有机试剂 5,荧光试剂..
荧光试剂分类
荧光试剂分类
荧光试剂可以根据其化学结构和特性进行分类，以下是荧光试剂的一些常见分类：
1. 酞菁类荧光试剂：如金属酞菁（如铜酞菁）、卟啉酞菁、镍酞菁等。
2. 偶氮类荧光试剂：如罗丹明B、罗丹明6G、罗丹明G等。
3. 荧光染料类荧光试剂：如草绿素、乳汁绿素、硫化银、吡啶酮等。
4. 有机荧光染料类荧光试剂：如硫脲染料、聚苯胺等。
5. 金属络合物类荧光试剂：如铬络合物、钌络合物、铂络合物等。
6. 量子点类荧光试剂：如半导体量子点、石墨烯量子点等。
除了以上分类，荧光试剂还可以根据其应用领域进行分类，如生物荧光染料、环境荧光探针、食品荧光指示剂等。
百灵威荧光试剂
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产品编号 337806
英文名称 D-Luciferin, 99%
中文名称 D- 荧光素
CAS 2591-17-5
包装
50 mg 100 mg
1g Bulk
D- 荧光素 (D-Luciferin) 是萤火虫荧光素酶的底物，其量子效率为 0.88，是 Luminol 的 20 倍。在镁离子存在的情况下，荧光素酶促使荧光素与 ATP 反应， 使荧光素被氧化成杂环结构并发出黄绿色的光。这个发光过程可用于 Luc 报告 基因检测，还可用来进行细胞活力测定以及细菌计数。此产品也可与小动物活 体成像系统配套使用，用于标记 Luc 基因的体内活体荧光检测。
异硫氰酸荧光素异 构体 I
C178320
5-Carboxyfluorescein/ 5-FAM
5- 羧基荧光素
518-47-8
100 g 500 g
用于蛋白、多肽标记
3326-32-7
50 mg 250 mg
1g
用于杂交探针设计、 蛋白测序
76823-03-5100 g 1g用于 DNA 自动测 序、核酸探针设计
HO SCN
O
OH
O
+ H2N Protein
O
HO
O
OH
O
S C NH
O
HN
Protein
酶荧光底物
Mol. Pharmaceutics, 2012, 9 (11), pp 3218–3227
产品编号
英文名称
分析化学中有机试剂的应用
中的衍生试剂 、发光试剂 、荧光试剂 、离子探针等 。对于有 机试剂 的研究与应用是现代分析化学 的重要课题之一 ，是分 析化学发展的需要 。 １有 机试 剂的基本构成与分类 １ ． １有机 试剂 的定义 有机试 剂指在 化 学分析 过程 中用于化 学元 素 的定 性或 定量 检测 以及在实验中起着分离、富集 、掩蔽等作用 的一类 有机 化合 物。有机 试剂种类繁多，性 能优 良，应用广泛 ，在 分 析 化 学 中具 有 重 要 的地 位 。
中国 科技期 刊 数据库
科研
分析化学中有机试剂的应用
闫 鹏
材 料 与化 学化 工 学院 成都 理工 大学，四 川 成都 ６ １ ０ ０ ５ ９
摘－ Ｊ ｒ － ：有机试 剂是分析化 学重要 组成 ， 目前 有机试 剂种类繁 多，应 用广泛。被测物质与适宜试刺的化学反应仍是分离、检 出 和 测 定 方 法 的 基 础 ， 因此 对 于 有 机 试 剂 的 利 用与 开 发 会 不 断加 深 ，有 机 试 剂 将 会 凸显 出更 重 要 的地 位 。 关键 词 ：有机试剂 ：分析化学 ：基 本构成 ：分 类：应 用 中 图分类号 ：０ ６ ２ １ Ｉ ３ 文献标识码 ：Ａ 文章编号 ：１ ６ ７ １ — ５ ７ ８ ０ （ ２ ０ １ ５ ） １ ７ — ０ １ ８ ９ 一 Ｏ １
、
３ ． ２有机试剂与仪器分析 的综合应 用
现代科技 的力量进步也推动着分析仪器 的蓬勃发展 ，越 来越多的化学分析离不开仪器 。传 统的定量 、定性分析方法 不仅耗 时耗能，其结果与 真实值偏差相对较大 ，因此满足不 了现代 化工水平 的需要。通过有机试剂与分析仪器的综合应 用 ，不仅达 到反应速度快 、灵敏度 高的要求 ，其结果更具可 靠 性。二者的综合应 用对 分析化学具有重大意义 。 ４结语 现如今 ，许多性能优 良的有机试剂 已成为许多分离测定 不 同物质 的高灵敏度 、高选择性分析方法的关键 ，也是人们 研 究、追求和寻找 的结果 。有机试剂仍然在不断发展 ，推动 分析化学朝着 “ 更灵敏 、更准确 、更迅速 ”的方 向发展 。对 于 以有机 试剂为 主要 内容 的科学研 究是分 析化学 不可 或缺 的一部分 ，继续合成 、开发、利用新 的有机试剂是 分析 化学 今后的主要任务之一 。 参考文献 ［ １ ］ 祝 可锦．有 机硅 试剂在药物合成 中的实践应用 ［ Ｊ ］ ． 华东 科技 ：学术版 ，２ ０ １ ４（ ９ ） ：４ ７ １ ． ［ ２ ］ 周伟．无 卤膨胀型有机 防火堵料在化 学火 灾 中的应用分 析［ Ｊ ］ ． 硅 谷 ，２ ０ １ １（ １ ５ ） ：１ ５ ０ ． ［ ３ ］ 冯 文，谢剑 飞，张建扬．纺 织品化学分析 中有 机萃取试 剂 的 回收 研 究 ［ Ｊ ］ ． 中 国纤 检 ，２ ０ １ ４（ ７ ） ：８ ３ — ８ ５ ． ［ ４ ］ 徐 柳 斌 ． 原 子吸 收 法在 有 机 分 析 中的应 用 ［ Ｊ ］ ．科技风 ，
