真菌镜检的实验室操作共20页文档
真菌检验
• 掌握白假丝酵母菌的鉴定
二、实验器材和试剂
• • • • 菌种：白假丝酵母菌 培养基：沙氏培养基，血琼脂 试剂：革兰染液， 其他：载玻片、小试管、 温箱等。
1.分离培养、菌落检查：将白假丝酵母菌和接种于 沙氏平板和血平板上，室温（ 25 ℃ 左右）培养后 观察其菌落特征。白假丝酵母菌的菌落均为酵母 型，表面光滑湿润．边缘整齐，灰白色或奶酪色。
2.显微镜检查：取白假丝酵母菌培养物制片， 经革兰染色，镜下观察其芽生孢子及是否有 假菌丝
3.芽管形成试验：将假丝酵母菌接种于0.5ml人或动 物血清中，37℃孵育1.5-4h，显微镜观察有无芽管形 成。白假丝酵母菌可由孢子长出短小的芽管。
五、实验结果
• 记录所观察到的菌落形态、染色情况 及相关试验结果。 • 完成实验报告
请确保油镜头擦拭干净！ 请安排同学留下值日
真菌鉴定操作方法包括哪些
真菌鉴定操作方法包括哪些
真菌鉴定操作方法包括以下几个步骤：
1. 样品收集：从被疑为真菌感染的环境、病患或植物体上采集样品，如组织块、培养物、孢子等。
2. 处理样品：根据实验要求，对采集的样品进行预处理，如切片、培养等。
3. 形态学观察：使用显微镜对样品进行观察，包括颜色、形状、大小、壁厚、孢子结构等特征的描述。
4. 细胞学观察：通过染色技术，如涂片染色、孢子培养等，观察真菌细胞的形态特征，如核型、核仁数量、细胞器等。
5. 生理生化特性检测：通过一系列生理生化特性检测，如生长速度、生长温度范围、菌落颜色、碳源利用等，进一步确定真菌属或种的分类位置。
6. 分子生物学检测：采用PCR、DNA测序等分子生物学手段，对样品中真菌所含的特定基因进行放大和分析，以确定真菌的种属和亲缘关系。
7. 地理分布分析：结合分布地理位置的信息和已有的真菌数据库，比对结果，进一步确定真菌的物种分类。
8. 结果分析与鉴定：根据所得的观察数据和检测结果，对真菌进行分类鉴定，并确认其属、种等分类阶元。
需要注意的是，这些步骤可以根据具体实验目的和所涉及的真菌种类进行调整和补充，适用的方法可能会有所差异。
皮肤真菌菌丝实验报告
一、实验目的1. 掌握皮肤真菌菌丝的采集和分离方法。
2. 学习观察和识别皮肤真菌菌丝的特征。
3. 了解皮肤真菌菌丝的培养和鉴定方法。
二、实验原理皮肤真菌是引起人类皮肤病的常见病原体，其菌丝生长迅速，易于培养。
本实验通过采集皮肤样本，分离出真菌菌丝，并对其进行培养和观察，以鉴定皮肤真菌种类。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 皮肤真菌菌丝样本- 无菌棉签- 无菌培养皿- 无菌生理盐水- 碱性复红染液- 20%KOH溶液- 镜检设备2. 实验仪器：- 生物显微镜- 高压蒸汽灭菌器- 温度计- 烧杯- 玻璃棒- 滴管四、实验步骤1. 采集皮肤样本：用无菌棉签蘸取20%KOH溶液，轻轻涂抹于皮肤患处，采集样本。
2. 分离真菌菌丝：将采集到的皮肤样本放入无菌生理盐水中，轻轻搅拌，使菌丝从皮肤组织中分离出来。
3. 制备菌丝悬液：将分离出的菌丝悬液用无菌生理盐水稀释，制成10^-2、10^-4、10^-6等不同浓度的菌丝悬液。
4. 接种培养：将不同浓度的菌丝悬液分别接种于无菌培养皿中，放入37℃恒温箱中培养。
