DNA提取和制备解读教案资料
分子生物学实验：DNA提取与鉴定生物教案
分子生物学实验：DNA提取与鉴定生物教案提取与鉴定生物教案一、教学目标：1.了解DNA分子的结构和基本特征。
2.理解DNA提取和测序的原理。
3.掌握实验操作技能，能够成功提取DNA并进行测序。
4.了解DNA在生物学研究中的重要性和应用价值。
二、教学内容：1.DNA的结构和基本特征DNA是一个双螺旋结构，由磷酸、脱氧核糖和碱基组成。
DNA分子的两个螺旋互相螺旋在一起，由氢键连接。
DNA分子的碱基有四种：腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶。
两个互补的碱基可以通过氢键进行配对，形成碱基对，例如腺嘌呤和胸腺嘧啶配对，鸟嘌呤和胞嘧啶配对。
2.DNA提取和测序的原理DNA提取是从生物样品中提取DNA分子的过程。
一般来说，DNA提取需要先破坏细胞膜和核壁，释放出DNA分子，然后通过离心、酶解和纯化等步骤将DNA分离并提取出来。
DNA测序是对DNA分子的核苷酸序列进行测定的过程。
DNA测序是通过识别DNA分子不同碱基的序列来实现的。
目前常见的DNA测序方法有Sanger测序和高通量测序两种。
3.实验操作技能DNA提取实验的操作技能包括实验前的准备工作、标本的采集、样品的处理、DNA的纯化和保存等步骤。
具体的实验步骤包括：（1）样品的切割、切碎和研磨。
（2）样品的裂解和蛋白质分离。
（3）DNA的纯化。
（4）鉴定DNA的纯度和浓度。
（5）冷冻和保存DNA样品。
DNA测序实验的操作技能包括：（1）DNA准备。
（2）参比序列的准备。
（3）PCR扩增。
（4）测序反应。
（5）序列分析和组装。
4.DNA在生物学研究中的重要性和应用价值DNA是生物学研究中不可或缺的分子，在生物学、医学、农业、环境学等多个领域都有广泛的应用。
例如：（1）通过DNA测序，可以对人类基因组或其他物种的基因组进行研究，了解基因功能和基因变异等信息。
（2）DNA检测可以用于鉴定生物学样品的物种、性别和亲缘关系。
（3）DNA诊断可以用于疾病的诊断和治疗。
（4）DNA疫苗可以用于预防疾病。
DNA提取和制备解读PPT学习教案
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DNA提取原则2：DNA产物纯度
• 严格要求产物纯度
▪ 存档、产物长期保存 ▪ Southern杂交 ▪ 荧光定量PCR ▪ SNP Microarray ▪ CGH (比较基因组杂交)
• 没有严格要求
▪ 常规PCR
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基因组提取方法
溶 液 盐 析 法 ：无需 酚氯仿 ，样本 量灵活 可变， 得率高 硅 胶 膜 吸 附 法：利 用硅胶 膜特异 吸附核 酸的原 理来纯 化核酸 磁 珠 法 ： 独 特包埋 的磁珠 ，在一 定条件 下对核 酸具有 很强的 亲和力 ，而当 条件改 变时， 磁珠释 放吸附 的核酸 ，能够 达到快 速分离 纯化核 酸的目 的。 传 统 酚 氯 仿 法：传 统方法 ，抽提 时间长 ，成本 低。但 酚氯仿 有毒， 危害身 体健康 。
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DNA检测方法－紫外分光光度法
纯度（ OD260-320 /OD280-320 ）
紫外分光光度计进行测量（选择正确的稀释倍数，确保OD260 值在0.1~1.0之
间，通常离心柱法稀释4－5倍；溶液裂解法稀释20－30倍）
OD260-320 /OD280-320 < 1.7
说明有蛋白的污染
理论上所有有核真核细胞、细菌、病毒都 可以提取DNA
样本选择取决于试验目的 全血是基因组提取最常见的样本
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血清、血浆、外周血有核细胞、痰液、体 液、棉拭子采集的各种分泌物、组织（包 括骨髓）和羊水等都是分子诊断的检验材 料，其中全血、血浆（血清）标本占分子 诊断的60%以上
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核酸吸附或沉淀
硅胶膜吸附法 1 . 加 入 乙 醇 颠倒混 匀后可 能会出 现絮状 沉淀， 动作要 轻柔。 2 . 将 裂 解 的 溶液和 絮状沉 淀全部 加入到 吸附柱 里，此 时的溶 液应是 高盐低 pH值的 。通过 硅胶膜 特异吸 附核酸 的特性 将裂解 溶液中 的核酸 吸附到 硅胶膜 上。 溶液法 1 . 当 沉 淀 时 间有限 时，用 预冷的 异丙醇 沉淀， 沉淀会 更充分 。 2 . 加 入 异 丙 醇颠倒 混匀后 应出现 丝状沉 淀，动 作要轻 柔，避 免基因 组因过 于猛烈 的外力 而降解 。 3 . 分 离 沉 淀 的方法 ：a.用 枪头小 心地将 丝状沉 淀挑出 ；b.离 心分离 ，应保 证一定 的转速 和时间 。
DNA的粗提取与鉴定教案
DNA的粗提取与鉴定教案一、教学目标1. 理解DNA的粗提取与鉴定的基本原理。
2. 学会使用不同的方法进行DNA的粗提取。
3. 学会使用不同的方法进行DNA的鉴定。
4. 能够独立完成DNA的粗提取与鉴定实验。
二、教学重点与难点1. 教学重点：DNA的粗提取与鉴定的基本原理、方法与步骤。
2. 教学难点：DNA的鉴定方法。
三、教学准备1. 实验室器材：试管、移液器、玻璃棒、滤纸、离心机等。
2. 实验材料：鸡血细胞、植物细胞、细菌等。
3. 试剂：酒精、盐、洗涤剂等。
四、教学过程1. 引入：通过讲解DNA的发现历程，引发学生对DNA的兴趣。
2. 讲解：讲解DNA的粗提取与鉴定的基本原理、方法与步骤。
3. 实验操作：引导学生独立完成DNA的粗提取与鉴定实验。
4. 讨论与思考：引导学生思考DNA的粗提取与鉴定在实际应用中的意义。
五、教学评价1. 学生能够理解DNA的粗提取与鉴定的基本原理。
2. 学生能够独立完成DNA的粗提取与鉴定实验。
3. 学生能够理解DNA的鉴定方法及其应用。
六、实验原理1. DNA的溶解性：DNA和蛋白质、脂质等成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。
