高三生物细胞融合技术PPT教学课件
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实验五 细胞融合
一、实验目的
➢ 了解细胞融合的原理 ➢ 初步掌握聚乙二醇法诱导细胞融合的实验
方法。
Hale Waihona Puke Baidu
二、实验内容
㈠实验原理
细胞融合是指在自然条件或利用人工方法（生 物的、物理的，化学的），使两个或两个以上的细 胞合并成一个具有双核或多核细胞的过程。利用人 工诱导方法，不仅可以使同种细胞发生融合，而且 可以使不同种间细胞发生融合。
人工诱导的方法很多，如：聚乙二醇（PEG） 法、灭活的仙台病毒诱导法、电场融合法等。
聚乙二醇（polyethyleneglycol,PEG）法的原 理：PEG分子能改变各类细胞的膜结构，使两细 胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，由 于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲合以及彼 此的表面张力作用，使细胞发生融合。
㈡实验方法
1. 处死蟾蜍。 2. 取血：注射器内吸取1ml Alsver液，再吸取 1ml蛙血，加入已盛有8ml Alsver液的玻璃离心管。 3. 分别取1ml细胞悬液移入塑料离心管中，加 入0.85%生理盐水4ml混匀，1200r/min，离心5min。 4. 弃去上清液，再加入0.85%生理盐水至5ml， 混匀，离心。
5. 重复步骤4。
6．收集最后一次离心沉淀的血细胞，加入 1mlGKN液混匀。（按压积红细胞体积配成10%的 红细胞悬液）
7．再加入0.5ml预热的50%PEG混匀，室温下 分别于2min、15min取一滴该悬液于干净的载玻片 上，盖上盖玻片显微镜下观察。
细胞融合
一、实验目的
➢ 了解细胞融合的原理 ➢ 初步掌握聚乙二醇法诱导细胞融合的实验
方法。
Hale Waihona Puke Baidu
二、实验内容
㈠实验原理
细胞融合是指在自然条件或利用人工方法（生 物的、物理的，化学的），使两个或两个以上的细 胞合并成一个具有双核或多核细胞的过程。利用人 工诱导方法，不仅可以使同种细胞发生融合，而且 可以使不同种间细胞发生融合。
人工诱导的方法很多，如：聚乙二醇（PEG） 法、灭活的仙台病毒诱导法、电场融合法等。
聚乙二醇（polyethyleneglycol,PEG）法的原 理：PEG分子能改变各类细胞的膜结构，使两细 胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，由 于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲合以及彼 此的表面张力作用，使细胞发生融合。
㈡实验方法
1. 处死蟾蜍。 2. 取血：注射器内吸取1ml Alsver液，再吸取 1ml蛙血，加入已盛有8ml Alsver液的玻璃离心管。 3. 分别取1ml细胞悬液移入塑料离心管中，加 入0.85%生理盐水4ml混匀，1200r/min，离心5min。 4. 弃去上清液，再加入0.85%生理盐水至5ml， 混匀，离心。
5. 重复步骤4。
6．收集最后一次离心沉淀的血细胞，加入 1mlGKN液混匀。（按压积红细胞体积配成10%的 红细胞悬液）
7．再加入0.5ml预热的50%PEG混匀，室温下 分别于2min、15min取一滴该悬液于干净的载玻片 上，盖上盖玻片显微镜下观察。
细胞融合