电泳常见问题
电泳常见问题及处理方法
电泳常见问题及处理方法1.缩孔这类缺陷在湿的漆膜上看不见，当烘干后漆膜表面出现直径通常为0.5-3.0mm漏底微孔、不漏底的火山口状的凹陷，称为陷穴、凹洼，露底者为缩孔，中间有颗粒但不刮手的称为“鱼眼”。
由于电泳漆湿膜中或表面有尘埃、油渍或与电泳涂料不相容的粒子，成为陷穴中心，因而产生涂膜缺陷。
很多情况下这类缺陷还与被涂物的材质有关，如金属底材上存在微裂纹和微孔等。
原因1:外来油污污染电泳漆膜，油污附着在工件表面，使电泳漆成膜受到影响。
这种原因引起缩孔的几率较大。
解决方法:可检查输送机构、挂具,防止油滴污染漆膜。
从电泳设备制造安装开始就要避免上述物质污染，每一种新零件投入电泳前最好进行相关检验，防止受油、硅油、蜡、脂性碳化物、胶水等污染物对工件，电泳设备及电泳槽液的污染。
原因2:前处理除油不干净，造成润湿性不良，使电泳漆烘干后漆膜有缩孔。
解决方法:加强前处理清洗。
原因3:槽液有油污、异物混入，影响电泳漆膜外观。
解决方法:用吸油纸吸去油污，清除槽液内异物，同时避免异物混入，保持电泳槽液清洁原因4:加漆时有电泳漆没搅拌均匀，使槽液无完全熟化，引起漆膜不良。
解决方法:确保加入的电泳漆搅拌均匀，加强槽液循环，使槽液完全熟化原因5:电泳后水洗中含油分或烘干室内不洁净，循环风含油分，使油分附著在漆膜上面烘干后有缩孔。
解决方法:水洗经常更换,烤箱经常清理.烤箱链轨用油可选用耐高温,不会高温挥发为最佳2.针孔工件上有露底针状小孔，称为针孔，它与缩孔的区别是孔径小，中心无异物，且四周无漆膜堆积凹起。
由漆膜再溶解而引起的针孔，称为再溶解针孔；由电泳过程中产生的气体、湿膜脱泡不良而产生的针孔，称为气体针孔；(1)湿膜针孔:工件未进行烘烤,在空气中凉干,可看到的针孔原因1: 电泳电压过高，电流冲击反应过剧，产生气泡过多，或升压速度过快。
解决方法:适当降低电压,加长软启动时间原因2:溶剂含量偏低。
解决方法:添加溶剂，每次添加不能超过1%原因3:槽液温度过低。
电泳常见问题及解决方法
一、颗粒（1）现象在烘干后的电泳涂膜表面上有手感粗糙的、较硬的粒子，或肉眼可见的细小痱子，往往被涂物的水平面较垂直面严重，这种漆膜病态称为颗粒。
（2）产生原因①CED槽液PH值偏高，碱性物质混入，造成槽液不稳定，树脂析出或凝聚。
②槽内有沉淀“死角”和裸露金属处。
③电泳后清洗液脏、含漆量过高，过滤不良。
④进入的被涂物面及吊具不洁，磷化后水洗不良。
⑤在烘干过程中落上颗粒状污物。
⑥涂装环境脏。
⑦补给涂料或树脂溶解不良，有颗粒。
（3）防治方法①将CED槽液的PH值控制在下限，严禁带入碱性物质，加强过滤，加速槽液的更新。
②消除易沉淀的“死角”和产生沉积涂膜的裸露金属件。
③加强过滤，推荐采用精度为25μm的过滤元件，养活泡沫。
④确保被涂面清洁，不应有磷化沉渣，防止二次污染。
⑤清理烘干室和空气过滤器。
⑥保持涂装环境清洁，检查并消除空气的尘埃源。
⑦确保新补涂料溶解良好，色浆细度在标准范围内。
二、缩孔（陷穴）（1）现象在湿的电泳涂膜上看不见，当烘干后漆膜表面出现火山口状的凹坑，直径通常为~,不露底的称为陷穴、凹洼、露底的称为缩孔，中间有颗粒的称为“鱼眼”。
产生这一弊病的主要原因是电泳湿涂膜中或表面有尘埃，油污与电泳涂料不相溶的粒子，成为陷穴中心，使烘干初期的湿漆膜流展能力不均衡，而产生涂膜缺陷。
（2）产生原因①被涂物前处理脱脂不良或清洗后又落上油污、尘埃。
②槽液中混入油污，漂浮在液面或乳化在槽液中。
③电泳后冲洗液混入油污。
④烘干室内不净，循环风内含油分。
⑤槽液的颜基比失调，颜料含量低的易产生缩孔。
⑥涂装环境脏、空气可能含有油雾、漆雾，含有机硅物质等污染被涂物或湿涂膜。
⑦补给涂料有缩孔或其中树脂溶解不良，中和不好。
（3）防治方法①加强被涂物的脱脂工序，确保磷化膜不被二次污染。
②在槽液循环系统设除油过滤袋，同时查清油污源，严禁油污带入槽中。
③提高后清洗水质，加强过滤。
④保持烘干室和循环热风的清洁。
⑤调整槽液的颜基比，适当加色浆提高颜料含量。
电泳常见问题及处理方法
电泳常见问题及处理方法电泳是一种常用于分离生物分子的实验技术，但在实验过程中常常会遇到一些问题。
以下是电泳实验中常见问题及相应的处理方法：**1. ** 电流不稳定或电流为零：- **可能原因：** 电源故障、电极接触不良、电极泄露或电极材料老化。
- **处理方法：**-检查电源设备，确保其正常工作。
-检查电极接触情况，确保良好接触。
-替换老化的电极材料。
**2. ** 样品移动过快或过慢：- **可能原因：** 缓冲液浓度、电场强度、电泳时间等因素影响。
- **处理方法：**-调整缓冲液的浓度，确保适当的离子浓度。
-调整电场强度。
-控制电泳时间，确保合适的分离时间。
**3. ** 电泳带模糊或扩散：- **可能原因：** 样品浓度过高、电场强度过大、电极材料老化等。
- **处理方法：**-减少样品浓度。
-降低电场强度。
-更新电极材料。
**4. ** 电泳带畸变：- **可能原因：** 缓冲液PH值不合适、电极材料污染、样品准备不当等。
- **处理方法：**-调整缓冲液PH值。
-清理电极材料。
-重新准备样品。
**5. ** 电泳槽泄露：- **可能原因：** 电泳槽密封不良、槽体老化等。
- **处理方法：**-检查槽体密封情况。
-更换老化的槽体。
**6. ** 电泳带粘在电极上：- **可能原因：** 电极表面污染、电场强度过大等。
- **处理方法：**-清理电极表面。
-降低电场强度。
**7. ** 电泳结束后凝胶上有色斑：- **可能原因：** 染色不充分、凝胶中存在异物等。
- **处理方法：**-加强染色过程。
-小心操作，避免在凝胶中引入异物。
**8. ** 凝胶破裂：- **可能原因：** 凝胶制备不当、电场强度过大等。
- **处理方法：**-仔细制备凝胶，确保无气泡。
-降低电场强度。
电泳实验中出现问题时，及时采取正确的处理方法是确保实验成功的关键。
通过检查设备、调整实验条件和注意样品制备，可以有效避免或解决电泳过程中的常见问题。
电泳仪六大常见问题处理方案
电泳仪六大常见问题处理方案
电泳仪是专为进行电泳供给外加电场的直流电源，其输出
电压或电流或功率要求相对稳定或按特定规律变化。
常见问题一：电泳仪的输出为何达不到设定值？
①电泳仪的输出状态遵守“欧姆定律”：电压U=电流I×（电泳槽）电阻R相对不变的情况下，U、I、P（功率P=电流I×电
压U）中任意一个参数恒定，其他参数也随之恒定；而任意一个参
数变化，其他参数也随之正比变化；
②假如电泳仪的输出电压U达不到预置值，应首先察看I
或P是否已经恒定，或者已经达到电泳仪所规定的I或P（JY电泳
仪均有明确指示灯标志）。
假如尚未达到极限值，将已经恒定I或
P的设置调大（有必要的话至极限值），才能够提高电压输出；
③假如电泳仪的电流I达不到预置值，可调整电压U或功
率P；
④假如电泳仪的功率P达不到预置值，可调整电压U或电
流I。
常见问题二：电脑掌控电泳仪发生过压报警现象，怎么办？
①检查是否空载使用；
②是否电泳槽未加缓冲液；
③是否电泳槽铂金丝断。
常见问题三：发生过流保护的原因？
①查是否存在电泳槽短路现象；
②查缓冲液是否选错。
常见问题四：发生漏电保护的原因？
①是否有液体溅入仪器内部或输出接口上；
②是否有很多灰尘落入仪器内部。
常见问题五：风机停转或发出异响，怎么办？
更换风机。
常见问题六：电压、电流没有输出，怎么办？
①检查保险管是否损坏；
②打开机箱检查前面板输出座与主板连接的插头是否脱落；
③检查瓷罐变压器的插头是否脱落或用万用表检查每组两
端应为通路。
标签:电泳仪。
电泳常见问题及解决方法
3. 1 滑橇底部油泥污染导致电泳缩孔及其解决办法在车身经手工预清理完后，进行洪流冲洗前，需要将车身承载在滑橇上并锁紧，再装挂在自行葫芦系统的吊架上，然后依次通过电泳涂装各工艺槽。
当滑橇第一次通过电泳槽时，滑橇表面会泳涂上一层电泳漆膜，形成绝缘层。
