微生物生长量测定法

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模块三微生物生长量的测定技术(精)

微生物生长测定技术
模块三微生物生长量的测定技术
微生物生长测定技术
一、体积测量法二、重量法三、比浊法四、薄膜过滤计数法五、涂片染色法
一、体积测量法

又称菌丝浓度法，是通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量
来反映微生物的生长状况。

方法是：取一定量的待测培养液离心后,测出上清液体积为v,则
三、比浊法
特点：快速、简便；但易受干扰。
原理：在一定范围内，菌悬液中的细胞浓度与混浊度成正比，即与光密度成正比，菌数越多，光密度越大。因此，借助于分光光度计，在一定波长下测定菌悬液的光密度，就可反应出菌液的浓度。
四、薄膜过滤计数法
常用该法测定含菌量较少的空气和水中的微生
物数目。
将定量的样品通过薄膜（硝化纤维素薄膜、醋
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酸纤维薄膜）过滤，菌体被阻留在滤膜上，取下滤膜进行培养，然后计算菌落数，可求出样品中所含菌数。
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五、涂片染色法
应用：可同时计数不同微生出视野面积；取0.1mL菌
液涂于1cm2面积上，计数后代入公式：
每ml原菌液含菌数=视野中平均菌数×涂布面积/视野面积×100 ×稀释倍数
菌丝浓度为(10-v)/10。
菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标，这种方法比较粗放、简便、快速，但需要设定一致的处理条件，且由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。
二、称干重法—适合菌浓较高的样品
将一定量的菌液中的菌体通过离心或过滤分离出来,然后烘干(干燥温度可采用105℃、100℃或80℃)、称重。一般干重为湿重的10%—20%，而一个细菌细胞一般重约10-12—10-13g。举例：大肠杆菌一个细胞一般重约10–12~10–13g，液体培养物中细胞浓度达到2×109个/mL时，100mL培养物可得10~90 mg干重的细胞。

微生物生长测定方法的原理及优缺点

微生物生长测定是指通过一系列方法和技术来检测和测定微生物的生长情况，包括微生物数量、生长速率、生长条件等。

微生物生长测定方法在医药、食品、环境等领域都有着重要的应用，对于评估产品质量、卫生安全具有重要意义。

本文将从原理和优缺点两个方面对微生物生长测定方法进行分析和讨论。

一、微生物生长测定方法的原理微生物生长测定方法主要基于微生物在特定条件下的生长特性来进行测定。

常见的微生物生长测定方法包括培养计数法、营养物质利用法、生物发光法等，下面针对每种方法的原理进行详细介绍。

1.培养计数法培养计数法是通过将待测样品在适宜的营养培养基上培养一定时间后，根据所形成的微生物菌落数量来进行测定微生物数量的方法。

其原理是利用微生物在特定条件下的生长特性，以及对不同影响因素的适应能力。

通过控制培养基的成分和环境条件，可以使不同菌种在不同条件下得到生长，并最终形成可见的菌落。

根据菌落的数量和形态，可以初步判断出待测样品中微生物的种类和数量。

2.营养物质利用法营养物质利用法主要是利用微生物对不同的碳源、氮源、氢源、无机盐等物质的利用能力来进行测定微生物的数量和生长情况。

其原理是根据微生物对不同营养物质的需求和利用方式，采用不同的培养基和特定的条件，使不同微生物菌种在不同培养基上的生长情况有所差异，通过观察和测定微生物生长的情况来推断待测样品中微生物的数量和种类。

3.生物发光法生物发光法是一种利用微生物在特定条件下产生发光现象来进行测定微生物数量和生长情况的方法。

其原理是利用微生物在特定条件下产生的发光物质，例如荧光素、发光菌等，通过测定发光强度和时间来间接推断微生物的数量和生长情况。

二、微生物生长测定方法的优缺点微生物生长测定方法在实际应用中具有一定的优点和局限性，下面将针对不同的方法进行分析和讨论。

1.培养计数法的优缺点优点：(1) 可以直接观察和测定微生物的数量和生长情况，结果直观准确。

(2) 可以根据培养基的选择和条件的控制，选择性培养出目标微生物。

微生物生长的测定方法

微生物生长的测定方法作者：刘华来源：《神州·下旬刊》2013年第02期摘要：微生物生长情况可以通过测定单位时间里微生物数量或生物量（biomass）的变化来评价。