2. DNA的稳定性：DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。
七、实验材料与试剂1. 实验材料：鸡血细胞、植物细胞、细菌等。
2. 试剂：2mol/L NaCl溶液：用于提取DNA。
0.14mol/L NaCl溶液：用于进一步纯化DNA。
冰醋酸：用于进一步纯化DNA。
50%酒精溶液：用于鉴定DNA。
二苯胺试剂：用于鉴定DNA。
八、实验步骤1. DNA的粗提取：a. 将实验材料加入2mol/L NaCl溶液，充分搅拌后放置一段时间。
b. 收集上清液，加入等体积的0.14mol/L NaCl溶液，轻轻搅拌后放置一段时间。
c. 收集上清液，加入等体积的冰醋酸，轻轻搅拌后放置一段时间。
d. 收集上清液，加入等体积的50%酒精溶液，轻轻搅拌后放置一段时间。
DNA的粗提取与鉴定教案
DNA的粗提取与鉴定教案第一章：DNA的简介1.1 课程目标：了解DNA的定义和结构理解DNA在生物体内的功能和重要性1.2 教学内容：DNA的定义和组成DNA的双螺旋结构DNA的复制和遗传信息的传递1.3 教学活动：引入话题：通过播放一个关于DNA的科普视频或进行一个简短的讨论来引起学生对DNA的兴趣。
讲解DNA的定义和组成：使用PPT或板书来展示DNA的基本结构和组成单位。
讲解DNA的双螺旋结构：使用模型或动画来展示DNA的双螺旋结构。
讲解DNA的复制和遗传信息的传递：使用示例或图解来说明DNA的复制过程和遗传信息的传递方式。
1.4 作业与评估：给学生发放相关的阅读材料或布置相关的阅读作业，以加深对DNA的理解。
进行小组讨论或小测验，以评估学生对DNA的掌握程度。
第二章：DNA的粗提取2.1 课程目标：学习DNA的粗提取方法理解DNA在不同溶液中的溶解度特性2.2 教学内容：DNA的溶解度特性：介绍DNA在不同溶液中的溶解度变化。
DNA的粗提取方法：介绍使用不同的溶液和离心方法来粗提取DNA。
2.3 教学活动：讲解DNA的溶解度特性：使用PPT或板书来展示DNA在不同溶液中的溶解度变化。
讲解DNA的粗提取方法：使用PPT或板书来展示使用不同的溶液和离心方法来粗提取DNA的步骤。
进行实验演示：演示如何使用不同的溶液和离心方法来粗提取DNA。
2.4 作业与评估：给学生发放实验指导书或布置相关的实验作业，以指导学生进行DNA的粗提取实验。
进行小组讨论或小测验，以评估学生对DNA的粗提取方法的掌握程度。
第三章：DNA的鉴定3.1 课程目标：学习DNA的鉴定方法理解DNA的电泳迁移和光谱特性3.2 教学内容：DNA的电泳迁移：介绍使用琼脂糖凝胶电泳来鉴定DNA的迁移速度。
DNA的光谱特性：介绍使用紫外光谱仪来鉴定DNA的吸收光谱。
3.3 教学活动：讲解DNA的电泳迁移：使用PPT或板书来展示琼脂糖凝胶电泳的原理和步骤。
高中三年级生物实验教案：研究DNA的提取与分析
高中三年级生物实验教案：研究DNA的提取与分析一、引言在高中生物教育中，实验是培养学生科学研究能力和探究精神的重要环节。
本文将介绍一种针对高中三年级生物课程的实验教案，旨在帮助学生了解和掌握DNA提取与分析的基本原理和方法。
二、实验目的1.了解DNA的结构与功能；2.掌握DNA提取的基本步骤；3.利用凝胶电泳分析DNA提取结果。
三、实验材料与设备准备1. 材料：- 1根新鲜洋葱（或其他富含DNA的食材）- 盐水（含氯化钠0.9%）- 酒精（乙醇或异丙醇）- 洗涤剂（例如洗衣粉）- 碱性液体（例如小苏打或食品级碳酸氢钠溶液）2. 设备：- 榨汁机（可选项：用于加速细胞破碎）- 烧杯- 塑料或玻璃容器- 滤纸–平板电脑/计算机（用于图像处理）四、实验步骤1. 制作DNA提取缓冲液：将5克盐溶解在100毫升的水中。
2. 细胞破碎：- 取洋葱切成小块，加入榨汁机中搅拌；- 如果没有榨汁机，可以用刀将洋葱切碎。
3. 细胞溶解：- 将细胞均匀地分布在干净的容器中；- 加入200毫升的盐溶液，并轻轻摇晃容器。
4. 蛋白质沉淀：- 将细胞溶液离心10分钟（3000×g）或静置30分钟；- 倒掉上层液体，保留含有DNA的沉淀。
5. 提取DNA：- 加入相同量的酒精到含有DNA的沉淀中；- 缓慢地倾斜容器，使酒精与DNA沉淀边界相互接触。
6. 观察提取结果：可以观察到细长白色物质，这即为提取出来的DNA。
将其收集在滤纸上，并放置一段时间以晾干。
7. 凝胶电泳分析（可选）：- 准备琼脂糖凝胶和电泳仪；- 将提取出的DNA溶解于适量的缓冲液中，加载到凝胶孔中；- 进行电泳分离（时间与电流根据实际情况调整）；- 分析凝胶图像，观察DNA带的大小、数量等特征。
五、实验注意事项1. 实验操作时要戴上手套和护目镜，避免接触化学物品对身体造成伤害。
2. 所用设备和材料应保持清洁干净，以避免污染样品。
3. 在细胞破碎后应及时加入酒精使DNA沉淀下来。
《DNA 的粗提取及鉴定》 教学设计
《DNA 的粗提取及鉴定》教学设计一、教学目标1、知识目标（1）理解 DNA 粗提取和鉴定的原理。
（2）了解 DNA 在细胞中的存在部位和提取的方法。
2、能力目标（1）通过实验操作，培养学生的动手能力和实验技能。
（2）学会分析实验现象，得出正确的实验结论。
3、情感目标（1）体验科学探究的过程，培养学生严谨的科学态度。
（2）激发学生对生物学的兴趣，培养学生的创新意识。
二、教学重难点1、教学重点（1）DNA 粗提取的原理和方法。
（2）DNA 鉴定的方法和实验操作。
2、教学难点（1）DNA 粗提取过程中去除杂质的方法。
（2）实验操作的规范性和准确性。
三、教学方法讲授法、实验法、讨论法四、教学准备1、实验材料和试剂鸡血细胞液、柠檬酸钠溶液、蒸馏水、2mol/L 的氯化钠溶液、体积分数为 95%的酒精溶液、二苯胺试剂、研钵、漏斗、纱布、玻璃棒、烧杯、试管、离心机等。
2、多媒体课件五、教学过程1、导入新课通过播放一段关于 DNA 鉴定在刑侦案件中的应用视频，引起学生的兴趣，从而引出本节课的主题——DNA 的粗提取及鉴定。
2、讲解 DNA 粗提取的原理（1）DNA 在氯化钠溶液中的溶解度是随着氯化钠浓度的变化而改变的。
当氯化钠的物质的量浓度为014mol/L 时，DNA 的溶解度最低。
利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的 DNA 析出。
