生化检验辅导：腺苷脱氨酶(ADA)测定及意义

腺苷脱氨酶测定

腺苷脱氨酶测定检验科于2012年7月开展血液ADA检测，该试验主要用于辅助诊断肝脏疾病，指导临床治疗，取得了良好的效果。

现总结如下：1.概述腺苷脱氨酶是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，属于巯基酶，每分子至少含2个活性巯基，其活性能对氯汞甲酸完全抑制。

ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷，再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤，其代谢缓和终产物为尿酸。

腺苷脱氨酶是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶。

测定血液、体液中的ADA及其同工酶水平对某些疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研究日趋受到临床重视。

ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。

ADA广泛分布于人体各组织中，T淋巴细胞含量尤其丰富。

血清ADA活性升高见于急性肝炎、酒精性肝纤维化、慢性活动性肝炎、肝硬化、病毒性肝炎和肝细胞瘤病人，结核病渗出液中也可见ADA活性增高。

结合ALT或γ-GT，检测病人血清ADA 活性对肝脏疾病诊断更具有独特价值。

2.检测仪器与原理：检测所用仪器为日立7180全自动生化分析仪，检测原理：ADA 催化腺嘌呤核苷脱氨转变为次黄嘌呤核苷，再经嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）作用生成次黄嘌呤。

次黄嘌呤经次黄嘌呤氧化酶（XOD）作用转变为尿酸和过氧化氢（H2O2）。

H2O2在过氧化物酶（POD）存在的情况下，可与N-乙醛-N-（2-羟基-3-硫丙基）-3-甲基苯胺（EHSPT）和氨基安替比林（4-AA）生成醌染料，醌染料生成速率与ADA含量相关。

3.技术优点：该技术具有测定精密度高，抗干扰能力强，标本中胆红素≤342umol/L，血红蛋白≤200mg/dl，甘油三酯≤8.47mmol/L，抗坏血酸≤4mg/dl 及NH4+对本试剂测定无影响，适合自动化快速测定的特点，为临床常规开展ADA检测应用创造了有利条件。

4.参考范围：4-24U/L，或66-398nkat/L。

ADA 酶比色法

腺苷脱氨酶（ADA ）测定试剂盒（酶比色法）使用说明书【产品用途】本试剂用于测定血清、胸腹水、脑脊液中的腺苷脱氨酶活性。

【临床意义】肝脏疾病时，本酶活性往往升高，有助于黄疸的鉴别诊断。

在阻塞性黄疸时，此酶活性升高很少，而在肝实质性损伤时，此酶和转氨酶往往同时升高，特别在慢性活动性肝炎和肝硬变时，转氨酶阳性率较低，增高幅度也不明显，而ADA 活性的阳性率可达90%左右，增高程度也较明显。

同时ADA 检测对白血病、伤寒、出血热也有辅助诊断作用。

测定胸腹水及脑脊液标本中的ADA 活性，有鉴别诊断价值。

结核性胸腹水中ADA 活力显著高于癌症及炎症胸腹水中ADA 活力，对早期诊断结核性胸、腹膜炎有较高的敏感性和一定的特异性。

此外，脑脊液ADA 检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标，结核性脑膜炎ADA 活性升高，病毒性脑膜炎不升高。

【适用范围】液体双试剂，即开即用，自动化分析仪用。

【产品规格】R 1 50ml ×2 R 2 50ml ×1【试剂成份】R 1Tris-HCl pH8.0 50mM4-AA 2mM PNP 0.1kU/mLXOD 0.2kU/mL POD 0.6kU/mL 稳定剂 R 2 Tris-HCl ph4.0 50mM 腺苷 10mMEHSPT 2mM【检测原理】腺苷在腺苷脱氨酶作用下脱氨基形成次黄苷，次黄苷在PNP 作用下生成次黄嘌呤，次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶（XOD ）作用下转化为尿酸和过氧化氢（H 2O 2），H 2O 2与EHSPT 和4-氨基安替比林（4-AA ）反应生成醌色物，显色强度与ADA 活性成正比。

