植株的全氮磷钾的测定

森林植物与森林枯枝落叶层全氮、磷、钾、钠、钙、镁的测定LY/T 1271一19991范围本标准规定了采用湿灰化法测定森林植物及森林枯枝落叶层氮、磷、钾、钠、钙、镁的方法。

本标准适用于森林植物及森林枯枝落叶层氮、磷、钾、钠、钙、镁的测定。

2 引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。

本标准出版时，所示版本均为有效。

所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

L Y /T 1269-1999 森林植物与森林枯枝落叶层全氮的测定L Y / T 1270-1999 森林植物与森林枯枝落叶层全硅、铁、铝、钙、镁、钾、钠、磷、硫、锰、铜、锌的侧定。

3 待测液的制备3.1 方法要点采用硫酸一高氯酸消煮法。

植物样品用硫酸一高氯酸消煮，即可加快消煮速度，又可使二氧化硅脱水，使其吸附作用降至最低限度。

消煮好的溶液中高氯酸基本分解，剩下的为浓硫酸。

同一消煮待测液可供氮、磷、钾、钠、钙、镁的测定。

3.2 试剂混合酸：浓硫酸(密度1.8 4g /mL，分析纯)与浓高氯酸(分析纯)以10：1 体积混合，浓硫酸缓缓注入高氯酸中。

3.3 主要仪器调温电炉；凯氏烧瓶(100m L)；容量瓶(100m L),3.4 测定步骤3.4.1 称样：用台秤称取通过2m m筛孔的风干样品0.8 g (木材3.0 g )于小烧杯中，于烘箱中65℃烘24h，然后把样品移入同时在烘箱内烘干的试管中，紧接着把盛样品的试管放在干燥器内，20 min后用减量法在分析天平上把样品称入100m L凯氏瓶中(准确到0.0001 g ) 。

同时做两个试剂空白试验。

3.4.2 消煮：滴水入凯氏瓶中，使样品湿润，然后加10 mL混合酸，放置过夜或更长些时间。

次日在调温电炉上消煮样品，把温度控制在瓶内样品与酸作用后产生的泡沫不到达瓶颈，并只有少量的烟从瓶口冒出为度。

当有缕状白烟在瓶内回旋时证明瓶内高氯酸基本上已作用完了。

缕状白烟不能超过瓶颈的二分之一。

若溶液好久不见清澈透明，可把瓶子离火，当瓶颈不烫手时可加数滴高氯酸，继续消煮，如消煮液已经变白，但还成糊状，说明硅还未脱水，须继续消煮，直到无色透明后再消煮20 min，整个消煮过程要经常摇动凯氏瓶，以防局部烧干。

3.4.3 定容：消煮完后用水把消煮液全部洗人100 mL容量瓶中，并用水定容到标度，作为测定氮、磷、钾、钠、钙、镁等系统分析的消煮待测液。

如只测氮、磷、钾，则试样量及消煮用的酸量都可减半。

4 氮的测定（同L Y/T 1269- 1999中第3章）。

附件：同L Y/T 1269- 1999中第3章3.2 蒸馏法3.2.1 方法要点待测液中的硫酸铵，用氢氧化钠碱化，加热蒸馏出氨，经硼酸吸收，用标准酸滴定其含量。

3.2.2 试剂3.2.2.1 400g/L氢氧化钠溶液：400g氢氧化钠加水1L。

3.2.2.2 甲基红一溴甲酚绿混合指示剂：0.066g 甲基红与0.099g 溴甲酚绿于玛瑙研钵中研细，溶于100mL 乙醇中，变色范围pH4.4（红）～5.4（蓝）。

3.2.2.3 20g/L 硼酸溶液：20g 硼酸（H 3BO 3，分析纯）加水1L 。

3.2.2.4 20g/L 硼酸—指示剂溶液：100mL 20g/L 硼酸溶液中加入2mL 甲基红一溴甲酚绿混合指示剂。

3.2.2.5 0.0200 mol/L 21Na 2B 4O 7标准溶液：1.9068g 硼砂（Na 2B 4O 7·10 H 2O ，分析纯）溶于水后，移入500mL 容量瓶中，用水稀释至标度。