（2）DNA 不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液。
利用这一原理，可以进一步提纯 DNA。
3、实验步骤（1）制备鸡血细胞液在鸡血中加入柠檬酸钠溶液，防止血液凝固。
将血液倒入离心管中，离心后去除上清液，留下鸡血细胞液。
（2）提取细胞核物质向鸡血细胞液中加入蒸馏水，使细胞吸水涨破，释放出细胞核物质。
（3）溶解 DNA向溶液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液，搅拌，使 DNA 溶解。
（4）析出 DNA缓慢加入蒸馏水，使氯化钠溶液的浓度降低至 014mol/L，这时DNA 会析出。
DNA的粗提取及鉴定实验教学设计
DNA的粗提取与鉴定实验一、教学背景分析【教材分析】生物体的性状之所以能够遗传给后代，是由于生物体具有DNA或RNA这些遗传物质。
通过必修2"遗传与进化"的学习，学生已经学习了证明DNA是主要的遗传物质的实验证据。
则DNA终究是什么样的呢.本课题通过尝试对植物或动物组织中的DNA进展粗提取，了解DNA的物理化学性质，理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理，使学生对DNA有一定的感性认识。
"DNA的粗提取与鉴定实验〞在"普通高中生物课程标准"和"考试大纲"对实验容考察的要求中属D级要求，新课标强调能力培养，高考对实验能力的考核比重也逐年加大。
学生通过本次实验探究活动，可进一步提高动手能力和创新能力。
【学情分析】通过必修2"遗传与进化"的学习，学生已经了解了证明DNA是主要的遗传物质的实验证据，知道生物体的形状之所以能够遗传给后代，是由于生物体具有DNA或RNA这些遗传物质。
通过本课题的学习，使学生对DNA有一定的感性认识。
二、教学目标【知识目标】本实验通过尝试对植物或动物组织中的DNA进展粗提取，了解DNA的物理化学性质，理解DNA粗提取方法以及DNA鉴定的原理容。
【能力目标】1.实验中能运用已有的知识，选择实验材料用具；2.通过具体的材料，学生尝试课题研究，体验科学探究的一般过程。
3.初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法4.在对实验原理、步骤的理解和分析过程中开展学生的科学思维。
5.熟悉粗提取生物大分子的的一般性方法【情感态度与价值观目标】1.通过小组之间的分工合作，逐渐养成协作精神；2.通过科学与数学的整合，逐渐形成简约、严谨的思维品质；3.在实验过程中培养学生严谨细致、实事的科学态度三、教学重难点【教学重点】DNA的粗提取与鉴定方法及其相关原理【教学难点】DNA的粗提取与鉴定方法及其相关原理四、实验实施准备【教师准备】1.分组。
2023高中生物人教版DNA的粗提取与鉴定实验教案
2023高中生物人教版DNA的粗提取与鉴定实验教案一、实验目的通过本实验，学生将了解到DNA的结构和提取方法，并学会进行DNA的粗提取与鉴定实验。
二、实验原理DNA是一种复杂的分子，存在于细胞核中。
DNA的提取是将细胞溶解，分离出DNA分子的过程。
本实验采用CTAB法进行DNA的提取。
CTAB（正十六烷基三甲基溴化铵）可与DNA中的脂质结合，使其在酒精中沉淀出来，然后进行纯化。
三、实验材料1. 鸽子肌肉组织2. CTAB提取液（含CTAB、EDTA等）3. 去离子水4. 洗涤溶液（含乙醇、酒精等）5. 漂白粉溶液6. 碘酒溶液7. NB试剂液（含甲酚、硫酸等）8. DNA鉴定试剂盒9. 细胞破碎管10. 离心管11. 显微镜四、实验步骤1. 取适量鸽子肌肉组织，用漂白粉溶液清洗约5分钟，然后用去离子水洗净。
2. 将清洗后的组织切成小块，加入细胞破碎管中。
3. 加入适量的CTAB提取液，轻轻颠倒破碎管，使其均匀混合。
4. 将混合液放入水浴中加热，温度控制在60℃，保持30分钟。
5. 在水浴中加热过程中，制备NB试剂液。
取一定体积的NB试剂液加入离心管中。
6. 完成加热后，将破碎管置于冷水中快速降温。
7. 按顺序加入等体积的NB试剂液和酒精，轻轻摇晃离心管。
8. 静置一段时间后，观察管内是否有白色物质沉淀，即DNA。
9. 使用显微镜观察提取的DNA样品，并拍照记录。
五、实验结果与分析通过上述实验步骤，我们成功从鸽子肌肉组织中提取到了DNA。
观察显微镜下的DNA样品，可以观察到DNA的纤维状结构，证明DNA成功提取。
通过DNA鉴定试剂盒，可以进一步鉴定DNA的质量和纯度。
六、实验扩展1. 不同来源的细胞组织是否存在DNA含量差异？2. 不同提取方法对DNA的效果有何不同？3. 通过PCR技术对提取的DNA进行进一步分析。
七、实验注意事项1. 实验过程中需注意个人安全，避免接触有害物质。
2. 实验器材需干净无污染，避免杂质对实验结果的影响。
DNA粗提取及鉴定教案
DNA粗提取及鉴定教案第一篇：DNA粗提取及鉴定教案《DNA粗提取及鉴定》一、学习目标：学生通过对本节内容的探究学习：能⑴了解DNA的物理化学性质。
⑵理解DNA粗提取与鉴定的原理。
⑶掌握DNA粗提取及鉴定方法，⑷利用DNA的性质进行实验分析和实验设计。
二、本节内容学习的重点：DNA的粗提取和鉴定原理、方法。
难点：DNA的粗提取和鉴定原理、方法。
三、自主探究（一）（阅读教材、学案；探究下列问题）1、提取生物大分子的基本思路？2、提取DNA的基本思路？3、用文字和坐标曲线描述DNA的溶解性；并思考该问题在DNA 粗提取中将有何应用？4、DNA在酒精溶液中的溶解性5、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性6、如何来进行DNA鉴定自主探究（二）（阅读教材、学案；探究下列问题）1、进行DNA粗提取应选择什么样的材料；你的选择的理由？2、为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？3、如何破碎植物细胞，并获取含DNA的滤液；请举例说明，并告诉自己应注意什么？自主探究（三）（阅读教材、学案；探究下列问题）去除滤液中的杂质1、此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？