植物显微技术实验参考资料

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实验一中药显微鉴定技术

实验一中药显微鉴定技术

实验一中药显微鉴定技术【目的要求】1.把握常用细胞壁显微鉴定技术2.把握常用细胞内含物显微鉴定方法3.练习显微观看方法【仪器、试剂、材料】1.仪器生物显微镜,目镜测微尺,镜台测微尺,显微描画器,镊子,解剖针,载玻片,盖玻片,酒精灯,单面刀片,粉碎机,绘图板,铅笔等。

2.试剂水合氯醛试剂,苏丹Ⅲ试液,稀甘油试剂,盐酸,硝酸,碘化铋钾试剂,氯化锌碘试液,硫酸,α-萘酚浓硫酸试液,碘试液,间苯三酚试液,钌红试液,硝酸汞试液,乙醚,石油醚,90%乙醇,70%乙醇,α-萘酚乙醇溶液,稀盐酸,稀醋酸等。

3.药材样品牛膝、薄荷、石斛、4.药材粉末大黄、肉桂、山药、黄芪、金银花、红花、洋金花、半夏、桔梗、木香、穿心莲【实验内容】一、用于组织切片及粉末药材的封藏剂1.水合氯醛试液为常用优良的化学透亮剂之一,特点是能迅速透入组织,使干燥收缩的细胞逐步膨胀复原,并能溶解大多数细胞内含物,如淀粉粒、叶绿体、菊糖、树脂、蛋白质、挥发油等,使细胞组织清晰透亮,易于观看。

用水合氯醛装片可观看各种组织特点,各种结晶,如草酸钙结晶、碳酸钙结晶和硅质块,各类细胞形状,如导管、纤维、石细胞、木栓细胞等。

不加热装片可观看菊糖、橙皮苷结晶等。

天冷时,水合氯醛装片后易析出结晶,可加一滴稀甘油幸免。

2.稀甘油为物理性透亮剂,能较快的透入组织,形成良好的透光条件,一样作临时封藏剂,常用于观看胡粉粒和菌丝等。

3.甘油醋酸(斯氏液)用于观看淀粉粒或测量其大小的封藏剂。

也能够用乳酸酚溶液代替。

4.乙醇依照不同目的,选用不同浓度的乙醇装片。

50%以上浓度的乙醇能够固定乳管;80~90%浓度的乙醇能够固定和观看菊糖;95%的乙醇能够观看黏液细胞;100%乙醇可用于植物叶绿体脱色;低浓度(10~30%)乙醇能够代替水软化含黏液质的材料。

5.蒸馏水能够溶解水溶性物质,透入组织较快,但不能溶解大多数细胞内含物,透亮度差,易干燥。

可用于检查淀粉粒的有无或配合其他试剂检查细胞壁和细胞内含物的性质。

根的显微实验报告

根的显微实验报告

一、实验目的1. 了解根的解剖结构,观察根尖的细胞组成。

2. 学习使用显微镜观察植物细胞的方法。

3. 掌握植物细胞的结构特点。

二、实验原理根是植物吸收水分和养分的重要器官,根尖是根的生长点。

根尖细胞排列紧密,形态规则,是观察植物细胞结构的良好材料。

通过显微镜观察根尖细胞,可以了解根尖的细胞组成、细胞核、细胞壁、细胞质等结构特点。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜的植物根尖、清水、酒精、盐酸、改良苯酚品红染液。

2. 实验仪器:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、酒精灯、剪刀、刀片、显微镜载物台。

四、实验步骤1. 取新鲜的植物根尖,用剪刀剪取根尖部分,放入装有清水的试管中,浸泡一段时间。

2. 将浸泡后的根尖放入装有酒精的试管中,浸泡30分钟,使细胞质脱水。

3. 将脱水的根尖放入装有盐酸的试管中,浸泡5分钟,使细胞壁软化。

4. 取出根尖,用刀片切取根尖部分,放入载玻片中。

5. 在载玻片上滴加改良苯酚品红染液,染色5分钟。

6. 用滴管吸去多余染液,用盖玻片覆盖在根尖上。

7. 将载玻片放入显微镜载物台上,调整焦距,观察根尖细胞。

五、实验结果与分析1. 观察根尖细胞结构:细胞呈长条形,排列紧密,细胞核位于细胞中央,细胞质均匀,细胞壁较厚。

2. 观察细胞核:细胞核较大,核仁明显,染色较深。

3. 观察细胞质:细胞质呈淡红色,染色较浅。

4. 观察细胞壁:细胞壁较厚,呈淡红色,染色较浅。

六、实验结论通过本次实验,我们成功观察到了根尖细胞的形态结构,了解了根尖细胞的基本组成。

实验结果表明,根尖细胞排列紧密,细胞核较大,细胞壁较厚,细胞质均匀。

这些结构特点有利于根尖细胞的正常生长和发育。

七、实验注意事项1. 实验过程中,操作要轻柔,避免损伤根尖细胞。

2. 在染色过程中,注意控制染色时间,以免染色过深或过浅。

3. 使用显微镜观察时,要调整好焦距,确保观察效果。

4. 实验结束后,及时清洗实验器材,保持实验室整洁。

八、实验拓展1. 观察不同植物根尖细胞的差异。

植物显微技术实验报告

植物显微技术实验报告

植物显微技术实验报告田祎风园10-2090344108植物显微技术实验报告09044108 风园10-2班田祎实验目的:1.接触初等的植物显微技术和组织化学,并初步了解。

2.了解石蜡制片法的操作步骤及各种药品各使用,了解木材切片制片的操作步骤。

3.操作显微照相,并掌握暗室冲洗照片的基础步骤4.木材切片的制作实验内容:一、石蜡制片法1、材料固定:将材料迅速杀死固定来保持其原有成分性质、位置,所以将材料用刀片截取成适当大小的块。

立即投入FAA固定液中,再进行抽气处理,以使固定液渗入材料。

固定好的材料要经过水或酒精洗2--3次。

2、脱水:材料经不同浓度的酒精,渐次脱去组织中的水,一般从50%酒精→70%酒精→85%酒精→95%酒精→100%酒精,每一级间隔2小时。

酒精用量为材料3-5倍。

3、透明:材料从纯酒精中出来后经过1/2二甲苯+1/2纯酒精(2小时)过渡到纯二甲苯中透明两小时。

4、浸蜡:将盛有材料的小杯中放入少量二甲苯、并加些蜡屑,再将小杯放入38度左右的温箱中过夜,第二天将材料换入纯蜡中以后每过4小时换一次纯蜡,总共换三次。

5、包埋:将融化的石蜡连同材料一并倾入小纸盒中,用热针迅速将材料排齐,然后平放入冷水中使其凝固,动作一定要迅速,否则石蜡浸慢了会出现结晶,切片易碎。

6、切片:注意刀要锋利,并将刀和蜡块的位置调整好。

7、贴片:要梅氏蛋白贴剂粘片。

注意载玻片一定要干净粘贴剂涂得要合适而且蜡片的背面和载玻片相贴。

8、染色封片:粘贴好的切片经一至数天干燥后进行脱蜡、复水、染色、脱水、透明封片等步骤。

染色程序:石蜡切片→二甲苯中脱蜡(5分钟)→1/2二甲苯1/2纯酒精→100%酒精(2 分钟)→95%酒精(2分钟)→85%酒精(2分钟)→70%酒精(2分钟)→50%酒精(2分钟)→蒸馏水(2分钟)→0.5%高碘酸钾(10分钟)→自来水(5分钟)→蒸馏水(2 分钟)→锡夫试剂(20分钟)→漂洗液3次,每次2分钟→自来水(5分钟)→蒸馏水(2分钟)→萘酚黄S染色(2--10分钟)→蒸馏水(2分钟)→叔丁醇,两次,每次2分钟→二甲苯透明(5分钟)→树胶封片。