考染与银染
常用的蛋白质染色试剂分为已考马斯亮蓝为代表的有机试剂染色、银染、荧光染色及同位素显色。
其中考马斯亮蓝染色法的应用较为广泛，现将其与其他的蛋白质染色方法（主要是银染法）作一比较，帮助大家更好地去选择合适的蛋白质染色方法。
蛋白质的染色常用的有4类：有机试剂染色、银染、荧光染色及同位素显色.其中有机试剂染色以考马斯亮蓝染色法（Coomasie brilliant blue,CBB)为代表,在蛋白质分析中常用,但对低丰度蛋白质的显现较差；银染灵敏度虽高,却常与质谱不兼容；荧光染色以SYPRO试剂为主，蛋白质检测灵敏度高,能兼容质谱,但由于需要配备特殊的检测仪器及试剂的昂贵，未被作为常规方法使用；而同位素显色则存在安全性和操作局限性等问题。
因此，筛选简便、节约、检测灵敏度高、质谱兼容的蛋白质着色法是蛋白质组研究所需。
由于考马斯亮蓝染色法的广泛运用，近年来就考马斯亮蓝染色法在提高其灵敏性方面研究者们作了许多改进，方法众多，评价不一.我们在作双向凝胶电泳时，将常用的几种考马斯亮蓝染色法及银染进行了比较，并就其染色影响因素作出分析。
试剂固相pH梯度干胶条(IPG strip pH3—10NL,IPG strip pH5—8,17cm)、urea、CHAPS、TBP、DTT、Bio—Lyte 3/10 Ampholyte、IAM、SDS、Tris、丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、甘氨酸、CBB-G250均为BIO-RAD公司产品。
硫酸铵及磷酸均购自成都科龙试剂厂.AgNO3为Sigma公司出品。
Protein molecular weight marker ＃SW0431为MBI公司出品.甲醛、Na2S2O3与Na2CO3分别为成都天华科技股份有限公司、重庆北碚化学试剂厂和天津市塘沽鹏达化工厂产品。
仪器IPGphor等电聚焦仪、proTEANⅡ垂直电泳仪、Power PAC1000电泳仪、加样溶胀槽、GS—800 Calibrated Densitometer扫描仪、PDQuest凝胶图像分析软件均为BIO-RAD公司产品。
测试荧光剂的简单方法
测试荧光剂的简单方法一、引言荧光剂是一种能够吸收光能并在激发态下发射光的化合物，广泛应用于生物医学、环境监测、材料科学等领域。
测试荧光剂的方法有很多种，其中简单易行的方法是使用紫外灯。
本文将介绍如何使用紫外灯测试荧光剂。
二、准备工作1. 紫外灯：选择波长在365nm左右的紫外灯。
2. 荧光试剂：选择常用的荧光试剂，如荧光素、罗丹明B等。
3. 无色透明容器：选择无色透明的容器，如玻璃试管或塑料小瓶。
4. 水：用纯净水冲洗容器和试剂。
三、实验步骤1. 准备好无色透明容器和纯净水，将容器用水冲洗干净。
2. 取少量荧光试剂加入容器中。
3. 加入足够量的水使得溶液浓度适当。
4. 将容器放置于紫外灯下方，打开紫外灯开关。
5. 观察溶液是否发出荧光。
如果荧光强度较弱，可将紫外灯调整到更近的位置或增加荧光试剂的用量。
6. 关闭紫外灯开关，取出容器，用纯净水将容器和溶液洗净。
四、注意事项1. 在进行实验时应注意安全，避免直接观察紫外灯。
2. 荧光试剂应存放在干燥、阴凉、避光的地方。
3. 实验前应检查紫外灯是否正常工作。
4. 实验结束后应及时关闭紫外灯开关。
五、实验结果分析在紫外灯下观察荧光试剂溶液，若发现溶液发出绿色或蓝色光，则说明该荧光试剂具有荧光性质。
根据荧光强度的不同可以初步判断荧光试剂的浓度或纯度。
六、总结使用紫外灯测试荧光剂是一种简单易行的方法。
通过本文介绍的实验步骤和注意事项，我们可以轻松地测试出荧光试剂是否具有荧光性质，并初步判断其浓度或纯度。
希望这篇文章能够对需要测试荧光剂的人们提供帮助。
常用有机试剂物理常数
序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
11
12
13 14 15 16 17 18 19
附录 5 共沸混合溶剂
溶剂
乙酸乙酯 环己烷 异丙醇 二异丙醚 乙酸甲酯 环乙烷 乙醇 氯仿 乙醇 四氯化碳 乙醇 苯 乙醇 庚烷 甲醇 氯仿 甲醇 二氯甲烷 乙醇 苯 环己烷 甲醇 乙酸乙酯 环己烷 甲醇 丙酮 环己烷 甲醇 乙酸乙酯 丁酮 庚烷 甲醇 苯 丙酮 环己烷 乙醇 甲苯 丁酮 氯仿 丙酮
和水溶性杂质)1~3 次,无水氯化
钙干燥,重蒸.
氯仿
61.2℃
5.2℃ 1.439 以稀氢氧化钾洗涤,再用水洗 2~3 氯 仿 不 能 用 金 属
次,以无水氯化钙干燥,重蒸.
钠干燥,用容易引
起爆炸.
乙酸乙酯 77.1℃
6.1℃ 0.902 工业用乙酸乙酯用 50%碳酸钠洗
至 2 次 ,以无水氯化钙干燥,重蒸.