2、方案一中为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？3、方案二与方案三的原理有什么不同？自主探究（四）（阅读教材、学案；探究下列问题）1、DNA析出的原理，DNA析出物是什么颜色？2、DNA鉴定需要设置对照吗？要注意什么问题？四：讨论（一）你帮助、我改正；我质疑，共提升小组内讨论自主探究内容并自行改正讨论（二）你我同思考，细总结，共同突破难点小组内讨论：总结1、本实验的实验原理2、DNA粗提取与鉴定过程3、此实验过程中有几次使用蒸馏水？几次过滤，几次析出？分别在哪一步？五：小组间质疑，完善六：课堂小结七：达标检测；当堂掌握知识拓展：课下思考总结：1、在我们的高中生物学习中有颜色反应的实验有那些？2、DNA在不同浓度氯化钠溶液中溶解度的变化曲线还能表示那些量的关系？3、还有那些实验中用到了酒精，他们的作用是？第二篇：dna粗提取和鉴定dna粗提取和鉴定实验用具洋葱或其他植物、洗洁精、食盐、搅拌机或研钵(我们采用的是家用豆浆机)、纱布、漏斗、烧杯、玻璃棒、量筒(10mL一支)、滴管、试管(20mL两支)、天平，dna粗提取和鉴定。
DNA的粗提取与鉴定教案
DNA的粗提取与鉴定教案第一章：DNA的发现与发展1.1 孟德尔与遗传学1.2 肺炎双球菌转化实验1.3 艾弗里体外转化实验1.4 沃森与克里克构建DNA双螺旋结构1.5 核酸的分类与分布第二章：DNA的结构与功能2.1 DNA分子结构的特点2.2 碱基互补配对原则2.3 DNA分子的复制2.4 基因与DNA的关系2.5 基因表达与蛋白质合成第三章：DNA的粗提取3.1 实验原理与步骤3.2 实验材料与试剂3.3 动物细胞的破碎3.4 植物细胞的破碎3.5 DNA的析出与纯化第四章：DNA的鉴定4.1 鉴定原理与方法4.2 实验材料与试剂4.3 DNA的量度与浓度测定4.4 琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA4.5 染色与观察第五章：DNA的应用与意义5.1 基因工程与DNA技术5.2 DNA测序与基因mapping5.3 法医学中的应用5.4 遗传病诊断与治疗5.5 DNA研究的伦理与法律问题第六章：实验操作注意事项6.1 实验操作的安全性6.2 实验材料的保存与处理6.3 实验仪器的使用与维护6.4 实验数据的处理与分析6.5 实验中可能出现的问题及解决方法第七章：DNA粗提取与鉴定实验的拓展7.1 不同生物样本中DNA的提取与鉴定7.2 不同方法对DNA提取效果的比较7.3 实验条件的优化与改进7.4 实验结果的可靠性评价7.5 实验设计的创新与改进第八章：DNA在其他领域的应用8.1 生物多样性研究8.2 考古学中的年代测定8.3 环境监测与污染评估8.4 食品工业中的品质检测8.5 生物制药与疾病治疗第九章：DNA教学资源的整合与利用9.1 教学资源的搜集与筛选9.2 教学素材的整合与设计9.3 教学方法的探索与实践9.4 教学评价与反馈机制9.5 教学研究与学术交流第十章：DNA教学的未来发展10.1 教育信息化的影响10.2 虚拟实验室与远程教学10.3 教学内容的更新与拓展10.4 跨学科教学与综合素质培养10.5 我国DNA教育的发展趋势重点和难点解析一、DNA的发现与发展难点解析：艾弗里体外转化实验是DNA研究领域的重要实验，学生需要理解实验的设计思路、实验过程以及实验结果对DNA研究的影响。
DNA的粗提取与鉴定教案
一、教学目标1. 理解DNA的粗提取与鉴定的基本原理。
2. 学会使用不同的方法对DNA进行粗提取。
3. 学会使用不同的方法对提取的DNA进行鉴定。
二、教学内容1. DNA的粗提取与鉴定的基本原理。
2. 实验材料的选择与处理。
3. DNA的提取与分离方法。
4. DNA的鉴定方法。
5. 实验结果的分析和解释。
三、教学步骤1. 介绍DNA的粗提取与鉴定的基本原理。
2. 讲解实验材料的选择与处理方法。
3. 演示DNA的提取与分离方法。
4. 演示DNA的鉴定方法。
5. 学生进行实验，观察实验结果。
四、教学方法1. 讲授法：讲解DNA的粗提取与鉴定的基本原理。
2. 演示法：演示实验操作和鉴定方法。
3. 实验法：学生进行实验操作，观察实验结果。
五、教学评价1. 学生能够理解DNA的粗提取与鉴定的基本原理。
2. 学生能够正确选择实验材料并进行处理。
3. 学生能够掌握DNA的提取与分离方法。
4. 学生能够掌握DNA的鉴定方法。
5. 学生能够分析和解释实验结果。
六、实验材料的选择与处理1. 实验材料：鱼鳞、鸡血、洋葱表皮等。
2. 材料的处理：将实验材料剪碎，放入研钵中，加入适量的洗涤剂和食盐，充分混合。
七、DNA的提取与分离1. 提取方法：利用洗涤剂和食盐破坏细胞膜，释放DNA，并通过酒精沉淀分离DNA。
2. 分离步骤：将混合物放入离心管中，离心后弃去上清液，加入酒精溶液，静置后弃去上清液，得到DNA沉淀。
八、DNA的鉴定1. 鉴定方法：二苯胺染色法。
2. 鉴定步骤：将提取的DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂，沸水浴加热后观察颜色变化。
九、实验结果的分析和解释1. 分析和解释实验结果：观察DNA提取液的颜色变化，判断DNA 的提取效果。
观察DNA沉淀的形态和数量，判断DNA的分离效果。
观察二苯胺染色后的颜色变化，判断DNA的存在与否。
十、安全与环保1. 安全注意事项：在实验过程中，避免接触眼睛和皮肤，防止吸入有害气体。
高中生物dna的粗提取教案
高中生物dna的粗提取教案
教学目标：
1. 了解DNA的组成和结构
2. 掌握DNA的提取方法
3. 培养实验操作技能和观察分析能力
所需材料：
1. 食盐水溶液
2. 洗洁精
3. 酒精
4. 研钵和研棒
5. 手指
6. 搅拌棒
7. 试管
8. 口罩
9. 手套
实验步骤：
1. 将一个新鲜水果（如番茄、苹果等）切成小块，放入研钵中。
2. 加入适量的食盐水溶液，用研棒捣碎水果，直至水果完全变成泥状。
3. 在泥状混合物中加入几滴洗洁精，用搅拌棒搅拌均匀。
4. 将混合物倒入试管中，加入同等体积的酒精。
5. 轻轻摇晃试管，观察到在试管中形成两层，DNA会从水果混合物中转移到酒精层中。
6. 使用棉签或手指小心捞取DNA团块。
实验注意事项：
