生物化学常用缓冲液
最全常用缓冲液配方及缓冲范围
最全常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种能够维持溶液pH值相对稳定的溶液。
它可以减少酸碱反应的影响，使物质在酸碱环境中保持稳定。
在生命科学实验室和工业生产中，常用的缓冲液有许多种。
下面是最常用的一些缓冲液配方及其缓冲范围。
1. Phosphate缓冲液：Phosphate缓冲液通常由磷酸二氢盐和磷酸氢二盐组成。
它的pH范围为2.1-7.4，在生物化学和细胞生物学实验中得到广泛应用。
配方1：-0.1M磷酸二氢盐，pH2.0-2.8-0.2M磷酸氢二盐，pH5.8-7.4配方2：-0.1M磷酸二氢盐，pH2.1-3.1-0.2M磷酸氢二盐，pH5.6-7.42. Tris缓冲液：Tris缓冲液由三羟甲基氨基甲烷（Tris）和其酸盐组成。
它的pH范围为7-9，在分子生物学和生化实验中广泛使用。
配方：- 1 M Tris HCl，pH 7.4-9.0- 1 M Tris base，pH 7.0-9.23.MES缓冲液：MES缓冲液是一种针对中性pH值（5.5-6.7）的缓冲液，常用于细胞生物学和酶活性实验。
配方：-0.1MMES，pH5.5-6.74.HEPES缓冲液：HEPES缓冲液是一种适用于细胞培养和酶活性实验的缓冲液，其pH 范围为6.8-8.2配方：-0.1MHEPES，pH6.8-8.25.CAPS缓冲液：CAPS缓冲液是一种适用于生化实验的缓冲液，其pH范围为9.7-11.1配方：-0.1MCAPS，pH9.7-11.1这些是最常用的缓冲液配方及其缓冲范围，可以根据实验的需要选择合适的缓冲液。
需要注意的是，在配制缓冲液时应使用高纯度的化学品，并根据实验要求精确控制缓冲液的pH值。
此外，在实验过程中应注意缓冲液的保存和稳定性，以确保实验结果的准确性。
常用缓冲液及培养基配方
常用缓冲液及培养基配方缓冲液和培养基是生物学实验中常用的重要试剂，它们的配方的选择对实验结果有着重要的影响。
下面将介绍几种常用的缓冲液和培养基的配方及其用途。
一、缓冲液配方1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液常被用于细胞培养和生物化学实验中，它的使用范围很广。
常用的磷酸盐缓冲液有PBS（磷酸盐缓冲盐水），配方如下：-NaCl8g-KCl0.2g-Na2HPO41.42g-KH2PO40.24g将以上物质溶解在1L的去离子水中，pH值调到7.4，即可得到1×PBS缓冲液。
2. Tris缓冲液Tris缓冲液在分子生物学实验中常被用作DNA和RNA电泳的产物混合液。
常用的Tris缓冲液有Tris-HCl缓冲液和Tris-acetate缓冲液。
以下是Tris-HCl缓冲液的配方：- Tris 12.1 g-HCl(10M,pH7.6)10mL将Tris和HCl分别溶解在800 mL去离子水中，然后添加水调至1 L，pH值调节到目标值即可。
Tris-acetate缓冲液的配方与Tris-HCl相似，只是在Tris-HCl的基础上添加乙酸。
3. Glycine缓冲液Glycine缓冲液常被用于电泳实验中，用于电泳缓冲液和电泳媒介液的制备。
以下是Glycine缓冲液的配方：- Glycine 3 g- Tris 4.8 g-SDS0.207g-EDTA0.37g将以上物质溶解在1 L的去离子水中，pH值调至8.3，即可得到1×Glycine缓冲液。
1.LB培养基LB培养基是最常用的细菌培养基之一，用于培养大肠杆菌等革兰氏阴性菌。
以下是LB培养基的配方：- Tryptone 10 g- Yeast extract 5 g-NaCl10g将以上物质溶解在1L的去离子水中，加热至溶解，然后进行高压灭菌即可得到LB培养基。
2.M9培养基M9培养基是一种缺乏氮、氨基酸和碳的最小培养基，常被用于重组DNA的传输。
常用缓冲体系缓冲能力
缓冲体系的缓冲能力是指其抵抗pH变化的能力，即在加入酸或碱后，能够保持溶液pH相对稳定的性质。
缓冲体系的缓冲能力受到多种因素的影响，包括缓冲对的浓度、解离常数以及溶液的离子强度等。
在生物化学和分子生物学实验中，常用的缓冲体系包括磷酸盐缓冲液（PBS）、Tris-HCl缓冲液、HEPES缓冲液等。
这些缓冲体系具有不同的缓冲范围和缓冲能力，适用于不同的实验条件和需求。
磷酸盐缓冲液（PBS）是一种常用的缓冲体系，其缓冲范围在pH 6.8-7.8之间。
PBS的缓冲能力主要来自于其组分中的磷酸氢二钠和磷酸二氢钾，这两种物质在水中可以解离出氢离子和氢氧根离子，从而起到缓冲作用。
PBS的缓冲能力相对较强，适用于大多数生物化学和分子生物学实验。
Tris-HCl缓冲液的缓冲范围在pH 7.0-9.0之间，其缓冲能力主要来自于Tris 分子中的氨基和羧基。
Tris-HCl缓冲液的缓冲能力较强，且对温度和离子强度的变化不太敏感，因此在许多生物化学和分子生物学实验中也得到广泛应用。
HEPES缓冲液的缓冲范围在pH 6.8-8.2之间，其缓冲能力主要来自于HEPES分子中的磺酸基和氨基。
HEPES缓冲液具有较好的缓冲能力和稳定性，适用于需要较长时间保持pH稳定的实验，如细胞培养和酶学反应等。
总的来说，不同缓冲体系的缓冲能力因其组分和浓度不同而有所差异。
在选择缓冲体系时，需要根据实验条件和需求来选择具有适当缓冲范围和缓冲能力的缓冲液。
同时，还需要注意缓冲液的离子强度、温度敏感性等因素对实验结果的影响。
pbs原理
pbs原理PBS原理。
PBS（Phosphate Buffered Saline）是一种常用的生物化学缓冲液，广泛应用于生物学实验、细胞培养、免疫学实验等领域。