10.4
12.3 12.47 13.9 14.7 16.56 17.8 18.3 18.5 19.92 20.3 20.7 20.7
溶解度(20~25℃)
溶剂在水 水在溶剂中
中
不溶
不溶
0.00095% 0.0111%
0.010% 0.0055% 任意混溶
0.077% 0.010%
0.1780% 0.063%
氧化物,引起爆炸.
乙醇
78.8℃
26.8 0.794* 工业酒精加生石灰回流 2~4 小时,
℃
重蒸.
甲醇
54.6℃
31.2 0.742 一般重蒸即可,如含有醛酮,可以 重蒸
℃
用高锰酸钾大致测定醛酮含量 ,
加过量的 盐酸羟胺回流 4 小时
危险废物鉴别方法
危险废物鉴别方法
1.外观鉴别法：通过观察废物的颜色、形状、质地、气味等外在特征，可以初步判断废物的危险性质。
如黄色废物可能是有机溶剂或重金属废物，褐色废物可能是含有酸性或碱性物质。
2.荧光试剂鉴别法：该方法通过将特定荧光试剂与废物发生反应，观
察产生的荧光颜色和强度来判断废物的危害程度。
常用的荧光试剂有焦亮唑、眩光素等，不同废物对这些试剂有不同的反应。
3.pH试纸鉴别法：将废物溶液滴在pH试纸上，根据试纸颜色变化来
判断废物的酸碱性质。
酸性废物使试纸变红，碱性废物使试纸变蓝，中性
废物试纸颜色保持不变。
4.燃烧鉴别法：将废物进行燃烧，观察其燃烧的颜色、状况和产生的
气味。
有机废物燃烧时，一般会产生黑色烟雾和焦油味；金属废物燃烧时，一般会有明亮火焰和火花飞溅。
5.仪器分析法：使用各种仪器设备对废物进行定量和定性分析，如红
外光谱仪、质谱仪、光电离质谱仪等。
通过分析废物的成分和结构，可以
准确判定废物的危险程度。
6.毒性检测法：使用生物检测方法对废物的毒性进行评估。
常用的有
急性毒性试验（如小白鼠急性毒性试验）、微生物毒性检测（如动植物的
细胞毒性试验）等。
以上是几种常用的危险废物鉴别方法，不同的鉴别方法可以互相支持
和验证，以提高鉴别结果的准确性。
在进行危险废物鉴别时，应尽量多方
面综合考量，确保废物的鉴别结果准确可靠，以保护环境和人体健康。
荧光试剂配制实验报告
一、实验目的1. 掌握荧光试剂的基本配制方法。
2. 熟悉荧光试剂的稳定性及保存条件。
3. 了解荧光试剂在实验中的应用。
二、实验原理荧光试剂是指能够在紫外光或可见光照射下，发出荧光的物质。
荧光试剂广泛应用于生物学、化学、医学等领域。
本实验主要研究荧光试剂的配制方法、稳定性及保存条件。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 荧光素钠- 磷酸盐缓冲溶液（pH 7.4）- 乙醇- 水合氯醛- 丙酮- 二甲基亚砜（DMSO）- 试剂瓶- 移液器- 荧光分光光度计2. 实验仪器：- 超净工作台- 研钵- 玻璃棒- 烧杯- 电子天平- 紫外可见分光光度计四、实验步骤1. 荧光素钠溶液的配制：- 称取0.1g荧光素钠，置于研钵中。
- 加入少量磷酸盐缓冲溶液（pH 7.4），用玻璃棒搅拌至溶解。
- 将溶解后的溶液转移至10ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲溶液定容至刻度。
- 摇匀，备用。
2. 水合氯醛溶液的配制：- 称取0.1g水合氯醛，置于研钵中。
- 加入少量乙醇，用玻璃棒搅拌至溶解。
- 将溶解后的溶液转移至10ml容量瓶中，用乙醇定容至刻度。
- 摇匀，备用。
3. 丙酮溶液的配制：- 称取0.1g丙酮，置于研钵中。
- 加入少量二甲基亚砜（DMSO），用玻璃棒搅拌至溶解。
- 将溶解后的溶液转移至10ml容量瓶中，用二甲基亚砜定容至刻度。
- 摇匀，备用。
4. 荧光试剂稳定性测试：- 分别取荧光素钠溶液、水合氯醛溶液、丙酮溶液各2ml，置于比色皿中。
- 使用荧光分光光度计，分别测定各溶液在激发波长和发射波长下的荧光强度。
- 每隔一定时间，重复测定一次，记录数据。
5. 荧光试剂保存条件测试：- 将配制好的荧光试剂分别置于不同温度（室温、4℃、-20℃）下保存。
- 在保存一定时间后，取出试剂，重复步骤4，测定荧光强度。
五、实验结果与讨论1. 荧光素钠溶液、水合氯醛溶液、丙酮溶液均能成功配制，且在紫外光或可见光照射下，发出明显的荧光。
常用鉴定试剂的配制和应用
常用鉴定试剂的配制和应用一、通用试剂1、碘试剂检查一般有机化合物。
（1）碘蒸气预先将盛有碘结晶的小杯置于密闭的玻璃容器内，使容器空间被碘蒸气饱和，将薄层置于容器内数分钟即显棕色斑点。
有时，于容器中加放一小杯水，增加容器内的湿度，可提高显色的灵敏度。
（2）0.5％碘的氯仿溶液喷洒试剂，置空气中待过量的碘挥发后，喷1％淀粉溶液，斑点由棕色转为蓝色。
2、硫酸试剂检查一般有机化合物。
5％硫酸乙醇溶液作为色谱显色剂用。
喷洒后，置空气中干燥15min，100℃烤至斑点呈色（不同化合物呈不同颜色）。
3、重铬酸钾—硫酸试剂检查一般有机化合物。
5g重铬酸钾溶于l00ml40％硫酸中。
喷该试剂后，150℃加热至斑点出现(不同化合物呈不同颜色)。
4、磷钼酸试剂检查还原性成分。
5％磷钼酸乙醇溶液。