标定剂硼砂必须保存于相对湿度60%～70％的空气中，以确保硼砂含10个水合水。

通常可在干燥器的底部放置氧化钠和蔗糖的饱和溶液（并有二者的固体存在），密闭容器中空气的相对湿度即为60％～70％。

3.2.2.6 1mol/L 盐酸溶液：42mL 浓盐酸，用水定容至500mL 。

3.2.2.7 0.02mol/L 盐酸标准溶液：吸取20mL 1mol/L 盐酸溶于1L 容量瓶中，加水稀释至标度，充分摇匀，用0.0200mol/L 21Na 2B 4O 7标准溶液标定。

吸取20mL 0.0200mol/L 21Na 2B 4O 7标准溶液于100mL 锥形瓶中，加1滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，用待标定的盐酸溶液滴定，由蓝变紫红色为终点。

同时做三个重复试验。

用式（2）计算盐酸标准溶液浓度：21V V V 0200.0c -⨯= ……………………（2） 式中：c —— 盐酸标准溶液的浓度，mol/L ；V 1—— 21Na 2B 4O 7标准溶液的体积，mL ； V 2—— 滴定硼砂用去盐酸标准溶液的体积，mL ；V 0一一 滴定空白试验用去盐酸标准溶液的体积，mL ；0.0200——21Na 2B 4O 7标准溶液的浓度，mol/L 。

3.2.3 主要仪器定氮蒸馏装置；锥形瓶（250mL ）。

3.2.4 测定步骤3.2.4.1 蒸馏：往250mL 锥形瓶中加入15mL 20g/L 硼酸—指示剂溶液，将锥形瓶置于定氮蒸馏装置冷凝器的承接管下，管口置于硼酸溶液面上3～4cm 处。

把盛有全部消煮液的凯氏瓶安装在蒸馏装置上，打开冷凝水。

经三通管加入30mL 400g/L 氢氧化钠溶液。

立即打开蒸汽夹．以每分钟8mL 速度进行蒸汽蒸馏，当锥形瓶内溶液达半小瓶时，用广泛pH 试纸在冷凝管口测试蒸馏液，如无碱性反应，表示氨已蒸馏完毕；否则需继续蒸馏。

3.2.4.2滴定：吸收在硼酸溶液中的氨，用0.02mol/L 盐酸标准溶液滴定，由蓝到紫红色为终点，记下用去的盐酸标准溶液的毫升数（V ），同时进行试剂空白试验。

3.2.5结果计算1000m014.0c V -V W 0N ⨯⨯⨯=）（ …………（3） 式中，W N ——全氮含量，g/kg ；V ——滴定样品用去盐酸标准溶液体积，mL ；V 0——滴定试剂空白试验用去盐酸标准溶液体积，mL ；c ——盐酸标准溶液的浓度，mol/L ；m ——烘干样质量，g ；0.014——氮原子的摩尔质量，g/mmol 。

3.2.6.1 允许偏差按表1的规定。

注：混合指示剂最好在使用时与硼酸溶液混合，如混合过久则可能有终点不灵敏的现象发生。

3.3 扩散法3.3.1 方法要点扩散皿内圈盛硼酸溶液，外圈放待测液（含0.05～0.3mg 氮）后加入入氢氧化钠溶液，密封，产生的氨扩散在皿内，由硼酸溶液吸收，直接用标准酸滴定。

3.3.2 试剂3.3.2.1 碱性胶水：40g 阿拉伯胶加50mL 水，加热至70～80℃，搅拌促溶，放冷，加20mL 甘油及20mL 饱和碳酸钾（15g 碳酸钾加水15mL ），再调匀，离心除去泡沫。

3.3.2.2 0.01mol/L 盐酸标准溶液：吸10mL 1mol/L 盐酸于1L 容量瓶中，用水定容到标度，以0.0200mol/L 21Na 2B 4O 7标准溶液标定其精确浓度（标定方法同3.2.2.7）。