植物显微技术(经典完整版)

植物显微技术(经典完整版)

植物显微技术1、任课教师:李岩、刘朝辉(中国农业大学生物学院)2、课程内容及安排:(1) 植物制片技术(2) 光学显微镜技术从校历的第6周起每周一次实验,分3组,每组不超过16人。

实验时间(周四下午2:00,周五上午8:30,周五下午2:00 )。

实验地点:新教学楼1325(显微技术室)。

3、教材及参考书:(1)生物学显微技术,余炳生、张仪编著。

(2)植物显微技术实验指导,余炳生、张仪、李岩编著。

一1、a、b、2、a、b、c、第一部分植物制片技术第一章概论第一节制片的目的及意义一、人类对自然的认识过程二、显微镜在人类认识自然中的作用三、制片技术在显微镜应用中的必要性第二节植物制片技术的分类与发展、植物制片的分类按保存时间可分为临时制片永久制片按制作方法可分为活体观察切片法非切片法二、植物制片技术的发展1、固定剂及固定方法的改进2、塑料包埋剂的应用与发展3、荧光及免疫荧光定位技术的应用与发展4、活细胞显微观察技术的应用与发展5、G FP(Green Fluorescence Protein,绿色荧光蛋白的应用第二章植物制片的基本步骤和原理第一节选材一、选材的原则二、选材注意事项三、一般植物材料的切取根、茎的切取叶的切取材料的体积问题第二节杀死、固定和保存一、杀死、固定和保存的概念1、基本概念杀死:利用某种方法使细胞的新陈代谢瞬时停止。

固定:在杀死的基础上,把细胞或组织按生活的状定下来,使在以后制片的过程中保持状态不变。

2、杀死与固定的关系3、保存与保存液70%乙醇4、制片的核心问题如何在制片过程中保持生命的真实结构?!二、固定的理论(一)两类固定剂1、非凝固型固定剂:使蛋白相互胶联。

2、凝固型固定剂:使蛋白沉淀。

(二)固定的目的和理想的固定剂1、固定的目的2、理想的固定剂(?)一般而言:非凝固型固定剂优于凝固型固定剂;混合固定优于单纯固定剂。

三、固定剂(一)凝固型固定剂1、酒精(e thyl,a lcohol)常用95%酒精及纯酒精特点、使用范围、作用原理及注意事项2、铬酸(c hromic acid)特点:易潮解,为强氧化剂缺点:渗透力弱,易使组织发生收缩一般与其它成分配成混合固定液3、苦味酸( picric acid )特点:渗透力弱,易使组织发生收缩,易爆炸一般与其它成分配成混合固定液注意事项:一般用50%、70%酒精清洗4、醋酸( acetic acid )特点:渗透力强,可使组织产生膨胀作用(二)非凝固型固定剂1、甲醛( formalin )特点:气体,在水中的溶解度为38%左右,很好的硬化剂,强还原剂;渗2、重铬酸钾( potassium dichromate )特点:强氧化剂,强硬化剂;渗透力弱。

植物学实验报告—显微镜构造使用及植物细胞的基本结构

植物学实验报告—显微镜构造使用及植物细胞的基本结构

植物学实验报告—显微镜构造使用及植物细胞的基本结构摘要:本实验主要通过使用显微镜观察植物细胞的基本结构,探讨显微镜的构造和使用方法。

实验结果表明,显微镜可以显著增强对植物细胞的观察能力,帮助我们更好地了解植物细胞的组成和结构。

引言:显微镜是一种常用的实验工具,它可以放大细小的物体并让其清晰可见。

植物细胞是植物体的基本构成单位,了解植物细胞的结构对于研究植物生长和发展过程至关重要。

因此,通过显微镜观察植物细胞的结构,可以帮助我们更好地了解植物生物学。

材料与方法:1.首先,我们需要准备一台显微镜和玻璃片。

2.取一块植物组织,如鲜叶片或根尖组织。

3.将植物组织切片,切片厚度约为0.1毫米。

4.将切好的植物组织放在玻璃片上,再叠加一片盖玻片。

5.将叠加好的样品放置在显微镜的样品平台上。

6.调整显微镜的焦距和光强,以确保图像清晰可见。

7.使用显微镜的目镜和物镜进行观察,并调整物镜的放大倍数。

8.通过调整显微镜的焦距和光强,可以获得更清晰的图像。

结果与讨论:我们使用上述的方法观察了鲜叶片和根尖组织的植物细胞。

在显微镜下,我们发现植物细胞具有一定的结构和组织层次。

主要观察到的结构包括细胞壁、细胞质、细胞核和细胞质器。

植物细胞壁是植物细胞的外围结构,其由纤维素组成。

细胞壁可以提供对细胞的支持和保护,同时还可以通过孔道与相邻细胞进行物质交换。

细胞质是细胞内包含细胞核和细胞质器的区域。

细胞质中含有许多细胞质器,如叶绿体、线粒体和高尔基体等。

这些细胞质器具有特定的功能,如叶绿体参与光合作用,线粒体参与细胞的呼吸作用,高尔基体参与蛋白质合成。

细胞核是细胞的控制中心,其中包含着遗传信息。

细胞核内有染色体,是由DNA和蛋白质组成的,其中编码了细胞的遗传信息。

细胞核还包含着核仁,核仁参与转录过程。

结论:通过本实验,我们掌握了显微镜的使用方法,并观察到了植物细胞的基本结构。

植物细胞的结构包括细胞壁、细胞质、细胞核和细胞质器等组成部分。

生物显微镜实验报告

生物显微镜实验报告

实验名称:显微镜观察植物细胞结构实验日期:2023年10月15日实验目的:1. 熟悉生物显微镜的使用方法。

2. 观察并描述植物细胞的基本结构,包括细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、叶绿体等。

3. 分析植物细胞结构与功能的关系。

实验原理:植物细胞是构成植物体的基本单位,具有多种结构和功能。

通过显微镜观察,可以清晰地看到细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等结构,并了解它们在植物生命活动中的作用。