喷洒后，120℃加热至呈蓝色斑点。
5、磷钨酸试剂检查还原性成分20％磷钨酸乙醇溶液。
喷洒后，120℃烘烤，还原性物质呈蓝色斑点。
6、硝酸银—氢氧化铵试剂检查还原性成分。
溶液I：0.1mol／L硝酸银溶液。
溶液Ⅱ：10％氢氧化铵溶液。
临用前溶液I和Ⅱ以1︰5混合。
喷洒后105℃加热5~l0min，至深黑色斑点出现。
7、中性高锰酸钾试剂检查易还原性成分。
0.05％高锰酸钾溶液。
喷洒后粉红色背景上显黄色斑点。
8、碱性高锰酸钾试剂检查还原性成分。
溶液I：1％高锰酸钾溶液。
溶液Ⅱ：5％碳酸钠溶液。
溶液I和Ⅱ等量混合使用，喷洒后，粉红背景上显黄色斑点。
9、四唑蓝试剂检查还原性成分。
溶液I：0．5％四唑蓝甲醇溶液。
溶液Ⅱ：25％氢氧化钠溶液。
临用前两液等量混合。
喷洒后，微热或室温放置显紫色斑点。
10、荧光素—溴试剂检查不饱和化合物。
溶液I：0.1g荧光素溶于l00ml乙醇中。
溶液Ⅱ：5g溴溶于l00ml四氯化碳中。
先喷洒溶液I，然后将薄层板放入盛有溶液Ⅱ的缸内，黄色斑点出现后，于紫外光灯下检视，红色底板上显黄色荧光斑点。
11．荧光显色试剂检查一般有机化合物。
有机化学实验教案--5.薄层色谱的应用
活性级别
偶氮染料
勃劳克曼活性级的Rf值
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅴ
偶氮苯
0.59
0.74
0.85
0.95
对甲氧基偶氮苯
0.16
0.49
0.69
0.89
苏丹黄
0.01
0.25
0.57
0.78
苏丹红
0.00
0.10
0.33
0.56
对氨基偶氮苯
0.00
4.薄层色谱定性分析（比移值计算）
在薄层色谱的分析中，经常使用比移值表示物质移动的相对距离。通过比移值判断分离情况。
= =
图薄层色谱展开图
5.薄层色谱应用试验
1）菠菜色素的提取
称取20g洗净后用滤纸吸干的新鲜菠菜叶，用剪刀剪碎并与20mL甲醇拌匀，研钵中研磨约5min，然后布氏漏斗抽滤菠菜汁，弃去滤液。
将菠菜汁放回研钵中，每次用20mL3:2体积比的石油醚——甲醇混合液萃取两次，每次需加以研磨并且抽滤。合并深绿色萃取液，转入分液漏斗，每次用10mL水洗涤两次，以除去萃取液中的甲醇。洗涤时要轻轻旋荡，以防止产生乳化。弃去水——甲醇层，石油醚层用无水硫酸钠干燥后虑入圆底烧瓶，水浴上蒸去大部分石油醚至体积约为1mL为止。
图薄层层析装置
3)显色
薄层展开完毕后，取出薄层板，画出溶剂前沿，如果化合物本身有颜色，就可直接观察它的斑点。如果本身无色，需要经过显色法显色后才能观察到斑点位置，判断分离情况。常用显色法包括碘蒸气显色法、紫外灯显色法和显色剂显色法。现简要介绍如下：
碘蒸气显色法：碘能与很多有机化合物可逆的结合成有颜色的络合物，先将几粒碘结晶放在密闭容器中，碘蒸气很快充满容器，然后将展开完毕挥干溶剂的薄层板放入容器中，有机化合物即与碘作用呈现棕色斑点。立即将薄层板取出，标记斑点形状和位置，计算比移值。
实验室化学药品分类
实验室化学药品分类
1. 有机试剂：如溶剂、酸、碱、醇类、酚类、醛类、酮类、脂肪酸、酰胺、酯、酰化剂等
2. 无机试剂：如氢氧化钠、氯化钠、氯化钙、硫酸铜、氯化铁、硝酸银等
3. 离子交换树脂：如弱酸性树脂、强酸性树脂、弱碱性树脂、强碱性树脂等
4. 分离剂：如硅胶、层析纸、薄层板等
5. 生化试剂：如酶、蛋白质、生物荧光剂、抗生素等
6. 光学试剂：如指示剂、荧光剂、消光剂等
7. 检测试剂：如试纸、试片、电极等
8. 催化剂：如酶类催化剂、金属催化剂等
9. 化学分析标准物质：如纯度较高的化学物质，可作为分析标准或标准品用来定量分析
10. 其他：如粉末活性炭、橡胶制品、玻璃器皿、滤纸、过滤瓶等。
有机化学中的点板技巧点板技巧
展开剂的选择最近刚进实验室，用TLC对反应进行检测，但是关于展开剂的资料不多，我们实验室大多就是两个体系:石油醚/乙酸乙酯，氯仿/甲醇，其他的就很少了，所以我下决心把这个实验室比较常用的技术搞清楚。
下面是我从网上搜的摘自于浙江理工大学实验教学网一种简单的办法是根据你产物的溶解性选择一种极性最强的溶剂学（如醇类，乙腈等），再根据你实际展开的情况慢慢加入极性弱的溶剂（如四氯化碳、石油醚、二氯甲烷等）调节体系的极性。
以得到最好的展开效果。
把我的祖传秘方告诉你吧PE(60-90)EtAc/PE=1:2EtAc/PE/AcOH=15:5:1EtAc/AcOH/n-Butanol/H2O=2:1:1:18年来我用这四种体系,没有出现过什么问题我一直在用的是乙酸乙酯：环已烷，不断调节比例，直到有满意的Rf值，有拖尾时可能要加酸或碱，我一般乙酸和三乙胺。
我用了好几年了，都还好。
不妨一试！氨基酸都有专用的展开剂，常用丁醇和水，再加酸碱选择展开剂一般要用混合溶剂：一般要有一种对所要展开样品溶解度较大的溶剂，视样品的极性，再选用相应的体系。