通过微生物生长的测定可以客观地评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响，或评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制（或杀死）作用的效果，或客观地反映微生物生长的规律。

因此微生物生长的测量在理论上和实践上有着重要的意义。

关键词：微生物测定方法计数法生理指标法微生物生长的测定有计数、重量和生理指标等方法。

1、计数法此法通常用来测定样品中所含细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量。

计数法又分为直接计数和间接计数两类。

⑴直接计数这类方法是利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。

此法的缺点不能区分死菌与活菌。

计数板是一块特制的载玻片，上面有一个特定的面积l mm2和高0.1mm的计数室，在1mm2的面积里又被刻划成25个（或16个）中格，每个中格进—步划分成16个（或25个）小格，但计数室都是由400个小格组成。

将稀释的样品滴在计数板上，盖上盖玻片，然后在显微镜下计算4-5个中格的细菌数，并求出每个小格所含细菌的平均数，再按下面公式求出每毫升样品所含的细菌数。

每毫升原液所含细菌数=每小格平均细菌数×400×l000×稀释倍数⑵间接计数法此法又称活菌计数法，其原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。

将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取0.2ml 故人无菌平皿，再倒人适量的已熔化并冷至45℃左右的培养基，与菌液混匀，冷却、待凝固后，放人适宜温度的培养箱或温室培养，长出菌落后，计数，按下面公式计算出原菌液的含菌数：每毫升原菌液活菌数=同一稀释度三个以上重复平皿菌落平均数×稀释倍数×5此法可因操作不熟练造成污染，或因培养基温度过高损伤细胞等原因造成结果不稳定。

微生物的大小及数量的测定

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微生物试验报告
内沿盖玻片的右上角滴入一小滴(不宜过多)，使菌液沿两玻片间自行渗入计数室，勿使产生气泡，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌液。 (3)先在低倍镜下找到计数室后，再转换高倍镜观察计数。 (4)计数时用 16 中格的计数板，要按对角线方位，取左上、左下、右上、右下的 4 个中格(即 100 小格)的酵母菌数。如果是 25 中格计数板。除数上述四格外，还需数中央 1 中格的酵母菌数(即 80 小格)。由于菌体在计数室中处于不同的空间位置，要在不同的焦距下才能看到，因而观察时必须不断调节微调螺旋，方能数到全部菌体，防止遗漏。如菌体位于中格的双线上，计数时则数上线不数下线，数左线不数右线，以减少误差。 (5)凡酵母菌的芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算。每个样品重复分数 2-3 次(每次数值不应招差过大，否则应重新操作)，取其平均值，按下述公式计算出每毫升菌液所含酵母菌细胞数（ 25 中格）。
关键词
目镜测微尺物镜测微尺血球计数板
前言
微生物细胞的大小，是微生物重要的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一，也让我们对微生物的实际大小有了一个感性的认识。微生物数量的测定在微生物生长曲线中运用非常重要，我们从微生物的数量上了解其生长状况，这也能指导我们的生产工业。
一、实验目的
1. 了解显微镜测定微生物大小与血球计数板测定微生物数量的原理。 2. 学习并掌握显微镜下测定微生物细胞大小的技术，包括目镜测微尺、镜台测微尺的校正技术与测定细胞大小的技术。 3. 了解血球计数板的结构，学习并掌握血球计数板计数微生物数量的技术，包括样品的点样、菌数计数的方法与计算。
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微生物（2）镜台测微尺（图 2）

