FAD葡萄糖脱氢酶
FAD葡萄糖脱氢酶

来源 重组 Pichiapastoris 酶号 E.C Number 1.1.99.10 产品用途 用于血糖监测、葡萄糖传感器和科学研究 产品规格 外观:亮黄色液体 活性:不低于 541U/mg 蛋白 检测原理 FAD-GDH 在有电子受体存在的情况下催化葡萄糖的氧化
FAD-GDH
具体图 5
图 1. 最适反应 pH
图 2. 最适反应温度
图 3. pH 稳定性
图 4. 温度稳定性(62℃)
图 5. 底物专一性
β-D-Glucose + Acceptor
Glucono-1,5-lactone + Reduced Acceptor
酶活定义
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
25℃时,在标准检测方法条件下,每分钟转化 1μmol 葡萄糖所需的酶量
性质
1.分子量(分子筛层析):65.6 kDa
2. Km:86.4±1.8 mM(D-葡萄糖)
3.最适 pH(图 1): pH7.5
4.最适温度(图 2):55℃
5.pH 稳定性(图 3):pH 3.5~9.0
6.温度稳定性(图 4):62℃处理时半衰期为 82min
底物专一性
将反应体系的底物分别换成 1M D-麦芽糖,D-木糖,D-半乳糖,L-阿拉伯糖,D-乳糖,海
藻糖,D-果糖,D-山梨醇和蔗糖,测定酶活并跟以 D-葡萄糖为底物的时测定的酶活比较。
重组葡萄糖脱氢酶的酶学性质及其偶联辅酶再生
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重组葡萄糖脱氢酶的酶学性质及其偶联辅酶再生余涛;胡蝶;邬敏辰;汪俊卿;冯峰;顾颖【期刊名称】《食品与生物技术学报》【年(卷),期】2014(033)009【摘要】为解决生物催化氧化还原反应中辅酶循环问题,人工合成密码子优化后的嗜酸热源体Thermoplasma acidophilum葡萄糖脱氢酶基因Sygdh,于E.coli BL21 (DE3)中表达,粗酶液经镍柱亲和层析获得纯化的重组葡萄糖脱氢酶SyGDH.SDS-PAGE显示相对分子质量为41.0 kDa.酶学性质分析表明:该酶的最适pH值为7.5,在pH 6.0~8.0稳定;最适反应温度为40℃,在55℃以下稳定;最适条件下其比活性达4.5 U/mg; Zn2+对其有明显激活作用;该酶对NADP+的亲和力大于NAD+且对大多数有机溶剂有良好的耐受性;对D-葡萄糖的Km和Vmax值分别为28.2 mmol/L和6.5 U/mg.在葡萄糖脱氢酶与羰基还原酶偶联构建的NADPH辅酶循环体系中,以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物,羰基还原酶催化产物4-氯-3-羟基丁酸乙酯的产率为99.0%,是未添加葡萄糖脱氢酶时产物产率的3.11倍,表明重组SyGDH具有为生物催化氧化还原反应提供辅酶NADPH再生的能力.【总页数】7页(P910-916)【作者】余涛;胡蝶;邬敏辰;汪俊卿;冯峰;顾颖【作者单位】江南大学药学院,江苏无锡214122;江南大学生物工程学院,江苏无锡214122;江南大学无锡医学院,江苏无锡214122;江南大学生物工程学院,江苏无锡214122;江南大学药学院,江苏无锡214122;江南大学无锡医学院,江苏无锡214122【正文语种】中文【中图分类】TQ925【相关文献】1.重组葡萄糖脱氢酶酶学性质研究 [J], 唐江涛;覃益民;杨梅;王顺成;姚评佳;魏远安2.重组葡萄糖脱氢酶的表达及辅酶再生应用研究 [J], 李凌凌;刘曜宁;吕早生;杨忠华;左振宇;宋采薇3.FAD为辅基的葡萄糖脱氢酶发酵、纯化及酶学性质 [J], 林荣; 宋祖坤; 张玲; 王男; 杨海麟4.重组毛白杨4-香豆酸:辅酶A连接酶的酶学性质研究 [J], 范丙友;陆海;蒋湘宁5.包括辅酶原位再生的偶联酶反应联产1,3-二羟基丙酮和2-氨基丁酸 [J], 苗维娟;王平;张松平因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
葡萄糖脱氢酶(GCDH)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法

葡萄糖脱氢酶(GCDH)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC2690规格:50T/48S产品简介:GCDH(EC 1.1.1.47)催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H,主要存在于多种微生物和高等动物的肝脏中。
GCDH是一种制备高含量低聚果糖的理想用酶,同时也是临床血糖测定的诊断用酶,可广泛用于食品工业及医药工业领域中。
GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH,利用NADH在340nm处吸光值的变化即可反映葡萄糖脱氢酶的活性。
试验中所需的仪器和试剂:紫外分光光度计、台式低温离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
产品内容:提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。
临用前加入15mL试剂一溶解,用不完的试剂4℃保存。
