植物基因转化受体系统

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培养技术相对于原生质体培养来说要容易的多,转 化效率优于其他组织培养系统
被认为是最为理想的基因转来自百度文库受体系统
特点
胚性细胞繁殖量大,同步性好,具有较强的接受外 源DNA的能力,转化率高
转化后胚性细胞可通过体细胞胚途径发育成完整植 株,嵌合体少
体细胞胚具有双极性,减少了不定芽发育途径中的 生根培养过程
来自同一体细胞胚的后代个体间遗传背景一致,无 性系变异小
生殖细胞受体系统
以生殖细胞如花粉粒和卵细胞为周倜细胞进行基因 转化的系统称为生殖细胞受体系统,也叫种质系统。
途径: (1)利用小孢子和卵细胞的单倍体培养,诱导出胚
性细胞或愈伤组织细胞,建立单倍体的基因转化受 体系统; (2)直接利用划分和卵细胞受精过程进行基因转化, 如花粉管通道法,花粉粒浸泡法和子房微注射法。
株难度更大
注意问题
直接分化受体系统比较适合于无性繁殖植物 选材:从组织类型上讲,子叶、叶片、胚轴和某些
营养变态器官通常比较容易诱导;从细胞状态上讲。 薄壁细胞状态外植体较容易诱导
原生质体再生系统
原生质体由于除去了细胞壁的屏障,能够直接高效 的摄取外源DNA或遗传物质,甚至细胞核
适合于现在建立的所有转化方法
油菜是人们食用油的 主要来源之一。一般油 菜籽的含油量约为40 %左右。通过转基因技 术,培育出来的油菜籽, 可以大大地提高它的出 油率。而且油的纯度质 量更好
转基因小麦
从植物体中分离出合 成赖氨酸的基因,把这 基因转入小麦植株中, 培育出转基因小麦。用 这种转基因小麦制造出 来的面粉,更适合用来 烤面包,而且面粉中赖 氨酸含量高,这种面包 的营养价值高。
且要求比一般的组织培养技术要高
一、高频再生系统的建立
高频再生系统必须满足4个条件: (1)外植体的组织细胞具有诱导愈伤组织和再生完
整植株的能力,并且最好是外植体能直接分化出芽 (2)芽的分化率要高 (3)易于离体培养,具有高度可重复性 (4)体细胞无性系变异小
植物周倜系统接受外源基因后不影响吱声非改造遗 传体系
又能外源基因遗传给后代,保持其遗传的稳定性 同时选材时注意尽量减小受体系统体细胞变异的发

具有温度的外植体来源
由于基因转化频率低,实验重复较多,因此需要稳 定的外植体来源;
常用转化外植体:种子,无菌实生苗的胚轴、子夜 或幼叶,一些植物的试管苗,以及可较高频率诱导 的营养变态器官。
第一节 植物基因转化受体的条件
植物基因转化的受体系统:一般是指通过组织培养 途径或其他非钻石培养途径,能够高效、温度地再 生无性系,并能接受外源基因的整合,对用于转化 选择的抗生素敏感的再生系统
高效稳定的再生能力
具有较高的再生频率; 具有良好的实验稳定性和重复性。
较高的遗传稳定性
注意问题
直接使用外植体组织进行农杆菌侵染时,应注意从 活跃生长的植物部位取材
用愈伤组织进行转化,应在愈伤组织细胞处于分省 细胞状态时进行转化,此时易于接受外援基因,转 化效率高
愈伤组织必需保持良好的生长状态,继代周期不能 太长
不经过愈伤组织的受体系统
不经过愈伤组织的受体系统也称为直接分化再生系 统,是指外植体细胞越过脱分化阶段,直接分化出 不定芽,从而获得再生植株的受体系统;
特点
原生质体受体系统利于准确的转化和鉴定 转化原生质体获得的转基因植株嵌合体少 但由于目前许多的原生质培养体系还不成熟,受原
生质体培养技术的限制,转化试验的重复性较差 原生质体培养周期长,受体细胞本身的体细胞变异
频率高,遗传稳定性差
细胞系及其体细胞胚受体系统
经过筛选和优化的植物细胞悬浮培养的细胞系,具 有较好的遗传和生理一致性,经过培养基调节,可 形成体细胞胚
抗生素敏感性
为了便于转化子的筛选需要使用标记基因(如抗生 素抗性基因等)
选择性抗生素需满足的条件: (1)植物受体材料对所选用的抗生素具有一定的敏
感性; (2)抗生素对受体植物没有剧烈的毒性,不会很快
杀死植物细胞
对抗生素过度敏感或过度钝化的植物材料都不适合 于构建植物转基因的受体系统
特点:
具有更强的接受外源DNA的潜能 转化的基因无显隐性的影响,利于性状的选育,加
倍后可迅速获得纯合二倍体新品种 花粉管通道法将现代的分子育种与常规育种紧密结
合,是十分有潜力的受体系统 在花粉或小孢子培养系统作为受体系统更为理想
第三节 植物基因转化受体系统的建立
建立一个好的受体系统是实现基因转化的先决条件 受体系统的建立主要依赖于植物组织培养技术,而
不同的受体类型具有不同的缺点,适合的转化方法 也不同
实际操作中应根据受体的特性,基因转化方法,选 择适宜的受体系统
特点
外植体来源广泛 扩繁量大,可获得较多的转化植株 使用的植物范围广
从愈伤组织分化的不定芽的多细胞起源特点,形成 嵌合体较多
再生植株无性系变异较大,转化的外源基因遗传稳 定性较差
第七章 植物基因转化受体系统
主要内容
1、植物基因转化受体的条件; 2、植物基因转化受体的类型及其特性; 3、植物基因转化受体系统的建立; 4、受体系统常见的问题及其解决途径。

我国科学工作者,
用转基因技术,可

以转变矮牵牛花的

花色,使矮牵牛花 的花色更加丰富多

彩。


转基因油菜
农杆菌敏感性
农杆菌介导的基因转化由于具有转化效率高、多为 单拷贝插入等优点,是常用的植物基因转化方法;
使用农杆菌介导的转化方法,需要植物受体对农杆 菌敏感
在选择农杆菌转化系统前,必需测试受体系统对农 杆菌的敏感性
第二节 植物基因转化受体的类型及其特性
由于众多类型的植物离体培养技术的完善,使转基 因受体系统有了很大的选择范围
研究显示,采用叶片、幼茎、子叶、胚轴以及一些 营养变态器官为外植体时,在适宜的培养技术控制 下,均可直接分化出芽
特点
获得再生知足周期短,操作简单 体细胞无性系变异相对较小,可较好的维持受体植
株的遗传特性 转化的外源基因能稳定遗传(特别是茎尖) 同样可能出现较多的嵌合体 外植体直接分化出芽较难,转化细胞直接分化成植
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