端6、重组DNA技术常用的DNA聚合酶有A.DNA聚合酶ⅠB. Klenow片段C. Taq DNA聚合酶D. 逆转录酶E. T4 DNA聚合酶7、载体分为克隆载体和表达载体两类。
分子生物学各章节复习题
第一章1、概念:分子生物学DNA重组技术结构分子生物学“基因”的分子生物学定义:产生一条功能多肽链或功能RNA所必需的全部核甘酸序列。
2、用你现有的知识解释DNA为什么是遗传信息的载体。
3、关注了解近几年诺贝尔奖获得者及其科学发现。
第二章名词解释:DNA的C值:C值是一种生物的单倍体基因组DNA的总量。
C值矛盾(C Value paradox):C值一般随生物进化而增加,研究发现某些两栖类的C值甚至比哺乳动物还大,而在两栖类中C值变化也很大,这种C值与生物进化(结构和组织的复杂性)矛盾的现象称为C值矛盾。
冈崎片段DNA的半保留复制(semi-conservative replication):由亲代DNA生成子代DNA时,每个新形成的子代DNA中,一条链来自亲代DNA,而另一条链则是新合成的,这种复制方式称半保留复制。
半不连续复制(semi-conservative replication):DNA复制时其中一条子链的合成是连续的,而另一条子链的合成是不连续的,故称半不连续复制。
复制子(Replicon):从复制原点到终点,组成一个复制单位,叫复制子。
转座子(transposon):存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。
反转录转座子(retrotransposon):指通过RNA为中介,反转录成DNA后进行转座的可动元件。
单链结合蛋白(SSBP-single-strand binding protein):在DNA复制过程中,稳定已被解开的DNA单链,阻止复性和保护单链不被核酸酶降解。
DNA连接酶: 双链DNA中一条链有切口,一端是3ˊ-OH,另一端是5ˊ-磷酸基,连接酶可催化这两端形成磷酸二酯键,而使切口连接,不能将两条游离的DNA单链连接起来。
在DNA复制、损伤修复、重组等过程中起重要作用。
拓扑异构酶(DNA Topisomerase):拓扑异构酶І:使DNA一条链发生断裂和再连接,作用是松解(消除)负超螺旋。
重组DNA技术练习试卷1(题后含答案及解析)
重组DNA技术练习试卷1(题后含答案及解析) 题型有:1. A2型题 2. A1型题 3. B1型题 4. B1型题1.现在医学科学工作者通过获得大量特异DNA片段,结合适当的分析技术即可鉴定基因缺陷。
当前临床或研究室获得大量特异DNA片段最流行的方法是A.化学合成B.DNA合成仪合成C.从外周血细胞大量制备D.基因克隆E.聚合酶链反应正确答案:E 涉及知识点:重组DNA技术2.利用重组DNA技术发展新药物的叙述中,错误的是A.在功能研究,基因克隆基础上进行B.需构建适当的表达体系表达有生物活性的物质C.需经过科学的动物实验D.需进行严格的临床试验和药物审查E.胰岛素和雌激素都可是重组DNA 医药产品正确答案:E 涉及知识点:重组DNA技术3.关于基因工程的叙述,下列哪项是错误的A.也称基因克隆B.只有质粒DNA能被用作载体C.需供体DNAD.重组DNA转化或转染宿主细胞E.重组DNA需进一步纯化、传代和扩增正确答案:B 涉及知识点:重组DNA技术4.限制性内切酶的作用是A.特异切开单链DNAB.特异切开双链DNAC.连接断开的单链DNAD.切开变性的DNAE.切开错配的DNA正确答案:B 涉及知识点:重组DNA技术5.双脱氧末端终止法测序体系与PCR反应体系的主要区别是前者含有A.模板B.引物C.DNA聚合酶D.ddNTPE.缓冲液正确答案:D 涉及知识点:重组DNA技术6.重组体的筛选方法,不包括A.抗药性选择B.标志补救C.分子杂交法D.盐析法E.免疫化学方法及酶免检测分析正确答案:D 涉及知识点:重组DNA技术7.限制性内切酶是一种A.核酸特异的内切酶B.DNA特异的内切酶C.DNA序列特异的内切酶D.RNA特异的内切酶E.RNA序列特异的内切酶正确答案:C 涉及知识点:重组DNA技术8.遗传病的预防措施不包括A.产前诊断B.携带者测试C.症候前诊断D.致病基因的定位与鉴定E.遗传病易感性分析正确答案:D 涉及知识点:重组DNA技术9.有关限制内切酶的叙述,正确的是A.由噬菌体提取而得B.可将单链DNA随机切开C.可将双链DNA特异切开D.可将两个DNA片段连接起来E.催化DNA的甲基化正确答案:C 涉及知识点:重组DNA技术10.关于脆性X综合征的叙述,不正确的是A.在受累个体中(CGG)n重复序列异常扩增B.异常扩增使(CGG)n所属基因FMR-1不能转录相应的RNAC.发病原因是在脆性位点发生的染色体易位D.在正常群体中,(CGG)n重复序列有6~54个重复单位E.脆性位点即(CGG)n重复序列正确答案:C 涉及知识点:重组DNA技术11.在DNA重组中,催化形成重组DNA分子的酶是A.拓扑异构酶B.DNA连接酶C.解链酶D.DNA聚合酶E.反转录酶正确答案:B 涉及知识点:重组DNA技术12.有关理想质粒载体的特点,正确的是A.为线性单链DNAB.含有多种限制酶的单一切点C.含有同一限制酶的多个切点D.其复制受宿主控制E.不含耐药基因正确答案:B 涉及知识点:重组DNA技术13.重组DNA的连接方式不包括A.粘性末端连接B.平头末端连接C.粘性末端与平头末端连接D.DNA连接子技术E.DNA适配子技术正确答案:C 涉及知识点:重组DNA技术14.关于用作基因载体的质粒的叙述,不正确是A.是细菌染色体外的DNA分子B.能在宿主细胞独立自主地进行复制C.是双链线性分子D.易从一个细菌转移入另一个细菌E.常带抗药基因正确答案:C 涉及知识点:重组DNA技术15.不属于基因治疗方法的是A.基因扩增B.基因矫正C.基因置换D.基因增补E.基因失活正确答案:A 涉及知识点:重组DNA技术16.关于DNA克隆的叙述,不正确的是A.目的基因的获取B.外源基因和载体连接C.将重组DNA导入受体菌D.筛选出含有目的基因的转化菌E.常用到DNA解链酶正确答案:E 涉及知识点:重组DNA技术17.关于质粒的叙述,下列哪项是错误的A.大小约为数千个碱基对B.是双链的线性分子C.存在于大多数细菌的胞质中D.易从一个细菌转移入另一个细菌E.常带抗药基因正确答案:B 涉及知识点:重组DNA技术18.基因重组不包括A.转化B.转换C.整合D.转导E.转位正确答案:B 涉及知识点:重组DNA技术19.实验室内常用的连接外源性DNA载体DNA的酶是A.Taq酶B.T4DNA连接酶C.DNA聚合酶ID.DNA聚合酶ⅡE.DNA聚合酶Ⅲ正确答案:B 涉及知识点:重组DNA技术20.在基因工程中,将目的基因与载体DNA拼接的酶是A.DNA-polⅠB.DNA-polⅢC.限制性核酸内切酶D.DNA连接酶E.反转录酶正确答案:D 涉及知识点:重组DNA技术21.一种可靠的DNA诊断学方法必须符合的条件中,不包括A.能正确扩增靶基因B.仅用于检测内源基因C.能准确区分单个碱基的差别D.噪声低、不干扰DNA的鉴定E.便于完全自动化操作,适合大面积、大人群普查正确答案:B 涉及知识点:重组DNA技术22.关于重组DNA技术的叙述,错误的是A.质粒、噬菌体可作为载体B.限制性内切酶是主要工具酶之一C.重组DNA由载体DNA和目标DNA组成D.重组DNA分子经转化或转染可进入宿主细胞E.进入细胞内的重组DNA 均可表达目标蛋白正确答案:E 涉及知识点:重组DNA技术23.下列哪项不是限制性内切酶识别序列的特点A.特异性很高B.常由4-6个核苷酸组成C.一般具有回文结构D.少数内切酶识别序列中的碱基可以有规律地替换E.限制性内切酶的切口均是粘性末端正确答案:E 涉及知识点:重组DNA技术A.支原体B.衣原体C.细菌D.噬菌体E.酵母24.常用作原核表达体系的是正确答案:C 涉及知识点:重组DNA技术25.常用作真核表达体系的是正确答案:E 涉及知识点:重组DNA技术A.将目的基因插入载体质粒的耐药基因B.将亮氨酸自养型重组体转化亮氨酸异养型宿主C.利用同位素标记目的基因作探针D.提取重组体DNA限制性酶切后电泳E.用目的基因编码蛋白的抗体26.分子杂交手段筛选阳性重组体需要正确答案:C 涉及知识点:重组DNA技术27.营养依赖表型筛选重组体需要正确答案:B 涉及知识点:重组DNA技术A.大肠杆菌DNA聚合酶ⅠB.大肠杆菌DNA聚合酶ⅡC.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大片段D.大肠杆菌DNA聚合酶ⅢE.