而当滑橇承载车身再一次通过电泳槽时，滑橇表面因有绝缘层的存在而不会泳涂上新的电泳漆膜，但会一次次附上一层新的电泳浮漆。
由于电泳后的水洗工艺主要是针对车身，而位于车身底部的滑橇不可能被冲洗干净。
因此，当附有电泳浮漆的滑橇在电泳后工位(如电泳烤房、电泳烤后存放)的输送链上前行时，滑橇底部的电泳浮漆和已泳涂上的电泳漆膜与输送链上的滚子不断接触、摩擦，就会粘附滚子上的润滑油，形成油泥。
由于这些油泥位于滑橇底部，并且有很强的粘附性，即使在通过脱脂和水洗等工艺槽时，也不能完全被清除干净，从而污染磷化槽液、电泳槽液及电泳烤房。
油泥污染引起的直接后果就是造成电泳漆膜缩孔。
经观察发现，在每次对电泳滑橇通过的输送链加油润滑后，电泳漆膜缩孔明显增加。
电泳漆膜缩孔不仅加大了电泳底漆打磨的工作量，也明显影响整车涂膜的质量和抗腐蚀性能。
人工擦除滑橇底部油泥，以避免电泳漆膜缩孔是一种解决办法，但费时费力；在预脱脂槽里增加喷嘴，利用高压脱脂液对滑橇底部油泥进行冲洗也是一种办法，但这样做需要对预脱脂槽进行较大的改造，并且还会加快预脱脂槽液的更新周期，从而造成成本上升；第3 种办法是在车身吊装进槽前的滚床间安装油泥清洗机。
清洗机带有一对呈滚轮状的毛刷，通过电机减速驱动毛刷对滑橇底部油泥进行刷洗。
该方法简便可行。
为加强对油泥的清洗效果，利用该方法并采用3 套清洗机，通过其6 个呈滚轮状、用以粘附滚轮下面清洗液的毛刷对在清洗机上面通过的滑橇底部的油泥进行连续滚刷。
清洗机安装调试完毕，经过2 周的试运行后发现，清洗机工作稳定可靠，清洗效果明显提高。
滑橇底部油泥在经过3 次连续的滚刷后基本被清除，再经过后续的洪流冲洗、脱脂、水洗等流程，油泥被清除得更为彻底，不再对磷化槽液、电泳槽液形成污染，从而避免了因油泥而造成的车身电泳漆膜缩孔的问题。
SDS-PAGE电泳过程中常见问题以及解决方法
SDS－PAGE电泳过程中常见问题以及解决方法几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进行，而所有条件总要确保蛋白质解离成单个多肽亚基并进可能减少其相互间的聚集，最常用的就是SDS－PAGE电泳技术，关于大家在此过程中经常遇到的问题进行一些讨论：Q：SDS－PAGE电泳的基本原理？A：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS（十二烷基硫酸钠），SDS 会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关，在达到饱和的状态下，每克多肽可与1.4g去污剂结合。
当分子量在15KD到200KD之间时，蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式：logMW=K-bX，式中：MW为分子量，X为迁移率，k、b均为常数，若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图，可获得一条标准曲线，未知蛋白质在相同条件下进行电泳，根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。
Q：配胶缓冲液系统对电泳的影响？A：在SDS－PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统。
在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低；而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介于二者之间泳动。
由于导电性与电场强度成反比，这一区带便形成了较高的电压剃度，压着蛋白质分子聚集到一起，浓缩为一狭窄的区带。
当样品进入分离胶后，由于胶中pH的增加，呈碱性，甘氨酸大量解离，泳动速率增加，直接紧随氯离子之后，同时由于分离胶孔径的缩小，在电场的作用下，蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。
所以，pH对整个反应体系的影响是至关重要的，实验中在排除其他因素之后仍不能很好解决问题的情况，应首要考虑该因素。
电泳常见问题分析
防治措施：改进工件的入槽条件，入槽后停留一段时间再通电电泳，使附着在工件上的气体尽量排除；检查循环系统和阴极掩蔽情况，对不合要求的地方进行调整；加大循环量，使槽内流速均匀，防止气泡在槽内滞留；适当调整电泳电压及槽液参数，使之符合工艺要求。
（12）氧化膜破裂。透过电泳漆膜，可以看到型材表面有无规则的裂纹。
（4）雾斑。与正常部位相比，局部出现无光亮斑点，侧光观察更为明显。容易出现在型材的大面和水平面上。
产生原因：酸雾、碱雾或有机溶剂气雾飞入电泳涂装工序的气氛中，附着在烘烤前的漆膜表面引起局部凝固、交联反应而产生的；漆液的中和度偏离控制范围；热水洗槽的温度、pH 值控制不好；电泳后水洗槽的pH 值太低。
（16）水平表面粗糙。亦称L效果差。被涂物电泳后水平表面粗糙，无光泽而垂直表面正常。
产生原因：槽液固体分低，有细小的凝聚物、不溶颗粒；槽液溶剂含量过低；槽液电导率太高，杂质离子含量太高；pH值太低，溶解性差；槽衬里破损，腐蚀。
防治措施：提高槽液固体分，加强过滤；适当补加电泳漆配套溶剂；加强槽液精制或排掉部分RO透过液，补加去离子水；倒槽检修槽衬里。
（2）麻点。亦称颗粒状异物，灰尘附着等。尘埃等附着在漆膜表面或漆膜下形成有手感的凹凸物。
产生原因：电泳槽前的水洗水太脏；电泳槽液中存在较粗大的机械杂质；车间空气中含有尘埃等漂浮物飘落到放在沥干区的工件上；烘烤炉内存在尘灰等杂物。
防治措施：更换电泳前水洗水；检查电泳槽过滤装置并过滤电泳槽液；搞好车间环境卫生，控制沥干区风向，防止灰尘飘浮；清理烘烤炉内卫生，清洁或更换热风循环过滤网。
（6）涂料滴痕。亦称漆斑或漆流痕。漆膜表面有略为凸起的漆斑或朝下的漆流痕迹，有手感。
产生原因：电泳出槽后停留时间过长；涂料的浓度不适当；电泳后水洗不足；RO2水洗槽固体分过高；未滴干的导电梁从正在沥干的料挂上方跨过。
SDS-PAGE电泳、westernblotting过程中常见问题以及解决方法
SDS－PAGE电泳过程中常见问题以及解决方法几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进行，而所有条件总要确保蛋白质解离成单个多肽亚基并进可能减少其相互间的聚集，最常用的就是SDS－PAGE 电泳技术，关于大家在此过程中经常遇到的问题进行一些讨论：Q：SDS－PAGE电泳的基本原理？A：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS（十二烷基硫酸钠）， SDS会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关，在达到饱和的状态下，每克多肽可与1.4g去污剂结合。
当分子量在15KD到200KD之间时，蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式：logMW=K-bX，式中：MW为分子量，X为迁移率，k、b均为常数，若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图，可获得一条标准曲线，未知蛋白质在相同条件下进行电泳，根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。
Q：配胶缓冲液系统对电泳的影响？A：在SDS－PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统。
在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低；而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介于二者之间泳动。