试剂三:粉剂×2瓶,-20℃避光保存。
临用前每瓶加入5mL试剂一溶解,用不完的试剂建议分装后-20℃避光保存,避免反复冻融。
操作步骤:一、粗酶液提取:组织:按照组织质量(g)︰提取液体积(mL)为1︰5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后,8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
细胞或细菌:先收集细胞或细菌到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个)︰提取液体积(mL)为500~1000︰1的比例(建议500万个细胞或细菌加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞或细菌(功率20%或200W,超声3s,间隔7s,总时间5min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
血浆(清):直接检测。
二、测定步骤:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、工作液的配制:按照试剂一︰试剂二︰试剂三为4︰3︰2的体积比例充分混匀,备用,用前37℃预热10min。
6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶

6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶
磷酸葡萄糖酸脱氢酶(Phosphogluconate dehydrogenase,PGD)是一种酶,参与底物——磷酸葡萄糖酸(6-phosphogluconate,6PG)的氧化还原反应,使其产生一分子的
CO2和一分子的NADPH。
PGD是巴氏循环的关键酶之一,也是细胞内NADPH的重要来源之一。
PGD是一个单元酶,大约含有460个氨基酸残基。
在进化过程中,从原核细胞向真核
细胞的转变中,PGD也经历了一些结构和功能上的改变。
比如在哺乳动物中发现的PGD是
一种亲水性膜蛋白,而在原核细胞和植物细胞中则是一种溶解于胞浆中的酶。
PGD的催化过程是一个复杂的氧化还原反应,反应过程中由于底物6PG与酶的活性中
心结合,产生一个混合酸酐化合物。
随后,由FAD作为辅因子参与底物6PG的氧化反应,
生成乙酰葡萄糖酸和FADH2。
接着,由NAD+作为另一种辅因子参与,将FADH2还原为FAD,同时生成CO2和NADPH。
PGD酶活性的调节很重要。
PGD本身是一种具有较高活性的酶,但在一些情况下,例
如细胞内NADPH的含量过多时,往往需要降低PGD酶的活性,以控制细胞内NADPH的水平。
事实上,PGD酶的活性可以通过磷酸化、去磷酸化等多种方式调节,而磷酸化对PGD酶活
性的抑制作用更强。
总之,PGD是一种在能量代谢及氧化还原反应中具有重要作用的酶,其独特的催化机
制和酶活性调节机制为科学家们深入探索细胞内代谢及调控机制提供了有益的帮助。
三羧酸循环的各个反应的酶

三羧酸循环的各个反应的酶三羧酸循环(TCA循环),也称为克雷布循环或柠檬酸循环,是生物体内的一种重要代谢途径,是细胞中能量供应的主要来源之一。
它通过一系列反应将葡萄糖分解为二氧化碳和水,并释放出大量的能量。
本文将以三羧酸循环的各个反应的酶为标题,介绍这些反应的具体过程。
1.异柠檬酸合成酶(citrate synthase)异柠檬酸合成酶是三羧酸循环的起始酶,它催化乙酰辅酶A与草酰乙酸结合,生成柠檬酸。
该反应是一个缩合反应,需要消耗一份乙酰辅酶A和一份草酰乙酸。
异柠檬酸合成酶是三羧酸循环中的限速酶,其活性受到ATP和NADH的抑制。
2.柠檬酸异构酶(aconitase)柠檬酸异构酶催化柠檬酸与水分子的反应,生成顺丁烯二酸。
这是一个脱水的异构化反应。
柠檬酸异构酶的催化过程中需要一个水分子参与,因此它也被称为水合酶。
3.顺丁烯二酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase)顺丁烯二酸脱氢酶催化顺丁烯二酸与NAD+反应,生成α-酮戊二酸和NADH。
这是一个氧化反应,同时也是三羧酸循环中的限速酶之一。
顺丁烯二酸脱氢酶的活性受到ATP和NADH的抑制。
4.α-酮戊二酸脱羧酶(α-ketoglutarate dehydrogenase)α-酮戊二酸脱羧酶催化α-酮戊二酸与辅酶A和NAD+反应,生成脱羧产物琥珀酸、NADH和二氧化碳。
这是一个氧化脱羧反应,也是三羧酸循环中的限速酶之一。
α-酮戊二酸脱羧酶的活性受到ATP 和NADH的抑制。
5.琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase)琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸与FAD反应,生成丙酮酸和FADH2。
这是一个氧化反应,琥珀酸脱氢酶是三羧酸循环中唯一与细胞呼吸链直接连接的酶。
6.丙酮酸激酶(succinyl-CoA synthetase)丙酮酸激酶催化丙酮酸与辅酶A反应,生成辅酶A连接的琥珀酸和GTP(也可生成ATP)。
这是一个酯化反应,同时也是三羧酸循环中的限速酶之一。