土壤微生物数量测定方法

土壤微生物数量测定方法土壤微生物是指生活在土壤中的微小生物，包括细菌、真菌、放线菌、古菌等。

土壤微生物在土壤的生物地球化学循环、有机质分解、养分转换和植物健康等过程中起着重要的作用。

因此，对土壤微生物数量的准确测定具有重要意义。

本文将介绍一些常用的土壤微生物数量测定方法。

1.瓶培法：将适量的土壤样品与适量的培养基混合，在37°C下培养约24小时，然后通过平板计数法或最凼稀释法进行测定。

2.膜过滤法：将土壤提取液通过特定孔径的膜过滤器滤过，然后将膜放置在培养基上进行细菌的生长，最后进行计数。

3.间接法：通过测定土壤样品的可培养细菌指标，如氧化还原酶、脱氢酶等的活性，从而推算出土壤中的细菌数量。

4.分子生物学方法：通过PCR扩增土壤DNA中的细菌基因，如16SrRNA基因，再通过测定PCR产物进行细菌数量的测定。

1.直接镜检法：直接在显微镜下观察土壤样品中的真菌，通过计数来估算真菌的数量。

2.平板计数法：将土壤样品均匀撒在培养基上，通过培养方法使真菌生长形成菌落，最后进行计数。

3.膜过滤法：与细菌数量测定相似，将土壤提取液通过膜过滤器滤过，然后将膜放置在适当的培养基上进行真菌的生长，最后进行计数。

4.分子生物学方法：通过PCR扩增土壤DNA中的真菌基因，如18SrRNA基因，再通过测定PCR产物进行真菌数量的测定。

1.直接镜检法：直接在显微镜下观察土壤样品中的放线菌，通过计数来估算放线菌的数量。

2.平板计数法：将土壤样品均匀撒在培养基上，通过培养方法使放线菌生长形成菌落，最后进行计数。

3.膜过滤法：与细菌和真菌数量测定类似，将土壤提取液通过膜过滤器滤过，然后将膜放置在适当的培养基上进行放线菌的生长，最后进行计数。

4.分子生物学方法：通过PCR扩增土壤DNA中的放线菌基因，如16SrRNA基因，再通过测定PCR产物进行放线菌数量的测定。

通过上述方法测定土壤中微生物的数量，可以了解土壤微生物对土壤生态系统功能的影响，并为土壤质量评价和科学合理利用提供依据。

土壤微生物生物量测定方法

土壤微生物生物量测定方法
土壤微生物生物量的测定方法有很多种，一般可以分为直接和间接测定方法。

直接测定方法包括：
1. 水解法：将土壤样品经过水解处理，然后通过高密度离心和显微镜观察计数获得微生物生物量。

2. 利用滴定法：通过向土壤中添加抑制剂或适宜的滴定液，测定细菌和真菌的数量以确定生物量。

3. 融解法：将土壤样品与溶解剂混合，在特定温度下溶解土壤中的微生物，然后通过测定溶液中的生物量来计算土壤中的微生物生物量。

间接测定方法包括：
1. 培养基测定法：将土壤样品接种到特定的培养基中，利用培养基中微生物生长所需的营养物质来测定微生物生物量。

2. 脂肪酸测定法：通过提取土壤样品中的脂肪酸，并利用气相色谱仪测定来确定微生物的生物量。

3. 磷脂酸测定法：通过提取土壤中的磷脂酸，并利用色谱或质谱仪测定磷脂酸来估计微生物生物量。

这些方法各有优缺点，选择适合的方法需要考虑实验条件、样品处理的方便程度
和测定结果的准确性。

微生物数量的测定方法

微生物数量的测定方法微生物数量的测定方法微生物是一类微小的生物体，包括细菌、真菌、病毒等。

它们广泛存在于自然界中的土壤、水体、空气中，也存在于人体内外。

了解微生物的数量对于环境监测、食品安全、医学诊断等领域具有重要意义。