由于导电性与电场强度成反比，这一区带便形成了较高的电压剃度，压着蛋白质分子聚集到一起，浓缩为一狭窄的区带。
当样品进入分离胶后，由于胶中pH的增加，呈碱性，甘氨酸大量解离，泳动速率增加，直接紧随氯离子之后，同时由于分离胶孔径的缩小，在电场的作用下，蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。
所以，pH对整个反应体系的影响是至关重要的，实验中在排除其他因素之后仍不能很好解决问题的情况，应首要考虑该因素。
电泳常见问题分析和解决方案
电泳操作要点1 ）纯水水质要求在电导率＜ 5μs/cm2 ）槽液液温控制在 25 -30℃ （冷热循环控制）3 ）进槽要清洗干净，不要将酸碱带入槽中4 ）电泳漆要晾于然后进烘箱，烤温时不要升温太快电泳常见问题及解决方案问题原因解决对策膜厚不足固体份低提高固体份电压低提高电压温度低提高温度漆膜过厚工作周围循环不好通常因泵，过滤器及喷嘴阻塞所致固体份高降低固体份温度高降低温度电导率高提高超滤液排放量电压高降低电压水迹沌水不干净换纯水温度过高降低湿度固体份过低加漆起泡工作表所不洁净充分水洗漆膜外观不丰满颜色基比过高减少颜料补加，增加树脂含量槽液有泡沫进气漏气检查管道和泵是否泄漏溢流槽液体过低提出高液体高度涂膜粗糙颜料份高减少色浆，增加树脂电导率高超滤，降低电导率针孔槽液温度低升高槽液温度电导率过高超滤降低电导率漆膜不均匀，破裂槽液温度高降低温度电压高降低电压电导率高超滤降低电导率斑纹地图斑痕底材表面污染检查金属表面漆迹清洗不够增加清洗凹孔，缩孔杂质污染清除工件上杂质颜料份低补加色浆硬度烘烤时间延长，严格按工艺操作烘烤温度升温不够流平加溶剂麻点液温低升温溶剂少加溶剂浓度低加漆条纹表面外观不佳电压升高快溶剂含量低槽液固含量低常见故障及其纠正方法故障产生原因纠正方法桔皮或表面粗糙电压过高降低电压溶液温度高降低温度固体分过高稀释溶液极距太近加大极距烘烤加温太快压缩空气吹干后再烘烤PH 值过高用有机酸调整针孔或麻点固体分过低调整至工艺范围PH 值过低降低溶液酸度清洗水不干净换清洗水溶液电导率太高超滤去掉杂质离子膜厚太薄增加电泳电压或时间电镀表面针孔压缩空气吹干后再烘烤火山口或油点工件上附有油加强除油工序槽液面有油渍防止槽液被油污染颗粒污染加强循环过滤和超滤电压高膜层厚降低电泳电压和时间彩虹膜层太薄增加电泳电压颜色不符膜层太厚或太薄选择合适的工作电压和时间调配涂料时，颜色比例错严格按工艺配方配制电泳漆溶剂太多，渗透能力差，膜层厚薄不均调整溶剂含量，使其符合工艺规范不规则图形前处理不彻底加强前处理工序硬度不够烤烘时间短或温度低严格按工艺规范进行涂装面点状或片状颜色差异零件有针孔或砂眼杜绝不合格工件下槽色料乳化搅拌不匀加强电泳漆搅拌表面有水液用压缩空气吹干水滴未干即烘烤用压缩空气吹干电泳前水洗不彻底加强入槽产零件的清洗。
电泳常见问题及解决方法
阳极电泳罕睹问题及办理要领之阳早格格创做一、颗粒（1）局里正在烘搞后的电泳涂膜表面上有脚感细糙的、较硬的粒子，大概肉眼可睹的细小痱子，往往被涂物的火仄里较笔曲里宽重，那种漆膜病态称为颗粒.（2）爆收本果①CED槽液PH值偏偏下，碱性物量混进，制成槽液没有宁静，树脂析出大概凝结.②槽内有重淀“死角”战裸露金属处.③电泳后荡涤液净、含漆量过下，过滤没有良.④加进的被涂物里及吊具没有净，磷化后火洗没有良.⑤正在烘搞历程中降上颗粒状污物.⑥涂拆环境净.⑦补给涂料大概树脂溶解没有良，有颗粒.（3）防治要领①将CED槽液的PH值统制正在下限，宽禁戴进碱性物量，加强过滤，加速槽液的革新.②与消易重淀的“死角”战爆收重积涂膜的裸露金属件.③加强过滤，推荐采与细度为25μm的过滤元件，养活泡沫.④保证被涂里浑净，没有该有磷化重渣，预防两次传染.⑤浑理烘搞室战气氛过滤器.⑥脆持涂拆环境浑净，查看并与消气氛的灰尘源.⑦保证新补涂料溶解劣良，色浆细度正在尺度范畴内. 两、缩孔（陷穴）（1）局里正在干的电泳涂膜上瞅没有睹，当烘搞后漆膜表面出现火山心状的凸坑，曲径常常为0.5~3.0mm,没有露底的称为陷穴、凸洼、露底的称为缩孔，中间有颗粒的称为“鱼眼”.爆收那一毛病的主要本果是电泳干涂膜中大概表面有灰尘，油污与电泳涂料没有相溶的粒子，成为陷穴核心，使烘搞初期的干漆膜流展本领没有均衡，而爆收涂膜缺陷.（2）爆收本果①被涂物前处理脱脂没有良大概荡涤后又降上油污、灰尘.②槽液中混进油污，漂浮正在液里大概乳化正在槽液中.③电泳后浑洗液混进油污.④烘搞室内没有净，循环风内含油分.⑤槽液的颜基比仄衡，颜料含量矮的易爆收缩孔.⑥涂拆环境净、气氛大概含有油雾、漆雾，含有机硅物量等传染被涂物大概干涂膜.⑦补给涂料有缩孔大概其中树脂溶解没有良，中战短好. （3）防治要领①加强被涂物的脱脂工序，保证磷化膜没有被两次传染.②正在槽液循环系统设除油过滤袋，共时查浑油污源，宽禁油污戴进槽中.③普及后荡涤火量，加强过滤.④脆持烘搞室战循环热风的浑净.⑤安排槽液的颜基比，适合加色浆普及颜料含量.⑥脆持涂拆环境净净，扫除对于涂拆有害物量源，更加是有机硅物量源.⑦加强补给涂料的管制，分歧格的没有克没有及增加进槽中，保证补给涂料溶解、中战、过滤好.三、针孔（1）局里电泳涂膜正在烘搞后爆收针尖状的小凸坑大概小孔，那种涂膜毛病称为针孔，它与缩孔（麻坑）的辨别是孔径小、核心无同物、四里无漆膜散集凸起.根据爆收的本果针孔有下列几种：①由干涂膜再溶解耐引起的针孔，称为再溶解针孔.②电泳历程中，由于电解反应猛烈，爆收气泡过多、脱泡没有良大概果槽液温度偏偏矮大概搅拌没有充分，制成被漆膜包裹，正在烘搞历程中气泡破裂而爆收的针孔，称为气泡针孔.③戴电进槽阶梯针孔：爆收正在戴电进槽阶梯毛病程度宽重的场合下，针孔是沿进槽斜线暴露底板，其余，由于槽液对于物体表面潮干没有良，使一些气泡被启关正在漆膜内大概是槽液表面的泡沫附着正在工件表面上产气愤泡针孔，普遍爆收正在被涂物的下部.（2）爆收本果①电泳涂拆后被涂物出槽荡涤没有即时，干涂膜爆收再溶解.②槽液中杂量离子含量过下，电解反应剧烈，被涂物表面爆收过多气体.③磷化膜孔隙率下，也易含量气泡.④槽液温度偏偏矮大概搅拌没有充分，使干膜脱泡没有良.⑤工件戴电进槽时输送链速度过缓.⑥被涂物进槽端槽液里流速矮，有泡沫散集.（3）防治要领①被涂物离启槽液应坐时用UF液大概杂火浑洗，时间没有超出1min.②排搁UF液、加杂火，降矮杂量离子的含量.③安排磷化配圆及工艺，使磷化膜结晶致稀化.④加强槽液搅拌，保证槽液温度正在28~30℃下运止.⑤正在链速过缓的场合，没有宜采用戴电进槽办法的电泳涂拆工艺，改用进槽后通电.⑥使槽液里流速大于0.2m/s，与消散集的泡沫.四、再溶解（1）局里泳涂重积正在被涂物上的干涂膜，被槽液大概UF荡涤液再次溶解，爆收涂膜变薄、得光、针孔、露底等局里. （2）爆收本果①电泳后的被涂件正在电泳槽液大概UF液中停顿（交触）时间过少.②槽液战UF液的PH值偏偏矮，溶剂含量偏偏下，后浑洗压力过下，荡涤时间过少.③设备障碍，制成停链.（3）防治要领①断电后工件坐时出槽，出槽后至后荡涤隔断时间战正在UF液中停顿时间没有宜超出1min.②将槽液战UF液的PH值战溶剂含量庄重统制正在工艺确定范畴内，屡屡UF液荡涤时间应统制正在20s安排，浑洗压力没有该超出0.12MPa.③应即时排除设备障碍.五、泳涂有膜薄偏偏薄（1）局里被涂物泳后表面的搞涂膜薄度缺累，矮于工艺确定的膜薄.主假如工艺参数实止没有宽，槽液老化、仄衡、导电没有良战再溶解制成的.（2）爆收本果①槽液固体分偏偏矮.②泳涂电压矮，泳涂时间缺累.③槽液温度矮于工艺确定的范畴.④槽液电导率矮.⑥槽液老化，革新期少，使干漆膜电阻过下，槽液电导变矮.⑦极板连交没有良战被腐蚀益坏，极液电导矮，极罩隔膜阻碍.⑧被涂物通电没有良.⑨UF液后浑洗时间过少，爆收再溶解.⑩阳极电泳槽液的PH值偏偏矮.（3）防治要领①普及槽液固体分，按工艺确定统制正在常常情况下±0.5%以内.