水生菌YT-1菌株的DNA聚合酶28.Klenow DN聚合酶正确答案:C 涉及知识点:重组DNA技术29.Tq DN聚合酶正确答案:E 涉及知识点:重组DNA技术A.96℃B.85℃C.72℃D.62℃E.55℃30.PCR变性温度一般为正确答案:A 涉及知识点:重组DNA技术31.PCR引物退火温度一般为正确答案:E 涉及知识点:重组DNA技术32.PCR引物延伸温度一般为正确答案:C 涉及知识点:重组DNA技术A.限制性内切酶B.反转录酶C.DNA连接酶D.碱性磷酸酶E.DNA聚合酶工33.识别DN回文结构并对其双链进行切割的是正确答案:A 涉及知识点:重组DNA技术34.用于DN片段与克隆载体共价连接的是正确答案:C 涉及知识点:重组DNA技术35.用于合成eDN的是正确答案:B 涉及知识点:重组DNA技术A.基因载体的切割B.外源基因与载体拼接C.重组DNA分子导入受体细胞D.筛选含有重组分子的受体细胞E.表达目的基因编码的蛋白质36.应用转化、转染技术正确答案:C 涉及知识点:重组DNA技术37.产生重组DN分子正确答案:B 涉及知识点:重组DNA技术38.获得DN克隆正确答案:D 涉及知识点:重组DNA技术A.pBR322B.DNAC.装配型质粒D.M13-DNAE.穿梭质粒39.环状双链DN,由4363bp组成,具有一个复制起始点,一个抗氨苄青霉素和一个抗四环素的基因正确答案:A 涉及知识点:重组DNA技术40.环形双链DN,具有两个复起始点,一个可在大肠杆菌中推动它的复制,另一个可在酵母细胞中推动复制正确答案:E 涉及知识点:重组DNA技术41.含单链环状DN,感染细菌后,可形成过渡阶段的双链环状复制型DN 正确答案:D 涉及知识点:重组DNA技术A.Northern印迹杂交B.亲和层析C.Southern印迹杂交D.Western印迹杂交E.离子交换层析42.用来鉴定蛋白质的技术是正确答案:D 涉及知识点:重组DNA技术43.用来鉴定RN的技术是正确答案:A 涉及知识点:重组DNA技术44.用来鉴定DN的技术是正确答案:C 涉及知识点:重组DNA技术。
DNA重组和重组DNA技术练习题
DNA重组和重组DNA技术练习题一、单选题1、同源重组()A、需要一段特定DNA序列的参与B、仅仅发生在两个相同的DNA分子的片段之间C、发生在两个DNA分子同源序列间的单链或双链片段的交换D、由转座酶催化E、需要参与重组的一条双链中两条单链都被切开正确答案:C2、下列关于同源重组的描述错误的是()A、同源重组是指两个同源DNA序列间的交换B、同源重组是在同源序列间不需断裂-连接过程的一种交换C、是基因敲除的基本原理D、乳腺癌易感基因BRCA2参与同源重组过程E、存在于真核生物和原核生物正确答案:B3、关于双链DNA的断裂,下列哪一项的描述是错误的()A、与哺乳动物中的异源二聚体(Ku)有关B、可涉及非同源重组C、总是涉及同源重组D、可导致遗传信息丢失E、可以引起突变或者基因表达的异常调节正确答案:C4、获得完全一样的DNA拷贝的方法是()A、克隆扩增B、PCRC、DNA片段的连接D、DNA转座E、逆转录合成正确答案:A5、免疫球蛋白基因重排的分子机制是()A、同源重组B、转座重组C、位点特异性重组D、转导作用E、接合作用正确答案:C6、限制性核酸内切酶的切割特点不包括()A、水解单链DNA为主B、不同酶可识别相同序列C、对称切割形成平端D、不同酶可形成相同黏性末端E、非对称切制形成黏性末端正确答案:A7、克隆载体的必备条件是()A、必须能直接切割连接操作B、多个单一酶切位点C、启动子序列D、分子量足够大E、自我复制正确答案:E8、能够将DNA片段以定向克隆方式插人载体的方法是()A、相同黏性末端连接B、平端连接C、T-A连接D、通过人工接头连接E、不同酶切割的黏性末端连接或平端与黏性末端连接正确答案:E9、不属于原核表达载体上的必备元件的是()A、启动子B、终止子C、筛选标志基因D、Poly(A)加尾信号E、克隆位点正确答案:D10、筛选重组质粒转化菌的方法不包括()A、插人失活法筛选B、酶切电泳法筛选C、Northerm印记杂交法筛选D、诱导目的蛋白表达的方法筛选E、抗生素的抗性筛选正确答案:C11、将重组DNA分子导人真核细胞的过程是()A、转化B、转导C、转染D、感染E、接合正确答案:C12、细菌与细菌接触引起质粒DNA从一个细菌进入另一细菌的过程是()A、转化B、转导C、转染D、感染E、接合正确答案:E13、细菌获取外源DNA并使其遗传性质发生改变的过程是()A、转化B、转导C、转染D、感染E、接合正确答案:A14、病毒从供体细胞进人受体细胞时引起DNA转移或基因重组的过程是()A、转化B、转导C、转染D、感染E、接合正确答案:B15、细菌通过相互接触引起质粒DNA从一个细菌进入另一细菌的过程是()A、转化B、转导C、转染D、感染E、接合正确答案:D16、具有5'→3'聚合、3'→5'外切及5'→3'外切活性,用于合成双链cDNA分子或片段连接的是()A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、DNA聚合酶D、Klenow片段E、逆转录酶正确答案:C17、催化DNA中相邻的5'-磷酸基团和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键,使DNA切口封合或使两个DNA 分子或片段连接起来的是()A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、DNA聚合酶D、Klenow片段E、逆转录酶正确答案:B18、具有完整5'→3'聚合及3'→5'外切活性,但缺乏5'→3'外切活性的是()A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、DNA聚合酶D、Klenow片段E、逆转录酶正确答案:D19、以RNA为模板的DNA聚合酶,用于合成cDNA,也可用于替代DNA聚合酶I进行缺口填补、标记或DNA 序列分析的是()A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、DNA聚合酶D、Klenow片段E、逆转录酶正确答案:E20、能够识别特异序列,切割DNA的是()A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、DNA聚合酶D、Klenow片段E、逆转录酶正确答案:A二、多选题1、DNA重组主要包括()A、同源重组B、位点特异性重组C、转座子转座D、细菌的接合、转化、转导”E、基因突变正确答案:ABCD2、克隆载体的基本特性()A、具有自主复制起点B、筛选标志C、多克隆酶切位点MCSD、启动子E、终止子正确答案:ABC3、下列能作为基因克隆载体的是()A、质粒B、M13噬菌体C、病毒RNAD、λ噬菌体E、酵母人工染色体正确答案:ABDE4、表达载体的基本特性()A、具有自主复制起点B、筛选标志C、多克隆酶切位点MCSD、启动子E、终止予正确答案:ABCDE5、II型限制性内切酶的特点包括()A、辨认的碱基--般为4~6个B、其识别不受DNA来源的限制C、酶切后的DNA可以产生黏性末端D、酶切后的DNA可以产生平末端E、能同时切开DNA双链正确答案:ABCDE三、填空题1、细菌中,可以通过____、____、____和____4种方式,在不同DNA分子间发生基因转移。
分子生物学考试复习题及答案
分⼦⽣物学考试复习题及答案第⼀章绪论⼀.简述分⼦⽣物学的主要内容。
1.DNA重组技术(⼜称基因⼯程)2.基因表达调控研究3.⽣物⼤分⼦的结构功能的研究——结构分⼦⽣物学4.基因组、功能基因组与⽣物信息学研究⼆.什么是遗传学的中⼼法则和反中⼼法则?遗传学中⼼法则:描述从⼀个基因到相应蛋⽩质的信息流的途径。
遗传信息贮存在DNA中,DNA被复制传给⼦代细胞,信息被拷贝或由DNA转录成RNA,然后RNA翻译成多肽。
反中⼼法则:由RNA逆转录到DNA,再由DNA转录到RNA,然后RNA翻译成多肽、蛋⽩质。
第⼆章染⾊体与DNA⼀、名词解释半保留复制:DNA复制时,以亲代DNA的每⼀条链作为模版,合成完全相同的两个双链⾃带DNA分⼦,每个⼦代DNA分⼦中都含有⼀条亲代DNA链的复制⽅式。
冈崎⽚段:在DNA复制过程中,前导链能连续合成,⽽滞后链只能是断续的合成5 3 的多个短⽚段,这些不连续的⼩⽚段称为冈崎⽚段。
复制⼦:从复制原点到终点,组成⼀个复制单位,叫复制⼦。
插⼊序列:最简单的转座⼦,不含有任何宿主基因,它们是细菌染⾊体或质粒DNA的正常组成部分。
DNA的变性和复性:变性:指DNA双链的氢键断裂,完全变成单链。
复性:指热变性的DNA缓慢冷却,单链恢复成双链。
双向复制:复制从⼀个固定的起始点开始,同时向两个⽅向等速进⾏。
引物酶:⼀种特殊的RNA聚合酶,在DNA模版上合成⼀段RNA链,这段RNA链是DNA复制起始时必需的引物。