腺苷−−−→−ADA次黄苷 + NH 3 次黄苷 + Pi −−→−PNP次黄嘌呤 + 核酸-1-磷酸次黄嘌呤 + 2H 2O + 2O 2−−−→−XOD 尿酸+ 2H 2O 22H 2O 2 + 4-AA + EHSPT −−→−POD醌亚氨染料+ H 20【样本采集】新鲜非溶血血清或血浆，ADA 在4℃时可稳定1周。

腺苷脱氨酶测定临床意义

腺苷脱氨酶测定临床意义
郭文杰
【期刊名称】《实用医技杂志》
【年(卷),期】2006(13)2
【摘要】腺苷脱氨酶（ADA）为一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶，其作用是催化水解腺苷生成肌苷和氨。

ADA广泛存在于各组织中，以盲肠、小肠黏膜、脾脏、胸腺中含量最高，肝脏、肺、肾、心脏、骨骼肌、神经组织等处含量较低，肝脏含量约为小肠的7％～10％。

肝内ADA90％存在与细胞浆水溶性部分，其余在细胞核内。

此外，血细胞（红细胞、粒细胞、淋巴细胞）内ADA活性约为血液中40倍～70倍，因此测定ADA时应避免溶血。

【总页数】2页(P321-322)
【作者】郭文杰
【作者单位】运城市中心医院,山西,运城,044000
【正文语种】中文
【中图分类】R446.6
【相关文献】
1.肝硬化患者血清前清蛋白、总胆汁酸、腺苷脱氨酶、胆碱酯酶测定的临床意义[J], 马丽;涂斌
2.慢性肝病患者血清腺苷脱氨酶测定的临床意义 [J], 石鹏辉;李伟民;李永勤
3.糖尿病并发症患者血清腺苷脱氨酶测定的临床意义 [J], 朱征;杨敏;黄倩
4.乙肝患者血清腺苷脱氨酶活性测定的临床意义 [J], 孙福明
5.脑脊液腺苷脱氨酶测定对结核性脑膜炎诊断的临床意义 [J], 谢东玲
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腺苷脱氨酶(ADA)

腺苷脱氨酶（ADA）参考值：0-15U/L 海丰参考区间4~24U/L介绍：腺苷脱氨酶(ADA)为一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶，其作用是催化水解腺苷生成肌苷和氨。

ADA广泛存在于各组织中，以盲肠、小肠黏膜、脾脏、胸腺中含量最高，肝脏、肺、肾、心脏、骨骼肌、神经组织等处含量较低，肝脏含量约为小肠的7%~10％。

肝内ADA90％存在与细胞浆水溶性部分，其余在细胞核内。

此外，血细胞(红细胞、粒细胞、淋巴细胞)内ADA活性约为血液中40倍~70倍，因此测定ADA时应避免溶血。

血清中的ADA主要来自肝脏，所以肝细胞损伤或膜通透性增强，均可使血中酶活性增高，故可依据该酶活性增高或降低反映肝细胞损伤和恢复程度。

血清腺苷脱氨酶（ADA）正常值：(1)酶速率法(37℃)：健康成年人：7.7-19.3 U/L(2)分光光度法：<25 U/L(3)比色法：健康成年人为：5～25 U/L诊断参考：肝脏疾病：ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。

一．ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与AIT或GGT等组成肝酶谱。

（1）用于判断急性肝损伤及残留病变急性肝炎时ALT明显升高。

ADA仅低度，中度升高。

但重症肝炎发生酶胆分离时，尽管ALT不高，而ADA常明显升高。

而ALT恢复正常，ADA持续升高者，常易复发或易迁延为慢性肝炎。

（2）协助诊断慢性肝病在反映慢性肝损伤时ADA较ALT为优。

慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌患者血清ADA活性显著升高，因而可判断慢性肝病的程度。