它的主要作用是维持生物样本在实验过程中的稳定性，避免PH值的波动对实验结果的影响。
本文将介绍PBS的原理及其在实验中的应用。
一、PBS的组成。
PBS主要由NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4四种化学物质组成，其中NaCl和KCl是用来维持PBS的渗透压，Na2HPO4和KH2PO4则用来调节PBS的PH值。
这些成分的比例和浓度都是经过严格计算和实验确定的，保证了PBS在不同实验条件下的稳定性和可靠性。
二、PBS的原理。
1. 缓冲作用。
PBS中的Na2HPO4和KH2PO4能够在一定范围内稳定PH值，使得PBS能够在不同实验条件下保持稳定的PH值。
这种缓冲作用对于需要保持生物样本在实验过程中的稳定性非常重要，避免PH值的变化对实验结果产生影响。
2. 渗透调节作用。
NaCl和KCl在PBS中起到维持渗透压的作用，保证了细胞在PBS中的正常生理状态。
在进行细胞培养或细胞实验时，PBS能够有效地保持细胞的形态和功能，避免渗透压的变化对细胞产生不良影响。
三、PBS在实验中的应用。
1. 细胞培养。
在细胞培养过程中，PBS常用于洗涤细胞，去除培养基中的残留物质，同时保持细胞的稳定性。
洗涤后的细胞可以用PBS悬浮，方便进行细胞计数、传代等操作。
2. 免疫学实验。
在免疫学实验中，PBS常用于洗涤细胞、稀释抗体、稀释细胞悬液等操作。
PBS的稳定性和渗透调节作用保证了实验结果的准确性和可靠性。
3. 蛋白质纯化。
在蛋白质纯化过程中，PBS常用于洗涤蛋白质，去除杂质和保持蛋白质的稳定性。
PBS的缓冲作用可以有效保护蛋白质的天然构象和功能。
四、总结。
PBS作为一种常用的生物化学缓冲液，在生物学实验、细胞培养、免疫学实验等领域发挥着重要作用。
它的原理主要包括缓冲作用和渗透调节作用，保证了生物样本在实验过程中的稳定性。
生物化学常用缓冲液
生物化学常用缓冲液（一）基本概念⑴ Bronsted-Lowry酸碱理论（酸碱质子理论）:1923年由丹麦化学家J.N.Brφnsted和英国化学家T.M.Lowry同时提出了酸碱质子学说，认为凡能释放质子的分子或离子（如：H2O，HCl，NH4+，HSO4- 等）称为酸，凡能接受质子的分子或离子（如：H2O，NH3，Cl-等）称为碱。
因此，一种酸释放质子后即成为碱，称为该酸的共轭碱，同样一种碱与质子结合后，形成对应的酸，称为该碱的共轭酸。
如盐酸在水中的解离：HCl Cl- ＋H+HCl是酸，Cl-是它的共轭碱。
pH = pKa+log{[质子受体]/[质子供体]}⑵缓冲体系的设计：1960年，N.E.Good和他的同事们提出，适合生命科学研究使用的缓冲体系应具有以下特性：① pKa值在6-8之间；②在水中的溶解度高；③不易穿透生物膜；④盐效应小；⑤离子浓度、溶液组成和温度对解离的影响小；⑥不与金属离子生成复合物或沉淀；⑦该缓冲剂化学稳定；⑧紫外和可见光波长范围内光吸收小；⑨易制得高纯度的盐。
（二）生物化学常用缓冲液⑴磷酸盐缓冲液：磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由於它们是二级解离，有二个pKa值，所以用它们配制的缓冲液，pH范围最宽：NaH2PO4： pKa1＝2.12， pKa2＝7.21Na2HPO4： pKa1＝7.21， pKa2＝12.32配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH＝1-4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6-8，配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10-12。
用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS（十二烷基硫酸钠）会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH范围宽；③pH受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH变化小，如稀释十倍后pH的变化小于0.1。
生物化学实验常用缓冲液的配制方法
生物化学实验常用缓冲液的配制方法
一、TRIS-HCl缓冲液的配制
1、TRIS-HCl缓冲液的配制原理
TRIS-HCl缓冲液，也称为三胍盐缓冲液，是一种有机盐缓冲液。
其配制原理是将三胍钠(三胍氢氯化钠)和氢氯化钠混合在一起，以获得所需的pH值，使其达到缓冲效果。
缓冲效果可以使溶液保持稳定的pH值。
2、TRIS-HCl缓冲液的配制
（1）准备实验室试剂
三胍钠（TRIS），氢氯化钠（NaCl）和蒸馏水
（2）计算配制配方
根据欲得到的pH值和需要的量，计算配制配方。
（3）放置容器
将三胍钠和氢氯化钠分别放入容器中。
（4）添加蒸馏水
用蒸馏水将两种盐分别稀释至相等比例。
（5）搅拌混合
用搅拌器或磁力搅拌器将两种盐混合均匀。
（6）温度调节
将混合物加热至37℃，保持温度，节省时间。
（7）校准pH
用pH计校正混合物的pH值，确保其在正确的pH范围内，调节pH值。
（8）放入瓶中
将缓冲液放入容器中，容器密封后存放，防止受污染。
二、枸橼酸缓冲液的配制
1、枸橼酸缓冲液的配制原理
枸橼酸液是一种有机碱性液，其原理是将枸橼酸(Citric acid)和碳
酸钙(CaCO3)混合在一起，以获得所需的pH值，使其达到效果。
常用缓冲液配方及缓冲范围