②普及泳涂电压，延少泳涂时间.③将槽液温度统制正在工艺典型的上限.④缩小UF液的益坏.⑤补加UF液的益坏.⑥加速槽液革新，增加删薄安排剂.⑦查看极板、极罩战极液系统，定期浑理大概革新，使其导电劣良.⑧浑理挂具，使被涂物通电劣良.⑨收缩UF液浑洗时间.⑩加速阳极液的排搁，大概增加矮中战度涂料，使槽液的PH值降到工艺确定的央供.六、泳涂的漆膜过薄（1）局里被涂物表面的膜薄度超开工艺确定的膜薄，如果漆膜中瞅仍很好，普遍没有是毛病，主假如涂料消耗删大，成本删下.（2）爆收本果①泳透电压偏偏下.②槽液温度偏偏下.③槽液的固体分过下.④泳涂时间过少（如停链）.⑤槽液中的有机溶剂含量过下，修槽初期死化时间短⑥槽液的电导率下.⑦被涂物周围循环短好.（3）防治要领①降矮泳涂电压②降矮槽液温度（千万于没有克没有及下开工艺确定温度）.③降矮槽液的固体分.④统制泳涂时间，预防停链.⑤排搁UF液，增加来离子火，延少新配槽液的死化时间.⑥排搁UF液增加来离子火，降矮槽液中杂量离子的含量.⑦常常果泵、过滤器战喷嘴阻碍而致七、非常十分附着（1）局里由于被涂物表面大概磷化膜的导电性没有匀称，正在电泳涂拆时电流稀度集结于电阻小的部分，引起漆膜正在该部位集结收展，截止是正在那个部位呈散集附着.当泳涂电压偏偏下、交近益害电压时，制成漆膜局部益害，也呈散集状态附着.（2）爆收本果①磷化膜传染（有指印、斑印）②前处理工艺非常十分（脱脂没有良、火洗没有充分、磷化膜有收蓝、黄锈斑等）③被涂物表面有黄锈、焊药等终扫撤除.④槽液被杂量离子传染，电导过大，槽液中的有机溶剂含量过下，颜料分过矮.⑤泳涂电压过下，槽液温度下，制成涂膜被益害.（3）防治要领①预防两次传染，宽禁裸脚触摸磷化膜表面.②安排前处理工艺，保证脱脂劣良，火洗充分，磷化膜匀称，无黄锈，蓝斑.③黑件加进前处理工序之前设预荡涤工序，撤除黄锈、焊药等.④排搁UF液，加来离子火，增加色浆，普及灰分，预防杂量离子混进.⑤降矮泳涂电压，统制进槽初期电压，降矮槽液温度，宽防极间距太近.八、泳透力变好（1）局里正在仄常情况下被涂物的内腔、夹层结构内表面皆能涂上漆，但是正在死产中偶尔创制内腔泳涂没有上漆大概者涂得很薄，那种局里称为泳透力变好.正在汽车车身涂拆死产中应定期抽检，将车身解体，瞅察其内腔、焊缝各部位的涂拆情景，并丈量膜薄，以考核泳透力的变更. （2）爆收本果①泳透电压过矮②槽液的固体分偏偏矮③槽液的搅拌缺累④极罩隔膜阻碍、电阻大⑤新增加电泳涂料的泳透力好大概分歧格（3）防治要领①普及泳透电压.②保证槽液的固体分正在工艺确定的范畴③加强槽液搅拌④浑理极罩大概革新隔膜⑤加强进厂资料的抽检，采用泳透力好的电泳涂料.九、两次流痕（1）局里经后荡涤所得干电泳涂膜表面仄常，但是经烘搞，正在被涂物的夹缝结构处爆收漆液流痕.那种局里称为“两次流痕”漆膜毛病.其本果是被涂物夹缝正在荡涤中已洗净，正在慢遽降温时沸腾将槽液挤出，爆收流痕.（2）爆收本果①被涂物的结构制成②电泳后荡涤工艺采用没有当，火洗没有良③加进烘搞时降温过慢④槽液固体分战后荡涤UF液含漆量偏偏下（3）防治要领①正在大概条件下矫正结构②对于搀杂的被涂物，如汽车车身，应选浸喷分离式荡涤工艺，大概用火冲大概压缩气氛吹掉夹缝中的槽液，终尾杂火浸洗火温加热到30~40，有好处与消两次流痕③加强晾搞功能，正在烘搞前预加热④适合降矮槽液的固体分；降矮后荡涤UF液中的含漆量十、火滴迹（1）局里电泳涂膜正在烘搞后局部漆里上有坎坷没有服的火滴斑状，做用涂膜仄坦性，那种毛病称为火滴迹. （2）爆收本果①干涂膜表面的火滴、火珠正在烘搞前已挥收掉大概吹掉②从挂具战悬链上滴降的火滴③被涂物上有积火④干电泳涂膜的抗火滴性（电渗性）好⑤加进烘搞室后温降过慢⑥杂火火洗缺累.（3）防治要领①吹掉火滴、火珠，降矮晾搞区的干度，加强排风普及气温.②采与步伐预防火滴降正在被涂物上③应设法与消积火④矫正所用电泳涂料的电渗性.⑤预防降温过慢大概减少预加热（60~100℃，10min）⑥加强杂火洗十一、搞漆迹（1）局里正在电泳涂拆后附着正在干涂膜上的槽液终荡涤净，烘搞后涂膜表面爆收斑痕，称搞漆迹大概漆迹.（2）爆收本果①被涂物出槽到后荡涤区之间的时间太少.②电泳后荡涤没有良③槽液温度偏偏下，涂拆环境干度矮（3）防治要领①加强槽上的“0”次荡涤，至循环UF液洗的沥漆时间没有该大于1min .②查看喷嘴是可阻碍大概安插没有当，适合加大浑洗火量③适合降矮温度，普及环境干度十两、涂里斑印（1）局里由于底材表面大概磷化膜的传染，正在电泳涂拆后搞漆膜表面仍可睹到花纹大概天图状的斑痕.它与火滴迹战漆迹斑痕的分歧之处是涂里仍仄坦，但是对于涂膜的耐火性、耐腐蚀性有做用. （2）爆收本果①磷化后的火洗没有充分②磷化后的火洗火量没有良③磷化处理过的被涂里再次被传染.（3）防治要领①加强磷化后火洗，查看喷嘴是可阻碍②加强磷化后火洗的火量管制，杂火洗后的滴火电导没有该大于10μs/cm③预防已处理过的磷化膜被两次传染，脆持环境整净，预防挂具滴火十三、电泳涂膜中瞅没有良（1）局里劣量阳极电泳涂料正在最好的泳涂条件涂拆，所得电泳涂中瞅光润、仄坦、歉谦，应无颗粒、缩孔、针孔、斑痕、猪皮状等缺陷.阳极电泳底漆涂层险些可没有挨磨，曲交涂中涂大概里漆，赢得下档化妆性涂层.电泳涂膜中瞅没有良，除前述多种漆膜毛病中，另有阳阳里，光芒、光润度等没有匀，得光，中瞅没有歉谦，呈猪皮状，漆里细糙，脚感短好（用脚摸没有但是滑，有细糙的感觉）等. 电泳涂膜中瞅没有良普遍是由再溶解、电泳涂料的L效验战热展仄性短好、槽液的颜料含量过下、溶剂含量过矮、被涂物周围的槽液流速过矮、槽液有细小的凝结物、过滤没有良等本果制成的.（2）爆收本果①由于涂膜再溶解，使漆膜变薄、得光、露底②电泳涂料的L效验短好以致火仄里、笔曲里光芒战细糙度纷歧.③槽液的颜料含量过下④槽液的有机溶剂含量过矮⑤被涂物周围的槽液流速过矮大概没有震动⑥被涂物底材战磷化膜表面细糙度没有匀，做用涂膜中瞅⑦槽液固体分过矮⑧槽液温度矮⑨槽液过滤没有良⑩槽液中的杂量离子含量下，电导太下（3）防治要领①与消除膜被再溶解的条件，庄重统制槽液战荡涤液的PH 值及有机溶剂含量②矫正所采与电泳涂料的L效验，统制涂料正在15μm以下.③加树脂液，安排槽液的颜基比④适量增加相映的有机溶剂⑤加强槽液搅拌，查看喷嘴状态大概流背⑥矫正底材表面的细糙度及其匀称性，采用致稀薄膜型磷化膜，加强磷化后的荡涤⑦普及槽液的固体分⑧按工艺央供宽控槽液温度⑨加强槽液过滤，过滤细度没有该下于25μm⑩排搁UF液，增加来离子火十四、戴电进槽阶梯毛病（1）局里正在连绝式电泳涂拆场合，被涂物戴电加进电泳槽，涂里上易爆收多孔量的阶梯条纹漆膜毛病，普遍称那种毛病为戴电进槽阶梯毛病.（2）爆收本果①进槽部位液里有泡沫浮动，泡沫吸附正在被涂里上，被重积的漆膜包裹②被涂物表面搞干没有匀大概有火滴③进槽段电压过下，制成电解反应过烈④被涂物进槽速度太缓大概有脉动（3）防治要领①加大进槽部位液里流速，与消液里的泡沫.②吹掉被涂里的火滴，保证被涂物齐搞大概齐干状。
电泳涂装常见问题汇总(1)
电泳涂装常见问题及解决方法一电泳漆膜常见故障及其纠正方法电泳槽液常规问题处理操作规范流程1.离子杂质处理测量电导率一般采用电导率仪进行测量，目前较为普遍采用的超滤处理法，在超滤以后，必须补加2-5%的溶剂（视槽液内溶剂量而定），否则会因为槽液内溶剂量缺失而造成电泳工件不良。
2.溶剂含量处理溶剂含量过高处理：正确判断是否溶剂含量偏高，溶剂含量偏高容易出现水痕、伴随上膜快、同样电压下电泳膜偏厚、湿膜粘性大、湿膜蓬松等现象；如果确定是溶剂含量高，可以采用超滤方式进行超滤处理，处理完后须测量电导率，要是电导率偏低的情况下需适量补加冰醋酸或乳酸调整（一般电导率控制在400μs/cm以上即可，PH低于4.5以下的慎用）溶剂含量过低处理方法：正确判断槽液溶剂含量是否过低，一般在长时间循环下新漆补加量少，槽液温度高，频繁超滤等情况下容易出现溶剂含量较低的情况，溶剂较低的现象表现为同样电压下漆膜较薄，湿膜干燥粘性小，膜厚不均匀（彩色电泳较为明显，工件颜色不均匀现象），工件烘烤后流平较差等现象；3.槽液PH值控制槽液PH偏高的处理：一般电泳槽液较难容忍PH偏高，PH值偏高容易带来很多负面影响，常见现象较为普遍的是漆膜容易出现局部漆膜堆积现象，电泳槽液发白，明显水溶性不好，如果长时间PH偏高将造成电泳槽液沉淀，严重影响槽液稳定性，出现颗粒等现象，直至无法调整；出现PH值偏高现象可以采用补加冰醋酸或乳酸调整。
