药物的鉴别试验

第二章药物的鉴别试验

第二章药物的鉴别试验

基本要求

1、掌握常用一般鉴别试验的原理、操作方法。

2、熟悉鉴别试验条件对结果的影响。

学习要点

1、化学鉴别法--呈色、沉淀、荧光、气体、测定mp。

2、光谱鉴别法--红外法（对照图谱）；紫外法（对比特征参数λmax，E1%1cm，A，λmin；比较吸收度比值Al/A2的一致性；对比吸收光谱的一致性）。

3、色谱法--HPLC、TLC、GC等（采用标准品对照法）。

内容

》概述

》鉴别试验项目

》鉴别方法

》鉴别试验条件

》鉴别试验灵敏度

一、概述

药物的鉴别试验（identification test）——判断药物的真伪药品质量检验的首项任务

药典收载的鉴别试验——均为用来证实贮藏的药物是否为其所标示的药物。

这些方法有一定的专属性，但不能赖以鉴别未知物。

对于原料药，还应结合性状项下的外观和物理常数进行综合判断。

二、鉴别试验的项目

鉴别

1、性状(description)

2、鉴别(identification)

性状----反映了药物特有的物理性质

包括:

1、外观————聚集状态、晶型、色、臭、味

2、物理常数——mp, bp, [a]t D, E1%1cm,η等

3、溶解度

4、熔点：

1、固体---->液体的温度

2、熔融同时分解的温度

3、初熔-全熔的一段温度

5、ChP收载方法

第一法：测定易粉碎的固体药品

第二法：测定不易粉碎的固体药品

第三法：测定凡士林或其他类似物

6、要求报告初熔和终熔

7、比旋度：

在一定波长（589.3nm）与温度（20°C）下，偏振光透过长1dm，含旋光性物质1g/1mL 的溶液时测得的旋光度a，称为比旋度。 [a]t D = 是手性药物特性及其纯度的主要指标。

8、吸收系数

在给定波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度（C）、单位液层厚度（L）时的吸收度，称为吸收系数（ E1%1cm或e）。

E1%1cm = A / C×L

C= 1%或1mol/L，L= 1cm

一般鉴别试验（general identification test）

依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪。

有机药物:官能团反应。

无机药物:阴、阳离子的反应

阴、阳离子的特殊反应

例钠盐、钾盐、钙盐的焰色反应

铵盐鉴别方法

氯化物

鉴别——供试液＋硝酸＋硝酸银→白色↓白色↓＋氨试液→沉淀溶解＋硝酸→白色↓

硫酸盐

鉴别——供试液＋氯化钡→白色↓白色↓＋硝酸（盐酸）→沉淀不溶

有机药物——典型的官能团反应。包括：丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物类、水杨酸盐、枸橼酸盐、乳酸盐等鉴别。

例有机氟化物鉴别

样品经氧瓶燃烧法破坏，被碱性溶液吸收成为无机氟化物，与茜素氟蓝、硝酸亚铈在pH4.3溶液中形成篮紫色络合物。

反应原理如下：

由上可知，一般鉴别试验只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。

专属鉴别试验（specific identification test）

是证实某一种药物的依据。

根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。

例巴比妥类药物含有共同母核，区别在于5，5-位取代基和2-位取代基的不同：苯巴比妥---苯环

司可巴比妥---双键

硫喷妥钠---硫原子

又如甾体激素类药物含有环戊烷并多氢菲母核，主要差别在A环和D环的取代基不同，可利用这

些结构特征进行鉴别确证。

综上所述，一般鉴别试验是以某些类别药物的共同化学结构为依据，根据其相同的物理化学性质进行药物真伪的鉴别，以区别不同类别的药物。

而专属鉴别试验，则是在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结构差异，来鉴别药物，以区别同类药物或具有相同化学结构部分的各个药物单体，达到最终确证药物真伪的目的。

三、鉴别方法

要求：专属，再现，灵敏，操作简便、快速

常用方法有：

(一)、化学鉴别法——

呈色，沉淀，荧光，气体

—三氯化铁呈色反应 ----酚羟基；

—异羟肟酸铁反应 ----芳酸、酯、酰胺；

—茚三酮呈色反应 ----类似氨基酸结构；

—重氮化-偶合显色反应 ---芳伯氨基；

—氧化还原显色等等。

●与重金属离子的沉淀反应；

●与硫氰化铬铵（雷氏盐）的沉淀反应。

●药物本身产生荧光；

●与各种试剂（硫酸、溴、间苯二酚等）反应后产生荧光；

☆强碱处理，加热，产生氨（胺）气；

☆强酸处理，加热，发生硫化氢气体；

☆直火加热，生成紫色碘蒸气；

☆硫酸水解，加乙醇产生醋酸乙酯香味。

(二)、光谱鉴别法——

紫外法——在指定溶剂中测定2～3个特定波长处的吸收度比值（峰值与峰值比或峰值与峰谷比），以提高专属性。

例地蒽酚的鉴别试验：

取含量测定项下的溶液，照分光光度法测定，于240～400nm的波长范围内测定吸收度，在257、289与356nm的波长处有最大吸收。

规定：A257/A289应为1.06～1.10；

A356/A289应为0.90～0.94。

对于一个药物多个吸收峰的峰值相差较大时，采用单一浓度不易观察到全部吸收峰，可采用两种浓度的供试液分别测定其最大吸收波长。

例氯贝丁酯的鉴别试验：取本品，加无水乙醇制成每1mL中含0.10mg的溶液（1）与每1mL 中含10ug的溶液（2），照分光光度法测定，溶液（2）在226nm的波长处有最大吸收；溶液（1）在280与288nm的波长处有最大吸收。

综上所述，紫外鉴别方法通常有