1. 实验过程中要佩戴口罩和手套，避免污染。
2. 手指在取DNA团块时要轻柔，避免破坏DNA。
3. 酒精不可倾倒，以免混合均匀。
实验延伸：
1. 可使用不同食材进行提取DNA的实验，比较不同食材的提取效果。
2. 进一步分析DNA的提取物，观察其形态和结构。
教学反思：
本实验通过简单的方法提取DNA，让学生直观了解DNA的存在，并培养实验技能和观察力。
帮助学生更好地理解DNA的组成和结构。
dna的提取与鉴定实验教案
dna的提取与鉴定实验教案教案标题：DNA的提取与鉴定实验教案教案目标：1. 了解DNA的结构和功能；2. 学习DNA提取的基本原理和方法；3. 掌握DNA鉴定实验的步骤和技巧；4. 培养学生的实验设计和科学思维能力。
教学准备：1. 实验材料：苹果、洋葱、盐水、肉汤等含有DNA的食物样本，酒精、洗涤液、盐等实验试剂；2. 实验器材：试管、显微镜、移液管、离心机等实验仪器；3. 实验安全：提醒学生注意实验室安全，使用实验器材时需戴手套和护目镜。
教学步骤：引入：1. 向学生介绍DNA的概念和重要性，解释DNA在生物体内的作用；2. 引发学生对DNA提取和鉴定实验的兴趣，提出问题：“我们如何从食物样本中提取出DNA？如何鉴定提取的DNA是否纯净？”实验步骤：1. 分组让学生准备实验材料和器材；2. 将苹果切碎，加入盐水中搅拌，制备苹果细胞悬浮液；3. 将苹果细胞悬浮液倒入试管中，加入洗涤液，轻轻摇晃，使细胞破裂释放DNA；4. 加入冷酒精，观察DNA从溶液中沉淀出来的过程；5. 使用移液管将DNA沉淀物转移到显微镜片上，加入一滴水后覆盖玻片；6. 使用显微镜观察DNA的形态和结构。
实验讨论：1. 引导学生观察和描述实验结果，讨论DNA的形态和结构；2. 引导学生思考DNA提取实验中各步骤的作用和原理；3. 引导学生思考如何鉴定提取的DNA是否纯净，提出可能的方法和实验设计。
拓展活动：1. 邀请专家或相关领域的研究者进行讲座，介绍DNA提取和鉴定的应用领域；2. 组织学生进行小组讨论，探讨DNA提取和鉴定的实际应用和意义；3. 引导学生进行更复杂的DNA提取和鉴定实验设计，培养其实验设计和科学思维能力。
评估方式：1. 观察学生在实验过程中的操作技巧和实验安全意识；2. 通过学生的实验报告和实验讨论的参与程度评估其对DNA提取和鉴定实验的理解和掌握程度；3. 评估学生在拓展活动中的表现和思考能力。
教学延伸：1. 将DNA提取和鉴定实验应用于其他食物样本或生物样本中，比较不同样本中DNA的提取效果；2. 探究DNA提取实验中不同因素对提取效果的影响，如温度、酒精浓度等；3. 引导学生了解DNA鉴定在法医学、亲子鉴定等领域的应用，并展开相关研究。
DNA的提取与鉴定讲解ppt课件
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4.DNA的再溶解。 用高浓度（2mol/L）的氯化钠溶液再溶解DNA粘稠物。
5.DNA的沉淀和浓缩。
对于除去了蛋白质的DNA的氯化钠溶液，必须再进 一步沉淀和浓缩，常用酒精沉淀法。即往含有Na＋的 DNA溶液，加入体积分数为95%的冷却酒精，混匀后可 以使DNA沉淀、浓缩，形成含杂质较少的DNA丝状物， 悬浮于溶液中。若丝状物较少，可将混合液再放入冰 箱中冷却几分钟即可。浓缩后的DNA丝状物可以用玻棒 （玻棒有吸附DNA的作用）缓缓旋转的方法卷起。
3.DNA的鉴定： 加入二苯胺试剂4mL，用玻棒搅拌使DNA溶解，沸水 浴5min，观察溶液是否出现浅蓝色。
三、实验小结
1.共有“三次过滤，两次析出，七次搅拌”
2.加入“两次蒸馏水，三次NaCl溶液，一次酒精”
四、实验原理拓展介绍。
1.DNA的释放。 DNA主要在鸡血细胞的细胞核内，正常情况下不会释 放出来，蒸馏水对于鸡血细胞是一种低渗液，水分可以 大量进入血细胞，使之胀破，同时加上玻璃棒快速搅拌 的机械作用，加速血细胞的细胞膜和核膜的破裂。但释 放出来的大量DNA与RNA、蛋白质结合在一起，即释放 的不是纯净的DNA，常称为DNA核蛋白。 2.DNA与蛋白质分离。 在高浓度（2mol/L）的氯化钠溶液中，核蛋白易溶解， 析出DNA并溶解在高浓度的氯化钠溶液中 3.DNA的析出与获取。 因为DNA在低浓度（ 0.14mol/L ）的氯化钠溶液中溶解 度小，而蛋白质的在其中的溶解度大。所以在向含DNA 的高浓度的氯化钠溶液中加入大量蒸馏水稀释氯化钠溶 液，从而使DNA溶解度下降，蛋白质溶解度增高。
高中三年级生物实验教案：研究DNA的提取与分析
高中三年级生物实验教案：研究DNA的提取与分析研究DNA的提取与分析引言：DNA是构成生物遗传信息的基础单位，对于理解生物的遗传机制以及进一步探索基因工程和生物科学发展至关重要。
高中三年级生物课程中，教授学生如何提取和分析DNA是一个重要环节。
本文将介绍一份高中三年级生物实验教案，旨在帮助学生了解DNA的特性、提取和分析DNA的基本原理和方法以及实验操作步骤。
一、DNA的特性和结构1.1 DNA的特性DNA（脱氧核糖核酸）是由磷酸、核糖和碱基组成的巨大分子，存在于所有的细胞中。
它在生物体内起着传递和保存遗传信息的重要作用。
1.2 DNA的结构DNA由两条互补的链组成，这些链通过碱基对之间的氢键相互连接。
碱基对包括腺嘌呤（A）与胸腺嘧啶（T），以及鸟嘌呤（G）与胞嘧啶（C）。
这种特定的碱基配对决定了DNA的遗传信息。
二、DNA的提取实验2.1 实验材料和设备- 酒精（乙醇）- 盐水- 洗涤剂- 蛋白酶- 滤纸或纱布- 试管- 离心机2.2 实验步骤第一步：收集实验样本从某种水果（如草莓或菠萝）中收集约10克的组织样品。
这些水果富含DNA，并且在提取过程中能够产生足够的DNA量。
第二步：细胞破碎将水果样品放入一个一次性塑料袋中，并用搅拌棒将其压碎。
这样可以破坏细胞壁，释放DNA。
第三步：加入提取液将一定量的盐水、洗涤剂和蛋白酶加入塑料袋中，轻轻地摇晃袋子，使其混合均匀。
这些试剂将有助于分解蛋白质并使DNA分离出来。
第四步：滤去固体物质将混合液倒入一个试管或容器中，用滤纸或纱布过滤，去除多余的固体物质。
获得的液体中富含DNA。
第五步：沉淀DNA将提取液放入离心机中，以高速离心约5分钟。
离心后，可见到形成粘稠状的DNA沉淀。
2.3 实验结果分析提取的DNA可以用肉眼观察到，通常呈现为白色的线状物质。