极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统，极性较大的用甲醇：氯仿系统，极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸(应该交好)，甲醇：氯仿对于胺类比较好，我常用的展开剂有：氯仿/甲醇；环已烷/丙酮；醋酸乙酯/石油醚；甲醇/吡啶/水；等.本人用过的展开系统中，苯-丙酮用的最多，通过调节不同比例可以得到较好的效果俺的：EtOAc/HexanesCh2Cl2（EtOAc）/MeOH，0-1% TEA or NH3极性乙酸乙酯和非极性的石油醚按不同比例混合对一般的都能适应人民卫生出版社的《分析化学》（下册）有专门的介绍，很详细。
我一般用乙酸乙酯和石油醚配成不同比例的混合溶剂。
实验时调整至Rf=0.3--------0.5我们做的氨基酸,用的都是丁醇:醋酸:水二氯甲烷：甲醇，调节不同的配比基本解决大多数问题. 用二氯甲烷与甲醇体系非常有用，只要调整好比例。
新荧光试剂5-(4-氯苯偶氮)-8-(8-喹啉重氮氨基)喹啉的合成及其荧光分析
中 图分 类 号 ： ６ ６．２ ０ ２ ３３ 文 献 标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：２ ８３ ８ （ ０ ８ ０ ．６ ５０ ０ ５ ．２ ３ ２ ０ ） ９０ ７ ．２
ＮＨ Ｎ Ｎ ￣ Ｃ Ｏ Ｈ Ｓ ４ ２ ａ Ｏ Ｈ Ｏ Ｈ／ ２０
—
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０ ℃ ￣５
ｃ －
Ｎ— Ｎ
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Ｐ— ￣Ａ Ａ 的合成路 线 Ｃ Ｑ Ｑ
１ ２２ ｐ ＣＰ Ｑ的合 成 ． ． － １Ａ
将 １２ （ ．１ ｏ） ．８ｇ０ ０ １对氯 苯 胺 和 １ ． Ｌ １ １ ｍ ００ｍ ：
２ ％的 Ｎ Ｏ ０ ａ Ｈ溶 液 调 节 ｐ Ｈ始 终 为 ５ ０ 反应 ２ｈ ．， 。
能在 ８氨基 喹啉 母体 中引入三 氮烯 基 团合成 新 的 ． 荧 光试 剂 ， 许该 试剂 具 有 较 高 的灵 敏度 高 和选 也 择性 。本文将 三 氮烯衍 生 物与具 有 荧光 特性 的 喹 啉结合 在一起 ， 成 了 ５（ ． 苯偶 氮 ）８（ － 合 ．４氯 ．．８喹啉
摘 要 ： 成 了标 题 化 合 物 （ －１Ａ Ａ ）其 结 构 经 Ｉ １ Ｎ Ｒ、 素 分 析 证 实 。在 碱 性 介 质 中 ， 试 剂 于 ／ 。 ２ ｍ 合 ｐＣＰ Ｑ Ｑ ， Ｒ、 Ｍ 元 Ｈ 该 Ａ ＝４７ｎ ／ ４８ｎ ９ ｍ产 生 荧 光 ， 能 与 Ａ （ 络 合 并 发 生荧 光 增 强 ， 于 此 ， 立 了 ｐ ＣＰ Ｑ Ｑ对 Ａ （ 的新 荧 光 分 析 法 。 且 ｌⅢ） 基 建 －Ｉ Ａ Ａ ｌ Ⅲ）
‘
荧光光谱法可测定的有机物
荧光光谱法测定有机物荧光光谱法多用于水环境样品中单一或两种污染物的直接测定[冯立娟，辛长波．荧光法直接测定环境水中痕量苯酚．光谱实验室，2002，19(2)：267-269。
张文伟，杨梅，李晓辉等．荧光法直接测定环境水中邻羟基苯甲酸和苯酚混合物的含量．光谱实验室，1999，16(5)：586-589。
张文伟，辛长波，李晓辉，等．荧光光度法直接测定环境水中的苯酚和苯胺．分析试验室，2000，19(5)：37-39。
宋社娟，沈珠琴，田桂英，等．荧光光谱法测定油气化探土壤样品中的烃．铀矿地质，1996，12(4)，：234-237]，如用于酚类、十二烷基磺酸钠、农药类等[刘文莉．荧光光谱法检测除草剂萘氧丙草胺．农药，2006，45(1)：40-42。
张勇，慕俊泽，朱亚先，等．荧光光谱法研究有机污染物的环境行为．环境科学增刊，2004，25：82-85。
吴志皓，唐尧基，李桂敏，等．荧光分析法在环境有机污染物分析中的应用．分析仪器，2005(3)：13-19]，对于多环芳烃类污染物多采用间接荧光分析法或同步荧光光谱法测定[ANDRADE EIROA A，VA’ZQUEZ BLANCO E，LO’PEZ MAHIA P，et al. Determination of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in a complex mixture by second—derivative constant-energy synchronousspectrofluorimetry [J].Talanta, 2000, 51: 677-684；Paula Rodr’lguez-Sanmart’in，Antonio Moreda-Pi’neiro, Adela ermejo-Barrera，et al. Ultrasound-assisted solvent extraction of total polycyclic aromatic hydrocarbons from mussels followed by spectrofluorimetric determination [J].Talanta, 2005, 66: 683-690. ]在有机物的荧光分析中，脂肪族有机化合物本身会发荧光的不多，但有许多都能和某种有机试剂反应，其产物具有荧光特性，可进行荧光分析。