转座⼦:存在与染⾊体DNA上可⾃主复制和位移的基本单位。
碱基切除修复:⾸先由糖苷⽔解酶识别特定受损核苷酸上的N-β糖苷键,在DNA上形成AP位点,由AP核酸内切酶把受损的核苷酸的糖苷-磷酸键切开,移去包括AP位点在内的⼩⽚段DNA,由聚合酶Ⅰ合成新⽚段,DNA连接酶最终把两者连接成新的DNA链。
DNA重组修复:即“复制后修复”。
机体细胞对在复制起始时尚未修复的DNA部位可先复制再修复。
在复制时,先跳过损伤部位,在和成链中留下⼀个缺⼝。
分子生物学技术之DNA重组技术( 35张)
AmpR
优点是具有较小的分子量,其长度为4 363bp。 不仅易于纯化,而且即使携带上一段6-8kb的外 源DNA片段,操作起来仍较为便利。
具有两种抗生素抗性基因以用作转化子的选择 记号。有较高的拷贝数,若经过氯霉素扩增, 每个细胞中可累积1000~3000个拷贝,为重组体 DNA的制备提供了极大的方便。
大肠杆菌质粒载体: 1、pSC101质粒载体
• 低拷贝数严紧型复制控制的大肠杆菌质粒载 体,平均每个寄主细胞仅有1~2个拷贝。
• 长9.09kb,带有四环素抗性基因(tetr)及 EcoRI 、 HindIII 、 BamHI 、 SalI 、 XhoI 、 PvuII以及SmaI等7种限制性核酸内切酶的 单酶切位点,在HindIII、BamHI和SalI等3 个位点插入外源基因,会导致tetr失活。
4、pUC质粒载体(包括四个部分):
(i)来自pBR322质粒的复制起点(ori);
(ii)氨苄青霉素抗性基因(ampr);
(iii)大肠杆菌β-半乳糖酶基因(lacZ)的启动 子及其编码α-肽链的DNA序列,此结构特称 为lacZ’基因;
(iv)位于lacZ ’基因中的靠近5’-端的一段多克 隆位点(MCS)区段,外源基因插入后破坏 了lacZ ’基因的功能。
5.1 基因操作的基本工具 (一)限制性核酸内切酶
能够识别DNA上的特定碱基序列并从这个位 点切开DNA分子。
第 一 个 核 酸 内 切 酶 EcoRI 是 Boyer 实 验 室 在 1972年发现的,它能特异性识别GAATTC序 列,将双链DNA分子在这个位点切开并产生 具有粘性末端的小片段。
大肠杆菌 pSC101 质粒载体 示意图。
DNA技术考试试题及答案
DNA技术考试试题及答案尊敬的考生,以下是DNA技术考试的试题及答案,希望对您的学习和备考有所帮助。
一、选择题(每题2分,共40分)1. DNA(去氧核糖核酸)的完整名称是:A. 核酸酶B. 脱氧核糖核酸C. 核酸脱氧D. 核酸聚酶答案:B. 脱氧核糖核酸2. PCR(聚合酶链式反应)是一种用于扩增DNA片段的技术,PCR反应体系中至少包含哪些组分?A. DNA模板、引物、dNTPs、聚合酶B. 引物、RNA、dNTPs、聚合酶C. DNA模板、引物、NTPs、聚合酶D. RNA、DNA模板、引物、聚合酶答案:A. DNA模板、引物、dNTPs、聚合酶3. 以下哪种方法可以将DNA片段移入蛋白质凝胶中进行电泳分离?A. RT-PCRB. 荧光PCRC. 蛋白质电泳D. Southern印迹法答案:D. Southern印迹法4. 克隆是指:A. 多个基因片段的连接B. DNA序列的扩增C. DNA重组体系的构建D. 进化过程中的基因突变答案:C. DNA重组体系的构建5. DNA测序是用于确定DNA序列的方法。
目前广泛应用的DNA测序方法是:A. SDS-PAGEB. 电泳法C. Sanger测序法D. PCR法答案:C. Sanger测序法二、简答题(每题10分,共40分)1. 请简要介绍PCR技术的原理并说明其在分子生物学中的应用。
答案:PCR技术,即聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),是一种用于扩增DNA片段的技术。
其原理是通过反复的DNA变性(解旋)、引物结合和DNA合成来扩增目标DNA。
PCR在分子生物学中的应用非常广泛。
它可以用于:- DNA序列的扩增,从而提供了大量用于测序、克隆和定量分析的DNA- 遗传性疾病的分子诊断和预测- 突变分析和基因多态性的研究- DNA指纹鉴定和亲子鉴定- 细菌和病毒的检测等2. 请简述蛋白质电泳的原理,并说明其在研究中的重要性。
分子生物学-DNA重组
分子生物学-DNA重组(总分:567.00,做题时间:90分钟)一、名词解释(总题数:22,分数:44.00)1.同源重组(homologous recombination)(分数:2.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:(依赖于大范围的DNA同源序列的联会,联会的部分不受限制,重组可发生在联会部分的任何位置上。
在重组过程中,两条染色体或2个DNA分子相互交换对等的部分。
)解析:2.一般重组(general recombination)(分数:2.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:(即非特异重组或同源重组。
)解析:3.位点特异性重组(site-specific recombination)(分数:2.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:(在能识别特定的核苷酸序列的重组酶作用下,DNA分子间的重组。
重组分子间不一定要求碱基配对,即使是碱基配对也只有少数几个碱基形成异源双链体。
这种重组最初是从x噬菌体基因组进入和离开宿主菌染色体的途径中发现的。
)解析:4.转座重组(transposition recombination)(分数:2.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:(重组发生在序列不相同的DNA分子间,在形成重组分子时往往依赖于DNA的复制而完成重组过程,而不依赖于DNA序列间的同源性。
分子生物学检验技术模拟试题与答案
分子生物学检验技术模拟试题与答案1、组织DNA提取中,苯酚-氯仿抽提离心分三层,DNA位于A、上层B、中间层C、下层D、中间层和下层E、上下均有答案:A2、下列哪种波长处测定DNA吸光值的变化可作为监测DNA是否发生变性的指标A、230nm波长B、210nm波长C、260nm波长D、280nm波长E、550nm波长答案:C3、下列说法错误的是A、用于RNA检测的样本短期可保存在-20℃B、用于PCR检测的样本可用肝素作为抗凝剂C、如使用血清标本进行检测应尽快分离血清D、外周血单个核细胞可从抗凝全血制备E、用于核酸提取的痰液标本应加入1mol/L NaOH初步处理答案:B4、以质粒为载体,将外源基因导入受体菌的过程称为A、转化B、转染C、感染D、转导E、转位答案:A5、DNA变性时其结构变化表现为A、磷酸二酯键断裂B、N—C糖苷键断裂C、戊糖内C—C键断裂D、碱基内C—C键断裂E、对应碱基间氢键断裂答案:E6、pBR322质粒包含氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,据此可以利用哪些方法筛选重组DNA克隆A、插入失活筛选法B、α-互补筛选法C、免疫化学筛选法D、分子杂交筛选法E、“蓝白斑”筛选法答案:A7、对人类基因组计划的完成起了重要作用的测序技术是A、焦磷酸测序法B、化学裂解法C、双脱氧终止法(末端合成终止法)D、Illumina Solexa测序技术E、单分子DNA测序答案:C8、下列描述最确切表达质粒DNA作为克隆体特性的是A、小型环状双链DNA分子B、携带某些抗生素抗性基因C、具有自我复制功能D、在细胞分裂时恒定地传给子代细胞E、获得目的基因答案:C9、菌落杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、用于基因定位分析C、不仅可以检置DNA样品中是否存在某特定的基因,还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息D、阳性菌落的筛选E、检测目标是 