实验材料与用具:1. 实验材料:洋葱鳞片叶、胡萝卜根、菠菜叶等。

2. 实验用具:生物显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、刀片、染色液(碘液)等。

实验步骤:1. 制作洋葱鳞片叶临时装片:a. 取一小块洋葱鳞片叶,用刀片将其切成薄片。

b. 将切片放在载玻片上,用滴管滴加一滴清水。

c. 用镊子轻轻压平切片,盖上盖玻片。

d. 滴加一滴碘液,盖上盖玻片,轻轻摇匀。

2. 制作胡萝卜根临时装片:a. 取一小块胡萝卜根,用刀片将其切成薄片。

b. 将切片放在载玻片上,用滴管滴加一滴清水。

c. 用镊子轻轻压平切片,盖上盖玻片。

d. 滴加一滴碘液,盖上盖玻片,轻轻摇匀。

3. 制作菠菜叶临时装片:a. 取一小片菠菜叶,用刀片将其切成薄片。

b. 将切片放在载玻片上,用滴管滴加一滴清水。

c. 用镊子轻轻压平切片,盖上盖玻片。

d. 滴加一滴碘液,盖上盖玻片,轻轻摇匀。

4. 使用生物显微镜观察:a. 调整显微镜的粗细准焦螺旋,使视野清晰。

b. 依次观察洋葱鳞片叶、胡萝卜根、菠菜叶的临时装片。

c. 观察细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、叶绿体等结构,并记录观察结果。

实验结果与分析:1. 观察洋葱鳞片叶临时装片,可以看到细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、叶绿体等结构。

细胞壁位于细胞最外层,呈透明状;细胞膜位于细胞壁内侧,较薄,不易观察;细胞质位于细胞膜内侧,呈透明状,内有细胞核;叶绿体呈绿色,分布在细胞质中。

2. 观察胡萝卜根临时装片,可以看到细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等结构。

实验一 植物细胞的显微结构 - 天津大学

实验一 植物细胞的显微结构 - 天津大学

实验一植物细胞的显微结构[目的和要求](1)掌握植物细胞的基本构造.(2)熟悉光学显微镜的使用方法.(3)学习临时装片法及绘制植物细胞图的基本技术.[仪器用品及实验材料](一)仪器用品显微镜、载玻片,盖玻片、钟表镊,解剖针、刀片、剪刀,吸水纸、拭镜纸、蒸馏水,稀碘液(二)实验材料洋葱鳞茎、女贞叶、桃树叶、紫鸭跖草、红辣椒或枸杞果、番茄[内容与步骤](一)制作洋葱表皮的临时装片从洋葱鳞茎上剥下一片肉质鳞叶,用镊子由其内表面撕下一块透明的内表皮,切取3~5mm大小的一块,按临时装片法,置于载玻片上预先加好的水滴中,用镊子将其展平,然后将盖玻片沿水滴一侧慢慢盖下,防止产生气泡,用吸水纸沿盖玻片一侧吸掉多余的水.(二)观察植物细胞的构造在阅读有关显微镜的构造和使用法后,将临时装片放在低倍镜下观察,注意洋葱鳞叶内表皮为一层细胞,细胞为长方形或扁砖状,排列紧密,没有细胞间隙.移动装片,选择几个较清楚的细胞置于视野中央,换用高倍物镜再仔细观察,注意识别下列各部分:1. 细胞壁为植物细胞所特有。

为细胞的最外层,比较透明.调节细调焦螺旋和虹彩光圈时,可见这层细胞壁实际为三层,其两侧为相邻两个细胞的细胞壁,中间是两个细胞所共有的中胶层(胞间层).2.细胞质为无色透明的胶状物,紧贴在细胞壁以内,被中央大液泡挤成一薄层,仅细胞两端较明显.3.细胞核为扁圆球形的小球体,浸埋在细胞质中,贴近细胞的侧壁的只能见其窄面,贴在细胞的上、下壁的可见其宽面。

仔细观察,可见包在细胞核外的核膜,细胞核内有l~3个发亮的小颗粒,即核仁。

4.液泡位于细胞中央,占细胞体积的大部分.由于液泡内充满细胞液,所以比细胞质更透明.为了观察更清楚,可取下制片,小心由盖玻片一侧清加一滴稀碘液,几分钟后观察,可见细胞质被染成浅黄色,细胞核被染成较深的黄色。

(三)质体1.白色体撕取紫鸭跖草叶下表皮一小块,制成临时装片.置显微镜下观察,可见在细胞核周围有很多微小无色颗粒,即白色体.2.叶绿体取女贞叶、槐树叶或其他绿叶,作徒手切片,或撕去叶表皮,用刀片刮取少量叶肉细胞,涂在载玻片上,制成临时装片.镜检时都可以见到众多椭圆形的绿色颗粒,即叶绿体.3.有色体用解剖针挑取枸杞、红辣椒或番茄的果肉少许,置载玻片上压碎,制成临时装片,镜检时都可见到有色体.注意其形状和颜色是否相同.[作业与思考](1)绘洋葱鳞叶的内表皮细胞,注明细胞各部分(参阅第一章绘图的要求和方法).(2)绘三种质体形态图.(3)植物细胞的显微构造主要有哪几部分?(4)质体有哪几种类型?它们的结构和功能之间有何关系?二植物细胞的后含物及细胞壁[目的要求](1)掌握细胞主要后含物的鉴别.(2)熟悉特化细胞壁的鉴别.(3)学习徒手切片和组织粉末透化法.[仪器用品及实验材料](一)仪器用品显微镜,解剖用具、培养皿、甘油醋酸试液、稀碘液,稀甘油水合氯醛试液、氯化锌碘试液,苏丹Ⅲ试液、盐酸、间苯三酚试液.(二)实验材料马铃薯块茎、蓖麻种子、大黄或曼陀罗叶粉末、半夏粉末、甘草或黄柏粉末、地骨皮或牛膝根横切制片、射干根状茎横切制片、印度橡胶树叶或无花果叶的横切制片、桔梗根的纵切制片、夹竹桃叶或柿树叶和嫩枝.[内容与步骤](一)淀粉粒取马铃薯块茎一小块,用刀片刮取少许组织,置载玻片上.加水或甘油醋酸制成临时装片,先在低倍镜下观察淀粉粒,注意其形状.再转换高倍境观察,注意其脐点和层纹,分辨出单粒、复粒和半复粒,绘图和记录.然后再现察半夏粉末,注意其和马铃薯淀粉粒有何不同?再由盖玻片一侧加一滴稀碘液,观察有何颜色变化.(二)菊糖(示教)取桔梗根纵切片,在低倍镜下观察,可见在薄壁细胞中靠近细胞壁有呈球形或扇形,并有放射状纹理的菊糖结晶.(三)糊粉粒(示教)观察蓖麻种子的剥去种皮,并经脱脂的胚乳徒手切片,在高倍镜下能否见到多边性的蛋白质晶体,含磷酸盐的球晶体及无定形的基质?(四)结晶体草酸钙结晶(1) 簇晶取大黄或曼陀罗叶粉末少许,置载玻片上,滴加水合氯醛试液1—2滴.在酒精灯上慢慢加热进行透化,注意不要蒸干.可加添新的试剂,井用滤纸吸去已带色的多余试剂,至材料颜色变浅而透明时,停止处理,加稀甘油一滴,盖上盖玻片,拭净其周围的试剂,镜检,可见多数大型、星状的草酸钙簇晶.(2) 针晶取半夏粉末少许,如上法透化后,镜检,可见散在或成束的针状草酸钙晶体.(3) 方晶取黄柏或甘草粉末少许,透化后,镜检,可见在细长的成束的纤维周围的薄壁细胞内,含有方形或长方形的草酸钙晶体,这种结构称为晶鞘纤维或晶纤维.(4) 砂晶(示教) 观察地骨皮或牛膝根横切制片,可见在类圆形的薄壁细胞中充满了细小三角形或箭头状的草酸钙砂晶.(5) 柱晶(示教) 观察射干根状茎切片,可见长柱形的草酸钙结晶.2. 碳酸钙结晶观察印度橡胶树叶或无花果叶的横切片,注意在近叶面的表皮细胞的大型细胞中,有葡萄状的结晶体附着在细胞壁增生的棒状物上,悬挂在细胞腔中,形似钟乳石,即碳酸钙结晶,又名钟乳体.(五)特化细胞壁的鉴别1.木质化细胞壁取夹竹桃或柿树嫩枝或叶柄,徒手切成横切片,选一薄片置载玻片上,加间苯三酚试液一滴,稍放置,再加浓盐酸一滴,加盖玻片,吸去盖玻片上多余的酸液,在低倍或中倍镜下观察,木质化细胞壁呈樱桃红色或红紫色,再用一段火柴棍直接滴加上述试液处理,有何变化?2.木栓化细胞壁取马铃薯块茎一小块,垂直于外皮做徒手切片,置载玻片上,加苏丹Ⅲ试液1—2滴,放置2分钟或微微加热.加盖玻后镜检,可见木栓化细胞壁被染成橙红色.另取一横切片,加氯化锌碘试液1滴,加盏玻片后镜检,可见外方木栓化细胞壁呈黄棕色.其内方的薄壁细胞壁以纤维素为主,呈蓝紫色.3.角质化细胞壁取夹竹桃叶或柿树叶或其他植物叶做徒手横切片,方法是选择叶片主脉近中部,在主脉两侧保留各约3mm的叶片,然后将材料夹在马铃薯或其他合适夹持物中,徒手切成横切片,并置盛水的培养皿中,除去夹持物,将切片置载玻片上,用吸水纸吸去水分,加苏丹Ⅲ试液1—2滴,镜检,可见叶片表皮细胞外的角质层被染成橙红色.[作业与思考](1)绘马铃薯块茎中淀粉粒的构造和类型图.(2)绘各种草酸钙结晶的形态图.(3)经水合氯醛透化的木质化细胞壁,用间苯三酚试液和盐酸处理,能否染成红色?。