在实验中，其形态可能因实验方法和样本的不同而有所变化。
三、DNA的分析实验3.1 准备工作- PCR试剂盒- 热循环仪- DNA模板- 引物- 标准DNA分子量标记物- PCR扩增仪器3.2 实验步骤第一步：制备PCR反应体系根据PCR试剂盒中的指导书，准确称取所需试剂并加入PCR反应管中，如DNA模板、引物和酶。
高中三年级生物实验教案：研究DNA的提取与分析 (2)
高中三年级生物实验教案：研究DNA的提取与分析研究DNA的提取与分析引言：生物实验是高中生物课程的重要组成部分，通过实践操作培养学生的观察能力、实验设计和数据分析能力。
在高中三年级的生物实验中，研究DNA的提取与分析是一项有趣且具有教育意义的实验。
DNA是所有生命体共有的基因遗传物质，理解DNA结构和功能对于认识生命现象非常重要。
一、实验目的了解DNA的结构和特点，并掌握基本提取和分析技术。
二、实验原理1. DNA结构DNA（脱氧核糖核酸）是由许多核苷酸单元连接而成，包含磷酸基团、糖基以及四种碱基（腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶）。
2. DNA提取原理利用细胞溶解方法和盐溶液等，使细胞内蛋白质被去除，从而使DNA被提取出来。
3. 分子量测定原理通过琼脂糖凝胶电泳技术可以将不同分子量的DNA片段分离出来，用以测定目标DNA的大小。
三、实验步骤1. 细胞溶解将采集的新鲜植物（如洋葱等）或动物细胞放入试管中加入细胞溶解缓冲液，与焦磷酸热处理。
2. DNA提取加入无色农药、酒精和盐溶液后，将混合液过滤收集上清液。
3. 染色体链断裂使用牙签轻轻搅拌上清液进行染色体链断裂。
4. 前处理通过一系列的前处理步骤来去除杂质并提纯DNA溶液。
5. 分子量测定在琼脂糖凝胶上电泳，使用紫外线透射仪观察并记录目标DNA的分离结果。
四、实验结果与分析1. DNA提取效果观察根据实验结果可观察到样品发生变化，颜色由透明变为白色絮状物。
说明DNA成功被提取出来并呈棉絮状。
2. DNA分子量测定结果分析根据琼脂糖凝胶电泳结果，可以测定目标DNA片段的分子量大小。
不同的DNA片段会在电场中以不同的速率迁移，形成特定的条带图案。
五、实验注意事项1. 操作要细心，注意实验室安全。
2. 使用工具时要注意正确使用和清洁。
3. 实验过程中要避免污染样品。
六、教学反思与展望这个实验有利于提高学生对DNA结构和功能的理解，并培养学生的实践操作能力和科学素养。
中学生物：DNA抽提实验教案
中学生物：DNA抽提实验教案教案名称：中学生物：DNA抽提实验教案授课对象：中学生（高一、高二）教学目标：1. 了解DNA的组成结构和特点，并了解DNA的抽提方法；2. 掌握DNA抽提实验的步骤和操作技能，能够进行DNA的抽提实验；3. 培养学生的实验设计能力和科学实验的思维方式；4. 培养学生的实验观察能力和实验数据分析能力。
教学内容：1. DNA的组成结构和特点；2. DNA的抽提方法；3. DNA抽提实验的步骤和操作技能。
教学重难点：1. DNA的抽提方法；2. DNA抽提实验的步骤和操作技能。
教学方法：1. 讲授法；2. 实验演示法；3. 实验操作法。
教学过程：一、导入（10分钟）1. 引出DNA的重要性及实验目的；2. 提问：“你们知道DNA在哪些生物体中存在吗？它的存在对生物体有何重要性？”二、讲授（20分钟）1. DNA的组成结构和特点：DNA的组成结构包括两条互补的链，每条链上都有含氮碱基，包括腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）、胸腺嘧啶（T）和胞嘧啶（C）。
DNA的特点包括双螺旋结构、互补配对、遗传信息的载体和稳定性强等。
2. DNA的抽提方法：主要有机械破碎法、化学分离法、热水浴法和冷冻法等。
三、实验操作（90分钟）1. 实验步骤：（1）将已无菌的番茄切成小块，放入绞肉机中绞碎；（2）将绞碎后的番茄均匀地放在滤纸上，用200ml NaCl溶液润湿，加入2ml草酸，充分搅拌；（3）将混合液用滤纸过滤至50ml锥形瓶中，加入等体积的异丙醇，离心10分钟，将上清液倒掉；（4）加入20ml 70%的乙醇，晃动均匀，倒掉上清液；（5）另备一锥形瓶，加入5ml去离子水，将获得的DNA溶液加入其中，缓慢地滴加浓HCl溶液至溶液呈现米酸沉淀，离心5分钟，将上清液倒掉；（6）用去离子水洗涤沉淀，再次离心，倒掉上清液，取出DNA。
2. 实验注意事项：（1）实验过程中要严格注意卫生和安全；（2）实验仪器、器材、试剂等务必做好准备工作；（3）操作过程中必须正确使用绞肉机、滤纸、离心机等工具和仪器。
dna提取实验说课
dna提取实验说课DNA提取实验说课一、教学目标通过本实验的学习，使学生了解DNA的提取方法以及DNA在生物体中的重要作用，培养学生动手操作和观察实验现象的能力，培养学生的科学思维和实验设计能力。
二、教学重点与难点1. 教学重点：（1）了解DNA提取的原理和方法；（2）掌握DNA提取实验的步骤和操作技巧；（3）观察并分析实验现象。
2. 教学难点：（1）理解DNA提取的原理；（2）掌握实验中使用的试剂和仪器；（3）观察并分析实验现象。
三、教学准备1. 实验器材：试管、移液管、离心机、恒温水浴等。
2. 实验试剂：细胞裂解液、蛋白酶K、异丙醇等。
四、教学过程第一步：引入老师可以通过问问题或展示图片等方式引入本次实验。
例如：“同学们，你们知道什么是DNA吗？它在我们身体中起着什么样的作用呢？今天我们将进行一项关于DNA提取的实验，来探索DNA的奥秘。
”第二步：实验原理1. DNA提取的原理：DNA提取是指将生物样本中的DNA分离出来，使其成为单独可见的物质。
DNA提取的基本原理是利用细胞膜和核膜的特性，通过细胞裂解、蛋白酶消化和异丙醇沉淀等步骤，将DNA从其他组分中分离出来。
2. DNA在生物体中的作用：DNA是生物体遗传信息的载体，它负责传递和保存遗传信息。
通过基因表达，DNA决定了生物体的形态、功能和遗传特征。
第三步：实验步骤1. 实验前准备：（1）准备好所需器材和试剂；（2）将试管标号，并准备好实验记录表。
2. 细胞裂解：（1）取一只水果（如香蕉），切成小块放入试管中；（2）加入适量的细胞裂解液，并轻轻摇晃试管使细胞充分破裂。
3. 蛋白酶处理：（1）加入适量的蛋白酶K，使其消化掉样本中的蛋白质；（2）将试管放入恒温水浴中，保持温度在50℃左右，反应一段时间。
4. DNA沉淀：（1）加入等体积的异丙醇，轻轻摇晃试管使DNA从溶液中沉淀出来；（2）使用移液管将DNA沉淀物转移到另一个试管中。
5. 观察实验现象：观察DNA沉淀物的形状和颜色，并记录在实验记录表中。
[精品]DNA的粗提取与鉴定实验教案——朱汉墨.doc
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DNA的粗提取与鉴定教案执教者：朱汉墨【教学目标】1、知识目标理解DNA的理化性质及根据其理化特性提取鉴定的原理2、能力目标（1）初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法（2）在对实验原理、步骤的理解和分析过程中发展学生的科学思维。
（3）熟悉粗提取生物大分子的的一•般性方法3、情感、态度、价值观在实验过程中培养学生严谨细致、实事求是的科学态度【教学重难点】1、教学重点DNA的粗提取与鉴定方法及其相关原理2、教学难点DNA的粗提取与鉴定方法及其相关原理【教学流程】教学流程教学阶段教师活动学生活动设计意图时间引入在高中生物课堂上我们经常会提到DNA,我想请大家说说，在你们心中，对DNA到底有怎样的认识？都说的很好，但是这些都只是书本上给出的文字性的描述，就像水中花镜中月一样虚无缥缈。
唯••显得具体点的就是在前面的试验中我们亲自动手做的DNA双螺旋结构模型，但那也只是•个模型。
但是在本次试软中，学生发言：最主要的遗传物质、双螺旋结构……提出问题让学生思考，回忆以前所学理论知识，引发我们将会见到真实的DNA,我们要亲自动手提取出洋葱细胞内的DNA,并做鉴定。
即DNA 的粗提取与鉴定。
学生的学习兴趣DNA的粗提取与鉴定实验原理我们先看实验原理1、十二烷基磺峻钠破坏细胞膜。
2、D NA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。
也就是旁边小黑板上所展示的溶解度曲线，我想请一位同学用你自己的语言给我们描述一下图中所反应的信息。
（当NaCl的物质的量浓度为0.14mol / L时,DNA的溶解度最低。
）利用这一原理，可以使溶解在NaCl 溶液中的DNA析出。
3、DNA不溶于95%冷酒精溶液，但是细胞「1'的某些蛋白质等杂质却可以溶于酒精溶液。
利用这一原理，对DNA进-一步纯化。
4、DXA遇到二苯胺在沸水浴中加热会显蓝色，因此，我们可以用二苯胺鉴定DNA。
认真听讲让学生明白整个实验的基本原理实验材料的选择本次试验我们所选取的材料是大家都很熟悉的洋葱。
提取和鉴定DNA-苏教版必修2遗传与进化教案
提取和鉴定DNA-苏教版必修2 遗传与进化教案一、前置知识在进行DNA提取和鉴定之前，需要学生先掌握以下知识：1.基本的遗传学知识，如DNA的结构和功能，基因和等位基因的概念、遗传方式等；2.DNA提取的概念和原理；3.PCR技术的基本原理和步骤；4.凝胶电泳的原理和步骤；5.DNA鉴定的常用方法。
二、教学目标1.理解DNA提取的原理和步骤，并掌握操作技能；2.掌握PCR技术的基本原理和操作方法，能够进行基因扩增；3.理解凝胶电泳的原理和步骤，掌握电泳技术的操作方法；4.了解DNA鉴定的基本原理和方法。
三、教学重点和难点1.鉴定DNA的可行性和准确性；2.鉴定结果的分析和解读。
四、教学内容和方法1. DNA提取和PCR扩增（1）DNA提取1.收集样本：可采用人类口腔、血液等样本，或从其他动物或植物中收集其组织样本。
2.细胞破碎：利用化学物质和物理力学方法破坏细胞壁和膜，释放细胞内部DNA。
3.分离DNA：通过添加化学试剂，使DNA与其他细胞成分分离开来。
4.溶解DNA：将DNA溶在合适的载体中，以便进行后续的PCR扩增。
（2）PCR技术1.热循环：通过不断变换温度使DNA链变性、退火和延伸，进行DNA片段的扩增。
2.配对引物：引物的选择和设计很关键，必须与目标基因序列互补，以保证PCR反应的特异性。
3.结果分析：通过凝胶电泳实验可查看扩增产物，判断扩增是否成功，并确定扩增产物的大小。
2. 凝胶电泳和DNA鉴定（1）凝胶电泳1.准备、制作凝胶：利用琼脂糖等化学试剂制备凝胶。
2.加载扩增产物：将扩增产物加载到凝胶槽中，进行电泳分离。
3.分析结果：通过凝胶染色和照相测量等方式，分析碎片的大小和数量。
（2）DNA鉴定1.RFLP法：通过结合酶切反应和凝胶电泳技术，分析基因型并进行鉴定。
2.PCR-RFLP法：利用PCR反应扩增需要检测的DNA片段，再通过酶切反应和凝胶电泳分析。
3.STR分型：通过PCR扩增短串联重复序列（STR）的方法，通过凝胶电泳分析，得到个体之间的差异，并进行鉴定。
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四、DNA提取的基本步骤
1、核酸的释放：
破裂细胞
释放核酸（机械法与非机械法）
2、核酸的分离与纯化
3、核酸的浓缩、沉淀与洗涤
4、DNA鉴定：浓度鉴定 纯度鉴定 完整性鉴定
五、DNA提取试验中常遇到的问题
基因组DNA收率较低或无基因组DNA
样本材料太少 细胞破裂不够充分，DNA释放不完全 离心力偏小 两相分离不完全… …
• 没有严格要求
▪ 常规PCR
基因组提取方法
溶液盐析法：无需酚氯仿，样本量灵活可变，得率高 硅胶膜吸附法：利用硅胶膜特异吸附核酸的原理来纯化核酸 磁珠法：独特包埋的磁珠，在一定条件下对核酸具有很强的亲和力，而 当条件改变时，磁珠释放吸附的核酸，能够达到快速分离纯化核酸的目 的。 传统酚氯仿法：传统方法，抽提时间长，成本低。但酚氯仿有毒，危害 身体健康。
样本保存和前处理－血清/血浆
保存 现在很多科研者使用血清/血浆提取游离核酸进行研究，例如：肿瘤研究。 分离得到的血清/血浆放置-70℃保存。尽量避免样本反复冻融。 样本前处理 1. 冻存的血清/血浆使用前溶解应在37℃水浴溶解，轻柔颠倒混匀。 2. 血清/血浆核酸提取时无需红细胞裂解。 3. 只需100-200ul样本，基本能满足下游常规PCR或荧光定量PCR检测。
血浆和血清是检测释放入血的游离核酸最主要的 标本来源，用来检测病毒、细菌，以及肿瘤细胞 等等释放出来的游离核酸和蛋白质产物，在临床 上被广泛应用于病原微生物和肿瘤标志基因的检 测.