RNA答案:D10、重组DNA技术领域常用的质粒DNA是A、细菌染色体DNA的一部分B、细菌染色体外的独立遗传单位C、真核细胞染色体DNA的一部分D、病毒基因组DNA的一部分E、酵母人工染色体答案:B11、基因工程操作中转导是指A、重组质粒导入宿主细胞B、把DNA重组体导入真核细胞C、DNA重组体导入原核细胞D、把外源DNA导入宿主细胞E、以噬菌体或病毒为载体构建的重组DNA导入宿主细胞答案:E12、DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不恰当A、同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似B、腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数C、DNA双螺旋中碱基对位于外侧D、二股多核苷酸链通过A与T或C与C之间的氢键连接E、体内以B构型最常见答案:C13、属于核糖核酸二级结构的描述是A、核苷酸在核酸长链上的排列顺序B、tRNA的三叶草结构C、DNA双螺旋结构D、DNA的超螺旋结构E、DNA的核小体结构答案:B14、病毒基因组的编码序列在基因组中所占比例为A、大于10%B、小于90%C、小于5%D、大于90%E、小于10%答案:D15、下列关于mRNA的叙述,错误的是A、在细胞核内由hnRNA剪接而成B、真核生物mRNA有“帽子”和“多聚A尾”结构C、生物体中各种mRNA的长短不同,相差很大D、是各种RNA分子中半衰期最长的一类E、其功能是作为蛋白质合成的模板答案:D16、下列对原核生物基因组结构特点的叙述,错误的是:A、只有一个复制起始点B、结构基因多为多拷贝C、大多数结构基因组成操纵子结构D、结构基因无重叠现象E、重复基因少答案:B17、用于蛋白质检测的标本长期保存于A、温室B、4℃C、8℃D、-20℃E、-70℃答案:E18、长期保存核酸样品的适宜温度是A、0~4℃B、-20℃C、-50℃D、-80℃E、室温答案:D19、组织DNA提取中,沉淀DNA的是A、抑制DNase、B、沉淀DNAC、减少液体表面张力D、抑制RNase、E、去除蛋白质答案:A20、以等位基因特异性的寡核苷酸探针杂交法诊断某常染色体隐性遗传病时,若能与突变探针及正常探针结合,则该样本A、正常人B、杂合体患者C、纯合体患者D、携带者E、不能确定答案:B21、含稀有碱基最多的RNA是A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、hnRNAE、snRNA答案:C22、对于tRNA的叙述,不正确的是A、tRNA通常由70—80个核苷酸组成B、细胞内有多种tRNAC、参与蛋白质生物合成D、每种氨基酸只有一种tRNA转运E、以上都不正确答案:D23、基因工程的特点是A、在分子水平上操作,回到细胞水平上表达B、在分子水平上操作,在分子水平上表达C、在细胞水平上操作,在分子水平上表达D、在细胞水平上操作,在细胞水平上表达E、在细胞水平上操作,在生物个体水平上表达答案:A24、分子杂交实验不能用于:A、单链DNA与RNA分子之间的杂交B、双链DNA与RNA 分子之间的杂交C、单链RNA分子之间的杂交D、单链DNA分子之间的杂交E、抗原与抗体分子之间的杂交答案:B25、重组DNA技术中常用的限制性内切酶为A、I类限制性内切酶B、Ⅱ类限制性内切酶C、核酸酶D、Ⅲ类限制性内切酶E、Klenow片段答案:B26、DNA的二级结构是A、β-折叠B、α-螺旋C、双螺旋结构D、三叶草结构E、锌指结构答案:C27、用切割法从哺乳动物染色体中获得目的的基因,进行表达的主要困难是A、目的基因太大,在原核细胞宿主中不能表达B、含有内含子序列,在原核细胞能表达,但原核细胞不具备转录后加工体系,不能得到有活性的mRNAC、没有足够容量的载体D、表达量非常少E、易被宿主的限制内切酶降解答案:B28、DNA分子中G、C含量越高A、解链越容易B、氢键破坏所需要温度越高C、信息含量越丰富D、50%复性时需要的温度越高E、螺旋结构更稳定答案:B29、重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是:A、DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、DNA连接酶D、RNA连接酶E、限制性核酸内切酶答案:C30、基因工程亦称为A、基因的剪切B、细胞克隆C、细胞工程D、重组DNA技术E、生物反应器答案:D31、以下说法,不正确的是A、引物自身不应该存在互补序列B、引物中的碱基组成应该尽可能与靶基因两侧序列互补C、应考虑上下游引物具有相似的Tm值D、引物的5’端必须和模板严格配对结合E、引物应保证一定长度,防止非特异扩增答案:D32、下列有关核酸分子杂交的叙述,不正确的是A、杂交可发生在碱基序列部分互补的核酸分子之间B、杂交可发生在碱基序列完全互补的核酸分子之间C、具有双螺旋结构的核酸分子之间才能杂交D、不同来源的DNA分子之间可以杂交E、以上都不正确答案:C33、限制性核酸内切酶切割DNA后,产生A、5’磷酸基和3’羟基基团的末端B、3’磷酸基和5’羟基基团的末端C、5’羟基和3’羟基基团的末端D、5’磷酸基和3’磷酸基团的末端E、5’磷酸基和2’羟基基团的末端答案:A34、DNA碱基构成的Chargaff规则是A、A=T,C=G;A+G=T+CB、A>T,G=C;A+C>T+CC、A>T,G>C;A+G>T+CD、A=T,G>C;A+G>T+CE、A=T, G=C A+C=T+G答案:A35、关于 PCR 的基本成分叙述错误的是:A、特异性引物B、耐热性DNA聚合酶C、ddNTPD、含有Mg 2+的缓冲液E、模板答案:C36、核酸变性后可发生A、减色效应B、增色效应C、最大吸收峰波长发生转移D、失去对紫外线的吸收能力E、沉淀答案:B37、DNA分子的体外连接方法包括A、人工接头连接B、同聚物加尾连接C、黏末端连接D、平末端连接E、以上都对答案:E38、缺陷型病毒指A、有遗传缺陷的病毒B、正在形成完整病毒颗粒的病毒C、正在形成缺陷型病毒颗粒的病毒D、整合入宿主细胞的缺陷型病毒基因组DNAE、以上都不是答案:D39、下列哪一步骤不属于基因工程范围A、制备目的基因B、制备重组体C、转化宿主细胞D、转化的阳性克隆的筛选E、表达产物的分离,纯化答案:E40、核酸具有紫外吸收能力因为A、嘌呤和嘧啶环中有共轭双键B、嘌呤和嘧啶中有氮原子C、嘌呤和嘧啶连接了核糖D、嘌呤和嘧啶中有硫原子E、嘌呤和嘧啶中有巯基答案:A41、关tRNA分子的恰当解释是A、tRNA的功能主要在于结合蛋白质合成所需要的各种辅助因子B、tRNA分子多数由80个左右的氨基酸组成C、tRNA的 3'-末端有氨基酸臂D、反密码环中的反密码子的作用是结合DNA中相互补的碱基E、以上都不正确答案:C42、基因工程操作过程可以按顺序概括为以下几个字:A、转、筛、分、接、切B、分、切、接、转、筛C、分、转、接、筛、切D、转、分、接、切、筛E、切、分、转、接、筛答案:B43、下述双链DNA序列(仅列出其中一条链序列)中,不属于完全回文结构的是A、TGAATTCAB、AGAATTCTC、GGAATTCCD、CGTTAAGCE、AAGATCTT答案:D44、基因工程中常用的工具酶有限制性核酸内切酶,下面对该酶的叙说正确的是A、总是产生平头末端B、识别三联体重复C、识别甲基化DNA序列D、双螺旋双股均被切开E、总是产生粘性末端答案:D45、下述哪种碱基,只存在于RNA而不存在于DNA中A、鸟嘌呤B、腺嘌呤C、尿嘧啶D、胸腺嘧啶E、以上都不是答案:C46、聚合酶链反应(PCR)过程中需要的酶是:A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、耐热DNA聚合酶D、反转录酶E、DNA聚合酶Ⅰ答案:C47、属于非直接筛选法筛选转化细菌是否含有质粒的方法是A、抗药性筛选B、营养互补筛选C、免疫化学筛选D、原位杂交筛选E、Southern印迹法答案:C48、引物设计时G+C含量在引物中一般占A、30%-60%B、20%-40%C、45%-55%D、含量高低无所谓E、大于60%答案:C49、下面哪一种技术不能用于鉴别核酸分子序列:A、Southern印迹杂交B、Northern印迹杂交C、斑点印迹D、原位杂交E、Western 印迹杂交答案:E50、在分子生物学领域,重组DNA又称A、酶工程B、蛋白质工程C、细胞工程D、基因工程E、DNA工程答案:D51、具有碱基互补区域的单链又可以重新结合形成双链,这一过程称为A、变性B、复性C、复杂性D、杂交E、探针答案:B52、寡核苷酸探针的最大优势是A、杂交分子稳定B、可以区分仅仅一个碱基差别的靶序列C、易标记D、易合成E、易分解答案:B53、双链DNA的Tm值主要与下面哪项有关A、A-T含量B、C-T含量C、A-G含量D、T-G含量E、C-G含量答案:E54、下列关于RNA的说法哪项是不正确的A、mRNA和tRNA三种B、mRNA中含有遗传密码C、tRNA是最小的一种RNAD、胞浆中只有mRNAE、rRNA是合成蛋白质的场所答案:D55、以等位基因特异的寡核行微探针余交法给诊断某常染色体隐性道遗传病时,若能与突变研及正常探针结合,则该样本为A、正常人B、杂合体患者C、纯合体患者D、携带者E、不能确定答案:B56、下列说法正确的是A、液体石蜡切片中缩短蛋白酶K的消化时间可增加提取DNA片段的长度B、组织样本不需要蛋白酶K消化即可进行核酸提取C、用于提取核酸的石蜡切片需要先用二甲苯脱蜡D、用于提取核酸的石蜡切片不需要脱蜡即可进行核酸提取E、新鲜的组织样本需要先用二甲苯脱蜡才能进行核酸提取答案:C57、下列有关mRNA的叙述,正确的是A、为线状单链结构,5’端有多聚腺苷酸帽子结构B、可作为蛋白质合成的模板C、链的局部不可形成双链结构D、3’末端特殊结构与mRNA的稳定无关E、三个相连核苷酸组成一个反密码子答案:B58、DNA携带生物遗传信息意味着A、病毒的侵染是靠蛋白质转移至宿主细胞来实现的B、不论哪一物种碱基组成均应相同C、同一生物不同组织的DNA,其碱基组成相同D、DNA碱基组成随机体年龄及营养状况而改变E、同一物种碱基组成不同答案:C59、PCR技术的缺点是:A、易出现假阴性结果B、易出现假阳性结果C、结果灵敏度不高D、结果特异性不强E、操作繁琐答案:B60、DNA双螺旋之间氢键断裂,双螺旋解开,DNA分子成为单链,这一过程称为A、变性B、复性C、复杂性D、杂交E、探针答案:A61、下列哪种物质在 