槽液PH值偏低的处理：PH偏低的现象表现为漆膜上膜较薄，容易出现针孔现象，伴随湿膜附着力差，容易被水冲掉露底等现象，其是因为槽液内酸含量高造成的返泳现象所致。
电泳涂装常见问题及解决方法二1.颗粒（疙瘩）在烘干后的电泳漆膜表面上，存在有手感粗糙的（或肉眼可见的）较硬的粒子，称为颗粒。
（1）形成原因1）电泳槽液有沉淀物，凝聚物或其他异物，槽液过滤不良。
2）电泳后冲洗液脏或冲洗水中含漆浓度过高。
3）烘干炉脏，落入颗粒状的污物。
电泳涂装常见问题汇总
电泳涂装常见问题汇总电泳涂装常见问题及解决方法一现象可能产生的原因对策膜厚不足固体份低提高固体份溶剂量少补加溶剂电压低提高电压温度低提高温度水迹纯水不干净换纯水温度过高降低湿度固体份过低加漆溶剂含量高适量超滤降低溶剂量起泡工作表所不洁净充分水洗漆膜外观不丰满颜基比过高减少颜料补加，增加树脂含量补加溶剂槽液有泡沫进气漏气检查管道和泵是否泄漏溢流槽液体过低提出高液体高度固体份过高，槽液粘度太大降低固体份涂膜粗糙颜料份高减少色浆，增加树脂电导率高超滤，降低电导率针孔槽液温度低升高槽液温度电导率过高超滤降低电导率漆膜不均匀，破裂槽液温度高降低温度电压高降低电压电导率高超滤降低电导率斑纹地图斑痕基材表面污染检查金属表面漆迹清洗不够凹孔，缩孔杂质污染清除工件上杂质颜料份低补加色浆硬度烘烤时间延长烘烤时间烘烤温度低升高温度不够流平加溶剂麻点液温低升温溶剂少加溶剂浓度低加漆条纹表面外观不佳电压升高快溶剂含量低槽液固含量低电泳漆膜常见故障及其纠正方法故障产生原因纠正方法桔皮或表面粗糙降低电压溶液温度高降低温度固体分过高加水稀释槽液极距太近加大极距烘烤加温太快压缩空气吹干后再烘烤PH 值过高用醋酸或乳酸调整针孔或麻点固体分过低调整至工艺范围PH 值过低降低溶液酸度清洗水不干净换清洗水溶液电导率太高超滤去掉杂质离子膜厚太薄增加电泳电压或时间电镀表面针孔压缩空气吹干后再烘烤火山口或油点工件上附有油加强除油工序槽液面有油渍防止槽液被油污染加强循环过滤和超滤电压高膜层厚降低电泳电压和时间彩虹膜层太薄增加电泳电压提高膜厚颜色不符膜层太厚或太薄选择合适的工作电压和时间调配涂料时，颜色比例错严格按工艺配方配制电泳漆溶剂太多，渗透能力差，膜层厚薄不均调整溶剂含量，使其符合工艺规范不规则图形前处理不彻底加强前处理工序硬度不够烤烘时间短或温度低严格按工艺规范进行涂装面点状或片状颜色差异零件有针孔或砂眼杜绝不合格工件下槽色料乳化搅拌不匀加强电泳漆搅拌表面有水液用压缩空气吹干水滴未干即烘烤用压缩空气吹干电泳前水洗不彻底加强入槽产零件的清洗工件漆膜局部堆积PH太高用冰醋酸或乳酸调整然后超滤工件表面带碱性增加中和槽处理工件油污未除尽加强除油工艺漆膜附着力差工件表面带碱性增加中和槽处理工件油污未除尽加强除油工艺烘烤温度不够或时间太短提高烘烤温度，增加烘烤时间电泳槽液常规问题处理操作规范流程1.离子杂质处理测量电导率一般采用电导率仪进行测量，目前较为普遍采用的超滤处理法，在超滤以后，必须补加2-5%的溶剂（视槽液内溶剂量而定），否则会因为槽液内溶剂量缺失而造成电泳工件不良。
电泳常见问题解答
1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响？在SDS－PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统。
在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低；而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介于二者之间泳动。
由于导电性与电场强度成反比，这一区带便形成了较高的电压剃度，压着蛋白质分子聚集到一起，浓缩为一狭窄的区带。
当样品进入分离胶后，由于胶中pH的增加，呈碱性，甘氨酸大量解离，泳动速率增加，直接紧随氯离子之后，同时由于分离胶孔径的缩小，在电场的作用下，蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。
所以，pH对整个反应体系的影响是至关重要的，实验中在排除其他因素之后仍不能很好解决问题的情况，应首要考虑该因素。
2. 样品如何处理？根据样品分离目的不同，主要有三种处理方法：还原SDS处理、非还原SDS处理、带有烷基化作用的还原SDS处理。
1）还原SDS处理：在上样buffer中加入SDS和DTT（或Beta 巯基乙醇）后，蛋白质构象被解离，电荷被中和，形成SDS与蛋白相结合的分子，在电泳中，只根据分子量来分离。
一般电泳均按这种方式处理，样品稀释适当浓度，加入上样Buffer，离心，沸水煮5min，再离心加样。
2）带有烷基化作用的还原SDS处理：碘乙酸胺的烷基化作用可以很好的并经久牢固的保护SH基团，得到较窄的谱带；另碘乙酸胺可捕集过量的DTT，而防止银染时的纹理现象。
100ul样品缓冲液中10ul 20％的碘乙酸胺，并在室温保温30min。
3）非还原SDS处理：生理体液、血清、尿素等样品，一般只用1％SDS沸水中煮3min，未加还原剂，因而蛋白折叠未被破坏，不可作为测定分子量来使用。
3. SDS-PAGE电泳凝胶中各主要成分的作用？聚丙烯酰胺的作用：丙烯酰胺与为蛋白质电泳提供载体，其凝固的好坏直接关系到电泳成功与否，与促凝剂及环境密切相关；制胶缓冲液：浓缩胶选择pH6.7，分离胶选择pH8.9，选择tris －HCL系统，TEMED与AP：AP提供自由基，TEMED是催化剂，催化自由基引起的聚合反应进行；十二烷基硫酸钠（SDS）：阳离子去污剂，作用有四：去蛋白质电荷、解离蛋白质之间的氢键、取消蛋白分子内的疏水作用、去多肽折叠。
SDS-PAGE电泳过程中常见问题以与解决方法
SDS－PAGE电泳过程中常见问题以及解决方法几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进展，而所有条件总要确保蛋白质解离成单个多肽亚基并进可能减少其相互间的聚集，最常用的就是SDS－PAGE电泳技术，关于大家在此过程中经常遇到的问题进展一些讨论：Q：SDS－PAGE电泳的根本原理？A：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS 〔十二烷基硫酸钠〕， SDS会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关，在到达饱和的状态下，每克多肽可与1.4g去污剂结合。
当分子量在15KD到200KD之间时，蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式：logMW=K-b*，式中：MW为分子量，*为迁移率，k、b均为常数，假设将分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图，可获得一条标准曲线，未知蛋白质在一样条件下进展电泳，根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。
Q：配胶缓冲液系统对电泳的影响？A：在SDS－PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，别离胶pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris －甘氨酸缓冲系统。