3.3.2.3 200g/L 氢氧化钠溶液：200g 氢氧化钠加水1L 。

3.3.2.4 其他试剂同3.2.2.2，3.2.2.3，3.2.2.4.3.3.3 主要仪器扩散皿（外圈10.0cm ）；微量滴定管；容量瓶（100mL ）。

3.3.4 测定步骤消煮好的待测溶液转移到100mL 容量瓶中，用水定容到标度，摇匀。

吸取上述溶液5 mL 于扩散皿的外圈及3mL 20g/L 的硼酸-指示剂溶液于内圈，扩散皿边缘上用毛笔涂上碱性胶水，盖上毛玻璃（光滑的一面在上）旋转皿盖勿使漏气，推动毛玻璃把外圈有缺口的一边露出一条狭缝，用注射器从缺口处加入8mL 200g/L 氢氧化钠溶液，立即盖严毛玻璃，然后把两个皿重叠在一起，十字交叉地套上两根橡皮筋，放入恒温箱中于40℃保温24h ，在此期间轻轻地水平摇动2-3次。

从恒温箱中取出扩散皿，去盖，用0.01 mol/L 盐酸标准溶液滴定皿内吸收氨的硼酸溶液，由蓝到紫红色为终点。

3.5 结果计算1000m014.0t c V -V W s 0N ⨯⨯⨯⨯=）（ …………（4） 式中，W N ——全氮含量，g/kg ；V ——测定样品时消耗的盐酸标准溶液体积，mL ；V 0——试剂空白试验消耗的盐酸标准溶液体积，mL ；c ——盐酸标准溶液的浓度，mol/L ；t s ——分取倍数⎥⎦⎤⎢⎣⎡===205100mL mL t s ）吸取待测液体积（）消煮液定容体积（； m ——烘干样质量，g ；0.014——氮原子的摩尔质量，g/mmol 。

3.3.6 允许偏差按表1的规定。

注1 由于碱性胶水的碱性很强，在涂胶液和洗涤扩散皿时，必须特别细心，慎防污染内室，致使造成错误。

2 滴定时要用细玻璃棒小心搅动吸收液，切不可摇动扩散皿。

5 磷的测定 （同L Y/T 1270-1999中第9章）。

采用铝锑抗比色法。

附件：同L Y/T 1270-1999中第9章9.1 方法要点待测液在一定酸度和三价锑离子存在下，其中的磷酸与钼酸铵形成锑磷钼混合杂多酸，被抗坏血酸还原为磷钼蓝，用比色法测定磷含量。

9.2 试剂9.2.1 2 g/L 4-二硝基酚指示剂：0.2g 2，4 -二硝基酚溶于100mL 水中。

9.2.2 2 mol/L 氢氧化钠溶液：80g 氢氧化钠（分析纯）溶于水，用水稀释至1L 。

9.2.3 0.5 mol/L 硫酸溶液：28mL 浓硫酸（分析纯）用水稀释至1L 。

9.2.4 铂锑贮存液： 153mL 浓硫酸（分析纯）缓缓倒入400mL 水中，搅拌，冷却。

10g 磨细的钼酸铵[（NH 4）6Mo 7O 24·4H 2O ，分析纯] 溶解于约60℃的300mL 水中，冷却。

然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中，再加入100mL 5g/L 酒石酸锑钾（KSbOC 4H 4O 6·21H 2O ，分析纯）溶液，最后用水定容至IL ，置于棕色瓶中。

此储存液中含10g/L 钼酸铵及2.8mol/L 硫酸。

9.2.5 钼锑抗显色剂：于100mL 钼锑储存液中，加1.5g 抗坏血酸。

现用现配。

9.2.6 100 μg/mL 磷（P ）标准溶液：称取0.4394g 于50℃烘干的磷酸二氢钾（KH 2PO 4，分析纯）于烧杯中，加水100mL 溶解，加10mL 浓盐酸，用水定容到IL 。

9.2.7 5μg /mL 磷（P ）标准溶液：吸取10mL 100 μg/mL 磷标准溶液于200mL 容量瓶中用水稀释至 标度。

9.3 主要仪器分光光度计；容量瓶（50mL ）。

9.4 测定步骤9.4.1 测定：吸取待测液2-5 mL 于50mL 容量瓶中．加水到15-20mL ，加1滴2,4-二硝基酚指示剂，用2mol/L 氢氧化钠溶液调到黄色，然后用0.5mol/L 硫酸溶液调到淡黄色，摇匀，用吸管加5mL 钼锑抗试剂，摇匀，用水稀释至标度，摇匀，30min 后在分光光度计上，用2cm 光径比色皿，选700nm 波长，以试剂空白溶液调仪器吸收值到零，然后测定各待测显色液的吸收值。