实验六 DNS-氨基酸的制备和鉴定
山东大学实验报告2011年4月13日姓名张行润系年级2009级生科4班学号200900140177 同组者于潜科目生物化学实验题目聚酰胺薄膜层析法分离氨基酸仪器编号105一、实验目的1.了解并掌握DNS-氨基酸的制备和鉴定的原理2.掌握制备Dansyl氨基酸和聚酰胺薄膜层析法的操作和方法二、实验原理荧光试剂5-二甲氨基-1-萘磺酰氯(dansyl-Cl，简称DNS-Cl)在碱性条件下与氨基酸(肽或蛋白质)的氨基结合成带有荧光的DNS-氨基酸(DNS-肽或DNS-蛋白质)，DNS-氨基酸再经酸水解可释放出DNS-氨基酸，其反应式如下：图1：DNS-氨基酸生成反应机理图2：单项层析结果示意图DNS-Cl能与所有的氨基酸生成具荧光的衍生物，其中赖氨酸、组氨酸、酪氨酸、天冬酰胺等氨基酸可生成双DNS-氨基酸衍生物。
这些衍生物相当稳定，可用于蛋白质的氨基酸组成的微量分析，灵敏度可达10－10～10－9mol水平，比茚三酮法高10倍以上，比过去常用的FDNB 法高100倍。
将Edman法和DNS法结合起来(称为Edman-DNS法)应用于蛋白质结构的序列分析上作，可以提高Edman法的灵敏度及其分析速度。
DNS-Cl在pH过高时，水解产生副产物DNS-OH，即：图3：DNS-Cl在pH过高水解产生DNS-OH在DNS-Cl过量时，会产生DNS-NH2，即：图4：DNS-Cl过量产生DNS-NH2DNS-氨基酸在紫外光照射下呈现黄绿色荧光，而DNS-OH和DNS-NH2产生蓝色荧光，可彼此区分开。
DNS-氨基酸可用聚酰胺薄膜层析法进行分离和鉴定，在薄膜上检测灵敏度为0.01ug(相当于10—10mol)。
由于它具有灵敏度高，分辨力强，快速，操作方便等优点，已被广泛应用于各种化合物的分析。
层析法是利用混合物中各组分物理化学性质的差异（如吸附力、分子形状及大小、分子亲和力、分配系数等），使各组分在两相（一相为固定的，称为固定相；另一相流过固定相，称为流动相）中的分布程度不同，即各组分所受的固定相的阻力和流动相的推力影响不同，从而使各组分以不同的速度移动而达到分离的目的。
实验室试剂分类
生物试剂分类生物试剂(BR：Biological reagent）涉及到化学试剂分类。
我国的试剂规格基本上按纯度（杂质含量的多少）划分，共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析和化学纯等7种。
国家和主管部门颁布质量指标的主要优级纯、分级纯和化学纯3种.（1)优级纯（GR：Guaranteed reagent)，又称一级品或保证试剂，99。
8%，这种试剂纯度最高，杂质含量最低，适合于重要精密的分析工作和科学研究工作，使用绿色瓶签。
（2）分析纯(AR），又称二级试剂,纯度很高,99。
7％,略次于优级纯，适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签.（3)化学纯（CP）,又称三级试剂，≥ 99.5%，纯度与分析纯相差较大，适用于工矿、学校一般分析工作。
使用蓝色（深蓝色)标签。
（4)实验试剂（LR：Laboratory reagent)，又称四级试剂。
除了上述四个级别外，目前市场上尚有：基准试剂（PT：Primary Reagent）:专门作为基准物用，可直接配制标准溶液。
光谱纯试剂(SP：Spectrum pure)：表示光谱纯净。
但由于有机物在光谱上显示不出，所以有时主成分达不到99。
9%以上，使用时必须注意，特别是作基准物时，必须进行标定。
纯度远高于优级纯的试剂叫做高纯试剂(≥ 99.99%）.目前，国外试剂厂生产的化学试剂的规格趋向于按用途划分，常见的如下：生化试剂(BC:Biochemical）生物试剂(BR：Biological reagent）生物染色剂（BS:Biological Stain)络合滴定用(FCM：For Complexometry)层析用（FCP：For chromatography purpose)荧光分析（FIA）微生物用(FMB）显微镜用（FMP：For microscopic purpose）合成用（FS：For synthesis）气相色谱（GC:Gas chromatography）高压液相色谱（HPLC:High Pressure Liquid chromatography）指示剂（Ind：Indicator）红外吸收(IR）液相色谱(LC）核磁共振（NMR）有机分析标准（OSA：Organic analytical standard）分析用（PA：Pro analysis）实习用（Pract：Practical use）（Pure purum 纯）Puriss （Purissmum 特纯）合成（SYN）工业用Tech：Techincal grade）薄层色谱（TLC：Thin Layer chromatography）分光纯、光学纯、紫析分光光度纯（UV：Ultra violet pure比较苛刻.例如，绝大多数酶试剂怕热,需在0～5℃下保存，有些作为遗传工程用的酶试剂则需在－20℃下保存.生化试剂按生物体组织中所含有的或是在代谢过程中所产生的物质可分为氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸、酶、辅酶、糖类、酯类、激素等；按生物学研究的需要可分为电泳试剂、色谱试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂等。