另外，慢性活动性肝炎活性明显高于慢性迁延性肝炎。

故可用于二者的鉴别诊断。

（3）有助于肝纤维化的诊断ADA活性差异与肝细胞损害关系不大，与肝纤维化程度相关。

肝纤维化程度增加，ADA活性增加。

（4）有助于黄疸的鉴别据文献报道，阻塞性黄疸血清ADA活性明显低于肝细胞性黄疸及肝硬化伴黄疸。

血清α-岩藻糖苷酶与血清腺苷脱氨酶（ADA）

血清α-岩藻糖苷酶与血清腺苷脱氨酶（ADA）
血清α-岩藻糖苷酶检测的临床意义：
1.AFU的敏感性高于AFP，特异性差于AFP。

两者的检测无明显的相关性，但联合检测可以提高肝癌的检出率。

特别是对AFP阴性和小细胞肝癌的诊断价值更大。

原发性肝癌（PHC）患者的血清中AFU 活性不仅高于正常对照，而且显著高于转移性肝癌，肝硬化等疾病。

2. 原发性肝癌与慢性肝炎，肝硬化之间的鉴别诊断。

在慢性肝炎，肝硬化患者的血清中AFU一般仅轻度升膏，且随疾病的治愈而好转降低。

而原发性肝癌患者血清中的AFP持续升高，且幅度较大。

3. 血清中的AFU随妊娠周数的增加而增加，但在自然分娩或人工终止妊娠后回迅速下降，5天后降至正常水平。

4. 有相关的试验证明AFU的检测与CA125的检测对卵巢上皮细胞癌的灵敏度和特异性基本一致，但还需要进一步的证明。

血清腺苷脱氨酶（ADA）检测的临床意义：
ADA在良恶性难辨的渗出液鉴别诊断上有重要的价值。

国内外的研究表明，ADA对诊断结核性渗出液的特异性与敏感性明显优于活检和细菌学方
法。

在结核性胸腹水中ADA的活性明显增高，而癌性胸腹水不增高，血清ADA二者无明显差别。

此外，脑脊液ADA的检测可做为中枢神经系统疾病的
诊断和鉴别诊断，结核性脑膜炎显著增高，病毒性脑炎不增高，颅内肿瘤及中枢神经系统白血病稍微增高。

腺苷脱氨酶(ADA),试剂标准操作规程(SOP)--ADA

试剂标准操作规程目录1.检测原理2.标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理腺苷在腺苷脱氨酶作用下脱氨基形成黄苷。

黄苷在PNP作用下生成次黄嘌呤，次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶（XOD）作用下转化为尿酸和过氧化氢（H2O2）。

H2O2与EHSPT和氨基安替比林（4-AA）反应生成有色染料，产物的颜色与ADA活性成正比。

ADA腺苷+H2O -----------------------黄苷+ 氨PNP黄苷+ 磷酸------------------------次黄嘌呤+ 核糖-1-磷酸XOD次黄嘌呤2H2O2+2O2----------------------尿酸+H2O2POD2H2O2+4-AA+EHSPT -----------------------醌式染料2．标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。

注意有无应用影响测试项目的药物。

此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。

应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：血浆使用EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。

2.4 标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，置洁净试管加盖低温保存。

ADA的临床意义

ADA的临床意义ADA的临床意义发布时间：2013-04-10 10:16:52 浏览次数：5 发布人：张继岭（检验科）ADA的临床意义一 ADA的生物学特性及来源腺苷脱氨酶(Adenosine deaminase, ADA)是一种嘌呤核苷分解代谢中的重要酶类，可特异性催化腺嘌呤核苷产生不可逆脱氨反应生成次黄嘌呤核苷, 再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤, 后者在嘌呤氧化酶作用下生成代谢终产物尿酸经肾脏排出体外。

ADA广泛分布于人体各组织中，以胸腺、脾和其他淋巴组织中含量最高，肝、肺、肾和骨胳肌等处含量较低。

血液中ADA主要存在于红细胞、粒细胞和淋巴细胞，其活性约为血清的40～70倍，T淋巴细胞比B淋巴细胞该酶活性更高。

二 ADA的临床意义ADA与机体的细胞免疫功能有重要关系，测定血液、体液中的ADA对于某些疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研究具有重要意义。