5. 观察和鉴定：在培养过程中，观察菌落生长情况，记录菌落形态、颜色、质地等特征。
用碱性复红染液染色，镜检菌丝结构。
6. 结果分析：根据菌落特征和菌丝结构，鉴定皮肤真菌种类。
五、实验结果1. 菌落特征：- 菌落形态：圆形、边缘整齐、表面光滑- 菌落颜色：白色、灰白色、粉红色等- 菌落质地：软、硬、膜状等2. 菌丝结构：- 菌丝粗细：较细、中等粗细、较粗- 菌丝分支：单分支、多分支- 菌丝分隔：无分隔、分隔明显根据菌落特征和菌丝结构，鉴定出皮肤真菌为白色念珠菌。
六、实验讨论1. 本实验成功分离和鉴定出皮肤真菌，说明实验操作规范，实验材料合格。
2. 在实验过程中，要注意无菌操作，避免污染。
3. 观察和鉴定皮肤真菌菌丝时，要注意菌落特征和菌丝结构，以准确鉴定真菌种类。
4. 皮肤真菌感染是一种常见的皮肤病，了解其菌丝特征和培养方法，有助于临床诊断和治疗。
真菌检测的质量控制的流程
真菌检测的质量控制的流程质量控制是任何实验室工作中至关重要的一环，对于真菌检测也不例外。
本文将详细介绍真菌检测的质量控制流程，包括样品准备、实验操作、数据分析和结果报告等方面。
一、样品准备1. 样品收集：根据检测要求，从不同来源收集真菌样品，例如土壤、空气、水体等。
确保样品采集的随机性和代表性。
2. 样品保存：将样品储存于适当的容器中，并按照规定的温度和湿度条件保存。
确保样品在运输和储存过程中不受污染和变质。
二、实验操作1. 实验室环境控制：确保实验室环境符合标准要求，包括温度、湿度、洁净度等方面。
避免外部污染对实验结果的影响。
2. 杂交试剂和仪器校准：使用经过验证的试剂和校准过的仪器进行实验操作，以确保结果的准确性和可重复性。
3. 样品处理：按照标准操作程序处理样品，包括样品的预处理、提取、纯化等步骤。
确保样品处理的一致性和高效性。
4. PCR扩增：采用特定引物进行PCR扩增，确保扩增反应的特异性和灵敏度。
同时设置阴性对照和阳性对照，验证扩增反应的可靠性。
5. 凝胶电泳：将PCR产物进行凝胶电泳分析，根据目标基因的大小和特异性，判断样品中是否存在目标真菌。
同时使用分子量标准品确定PCR产物的大小。
6. 数据记录：准确记录实验操作的各项参数和结果数据，包括样品编号、扩增结果、电泳图像等。
确保数据的可追溯性和准确性。
三、数据分析1. 电泳图像分析：根据电泳图像，判断样品中是否存在目标真菌，并记录其相对强度和带型特征。
2. 数据统计和分析：对不同样品的检测结果进行统计和分析，包括目标真菌的检出率、数量分布、群落结构等。
使用适当的统计方法评估结果的可靠性和显著性。
四、结果报告1. 结果解读：根据数据分析的结果，解读样品中真菌的检测情况，包括目标真菌的存在与否、数量水平等。
2. 报告编写：将结果整理成报告形式，包括样品信息、实验方法、结果数据和解读等内容。
确保报告的准确性和清晰性。
3. 质量控制记录：记录实验操作中的质量控制措施和结果，包括样品处理、PCR扩增、电泳分析等各个环节的质量控制数据。
真菌检测的质量控制的流程
真菌检测的质量控制的流程一、引言真菌检测是一项重要的质量控制措施，用于确保产品的安全和合规性。
本文将详细介绍真菌检测的质量控制流程，包括样品收集、实验室分析和结果解读等方面。
二、样品收集1. 样品选择：根据产品类型和检测要求，选择代表性的样品进行检测。