在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低；而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介于二者之间泳动。
由于导电性与电场强度成反比，这一区带便形成了较高的电压剃度，压着蛋白质分子聚集到一起，浓缩为一狭窄的区带。
当样品进入别离胶后，由于胶中pH的增加，呈碱性，甘氨酸大量解离，泳动速率增加，直接紧随氯离子之后，同时由于别离胶孔径的缩小，在电场的作用下，蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进展别离。
所以，pH对整个反响体系的影响是至关重要的，实验中在排除其他因素之后仍不能很好解决问题的情况，应首要考虑该因素。
电泳常见问题及解决方法
阴极电泳常见问题及解决方法、颗粒(1)现象在烘干后的电泳涂膜表面上有手感粗糙的、较硬的粒子，或肉眼可见的细小痱子，往往被涂物的水平面较垂直面严重，这种漆膜病态称为颗粒。
(2)产生原因①CED槽液PH值偏高，碱性物质混入，造成槽液不稳定，树脂析出或凝聚。
②槽内有沉淀死角”和裸露金属处。
③电泳后清洗液脏、含漆量过高，过滤不良。
④进入的被涂物面及吊具不洁，磷化后水洗不良。
⑤在烘干过程中落上颗粒状污物。
⑥涂装环境脏。
⑦补给涂料或树脂溶解不良，有颗粒。
(3)防治方法①将CED槽液的PH值控制在下限，严禁带入碱性物质，加强过滤，加速槽液的更新。
②消除易沉淀的死角”和产生沉积涂膜的裸露金属件。
③加强过滤，推荐采用精度为25 am的过滤元件，养活泡沫。
④确保被涂面清洁，不应有磷化沉渣，防止二次污染。
⑤清理烘干室和空气过滤器。
⑥保持涂装环境清洁，检查并消除空气的尘埃源。
⑦确保新补涂料溶解良好，色浆细度在标准范围内。
(1)现象在湿的电泳涂膜上看不见，当烘干后漆膜表面出现火山口状的凹坑，直径通常为0.5~3.0mm,不露底的称为陷穴、凹洼、露底的称为缩孔，中间有颗粒的称为鱼眼”产生这一弊病的主要原因是电泳湿涂膜中或表面有尘埃，油污与电泳涂料不相溶的粒子，成为陷穴中心，使烘干初期的湿漆膜流展能力不均衡，而产生涂膜缺陷。
(2)产生原因①被涂物前处理脱脂不良或清洗后又落上油污、尘埃。
②槽液中混入油污，漂浮在液面或乳化在槽液中。
③电泳后冲洗液混入油污。
④烘干室内不净，循环风内含油分。
⑤槽液的颜基比失调，颜料含量低的易产生缩孔。
⑥涂装环境脏、空气可能含有油雾、漆雾，含有机硅物质等污染被涂物或湿涂膜。
⑦补给涂料有缩孔或其中树脂溶解不良，中和不好。
(3)防治方法①加强被涂物的脱脂工序，确保磷化膜不被二次污染。
②在槽液循环系统设除油过滤袋，同时查清油污源，严禁油污带入槽中。
③提高后清洗水质，加强过滤。
④保持烘干室和循环热风的清洁。
⑤调整槽液的颜基比，适当加色浆提高颜料含量。
电泳仪六大常见问题处理方案
电泳仪六大常见问题处理方案电泳仪是一种广泛应用于分离、纯化和分析生物大分子的仪器设备。
在实际应用中，电泳仪可能会遇到一些问题，影响到实验的准确性和可靠性。
本文将介绍电泳仪六大常见问题的处理方案。
1. Buffer 溶液异常Buffer 溶液是电泳过程中必不可少的一部分。
如果 Buffer 溶液出现问题，会直接影响电泳的结果。
Buffer 溶液的问题可能有以下几种：1.1 Buffer 溶液异常导致电迁移出现偏移解决方案：检查 Buffer 溶液配制是否正确，是否出现过期、变质等情况。
如有异常，应及时更换 Buffer 溶液并重新配制。
通常情况下，Buffer 溶液的 pH 值和离子浓度是导致电迁移偏移的主要原因。
因此，在实验过程中，应尽可能严格按照配制方法进行操作，并注意 Buffer 溶液的质量情况。
1.2 Buffer 溶液盐度过高或过低解决方案：检查 Buffer 溶液配制过程中是否有误，盐度是否超出了所需范围。
如果 Buffer 溶液盐度过高，可以适当减少溶液中的盐量或者改用更适合的 Buffer溶液。
如果 Buffer 溶液盐度过低，则可以适当增加盐量或者加入一些协同剂以提高 Buffer 溶液的离子浓度。
1.3 离子浓度变化过大解决方案：检查电泳过程中是否有电泳缸的漏电现象，避免 Buffer 溶液中溶解的离子浓度发生明显变化。
此外，也可以适当加大电场或增加Buffer 溶液的用量，以提高 Buffer 溶液中离子浓度的稳定性。
2. 电泳缸温度过高在电泳实验过程中，电泳缸的温度过高可能导致电泳结果不准确，需要及时解决。
解决方案：降低电泳缸的温度。
可以采用以下方法：•检查冷却水路线是否通畅，电泳缸的冷却水是否充足。
•提高冷却水流量，以降低电泳缸内的温度。
•检查电泳缸内的电泳盐离子是否过多，它们可能会影响电泳缸的冷却效果。
3. 电泳时间过长在电泳实验中，电泳时间过长可能会导致样本分离失效，需要及时解决。
DNA电泳常见问题分析
DNA电泳常见问题凝胶电泳操作注意事项1、琼脂糖：不同厂家、不同批号的琼脂糖,其杂质含量不同,影响DNA的迁移及荧光背景的强度,应有选择地使用;2、凝胶的制备：凝胶中所加缓冲液应与电泳槽中的相一致,溶化的凝胶应及时倒入板中,避免倒入前凝固结块;倒入板中的凝胶应避免出现气泡,以免影响电泳结果;3、电泳缓冲液：为保持电泳所需的离子强度和pH,应经常更新电泳缓冲液;4、样品加入量：一般情况下,宽的梳子可加μg的DNA量,加样量的多少依据加样孔的大小及DNA中片段的数量和大小而定.当加样孔大时,样品上样量应相应加大,否则会造成条带浅甚至辨认不清;反之则应适当减少加样量,但是上样量过多会造成加样孔超载,从而导致拖尾或弥散,对于较大的DNA此现象更明显;5、DNA样品中盐浓度会影响DNA的迁移率,平行对照样品应使用同样的缓冲条件以消除这种影响;6、DNA迁移率取决于琼脂糖凝胶的浓度,迁移分子的形状及大小;采用不同浓度的凝胶有可能分辩范围广泛的DNA分子,制备琼脂糖凝胶可根据DNA分子的范围来决定凝胶的浓度;小片段DNA的检测应采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,以提高分辨率;7.选择的实验材料要新鲜,处理时间不易过长;8.在加入细胞裂解缓冲液前,细胞必须均匀分散,以减少DNA团块形成;9. 提取的DNA不易溶解：不纯,含杂质较多；加溶解液太少使浓度过大;沉淀物太干燥,也将使溶解变得很困难;10. 电泳检测时DNA成涂布状：操作不慎；污染核酸酶等;11.分光光度分析DNA的A280/A260小于；不纯,含有蛋白质等杂质;在这种情况下,应加入SDS至终浓度为%,并重复步骤2～8;12.酚/氯仿/异戊醇抽提后,其上清液太黏不易吸取：含高浓度的DNA,可加大抽提前缓冲液的量或减少所取组织的量DNA电泳常见问题分析之一1 请问配制聚丙烯酰胺凝胶电泳胶时,促凝的是TEMED还是过硫酸铵胶聚时间很长如何解决过硫酸铵提供驱动丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚合所需的自由基,而TEMED通过催化过硫酸铵形成自由基而加速它俩的聚合;胶聚合时间长可能是TEMED失效了,过硫酸铵固体时间过久也会失效的;一个让PAGE胶很快聚合的方法：不要先配AP过硫酸铵溶液,因为AP很容易变质;在保证TEMED和AP质量的情况下,每次配胶时,直接称一定量的AP粉剂溶入液体状态的PAGE中,这样可以保证AP的催化能力,而且可以多加一点;配25ml的PAGE胶,加克AP粉剂,最后加入25ulTEMED,20分钟左右就可以凝固当然这个时候拔梳子,会有少量未凝固的PAGE在孔里形成丝状干扰,使加的样品看起来不太漂亮,但一般不影响跑胶效果和条带的形状和位置;2DNA电泳的MARKER怎么是扭曲的1、配制胶时的缓冲液需要和电泳缓冲液不是同时配制的.最好是同时配制.电泳时缓冲液高过液面1－2mm即可;2、电泳时电压过高,可以在电泳前15分钟用较低电压3V/cm,等条带出孔后比较漂亮了.