葡萄糖脱氢酶(Glucose dehydrogenase,GCDH)试剂盒说明书

货号:MS2627 规格:100管/96样葡萄糖脱氢酶(Glucose dehydrogenase,GCDH)试剂盒说明书微量法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义:GCDH(EC 1.1.1.47)催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H,大量存在于高等动物的肝脏和弱氧化醋杆菌中。
在低聚果糖生产中使用GCDH,不仅能去除低聚果糖中的葡萄糖提高低聚果糖的含量,而且生成的葡萄糖酸与钙离子结合生成的葡萄糖酸钙是一种理想的补钙制剂。
因而,GCDH已成为制备高含量低聚果糖的理想用酶。
测定原理:GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH,在340nm下测定NADH上升速率,即可反映GCDH活性。
自备实验用品及仪器:紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:提取液:100mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体19 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;样本的前处理:组织的前处理:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
细菌或培养细胞的前处理:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤:1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零;2、工作液的配制:临用前将试剂二转移到试剂一中混合溶解待用;用不完的试剂4℃可保存一周;3、将工作液置于37℃预热5分钟。
fad 氧化还原

fad 氧化还原FAD氧化还原是一种化学反应,也被称为脱氢酶反应。
作为细胞呼吸的关键环节,FAD氧化还原是分解羟基化合物(比如葡萄糖)以产生能量的过程,其实也是细胞燃料。
该反应的发生是靠FAD(叶酸盐基二聚氧化物),为一种有机脱氢酶。
它位于质子泵机构内,通过它可以改变氧化状态,使能量被释放出来,从而进行细胞的燃料转换。
FAD氧化还原的反应机理,主要涉及FAD的氧化还原反应,是将FAD连接到一个甘油三酯脂质,其糖原脂蛋白结合也参与其中。
然后FAD作为催化剂,将甘油三酯中的一氧化碳去除,形成二氧化碳和一个脱氢脂质,同时交换氧和氢,从而改变FAD的氧化状态。
在FAD氧化还原反应过程中,发生了一系列催化反应,使糖原脂蛋白得到脱氢,形成一氧化碳和一个脱氢脂质,同时交换氧和氢,从而改变FAD的氧化状态。
FAD的氧化还原反应的反应机理不仅涉及FAD的氧化还原,还涉及质子泵的活动。
质子泵的活动能够发挥催化作用,以有效改变FAD 的氧化还原状态,从而使能量被释放出来。
FAD的氧化还原反应需要ATP(能量质子)和NADH(电子载体)的参与,以及由细胞呼吸产生的氧。
FAD的氧化还原反应能够有效地将化学能转化为热能,为细胞提供能量,从而保持细胞的正常功能。
FAD的氧化还原反应最重要的作用,在于将细胞内的能量转换成活动能,并使细胞生长、发育和繁殖,以及细胞内的其他生化反应。
FAD氧化还原反应是一种生物反应,它涉及到很多生物体,不仅仅是人类,还有鱼、鸟、昆虫、植物、真菌和细菌等,其中在细胞呼吸中都有重要作用。
FAD氧化还原反应不仅可以在生物体内发生,而且在化学实验室中也可以进行。
总之,FAD氧化还原反应是一种重要的化学反应,在细胞内有着重要的作用,包括维持细胞正常活动,产生能量等。
它可以通过FAD 的氧化还原,实现糖原脂蛋白的脱氢和能量的释放,使细胞燃料得到转换。
通过FAD的氧化还原,也可以在实验室中实现。
脂肪酸脱氢酶的名词解释

脂肪酸脱氢酶的名词解释脂肪酸脱氢酶是一个在生物体内起着重要作用的酶类分子。
它参与了脂肪酸的氧化代谢过程,通过去氢反应将脂肪酸中的氢原子移除,产生一系列不饱和脂肪酸。
本文将对脂肪酸脱氢酶进行详细的名词解释,探讨其功能、作用机制以及生物领域中的应用。
首先,我们来理解脂肪酸脱氢酶的基本定义。
脂肪酸脱氢酶(Fatty Acid Desaturase,简称FAD)是一类酶,能够催化脂肪酸分子中的氢原子移除反应,生成含有双键的不饱和脂肪酸。
这种酶在生物体内广泛存在,从细菌到植物、动物都有相应的脂肪酸脱氢酶。
在生物体内,脂肪酸是重要的能量来源,同时也是构建细胞膜和合成各种生物活性物质的基础物质。
而脂肪酸脱氢酶则参与了脂肪酸的代谢过程,调节脂肪酸结构的饱和度,进而影响生物体内脂肪酸的功能。
脂肪酸脱氢酶的作用机制相当复杂,一般可分为两种类型:饱和脂肪酸脱氢酶(Saturated Fatty Acid Desaturase)和单不饱和脂肪酸脱氢酶(MonounsaturatedFatty Acid Desaturase)。
饱和脂肪酸脱氢酶主要催化饱和脂肪酸的去氢反应,将饱和脂肪酸中的氢原子去除,生成一氧化碳,形成不饱和脂肪酸。
这种不饱和脂肪酸又被称为亚饱和脂肪酸。
饱和脂肪酸脱氢酶在生物体内起到调节脂肪酸结构的饱和度,调控细胞膜的流动性以及一系列生理过程的平衡。
