爱德华氏菌

鲇鱼爱德华氏菌
培养特征
1.鲇鱼爱德华氏菌是爱德华氏菌属细菌中较难养的, 在培养基平板上生长较缓慢, 常需培养约48 h才能形成直 径1-2mm、圆形光滑、边缘整齐、 稍隆起的无色小菌落; 2. 鲇鱼爱德华氏菌更喜欢较低的温度,其最适一般为 25～30℃,在37℃时生长缓慢或完全不能生长,尤其是运 动力只有在约28℃时才能表现出来且是微弱的; 3.该菌为爱德华氏菌中生化活性最低的一个种
检测方法
对于斑点叉尾鮰的这种疾病可以根据病鱼规格、症状、 病变和流行季节的特点可做出初步诊断。将病鱼脏器与肌肉 做成除菌匀浆液，经注射途径接种健康鱼种可使之发病死亡； 或者将该液接种敏感细胞，接种后2d左右出现细胞病变效应 （CPE）;或者利用电子显微镜观察到CCHV粒子，就可以对 该疾病作出准确诊断。从患病或将要死的鱼体中分离致病菌， 以血浆琼脂在30下℃纯培养24小时后，可以分辨出这种菌。 这种致病菌的主要理化特性如下：为G细胞色素氧化酶阴性， 在葡萄糖O/F培养基中可以发酵产气，在 30℃条件下，经三 糖铁（triple sugariron，TSI）培养基中不产生硫化氢和吲哚， 在25℃下可以活动，而在37℃下失去活动性，几乎所有的 E.ictaluri都具有血清学的同源性，因此，一些血清学的手段， 如荧光抗体和免疫酶技术均可以用于ESC的诊断。
• 麦康凯琼脂培养基：选择性生长革兰氏阴 性菌，含胆盐及龙胆紫，加了乳糖和中性 红来辨别乳糖发酵菌，如果可发酵乳糖， 菌落为粉红色；不发酵为透明。 • 胆盐硫化氢乳糖琼脂（DHL）培养基：用 于沙门氏菌和志贺氏菌的选择性分离培养。 • SS琼脂培养基：沙门氏菌属、志贺氏菌属 选择琼脂培养基，它对沙门氏菌和志贺氏 菌都具有选择性。 • 亚硫酸铋琼脂（BSA）培养基：用于沙门 氏菌的选择性培养。
迟钝爱德华氏菌
防治
化学治疗法：庆大霉素、氨苄青霉素、新霉素、土霉素、氯霉 素、四环素、链霉素及磺胺类药物
疫苗防治：灭火疫苗、亚单位疫苗、核酸疫苗
生物防治：Patilet 等从海洋底质分离到了有抗迟钝爱德华菌作 用的链霉菌。Wu Chao发现了一种针对迟钝爱德华菌的噬菌体 Phi ET-1,对该菌有很强的杀灭作用。
生物学特性
• 属的共同特性：小直杆菌, 革兰氏染色阴性,兼性 厌氧, 具周生鞭毛，无荚膜，盐度为0-40，pH为 5.5-9.0，有运动性，最适生长温度为31℃，鲇鱼 爱德华氏菌(E.ictaluri)喜欢较低的温度。 • 发酵D-葡萄糖及其他一些碳水化合物产酸产气,但 与肠杆菌科中大多数其他种类相比其活性差得多; 氧化酶阴性, 接触酶阳性, 赖氨酸及鸟氨酸脱羧酶 阳性, 还原硝酸盐为亚硝酸盐, 发酵麦芽糖和D-甘 露糖。 • 时常被分离于冷血动物肠道及其他环境尤其是淡 水中,在温血动物和人也可被分离到;对鳗鲡、鲇鱼 和其他动物致病,对人属罕见的机会致病菌。
鲇鱼爱德华氏菌
防治策略
1. 引进鱼苗和鱼种时严格实施检疫，避免引进带有病 毒的斑点叉尾鮰 2. 加强饲养管理，保持良好的水质，控制斑点叉尾鮰 苗种的放养密度 3. 在水温较高时，不要拉网作业，不要运输鱼种
保科爱德华氏菌
• 保科爱德华菌在15-42℃、pH值为 5.5-9.0的 水环境中生存。 • 接种于 Columbia羊血琼脂培养基上, 37℃培 养24h。为β溶血，灰白色、半透明菌落，革 兰氏染色，镜检呈阴性杆菌。 • 保科爱德华氏菌：有关本菌其他理化特性方 面的记述较少,在鱼类的致病作用方面也不像 另外两种那样明确。
迟钝爱德华氏菌
检验方法
• 细菌学：
分离培养、形态特征检查、生理生化特性检查 • 免疫学： 间接荧光抗体技术：一种免疫标记技术。即应用荧光标 记的二抗,通过与第一抗体结合而检测未知抗原。 抗迟钝爱德华菌的单克隆抗体建立起免疫组织化学的酶 染色检验方法 FITC（异硫氰酸荧光素）标记兔抗迟钝爱德华菌抗体
THANK YOU!