常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种水溶液，其中含有在酸性或碱性条件下能够保持pH稳定的化学物质。
缓冲液广泛应用于生物化学、分子生物学、生物技术和医学等领域的实验和研究中。
下面是一些常用的缓冲液配方及其应用范围。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是一种中性缓冲液，常用于生物化学和分子生物学实验。
它的配方通常为：- 10 mM Tris base-1mMEDTA-向溶剂中调整pH至7.4Tris缓冲液可用于DNA和RNA的电泳、酶反应、细胞培养等实验中。
2.PBS缓冲液PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物学缓冲液，具有缓冲能力强和与生物体液成分相似的特点。
它的配方通常为：-137mMNaCl-2.7mMKCl-10mMNa2HPO4-2mMKH2PO4-向溶剂中调整pH至7.4PBS缓冲液可用于细胞培养、免疫荧光染色、蛋白质凝胶电泳等实验中。
3.TAE缓冲液TAE（三乙酸缓冲液）是一种常用的核酸电泳缓冲液，其配方为：- 40 mM Tris base-20mM醋酸-1mMEDTA-向溶剂中调整pH至8.0TAE缓冲液可用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳，如聚丙烯酰胺凝胶电泳（）和琼脂糖凝胶电泳（agarose gel electrophoresis）。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液是一种常用的酸性或碱性缓冲液。
它的配方基于Tris缓冲液，在Tris缓冲液基础上调整pH的方法是在配方中加入稀盐酸或稀氢氧化钠。
例如，对于Tris-HCl缓冲液的配方为：- 50 mM Tris base-向溶剂中加入HCl调整pH至所需的值（通常为7.2至9.0）Tris-HCl缓冲液可用于酶反应、蛋白质组学研究、PCR等实验中。
这只是一些常用的缓冲液配方，根据不同实验需求和物质稀释要求，还有其他许多缓冲液的配方。
对于缓冲液的选择，关键在于根据实验要求选取适当的缓冲体系，并对缓冲液中所需的化学物质浓度、pH值等进行精确调整。
常用的三种标准缓冲溶液
常用的三种标准缓冲溶液
1. 磷酸盐缓冲溶液，磷酸盐缓冲溶液是一种常用的生物化学和
分子生物学实验中使用的缓冲溶液。
常见的磷酸盐缓冲溶液包括磷
酸盐缓冲液（PBS）、Tris-HCl缓冲液等。
磷酸盐缓冲溶液的pH范
围广，能够在不同的实验条件下稳定维持所需的pH值。
2. 乙酸/乙酸钠缓冲溶液，乙酸/乙酸钠缓冲溶液是另一种常用
的生物化学实验中使用的缓冲溶液。
它主要由乙酸和乙酸钠组成，
能够在酸性条件下有效地维持所需的pH值。
乙酸/乙酸钠缓冲溶液
在许多生化实验中被广泛应用，如蛋白质电泳、核酸电泳等。
3. 碳酸氢盐缓冲溶液，碳酸氢盐缓冲溶液是一种常用的生物化
学实验中使用的缓冲溶液，由碳酸氢盐和碳酸盐组成。
碳酸氢盐缓
冲溶液通常用于在生理pH范围内进行实验，如细胞培养、酶反应等，能够有效地维持稳定的pH值。
这三种标准缓冲溶液在生物化学、分子生物学和生物医学实验
中被广泛应用，能够提供稳定的pH环境，保证实验的准确性和可重
复性。
在实验设计和操作中，选择合适的缓冲溶液对于实验结果的
准确性和稳定性至关重要。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法缓冲液（Buffer）在生物化学和分子生物学实验中起到了至关重要的作用，它可以维持溶液的稳定性，调节pH值，同时还提供所需的离子环境。
这是一个关于不同类型缓冲液的配制方法的综合指南。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一、以下是Tris缓冲液的配制方法：- 配制0.1 M Tris缓冲液（pH 7.4）：a. 在100 mL去离子水中加入12.11 g Tris（Tris(hydroxymethyl)aminomethane）粉末。
b.用盖住容器的滤纸纸带覆盖容器，并将其放在磁力搅拌器上。
c.用盖住容器的锡纸覆盖容器，加热至溶解。
搅拌以加速溶解过程。
d.继续搅拌，使其冷却至室温。
e.使用0.1MHCl或0.1MNaOH调节pH值至7.4，直到所需的pH值稳定。
f.用去离子水稀释至总体积100mL。
2.PBS缓冲液PBS缓冲液是生物学实验中常用的缓冲液之一、以下是PBS缓冲液的配制方法：-配制10×PBS缓冲液：a.在1L去离子水中加入80gNaCl，2gKCl，14.4gNa2HPO4，2.4gKH2PO4b.使用10MNaOH或10MHCl调节pH值至7.4c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×PBS缓冲液：a.取10×PBS缓冲液100mL，用去离子水稀释至总体积1L。
3.TAE缓冲液TAE缓冲液常用于琼脂糖凝胶电泳。
以下是TAE缓冲液的配制方法：-配制50×TAE缓冲液：a. 在1 L去离子水中加入242 g Tris base，57.1 mL 0.5 M EDTA，100 mL冰醋酸。
b.用10MNaOH或10MHCl调节pH值至8.3c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×TAE缓冲液：a.取50×TAE缓冲液20mL，用去离子水稀释至总体积1L。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液常用于DNA或RNA的酶切反应。