实验报告动植物细胞的显微观察

实验报告动植物细胞的显微观察

实验报告动植物细胞的显微观察实验报告:动植物细胞的显微观察一、实验目的通过显微镜观察动植物细胞的结构,了解动植物细胞在形态、结构和功能上的差异,掌握显微镜的使用方法和细胞制片技术。

二、实验原理细胞是生物体的基本结构和功能单位。

动植物细胞在结构上存在一定的差异,植物细胞具有细胞壁、叶绿体和液泡等结构,而动物细胞则没有。

显微镜是一种用于观察微小物体的工具,通过将物体放大,可以清晰地观察到细胞的细节。

三、实验材料和仪器(一)实验材料1、洋葱鳞片叶表皮细胞2、人口腔上皮细胞3、生理盐水4、稀碘液5、清水(二)实验仪器1、显微镜2、载玻片3、盖玻片4、镊子5、滴管6、刀片四、实验步骤(一)制作洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片1、用干净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净。

2、在载玻片中央滴一滴清水。

3、用镊子撕取一小块洋葱鳞片叶表皮,将其放在水滴中,并用镊子展平。

4、用镊子夹起盖玻片,使它的一边先接触载玻片上的水滴,然后缓缓地放下,盖在要观察的材料上,避免盖玻片下出现气泡。

5、在盖玻片的一侧滴一滴稀碘液,用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引,使染液浸润标本的全部。

(二)制作人口腔上皮细胞临时装片1、在载玻片中央滴一滴生理盐水。

2、用消毒牙签在自己已漱净的口腔内侧壁上轻刮几下,把牙签附有碎屑的一端放在载玻片上的生理盐水中,轻涂几下。

3、用镊子夹起盖玻片,使它的一边先接触载玻片上的水滴,然后缓缓地放下,盖在要观察的材料上,避免盖玻片下出现气泡。

4、在盖玻片的一侧滴一滴稀碘液,用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引,使染液浸润标本的全部。

(三)观察临时装片1、取镜和安放:右手握住镜臂,左手托住镜座,将显微镜放在实验台上,略偏左。

安装好目镜和物镜。

2、对光:转动转换器,使低倍物镜对准通光孔。

把一个较大的光圈对准通光孔。

左眼注视目镜内,右眼睁开。

转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内。

通过目镜可以看到白亮的圆形视野。

3、观察:把所要观察的装片放在载物台上,用压片夹压住,标本要正对通光孔的中心。

植物学实验报告显微镜

植物学实验报告显微镜

植物学实验报告:显微镜引言显微镜是一项重要的科学工具,它能够帮助科学家观察微小的细胞结构和植物的微观世界。

本次实验我们将使用显微镜观察植物细胞的结构,探索植物的奥秘。

材料和方法1.显微镜:确保显微镜调节正常。

2.植物样本:从植物叶片上取得样本。

3.盖玻片和载玻片:用于制作植物样本的准备。

4.食盐溶液:用于制作显微镜下的植物样本。

步骤1.准备工作:–将显微镜放在平稳的台面上。

–调节显微镜的焦距,使其能够清晰观察细胞结构。

–清洁显微镜的镜头和物镜,以确保观察的图像清晰。

2.制作植物样本:–从植物叶片上取得一个小的样本。

–将样本放在载玻片上。

–在样本上滴加一滴食盐溶液,以保持样本的湿润并防止腐烂。

3.覆盖载玻片:–将盖玻片慢慢地放在样本上,并确保没有空气泡困在样本和盖玻片之间。

–轻轻按压盖玻片,以确保样本均匀分布在载玻片上。

4.放置样本:–将制作好的载玻片放在显微镜的台面上。

–调节显微镜的焦距,使样本图像清晰可见。

5.观察样本:–通过目镜观察样本的整体结构。

–使用转盘旋钮调节物镜,逐渐增加放大倍数。

–注意观察样本中的细胞壁、细胞核和细胞质等细胞结构。

6.记录观察结果:–使用笔和纸记录观察到的植物细胞结构。

–画出细胞的示意图,并标注关键的细胞结构。

结果和讨论通过观察显微镜下的植物样本,我们可以看到细胞壁、细胞核和细胞质等细胞结构。

细胞壁是细胞外的一层结构,提供细胞的支持和保护。

细胞核是细胞的控制中心,其中包含着遗传物质DNA。

细胞质则位于细胞核和细胞壁之间,其中包含着各种细胞器和细胞液。

通过观察不同植物的细胞结构,我们可以了解到不同植物的细胞组织的差异。

有些植物的细胞壁较厚,而有些植物的细胞核较大。

这些差异可能与植物的生长环境和功能有关。

在观察过程中,我们还发现了一些异常细胞结构,如细胞核异常增大或细胞壁变形等。

这些异常现象可能与疾病或环境压力有关,需要进一步的研究和分析。

结论通过显微镜的使用,我们成功观察到了植物细胞的结构。

植物显微技术实验参考资料

植物显微技术实验参考资料

植物显微技术实验参考资料实验一植物根尖染色体压片法一、实验目的1. 学习并掌握根尖处理、染色、压片及制片观察的方法;2. 观察有丝分裂各时期染色体的形态变化,了解有丝分裂全过程。