下面就ADA的临床价值进行简要概述。

（1）肝脏疾病ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。

血清中的ADA活性测定可用于：①判断急性肝损伤及残留病变，急性肝炎时，ADA轻、中度升高，但重症肝炎发生酶胆分离时，ADA明显升高。

急性肝炎后期，ADA增高率高于ALT，其恢复正常时间也较后者为迟， ALT恢复正常而ADA持续升高者，常易复发或易迁延为慢性肝炎。

②协助诊断慢性肝病，可作为慢性肝病的筛选指标。

慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌患者血清ADA活性显著升高。

其阳性率达85%～90%，慢性活动性肝炎ADA活性明显高于慢性迁延性肝炎，可用于二者的鉴别诊断。

③有助于肝纤维的诊断④有助于黄疸的鉴别，阻塞性黄疸血清ADA活性及阳性率均明显低于肝细胞性黄疸及肝硬化伴黄疸者。

（2）结核的诊断和鉴别诊断体液中ADA活性水平测定是诊断和鉴别诊断结核病的一个重要辅助手段。

结核患者的血清、胸腹水、脑脊液、支气管肺泡灌洗液中的ADA活性都有不同程度地升高。

血清腺苷脱氨酶ADA测定

血清腺苷脱氨酶ADA测定1.实验原理应用ADA偶联嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)，黄嘌呤氧化酶(XOD)和过氧化物酶(POD)反应连续监测法。

ADA酶解腺苷(Adenosine)脱氨产生次黄苷(Inosine)；再通过偶联PNP的作用，生成次黄嘌呤(Hypoxanthine);后者在XOD氧化作用下生成尿酸和过氧化氢；最后在POD的作用下H2O2再与N-乙基-N-(2-羟基-3-硫丙基)-3-甲基苯胺(EHSPT)、4-氨基安替比林(4-AAP)反应(Trinder氏反应)，生成紫红色的有色醌。

通过测量有色醌550nm处吸光度上升的速度来测算ADA的活性。

ADAAdenosine + H2O Inosine + NH3PNPInosine + Pi Hypoxanthine + Ribose 1-phosphateXODHypoxanthine + 2H2O + 2O2 Uric acid + 2H2O2POD2H2O2 + 4-AA P+ EHSPT 4H2O + Quinone dy e2. 标本：2.1 病人准备：新鲜血清，采血后应及时分离，避免溶血。

2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。

3. 标本存放：血清，采血后应及时分离避免溶血，ADA在4℃稳定一个星期。

4. 标本运输：冰冻条件下保存运输。

5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血等存运输的标本。

6. 实验材料6.1 试剂：亚太ADA试剂盒（H013 090920 试剂1＋试剂2）6.1.1 试剂组成6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。

试剂有效期为12个月。

试剂必需避光保存。

试剂不可冰冻。

6.1.4 变质指示：试剂出现颗粒或浑浊，被视作变质，应停止使用。

6.1.5 注意事项：试剂请勿直接接触皮肤、眼睛，如有接触，请用大量清水清洗。

请勿吞服。

6.2 校准品：使用亚太提供的专用校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：奥林巴斯AU640生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU640生化分析仪项目测定参数.SOP文件。

腺苷脱氨酶(ADA)的检测及临床应用

显著增高加。
ＡＩ嘿呤饮ｆ分解代鲥过程中起关键作用的酶，能）Ａ１：它
催化腺嵘呤核＿降解为次黄嘌呤核苷，后经核苷磷酸化酶催ｆ｛＝而化成次嘌呤，终钣化成代谢产物尿酸。最
４重症联合免疫缺陷病（ＣＤ的产前诊断．ＳＩ）
ＡＩ缺）Ａ
乏与ＳＩＣＤ有关，至今发现约有１４／／～１２的ｇＩ因先天缺ＣＤ是
乏ＡＤＡ造成的，且也证实了ＡＤ属常染色体隐性遗传。并Ａ
肝损害程度方面，结核患者服用抗痨药物最常见引起肝损如
害，Ａ较Ａ敏感，且可作为非甲非乙型肝炎的标记。ＡＤＩＴ并
在临床方面的应用利用相同血型红细胞悬液，处理破坏其中的淋巴细胞后经
临床测定胎儿羊水中纤维母细胞ＡＤＡ活性能有效地对ＡＤＡ
ＡＩ）Ａ属于一种筑幕酶，一分子含两个活性巯基，活性每其能被对氯笨｝酸完伞抑制。Ａ｝１ＤＡ基因位于第２Ｏ对染色体
孙菲
【键词】腺苷脱氨酶；方法；临床实验室技术关
中图分类号：４６１Ｒ４．
文献标识码：Ｂ
文章编号：６３４３（０８１一１１Ｏ１７ —１０２０）２ｌ５一２有关资料证实，性淋巴细胞性白血病的Ｔ淋巴细胞活性增急强，而慢性淋巴细胞性白血病和何杰金氏淋巴瘤患者外周血Ｔ