各种缓冲液配制方法
各种缓冲液配制方法缓冲液是一种用于调节溶液的pH值的溶液，常用于实验室中的生物化学和分子生物学实验中。
根据所需的pH范围和实验目的，可以使用不同的缓冲液配制方法。
以下是一些常见的缓冲液配制方法：1.磷酸盐缓冲液（PBS）磷酸盐缓冲液是一种常见的生物学实验中使用的缓冲液。
它的制备方法如下：-取一个容器，加入8克氯化钠（NaCl），0.2克磷酸二氢钠（NaH2PO4），和1.44克磷酸氢二钠（Na2HPO4）。
-加入适量的去离子水，搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。
2. Tris缓冲液Tris缓冲液适用于pH 7-9范围内的实验。
制备方法如下：- 取一个容器，加入121.14克Tris（羟甲基氨基甲烷）。
-加入适量的去离子水，搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。
3.醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液适用于pH3-5范围内的实验。
制备方法如下：-取一个容器，加入20毫升醋酸钠三水合物（NaC2H3O2·3H2O）。
-加入6毫升醋酸。
-加入适量的去离子水，搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。
4.磷酸缓冲液磷酸缓冲液适用于pH2-8范围内的实验。
制备方法如下：-取一个容器，加入0.126克磷酸二氢钾（KH2PO4）。
-加入0.680克磷酸二氢钠（Na2HPO4）。
-加入适量的去离子水，搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。
5.碳酸氢盐缓冲液（HEPES缓冲液）HEPES缓冲液适用于pH6-8范围内的实验。
-取一个容器，加入10克HEPES。
-加入适量的去离子水，搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法缓冲液是一种用于调节溶液酸碱度（pH值）的溶液，它可以稳定溶液的pH值，满足实验的需要。
不同实验需要使用不同pH值的缓冲液，因此配制方法也会有所不同。
下面将介绍常见的几种缓冲液的配制方法。
1.磷酸盐缓冲液：磷酸盐缓冲液是最常用的一种缓冲液，在生物化学和分子生物学实验中广泛应用。
配制方法：-0.2M磷酸盐酸（pH2.5）：用稀磷酸（H3PO4）溶液调节酸度至所需pH值。
-0.2M磷酸盐盐（pH2.5）：用0.2M磷酸钠（Na2HPO4）溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的磷酸盐缓冲液。
2.乙酸缓冲液：乙酸缓冲液常用于酶催化反应的研究和生物制剂的稳定。
配制方法：-0.1M乙酸酸（pH3.6）：用浓烧碱（CH3COOH）溶液调节酸度至所需pH值。
-0.1M乙酸盐（pH3.6）：用0.1M乙酸钠（CH3COONa）溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的乙酸缓冲液。
3.碳酸氢盐缓冲液：碳酸氢盐缓冲液常用于生命科学实验中。
配制方法：-0.1M碳酸酸（pH6.0）：用稀碳酸（H2CO3）溶液调节酸度至所需pH 值。
-0.1M碳酸盐（pH6.0）：用0.1M碳酸氢钠（NaHCO3）溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的碳酸氢盐缓冲液。
4. Tris缓冲液：Tris缓冲液是一种多用途的缓冲液，在生物化学和分子生物学研究中广泛应用。
配制方法：- 0.1 M Tris酸（pH 8.0）：用三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液调节酸度至所需pH值。
- 0.1 M Tris盐（pH 8.0）：用0.1 M Tris盐溶液调节碱度至所需pH值。
- 混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的Tris缓冲液。
配制缓冲液时需要准备所需浓度的酸液和盐液，然后根据所需pH值逐渐调整酸度和碱度至目标值。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物化学缓冲液，用于洗涤和稀释生物化学试样。
配方：-NaCl：8g-KCl：0.2g-Na2HPO4：1.42g-KH2PO4：0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.4、用1M（摩尔浓度）盐酸或1M氢氧化钠进行调节。
2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基，适用于大多数细菌和酵母菌的培养。
配方：- 水解酪蛋白（tryptone）：10 g- 酵母粉（yeast extract）：5 g-NaCl：10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。
可以选择添加洗涤剂Tween-20（0.1%）以提高溶解度。
SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。
配方：-NaCl：175.3g- Na3Citrate·2H2O：88.2 g-EDTA：37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC（二硫酰二甲酯）处理，增强其功能。