二、实验原理高等植物有丝分裂主要发生在根尖、茎尖生长点及幼叶等器官的分生组织(分生区),其中根尖是最常用的材料:1. 根尖取材容易,操作和鉴定也比其它组织方便;2. 采用实验室内种子萌发后所长出的幼嫩根尖,不受植物生长季节的限制,并且可以大量获得;3. 对于某些珍贵而稀少的实验材料,取用自然条件下生长植株的根尖,比取用茎尖、花器等对材料的伤害要小得多;4. 采用实验室内种子发根,切取根尖后的种苗通常还可以进行正常种植,利于后续研究进行。

三、实验材料大蒜(Aillum sativum 2n=16)四、实验器具和药品1. 用具:染色板,载玻片,盖玻片,指管,温度计,试剂瓶,滴瓶,镊子,解剖针,毛边纸。

2. 药品:无水酒精,70%酒精,冰醋酸,对二氯苯或秋水仙素,醋酸钠,碱性品红,石炭酸,甲醛,山梨醇,纤维素酶,果胶酶,中性树胶或油派胶(Euparal),二甲苯。

五、实验说明1.根尖由于取材方便,是观察植物染色体最常用的材料,有些植物种子难以发芽,或仅有植株而无种子,也可以用茎尖作为材料。

2. 植物细胞分裂周期的长短不尽相同,通常在十到几十小时之间,温度明显地影响分裂周期,对于一个不太熟悉的实验材料,最好在特定温度下长根,掌握有丝分裂高峰期,以便得到更多的有丝分裂的细胞。

3. 有丝分裂期在整个细胞周期中所占的时间相对较短,有丝分裂制片的主要目的是进行染色体鉴定,希望观察到更多分裂相,尤其是分裂中期相,通常要对材料进行不同的预处理。

(预处理的目的是降低细胞质的粘度,使染色体缩短分散,防止纺锤体形成,让更多的细胞处于分裂中期,一般在分裂高峰前,把根尖放到药剂中处理3-4小时。

常用的药剂,如秋水仙素、对二氯苯、8-羟基喹啉等。

)4.植物细胞的细胞壁对细胞形态和结构起支撑和保护作用,分生组织的细胞壁将分生细胞结合成一个整体,因此在压片之前需要采用适当方法软化或部分分解细胞壁使细胞间易于分离,称为解离。

植物学实验1显微镜的使用及植物细胞观察

植物学实验1显微镜的使用及植物细胞观察

植物学实验1显微镜的使用及植物细胞观察引言:显微镜是植物学研究中常用的一种工具,它可以帮助我们观察植物细胞的微观结构。

本实验的目的是学习显微镜的使用方法,并观察植物细胞的结构和组织。

材料与方法:1.显微镜:包括目镜、物镜和调焦手轮等部件。

2.盖玻片、载玻片和滴管:用于制作和观察样品。

3.植物材料:如鲜叶片、细胞培养物等。

实验步骤:1.准备显微镜:将显微镜放在水平桌面上,并调节目镜和物镜。

2.制作样品:取一片鲜叶片,用镊子夹起并放在载玻片上。

滴一滴蒸馏水在叶片上,然后将盖玻片轻轻覆盖在叶片上。

3.放置样品:将制作好的样品放在显微镜的样品夹上。

4.调焦:用调焦手轮将样品调焦到最清晰的位置。

5.观察细胞:通过目镜观察样品中的细胞,并注意细胞的形状、大小和结构。

结果与讨论:在本实验中,我们观察了鲜叶片的细胞结构。

在显微镜下,我们可以清楚地看到叶片上的细胞。

细胞是植物体的基本单元,它们具有细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核等结构。

在观察过程中,我们发现细胞的形状和大小各异,有的呈长方形,有的呈圆形,有的呈梭形等。

细胞壁是细胞的外围结构,它起到支持和保护细胞的作用。

在样品中可以清晰地看到细胞壁的存在,它呈现为一层透明且均匀的薄膜。

细胞膜是细胞内外的分界线,它控制着物质的进出。

细胞膜呈现为一层透明的薄膜,紧密地包裹在细胞质的外围。

细胞质是细胞核和细胞膜之间的区域,它包括细胞器和细胞液等成分。

在样品中,我们可以看到细胞质呈现为一种黏稠的半透明物质,散布在细胞核和细胞膜之间。

细胞核是细胞中的控制中心,它包含着遗传物质DNA,并参与细胞的分裂和遗传传递等重要功能。

在观察中,我们可以看到细胞核位于细胞质的中央,呈现为一个较大的、圆形的结构。

综上所述,通过显微镜的使用,我们成功地观察到了植物细胞的微观结构。

细胞是植物体的基本组成部分,了解其结构和功能对于我们深入研究植物学具有重要意义。

在今后的实验中,我们可以进一步观察和研究植物细胞的其他组成和特征,以更好地了解植物的生长和发育过程。

植物学实验报告显微镜

植物学实验报告显微镜

植物学实验报告显微镜
植物学实验报告:显微镜
引言
在植物学实验中,显微镜是一种重要的工具,它可以帮助我们观察和研究植物的微观结构。

通过显微镜,我们可以看到植物细胞的组成,细胞器的结构以及植物组织的细微特征。

本实验报告将介绍使用显微镜观察植物样本的过程和结果。

实验目的
本实验的目的是通过显微镜观察植物细胞的结构和特征,了解植物组织的微观构成。

实验材料和方法
1. 实验材料:显微镜、玻璃载玻片、植物样本(如叶片、茎部、根部等)
2. 实验方法:
a. 将植物样本切成薄片,并用盐水或甘油浸泡片段,使其变得透明。