PCR 反应中不能作为模板:A、RNAB、单链DNAC、cDNAD、肽链E、双链DNA答案:D62、下列关于DNA双螺旋结构的叙述,正确的是A、一条链是左手螺旋,另一条链是右手螺旋B、双螺旋结构的稳定纵向靠氢键维系C、A+T与G+C的比值为1D、两条链的碱基间以共价键相连E、磷酸、脱氧核糖构成螺旋的骨架答案:E63、下列关于质粒DNA的描述中作为克隆载体最基本的原因是:A、小型环状双链DNA分子B、携带有某些抗性基因C、在细胞分裂时恒定地传给子代细胞D、独立于染色质具有复制功能的遗传单位E、获得目的基因答案:D64、以下哪种PCR技术,广泛应用于组织胚胎学和肿瘤学的研究?A、原位PCRB、差异显示PCRC、反向PCRD、不对称PCRE、RT-PCR答案:A65、基因芯片显色和分析测定方法主要为A、荧光法B、生物素法C、32P法D、地高辛法E、放射法答案:A66、一般来说,设计的寡核目有酸探针的的长度为A、2-10bpB、17-50bpC、60-100bpD、100-200bpE、200-300bp答案:B67、下列有关DNA变性的叙述,不正确的是A、两条多核苷酸链间氢键断裂B、分子中磷酸二酯键断裂C、DNA中含GC碱基对多则Tm值高D、两条多核苷酸链分离E、A 260 增高答案:B68、DNA序列测定中,待测DNA克隆到质粒载体后,通过下列哪种方法处理重组载体,使测序引物便于结合模板DNA?A、碱变性B、加热C、紫外线照射D、酸变性E、乙醇处理答案:A69、利用聚合酶链反应扩增特异DNA序列重要原因之一是:A、反应体系内存在特异DNA模板B、反应体系内存在特异RNA模板C、反应体系内存在特异DNA引物D、反应体系内存在特异RNA引物E、反应体系内存在Taq DNA聚合酶具有识别特异DNA序列的作用答案:C70、核酸对紫外线的最大吸收峰是。
分子生物学试题与答案(重点版)
广石化分子生物学试题及答案一、名词解释1.cDNA与cccDNA:cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA;cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。
2.标准折叠单位:蛋白质二级结构单元α-螺旋与β-折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块,此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。
几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型,乃至他们的组合型来予以描述,因此又将其称为标准折叠单位。
3.CAP:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMPreceptorprotein),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMPactivatedprotein)4.回文序列:DNA片段上的一段所具有的反向互补序列,常是限制性酶切位点。
5.micRNA:互补干扰RNA或称反义RNA,与mRNA序列互补,可抑制mRNA的翻译。
6.核酶:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。
7.模体:蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域8.信号肽:在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。
9.弱化子:在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。
10.魔斑:当细菌生长过程中,遇到氨基酸全面缺乏时,细菌将会产生一个应急反应,停止全部基因的表达。
产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp) 和鸟苷五磷酸(pppGpp)。
PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子,而是影响一大批,所以称他们是超级调控子或称为魔斑。
11.上游启动子元件:是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列,-10 区的TATA、-35区的TGACA及增强子,弱化子等。
112.DNA探针:是带有标记的一段已知序列DNA,用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。
13.SD序列:是核糖体与mRNA结合序列,对翻译起到调控作用。
分子生物学检验技术模拟考试题含答案
分子生物学检验技术模拟考试题含答案一、单选题(共80题,每题1分,共80分)1、cDNA文库正确的叙述是A、包含了基因组DNA的所有序列B、又称DNA文库C、只包含内含子D、包含了内含子和外显子E、只包含外显子正确答案:E2、进行蛋白质溶液凝胶过滤脱盐时,宜选用的葡萄糖凝胶是A、G-150B、G-100C、G-75D、G-200E、G-25正确答案:E3、基因工程中,将目的基因与载体DNA拼接的酶是A、DNA聚合酶ⅢB、反转录酶C、限制性内切核酸酶D、DNA连接酶E、DNA聚合酶I正确答案:D4、质粒的主要成分是A、多糖B、DNAC、蛋白质D、脂类E、氨基酸衍生物正确答案:B5、机体生理功能的执行者是A、基因B、脂类C、蛋白质D、mRNAE、糖类正确答案:C6、有关DNA的变性是A、DNA分子中糖苷键的断裂B、DNA分子中磷酸二酯键的断裂C、DNA分子中碱基的水解D、DNA分子中碱基间氢键的断裂E、DNA分子由正超螺旋转变成负超螺旋正确答案:D7、限制性核酸内切酶通常的识别序列是A、回文对称序列B、黏性末端C、NA聚合酶附着点D、聚腺一苷酸E、甲基化“帽”结构正确答案:A8、下述哪种碱基,只存在于RNA而不存在于DNA中A、尿嘧啶B、胸腺嘧啶C、鸟嘌呤D、以上都不是E、腺嘌呤正确答案:A9、Southerm印迹杂交可以用于A、蛋白水平的检测B、阳性菌落的筛选C、不仅可以检测DNA样品中是否存在某特定的基因,还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息D、用于基因定位分析E、检测的目标是RNA正确答案:C10、关于癌基因论述正确的是A、有癌基因的细胞一定发生癌变B、癌基因只存在于病毒中C、细胞癌基因是细胞的正常基因D、甲基化程度增高导致原癌基因被激活E、细胞癌基因来源于病毒癌基因正确答案:C11、在核酸中,核苷酸之间的连接方式是A、氢键B、3’,5’-磷酸二酯键C、2’,5’-磷酸二酯键D、2’,3’-磷酸二酯键E、糖苷键正确答案:B12、DNA或RNA样品中不同序列的总长度,称为A、探针B、杂交C、变性D、复性E、复杂性正确答案:E13、通常不存在RNA中,也不存在DNA中的碱基是A、尿嘧啶B、黄嘌吟C、腺嘌呤D、鸟嘌呤E、胸腺嘧啶正确答案:B14、PCR检测中,经过个n循环的扩增,拷贝数将增加A、NB、2 n+1C、2 nD、2nE、n²正确答案:C15、绝大多数真核生物mRNA 