然后再调电压;3、上样时尽量慢慢加样,等样品自然沉降后再加电压;3跑出的DNA带模糊1、DNA降解：避免核酸酶污染;2、电泳缓冲液陈旧:电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果;建议经常更换电泳缓冲液;3、所用电泳条件不合适:电泳时电压不应超过20V/cm,温度＜30℃；巨大DNA 链电泳,温度应＜15℃；核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力;4、DNA上样量过多：减少凝胶中DNA上样量;5、DNA样含盐过高：电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐;6、有蛋白污染：电泳前酚抽提去除蛋白;7、DNA变性：电泳前勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA;4 有不规则DNA带迁移1、对于λ/Hind III片段cos位点复性：电泳前于65℃加热DNA 5分钟,然后在冰上冷却5分钟;2、电泳条件不合适：电泳电压不超过20V/cm；温度＜30℃；经常更换电泳缓冲液;3、DNA变性：以20mM NaCl Buffer稀释DNA,电泳前勿加热;5 跑出的DNA条带带弱或无DNA带1、DNA的上样量不够：增加DNA的上样量；聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度稍高,上样量可适当降低;2、DNA降解：避免DNA的核酸酶污染;3、DNA走出凝胶：缩短电泳时间,降低电压,增强凝胶浓度;4、对于EB染色的DNA,所用光源不合适应用短波长254nm的紫外光源;6 跑出的DNA带缺失不完整是怎么回事1、如果是小DNA带走出凝胶,可以缩短电泳时间或降低电压或增强凝胶浓度;2、分子大小相近的DNA带不易分辨增加电泳时间,核准正确的凝胶浓度;3、DNA 变性：电泳前请勿高温加热DNA链,以20mM NaCl Buffer稀释DNA;DNA链巨大,常规凝胶电泳不合适在脉冲凝胶电泳上分析;7 做PCR电泳后跑电泳,目的基因是489BP的,结果每次切胶回收后再跑电泳就变成500多了,快到600了为什么有时只靠电泳结果判断是不准确的,同样的片段每次跑的远近会有不同;有经验显示目的片段是1300多,结果就跑到1000的marker下面去了,后来证实片段没有问题;也有做的一个片段也是这样,是490BP.理论上两个条带一样,可是PCR结果显示就是大小不一致;然后回收以后的检测结果又全部都一样了,后来又拿去做了下一个测序,才知道根本没有问题;8：为什么marker条带非常模糊,无法辨别具体条带A：出现上述情况,可能有以下几个原因：1. marker条带出现了降解;请确保在使用过程中避免核酸酶污染；2. 电泳缓冲液陈旧;电泳缓冲液多次使用后,离子浓度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果,建议经常更换电泳缓冲液；3. 电泳条件不合适;电泳时电压应不超过20V/cm,温度应低于30℃；4. marker上样量过多;请根据说明书选用合适上样量；5. 凝胶质量不好;建议使用质量较好的琼脂糖；此外,凝胶凝固不均匀也会导致条带模糊;9：为什么marker条带出现不规则的条带如哑铃状等A：出现上述情况,多与以下几个原因有关：1. 电泳缓冲液陈旧;老化的电泳缓冲液离子浓度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果,建议经常更换电泳缓冲液；2. 电泳条件不合适;电泳时电压应不超过20V/cm,电压太高可能也会导致marker条带出现不规则现象;此外,凝胶质量差以及凝胶冷却时凝固不均匀也会导致该现象出现;10为什么marker条带非常弱或者根本没有条带A：出现上述情况可能是：1. marker上样量较低,可适当增加上样量；2. 凝胶质量较差或凝胶凝固不均匀也会导致电泳条带弱或根本没有条带；3. 电泳时间过长导致marker条带跑出凝胶,可缩短电泳时间,降低电压,增加凝胶浓度;11：为什么marker缺带A：对于含有较小片段的marker,如果出现缺带现象,可能是因为：1. 小条带跑出凝胶或分子量大小非常相近的条带不易辨认所致,可适当缩短电泳时间,降低电压,同时增加凝胶浓度；2. 凝胶中EB含量过低,导致大片段结合EB量太少或没有,在紫外光下亮度太低,可适当增加EB用量;。
SDS-PAGE电泳过程中常见问题以及解决方法要点
SDS－PAGE电泳过程中常见问题以及解决方法几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进行，而所有条件总要确保蛋白质解离成单个多肽亚基并进可能减少其相互间的聚集，最常用的就是SDS－PAGE电泳技术，关于大家在此过程中经常遇到的问题进行一些讨论：Q：SDS－PAGE电泳的基本原理？A：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS（十二烷基硫酸钠），SDS会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关，在达到饱和的状态下，每克多肽可与1.4g去污剂结合。
当分子量在15KD到200KD之间时，蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式：logMW=K-bX，式中：MW 为分子量，X为迁移率，k、b均为常数，若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图，可获得一条标准曲线，未知蛋白质在相同条件下进行电泳，根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。
Q：配胶缓冲液系统对电泳的影响？A：在SDS－PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统。
在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低；而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介于二者之间泳动。
由于导电性与电场强度成反比，这一区带便形成了较高的电压剃度，压着蛋白质分子聚集到一起，浓缩为一狭窄的区带。
当样品进入分离胶后，由于胶中pH的增加，呈碱性，甘氨酸大量解离，泳动速率增加，直接紧随氯离子之后，同时由于分离胶孔径的缩小，在电场的作用下，蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。
所以，pH对整个反应体系的影响是至关重要的，实验中在排除其他因素之后仍不能很好解决问题的情况，应首要考虑该因素。
电泳常见质量问题之针孔及麻点
针孔：使用电泳设备对工件进行电泳时，工件上的电泳涂膜在烘干后产生针尖状的小凹坑或小孔，称为针，它与缩孔（陷穴）的区别是孔径小，中心无异物，且四周无漆膜堆积凸起。
由漆膜再溶解而引起的针孔，称为再溶解针孔；由于电泳设备在电泳过程中产生的气体、湿膜脱泡不良而产生的针孔，称为气体针孔；沿被涂物带电入槽的斜线形成的气体针孔称为带电人槽阶梯式针孔，一般出现在被涂物的下部。
①电泳电压过高，电解反应过剧，产生气泡过多，或升压速度过快。
适当降低电压。
②混入电泳漆中的杂质（油、润滑脂等）粘附在漆膜上。
除去电泳漆中的油脂等杂质。
③助溶剂含量偏低。
添加助溶剂。
④槽液温度过低或搅拌不充分，脱泡不良。
控制好槽液温度。
⑤涂料的pH过低及溶剂过剩使漆膜极化能力变低，抵抗杂质能力变弱。
提高涂料的pH并将漆膜厚度控制在必要的范围内。
⑥槽液杂质离子过高，电解反应剧烈，被涂物表面产生的气体多。
超滤除去杂质离子。
阴极电泳的缩孔产生原因还有前处理不良和涂料质量低劣（采取相应之法消除），这两种原因及第⑥项原因产生的缩孔或凹陷，一般可见底材。