b. 将植物片段放置在载玻片上,并加入一滴甘油或盐水。

c. 用显微镜将载玻片放大观察,调节焦距和光源,观察植物细胞的结构和特征。

实验结果
通过显微镜观察,我们可以清晰地看到植物细胞的结构和特征。

植物细胞通常具有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核和叶绿体等组成部分。

在叶片样本中,我们可以看到叶绿体的结构和色素体的分布;在茎部样本中,我们可以观察到维管束的排列和形态;在根部样本中,我们可以看到根毛和根尖细胞的形态特
征。

结论
通过本实验,我们成功地使用显微镜观察了植物细胞的结构和特征,了解了植物组织的微观构成。

显微镜为我们提供了一种强大的工具,帮助我们深入研究植物的微观世界,为植物学研究提供了重要的支持。

总结
显微镜在植物学实验中具有重要的作用,它可以帮助我们观察和研究植物的微观结构,从而深入了解植物的生长和发育过程。

通过本实验,我们对显微镜的使用方法和观察结果有了更深入的理解,为今后的植物学研究提供了重要的参考和指导。

植物显微实验报告

植物显微实验报告

实验名称:植物细胞显微结构观察实验日期:2023年10月26日实验地点:生物实验室实验人员:[姓名],[学号]一、实验目的1. 学习使用光学显微镜的基本操作。

2. 观察植物细胞的基本结构,包括细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、液泡等。

3. 理解植物细胞的结构与功能之间的关系。

二、实验原理光学显微镜利用可见光照射样品,通过透镜系统放大样品的图像,使人们能够观察到肉眼无法看到的细微结构。

植物细胞作为生物学研究的基础单位,其结构是生物学教育的重要内容。

三、实验材料与仪器材料:- 植物叶片(如菠菜、洋葱鳞片叶)- 生理盐水- 70%酒精- 甘油- 碘液- 刮刀- 滴管- 镜台- 物镜- 目镜- 载物台- 转换器- 显微镜四、实验步骤1. 样品制备:- 取一片新鲜的植物叶片,用刮刀轻轻刮取下表皮细胞。

- 将刮取的细胞放入盛有生理盐水的培养皿中,轻轻漂洗。

- 将细胞用70%酒精固定,并轻轻搅拌。

- 将固定后的细胞用滴管滴在载玻片上,覆盖盖玻片。

2. 染色:- 将载玻片上的细胞滴加少量碘液,轻轻摇动使碘液与细胞接触。

- 静置片刻,使碘液染色。

3. 显微镜观察:- 将载玻片放在显微镜载物台上,调整光源。

- 使用低倍镜找到细胞,然后逐步切换到高倍镜。

- 调整焦距,使细胞结构清晰可见。

4. 记录与绘图:- 观察细胞的结构,包括细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、液泡等。

- 使用绘图工具记录观察到的细胞结构,并标注名称。

五、实验结果与分析1. 细胞壁:细胞壁位于细胞的最外层,呈半透明状,具有支持和保护细胞的作用。

2. 细胞膜:细胞膜紧贴细胞壁,透明,具有调节物质进出的功能。

3. 细胞质:细胞质充满细胞,含有各种细胞器,如叶绿体、线粒体等,负责细胞的代谢活动。

4. 细胞核:细胞核位于细胞质中,呈圆形或椭圆形,含有遗传物质DNA,负责细胞的遗传信息传递。

5. 液泡:液泡位于细胞质中,呈圆形或椭圆形,内含细胞液,具有储存营养物质、调节细胞渗透压等功能。

植物学实验一显微镜和植物细胞

植物学实验一显微镜和植物细胞
再高倍观察(40X)(只能动细调整器) • 忌在高倍镜(40X)下调换显微标本。
显微图像旳统计措施:
生物绘图法
注意事项:
1、绘图和文字一律用2H或3H铅笔。 2、图注在右侧,平行线引出。 3、图形一律点线表达;
明暗和颜色深浅用不同密度圆点表达。
生物绘图环节:
** 观察:注意位置、百分比、特征;区别正常 构造与偶尔及人为假像;选择代表 性部位。
花生子叶细胞内旳贮藏物质观察:
(涂片法、显微化学法)
1、用刀片在花生子叶上刮取少许碎末; 2、将碎末涂抹在载玻片上; 3、加少许苏丹III和碘液,封片后观察。
-----观察花生子叶细胞内有哪些贮藏物质? -----这些物质分别被染成什么颜色?
作业:参见《试验报告本》
** 起稿:用软铅笔(HB)轻轻勾画出轮廓。 ** 定稿:用硬铅笔(2H或3H)将图清楚画
出;用“点点衬阴”法显示图像旳立 体感。 ** 文字阐明:在图旳右侧注明图中各部位名称; 在图旳下方中央写出图题。
植物细胞旳基本构造
植物细胞
细胞壁-----纹孔、胞间连丝
细胞膜
白色体
细胞质-----质体 叶绿体
显微标本:
1、小麦颖果制片---种子构造(单子叶禾本科) 2、柿胚乳制片---胞间连丝
体视显微镜旳使用
植物种子旳解剖观察 (油菜或蓖麻)
种子旳基本构造构成:
种皮
种 子
胚乳
子叶 胚芽

胚轴
胚根Biblioteka 环节:1、先用吸水纸将种子表面旳水吸干 2、去掉种皮(注意不要损坏内容物) 3、解剖种皮以内旳部分。
解剖过程中注意下列问题: 1、有无胚乳? 2、子叶有几枚? 3、哪端是胚根?哪端是胚芽?

实验六--植物显微化学制片

实验六--植物显微化学制片

实验六
一、实验目的
植物显微化学制片
利用临时装片进行显微化学鉴定,掌握常用植物显微化
学实验的原理与方法。
二、实验原理
将材料以徒手切片法制成薄片,利用化学反应或染色与
化学的方法,将组织或细胞内的某种化学成分 (淀粉粒、蛋白 质、脂肪等)在组织切片内予以显示,在显微镜下直接观测、 细胞中含有物的存在、性质、含量和分布的一种快速定性及 定位方法。
1.选用新鲜而健全的植物材料。
2.取材后要尽快地进行制片。以冰冻切片法或徒手切片法最为适宜。 3.切片厚度约20—40微米。
4.选用的试剂和化学反应方法必须是对某一待测物质具有专一的特殊性。
5.在取样的数量,或观察、测定的次数上都要有重复。尽量排除可能出现 的偶然性。 6.进行显微化学法鉴定时,应当注意对照试验。 7.反应处理的切片和对照的切片应该尽量邻近,最好是前一片作反应处 理,后一片则为对照切片。 8.随时-碘化钾溶液(碘液遇淀粉时,形成碘化淀粉, 呈现特殊的深蓝色或棕红色反应)
四、实验步骤
1、制作土豆临时装片; 2、染色:取一滴配好的溶液滴在切片上染色30s,水洗; 3、观察
五、实验结果
绘制马铃薯三种类型的淀粉粒图,并引线注明。
六、实验结果分析
七、植物显微化学鉴定的注意事项

植物显微技术实验报告

植物显微技术实验报告

实验一利用流动细胞仪测定植物DNA含量一、实验目的1、了解流动细胞仪的基本构造、原理与应用。

2、熟悉流动细胞仪的基本操作。

3、学会流动细胞仪样品制备及结果处理。

二、实验原理单个细胞、细胞群或其他生物微粒经过特异的荧光染料染色(DAPI或PI或免疫荧光标记)之后,在气体压力下,通过样品管引入到喷嘴内形成样品流,样品流经过激光束(488、405等)照射,样品流中的细胞吸收光能后发射出荧光,然后经相应的检测器检测,检测结果以直方图、二维散点图或三维立体图的形式显示出来。