微生态制剂防治：Kwon S R（2007） 等用迟钝爱德华菌菌体 （ETG）做为口服制剂饲喂牙鲆，能有效的抵抗迟钝爱德华菌 的感染。Pirarat N（2006）等分离出了属于乳酸杆菌的鼠李糖 乳酸杆菌，它能够增强罗非鱼的补体系统，使噬菌体细胞积聚， 增强噬菌体细胞的杀菌力，能有效的防治感染迟钝爱德华氏菌 感染引起的的败血病。
迟钝爱德华氏菌：在许多资料中也被记为迟缓爱德华氏菌或缓 慢爱德华氏菌,该菌于1959 年由日本的Sakazaki 和Murata首先 分离到,美国疾病控制中心(CDC)的Ewing 等曾将其称为杆菌 1483-59( Bacterium 1483-59),1962年Sakazaki等根据对256 株 的生物学特性研究后将其取名为Asakusa菌群, 1964年King和 Adler将其称为Bartholomew 菌群, 1965年Ewing等在对其进一 步研究的基础上,建议将此菌正式命名为迟钝爱德华氏菌(E. tarda Ewing and McWhorter 1965)。 鲇鱼爱德华氏菌：曾被称为爱德华氏菌“ GA7752” 群( Hawke, 1979) ,在有的书籍中也将其称为鮰爱德华氏菌或鮰鱼爱德华氏 菌。此菌分离于美国东南部池塘养的鲇鱼中,尤其是养鲇鱼比较 集中的密西西比河口区域。 保科爱德华氏菌：在有的书籍中也被记作霍欣爱德华氏菌或浩 辛爱德华氏菌。
迟钝爱德华氏菌
2.抗宿主免疫机制 巨噬细胞介导的杀伤是细菌细胞进入宿主体内所遇到的 第一道防线。病原菌进入宿主后首先必须克服宿主的防御 机制，才能在宿主体内存活和繁殖，同时具备在宿主非吞 噬细胞和吞噬细胞中存活和复制的能力，才能对宿主进行 系统的感染。 3.分泌毒素
Ullah Arai发现迟钝爱德华氏菌中含有两种外毒素，它 们可引起兔皮肤红斑和兔浮肿和溃疡性红斑。Chung 发现 对磷脂酞乙酰胺、磷脂酞胆碱和鞘磷脂有特异活性的外毒 素。葛艳等发现迟钝爱德华菌的外毒素能致HEp-2细胞产 生病变,变圆,脱落等。
致病作用
迟钝爱德华氏菌
Βιβλιοθήκη Baidu
1.粘附和侵袭 鞭毛作为一种粘附素，协助细菌黏附到细胞表面，并通过 诱发微丝重排而侵入到细胞内部 致病相关因子：血溶素、溶血素、铁载体、粘附素和侵袭 素等，细胞外产物和菌体成分均含有毒素。 通过口腔灌注、 肌肉注射和腹腔注射等方法均可使牙鲆感 染迟缓爱德华氏菌, 说明其可以通过食物和体表的伤口多种途径 感染。 迟缓爱德华氏菌作用的靶器官主要是肝脏和肾脏。
鲇鱼爱德华氏菌
主要入侵对象：斑点叉尾鮰 症状：早期食欲减退；严重时呈“吊水”状，即头朝水 面，尾垂；当收到刺激时，作螺旋状快速翻转或不规 则游动，这是濒死征兆。 病鱼变化：主要是有血样或清水样腹水；脂肪组织、肝、 肠、肌、体腔壁有紫斑样出血，肾、肝和脾脏肿大， 脾呈深红色，肝组织有白色坏死灶。