单不饱和脂肪酸脱氢酶主要催化单不饱和脂肪酸的反应,在脂肪酸的碳链上形成一个新的双键。
这种双键的形成会影响脂肪酸的立体构型和生物活性。
单不饱和脂肪酸脱氢酶在细胞膜的结构和功能调节中扮演着重要角色,同时也参与了多种生物过程的调控。
脂肪酸脱氢酶在生物领域中的应用非常广泛。
在食品工业中,通过控制脂肪酸脱氢酶的活性,可以调整油脂中的不饱和脂肪酸含量,改善油脂的储存稳定性和口感。
同时,在农业领域,利用脂肪酸脱氢酶基因工程技术,可以改良作物的脂肪酸组成,提高农产品的营养价值和品质。
一种密码子优化的FAD-葡萄糖脱氢酶基因及其应用[发明专利]
![一种密码子优化的FAD-葡萄糖脱氢酶基因及其应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/39d0deebba1aa8114431d9e8.png)
专利名称:一种密码子优化的FAD-葡萄糖脱氢酶基因及其应用
专利类型:发明专利
发明人:公维丽,马耀宏,孟庆军,王丙莲,史建国,蔡雷,刘庆艾,杨艳
申请号:CN201911190811.1
申请日:20191128
公开号:CN110819642A
公开日:
20200221
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明提供了一种密码子优化的FAD‑葡萄糖脱氢酶基因,所述基因来源于Aspergillus niger An76,其序列如SEQ ID No.2所示。
该原始的FAD‑葡萄糖脱氢酶基因在毕赤酵母中无法成功表达,经过序列优化,其能够在毕赤酵母中顺利表达,并且,经过分离、纯化,能够得到纯化的目的蛋白,该重组FAD‑葡萄糖脱氢酶可以用于葡萄糖生物传感器中。
申请人:山东省科学院生物研究所
地址:250103 山东省济南市历城区经十东路28789号
国籍:CN
代理机构:北京市诚辉律师事务所
代理人:范盈
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基于密码子优化的FAD依赖葡萄糖脱氢酶在毕赤酵母中的高效表达及酶学性质

(Institute of Microbiology,Hebei Academy of Sciences,Baoding 071051)
Abstract: The objective of this work is to obtain high-yield FAD-dependent glucose dehydrogenase(FAD-GDH). First,by optimizing the codons of FAD-GDH gene according to the codon preference of Pichia pastoris,the gene fragment was artificially synthesized,then the recombinant vector pMD-GDH containing FAD-GDH e gene was constructed and transferred into P. pastoris(X33),and the secretory expression by methanol induction was achieved. Results showed that a stable recombinant strain with high enzymatic activity was obtained by screening positive transformants at test-tube level. In the 10 L fermenter after 136 h induction culture,enzyme activity reached 257 600 U/ L. The analysis of enzymatic characterization demonstrated that the optimal pH and temperature while using glucose as substrate were 7.0 and 55℃,respectively. The initial enzyme activity still remained 70% after 150 min treatment at 50℃. In the range of pH 4-7,FAD-GDH still retained over 50% activity after incubated at 37℃ for 4 h. Cu2+ presented relatively large inhibition to enzyme activity. FAD-GDH harbored a relative high substrate specificity and D-glucose was the optimal substrate. The efficient expression of FAD-GDH in P. pastoris is achieved by optimizing the codon preference of P. pastoris,which provides a theoretical basis for the detection of blood glucose.