血清腺苷脱氢酶

检验科新项目简介血清腺苷脱氨酶（ADA）活性测定简介ADA在良恶性难辨的渗出液鉴别诊断上有重要价值。

ADA对诊断结核性渗出液的特异性和敏感性明显优于活检和细菌学检查。

结核性胸腹水ADA活性显著增高，癌性胸腹水不增高，而血清ADA活性二者无显著差别。

此外，脑脊液ADA检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标。

结核性脑膜炎显著增高，病毒性脑膜炎血清总胆汁酸（TBA）的测定简介血清TBA测定对肝外胆管阻塞和肝内胆汁淤积的诊断，有较高的灵敏度。

包括胆胱抑素C简介机体内胱抑素C是由肾小球滤出的，肾小球滤出液中胱抑素C被肾小管重新吸收的胱抑素C降解而不再返回到血液循环中。

当滤出液减少时显示肾脏功能减退，相应的血中的某些物质如胱抑素C水平升高，因此可以通过胱抑素C水平判断患者的肾脏功能。

胱抑素C作为肾功评价指标有许多优点。

与肌酐不同，肌肉量、性别、年龄以及种族差异对胱抑素C没有影响。

肾功正常时，血液中胱抑素C水平稳定，而当肾功退化时，血液中胱抑素C水平开始升高，甚至在CFR下降前即可被检测出来。

胱抑素C可替代肌酐和肌酐清除率对确诊或怀疑肾脏疾病患者的肾功能障碍进行筛查和监测。

对于不是很适合测定肌酐清除率的患者来讲，胱抑素C检测特别有用，如肝硬化、异常肥胖、营养不良或肌肉量减少的患者。

胱抑素C可早于其他肾功检测项目反映肾脏疾病，特别抗RF、抗链球菌溶血素“O”定量测定简介1.70-90%的RF患者抗RF阳性，抗RF测定是美国风湿学会1987年类风湿性关节炎诊断标准之一。

2.抗链球菌溶血素“O”为A族溶血性链球菌在生长过程中可见产生的毒素，检测血清中的相应抗体有利于风湿性疾病的诊断。

以上两项目均采用免疫比浊法进行全自动检测，不但灵敏度高，而且有检测速度快。

胸腹水中腺苷脱氨酶ADA检测的临床意义

胸腹水中腺苷脱氨酶ADA检测的临床意义作者：宋瑞来源：《养生保健指南》2014年第10期摘要：目的探讨检测胸腹水腺苷脱氨酶（ADA）在鉴别结核性、细菌性、无菌性胸腹水患者的临床意义。

方法对我院2009年3月-2010年6月住院诊断有胸腹水的患者，测定胸腹水ADA，分三组：结核性胸、腹水组17例，细菌性胸、腹水组33例，无菌性胸、腹水组31例。

结果细菌性胸、腹水组ADA值与无菌性胸、腹水组比较差异无显著性（P>0.05），结核性胸腹水组ADA值显著高于细菌性胸、腹水组和无菌性胸腹水组P关键词：胸腹水腺苷脱氨酶 ADA 检测1.材料与方法1.1 试剂与仪器试剂盒为豪迈生物有限公司提供，仪器为雅培8200全自动生化分析仪。

1.2 方法1.2.1研究对象分三组：（1）结核性胸、腹水组17例，男12例，女5例；年龄22～71岁，平均48.5岁，来自我院2009年3月-2010年6月住院病人，根据相关诊断标准确诊为结核性胸、腹膜炎病例。