⑦固体分过低。
提高固体分。
⑧电泳涂装后清洗不彻底或不及时，使漆膜再溶解。
磷化膜孔隙率高，易含气泡。
工件带电人槽时链速过慢；若链速太慢，不宜选用带电入槽的工艺，改用人槽后通电。
被涂物人槽端处液面流速低，有泡沫堆积；可使液面流速大于0.2m／s，以消除泡沫。
麻点：①电泳液中存在较粗大的机械杂质；检查电泳槽过滤装置。
②车间空气中含有的尘埃等漂浮物飘落到放在滴干区的工件上；搞好车间环境卫生，防止灰尘飘浮。
③烘炉内存在灰尘等杂物；清洁烤炉。
电泳漆膜出现陷穴（缩孔）怎么办由外界造成被涂物表面、磷化膜或电泳湿膜上附有尘埃、油分等，或在漆膜中混有与电泳涂料不相溶的异物，它们成为陷穴中心，并造成烘干初期的流展能力不均衡而产生火山口状的凹坑，直径通常为0.5-3.0mm,不露底的称为陷穴、凹坑，露底的称为缩孔。
产生原因：（1）槽液中混入异物（油分、灰分），油漂浮在电泳槽液表面或乳化在槽液中。
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Marker
参考见解：marker有时会出现这样的问题,应该是时间久了。
新买时跑胶在点样孔没有,过一段时间就会在点样孔出现亮点。
也可能是蛋白，有时DNA提的不纯含有蛋白时就会出现上样孔有条带的现象
琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,跑出的带后面出现拖尾现象,什么原因造成的?
参考见解：DNA带模糊??：
1、DNA降解??避免核酸酶污染。
2、DNA上样量过多??减少凝胶中DNA上样量。
3、所用电泳条件不合适??电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃,巨大DNA链，温度应＜15℃，核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。
4、DNA样含盐过高??电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。
5、有蛋白污染??电泳前酚抽提去除蛋白。
6、DNA变性，?电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。
将从组织提取的DNA进琼行脂糖凝胶电泳，用的1.5%的胶加了EB，80V跑1小时，溴酚蓝已经跑到头了，在紫外灯观察什么带也没有，只见孔里面有橘红色的亮光。
好象没跑出来，是怎么回事？
参考见解：
1、根据目的条带长度来调整凝胶浓度，一般1.5％左右，也不一定。
2、紫外灯下没见带，不一定没有出孔，而是量少看不到，可以测一下浓度看一下，或直接试跑一下PCR。
3、最好加一个marker孔，尤其你第一次跑胶时。
4、电泳时间可能过长，一般75v×30min左右，但是具体看溴酚蓝的离孔距离和目的条带离孔距离。
怎样根据目测条带亮度来判断DNA浓度？
参考见解：
1、跑胶时候marker 可以加成定量marker，如1kb、100bp等marker，按说明书的量上样电泳，如加500ng量的DNA marker，电泳完毕后，就可将目的DNA条带和MARKER 条带的亮度做个大致的比较，找出两者最接近亮度的条带。
因为marker的各条带都已知所含的DNA浓度（说明书中详细注明），因此根据条带的亮度、大小大致就可推测目的DNA的浓度。
2、在通过目测DNA浓度的时候，最好要把加样量设一个梯度，比如从0。
5、2、4、6，因为，如果质粒的量很浓的话，通过简单的对一条条带的目测产生的结果误差是很大的或者利用marker(推荐DL 2000),再用软件做半定量分析。
DNA电泳的MARKER怎么是扭曲的？
参考见解：
1、配制胶时的缓冲液需要和电泳缓冲液不是同时配制的.最好是同时配制.电泳时缓冲液高过液面1－2mm即可。
2、电泳时电压过高,可以在电泳前15分钟用较低电压(3V/cm),等条带出孔后比较漂亮了.然后再调电压。
3、上样时尽量慢慢加样,等样品自然沉降后再加电压。
跑出的DNA带模糊？
参考见解：
1、DNA降解：避免核酸酶污染。
2、电泳缓冲液陈旧:电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，pH值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果。
建议经常更换电泳缓冲液。
3、所用电泳条件不合适:电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃；巨大DNA链电泳，温度应＜15℃；核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。
4、DNA上样量过多：减少凝胶中DNA上样量。
5、DNA样含盐过高：电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。
6、有蛋白污染：电泳前酚抽提去除蛋白。
7、DNA变性：电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。
有不规则DNA带迁移?
参考见解：
1、对于λ/Hind III片段cos位点复性：电泳前于65℃加热DNA 5分钟，然后在冰上冷却5分钟。
2、电泳条件不合适：电泳电压不超过20V/cm；温度＜30℃；经常更换电泳缓冲液。
3、DNA变性：以20mM NaCl Buffer稀释DNA，电泳前勿加热。
跑出的DNA条带带弱或无DNA带？
参考见解：
1、DNA的上样量不够：增加DNA的上样量；聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度稍高，上样量可适当降低。
2、DNA降解：避免DNA的核酸酶污染。
3、DNA走出凝胶：缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度。
4、对于EB染色的DNA，所用光源不合适??应用短波长（254nm）的紫外光源。
跑出的DNA带缺失不完整是怎么回事?
参考见解：?
1、小DNA带走出凝胶??缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度。
2、分子大小相近的DNA带不易分辨??增加电泳时间，核准正确的凝胶浓度。
3、DNA变性：电泳前请勿高温加热DNA链，以20mM NaCl Buffer稀释DNA。
DNA链巨大，常规凝胶电泳不合适??在脉冲凝胶电泳上分析。
跑完PCR，暂时不方便胶回收，条带已经切下来放到ep管里了，这个能保存么？会不会有不良影响？
参考见解：还有个问题，pcr的产物可以不可以直接拿来做模板再进行pcr。
我试过，可是总是出现一个拖尾亮条，没有带，是什么原因呢？
割下来的胶放在-20保存两个星期完全没有问题。
切下来的胶放在4度冰箱中4、5小时没有问题回收的效果也很好。
凝胶回收DNA实验的关键在哪里?
参考见解：最关键的是切胶之后,溶胶的那一步.切胶的时候要尽量把多余的琼脂糖凝胶切干净,按照实验步骤,第一步应该是将胶充分的溶化.这以后步一定要做充分,保证凝胶已经完全溶解了.加乙醇这步也很关键，当凝胶溶解后最好多过几次柱子。
还有就是洗脱的那一步。
洗脱的时候最好用加热到60度的洗脱液洗脱，如果实在效果不好可以分两次洗脱。
切胶的时候如何能切的准呢？条带的位置肉眼很难判断出来，如何判断条带的位置呢？
参考见解：可以将产物与Marker一起电泳，染色后，在紫外灯下观察结果，跟Marker进行相比，就知道要的是哪条带。
注意，紫外灯下切胶速度要快，否则DNA会降解，另外，紫外线对身体伤害很大，特别是眼睛，请注意采取保护措施（比如在专门的箱子里切，带眼镜等）。
|||RNA用具要用10%的NaOH浸泡过液，再用DEPC水冲洗干净 70%的乙醇用过国产分析乙醇有杂质。