2. 样品采集：采用无菌技术收集样品，避免外部污染。
3. 样品存储：将样品储存于适当的温度和湿度条件下，避免真菌生长和样品变质。
三、实验室分析1. 样品准备：将样品进行处理，如研磨、稀释等，以便于后续实验操作。
2. 真菌培养：将样品接种于含有适当培养基的培养皿中，培养一定时间，促使真菌生长。
3. 真菌分离：从培养物中分离出单个真菌菌株，避免混杂现象。
4. 真菌鉴定：通过形态学和生物化学方法，对分离出的真菌进行鉴定，确定其种属和属属。
5. 真菌计数：使用显微镜和计数室，对样品中的真菌进行计数，得出真菌数量。
四、结果解读1. 标准值设定：根据相关法规和标准，确定真菌数量的合理范围。
2. 结果比较：将实验结果与标准值进行比较，判断样品是否符合要求。
3. 结果报告：将实验结果整理成报告，包括样品信息、实验方法、结果数据和结论等内容。
4. 异常处理：如果样品超过标准值，需要进行异常处理，如重新采集样品、改进生产工艺等。
五、质量控制措施1. 内部质量控制：实验室应建立内部质量控制体系，包括使用标准菌株进行日常验证、定期校准仪器设备、培训人员等。
2. 外部质量控制：参加相关质量控制组织的外部质量评估，与其他实验室进行比对，确保结果的准确性和可靠性。
3. 仪器设备维护：定期维护和校准实验室使用的仪器设备，确保其正常运行和准确性。
六、结论真菌检测的质量控制流程包括样品收集、实验室分析和结果解读等环节。
通过严格执行质量控制措施，可以确保真菌检测结果的准确性和可靠性，保障产品的质量和安全。
实验室应建立完善的质量控制体系，并参与外部质量评估，不断提高真菌检测水平。
真菌检测的质量控制的流程
真菌检测的质量控制的流程一、引言真菌检测的质量控制是确保检测结果准确可靠的关键步骤。
本文将介绍真菌检测的质量控制流程，包括样品采集、实验室操作、数据分析和报告编写等环节。
二、样品采集1. 样品选择：根据检测目的和要求，选择代表性的样品。
例如，如果是室内环境真菌检测，可以选择空气、尘埃或建筑材料等样品。
2. 采样方法：根据不同样品的特点，采用合适的采样方法。
例如，对于空气样品，可以使用活性气溶胶采样器进行采样；对于表面样品，可以使用刷子或粘贴式采样器进行采样。
3. 采样数量：根据标准要求，确定采样数量，确保样品的代表性和统计学可靠性。
4. 采样记录：在采样过程中，详细记录采样地点、时间、采样人员等信息，以便后续分析和质量控制。
三、实验室操作1. 样品接收和登记：在样品送达实验室后，及时进行接收和登记，确保样品信息的准确性和完整性。
2. 样品处理：根据检测要求，对样品进行预处理，如去除杂质、粉碎等。
3. 样品提取：采用适当的方法提取样品中的真菌，如液体培养、过滤、离心等。
4. PCR扩增：使用聚合酶链反应（PCR）技术对提取的样品进行扩增，以增加检测灵敏度和特异性。
5. 凝胶电泳：将PCR产物进行凝胶电泳分析，检测真菌的存在和数量。
6. 阳性对照：同时进行阳性对照实验，以确保实验操作的准确性和可靠性。
7. 实验记录：详细记录实验操作过程、结果和观察，以便后续数据分析和质量控制。
四、数据分析1. 数据整理：对实验结果进行整理和统计，包括真菌种类、数量等信息。
2. 质控样品：在数据分析过程中，加入质控样品进行验证，确保实验结果的准确性和可靠性。