鲇鱼爱德华氏菌
迟钝爱德华氏菌
宿主种类
更为重要的是,迟钝爱德华氏菌还是一种重要的人 畜共患病的病原菌,是爱德华氏菌属中唯一感染人的 成员。人们通过接触带有迟钝爱德华氏菌的动物或水 产品甚至观赏性鱼类都有可能受到感染。 Brady & Vinitnantharat在-20℃冻存60天的斑 点叉尾鮰当中仍能分离到该菌。在热带国家,如印度、 马来西亚和巴拿马的流行性腹泻中,该菌也是重要的 病原菌。而且它更易感染本来已患有某种疾病尤其是 肝炎和肿瘤疾病的人群。 另外迟钝爱德华氏菌还可引起人的脑膜炎、肝脓 肿、蜂窝组织炎、骨髓炎和败血症等。
爱德华氏菌属
Edwardsiella
分类地位
1994年出版的第九版《伯杰氏鉴定细菌 手册》中,爱德华氏菌属被归属于肠杆菌科 (Enterobacteriaceae),记述有迟钝爱德华氏 菌(E.tarda)、鲇鱼爱德华氏菌(E.ictaluri)和 保科爱德华氏菌(E.hoshinae)共3个种。
迟钝爱德华氏菌
宿主种类
到目前（2003）迟钝爱德华氏菌已经在二十多种 鱼类中引起了病害,包括淡水鱼类和海水鱼类,如鳗鲡 （Anguilla japanica)、牙鲆（Paralichthys olivaceus）、真鲷（Pagyrus major）、虹鳟 （Ocorhynchus mykiss）、罗非鱼（Tilapia nilotica）、斑点叉尾鮰（Ictalurus punctatus）等。 除此外,该菌还可感染两栖类动物如牛蛙（Rana catesbeiana）和爬行类动物如中华鳖 （Trionyxsinensis）。Regalla（1982）还报道了由 该菌引起的海豹的发病。
爱德华氏菌电镜图
革兰氏染色阴性
迟钝爱德华氏菌
迟钝爱德华氏菌属于肠杆菌科，爱德华氏菌，革兰氏阴 性，杆菌，可在NaCL浓度0-40g/L的培养基上生长，菌落直 径 0.5-1mm，菌落圆形，边缘整齐，灰白色，湿润。 4-10℃能够生长，最适生长温度 25-32℃，42 ℃以上不 生长。在血琼脂平板上能在菌落周围形成狭窄的β型溶血环, 在麦康凯琼脂、胆盐硫化氢乳糖琼脂（DHL）、SS琼脂等 肠道菌选择性培养基上可形成较小菌落, 因其产生 H2S能使 菌落中央为黑色。在亚硫酸铋琼脂（BSA）培养基上形成灰 色、 带棕色光晕和金属光泽的菌落。在胰胨大豆琼脂（TSA） 培养基上, 可形成圆形、光滑、湿润、半透明的灰白色小菌 落。在乳糖胆盐（LB）培养基上也能很好的生长。 又称迟缓爱德华氏菌或缓慢爱德华氏菌，是爱德华氏菌 属细菌家族中较早发现的成员之一，该菌是爱德华氏菌属的 模式种。