4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。
配方：-甲醛：37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中，制备所需浓度的甲醛溶液。
5. β-羟丁酸钠（β-Hydroxybutyrate）溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂，用于生物化学实验中。
配方：-β-羟丁酸钠：1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。
这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方，实验室试剂和缓冲液种类丰富多样，具体使用取决于研究目的和实验要求。
在进行实验之前，建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书，并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。
生物化学实验常用缓冲液的配制方法
生物化学实验常用缓冲液的配制方法1、0.2mol/L 磷酸缓冲液*组份浓度0.2mol/L （pH 6.0）*配制量1L*配置方法1.称取磷酸氢二钠.12水8.82 g。
2.称取磷酸二氢钠.2水27.34g。
3.用去离子水溶解并定容至1L。
室温保存。
注意：此为母液，使用时稀释40倍使用。
2、洗脱液*组份浓度0.15mol/L （含0.15mol/L 氯化钠的0.005mol/L pH 6.0的磷酸缓冲液）*配制量10L*配置方法1.称取氯化钠87.66g。
2.用0.2mol/L pH6.0的磷酸缓冲液250mL溶解。
3.用去离子水稀释至10L。
室温保存。
3、0.3mol/L 磷酸缓冲液*组份浓度0.3mol/L （pH7.8）*配制量0.5L*配置方法1.准确称取磷酸氢二钠.12水49.150g。
2.磷酸二氢钠.2水2.000g。
3.用去离子水溶解并定容至0.5L。
室温保存。
注意：此为母液，使用时稀释10 倍使用。
4、0.2mol/L 乙酸缓冲液*组份浓度0.2mol/L （pH4.6）*配制量2L*配置方法1.准确称取乙酸钠.3水54.44g。
2.加入23mL冰乙酸，溶解。
3.用去离子水溶解并定容至2L。
4℃保存。
5、0.2mol/L 磷酸-柠檬酸缓冲液（pH 2.6、4.6、6.6）*组份浓度0.2mol/L*配制量各1L*配置方法1.母液A（0.2mol/L 的Na2HPO4溶液）：称取Na2HPO4.12 水143.256g，用去离子水定容至2L。
2.母液B（0.1mol/L 的柠檬酸溶液）：称取柠檬酸.1水42.028g用去离子水溶解定容至2L。
3. pH2.6、4.6、6.6的三种缓冲液如下表配制：pH值A（mL）B（mL）2.6 109.0 891.04.6 467.5 532.56.6 727.5 272.54.按上表混匀后，4℃保存。
6、20×SSC 缓冲液*配制量1L（pH7.0）*配置方法1.准确称取175.2g氯化钠。
pbs缓冲范围
pbs缓冲范围PBS（Phosphate-buffered saline）缓冲范围是一种常用的生物化学缓冲液，它在生物学研究和临床实验中起着重要的作用。
本文将从不同角度介绍PBS缓冲范围的应用和意义，以及其在实验中的注意事项。
一、PBS缓冲范围的概述PBS是一种含磷的盐溶液，主要由磷酸盐、氯化钠和氯化钾组成。
它的pH值通常在7.2-7.4之间，与生理盐水的pH值相似。
PBS具有良好的缓冲能力，能够维持生物体内细胞和组织的正常酸碱平衡。
因此，它被广泛用于细胞培养、细胞冻存、蛋白质和核酸的提取、免疫染色等实验中。
二、PBS缓冲范围的应用1. 细胞培养在细胞培养中，PBS被用于洗涤细胞，以去除培养基中的残留物和细胞分泌物。
同时，PBS也可以用作稀释细胞培养基或蛋白质溶液，以达到所需的浓度。
2. 细胞冻存在细胞冻存过程中，PBS被用作细胞的冻存液。
其缓冲能力可以保护细胞免受冷冻和解冻过程中的损伤。
此外，PBS还可以与冷冻保护剂一起使用，提高细胞的冷冻保存效果。
3. 蛋白质和核酸的提取在蛋白质和核酸提取实验中，PBS被用作细胞或组织的裂解缓冲液。
它能够维持细胞或组织的生理状态，并保持其中的蛋白质和核酸的稳定性。
此外，PBS还可以用于洗涤蛋白质和核酸的沉淀物，以去除杂质。
4. 免疫染色在免疫染色实验中，PBS被用作抗体和抗原的稀释缓冲液。
它能够维持抗体和抗原的稳定性，并提供适当的离子环境，以促进抗体和抗原的结合。
三、PBS缓冲范围的注意事项1. 在准备PBS缓冲液时，应严格按照配方比例混合各种成分。
过高或过低的浓度都会影响其缓冲能力。
2. 在实验过程中，应避免PBS缓冲液的污染。
使用无菌技术操作，并在实验前对PBS进行灭菌处理。
3. 在保存PBS缓冲液时，应避免阳光直射和高温环境，以防止其pH值的变化。
4. 在使用PBS洗涤细胞或组织时，应注意洗涤的时间和次数。
过长或过多的洗涤会导致细胞或组织的损伤。
5. 在免疫染色实验中，应根据实验需求调整PBS的pH值和离子浓度，以提高抗体和抗原的结合效率。
实验室常用试剂缓冲液的配制方法
实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液，以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。
1.NaCl溶液配制：NaCl作为实验室常用的盐类试剂，可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。