（2）细菌性胸、腹水组33例，男20例，女13例；年龄24～60岁，平均41.2岁，通过细菌培养和涂片发现细菌。

（3）无菌性胸、腹膜水组31例，男22例，女9例；年龄33～75岁，平均45.6岁，通过涂片和细菌培养未发现细菌。

1.2.2 统计学处理统计学处理采用样本均数t检验。

2.结果3组患者胸腹水ADA水平比较，细菌性胸、腹水组与无菌性胸、腹水组ADA值差异无显著性（P>0.05），结核性胸、腹膜炎组ADA值显著高于细菌性胸、腹膜炎组与无菌性胸、腹胸水组P表1 患者胸腹水ADA（■±s）3.讨论胸腹水是由多种疾病引起的，目前尚没有一种指标能完全区分各种不同性质的胸腹水疾患，ADA是一种腺苷分解酶，其活性值升高主要与细胞免疫有关，尤其是淋巴细胞的激活。

在炎性的胸腹水中，T淋巴细胞盒单核-巨噬细胞被细菌激活，引起ADA升高，特别是在结核性胸腹水中ADA活性异常增高。

腺苷脱氨酶ADA测定

腺苷脱氨酶ADA测定1检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2原理ADA腺苷+H2O 肌苷+NH3PNP肌苷+Pi 次黄嘌呤+1-磷酸核糖XOD次黄嘌呤+2 H2O+2O2尿酸+2 H2O2PODH2O2 +4-AAP+EHSPT 4H2O+苯醌类3标本要求3.1使用新鲜血清,不使用血浆.3.2在采集血液后2h分离血清.3.38h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次.3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.4试剂4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司ADA试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1试剂组成试剂1 60 ml,试剂主要成分如下:Tris—HCL缓冲液（PH8.0）50.0mmol/L XO 0.2u/ml 4-AAP 2.0mmol/L POD 0.6u/mlPNP 0.1u/ml NaN3 0.2g/L试剂2 60 ml,试剂主要成分如下:Tris—HCL缓冲液（PH4.0） 50.0mmol/L EHSPT 2.0 mmol/L 腺苷 10.0mmol/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。

试剂1 与试剂2 启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定20天。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.2 校准品：4.2.1采用以检测用水为空白的方式进行校准。

4.2.2校准及校准频次的要求：正常情况下，应每周至少对测定进行一次校准。

当发生下列情况时（如：使用的试剂批号发生改变时、使用的仪器进行维修、保养或关键部件进行更换后、质控品的测定结果发生漂移或超出规定的范围等），应重新对测定进行校准后再对患者的样本进行检测。

ADA

3种同工酶具有不同的动力学性质: ADA1和ADA1 +CP最适PH为5.5~8.0，对腺苷的Km值为50umol/L。对2-脱氧腺苷与腺苷的活性之比为0.8，两者均对红-9-(2-羟基 -3-壬烷基)腺嘌呤抑制作用敏感。ADA2相对于前两种同工酶具有较低的最适PH、较高的催化腺苷Km值(2000umol/L)以及较低的2-脱氧腺苷与腺苷的活性之比值(0.2)，对红-9-(2-羟基-3-壬烷基)腺嘌呤抑制作用不敏感。
2. 5伤寒的诊断
在诊断伤寒的实验室检查方法中，血、粪培养虽可起确诊作用，但影响培养因素较多，阳性率也不高；骨髓培养阳性率高，但难普遍开展；而肥达氏反应近年来受抗生素影响，常出现假阳性或假阴性等异常结果。有研究表明，血清ADA 测定可用于伤寒的辅助诊断，其变化早于肥达氏反应。在伤寒患者发病初期的第1～4 天，ADA 就可明显增高。增高的机理可能是由于伤寒患者回肠末端淋巴结增大，大量淋巴细胞和巨噬细胞增生、坏死及肠黏膜破坏，受累淋巴结及肠黏膜释放大量ADA 所ห้องสมุดไป่ตู้ 。
2. 8 透析性腹膜炎的诊断
透析性腹膜炎时，透析液中ADA 活性增高,直至腹膜炎治愈，炎症消失后才明显下降。所以ADA活性测定对于腹膜透析并发腹膜炎的诊断有意义，可作为透析性腹膜炎比较稳定的诊断指标。
2.1.3肝纤维
肝硬化患者血清ADA活性明显高于急性黄疸型肝炎、慢性迁延性肝炎、慢性活动性肝炎、肝内多发性占位、阻塞性黄疸及对照组，慢性活动性肝炎者也明显高于慢性迁延性肝炎者及对照组，表明ADA活性差异关键在于肝纤维化程度，而与肝细胞损害关系不大。实验得出，用肝硬化的肝组织切片标本作肝纤维化程度的分级评分观察，发现积分均值≤1.5者ADA阳性率(38.46%)显著低于>1.5者(86.96%)，证实ADA活性与肝纤维化程度有关。随肝纤维化程度增加，ADA活性逐渐增加，即肝硬化>慢性活动性肝炎>慢性迁延性肝炎。