3’末端有A、帽子结构B、终止密码C、起始密码D、PolyAE、CCA-OH正确答案:D16、基因工程亦称为A、生物反应器B、重组DNA技术C、细胞工程D、基因的剪切E、细胞克隆正确答案:B17、下列关于DNA双螺旋结构的叙述,正确的是A、一条链是左手螺旋,另一条链是右手螺旋B、双螺旋结构的稳定纵向靠氢键维系C、A+T与G+C的比值为1D、磷酸、脱氧核糖构成螺旋的骨架E、两条链的碱基间以共价键相连正确答案:D18、tRNA分子上3’端CCA-OH的功能为A、识别并结合核蛋白体B、提供-OH基与氨基酸结合C、被剪接的组分D、形成局部双链E、辨认mRNA上的密码子正确答案:B19、一般来说,设计的寡核目有酸探针的的长度为A、17-50bpB、200-300bpC、100-200bpD、2-10bpE、60-100bp正确答案:A20、下列DNA中,一般不用作克隆载体的是A、质粒DNAB、噬菌体DNAC、酵母人工染色体D、病毒DNAE、大肠杆菌DNA正确答案:E21、组成核酸分子的碱基主要有A、2种B、6种C、5种D、3种E、4种正确答案:C22、PCR技术的本质是A、核酸重组技B、核酸连接技术C、核酸变性技术D、核酸杂交技术E、核酸扩增技术正确答案:E23、关于基因组,说法错误的是A、基因组是一套完整的单倍体的遗传物质的总和B、基因组包括编码序列和非编码序列C、原核生物和真核生物的基因组都是DNAD、基因组是一个细胞内全部DNA的总和E、原核生物都具有自己独特的基因组正确答案:D24、下列说法正确的是A、组织样本不需要蛋白酶K消化即可进行核酸提取B、液体石蜡切片中缩短蛋白酶K的消化时间可增加提取DNA片段的长度C、用于提取核酸的石蜡切片不需要脱蜡即可进行核酸提取D、用于提取核酸的石蜡切片需要先用二甲苯脱蜡E、新鲜的组织样本需要先用二甲苯脱蜡才能进行核酸提取正确答案:D25、病毒基因组的编码序列在基因组中所占比例为A、大于10%B、小于5%C、小于90%D、小于10%E、大于90%正确答案:E26、基因克隆是指A、单一DNA重组体的无性繁殖系B、酶工程C、细胞工程D、蛋白质工程E、单一细胞的无性群体正确答案:A27、DNA受热变性时,出现的现象是A、最大光吸收峰波长发生转移B、溶液黏度增加C、碱基对以共价键连接D、在260nm波长处的吸光度增高E、多聚核苷酸链水解成单核苷酸正确答案:D28、下列哪种方法不是根据蛋白分子大小进行蛋白分离纯化的是A、凝胶过滤层析B、离子交换层析C、超滤D、离心E、透析正确答案:B29、构成核酸的基本单位是A、多核苷酸B、核苷C、核苷酸D、环核苷酸E、磷酸戊糖正确答案:C30、在筛选DNA重组体时,采用插入灭活法,该方法是指A、载体携带目的基因后,目的基因失活B、目的基因插入载体的抗药性标志内,灭活了载体上插入部位的抗药性标记C、目的基因插入载体后,使载体失活D、以上都不是E、目的基因插入载体的启动子部位,灭活了启动子正确答案:B31、以等位基因特异性的寡核苷酸探针杂交法诊断某常染色体隐性遗传病时,若能与突变探针及正常探针结合,则该样本A、携带者B、正常人C、不能确定D、纯合体患者E、杂合体患者正确答案:E32、不同的核酸分子其解链温度(Tm)不同,以下关于Tm的说法正确的是A、核酸愈纯,Tm范围愈大B、核酸分子愈小,Tm范围愈大C、DNA中AT对比例愈高,Tm愈高D、DNA中GC对比例愈高,Tm愈高E、Tm较高的核酸常常是RNA正确答案:D33、重组DNA技术领域常用的质粒DNA是A、细菌染色体DNA的一部分B、细菌染色体外的独立遗传单位C、病毒基因组DNA的一部分D、酵母人工染色体E、真核细胞染色体DNA的一部分正确答案:B34、DNA变性时其结构变化表现为A、对应碱基间氢键断裂B、N—C糖苷键断裂C、碱基内C—C键断裂D、戊糖内C—C键断裂E、磷酸二酯键断裂正确答案:A35、确切地讲,cDNA文库包括含:A、一个生物体组织或细胞的全部mRNA信息B、一个生物体组织或细胞的全部基因信息C、一个物种的全部基因信息D、一个生物体组织或细胞所表达mRNA信息E、一个物种的全部mRNA信息正确答案:D36、tRNA氨基酸臂的特点是A、3’-末端有磷酸B、3’-末端有CCA-OH结构C、有帽子结构D、由九个碱基对组成E、5’-末端有羟基正确答案:B37、1953年,Watson和Crick提出A、多核苷酸DNA链通过氢键连接成双螺旋B、以上都不是C、三个连续的核苷酸代表一个遗传密码D、DNA的复制是全保留的,常常形成亲本-子代双螺旋杂合链E、遗传物质通常是DNA而非RNA正确答案:A38、关于探针叙述错误的是:A、可以是基因组 DNA 片段B、可以是抗体C、带有特殊标记D、具有特定序列E、必须是双链的核酸片段正确答案:E39、DNA载体的哪一个基本性质,与其无性繁殖的关系最密切A、LacZ序列B、自我表达能力C、青霉素抗性D、自我转录能力E、自我复制能力正确答案:E40、RNA的核苷酸间由哪种键相连接A、磷酸酯键B、糖苷键C、磷酸二酯键D、疏水键E、氢键正确答案:C41、核酸具有紫外吸收能力因为A、嘌呤和嘧啶环中有共轭双键B、嘌呤和嘧啶中有氮原子C、嘌呤和嘧啶中有巯基D、嘌呤和嘧啶中有硫原子E、嘌呤和嘧啶连接了核糖正确答案:A42、与pCAGCT互补的DNA序列是A、pGTCGAB、以上都不是C、pAGCUGD、pAGCTGE、pGUCGA正确答案:D43、对人类基因组计划的完成起了重要作用的测序技术是A、Illumina Solexa测序技术B、焦磷酸测序法C、双脱氧终止法(末端合成终止法)D、化学裂解法E、单分子DNA测序正确答案:C44、采用配体的特异性亲和力分离纯化蛋白的方法是A、离子交换层析B、凝胶过滤层析C、盐析D、离心E、亲和层析正确答案:E45、双脱氧终止法一次反应能测定的核酸序列的长度是:A、< 1000bpB、100bpC、> 1000bpD、200bpE、< 500bp正确答案:A46、下列不属于提取DNA原则的是A、排除RNA分子的污染与干扰B、保留所有核酸分子C、蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度D、保证核酸一级结构均完整性E、核酸样品中不应该存在有机溶剂和过高浓度的金属离子正确答案:B47、—个DNA分子中,若T所占摩尔比为28.2%,C的摩尔比为A、14.1%B、21.8%C、30.3%D、43.6%E、28.2%正确答案:B48、DNA的二级结构是A、α-螺旋B、β-折叠C、锌指结构D、三叶草结构E、双螺旋结构正确答案:E49、核酸变性后可发生A、减色效应B、沉淀C、失去对紫外线的吸收能力D、增色效应E、最大吸收峰波长发生转移正确答案:D50、引物设计时G+C含量在引物中一般占A、20%-40%B、大于60%C、含量高低无所谓D、45%-55%E、30%-60%正确答案:D51、重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是:A、DNA连接酶B、RNA连接酶C、RNA聚合酶D、限制性核酸内切酶E、DNA聚合酶正确答案:A52、属于核糖核酸二级结构的描述是A、DNA的超螺旋结构B、tRNA的三叶草结构C、核苷酸在核酸长链上的排列顺序D、DNA的核小体结构E、DNA双螺旋结构正确答案:B53、催化聚合酶链反应的酶是:A、反转录酶B、末端转移酶C、DNA聚合酶ID、Taq DNA聚合酶E、DNA连接酶正确答案:D54、重组DNA、技术常用的限制性核酸内切酶为A、IV类酶B、II类酶C、III类酶D、V类酶E、I类酶正确答案:B55、cDNA是指A、在体内经转录合成的与RNA互补的DNAB、在体内经反转录合成的与RNA互补的RNAC、在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAD、在体外经反转录合成的与RNA互补的RNAE、在体外经反转录合成的与DNA互补的DNA正确答案:C56、克隆的基因组DNA不宜在以下哪种系统中表达A、Ecoli表达体系B、昆虫表达体系C、COS细胞表达体系D、酵母表达体系E、哺乳动物细胞表达体系正确答案:A57、对于双链DNA碱基含量关系,哪个是不正确的A、G=CB、A=T;C、A+G=C+TD、A+T=C+GE、以上都不正确正确答案:D58、下列描述最确切表达质粒DNA作为克隆体特性的是A、获得目的基因B、在细胞分裂时恒定地传给子代细胞C、小型环状双链DNA分子D、携带某些抗生素抗性基因E、具有自我复制功能正确答案:E59、核酸分子中储存、传递遗传信息的关键部分是A、以上都不是B、磷酸戊糖C、磷酸二酯键D、碱基序列E、核苷正确答案:D60、核酸杂交中,目前应用最为广泛的一种探针是A、cDNA探针B、肽苷酸探针C、基因组DNA探针D、RNA探针E、寡核苷酸探针正确答案:A61、探针的纯化时,无水乙醇沉淀A、蛋白质分子B、DNA片段C、小分子物质D、氨基酸分子E、RNA片段正确答案:B62、转化作用叙述不正确的是哪一项A、可人为供给外源DNAB、可发生外源DNA的整合C、可获得新的遗传表型D、自然界发生的转化效率高E、染色体整合的几率低正确答案:D63、下述哪一条对质粒的描述是错的?A、大片段DNA与质粒重组较困难B、质粒DNA往往是闭环状态C、质粒对宿主细胞的转化效率高于噬菌体D、从细菌体内分离出的质粒DNA在体外呈现超螺旋,开环和线性三种状态的混合物E、质粒小则转化效率较高正确答案:C64、三种RNA中,种类最多、分子量最不均一、代谢上最活跃的是A、tRNAB、28S