常用浓度为0.9%（w/v）的生理盐水。
配制方法如下：称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中，搅拌溶解，用蒸馏水调整至最终体积。
2.血红蛋白溶液配制：血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。
常用方法如下：从新鲜血液中分离出血红蛋白，加入适量的生理盐水或缓冲液，控制pH值为7.4-7.6，并用密闭容器保存。
3. Tris-HCl缓冲液配制：Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。
常用方法如下：按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中，搅拌溶解，用强碱（比如氢氧化钠）或强酸（比如盐酸）调整pH值至所需范围。
1. Tris缓冲液配制：Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，并用去离子水稀释至最终体积。
2.PBS缓冲液配制：PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。
配制方法如下：称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积，调整pH值至所需范围。
3. Tris-Borate-EDTA（TBE）缓冲液配制：TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，然后加入Boric acid和EDTA固体，继续搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积。
以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法，实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。
在配制试剂和缓冲液时，需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台，并遵循相应的实验操作规范和安全要求。
生化中常用缓冲试剂及应用
生化中常用缓冲试剂及应用生化实验中常用的缓冲试剂包括盐酸/氯化钠缓冲液、磷酸缓冲液、Tris缓冲液、乙二胺四乙酸(EDTA)缓冲液、碳酸氢盐/碳酸钠缓冲液等。
首先，盐酸/氯化钠缓冲液是一种弱酸/弱碱缓冲液，常用于酶活性测定、蛋白质提取和分离等实验中。
其pH调节范围一般在2.0-7.5之间，具有很好的稳定性和可靠性。
然后，磷酸缓冲液可分为无机磷酸盐缓冲液和有机磷酸盐缓冲液。
无机磷酸盐缓冲液可以提供更广泛的pH范围，适用于分子生物学、酶学研究以及细胞培养等实验。
有机磷酸盐缓冲液常用于生物化学分离、柱层析、电泳等实验中。
Tris缓冲液是一种常用的弱酸/弱碱缓冲液。
由于其pKa值较接近生物体内的pH 值，所以在生化实验中被广泛应用。
Tris缓冲液的最适pH范围为7.0-9.0，适用于蛋白质电泳、DNA/RNA纯化等实验。
乙二胺四乙酸(EDTA)缓冲液常用于螯合金属离子，维持实验体系中金属离子的稳定性。
在细胞培养、核酸提取、膜蛋白分离等实验中，EDTA可有效地去除对实验干扰的金属离子。
碳酸氢盐/碳酸钠缓冲液在生化实验中用于模拟生物体内酸碱环境。
这种缓冲液根据需要可调节pH值，并且稳定性较高。
碳酸氢盐/碳酸钠缓冲液在酶活性测定、细胞生长等实验中被广泛应用。
这些缓冲试剂在生化实验中起到了非常重要的作用。
它们能够稳定实验环境的pH值，提供合适的酸碱条件，维持酶的活性，同时可以优化化学反应。
不同的缓冲试剂适用于不同的实验需求。
在实际操作中，要根据所需pH范围、实验样品的性质和实验条件的要求选择合适的缓冲试剂。
除了上述常见的缓冲液外，还有一些特定用途的缓冲试剂。
例如，Tris-EDTA（TE）缓冲液常用于储存DNA和RNA样品，以保持其稳定性。
Tween缓冲液常用于蛋白质或细胞膜的提取和溶解，起到增加样品溶解度和提高蛋白质提取效果的作用。
总之，缓冲试剂在生化实验中是不可或缺的。
它们通过调节溶液的酸碱度，稳定实验条件，保证实验结果的准确性和可重复性。
常用标准缓冲溶液的配制
常用标准缓冲溶液在化学分析、仪器分析、生物化学等领域有广泛的应用。
它们通常用于标定传感器、校准仪器、测定物质特性等。
下面将详细介绍如何配制常用标准缓冲溶液。
一、磷酸盐标准缓冲溶液磷酸盐标准缓冲溶液通常用于pH测量。
具体配制方法如下：1. 称取约2克磷酸二氢钾，用纯水溶解。
2. 加入约700ml纯水。
3. 用氢氧化钠溶液调整溶液pH至7.0。
可以使用0.1N氢氧化钠溶液进行调pH。
4. 稀释至总容量为1000ml，这样就得到了磷酸盐标准缓冲溶液。
二、乙酸-乙酸钠缓冲液乙酸-乙酸钠缓冲液常用于PH计的校准。
其配制方法如下：1. 称取无水乙酸钠（28.85g）及乙酸（3mL，约27ml）溶于约500mL纯水中。
2. 用盐酸（1+1）溶液调整溶液pH至3.6～3.8。
3. 稀释至总容量约700mL。
三、纳氏试剂缓冲溶液纳氏试剂是一种常用的显色剂，常用于水质分析等工作中。
缓冲溶液的配制如下：1. 称取三乙醇胺9～15g，加少量纯水溶解，再加入氢氧化钠溶液至pH值约10，即得基本缓冲液。
2. 称取酒石酸钾钠20g及碘化钾2g溶于纯水，稀释至基本缓冲液总容量约50ml，然后慢慢加入碘化汞钾溶液（4%w/v）4～5滴，即得纳氏试剂缓冲溶液。