ADA

2. 8 透析性腹膜炎的诊断
2.1.2慢性肝病
在反映慢性肝损伤时ADA较ALT为优。慢性肝炎(CH)、肝硬化和肝细胞癌患者血清ADA 活性显著升高.其阳性率达85%~90%，而肝硬化时ALT多正常或轻度升高,故ADA活性测定可作为慢性肝病的筛选指标.失代偿期肝硬化ADA 活性明显高于代偿期肝硬化,因而可判断慢性肝病的程度。另外，慢性活动性肝炎(CAH)ADA 活性明显高于慢性迁延性肝炎(CPH)，故可用于二者的鉴别诊断。
1.3.1同工酶ADA1
细胞内ADA1存在的重要性也通过先天性ADA1缺乏患者的免疫无反应性显露出来,这是由于这些患者免疫细胞内的2’-脱氧腺苷内稳定状态失衡造成的. 其最适pH 为7.0～7.5,它对腺苷及2’-脱氧腺苷的亲和力相等, 使ADA1在生物体内具有很高的脱氨效应。
1.3.2同工酶ADA1 +CP ADA1 +CP分子量为280kD，实际上是由2条单键的ADA1分子和不具酶活力的200kD结合蛋白结合而成。
2.1.3肝纤维
肝硬化患者血清ADA活性明显高于急性黄疸型肝炎、慢性迁延性肝炎、慢性活动性肝炎、肝内多发性占位、阻塞性黄疸及对照组，慢性活动性肝炎者也明显高于慢性迁延性肝炎者及对照组，表明ADA活性差异关键在于肝纤维化程度，而与肝细胞损害关系不大。实验得出，用肝硬化的肝组织切片标本作肝纤维化程度的分级评分观察，发现积分均值≤1.5者ADA阳性率(38.46%)显著低于>1.5者(86.96%)，证实ADA活性与肝纤维化程度有关。随肝纤维化程度增加，ADA活性逐渐增加，即肝硬化>慢性活动性肝炎>慢性迁延性肝炎。
2. 5伤寒的诊断
在诊断伤寒的实验室检查方法中，血、粪培养虽可起确诊作用，但影响培养因素较多，阳性率也不高；骨髓培养阳性率高，但难普遍开展；而肥达氏反应近年来受抗生素影响，常出现假阳性或假阴性等异常结果。有研究表明，血清ADA 测定可用于伤寒的辅助诊断，其变化早于肥达氏反应。在伤寒患者发病初期的第1～4 天，ADA 就可明显增高。增高的机理可能是由于伤寒患者回肠末端淋巴结增大，大量淋巴细胞和巨噬细胞增生、坏死及肠黏膜破坏，受累淋巴结及肠黏膜释放大量ADA 所致。因此，ADA 检测对伤寒的早期诊断有较大的参考价值，特别是对细菌培养阴性的患者，结合肥达氏反应结果，可起到较好的辅助诊断作用。