3. 数据验证：对数据进行验证，检查实验结果是否与质控样品和实验室标准符合。
4. 数据解读：根据数据分析结果，对样品中真菌的种类、数量等进行解读，并与相关标准进行比较。
五、报告编写1. 报告结构：按照标准的报告结构，包括摘要、引言、方法、结果、讨论和结论等部分。
2. 报告内容：在报告中详细描述样品采集、实验室操作和数据分析的过程和结果，以及相关的质量控制措施。
真菌检测的质量控制的流程
真菌检测的质量控制的流程一、概述真菌检测的质量控制是确保检测结果准确可靠的重要步骤。
本文将详细介绍真菌检测的质量控制流程，包括样品收集、实验室准备、实验操作、数据分析和结果确认等环节。
二、样品收集1. 样品选择：根据检测目的和要求，选择适当的样品进行真菌检测。
2. 样品采集：采集样品时应遵循标准操作规程，避免污染和交叉污染。
3. 样品标识：对每个样品进行标识，包括样品编号、采样日期、采样地点等信息。
三、实验室准备1. 实验室环境：确保实验室空气清洁，无真菌污染源。
2. 实验室设备：保证实验室设备的正常运行，并进行定期校验和维护。
3. 试剂准备：按照标准操作规程准备所需试剂，确保试剂的质量和准确性。
四、实验操作1. 样品处理：根据检测方法的要求，对样品进行适当的处理，如研磨、稀释等。
2. DNA提取：使用合适的方法提取样品中的真菌DNA。
3. PCR扩增：根据检测方法选择适当的引物和PCR条件进行扩增反应。
4. 凝胶电泳：将PCR产物进行凝胶电泳分析，检测扩增产物的大小和纯度。
5. 数据记录：准确记录实验操作的步骤、条件和结果。
五、数据分析1. 凝胶图像分析：使用专业的图像分析软件对凝胶图像进行分析，测量带的强度和大小。
2. 数据解读：根据标准曲线或对照样品，判断样品中真菌的存在与否，计算真菌的数量或浓度。
3. 数据统计：对多个样品的检测结果进行统计分析，计算平均值、标准差等指标。
六、结果确认1. 结果验证：对检测结果进行验证，确保结果的准确性和可靠性。
2. 报告编制：根据标准格式编制检测报告，包括样品信息、检测方法、结果解读等内容。
3. 结果解释：向委托方或客户解释检测结果，提供专业建议和意见。
七、质量控制措施1. 实验室内部质控：包括正、负对照样品的加入和检测，以及实验室内部交叉验证等措施。
2. 外部质控：参加由相关机构组织的真菌检测质量控制项目，进行外部质量评估和比对分析。
3. 员工培训：定期组织培训，提高员工的技术水平和质量意识。
真菌检测的质量控制的流程
真菌检测的质量控制的流程一、引言真菌检测是一项重要的质量控制活动，用于确保产品或环境中的真菌污染状况符合相关标准和法规要求。
本文将介绍真菌检测的质量控制流程，包括样品采集、实验室分析、数据处理和结果报告等环节。
二、样品采集1. 样品选择：根据检测目的和要求，选择代表性的样品，如空气、土壤、水、食品或药品等。
2. 采样设备和方法：根据不同样品类型，选择合适的采样设备和方法，确保采样过程不会引入外部真菌污染。
3. 采样点位和频率：根据实际情况确定采样点位和频率，以保证样品的代表性和可比性。
三、实验室分析1. 样品接收和登记：实验室收到样品后，应及时登记并确认样品信息的准确性，包括样品编号、采样日期、采样点位等。
2. 样品处理：根据检测方法的要求，对样品进行适当的处理，如分离培养、DNA提取等。