四、磺基水杨酸标准缓冲溶液磺基水杨酸标准缓冲溶液常用于电位滴定分析，其配制方法如下：1. 称取24克磺基水杨酸，加入约600毫升蒸馏水，完全溶解。
2. 用氢氧化钠溶液调整溶液pH至5.4，使其符合滴定分析要求。
可以使用0.1N氢氧化钠溶液进行调pH。
3. 稀释至总容量约1000ml，这样就得到了磺基水杨酸标准缓冲溶液。
需要注意的是，在配制标准缓冲溶液时，必须严格遵守实验室安全规范，包括正确处理化学药品、避免交叉污染、避免蒸发皿破裂等。
同时，也应注意保护实验环境的卫生和安全，如保持实验台整洁、避免有毒废料的排放等。
此外，对于不同类型和浓度的标准缓冲溶液，可能需要不同的配制步骤和注意事项。
生物化学常用缓冲液
缓冲溶液缓冲溶液是一类能够抵制外界加入少量酸和碱的影响，仍能维持pH值基本不变的溶液。
该溶液的这种抗pH变化的作用称为缓冲作用。
缓冲溶液通常是由一或两种化合物溶于溶剂（即纯水）所得的溶液，溶液内所溶解的溶质（化合物）称之为缓冲剂，调节缓冲剂的配比即可制得不同pH的缓冲液。
缓冲溶液的正确配制和pH值的准确测定，在生物化学的研究工作中有着极为重要的意义，因为在生物体内进行的各种生物化学过程都是在精确的pH值下进行的，而且受到氢离子浓度的严格调控，能够做到这一点是因为生物体内有完善的天然缓冲系统。
生物体内细胞的生长和活动需要一定的pH值，体内pH环境的任何改变都将引起与代谢有关的酸碱电离平衡移动，从而影响生物体内细胞的活性。
为了在实验室条件下准确地模拟生物体内的天然环境，就必须保持体外生物化学反应过程有体内过程完全相同的pH值，此外，各种生化样品的分离纯化和分析鉴定，也必须选用合适的pH值，因此，在生物化学的各种研究工作中和生物技术的各种开发工作中，深刻地了解各种缓冲试剂的性质，准确恰当地选择和配制各种缓冲溶液，精确地测定溶液的pH值，就是非常重要的基础实验工作。
下表列出某些人体体液的pH值：有以下特性：① pKa值在6～8之间；② 在水中的溶解度高；③ 不易穿透生物膜；④ 盐效应小；⑤ 离子浓度、溶液组成和温度对解离的影响小；⑥ 不与金属离子生成复合物或沉淀；⑦ 该缓冲剂化学稳定；⑧ 紫外和可见光波长范围内光吸收小；⑨ 易制得高纯度的盐。
按照这些要求可以设计和选择最为合适的缓冲剂来配制所需的缓冲溶液。
生物化学常用缓冲液⑴ 磷酸盐缓冲液磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由於它们是二级解离，有二个pKa值，所以用它们配制的缓冲液，pH范围最宽：NaH2PO4： pKa1＝2.12， pKa2＝7.21Na2HPO4： pKa1＝7.21， pKa2＝12.32配酸性缓冲液：用 NaH2PO4，pH＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8，配碱性缓冲液：用 Na2HPO4，pH＝10～12。
不同缓冲液用途
不同缓冲液用途缓冲液是一种具有稳定pH值的溶液，常用于实验室、生物技术和医药等领域。
不同的缓冲液在这些领域中有着各自的用途。
下面我将分别介绍一些常见的缓冲液及其用途。
1. 磷酸缓冲液磷酸缓冲液是最常用的缓冲液之一，通常由二元酸（H2PO4^-）和一元酸（HPO4^2^-）组成。
它的pH值在酸性范围内（pH 2.1-7.4），主要用于DNA 和RNA的电泳、核酸杂交、PCR等分子生物学实验中。
2. 三氯醋酸缓冲液三氯醋酸缓冲液是一种低温缓冲液，也常用于分子生物学实验中。
它可以沉淀DNA、RNA和蛋白质，常用于核酸和蛋白质的提取、纯化和鉴定实验中。
3. Tris缓冲液Tris缓冲液是一种常用的碱性缓冲液，由三乙醇胺与盐酸反应得到。
它的pH值在碱性范围内（pH 7.0-9.4），主要用于电泳、蛋白质的提取和纯化、酶反应等生物化学实验中。
4. PBS缓冲液PBS（磷酸盐缓冲盐水）是一种生理盐水，由磷酸、氯化钠和氯化钾等成分组成。
它的pH值在中性范围内（pH 7.2-7.4），是细胞培养和免疫学实验中常用的缓冲液。
它可以稳定生物试样的离子平衡，并具有与细胞渗透性相似的离子浓度，用于洗涤、稀释和保存细胞。
5. HEPES缓冲液HEPES缓冲液是一种羧酸缓冲液，可以调节生理pH范围内的细胞培养液。
由于其pKa接近细胞的pH（7.2-7.4），对细胞具有较小的影响，因此常用于体外细胞培养与生物化学研究中。
6. MES缓冲液MES（2-(N-甲基-2-氨基乙基)-邻苯二甲酸）缓冲液是一种中性pH值的缓冲液，主要用于蛋白质电泳、DNA电泳和酶反应等实验中。
它在pH 5.5-6.7之间比较稳定，并可以缓冲许多生物反应。
7. Acetate缓冲液Acetate缓冲液是由乙酸和乙酸钠或乙酸铵组成的缓冲液，常用于生物技术和分子生物学实验中。
它的pH值通常在酸性范围内（pH 4.0-6.0），具有良好的稳定性，可用于DNA和RNA的沉淀、纯化和浓缩。
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生物化学常用缓冲液
⑴ 磷酸盐缓冲液
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由於它们是二级解离，有二个pK
a
值，所以用它们配制的缓冲液，pH范围最宽：
NaH
2PO
4
： pK
a1
＝2.12， pK
a2
＝7.21
Na
2HPO
4
： pK
a1
＝7.21， pK
a2
＝12.32
配酸性缓冲液：用 NaH
2PO
4
，pH＝1～4，
配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8，
配碱性缓冲液：用 Na