常用显色剂配制
常用显色剂配制一、通用显色剂1．碘，检查一般有机物。
碘蒸气对很多化合物显黄棕色。
在一个密闭的玻璃缸内予先放入碘片，使缸内空气被碘蒸气饱和，将薄层或纸层放入缸内数分钟即可显色。
有时在缸内放一盛水的小杯，增加缸内的湿度，可以提高显色的灵敏度。
2．硫酸：通用。
浓硫酸：水（1：10），或10%硫酸的乙醇溶液。
3．四唑兰试剂：还原性物质在室温或微加热时显紫色。
溶液I：0.5%四唑兰甲醇溶液溶液II：6N氢氧化钠溶液临用前溶液I和溶液II等量混合。
4．铁氰化钾—三氯化铁试剂：还原性物质显蓝色，再喷2N盐酸溶液，则蓝色更深。
二、生物碱显色剂1．改良碘化铋钾试剂：生物碱和某些含氮化合物显橙红色。
取7.3克碘化铋钾，冰醋酸10毫升，加水60毫升。
2．碘—碘化钾试剂：生物碱显棕褐色。
碘1克和碘化钾10克溶于50毫升水中，加热，加冰乙醇2毫升，用水黧到100毫升。
3．硅钨酸试剂（沉淀试剂）5克硅钨酸溶于100毫升水中，加盐酸至PH2左右。
4．苦味酸试剂（沉淀试剂）1克苦味酸溶于100毫升水中。
5．鞣质试剂（沉淀试剂）1克鞣酸加乙醇1毫升溶解后，再加水至10毫升。
6．王水浓盐酸：硝酸（1：3）三、甙类显色剂1．糖的检出试剂（1）苯胺—邻苯二甲酸试剂：喷后105~110℃烤10分钟，糖显红棕色（检测还原糖）[注]苯胺—邻苯二甲酸试剂的制备：苯胺0.93克，邻苯二甲酸1.66克，溶于水饱和正丁醇100ml中。
（2）α—萘酚—硫酸试剂：喷后100℃烤3—6分钟，多数糖呈蓝色，鼠李糖呈橙色。
[注]试剂制备：15%α—萘酚乙醇溶液21ml，浓硫酸13ml，乙醇87ml及水8ml混合后使用。
（3）Fehing试剂：本品分甲液与乙液，应用时取等量混合，检查还原糖。
甲液：结晶硫酸铜6.23克，加水至100毫升。
乙液：酒石酸钾钠34.6克及氢氧化钠10克，加水至100毫升。
（4）百里酚硫酚剂：喷后120℃烤15—20分钟，多数糖在灰白色背景上显暗红色，继续加热则变成浅紫色。
紫外光谱法常用的诊断试剂及应用
紫外光谱法常用的诊断试剂及应用下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!紫外光谱法是一种基于分子对紫外光吸收特性的分析技术，广泛应用于化学、生物、医药、环境和食品等多个领域。
化验室化学试剂分类清单
化验室化学试剂分类清单
化学实验室的化学试剂一直以来都是化学研究不可或缺的资源，下面将为大家
介绍一些重要的化学试剂分类：
1、电解质试剂：这是最常用的一类试剂，主要有金属电解质、有机锂离子溶液、无机酸/碱类等，具有良好的溶解性和活性，常用于实验室中多种分析测定、
制备研究。
2、无机试剂：这类试剂通常由金属氢源、金属离子和标准溶液构成，这类试
剂常用于物理、化学分析；常用的有碳酸钠、氯化钠、氯化铵等。
3、有机试剂：这类型的试剂一般是以芳烃和芳香化合物为基础的有机物质，
用于仪器分析、合成化学和其他有机反应研究，用途广泛，例如六甲基四氢咪啶、乙酸乙酯、N、N-二烷基乙酰亚胺等。
4、气体试剂分析：包括了空气、氫气、氯气、氨气、硫化氢、氯气等多种气体，可以用于气体检测、研究分析等，具有危险性。
5、特种试剂：这类型的试剂是用于多种研究分析的特殊化学品，有荧光试剂、痕量元素、定性指示剂、色谱试剂等，在特定实验环境中有着重要的作用。
以上是、实验室化学试剂的分类，包括了电解质试剂、无机试剂、有机试剂、
气体试剂分析和特种试剂，这些试剂都是实验室研究不可缺少的基础资料，非常重要。
在选择使用化学试剂时，应该确定其本身的属性，并加以可靠的化学调控，以减少潜在的风险。
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影响有机化合物荧光的有机试 剂结构因素
• • • • • • 分子共轭体系 共轭大π键共平面程度及其刚性 .取代基 影响 杂原子影响 分子离子化对荧光的影响 立体结构
分子共轭体系大小对荧光的影响 • 有机荧光团 能发射出荧光的共軛π键的 基团 • （-CH=CH-）n（n>2），苯，萘，对苯 二醌，苯并杂环、吡喃酮以及占吨酮基 团 • 共轭体系越大，荧光量子强度越高
• 两个以上推电子基同时取代，化合物的 荧光会受到抑制 如 甲氧基苯的ФF是0.29 1，4-二甲氧基苯的ФF是0.21， 再如 甲苯的ФF是0.17 对甲酚的ФF等于0.09，
（取代基）加重效应对荧光的影响
• 加重效应减弱荧光
ФF是0.22，ФP（磷光量子产率）是0.14
O CH3 O N N CH3
