固相萃取柱常见问题及对策 SPE问题

固相萃取柱常见问题及对策SPE问题

问题可能的原因解决方法

回收率低

柱活化条件不恰当

根据固定相的不同正确活化SPE小

柱

反相填料：甲醇、乙腈等，1倍柱管

体积或3倍柱床体积

正相填料：非极性有机溶剂如正己烷

等，1倍柱管体积或3倍柱床体积

离子交换填料：1倍柱管体积的甲醇、

乙腈或异丙醇等与水互溶的极性溶

剂。

样品溶剂对目标成分

的作用力比固定相强

选择对目标组分具有更强选择性的

SPE小柱；

调整样品溶剂的PH值，增加目标组

分在固定相中的作用力；

改变样品溶剂的极性，降低目标组分

在溶剂中的作用力。

清洗溶剂选择不当；

洗脱能力太强

使用正确的清洗溶剂；

选择洗脱能力更弱的溶剂载样时流速过快

重力自然载样或控制载样流速

≤1ml/min

SPE小柱太小

用更大规格的SPE小柱；

用选择性更强的SPE小柱；

用载样量更大的SPE小柱

洗脱前SPE小柱清洗

溶剂抽干不充分

充分抽干冲洗溶剂

洗脱不充分

增加洗脱剂的体积；增加洗脱剂的强

度；用更小规格的SPE小柱

洗脱时流速过快或过

慢

控制流速1-2ml/min

目标成分不能从SPE小柱上

洗脱固定相对目标组分选

择性太强

选择对被分析物保留较弱的小柱；

选择洗脱能力更强的洗脱溶剂。对酸

碱目标成分，调节洗脱剂的PH值，

减弱固定相对目标组分的选择性

SPE小柱规格太大

增加洗脱剂的用量；用更小规格的SPE小柱

洗脱剂用量不足增加洗脱剂

洗脱时流速过快或过

慢

控制流速1-2ml/min

洗脱剂洗脱能力太弱调节洗脱剂的PH值，提高溶剂对目标成分的洗脱能力（对酸、碱目标成

分）；

改变洗脱液的极性，提高溶剂对目标

成分的洗脱能力

重现性差

上样前柱床干涸重新活化SPE小柱

超出小柱的载样能力

减小载样量，或用规格更大的SPE小

柱

载样过程流速过高

降低流速，重力自然载样或控制载样

流速≤1ml/min

清洗溶剂洗脱能力太

强

降低清洗溶剂洗脱强度洗脱流速过快

先让洗脱液渗透小柱，再对小柱抽真

空或加压，控制流速1-2ml/min

洗脱剂分两次加入洗脱剂用量不足

增加洗脱剂的用量或者用更小规格的

SPE小柱

干扰物清洗不

干净固定相对干扰物的选

择性太强

选择合适的清洗液，有选择性的将干

扰物清洗掉

选择对目标组分专属性更强的SPE

小柱

固定相残留的干扰物活化前先用洗脱剂清洗SPE小柱

操作过程流速

过低样品中含有过多的颗

粒物质

载样前过滤或离心样品溶液或改用溶

解能力更强的样品溶剂

样品溶液粘度过大使用洗脱力弱的溶剂稀释样品或改用溶解力更强的样品溶剂

真空度不够检查萃取装置的密封性，检查泵是否正常工作，增加真空度

样品量过大样品量大于萃取小柱

的载样量

采用规格更大的SPE小柱

萃取效率差，失

败方法选择错误

选择具有不同萃取模式的固定相或采

用其他分析方法