根据荧光强度与胞内生物大分子含量的比例关系,对细胞进行定量分析。

三、实验步骤1、从野外取新鲜幼嫩的叶片(或竹笋)。

2、将新鲜的叶片(或竹笋)切取1平方厘米大小,放进干净玻璃培养皿中。

3、加入500μL PARTEC公司流式细胞仪自带的cystain UV precise P Nuclei Extraction Buffer 滴于样品上。

4、用双面刀片将样品剁碎,核提取2-3分钟。

5、然后再加入2mL 仪器自带的cystain UV precise P stain Buffer进行细胞核染色4分钟。

6、利用移液枪吸取染色后的样品,经公司自带的滤膜过滤到5mL的测量管中,进行测量。

四、实验结果水稻平均峰值25.25,用所测竹种的数值除以水稻平均峰值25.25就是该竹种的DNA含量所对应的DNA含量。

水稻(2C=1pg)获得类似下图结果白纹阴阳竹平均峰值为(104.71+108.5+109.37)/3=107.53白纹阴阳竹DNA含量:2C=107.53÷25.25×1pg=4.26pg实验二石蜡切片技术一、实验目的在有关植物胚胎发育和组织器官的形态建成研究的过程中,都需要应用到石蜡切片技术。

在植物杂交育种、作物病虫害防治、药用植物的培育和鉴别,以及林木材性鉴别等方面的研究和教学工作中,由于各作物器官的性质差异以及研究目的的不同,就需要用不同的制片方法。

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实验一植物根尖染色体压片法一、实验目的1. 学习并掌握根尖处理、染色、压片及制片观察的方法;2. 观察有丝分裂各时期染色体的形态变化,了解有丝分裂全过程。

二、实验原理高等植物有丝分裂主要发生在根尖、茎尖生长点及幼叶等器官的分生组织(分生区),其中根尖是最常用的材料:1. 根尖取材容易,操作和鉴定也比其它组织方便;2. 采用实验室内种子萌发后所长出的幼嫩根尖,不受植物生长季节的限制,并且可以大量获得;3. 对于某些珍贵而稀少的实验材料,取用自然条件下生长植株的根尖,比取用茎尖、花器等对材料的伤害要小得多;4. 采用实验室内种子发根,切取根尖后的种苗通常还可以进行正常种植,利于后续研究进行。

三、实验材料•大蒜(Aillum sativum 2n=16)四、实验器具和药品1. 用具:染色板,载玻片,盖玻片,指管,温度计,试剂瓶,滴瓶,镊子,解剖针,毛边纸。

2. 药品:无水酒精,70%酒精,冰醋酸,对二氯苯或秋水仙素,醋酸钠,碱性品红,石炭酸,甲醛,山梨醇,纤维素酶,果胶酶,中性树胶或油派胶(Euparal),二甲苯。

五、实验说明1.根尖由于取材方便,是观察植物染色体最常用的材料,有些植物种子难以发芽,或仅有植株而无种子,也可以用茎尖作为材料。

2. 植物细胞分裂周期的长短不尽相同,通常在十到几十小时之间,温度明显地影响分裂周期,对于一个不太熟悉的实验材料,最好在特定温度下长根,掌握有丝分裂高峰期,以便得到更多的有丝分裂的细胞。

3. 有丝分裂期在整个细胞周期中所占的时间相对较短,有丝分裂制片的主要目的是进行染色体鉴定,希望观察到更多分裂相,尤其是分裂中期相,通常要对材料进行不同的预处理。

(预处理的目的是降低细胞质的粘度,使染色体缩短分散,防止纺锤体形成,让更多的细胞处于分裂中期,一般在分裂高峰前,把根尖放到药剂中处理3-4小时。

常用的药剂,如秋水仙素、对二氯苯、8-羟基喹啉等。

)4.植物细胞的细胞壁对细胞形态和结构起支撑和保护作用,分生组织的细胞壁将分生细胞结合成一个整体,因此在压片之前需要采用适当方法软化或部分分解细胞壁使细胞间易于分离,称为解离。

同时,解离也可适当清除部分细胞质,使细胞质背景趋于透明化,便于观察染色体。

六、实验步骤1.前处理:将大蒜或洋葱的鳞茎,置于盛水的小烧杯上,放在25℃温箱中,待要长到2cm左右时,在上午九时摘下根尖,放到对二氯苯饱和水溶液,或0.02%秋水仙素溶液中,浸泡处理3-4小时。

2.固定:经过前处理的根尖,再放到卡诺固定液中,固定24小时。

固定材料可以转入70%酒精中,在4℃冰箱中保存,保存时间最好不超过二个月。

3. 酸解:从固定液中取出大蒜或洋葱根尖,用蒸馏水漂洗,再放到0.1mol/L HC中,在60℃水浴中,解离8-10分钟,用蒸馏水漂洗后,放在染色板上,加上几滴改良石炭酸品红染色液,根尖着色后即可压片观察。

4.压片:把染色后的根尖放在清洁的载玻片上,用解剖针把根冠及延长区部分剪去,加上少量染色液,并盖上盖玻片。

一个解离良好的材料,只要用镊子尖轻轻的敲打盖玻片,分生组织细胞就可铺展成薄薄的一层,再用毛边纸把多余的染色液吸干,经显微镜检查后,选择理想的分裂细胞,再在这个细胞的附近轻轻敲打,使重叠的染色体渐渐分散,就能得到理想的分裂相,要达到这个目的,必需掌握以下几点:①压片材料要少,避免细胞紧贴在一起,致使细胞和染色体没有伸展余地。

②敲打盖玻片时,用力要均匀,若在压片时稍不留意,使个别染色体丢失,而被迫放弃一个良好的分裂相的细胞。

5. 封片:把压好的玻片标本,放在干冰或冰箱结冰器时冻结。

然后用刀片迅速把盖玻片和载玻片分开,用电吹风把玻片吹干后,滴上油派胶加上盖玻片和载玻片封片,或经二甲苯透明后,滴中性树胶,加盖玻片封片,做成永久封片。

七、结果拍摄根尖染色体有丝分裂中期相。

实验二去壁低渗法制备染色体标本一、实验目的1. 学习利用去壁低渗火焰干燥法制备植物染色体标本。

2. 获得分散良好、形态清晰的中期染色体用于核型分析。

二、实验原理植物染色体标本制备最常用的方法是压片法,将材料解离后进行染色和压片,由于植物细胞具有很坚实的细胞壁,染色体很难像动物染色体那样平整地贴在载玻片上,使用压片法进行制片时常常由于细胞堆积致使染色体很难彻底分散开。

而去壁低渗法则是先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,得到原生质体,再将细胞进行低渗处理,即把细胞置于低渗液(低浓度的KCl或蒸馏水)中,使细胞充分吸水膨胀,染色体分散,平展地铺展在载玻片上,再用火焰干燥让染色体紧贴在载玻片上。