3. 真菌检测方法：选择合适的真菌检测方法，如培养法、PCR法、荧光定量PCR法等，根据样品特点和检测目的进行选择。
4. 质控样品：在实验过程中加入质控样品，用于验证方法的准确性和可靠性。
5. 仪器设备校准：定期对实验室使用的仪器设备进行校准和验证，确保测量结果的准确性和可靠性。
四、数据处理1. 数据录入：将实验结果录入电子数据库，确保数据的完整性和准确性。
2. 数据分析：根据检测方法和标准要求，对数据进行统计和分析，判断真菌污染的程度和趋势。
3. 异常数据处理：对于异常数据，应及时进行排查和处理，确保数据的可靠性和可比性。
4. 质量控制指标：根据内部质量控制要求，设定真菌检测的质量控制指标，如阳性对照样品的阈值、质控样品的回收率等。
五、结果报告1. 报告编制：根据实验结果，编制真菌检测报告，包括样品信息、检测结果、数据分析和结论等内容。
2. 报告审核：报告应经过实验室主管或质量管理人员审核，确保报告的准确性和可靠性。
3. 报告发送：将审核通过的报告发送给委托单位或客户，并及时回答他们的问题和疑虑。
六、质量控制措施1. 校准和验证：定期对实验室使用的仪器设备进行校准和验证，确保测量结果的准确性和可靠性。
微生物 真菌实验操作方法
微生物真菌实验操作方法
1.准备工具和培养基
首先需要准备好实验需要的工具和培养基，如培养皿、移液器、洗涤剂、纯化水、琼脂、淀粉等。
并注意消毒操作，以防细菌或其他微生物污染实验。
2.制备菌丝悬液
从生物种质资源库或者野外收集的真菌中挑选合适的菌株，培养在PDA等合适的培养基上，待菌落生长较好时，利用移液器或其他工具取出菌落，加入少量生理盐水或去离子水，摇匀制备悬液。
3.铺平琼脂培养基
将琼脂溶液制备并均匀倒入培养皿中，待固化后，用准备好的移液器将菌丝悬液均匀涂抹在琼脂表面上。
注意操作过程中避免过度划伤琼脂，以保证真菌生长的均匀性。
4.培养
将铺好的琼脂培养基置于28-30的恒温培养箱内，通风孔要保持开放，以保证氧气和二氧化碳供给均衡。
观察、记录菌丝生长的情况，重复操作4-6次以增加
实验检测的准确性。
5.观察真菌生长
观察培养皿上真菌生长的情况，如生长结构、形态、颜色、密度等，同时进行镜检和电子显微镜观察，以获取更详细的真菌形态和生长特征。
若需要分离纯化真菌株，则可以在生长完整的菌丝处进行分离，接种于培养基上培养，待生长形态稳定后进行进一步的鉴定和检测。
真菌直接镜检法
真菌直接镜检法
取病变处的皮屑、毛发、甲屑放玻片上，加10%-20%的KOH，覆盖片，放火焰上微加温，直接镜检。
在弱光下先低倍镜，再高倍镜观察，可找到菌丝或孢子。
常见真菌形态分布如下：1．皮屑可见细长的分枝分节菌丝或分隔菌丝及成串的孢子。
2．甲屑标本可见有成串小孢子或由孢子排列成的链状菌丝。
3．毛发内或发外周围可见有小孢子成链状排列，孢子可呈卵圆形或圆形镶嵌状包绕毛干可密集成群。
有的发内可见较粗的菌丝，与毛发长轴一致，发内常有大小不一的气泡。
皮肤科实验室检查技术操作常规
常见皮肤科实验室检查技术操作常规一．真菌（癣菌）直接镜检【方法】1．取材部位：临床医师采取头癣，体癣，股癣，足癣，甲癣标本。
2．操作方法：将标本置于载玻片上，加一滴5-10%KOH，加盖玻片，在酒精灯火焰上过三次以消化角质蛋白，普通光学显微镜下检查。
【结果判断】可见真菌菌丝和/或孢子，可判断为阳性。
二．毛囊虫（蠕螨）的检查【方法】临床医师采取，在扩张的毛囊口挤压出一点皮脂或用刀片刮出些皮脂，在载玻片加一滴液体石蜡或甘油，加盖片轻压使皮脂变薄，普通光学显微镜下检查。
【结果判断】低倍镜下发现活的毛囊虫，可判断为阳性。
三．疥螨虫镜检【方法】1．取材部位：临床医师采取标本。
2．操作方法：将标本置于载玻片上，加一滴5-10%KOH（或加NS），加盖玻片，在酒精灯火焰上过三次以消化角质蛋白，普通光学显微镜下检查。
【结果判断】见到以下任何一项均可判断为阳性。
1．成虫：低倍镜下看到完整或破碎的成虫。
如用NS，有可能发现活动的成虫。
2．虫卵：可以见到虫体的同时见到成堆或散在的虫卵。
四．头，体，阴虱检查【方法】1．取材部位：临床医师夹取标本。
2．操作方法：将标本置于载玻片上，加一滴NS，加盖玻片，普通光学显微镜下检查。
【结果判断】见到以下任何一项均可判断为阳性。
1．成虫：低倍镜下看到完整或破碎的成虫。
如用NS，有可能发现活动的成虫。
2．虫卵：可以见到虫体的同时见到成堆或散在的虫卵。
五．阴道毛滴虫直接镜检【方法】在载玻片上加一滴温NS，用不涂润滑油的阴道窥器暴露子宫颈，在后穹隆，子宫颈等部位拭取分泌物混入温盐水中，立即在低倍镜下镜检。
或用棉拭子蘸取阴道分泌娶后置于2ml温盐水小瓶中，混匀后取一滴在玻片上镜检。
也可取男性尿道分泌物，前列腺液或尿沉渣同法镜检。
【结果判断】及镜下见到呈波状移动的毛滴虫为阳性。
有时可见到毛滴虫周围的白细胞被推移。
六．念珠菌涂片检查【方法】根据病变部位的不同收集不同的标本。
如果检查体液标本（如尿液或脑脊液）应在离心后去沉淀物。
分离植物内生真菌操作流程
分离植物内生真菌操作流程1.材料准备：植物样本、剪刀、镊子、70%乙醇、3%次氯酸钠（本实验用4%84）、酒精灯、计时器、平板、锥形瓶，无菌水，离心管（带盖，灭菌）、打开无菌操作台灭菌30min。
（1）植物样本的采集：选取生长状态良好，不要有病斑或者枯枝烂叶，每种植物采取三株标本，要带有叶子、叶柄和枝条及其他部位，将样本名字写在小纸条上放在装标本的袋子里，采下来的标本与写有名字的纸条一同拍照，样本上有脏东西时，请用纸轻轻擦掉，若不清楚植物名字，请将整棵植物拍照留用于鉴定，并做好相关记录。
（2）制作PDA固体培养基，在无菌操作台中倒平板，每瓶250ml的培养基大概倒15个板，待其凝固后用于接种。
2.清洗：认真用清水将标本洗净，洗去标本表面的灰尘，去除枯叶，备用。
3.取样：（1）在叶片的左上、右上、左下，右下和正中五个部位进行取样，剪取5mm*5mm的叶片，如果是叶柄或枝干，则剪取5~10mm，若是比较粗的枝干或圆圆的果实之类的，总之比较大的，则将它切开，再剪取样本，样本不要剪的太大或太小。
（2）每种植物的叶子，叶柄，枝干等其他部位，每种部位接种两块板，大板每个要接种五个样本即左上、右上、左下，右下和正中，小板每个接种四个样本即左上、右上、左下，右下，计算好所要剪的样本数，尽量多剪几个，以免后面的表面灭菌中冲洗时被冲掉。
（3）若植物标本有剩余，且是没有洗过的，重新装好，放到冰箱里，备用，洗过的扔掉。
（4）每种植物标本所剪的样本放在一个50ml的离心管中，放在试管架上，并且每个离心管上要标好所对应的植物标本。
4.表面灭菌：在无菌操作台中进行（1）先向各离心管内倒入适量（10~20ml）70%乙醇，拧紧盖子，用计时器开始计时1min,每10秒钟晃动离心管几次，使其充分灭菌。
（2）1min后，拧松盖子，将乙醇倒入事先准备的锥形瓶中，注意不要将管中样本倒出，倒出的样本不要再放入其中，也不要用手碰到样本，样本不可以接触到除了离心管以外的东西。
真菌检测方法
分离培养：无菌采取病料接种马铃薯琼脂培养基中，置37℃恒温箱中培养24小时，长成绒毛样菌丝，未见其它细菌生长。
经48小时培养长成白色菌落。
72小时菌落呈纽扣状，由中心向外周逐渐变深，转变成灰白色、灰绿色。
取培养物镜检可见大量球形的分生孢子。
通常人们把真菌和霉菌认为是一种病原的两种说法。
真正真菌包括霉菌，霉菌只是众多真菌中的一种。
真菌是由单细胞或多细胞组成，按有性或无性方式进行繁殖的真核细胞类微生物。
根据其侵犯人体的部位分为前部真菌和深部通常人们把真菌和霉菌认为是一种病原的两种说法。
真正真菌包括霉菌，霉菌只是众多真菌中的一种。
真菌是由单细胞或多细胞组成，按有性或无性方式进行繁殖的真核细胞类微生物。
根据其侵犯人体的部位分为前部真菌和深部真菌，包括皮肤癣菌、孢子丝菌、念珠菌、曲霉菌、隐球菌、组织胞浆菌等。
而霉菌多为细胞真菌的一种，也为深部感染真菌，包括烟曲菌、黄曲菌、黑曲菌、土曲菌等，常发生于免疫力低下的患者，引起全身播散性感然，影响预后。
培养基的选择应根据实验材料和检验目的来确定。
目前国标方法中使用的培养基有:马铃薯葡萄糖琼脂(PDA),孟加拉培养基(RBC)、高盐察氏培养基(CAO),其中PDA和RBC适合于一般的霉菌和酵母菌生长,而CAO则适合于高渗性霉菌生长,酵母菌几乎不长。
在日常检测中我们发现,有些常见的耐高渗性霉菌,如局限曲霉、谢瓦曲霉、赤曲霉、Wallemia等在PDA、RBC上生长非常缓慢或不长,而这些菌在高渗培养基如M40Y、DG18(M40Y琼脂配方:蔗糖400g,麦芽提取汁20g,酵母提取汁5g,琼脂20g,氯霉素50mg,蒸馏水1000ml;DG18琼脂配方:葡萄糖10g,蛋白胨5g,KH2PO41g,MgSO4·7H2O 0.5g,氯霉素0.1g,0.2%二氯硝基苯胺1.0mL,琼脂15g,蒸馏水1000mL,PH6.5)上则正常生长,孢子、形态特征发育良好,而且酵母菌也能在M40Y、DG18上生长,因此,若能同时采用PDA和M40Y(或DG18)分离培养各类样品中的霉菌,将能更全面地反映出污染霉菌的菌相。
真菌检测方法
分离培养：无菌采取病料接种马铃薯琼脂培养基中，置37℃中培养24小时，长成绒毛样菌丝，未见其它细菌生长。
经48小时培养长成白色菌落。
72小时菌落呈纽扣状，由中心向外周逐渐变深，转变成灰白色、灰绿色。
取培养物镜检可见大量球形的分生孢子。
通常人们把真菌和霉菌认为是一种病原的两种说法。
真正真菌包括霉菌，霉菌只是众多真菌中的一种。
真菌是由单细胞或多细胞组成，按有性或无性方式进行繁殖的真核细胞类微生物。
根据其侵犯人体的部位分为前部真菌和深部通常人们把真菌和霉菌认为是一种病原的两种说法。
真正真菌包括霉菌，霉菌只是众多真菌中的一种。
真菌是由单细胞或多细胞组成，按有性或无性方式进行繁殖的真核细胞类微生物。
根据其侵犯人体的部位分为前部真菌和深部真菌，包括皮肤癣菌、孢子丝菌、念珠菌、曲霉菌、隐球菌、组织胞浆菌等。