fad-gdh的血糖仪原理

fad-gdh的血糖仪原理
FAD-GDH(葡萄糖脱氢酶)血糖仪原理是基于酶电极法的血糖检测技术,其主要原理如下:
1. 血糖酶反应:将血液样品与试剂中的葡萄糖氧化酶(FAD-GDH)发生酶促反应,将葡萄糖转化为葡萄糖酸,并同时将FAD(氧化剂)还原为FADH2(还原剂)。
2. 测量电流生成:在酶电极上,FADH2再次被还原,将电子传递到电极,导致电流的生成。
3. 电流测量:血糖仪使用电子测量设备来测量通过酶电极流过的电流量。
根据血液样品中葡萄糖浓度与产生的电流之间的关系,可以计算出血糖的浓度。
需要注意的是,血糖仪在测量血糖时会受到其他物质的干扰,因此在实际使用时,通常会添加其他试剂(例如氧化剂)来排除这些干扰因素,以提高测量的准确性。
一种新的葡萄糖脱氢酶fad-gdh的晶体结构与催化机制研究

一种新的葡萄糖脱氢酶fad-gdh的晶体结构与催化机制研究标题:解密一种新的葡萄糖脱氢酶fad-gdh的晶体结构与催化机制一、引言:对葡萄糖脱氢酶fad-gdh的研究意义葡萄糖脱氢酶(GDH)是一类重要的生物催化剂,其在生物制药和生物能源领域具有广泛的应用价值。
近期,科学家们研究出了一种全新的葡萄糖脱氢酶fad-gdh,并成功解析了其晶体结构,这一突破为我们深入了解葡萄糖氧化的催化机制提供了新的视角。
二、葡萄糖脱氢酶fad-gdh的晶体结构探究1. 晶体结构解析利用X射线衍射技术,科学家们成功解析了葡萄糖脱氢酶fad-gdh的晶体结构。
该结构呈现出特定的空间构型和重要的功能区域,为我们进一步了解该酶的催化机制奠定了基础。
2. 结构特征分析在文章中多次提及葡萄糖脱氢酶fad-gdh的晶体结构,探讨其与其他葡萄糖脱氢酶的异同之处,以及在结构上的新发现,如何影响其催化活性和特异性等。
三、葡萄糖脱氢酶fad-gdh的催化机制探讨1. 催化机理分析根据葡萄糖脱氢酶fad-gdh的晶体结构,我们可以深入挖掘其催化反应的细节和机制。
从酶与底物结合、催化中间态形成到产物释放等方面展开探讨。
2. 催化活性调控论述葡萄糖脱氢酶fad-gdh的活性受何因素影响,以及如何通过结构设计和改造来调控其催化活性,这对于未来工业生产和生物医学应用有着重要的指导意义。
四、总结与展望通过对葡萄糖脱氢酶fad-gdh的晶体结构和催化机制的深入探讨,我们对其功能及应用有了全面的了解。
未来,我们有信心通过结构基础的设计改造,进一步完善葡萄糖脱氢酶fad-gdh,并促进其在生物制药和生物能源领域的应用。
个人观点:我认为这项研究的突破意义重大,不仅为我们提供了更加深入的认识葡萄糖脱氢酶fad-gdh的机理,也为相关领域的应用研究提供了新的思路和可能性。
希望未来能够有更多的科研机构和企业投入该领域的研究,共同推动这一成果向产业化应用迈进。
解密一种新的葡萄糖脱氢酶fad-gdh的晶体结构与催化机制是一项引人瞩目的研究成果,希望通过本篇文章的阐述和探讨,读者们能对该领域的研究和应用有更深入的认识。
三羧酸循环中直接以fad为辅酶的酶

标题:三羧酸循环中直接以FAD为辅酶的酶引言:三羧酸循环是细胞内最重要的代谢途径之一,它在有氧条件下将葡萄糖分解成二氧化碳和能量。
在这个过程中,多个酶参与其中,其中有一些酶直接以辅酶FAD参与反应。
本文将介绍三羧酸循环中直接以FAD为辅酶的酶的作用及其在代谢中的重要性。
一、FAD概述:1. FAD是一种辅酶,全称为脱氢核苷酸辅酶。
它由核黄素(vitamin B2)和腺嘌呤二核苷酸(adenosine diphosphate, ADP)组成。
2. FAD在细胞代谢中发挥重要作用,参与多种氧化还原反应,特别是三羧酸循环和呼吸链过程中的电子传递。
二、直接以FAD为辅酶的酶:1. 脱氢酶:a. 柠檬酸脱氢酶(citrate dehydrogenase):- 作用:将异柠檬酸(isocitrate)脱氢生成α-酮戊二酸(α-ketoglutarate)。
- 反应:异柠檬酸+ NAD+ + FAD →α-酮戊二酸+ NADH + H+ + FADH2。