2HPO
4
，pH＝10～12。
用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS（十二烷基硫酸钠）会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH 范围宽；③pH受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH变化小，如稀释十倍后pH
的变化小于0.1。
其缺点为：①易与常见的钙Ca++离子、镁Mg++离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。
⑵Tris（三羟甲基氨基甲烷，N-Tris(hydroxymethyl)aminomethane）缓
冲液
Tris缓冲液在生物化学研究中使用的越来越多，有超过磷酸盐缓冲液的趋势，如在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中已都使用Tris缓冲液，而很少再用磷酸盐。
Tris缓冲液的常用有效pH范围是在“中性”范围，例如：
Tris-HCl缓冲液： pH＝7.5～8.5
Tris-磷酸盐缓冲液： pH＝5.0～9.0
配制常用的缓冲液的方法有两种：①按书后附录中所列该缓冲液表中的方法，分别配制0.05mol/L Tris和0.05mol/L HCl溶液，然后按表中所列体积混合。
由于标准浓度的稀盐酸不易配制，所以常用另一种方法；②若配1L
0.1mol/L的Tris-HCl缓冲液：先称12.11g Tris碱溶于950mL～970mL 无离子水中，边搅拌边滴加4N HCl，用pH计测定溶液pH值至所需的pH值，然后再加水补足到1L。
Tris-HCl缓冲液的优点是：①因为Tris碱的碱性较强，所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液；②对生物化学过程干扰很小，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。
其缺点是：①缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，缓冲液稀释十倍，pH值的变化大于0.1；②温度效应大，温度变化对缓冲液pH值的影响很大，即：
△pK
a
／℃＝－0.031 ，例如：4℃时缓冲液的pH＝8.4，则37℃时的pH＝7.4，所以一定要在使用温度下进行配制，室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于
0℃～4℃。
③易吸收空气中的CO
2
，所以配制的缓冲液要盖严密封。
④此缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用，所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。
⑶ 有机酸缓冲液
这一类缓冲液多数是用羧酸与它们的盐配制而成，pH范围为酸性，即pH
＝3.0～6.0，最常用的是甲酸、乙酸、柠檬酸和琥珀酸等。
甲酸～甲酸盐缓冲液很有用，因其挥发性强，使用后可以用减压法除之。
乙酸～乙酸钠和柠檬酸～柠檬酸钠缓冲体系也使用的较多，柠檬酸有三个pK
a
值：
pK
a1
＝3.10，
pK
a2＝4.75， pK
a3
＝6.40。
琥珀酸有二个pK
a
值：pK
a1
＝4.18， pK
a2
＝5.60。
有机酸缓冲液的缺点是：①所有这些羧酸都是天然的代谢产物，因而对
生化反应过程可能发生干扰作用；②柠檬酸盐和琥珀酸盐可以和过渡金属离子（Fe3+、Zn++、Mg++等）结合而使缓冲液受到干扰；③这类缓冲液易与Ca++离子结合，所以样品中有Ca++离子时，不能用这类缓冲液。
⑷ 硼酸盐缓冲液
常用的有效pH范围是：pH＝8.5～10.0，因而它是碱性范围内最常用的缓冲液，其优点是配制方便，只使用一种试剂，缺点是能与很多代谢产物形成络合物，尤其是能与糖类的羟基反应生成稳定的复合物而使缓冲液受到干扰。
⑸ 氨基酸缓冲液
此缓冲液使用的范围宽，可用于pH=2.0～11.0，例如最常用的有：
甘氨酸—HCl缓冲液：pH=2.0～5.0，
甘氨酸—NaOH缓冲液：pH=8.0～11.0，
甘氨酸—Tris缓冲液：pH=8.0～11.0，（此缓冲液用于广泛使用的SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的电极缓冲液），
组氨酸缓冲液：pH=5.5～6.5，
甘氨酰胺（glycine amide）缓冲液：pH=7.8～8.8，
甘氨酰甘氨酸（glycylglycine）缓冲液：pH=8.0～9.0。
此类缓冲体系的优点是：为细胞组份和各种提取液提供更接近的天然环境。
其缺点是：①与羧酸盐和磷酸盐缓冲体系相似，也会干扰某些生物化学反应过程，如代谢过程等。
②试剂的价格较高。
⑹ 两性离子缓冲液（Zwitterionic buffers），又称Good’s缓冲液
1960年，N.E.Good和他的同事们总结了现有的各种缓冲试剂的优缺点后认为，必须用人为设计和人工合成的方法来找到专门用于生命科学研究的特定的缓冲体系，这些缓冲体系应具有前面所述的九条要求和特性。
他们合成的一系列Good’s缓冲液可查阅有关的资料。
Good’s缓冲液的主要优点是不参加和不干扰生物化学反应过程，对酶化学反应等无抑制作用，所以它们专门用于细胞器和极易变性的、对pH敏感的蛋白质和酶的研究工作。
其缺点是：①价格昂贵，②对测定蛋白质含量的双缩脲法和Lowry 法不适用，因为它们会使空白管的颜色加深。