本文将介绍几种常用的微生物数量测定方法。

1. 直接计数法直接计数法是最直接、最常用的微生物数量测定方法之一。

它通过显微镜观察和计数来确定微生物的数量。

首先，将待测样品制备成适当的悬浮液，然后在显微镜下观察，并使用计数器进行计数。

这种方法适用于细菌和酵母等较大的微生物。

但是，由于显微镜观察需要较高的技术水平和时间，所以无法快速测量大量样品。

2. 培养法培养法是一种常用的微生物数量测定方法，它通过培养微生物并计数生长的菌落来确定数量。

首先，将待测样品制备成适当的培养基，然后在恰当的温度和湿度条件下培养一段时间。

培养基中的微生物会形成可见的菌落，通过计数菌落的数量来确定微生物的数量。

这种方法适用于大部分微生物，但是它需要一定的培养时间，并且某些微生物可能无法在常规培养基上生长。

3. 膜过滤法膜过滤法是一种常用的微生物数量测定方法，它通过将待测样品过滤到膜上，并将膜培养在适当的培养基上来确定数量。

首先，将待测样品通过特定孔径的过滤器过滤，然后将过滤后的膜放置在培养基上培养。

培养基中的微生物会在膜上形成可见的菌落，通过计数菌落的数量来确定微生物的数量。

这种方法适用于水样、空气样等液态和气态样品。

4. 分子生物学方法分子生物学方法是一种新兴且快速发展的微生物数量测定方法。

它通过检测和分析微生物DNA或RNA来确定数量。

常用的分子生物学方法包括聚合酶链反应（PCR）、实时荧光定量PCR（qPCR）等。

这些方法可以快速、准确地测定微生物的数量，并且可以检测到少量微生物。

但是，分子生物学方法需要一定的实验设备和技术，并且对样品预处理要求较高。

总结起来，微生物数量的测定方法有直接计数法、培养法、膜过滤法和分子生物学方法等。

微生物的生长量的测定方法

实验误差分析
误差来源
01
分析实验过程中可能出现的误差来源，如样品采集、培养条件
控制、测定方法等。
误差控制
02
采取有效措施，如使用标准品、进行重复实验等，减小误差对
实验结果的影响。
误差评估
03
对实验误差进行评估，了解误差对实验结果的影响程度，提高
实验的准确性和可靠性。
THANKS
感谢观看
显微镜直接计数法
总结词
显微镜直接计数法是通过显微镜观察微生物细胞并计数来测定微生物生长量的方法。
详细描述
该方法通过显微镜观察微生物细胞，利用血球计数板或细胞计数板进行计数，根据计数结果计算微生物生长量。该方法适用于各种生长阶段的微生物生长量测定，但操作较为繁琐，需要一定的技术要求。
流式细胞计数法
菌落计数法
总结词
菌落计数法是一种通过培养微生物并计数菌落数量来测定微生物生长量的方法。
详细描述
该方法通过将微生物接种在固体培养基上，经过一定时间的培养，微生物繁殖形成肉眼可见的菌落，然后通过计数菌落的数量来推算原始接种的微生物数量。该方法适用于对数生长期的微生物生长量测定，具有操作简单、直观的优点。
通过测量与微生物生长相关的生理指标来间接评估微生物的生长量。
详细描述
生理指标法包括测量细胞密度、细胞形态、细胞代谢产物等，这些指标的变化与微生物的生长状态密切相关，可以间接反映微生物的生长量。
比浊法
总结词
利用微生物悬液的光学性质来测量其浓度，从而评估微生物的生长量。
详细描述
比浊法是通过测量微生物悬液的光密度来计算微生物的浓度。在一定波长下，光密度与微生物浓度呈线性关系，因此可以用来评估微生物的生长量。该方法操作简便、快速，适用于大量样本的快速检测。

微生物的生长量的测定方法

2. 间接计数法
➢液体稀释法
将待测样品作一系列稀释，一直稀释到取少量该稀释液 (如1mL)接种到新鲜培养基中没有出现生长繁殖为止。
具体做法是取单细胞菌悬液在定量培养基中做系列稀释培养，在一定稀释度以前的培养基中接上菌，出现生长，而在这个稀释度以后的培养液中没有接上菌，不出现菌的生长，这最后一级出现菌生长的稀释度称为临界级数，从 3～5次重复的临界级数求最大概率数(MPN)，就可得到较可靠的结果。
特点：快速，准确，对酵母菌可同时测定出率，或在菌悬液中加入少量美蓝可以区分死活细胞。
计数室
盖玻片
血球计数板是一块特别的厚玻璃片，玻片上有四条沟和两条嵴。中央有一短横沟和两个平台，两嵴的表面比两个平台的表面高0.1mm，每个平台上刻有不同规格的格网，中央1mm2面积上刻有 400个小方格(图A)。
1
11.0
2
14.0
0
13.0
1
17.0
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3
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2. 间接计数法
➢薄膜过滤计数法
常用该法测定含菌量较少的空气和水中的微生物数目。
将定量的样品通过薄膜（硝化纤维素薄膜、醋酸纤维薄膜）过滤，菌体被阻留在滤膜上，取下滤膜进行培养，然后计算菌落数，可求出样品中所含菌数。
原液所含菌体数（mL） =每小格平均菌体数×400×104×稀释倍数
计数区的结构
2. 间接计数法
➢平板菌落计数法
将待测样品进行适当稀释，取一定的菌悬液涂布平板，让微生物的单细胞一一分散在平板上
，经适宜条件培养
，每个活细胞就会形成单菌落，然

测量细菌的生长速率

测量细菌的生长速率细菌是微小但却广泛存在于我们周围的微生物，它们对我们的生活有着巨大的影响。

测量细菌的生长速率是一项重要的科学实验，它帮助我们了解细菌的生命周期和繁殖方式。

在这篇文章中，我们将探讨测量细菌生长速率的方法和其意义。

首先，要测量细菌的生长速率，我们需要准备一定数量的细菌培养基。

细菌培养基是一种特殊的营养物质，可以提供细菌生长所需的营养物质和环境条件。

它通常由水、糖、盐和其他必要的无机盐组成。

在实验过程中，我们需要确保细菌培养基的成分和浓度足够适宜，以促进细菌的生长和繁殖。

接下来，我们需要收集细菌样本并将其悬浮于培养基中。

这可以通过在细菌样本中使用稀释液，然后将混合液滴入培养基中来实现。

这样做的目的是确保我们在培养基中有一定数量的细菌，以便更好地观察它们的生长过程。

在试验开始后的一段时间内，我们需要定期观察细菌培养基中的细菌数量变化。

这可以通过在不同时间点上取样并使用显微镜观察细菌数量来实现。

这样一来，我们既可以了解细菌数量的变化趋势，又可以计算出细菌的生长速率。

在观察细菌数量变化时，我们可以发现细菌呈现出一个明显的生长曲线。

一开始，细菌数量较少，但随着时间的推移，其数量会以指数级增长。

然而，在某个时间点后，细菌数量会趋于稳定，不再出现指数增长的趋势。

这意味着细菌已经达到了其承载能力的极限，不能再继续增长。

通过观察这个生长曲线，我们可以计算出细菌的最大生长速率和周期。

测量细菌的生长速率对于了解微生物生态学和细菌传播方式具有重要意义。

通过测量细菌生长速率，我们可以预测细菌在不同环境条件下的繁殖行为，并做出相应的控制和处理。

此外，如果我们可以测量细菌在不同抗生素条件下的生长速率，就可以帮助医生选择合适的抗生素来对抗感染。

细菌的生长速率测量也对农业和环境保护有重要意义。

在农业领域，测量细菌生长速率可以帮助农民确定合理的施肥量和农药使用时间，从而提高农作物产量和保护环境。

在环境保护方面，测量细菌生长速率有助于监测水体和土壤中的污染情况，及时采取措施保护生态系统的健康。

微生物生长量的测定技术

模块二微生物生长量的测定技术
• 微生物生长的测定除了可以测定细胞的数目，还可以测定细胞的生长量以及与生长量相平行的生理指标。
一、测体积法
• 把待测培养液放在带刻度离心管中作自然沉降或进行一定时间的离心，然后观察其体积。（是一种粗放的方法）
二、重量法
以干重/湿重直接衡量微生物群体的生物量
适用于菌体浓度较高的样品，要除尽杂质
湿重法将微生物培养液离心，收集细胞沉淀物，然后称重。
干重法将一定量的菌液中的菌体通过离心或过滤分离出来,然后烘干(干燥温度可采用105℃、100 ℃或80℃)、称重。一般干重为湿重的10% — 20%，而一个细菌细胞一般重约10-12—10-13g。
该法适合菌浓较高的样品。举例：大肠杆菌一个细胞一般重约10 –12 ~10 – 13g，液体培养物中细胞浓度达到2×109个/ml时， 100ml培养物可得10~90mg干重的细胞。
三、生理指标法
1.含氮量测定法
蛋白质是细胞的主要物质，含量稳定，而氮是蛋白质的主要成分，通过测含氮量就可推知微生物的浓度。一般微生物细胞的含氮量比较稳定，可以用凯氏定氮法等测其总量，再乘以系数6.25即为粗蛋白含量，蛋白含量越高，说明菌体数和细胞物质量越高。
这种方法适用于菌体浓度较高的样品。操作过程繁琐，适用于研究工作。
2.含碳量测定法
• 微生物新陈代谢的结果，必然要消耗或产生一定量的物质，以表示微生物的生长量。一般生长旺盛时消耗的物质就多，或者积累的某种代谢产物也多。
3、DNA含量测定法微生物细胞的DNAபைடு நூலகம்量比较稳定，采用适当的荧光指示剂与菌体DNA作用，荧光比色或分光光度计法测DNA含量。
4、其它生理指标法

微生物生长繁殖的测定方法

微生物生长繁殖的测定方法嘿，咱今儿个就来唠唠微生物生长繁殖的测定方法。

你说这微生物啊，小不点儿一个，可它们的世界那也是相当精彩呢！要想知道微生物咋生长繁殖的，咱就得有办法去测量不是？这就好比你想知道自己跑多快，总得有个秒表啥的来测测吧。

咱先说说直接计数法。

嘿，就像你直接数星星一样，咱直接去数微生物的个数。

不过这可不是用眼睛瞪着看就行的哦，得借助专门的工具，比如显微镜。

想象一下，在那小小的镜头下，一个个微生物就像小精灵似的出现啦，然后咱就一个一个地数。

这办法简单直接，但也有点麻烦，毕竟微生物那么多，数起来可得费点功夫呢。

还有间接计数法呢！这就好比你通过看脚印来推测有多少人走过。

咱可以通过测量微生物生长过程中产生的一些东西来推断它们的数量。

比如说测测培养液的浑浊度呀，或者看看产生了多少代谢产物。

就好像一个人吃了多少东西，咱能大概猜到他有多饿一样。

平板菌落计数法也很常用呢！咱把微生物均匀地涂在平板上，等它们生长出一个个小菌落，就像一朵朵小花在平板上绽放。

然后数菌落的数量，不就知道有多少微生物啦？这就像是在一块大草坪上数花朵，是不是挺有意思？比浊法也不错呀！微生物多了，培养液就会变得浑浊，就像清水里加了泥土一样。

咱通过测量这种浑浊度的变化，就能大概知道微生物的生长情况啦。

这是不是有点像看着河水变浑浊就知道下雨啦？哎呀呀，这些测定方法各有各的用处和特点呢！咱得根据不同的情况选择合适的方法。

就像你去不同的地方得穿不同的鞋子一样，得合适才行呀。

咱研究微生物生长繁殖的测定方法可不是为了好玩，那用处可大着呢！比如说在食品加工里，得知道有没有微生物超标呀，不然吃坏了肚子可咋办。

在医学上，更是重要啦，得监测细菌病毒啥的，好对症下药呀。

总之呢，微生物生长繁殖的测定方法就像是我们了解微生物世界的一把钥匙，打开了这扇门，才能更好地探索微生物的奥秘。

所以呀，咱可得好好掌握这些方法，和微生物来一场奇妙的互动之旅哟！。

微生物数量测定

微生物数量测定在生物学和医学领域，微生物的数量测定是一个重要的实验技术。

通过对微生物数量的测定，我们可以了解生物体在不同环境中的适应性和生存能力，评估环境的健康状态，以及监测和治疗疾病等。

微生物数量测定的基本原理是利用单位体积或单位面积上的微生物细胞数，通过统计和计算得到微生物的数量。

常用的方法包括显微镜计数法、比浊法、平板计数法等。

显微镜计数法是一种直接计数法，通过显微镜观察并计数样品中的微生物数量。

该方法需要将样品均匀涂布在载玻片上，干燥后进行染色和固定，然后使用显微镜观察并计数。

该方法的优点是简单易行，适用于微生物数量较少的样品，但不适用于大量样品。

比浊法是一种通过测量样品的浊度来测定微生物数量的方法。

该方法是通过将样品与标准曲线进行比较，得出微生物的数量。

该方法的优点是快速、简便、准确度高，适用于大量样品的测定。

但是，该方法需要使用标准曲线，对于某些微生物可能不太准确。

平板计数法是一种通过培养微生物并计数菌落数量来测定微生物数量的方法。

该方法是将样品稀释后涂布在培养基上，培养一定时间后统计菌落数量，然后计算出微生物的数量。

该方法的优点是准确度高，适用于各种微生物的测定，但需要一定的培养时间和人力。

微生物数量测定的应用领域非常广泛，包括环境科学、医学、食品科学、农业科学等。

例如，在环境科学中，微生物数量测定可以用来评估污染物的毒性对生态环境的影响；在医学中，微生物数量测定可以用来监测和治疗疾病；在食品科学中，微生物数量测定可以用来控制食品的质量和安全；在农业科学中，微生物数量测定可以用来了解土壤的健康状况和作物的生长情况等。

微生物数量测定是一种重要的实验技术，广泛应用于生物学和医学等领域。

通过对微生物数量的测定，我们可以更好地了解生物体的适应性和生存能力，评估环境的健康状态，监测和治疗疾病等。

未来随着科技的不断进步和应用领域的不断拓展，微生物数量测定的方法和应用将更加多样化和精准化。

在生物学和医学领域，微生物的大小和数量的测定对于研究生命过程、疾病诊断和治疗等方面都具有重要的意义。

土壤微生物生物量的测定方法

土壤微生物生物量的测定方法土壤微生物生物量是衡量土壤生态系统功能的重要指标之一、测定土壤微生物生物量可以帮助我们了解土壤生态系统的活跃度和健康状况，进而指导土壤环境修复以及农田生产管理。

氯仿熏蒸法是一种常用的测定土壤微生物生物量的方法，本文将对该方法进行详细介绍。

首先，介绍氯仿熏蒸法的原理。

氯仿是一种广谱杀菌剂，可以破坏土壤中的微生物细胞膜，使微生物失去活性。

在测定土壤微生物生物量时，将土壤样品放置在含有适量氯仿的密闭容器中，通过熏蒸的方式杀灭土壤中的活性微生物。

熏蒸时间通常为24小时。

然后，通过测定氯仿熏蒸前后土壤中可溶性氮的浓度差异，计算出土壤微生物生物量。

其次，介绍氯仿熏蒸法的操作步骤。

首先，将采集到的土壤样品通过筛网筛选除去杂质。

然后，将土壤样品平均分配到已预先称量好的量筒中。

每个量筒中的土壤样品重量应保持一致。

为了保证测定的准确性，通常会设置重复样品。

接下来，在密闭容器的底部放置氟化钾和含有适量氯仿的吸附剂。

然后，将装有土壤样品的量筒设置在容器的顶部，将密闭容器封闭并在室内温度下进行熏蒸。

熏蒸时间通常为24小时。

熏蒸结束后，取出含有氯仿的吸附剂，并将土壤样品离心以去除残余的溶液。

最后，用适量的蒸馏水冲洗残留在土壤样品中的溶解态氮，并测定冲洗液中溶解态氮的浓度。

最后，介绍氯仿熏蒸法的数据分析和结果解释。

首先，通过测定熏蒸前后土壤样品中可溶性氮的浓度差异，计算出土壤微生物生物量。

常用的计算公式为：其中，溶液体积为冲洗液的体积，土壤样品质量即为放置在量筒中土壤样品的质量。

通过计算，可以得出土壤微生物生物量的结果。

根据测定结果，我们能够了解土壤微生物的数量和活性程度。

较高的土壤微生物生物量通常表示土壤中的微生物丰富多样且活跃，土壤生态系统功能较好。

而较低的土壤微生物生物量则提示土壤中微生物数量和活性较低，土壤生态系统功能受到一定程度的抑制。

因此，通过氯仿熏蒸法测定土壤微生物生物量，可以为土壤环境修复和农田生产管理提供科学依据。

微生物生长测定方法

微生物生长测定方法
常用测定微生物生长的方法有：
1)、称干重法。

可用离心法或过滤法测定。

优点：可适用于一切微生物，缺点：无法区别死菌和活菌。

2)、比浊法。

原理：由于微生物在液体培养时，原生质的增加导致混浊度的增加，可用分光光度计测定。

优点：比较准确。

3)、测含氮量，大多数微生物的含氮量占干重的比例较一致，根据含氮量再乘以6。

25即可测得其粗蛋白的含量。

4)、血球计数板法。

优点：简便、快速、直观。

缺点：结果包括死菌和活菌。

5)、液体稀释法。

对未知菌样作连续的10倍系列稀释，经培养后，记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查MPN表，再根据样品的稀释倍数就可计算其中的活菌含量。

优点：可计算活菌数，较准确。

缺点：比较繁琐。

6)、平板菌落计数法。

取一定体积的稀释菌液涂布在合适的固体培养基，经培养后计算原菌液的含菌数。

优点，可以获得活菌的信息。

缺点：操作繁琐，需要培养一定时间才能获得，测定结果受多种因素的影响。

微生物生长量的测定

微生物学研究中常常要进行微生物生长量的测定。

有多种方法可用于微生物生长量的测定，概括起来常用的有以下几种：(一)自接计教法(又称全数法)1．计数器直接测数法取定量稀释的单细胞培养物悬液放置在血球计数板(细胞个体形态较大的单细胞微生物，如酵母菌等)或细菌计数板(适用于细胞个体形态较小的细菌)上，在显微镜下计数一定体积中的平均细胞数。

换算出供测样品的细胞数。

(1)血球计数板及细胞计数血球计数板是一种在特定平面上划有格子的特殊载片。

在划有格子的区域中，有分别用双线和单线分隔而成的方格。

其中有以双线为界划成的方格25(或16)格，这种以双线为界的格子称为中格(见图5-10)。

其内有以单线为界的16(或25)小格。

因此，用于细胞计数的区域的总小格数为：25×16=400。

该400个小格排成一正方形的大方格，此大方格的每条边的边长为1mm，故400个小格的总面积为1mm2。

在进行细胞计数前，先取盖玻片盖于计数方格之上．盖玻片的下平面与刻有方格的血球计数板平面之间留有0．1mm高度的空隙。

含有细胞的供测样品液被加注在此空隙中。

加注在400个小格(1mm2)之上与盖玻片之间的空隙中的液体总体积应为：1．0mm×1．0mm×0．1mm=0．1mm3一般表示样品细胞浓度的单位为亿个/mL。

因此，在计数后。

获得在400个小格中的细胞总数，再乘以104，以换算成每mL所含细胞数。

其计算公式如下：菌液的含菌数／mL=每小格平均菌数×400×10 000×稀释倍数在进行具体操作时，一般取；个中格进行计数，取格的方法一般有两种：①取计数板斜角线相连的5个中格；②取计数板4个角上的4个中格和计数板正中央的1个中格。

对横跨位于方格边线上的细胞，在计数时，只计一个方格4条边中的2条边线上的细胞，而另两条边线上的细胞则不计。

取边的原则是每个方格均取上边线与右边线或下边线与左边线。