腺苷脱氨酶在结核性胸腔积液中的诊断意义

腺苷脱氨酶在结核性胸腔积液中的诊断意义【摘要】目的探讨胸腔积液中腺苷脱氨酶（ADA）活性的高低与结核性胸腔积液患者之间的关系，为鉴别诊断结核性胸腔积液提供依据。

方法共收集106例结核性胸腔积液标本和对照组58例癌性胸腔积液标本，用ROCHE全自动生化分析仪对标本中的ADA活性进行测定。

结果结核性胸腔积液ADA活性明显增高，与对照组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。

结论腺苷脱氨酶测定对结核性胸腔积液的鉴别诊断与诊断具有较高的临床诊断意义。

【关键词】腺苷脱氨酶；胸腔积液；结核性；癌性胸腔积液是临床结核性胸膜炎患者和全身恶性肿瘤患者的常见症状。

目前胸腔积液检查方法较多，传统的病原学检测不仅工作流程繁琐时间较长而且阳性率也较低，不能为临床及时提供准确科学的诊断依据。

随着全自动生化分析仪的普及运用，ADA的检测以作为临床鉴别诊断结核性胸腔积液常用的一个指标。

1资料与方法1.1一般资料106例结核性胸腔积液标本均为2008年3月至2011年9月在本院住院的患者，结合临床症状和其他的检测结果，并进行抗结核治疗有效而确诊的诊断。

其中男64例，女42例，年龄14～71岁，平均（41.8±10.3）岁。

对照组为同期癌性胸腔积液患者58例，其中男性39例，女性19例，年龄23～78岁，平均年龄（42.6±11.7）岁，并作出了明确的临床诊断，既往无结核史。

1.2方法所有标本为患者住院后第二天穿刺抽取胸腔积液3ml，按检验操作规程抗凝，离心后取上清液检测。

ADA测定试剂盒是由北京利德曼生化股份公司提供，严格按照试剂说明书进行操作。

检测仪器为德国罗氏全自动生化分析仪P800模块，并按照实验室制订的SOP文件对生化分析仪进行每日、每周、每月维护保养，每日质控结果必须在控，检测方法及仪器固定。

结核性胸腔积液ADA 诊断界限值定为45U/L，即≥45U/L为结核性，＜45U/L为非结核性。

3讨论胸腔积液，特别是渗出性胸腔积液，临床对病因很难做出明确诊断，对于病因未明的渗出液，以前多采用多种检查方法进行检测，例如胸腔积液常规、LDH、肿瘤标志物检测，或者在胸腔积液中寻找病原菌、癌细胞、抗酸杆菌[1]等，以确诊病因。

腺苷脱氨酶

腺苷脱氨酶定义：催化腺苷水解脱氨成肌苷的氨基水解酶，是嘌呤代谢的必需酶。

腺苷脱氨酶作用机理腺苷脱氨酶（EC:3.5.4.4 adenosine deaminase ADA）是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，属于巯基酶，每分子至少含2个活性巯基，其活性能对氯汞甲酸完全抑制。

ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷，再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤，其代谢缓和终产物为尿酸。

人体分布情况ADA广泛分布于人体各组织中，以胸腺、脾和其他淋巴组织中含量最高，肝、肺、肾和骨胳肌等处含量较低。

血液中ADA主要存在于红细胞腺苷脱氨酶作用图、粒细胞和淋巴细胞，其活性约为血清的40～70倍，T淋巴细胞比B淋巴细胞该酶活性更高。

人ADA基因位于第20对染色体上，并呈现出遗传多态性现象，其同工酶有3种，分别为ADA1，ADA1＋CP和ADA2。

ADA1分子量为35kD，为一种单链蛋白质；ADA1＋CP分子量为280kD，实际上是由2条单键的ADA1分子和人个不具酶活力的200kD结合蛋白结合而成；ADA2分子量为100kD。

3种同工酶具有不同的动力学性质：ADA1和ADA1＋CP最适PH为5.5～8.0，对腺苷的Km值为50umol/L。

对2’-脱氧腺苷与腺苷的活性之比为0.8，两者均对红-9-（2-羟基-3-壬烷基）腺嘌呤[erythro-9-（2-hydroxyl-3-nonyl）adenine（EHNA）]抑制作用敏感。

ADA2相对于前两种同工酶具有较低的最适PH、较高的催化腺苷Km值（2000umol/L）以及较低的2’-脱氧腺苷与腺苷的活性之比值（0.2），对EHNA抑制作用不敏感。

ADA同工酶在各类组织和细胞中的分布不同，ADA1在脾脏、红细胞、淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞中占优势，ADA1＋CP在肝脏、肺、胰、肾组织和骨骼中占优势，ADA2只存在于单核细胞，目前在其他组织细胞中尚未检出。

临床意义腺苷脱氨酶是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶。