G试验和GM试验概述
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早期诊断诊断侵袭性真菌感染(如侵袭性念珠菌病、侵袭
性曲霉菌病、肺孢子菌肺炎等)的方法之一。 适用于除隐球菌和接合菌(毛霉菌)外的所有深部真菌感 染的,但不能确定菌种。
1.3 血清G试验假阳性的情况
使用纤维素膜进行血透,标本接触过纱布或其他含有葡聚糖的材料; 静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品; 标本中存在脂多糖或处理标本时存在污染;
2.4 GM试验假阴性的情况
释放入血循环中的曲霉GM并不持续存在而是会很快清除; 以前使用了抗真菌药物;
病情不严重;
非粒细胞缺乏的患者。
2.5 血清GM试验的优势和局限
优势:
鉴别曲霉菌侵袭性感染与定植;
早于临床症状和影像学异常1周; GM诊断侵袭性曲霉感染的敏感度高于G试验;
使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦;
新生儿和儿童 双歧杆菌定植、 血液透析;
食用乳制品 阿莫西林/头孢哌酮; 不仅血液,灌洗液亦可出现假阳性
自身免疫性肝炎等; 食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物。 造血干细胞移植者预处理阶段2周中; 放化疗损伤肠粘膜屏障食物种GM入血; 巨细胞病毒、铜绿感染;
使用多糖类抗癌药物(含葡聚糖类似物);
放化疗造成粘膜损伤致食物中葡聚糖或定植念珠菌经胃肠道入血; 真菌为原料制成的抗生素:多粘菌素、厄他培能、头孢噻肟/吡肟、磺胺 等。 某些细菌感染:大肠杆菌、铜绿假单胞、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯、 阴沟肠杆菌、科氏G球菌、伯克霍尔德(细菌浓度过高交叉反应)
血清中存在时间较短,可作为疗效监测。
局限: 不能区分曲霉菌的种类。
G试验和GM试验的联合使用
种属 念珠菌属 镰刀菌属 隐球菌属 曲霉菌属 青霉/拟青霉 接合菌纲
G试验 + + - + + -
GM试验 - - + + + -
同时测定G试验和GM试验有助于早期诊断侵袭性真菌感染
三、肺泡灌洗液(BAL)的GM试验
血清G+GM试验
肺泡灌洗液GM试验
主 要 内 容
一、血清G试验
二、血清GM试验 三、肺泡灌洗液GM试验
一、血清G试验
1. 3. 4. 5.
血清G试验原理 血清G试验假阳性的情况 血清G试验假阴性的情况 血清G试验的优势和局限
2. 血清G试验的临床价值
1.1 血清G试验原理
G试验检测的是真菌的细胞
侵袭性肺部真菌感染重要的检测方法;
比血清GM试验具有更高的敏感性; 结果的判定尚无定论。
(BALF GM 1.0为阳性阈值时敏感度97% 特异度93% ,阳性预计值68% ,阴性预计值99%)
BALF-GM 取材要求
1.未使用抗生素、未行抗菌治疗; 2.在活检、刷检前灌洗; 3.纤支镜需嵌入到(怀疑)致病肺段或亚段支气管。 4.灌洗总量50-150ml,每次25-50ml; 5.负压小于100mmHg(吸引时支气管腔不塌陷为宜) 6.每次回收量应不低于灌入量的5% (回收率以≥30%为宜,40-60%最佳)。 7.取首次灌洗回收液体10ml。 8.低温保存,及时送检。 9.使用无热源真空管(BD红头管)。
半乳甘露聚糖是最早释放的抗原; 检测法是一种微孔板双抗体夹心法。
2.2 血清GM试验的临床价值
曲菌定植时极少释放,鉴别侵袭与定植; GM释放量与菌量成正比,可以反映感染程度; 连续检测GM可作为治疗疗效的监测(半衰期短); 在造血干细胞移植患者中的诊断敏感性高;
2.3 血清GM试验假阳性的情况
二、血清GM试验
1. 3. 4. 5.
血清GM试验原理 血清GM试验假阳性的情况 血清GM试验假阴性的情况 血清GM试验的优势和局限
2. 血清GM试验的临床价值
2.1 血清GM试验的原理
检测半乳甘露聚糖(glactomannan,GM),主要适于侵袭性曲霉菌感 染的早期诊断;
半乳甘露聚糖广泛存在于曲霉和青霉细胞壁,细胞壁表面菌丝生长时,
壁成分---1,3-β -D-葡聚
糖(BG),经吞噬细胞处 理释放入血或体液。
细胞核
-(1,3)-D-葡聚糖
(1-3)-D-Glucan
定植时BG很少释放入血, 因此可有助于鉴别真菌侵 袭与定植。
凝固酶原
活化G因子 凝固酶
鲎变形细胞裂解 物的G因子
凝固蛋白原
凝固蛋白(凝胶)
1.2 血清G试验的临床价值
1.4 血清G试验假阴性的情况
隐球菌具有厚壁包膜,生长缓慢,导致假阴性; 局灶性曲菌病,BG很少释放入血;
抗真菌药物的使用(卡泊芬净:非竞争抑制BG合成)。
1.5 血清G试验的优势和局限
优势:
鉴别侵袭性感染与定植;
不受机体免疫状态影响,早于临床诊断平均4天。
局限:
不能区分真菌的种类。
百度文库 小结
熟悉G+GM试验假阳性结果可能原因;
熟悉肺泡灌洗液GM取材原则。
性曲霉菌病、肺孢子菌肺炎等)的方法之一。 适用于除隐球菌和接合菌(毛霉菌)外的所有深部真菌感 染的,但不能确定菌种。
1.3 血清G试验假阳性的情况
使用纤维素膜进行血透,标本接触过纱布或其他含有葡聚糖的材料; 静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品; 标本中存在脂多糖或处理标本时存在污染;
2.4 GM试验假阴性的情况
释放入血循环中的曲霉GM并不持续存在而是会很快清除; 以前使用了抗真菌药物;
病情不严重;
非粒细胞缺乏的患者。
2.5 血清GM试验的优势和局限
优势:
鉴别曲霉菌侵袭性感染与定植;
早于临床症状和影像学异常1周; GM诊断侵袭性曲霉感染的敏感度高于G试验;
使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦;
新生儿和儿童 双歧杆菌定植、 血液透析;
食用乳制品 阿莫西林/头孢哌酮; 不仅血液,灌洗液亦可出现假阳性
自身免疫性肝炎等; 食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物。 造血干细胞移植者预处理阶段2周中; 放化疗损伤肠粘膜屏障食物种GM入血; 巨细胞病毒、铜绿感染;
使用多糖类抗癌药物(含葡聚糖类似物);
放化疗造成粘膜损伤致食物中葡聚糖或定植念珠菌经胃肠道入血; 真菌为原料制成的抗生素:多粘菌素、厄他培能、头孢噻肟/吡肟、磺胺 等。 某些细菌感染:大肠杆菌、铜绿假单胞、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯、 阴沟肠杆菌、科氏G球菌、伯克霍尔德(细菌浓度过高交叉反应)
血清中存在时间较短,可作为疗效监测。
局限: 不能区分曲霉菌的种类。
G试验和GM试验的联合使用
种属 念珠菌属 镰刀菌属 隐球菌属 曲霉菌属 青霉/拟青霉 接合菌纲
G试验 + + - + + -
GM试验 - - + + + -
同时测定G试验和GM试验有助于早期诊断侵袭性真菌感染
三、肺泡灌洗液(BAL)的GM试验
血清G+GM试验
肺泡灌洗液GM试验
主 要 内 容
一、血清G试验
二、血清GM试验 三、肺泡灌洗液GM试验
一、血清G试验
1. 3. 4. 5.
血清G试验原理 血清G试验假阳性的情况 血清G试验假阴性的情况 血清G试验的优势和局限
2. 血清G试验的临床价值
1.1 血清G试验原理
G试验检测的是真菌的细胞
侵袭性肺部真菌感染重要的检测方法;
比血清GM试验具有更高的敏感性; 结果的判定尚无定论。
(BALF GM 1.0为阳性阈值时敏感度97% 特异度93% ,阳性预计值68% ,阴性预计值99%)
BALF-GM 取材要求
1.未使用抗生素、未行抗菌治疗; 2.在活检、刷检前灌洗; 3.纤支镜需嵌入到(怀疑)致病肺段或亚段支气管。 4.灌洗总量50-150ml,每次25-50ml; 5.负压小于100mmHg(吸引时支气管腔不塌陷为宜) 6.每次回收量应不低于灌入量的5% (回收率以≥30%为宜,40-60%最佳)。 7.取首次灌洗回收液体10ml。 8.低温保存,及时送检。 9.使用无热源真空管(BD红头管)。
半乳甘露聚糖是最早释放的抗原; 检测法是一种微孔板双抗体夹心法。
2.2 血清GM试验的临床价值
曲菌定植时极少释放,鉴别侵袭与定植; GM释放量与菌量成正比,可以反映感染程度; 连续检测GM可作为治疗疗效的监测(半衰期短); 在造血干细胞移植患者中的诊断敏感性高;
2.3 血清GM试验假阳性的情况
二、血清GM试验
1. 3. 4. 5.
血清GM试验原理 血清GM试验假阳性的情况 血清GM试验假阴性的情况 血清GM试验的优势和局限
2. 血清GM试验的临床价值
2.1 血清GM试验的原理
检测半乳甘露聚糖(glactomannan,GM),主要适于侵袭性曲霉菌感 染的早期诊断;
半乳甘露聚糖广泛存在于曲霉和青霉细胞壁,细胞壁表面菌丝生长时,
壁成分---1,3-β -D-葡聚
糖(BG),经吞噬细胞处 理释放入血或体液。
细胞核
-(1,3)-D-葡聚糖
(1-3)-D-Glucan
定植时BG很少释放入血, 因此可有助于鉴别真菌侵 袭与定植。
凝固酶原
活化G因子 凝固酶
鲎变形细胞裂解 物的G因子
凝固蛋白原
凝固蛋白(凝胶)
1.2 血清G试验的临床价值
1.4 血清G试验假阴性的情况
隐球菌具有厚壁包膜,生长缓慢,导致假阴性; 局灶性曲菌病,BG很少释放入血;
抗真菌药物的使用(卡泊芬净:非竞争抑制BG合成)。
1.5 血清G试验的优势和局限
优势:
鉴别侵袭性感染与定植;
不受机体免疫状态影响,早于临床诊断平均4天。
局限:
不能区分真菌的种类。
百度文库 小结
熟悉G+GM试验假阳性结果可能原因;
熟悉肺泡灌洗液GM取材原则。