• 类取代基中的n电子跃迁到π*属于禁阻跃 迁 ，激发态分子数较少 • S1－T1的体系间跨越占优势，激发态分 子放出光子的数大为减少，使荧光减弱 • －CN氰基（-C≡N）是不饱和取代基，它 应使取代的化合物荧光减弱，但实际结 果是表现出推电子的效果—荧光增强 • －F虽是吸电子取代基，但增强荧光
荧光产生的理论基础
• 基态和激发态 • 单重态（S)和三重态 (T)
S2 S1
ic
isc
ic isc
T2 T1
E F ic P
S0
荧光激发光谱和荧光发射光谱
• λem>λex 斯托克斯（stokes）位移
荧光强度、荧光量子产率和荧 光寿命
• 荧光强度 F= 2.3ФFIoεbc
F—荧光强度；ФF—荧光量子产率，Io—照射到被测物 质上的光强度；ε—该物质的摩尔吸光系数；b—检测
共轭大π键共平面及其刚性的影响
• 有机分子具有共軛平面结构才显示出荧 光特性 • 分子的共轭体系必须具备共平面性 • 共軛体系的平面结构还要有一定程度的 刚性
(C H ) N
2 5 2
O C COOH
பைடு நூலகம்
+ N(C 2H )
5 2
(C H ) N
2 5 2
+ N(C 2H ) C
5 2
取代基的影响
• 对于稠环芳烃，具有相同芳香环数的化 合物，芳环的连接和排列顺序不同，化 合物的有关荧光性能也不同 • 芳环直线性排列的化合物的荧光发射波 长比非线性排列的波长要长 • 芳香环数越多，共轭体系越大，荧光越 强 • 芳香环或共轭体系增加到一定程度，只 是荧光发射波长向长波红移，ФF不再增 加，还可能降低
两类取代基共同作用
• 推电子基和吸电子基共存时，推电子基结合在对于吸 电子基共振电子密度减小的原子上，构成荧光性 • 7-羟基香豆素（ФF =0.37） • 6-和8-羟基取代香豆素无荧光 • 4-甲基-7-羟基香豆素则因甲基的超共轭效应使荧光增 强（ФF =0.41）
8
7 6 5
O 1 4
O 2 3
O
ФF约1.0
NH
ФF 0.86
N
ФF 0.90
.分子离子化对荧光的影响 • 分子离子化对荧光影响很大
• 取代基种类的影响 取代基有推电子取 代基和吸电子取代基 • 推电子取代基：-NH2、-NHR、-NR2、OH、-OR（R=-CH3、-C2H5等 • 吸电子取代基：C=O、-NO2，-COOH，CHO、-COR（R=-CH3，-C2H5等）、N=N-、卤素（-F，Cl，Br，I）等 • 推电子取代基增强荧光
第五章 荧光试剂
• • • • • • 荧光的发现及发展 荧光产生的理论基础 分子荧光光谱 荧光强度、荧光量子产率和荧光寿命 有机试剂结构与荧光的关系 代表性荧光试剂
荧光的发现及发展
• 十六世纪被发现，但对荧光的产生原理和条件 • 1852年Stokes考察奎宁和叶绿素荧光 发现荧光波长比照射光波长要长，认定是物质 吸收光后重新发射出的光，，提出了“荧光” • 1867 Goppetsroder 桑色素荧光检测铝 • 二十世纪初，已荧光素、稠环芳烃及曙红等 600余种化合物有荧光 • 1924年 Wawwillous测定荧光产率 • 1926年 Gavila对荧光寿命进行了测定
推电子取代基增强荧光 • 取代基中O或N上的孤对电子参与有机荧 光分子的共轭大π键，扩大共轭体系 • 波长红移，荧光强度明显增加 • 极性溶剂中易形成氢键，强酸中易质子 化，碱性介质中可离解出H • 质子化试剂分子带正电，使荧光减弱 • 离解出H试剂分子带负电荷，荧光增强
吸电子取代基 减弱荧光
池厚度；c—物质浓度
荧光量子产率
荧光量子产率与荧光强度的区别
• • • • 荧光量子产率是荧光物质的固有属性 其与物质浓度无关 荧光强度与物质浓度有密切关系 同浓度下，荧光量子产率高的荧光越强 （排出外界条件影响）
荧光寿命
• 荧光寿命（τ） • lnFo-lnFτ=-t/τ Fo和Fτ分别代表t=0和t=τ时的荧光强度，通过实 验测量不同时间的Ft值，确定lnFt—t的关系曲 线，应为直线 • 直线斜率就是荧光寿命 • 用式子τ=10-5/εmax估计荧光寿命，εmax为最大吸 收波长下的摩尔吸光系数，如S0-S1跃迁的ε值 一般为103，估计荧光寿命是10-8s.
CH3 N N
S CH3 N N CH3
CH3 N N
ФF等于10-5，ФP变为0.43
O
芳香环中杂原子的影响
• 增强或减弱荧光，看杂原子化合物结构 • 吡咯、噻吩及呋喃荧光量子产率很小 ， 苯并后的吲哚、硫茚及苯并呋喃荧光大 大增强 • n——π*跃迁变为 π——π*跃迁
问题：从分子结构和光谱特性讨 论有机显色剂和荧光试剂的联系 与区别。
• 磺酸基含有不饱和键，表现出吸电子性 能，应减弱荧光 • 但它易离解出H带负电荷，又体现出推电 子的行为，使荧光增加 • 增减相低，磺酸根的引入一般无显著荧 光变化，最明显的是试剂水溶性的增加
取代基数量及其所处位置的影响 • 对于不同的发光母体，同类取代基所处 位置不同所表达的荧光强弱变化规律也 不相同 • 小体积取代基所贡献的共轭效应小只是 体现出其电荷影响 • 大的取代基如苯或乙炔基苯，其共轭效 应大，取代后扩大共轭体系，荧光增强 的效应大于其吸电子使荧光减弱的效应 结果是取代后的荧光强度不是减弱而 是大大增强