b. α-酮戊二酸脱氢酶(α-ketoglutarate dehydrogenase):- 作用:将α-酮戊二酸脱氢生成琥珀酰辅酶A (succinyl-CoA)。
- 反应:α-酮戊二酸 + NAD+ + CoA-SH + FAD →琥珀酰辅酶A + NADH + H+ + CO2 + FADH2。
2. 琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase):- 作用:将琥珀酸(succinate)脱氢生成脱氢琥珀酸(fumarate)。
- 反应:琥珀酸 + FAD →脱氢琥珀酸 + FADH2。
3. 肌酸酸化酶(malate dehydrogenase):- 作用:将苹果酸(malate)脱氢生成草酰乙酸(oxaloacetate)。
- 反应:苹果酸 + NAD+ + FAD →草酰乙酸 + NADH + H+ + FADH2。
三、直接以FAD为辅酶的酶在代谢中的重要性:1. 电子传递:- 上述酶通过FAD接收电子,将电子传递给呼吸链中的细胞色素C还原酶,促进氧化磷酸化过程中的ATP产生。
葡萄糖脱氢酶用途
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葡萄糖脱氢酶用途
葡萄糖脱氢酶(Glucose Dehydrogenase,简称GDH)是一种酶类蛋白质,主要作用是催化葡萄糖的氧化反应。
这种酶在生物技术、医学和食品工业等领域具有多种用途,以下是一些主要的应用:
血糖检测:
葡萄糖脱氢酶广泛用于血糖检测。
在血糖检测仪中,葡萄糖脱氢酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酮,同时还参与了电子传递反应。
这一过程产生的电子流可以被检测器测量,从而确定血液中的葡萄糖浓度。
食品工业:
在食品工业中,葡萄糖脱氢酶可用于检测和监测食品中的葡萄糖含量。
这对于食品加工和质量控制非常重要。
醇生产:
葡萄糖脱氢酶在工业生产中也用于生产一些醇类,如葡萄糖醇。
通过催化葡萄糖的氧化反应,可以产生一些有用的化合物。
生物燃料电池:
在生物燃料电池中,葡萄糖脱氢酶可用作阳极反应的催化剂。
葡萄糖在阳极处被氧化,产生电子和质子,从而产生电流。
生物传感器:
葡萄糖脱氢酶也被用于构建生物传感器,用于检测环境中的葡萄糖浓度。
这对于环境监测和医学诊断等方面都有重要的应用。
总体而言,葡萄糖脱氢酶在生物技术和医学领域的应用非常广泛,它为各种实验和应用提供了可靠的葡萄糖检测手段。
葡萄糖脱氢酶(GCDH)检测
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迪信泰检测平台
葡萄糖脱氢酶(GCDH)检测
葡萄糖脱氢酶(Glucose dehydrogenase, GCDH)是一种NAD(P)+依赖型的氧化还
原酶,催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H,主要存在于多种微生
物和高等动物的肝脏中。
葡萄糖脱氢酶是一种制备高含量低聚果糖的理想用酶,同时也是临床血糖测定的诊断用酶,可广泛用于食品工业及医药工业领域中。
葡萄糖脱氢酶催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH,利用NADH在340nm处吸光
值的变化即可反映葡萄糖脱氢酶的活性。
迪信泰检测平台采用生化法,可高效、精准的检测葡萄糖脱氢酶的活性变化。
此外,我们还提供其他糖代谢类的酶活性检测服务,以满足您的不同需求。
生化法测定葡萄糖脱氢酶样本要求:
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期:2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)。
2. 相关参数(中英文)。
3. 图片。
4. 原始数据。