三、DNA的收率
样本类型 20mg肝脏组织
100mg豆苗 100l全血 2106培养细胞
基因组DNA收率 8 g 10 g 2 g 10 g
样本保存和前处理－口拭子/漱口水
保存 口拭子：干燥后室温保存 漱口水：4℃保存或离心得到沉淀-20℃或-70℃保存 样本前处理 1. 拭子将拭子棉头剪入到离心管里，加入缓冲液直接进行提取。 2. 有些拭子的棉头剪不下来，可以将拭子在生理盐水里漂洗几次，离心 得到沉淀再进行核酸提取。 3. 漱口水先进行离心得到沉淀再进行核酸提取。
样本保存和前处理－非抗凝血
保存 非抗凝血即血凝块。-20℃保存一个月；-70℃长期保存。尽可能保证样本 不经过反复冻融。 样本前处理 1. 冻存的血凝块使用前应在37℃水浴溶解，轻柔颠倒混匀。 2. 血凝块取出后先采取机械破碎的方法（例如：放入无粉橡胶手套中捏 碎或匀浆）将血凝块破碎，然后再根据自己的实验取适量样本。
样本保存和前处理－微量血液/干血点/羊水/胸水
保存 微量血液：抗凝血液-20或-70℃保存； 干血点：干燥后室温或4℃保存； 羊水： -20或-70℃保存。 样本前处理 1. 微量血液处理同抗凝血液，不同之处是无需进行红细胞裂解步骤。 2. 干血点加入缓冲液直接进行提取。 3. 羊水/胸水提取时先离心得到沉淀，再进行裂解提取核酸。
样本保存和前处理－抗凝血液
保存 柠檬酸、EDTA、肝素三种抗凝剂均可使用。但肝素对酶反应有可能起阻害 作用,采血时如没有特殊要求,请使用柠檬酸或EDTA处理血样。 加入抗凝剂混匀后2-8℃保存一周；－20℃保存一个月；－70℃长期保存。 尽可能保证样本不经过反复冻融。 样本前处理 1. 冻存的抗凝血液使用前溶解应在37℃水浴迅速溶解。 2. 抗凝血提取前需要彻底混匀后再吸取实验所需的体积。
DNA提取原则1：DNA片段长度
DNA Length
严格要求片段长度:▪ 构建 ▪ PFGE(脉冲场凝胶电泳)没有严格要求:
▪ PCR ▪ Southern Blots ▪ RFLP
DNA提取原则2：DNA产物纯度
• 严格要求产物uthern杂交 ▪ 荧光定量PCR ▪ SNP Microarray ▪ CGH (比较基因组杂交)
DNA提取前样本采集、预处理和保存：
（一）全血 1.抗凝剂
EDTA-Na2 或枸橼酸钠 作为抗凝剂 不宜使用肝素
-80℃ 4℃ 室温
抗凝剂处理血
肝素 柠檬酸* EDTA*
保存2个月，第10天收率90%
第四天收率90%
第10天提取效 果差
提取效果差
第十天收率85% 第四天收率90%
第十天提取效果差
（二）血浆和血清
DNA提取和制备解读
二、样本来源：
理论上所有有核真核细胞、细菌、病毒都 可以提取DNA
样本选择取决于试验目的 全血是基因组提取最常见的样本
血清、血浆、外周血有核细胞、痰液、体 液、棉拭子采集的各种分泌物、组织（包 括骨髓）和羊水等都是分子诊断的检验材 料，其中全血、血浆（血清）标本占分子 诊断的60%以上
血凝块前期破碎程度越高，提取基因组就越容易！
样本保存和前处理－白膜层
保存 全血分离得到的白膜层放置-20℃或-70℃长期保存。尽可能保证样本不经 过反复冻融。 样本前处理 1. 白膜层是将全血离心取中间层所得。白细胞则是用红细胞裂解液裂解 红细胞后得到的沉淀。 2. 冻存的白膜层使用前应在37℃水浴溶解，轻柔颠倒混匀。 3. 虽然得到的是白膜层，但是会有少量红细胞存在，所以红细胞裂解液 还是必要的，但用量减半。 4. 采用白膜层提取核酸时，所用到的提取溶液体积需按照全血体积进行 操作。即：1ml全血得到的白膜层提取时需要加入提取1ml全血的试剂量。
基因组提取流程
溶液法（盐析法） 样本裂解 纯化去蛋白 沉淀核酸 洗涤去盐 溶解DNA沉淀
吸附柱法 样本裂解 加入吸附柱 缓冲液漂洗 DNA洗脱收集
红细胞裂解
哺乳动物血液的红细胞中没有细胞核且核酸酶含量丰富，所以裂解红细胞 对核酸提取非常重要。红细胞裂解有两种方式：
采用红细胞裂解液进行裂解（通常红细胞裂解液按照3倍全血体积加 入进行裂解). 采用细胞裂解液进行裂解（TIANGEN的细胞裂解液CL是按照2.5倍全血 体积），细胞裂解液将红细胞裂解的同时可以裂解白细胞，得到的为 细胞核沉淀，更方便基因组DNA的提取。
DNA降解的原因 样本不够新鲜，采集材料过陈旧 样本本身存在大量DNA酶
提取DNA的生物活性差的原因？ 提取的基因组DNA盐浓度过高 基因组DNA中乙醇未清除净 基因组DNA中可能存在其他抑制因素
提取基因组DNA，有时加入蔗糖的原因 加入多糖，保护DNA长度
不可忽视的细节
—血液基因组提取
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