rRNAC、mRNAD、18S rRNAE、snRNA正确答案:C65、加热或紫外线照射下,可导致两条DNA链之间的氢键断裂,而核酸分子中所有的共价键则不受影响,称为A、DNA重排B、DNA复性C、DNA重组D、DNA杂交E、DNA变性正确答案:E66、对于DNA热变性的叙述,哪一项是不正确的A、二条链之间氢键断裂B、核苷酸之间的磷酸二酯键断裂C、DNA黏度下降D、以上都不正确E、在260nm处光吸收增加正确答案:B67、DNA和RNA共有的成分是A、鸟嘌呤B、尿嘧啶C、胸腺嘧啶D、D-2-脱氧核糖E、D-核糖正确答案:A68、卫星DNA属于A、较复杂的重复单位组成的重复序列B、反向重复序列C、中度重复序列D、单拷贝序列E、高度重复序列正确答案:E69、下列有关RNA的叙述错误的是A、tRNA是细胞内分子量较小的一种RNAB、胞质中只有mRNA和tRNAC、主要有mRNA,tRNA和rRNA三类D、rRNA可与蛋白质结合E、RNA并不全是单链结构正确答案:B70、PCR反应中,所设计引物的长度一般为A、长度任意,但必须具有特异性B、大于50个核苷酸C、15-30个核苷酸D、5-10个核苷酸E、小于50个核苷酸正确答案:C71、原核生物染色体基因组是A、线性双链DNA分子B、环状双链DNA分子C、线性单链RNA分子D、环状单链DNA分子E、线性单链DNA分子正确答案:B72、在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时,需采用A、反转录酶B、RNA聚合酶C、引物酶D、多聚核苷酸激酶E、末端转移酶正确答案:E73、蛋白质水平的检测,主要采用A、斑点杂交法B、Northern印迹法C、Southern印迹法D、原位杂交法E、Western印迹法正确答案:E74、限制性核酸内切酶切割DNA后,产生A、5’磷酸基和2’羟基基团的末端B、5’羟基和3’羟基基团的末端C、5’磷酸基和3’羟基基团的末端D、5’磷酸基和3’磷酸基团的末端E、3’磷酸基和5’羟基基团的末端正确答案:C75、长期保存核酸样品的适宜温度是A、0~4℃B、室温C、-20℃D、-50℃E、-80℃正确答案:E76、下列几种DNA分子的碱基组成比例各不相同,哪一种DNA的解链温度(Tm)最低A、DNA中A+T含量占60%B、DNA中G+C含量占70%C、DNA中A+T含量占15%D、DNA中G+C含量占40%E、DNA中G+C含量占25%正确答案:E77、下列有关核酸分子杂交的叙述,不正确的是A、具有双螺旋结构的核酸分子之间才能杂交B、杂交可发生在碱基序列完全互补的核酸分子之间C、杂交可发生在碱基序列部分互补的核酸分子之间D、不同来源的DNA分子之间可以杂交E、以上都不正确正确答案:A78、M13噬菌体适用于A、构建CDNA文库B、构建基因组文库C、克隆较小DNA片段D、以上都对E、克隆待测序的正确答案:E79、基因工程操作中转导是指A、重组质粒导入宿主细胞B、把外源DNA导入宿主细胞C、以噬菌体或病毒为载体构建的重组DNA导入宿主细胞D、把DNA重组体导入真核细胞E、DNA重组体导入原核细胞正确答案:C80、哪种核苷酸含量是核酸变性的最主要因素?A、GCB、TCC、ACD、AGE、AT正确答案:A二、多选题(共20题,每题1分,共20分)1、作为基因工程的载体必须具备的条件是A、易转化B、能独立自主复制C、具有表达外源基因的能力D、具有限制性内切核酸酶的切口E、易检测(含有抗药性基因等)正确答案:ABE2、下列关于质粒载体的叙述,正确的是A、有些质粒常携带抗药性基因B、含有克隆位点C、具有自我复制能力D、为小分子环状DNAE、独立于细菌染色体之外正确答案:ABCDE3、真核生物mRNAA、由hnRNA转变而来B、3’端的polyA尾结构与mRNA稳定有关C、mRNA分子越大,其3’端polyA尾也越长D、5’端帽子结构与蛋白质合成起始有关E、5’端帽子结构与生物进化有关正确答案:ABDE4、对于核酸和蛋白质的下述描写哪些是对的A、都有各自的一、二、三级结构B、均是大分子C、都是遗传的物质基础D、加热均可引起变性E、在适当的电场中可以泳动正确答案:ABDE5、DNA分子杂交的基础是A、DNA黏度大B、DNA分子的碱基互补配对原则C、DNA的刚性与柔性D、DNA变性后在一定条件下可复性E、DNA变性双链解开,在一定条件下重新缔合正确答案:BDE6、有关重组体的筛选,下列哪些方法是属于直接筛选法A、抗药性标志筛选B、分子杂交法C、免疫学方法D、标志补救(如α—互补)E、菌落PCR正确答案:BDE7、PCR循环次数设定时注意A、循环次数过多时,会引起停滞效应B、PCR的循环次数一般为25—30次C、理论上20~25个循环后,PCR产物累积达最大值D、应由最初靶分子浓度而定E、循环次数不影响PCR产物的多少正确答案:ABCD8、哪些属于生物大分子A、维生素B、核酸C、脂质D、多糖E、蛋白质正确答案:BDE9、细菌基因组的特点是A、染色体通常仅由一条环状双链DNA分子组成B、具有重叠基因C、某些细菌以逆转录作用方式繁殖D、具有操纵子结构E、结构基因多为单拷贝正确答案:ADE10、进行PCR实验时,以下哪些措施有助于防止污染和结果的假阳性?A、排除结构相近异源DNA的污染B、严格实验操作C、分装试剂D、设立实验对照E、隔离不同的操作区正确答案:ABCDE11、有关DNA的叙述中,恰当的是A、DNA的基本单位是脱氧核糖核苷酸B、DNA分子的两条链呈反向平行排列C、DNA是绝大多数生物的遗传物质基础D、二级结构为双螺旋结构E、在真核生物中,DNA主要分布于细胞核正确答案:ABCDE12、DNA重组的步骤包括A、获取目的基因B、选出含有重组体的克隆C、培养细胞以扩增重组DNAD、将外源DNA与载体连接E、将重组DNA导入受体细胞正确答案:ABCDE13、进行基因工程实验时,常用的技术有A、PCR技术B、DNA探针技术C、质粒重组技术D、分子杂交技术E、基因调控技术正确答案:ABCD14、下述哪些步骤属于Southern印迹杂交A、凝胶中核酸的变性B、待测核酸样品的制备C、探针的制备D、待测DNA样品的电泳分离E、Southern转膜正确答案:ABCDE15、DNA双螺旋稳定因素有A、碱基之间存在离子键B、磷酸基团的亲水性C、碱基间的堆积力D、碱基之间的磷酸二酯键E、大量的氢键正确答案:CE16、关于病毒基因组,下列叙述中正确的是A、可由RNA组成B、有断裂基因C、基因组绝大部分不被翻译D、有重叠基因E、可由DNA组成正确答案:ADE17、Sanger双脱氧链终止法采用DNA引物引导新生DNA的合成,采用的模板是A、mRNAB、双链DNAC、单链RNAD、单链DNAE、双链RNA正确答案:BD18、对于核酶哪些是恰当的A、是核酸与蛋白质共同组成的酶B、可作为肿瘤和病毒的基因治疗手段C、它的作用是水解蛋白质D、也存在DNA核酶E、是具有酶活性的RNA分子正确答案:BDE19、RNA分子A、含有胸腺嘧啶B、主要是单链,可以有局部双链C、都是单链D、具有功能多样性E、发挥作用必须有维生素的参与正确答案:BD20、有关DNA变性的描述哪些不对A、磷酸二酯键断裂B、变性温度的最高点称为TmC、二级结构被破坏D、DNA变性时糖苷键断裂E、A260吸收增加正确答案:ABD。