5. 葡萄糖脱氢酶活性信息。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案,具体可免费咨询技术支持。
三羧酸循环的酶
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三羧酸循环的酶三羧酸循环是细胞内重要的代谢途径之一,它在有氧条件下将葡萄糖和其他有机物转化为能量。
三羧酸循环涉及多种酶的参与,下面将分别介绍这些酶及其在循环中的作用。
1. 乙酰辅酶A合成酶(pyruvate dehydrogenase complex):乙酰辅酶A合成酶是三羧酸循环的起始酶,它将葡萄糖产生的丙酮酸转化为乙酰辅酶A,同时还释放出一分子二氧化碳。
这个过程中,乙酰辅酶A合成酶需要多种辅酶和金属离子的参与,如硫辅酶A、NAD+和FAD。
2. 柠檬酸合酶(citrate synthase):柠檬酸合酶将乙酰辅酶A与草酰乙酸结合,生成柠檬酸。
这个过程中,柠檬酸合酶需要柠檬酸和硫辅酶A的参与。
3. 柠檬酸脱氢酶(aconitase):柠檬酸脱氢酶将柠檬酸转化为异柠檬酸,再将异柠檬酸转化为顺式甲基苏氨酸。
柠檬酸脱氢酶需要铁离子的参与。
4. 顺式甲基苏氨酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase):顺式甲基苏氨酸脱氢酶将顺式甲基苏氨酸转化为α-酮戊二酸,并释放出一分子二氧化碳。
这个过程中,顺式甲基苏氨酸脱氢酶需要NAD+的参与。
5. α-酮戊二酸脱羧酶(α-ketoglutarate dehydrogenasecomplex):α-酮戊二酸脱羧酶将α-酮戊二酸转化为琥珀酸,并释放出一分子二氧化碳。
这个过程中,α-酮戊二酸脱羧酶需要多种辅酶和金属离子的参与,如硫辅酶A、NAD+和FAD。
6. 转戊酰辅酶A脱氢酶(succinyl-CoA synthetase):转戊酰辅酶A脱氢酶将琥珀酸转化为琥珀酰辅酶A,并释放出一分子GTP。
这个过程中,转戊酰辅酶A脱氢酶需要转戊酰辅酶A的参与。
7. 琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase):琥珀酸脱氢酶将琥珀酸转化为丙酮酸,并释放出一分子FADH2。
这个过程中,琥珀酸脱氢酶需要FAD和铁离子的参与。
8. 含氧化还原辅酶的蛋白质(ubiquinone):含氧化还原辅酶的蛋白质是细胞色素呼吸链中的一部分,它将FADH2和FAD还原为FADH2。
三羧酸循环中直接以fad为辅酶的酶
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三羧酸循环是生物体内重要的代谢途径之一,它通过将葡萄糖等有机物转化为ATP等能量分子,满足生物体各种代谢需求。
而在三羧酸循环中,辅酶FAD(氧化型)作为电子受体和供体,在许多关键酶反应中扮演着不可或缺的角色。
本文将主要介绍在三羧酸循环中直接以FAD为辅酶的酶。
1. 脱羧酶脱羧酶(dehydrogenase)是三羧酸循环中最早发现的FAD辅酶酶,也是其中最重要的酶之一。
脱羧酶作用于异柠檬酸、丙酮酸和草酰乙酸等化合物,将它们转化为顺式丙二酸、乳酸和琥珀酸等产物,并同时生成FADH2。
该过程中,FAD接受了化合物的两个氢原子和两个电子,被还原为FADH2。
脱羧酶的活性对于维持三羧酸循环正常运转非常重要,其不仅参与能量产生,而且还影响其他代谢途径,如葡萄糖-脂肪酸循环和氧化的调节。
2. 双功能琥珀酸脱氢酶/脆氨酸酰基转移酶双功能琥珀酸脱氢酶/脆氨酸酰基转移酶(SDH)是三羧酸循环中另一个以FAD为辅酶的酶。
它作用于琥珀酸并将其转化为丙酮酸并生成FADH2。
同时,SDH还可参与乙酰辅酶A合成,并将脆氨酸酰基转移至某些氧化酶上。
该过程中,FAD接受了琥珀酸中两个氢原子和两个电子,被还原为FADH2。
SDH在肌肉、神经和心肌组织等处广泛存在,其缺失会导致能量代谢障碍和多种疾病。
3. 甲酰-辅酶A脱氢酶甲酰-辅酶A脱氢酶(FHADH)是三羧酸循环中最后一个以FAD 为辅酶的酶。