而霉菌多为细胞真菌的一种，也为深部感染真菌，包括烟曲菌、黄曲菌、黑曲菌、土曲菌等，常发生于免疫力低下的患者，引起全身播散性感然，影响预后。
培养基的选择应根据实验材料和检验目的来确定。
目前国标方法中使用的培养基有:马铃薯葡萄糖琼脂(PDA),孟加拉培养基(RBC)、高盐察氏培养基(CAO),其中PDA和RBC适合于一般的霉菌和酵母菌生长,而CAO则适合于高渗性霉菌生长,酵母菌几乎不长。
在日常检测中我们发现,有些常见的耐高渗性霉菌,如局限曲霉、谢瓦曲霉、赤曲霉、Wallemia等在PDA、RBC上生长非常缓慢或不长,而这些菌在高渗培养基如M40Y、DG18(M40Y琼脂配方:蔗糖400g,麦芽提取汁20g,酵母提取汁5g,琼脂20g,氯霉素50mg,蒸馏水1000ml;DG18琼脂配方:葡萄糖10g,蛋白胨5g,KH2PO41g,MgSO4·7H2O 0.5g,氯霉素0.1g,0.2%二氯硝基苯胺1.0mL,琼脂15g,蒸馏水1000mL,PH6.5)上则正常生长,孢子、形态特征发育良好,而且酵母菌也能在M40Y、DG18上生长,因此,若能同时采用PDA和M40Y(或DG18)分离培养各类样品中的霉菌,将能更全面地反映出污染霉菌的菌相。
真菌检测方法
分离培养：无菌采取病料接种马铃薯琼脂培养基中，置37℃恒温箱中培养24小时，长成绒毛样菌丝，未见其它细菌生长。
经48小时培养长成白色菌落。
72小时菌落呈纽扣状，由中心向外周逐渐变深，转变成灰白色、灰绿色。
取培养物镜检可见大量球形的分生孢子。
通常人们把真菌和霉菌认为是一种病原的两种说法。
真正真菌包括霉菌，霉菌只是众多真菌中的一种。
真菌是由单细胞或多细胞组成，按有性或无性方式进行繁殖的真核细胞类微生物。
根据其侵犯人体的部位分为前部真菌和深部通常人们把真菌和霉菌认为是一种病原的两种说法。
真正真菌包括霉菌，霉菌只是众多真菌中的一种。
真菌是由单细胞或多细胞组成，按有性或无性方式进行繁殖的真核细胞类微生物。
根据其侵犯人体的部位分为前部真菌和深部真菌，包括皮肤癣菌、孢子丝菌、念珠菌、曲霉菌、隐球菌、组织胞浆菌等。
而霉菌多为细胞真菌的一种，也为深部感染真菌，包括烟曲菌、黄曲菌、黑曲菌、土曲菌等，常发生于免疫力低下的患者，引起全身播散性感然，影响预后。
培养基的选择应根据实验材料和检验目的来确定。
目前国标方法中使用的培养基有:马铃薯葡萄糖琼脂(PDA),孟加拉培养基(RBC)、高盐察氏培养基(CAO),其中PDA和RBC适合于一般的霉菌和酵母菌生长,而CAO则适合于高渗性霉菌生长,酵母菌几乎不长。
在日常检测中我们发现,有些常见的耐高渗性霉菌,如局限曲霉、谢瓦曲霉、赤曲霉、Wallemia等在PDA、RBC上生长非常缓慢或不长,而这些菌在高渗培养基如M40Y、DG18(M40Y琼脂配方:蔗糖400g,麦芽提取汁20g,酵母提取汁5g,琼脂20g,氯霉素50mg,蒸馏水1000ml;DG18琼脂配方:葡萄糖10g,蛋白胨5g,KH2PO41g,MgSO4·7H2O 0.5g,氯霉素0.1g,0.2%二氯硝基苯胺1.0mL,琼脂15g,蒸馏水1000mL,PH6.5)上则正常生长,孢子、形态特征发育良好,而且酵母菌也能在M40Y、DG18上生长,因此,若能同时采用PDA和M40Y(或DG18)分离培养各类样品中的霉菌,将能更全面地反映出污染霉菌的菌相。