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分生—重组DNA 技术试题一、单选1、在分子生物学领域,分子克隆主要是指()A DNA勺大量复制B、DNA勺大量转录C、DNA勺大量剪切D RNA勺大量反转录E、RNA勺大量剪切2、在分子生物学领域,重组DNA又称()A、酶工程B、蛋白质工程C、细胞工程D、基因工程E、DNAT程3、在重组DNA技术中,不常用到的酶是()A、限制性核酸内切酶B、DNA聚合酶C、DNA连接酶D、反转录酶E、DNA军链酶4、多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为()A、平头末端B、3突出末端C、5突出末端D、粘性末端E、缺口末端5、可识别DNA勺特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA勺一类酶称为()A、限制性外切核酸酶B、限制性内切核酸酶C、非限制性外切核酸酶D非限制性内切核酸酶E、DNA内切酶6、CDNA1 指()A、在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB在体外经反转录合成的与DNA互补的DNAC在体外经转录合成的与DNA2补的RNAD在体内经反转录合成的与RNA互补的DNAE、在体内经转录合成的与DNA互补的RNA7、基因组代表一个细胞或生物体的()A、部分遗传信息B、整套遗传信息C、可转录基因D非转录基因E、可表达基因8、在基因工程中通常所使用的质粒存在于()A、细菌染色体B、酵母染色体C细菌染色体外D酵母染色体外E、以上都不是9、就分于结构而论,质粒是()A、环状双链DNA分子B、环状单链DNA分于C、环状单链RNA分子D线状双链DNA分子E、线状单链DNA分子10、聚合酶链反应可表示为()A、PECB、PERC、PDRD、BCRE、PCR11、在已知序列信息的情况下,获取目的基因的最方便方法是()A、化学合成法B、基因组文库法C、CDNAfc库法D聚合酶链反应E、差异显示法12、重组DNA勺基本构建过程是将()A、任意两段DNA娄在一起B、外源DNA接入人体DNAC、目的基因接人适当载体D、目的基因接入哺乳类DNAE 、外源基因接人宿主基因13、ECoRI切割DNA双链产生()A、平端B、5'突出粘端C、3'突出粘端D、钝性末端E、配伍末端14、催化聚合酶链反应的酶是()A DNA连接酶B、反转录酶C末端转移酶D、碱性磷酸酶E TaqDNA聚合酶15、将Pstl内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属()A、同聚物加尾连凑B、人工接头连接C平端连接D、粘性末端连接E、非粘性末端连接16、限制性核酸内切酶切割DNA后产生()A、3 磷酸基末端和5 羟基末端B 、5 磷酸基末端和3 羟基末端C、3 磷酸基末端和5 磷酸基末端D 、5 羟基末端和3 羟基末端E、3 羟基末端、5 羟基末端和磷酸17、重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是()A DNA R合酶B、RNA聚合酶C、DNA连接酶D、RNA连接酶E、限制性核酸内切酶18、以质粒为载体。
将外源基因导入受体菌的过程称()A、转化B、转染C、感染D、转导E、转位19、最常用的筛选转化细菌是否含质粒的方法是()A、营养互补筛选B、抗药性筛选C、免疫化学筛选D PCR筛选E、分子杂交筛选20、a互补筛选法属于()A、抗药性标志筛选B、酶联免疫筛选C标志补救筛选D、原位杂交筛选E、免疫化学筛选21、下列常用于原核表达体系的是()A、酵母细胞B、昆虫细胞C、哺乳类细胞D、真菌E、大肠杆菌22、在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时,需采用()A、反转录酶B、多聚核苷酸激酶C、引物酶D、RNA聚合酶E、末端转移酶23、重组DNA技术常用的限制性核酸内切酶为()A I类酶B、U类酶C、川类酶D、W类酶E、V类酶25、用于重组DNA的限制性核酸内切酶识别核苷酸序列的()A、正超螺旋结构B、负超螺旋结构C、a螺旋结构D回文结构E、锌指结构26、下列有关重组DNA技术的叙述,正确的是()A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B所有的限制酶都只能识别一种特定的核苷酸序列C. 选细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D. 只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达E. 重组DNA技术不需要限制酶27、作为基因的运输工具-运载体,必须具备的条件之一及理由是()A能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因B. 具有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达C. 具有某些标记基因,以便为目的基因的表达提供条件D 能够在宿主细胞中复制并稳定保存,以便于进行筛选E 能够转载比较大的基因28、基因治疗是把健康的外源基因导入()A.有基因缺陷的DNA分子中B 有基因缺陷的染色体中C 有基因缺陷的细胞器中D. 有基因缺陷的细胞中E. 有缺陷的基因中29、应用重组DNA技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。
这里的基因探针是指()A. 用于检测疾病的医疗器械B. 用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C. 合成B -球蛋白的DNAD. 合成苯丙羟化酶的DNA片段E 用于表达的外源基因30、基因工程的操作步骤:①使目的基因与运载体结合②将目的基因导入受体细胞③检测目的基因的表达④提取目的基因。
正确的顺序是()A ③②④①B ②④①③C ④①②③D ③④①②E ③④②①二、多选1、基因重组包括()A、同源重组B、位点特异性重组C、插入序列转座D、细菌的基因转移与重组E、转座子转座2、下列能作为基因克隆载体的事()A、质粒B、M13噬菌体C、病毒RNA D入噬菌体E、逆转录病毒的DNA3、转座的基因学效应包括()A、复制转座可以引起缺失B、转座可以引起生物进化C 、专做可以引发移码突变、基因提前终止和启动基因的表达D 、转座可使插入位点产生新基因E 、复制转座可引起倒位4、限制性内切酶的特点包括()A、辨认的碱基一般为4~6个B、其识别不受DNA来源的限制C、酶切后的DNA可以产生粘性末端D、酶切后的DNA可以产生平末端E、能同时切开DNA双链5、有关cDNA文库的叙述正确的是()A、cDNA文库可以包括该物种的全部结构基因B、cDNA包括该物种的内含子和调控区C、可以从组织中提取总RNA逆转录建立cDNA文库D、可以从组织中提取mRNA逆转录建立cDNA文库E、cDNA文库包含编码mRNA口tRNA的三、名词解释1 、同源重组(homologous recombination )2、转座(transposition)3、接合作用(conjugation)4、基因重组(gene recombination)5、基因组文库((genetic DNA library)四、简答题1、简述质粒的概念和特性,常用的质粒载体有哪几种?2、简述重组DNA技术的原理及技术。
3、简述黏性末端DNA重组体的构建过程。
答案:一、单选1-5:A D E D B6-10 :A B C A E 11-15 :D C B E D16-20:B C A B C21-25:E E B C D26-30:B AABC二、多选1、A BCDE2、ABDE3、BCDE4、ABCDE5、ACD三、名解1、D NA同源序列之间的重组,实现两者间进行单链或双链的交换,是最基本的DNA 重组方式。
2、由转座因子或插入序列介导的基因的转移或重排现象。
3、细菌细胞相互接触时将遗传信息从一个细胞转移给另一个细胞的过程。
4、不同来源的DNA分子通过磷酸二酯键组合成新DNA勺过程5、将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段,并与合适的载体重组后导入宿主细胞,进行克隆。
这些基因组DNA片段的集合即基因组文库,包含了该生物的所有基因。
四、问答1、质粒为细菌染色体外一些双链、共价闭合环状DNA分子,是能够进行独立复制并保持稳定遗传的复制子。
质粒具有复制和控制机构,能够在细胞质中独立自主的进行自身复制,并使子代细胞保持它们恒定的拷贝数。
质粒一般具有以下特性:①自主复制性,它能独立于宿主细胞的染色体DNA而自主复制;②质粒不相容性;③可扩增性;④可转移性。
理想质粒载体应具备①具有松弛型复制子;②在复制子外存在几个单一的酶切位点;③具有插入失活的筛选标记;④分子量相对较小,有较高的拷贝数。
常见的质粒载体有:pBR322质粒、pUC质粒载体、pGEM系列载体等。
2、重组DNA是在体外利用限制性内切酶,将不同来源的DNA分子进行特异的切割,获得的目的基因或DNA片段与载体连接,从而组成一个新的DNA分子。
重组的DNA分子能够通过一定的方式进入相应的宿主细胞,并在宿主细胞中进行无性繁殖,获得大量的目的基因或DNA片段。
经重组的DNA分子能在宿主细胞中进行表达,获得相应的蛋白质。
大致步骤包括:①目的基因的获取;②载体的选择;③目的基因与运载体连接成重组DNA④重组DNA导入受种细胞;⑤重组体的筛选。
3、目的基因和载体可由同一种限制酶切割后产生,或由不同的限制酶切割形成互补黏性末端,经退火,彼此间很容易按碱基配对原则形成氢键。
然后由DNA 连接酶催化连接接头处的缺口,形成重组质粒。
载体DNA在限制酶切割后,用碱性磷酸酶处理,除去5'端磷酸基,以避免载体DNAI身环化。