此法有效地克服了压片法中存在的染色体分散不开、平展不良等不足,现已成为当前植物染色体研究中的重要方法,广泛应用于核型分析、染色体显带等研究。

三、实验材料大蒜根尖(染色体数2n=16)四、实验用品:1. 器材:显微镜;温箱;冰箱;重蒸水;眼科镊子;刀片;牙签;载玻片;试剂瓶;三角瓶;量筒;酒精灯;青霉素小瓶2. 药品:①0.2% 秋水仙素溶液②Giemsa原液③甲醇(AR级以上)④冰醋酸(AR级以上)五、实验步骤1.取材:将大蒜瓣掰开,大头朝下置于白瓷盘中,加上少许水,3-4天后根长到1cm左右,将根剪下,用蒸馏水洗几次。

2.预处理:根尖用0.2%的秋水仙素溶液处理2~4h。

3. 前低渗:切取分裂旺盛的部分根尖(1mm),放入0.075mol/L氯化钾低渗液中,在25℃条件下处理30分钟。

以下可分两种方法进行处理:第一种方法:①酶解去壁:吸去氯化钾溶液,加入混合酶液(2ml滴管5滴左右),在25℃下处理1-2小时。

②后低渗:吸去酶液,慢慢加入(25±0.5) ℃的双蒸水,轻轻洗一次,然后在双蒸水中浸泡10-30分钟第二种方法:①固定:吸去前低渗液,立即加入甲醇:冰醋酸(3:1)固定20-30min②水洗:将固定好的材料用蒸馏水洗三次,除去材料中的固定液③酶解去壁:在小瓶内加入混合酶液(酶液量以浸过材料为合适),在25℃下酶解30-60min。

④后低渗:同上,但是,可适当延长时间至1-1.5小时。

4. 经过上述两种方法处理的材料,可用两种方法制备染色体标本第一种方法——涂片法:①固定:经后低渗的材料,直接用甲醇:冰醋酸(3:1)固定30min上②涂片:将材料放在预先用蒸馏水浸泡并冷冻的清洁载玻片上,加1滴固定液,然后用镊子迅速将材料夹碎涂布,并去掉大块组织残渣③火焰干燥:立即将载玻片在酒精灯火焰上微微加热烤干④染色:经干燥的玻片标本,用Giemsa染色液染色30分钟,然后用自来水细流冲洗,甩干水珠空气干燥。

第二种方法——悬液法:①制备细胞悬液:倒去双蒸水,用镊子立即将材料夹碎形成细胞悬液;②固定:向细胞中加入新配制的甲醇:冰醋酸(3:1)固定液1-2ml,使成细胞悬液;③去沉淀:静置片刻使大块组织沉淀,然后取上层悬液于另一个小瓶中;④去上清夜:将上层细胞悬液静置30分钟左右,即可见细胞沉淀,用吸管轻轻吸去上清夜,留约0.5ml左右细胞悬液置备标本;⑤标本制备:在一张经过充分洗净脱脂,并预先在蒸馏水中冷冻的清洁载玻片上,用吸管滴2-3滴细胞悬液,立即将载玻片一端抬起,并轻轻吹气,使细胞迅速分散,然后在酒精灯火焰上微微加热烤干。

⑥染色:同涂片法④5. 镜检:在显微镜下寻找典型的中期染色体,注意观察中期染色体的长臂、短臂和着丝粒位置,并尽可能找到具随体染色体。

六、注意事项1.由于分裂细胞主要位于根尖的分生区,所以切取根尖时不宜太短(丢失分裂的细胞),也不宜太长(使分裂细胞在所有细胞中的比率减少),以刚好切下分生区最为适合。

2.用吸管吹打时要充分,尽量使组织块分散成单个细胞,观察细胞悬液看不到漂浮的组织块即可,如果组织块不分散会不利于染色体分散。

3.载玻片要预先冰冻,进行滴片时,从冰箱中拿出载玻片后马上滴片。

由于在进行滴片时,细胞铺展在整个载玻片上,所以染色时要尽量铺4.满载玻片,注意不要将染液滴到实验台及其它地方。

七、作业:去壁低渗火焰干燥法与压片法相比,其优点是什么?实验三徒手切片法一、实验目的1. 掌握临时装片的制片方法、掌握徒手切片的方法2. 了解植物细胞结构。

二、材料与用品器械:显微镜、载/盖玻片、刀片、镊子、滴管、擦镜纸、毛笔、培养皿实验材料及夹持物:洋葱鳞茎、西红柿老熟果实、芹菜叶柄三、实验原理用光学显微镜观察的样品,必须是透明的薄片,因此,首先要把观察的材料制成透明的切片后才能在显微镜下观察。

徒手切片法是指手拿刀片把新鲜材料切成薄片,制成临时装片的方法。

此法简单方便,不需设备即可保留植物活体状态。

四、实验内容和实验方法(一)临时装片的制作1. 擦净载玻片和盖玻片①擦载玻片用左手的拇指和食指捏信载玻片的边缘,右手用纱布将载玻片上下两面包住,然后反复擦拭,擦好后放在干净处备用。

②擦盖玻片先用左手拇指和食指轻轻捏住盖玻片的一角,再将右手拇指和食指用纱布把盖玻片包住,然后从上下两面隔着纱布慢慢地进行擦试。

2. 取样用滴管滴一点水或其他溶液(根据需要)于载玻片的中央,把观察物放于载玻片上的液滴中,展开或摇匀。

3. 盖盖玻片右手持镊子,轻轻夹住盖玻片的一角,使盖玻片的边缘与液滴的边缘接触,然后慢慢倾斜下落,最后平放于载玻片上,避免气泡的产生。

如盖玻片下的液体过多,可用吸水纸将多余的液体吸掉。

(二)徒手切片法徒手切片法不需要任何机械设备,只需要一把锋利的刀片即可完成切片的制作,方法简单,也容易保持物的生活状态,有很大的实用价值。

1. 选材选择软硬适度的材料,先截成适当的段块。

一般直径大小3-5mm、长度20-30mm为宜。

若材料太软,如幼叶,不能直接拿在手中切片,可用适当大小的马铃薯块茎或萝卜块根等作支持物,将材料夹入其中一起切片。

2. 切片用左手拇指、食品指和中指夹住材料,使其稍突出在手指之上,拇指略低于食指,以免刀口损伤手指。

材料和刀刃上蘸水,使其湿润。

右手拇指和食指横向平握刀片,刀片要与材料断面平行,刀刃放在材料左前方稍低于材料断面的位置,以均匀的力量和平稳的动作从左前方向向右后方拉切。

切片时要用臂力而不用腕力,手腕不要动,靠肘、肩关节的屈伸来切片,拉切要快,中途不要停顿,更不能用拉锯方式进行切片。

每切2-3片就要把刀片上的薄片用湿毛笔移入盛有清水的培养皿中暂存备用。

如发现材料切面出现倾斜,应修平切面后再继续切片。

3. 镜检观察连续切下很多切片后,挑选最薄的切片放于加了1滴清水的载玻片,盖上盖玻片,制成临时装片,进行镜检、观察。

(三)植物细胞的结构观察1. 洋葱表皮细胞的观察取一洁净载玻片,于载玻片中央加上一滴水。

取洋葱一个,剥下一片新鲜的带紫色的南鳞叶,和刀片从外表面(或内表面)切一个面积为4mm2左右的方形小格,然后用镊子将表皮撕下,迅速入入载玻片上的小水滴中(表面向上)。

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