它作用于甲酰-辅酶A并将其转化为丙酮酸和二氧化碳,并在过程中生成FADH2。
FHADH的活性对于维持三羧酸循环正常运转非常重要,其不仅参与能量产生,而且还影响其他代谢途径,如葡萄糖-脂肪酸循环和氧化的调节。
FHADH在许多组织中都有表达,其缺失会导致许多代谢障碍和疾病。
4. 总结在三羧酸循环中,FAD辅酶酶在多个关键酶反应中扮演着不可或缺的角色。
脱羧酶、SDH和FHADH等直接以FAD为辅酶的酶,不仅参与能量产生,而且还影响其他代谢途径,如葡萄糖-脂肪酸循环和氧化的调节。
fad 氧化还原
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fad 氧化还原FAD一种有自由羟基的多电子载体,是大多数生物体中的关键组分,一种自由基反应(free-radical reaction)使得该物质具有氧化还原性质。
FAD一种小分子并具备相当广泛的活性,因此被称为“脱水烯醇”(dehydrogenase)或“脱氢酶”(coenzyme)。
它在生命过程中充当氧化还原剂,将氧化性物质(如脂肪酸)还原为还原性物质(如二氢酐)。
FAD化还原反应是生物体里最常用的氧化还原反应,它可以将氧化性物质(如脂肪酸和糖原)转化为还原性物质(如二氢酐和三磷酸腺苷)。
也就是说,FAD以直接在生物体中将氧化性物质转变为还原性物质,从而产生能量。
FAD化还原反应在多种生物过程中起着重要作用,其中一种代表性的例子是糖醛酸氧化-脱氢反应。
该反应是由一系列酶调节的,最终将糖原(常见的以赖氨酸为原料)氧化成糖醛酸,并同时产生葡萄糖盐酸和葡萄糖,从而获得能量。
该反应还能帮助使得糖原储存在生物体中的能量可以有效的释放出来。
FAD化还原反应在呼吸酶系统中也起着重大作用。
它提供了一种有效的方式,将细胞水平的氧和氧气,以及母细胞由许多种还原性物质,如水,乙醇,乙醛和乙酸等,氧化成分子氧,氧气,乙醛和乙酸,最终获取能量(ATP)。
此外,FAD化还原反应还可以用于血液中细胞毒性物质的处理,如铁,硫代硫酸钾等。
当这些物质进入血液时,它们会被FAD化为更安全的化合物,以避免对细胞的毒性。
最后,FAD化还原反应也与碳水化合物、氨基酸和脂质代谢有关。
它可以将多种碳水化合物,如糖原、葡萄糖磷酸和甘油三酯,氧化成分子氧,乙醛和乙酸,和氨基酸脂肪酸转化为肌醇和胆甾醇,并最终生成葡萄糖、乳酸和乙醇酸等能量源。
总之,FAD化还原反应是一个重要的、复杂的生物体反应。
它可以将各种氧化性物质转变为更安全的化合物,同时释放出大量的能量,从而维持生物体的活动和免受外界刺激的影响。
也是否可以在生物体中保持健康的关键所在。
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具体图 5
图 1. 最适反应 pH
图 2. 最适反应温度
图 3. pH 稳定性
图 4. 温度稳定性(62℃)
图 5. 底物专一性
FAD-葡萄糖脱氢酶
来源 重组 Pichiapastoris 酶号 E.C Number 1.1.99.10 产品用途 用于血糖监测、葡萄糖传感器和科学研究 产品规格 外观:亮黄色液体 活性:不低于 541U/mg 蛋白 检测原理 FAD-GDH 在有电子受体存在的情况下催化葡萄糖的氧化
FAD-GDH
4.最适温度(图 2):55℃
5.pH 稳定性(图 3):pH 3.5~9.0
6.温度稳定性(图 4):62℃处理时半衰期为 82min
底物专一性
将反应体系的底物分别换成 1M D-麦芽糖,D-木糖,D-半乳糖,L-阿拉伯糖,D-乳糖,海
藻糖,D-果糖,D-山梨醇和蔗糖,测定酶活并跟以 D-葡萄糖为底物的时测定的酶活比较。
β-D-Glucose + Acceptor
Glucono-1,5-lactone + Reduced Acceptor
酶活义
25℃时,在标准检测方法条件下,每分钟转化 1μmol 葡萄糖所需的酶量
性质
1.分子量(分子筛层析):65.6 kDa
2. Km:86.4±1.8 mM(D-葡萄糖)
3.最适 pH(图 1): pH7.5