头皮屑检测

头皮屑相关菌群的检测

一、头皮屑概述

头皮屑是头皮或头发上肉眼可见的细小鳞屑，大多数学者认为本症是一种轻度的脂溢性皮炎。头皮屑是角质层细胞不断从表皮脱落，和头皮分泌的皮脂及空气中的尘埃等混合在一起形成的。头皮屑是不正常的脱屑过程，任何使角质层细胞代谢过快或皮脂分泌过多的因素如饮食、压力、遗传及健康状况都能诱发或加重头皮屑。而与头皮屑有关的最重要的微生物是马拉色菌，自19世纪以来已有大量的临床及实验室相关研究证实该学说，实际上头皮应用抗真菌制剂与头皮屑的改善有明显的关系，头皮屑的反复发作给治疗带来一定的困难也与该菌的感染有关。研究表明角质层细胞间脂质成分的减少，表皮屏障功能发生障碍使头皮屑患者对微生物、环境污染等因素更易感。马拉色菌属是双相嗜脂性酵母菌，是人类皮肤上的正常菌，属条件致病菌，有研究表明马拉色菌在正常人群、头皮屑及脂溢性皮炎患者皮肤寄生的微生物中所占比例分别为46％、74％及83％。

二、马拉色菌的致病机理

马拉色菌大多菌体含脂酶，以镶嵌形式存在于富含葡聚糖的细胞壁和(或)细胞膜系统。由于这种真菌需要油脂来生长，因此它通常会感染脂腺发达区域，例如：头皮、脸部以及上半身。当这些真菌繁殖速度过快时，细胞的自然更新过程就会受到干扰，瘙痒及皮屑就会出现。其他研究还发现该菌属具有透明质酸、磷脂酶、脂氧合酶等活性，这些酶具有干扰细胞膜信号传递、损伤细胞膜等功能，从而导致疾病的发生。该菌属还具有蛋白酶活性。蛋白酶能分解角蛋白和胶原蛋白，为菌体提供氮源。

马拉色菌的过量繁殖会破坏头皮角质细胞和细胞间脂质层的紧密结构。而头皮屑的反复产生和脱落，则使患者的头皮角质层厚度明显变薄。有调查结果显示，长期头皮屑患者的头皮细胞平均不到10层。比起正常人拥有的完全角化的25-35层紧密结合在一起的细胞足足少了2/3，这就严重削弱了头皮的防御屏障。在健康的头皮上，马拉色菌和人类相安无事，头皮的易感性及头皮油脂分泌量会保持相对的平衡状态。脱落的角质细胞零星而透明，肉眼无法察觉。而这种平衡一旦被打破，马拉色菌就会异常繁殖，造成表皮代谢加速，表皮细胞会成群大片脱落。头皮屑的反复发作使头皮细胞层严重受损，变薄的头皮细胞层不能健康毛囊，稳

固发根，脱发由此产生。

三、马拉色菌检测的意义

针对以上机理，目前市售各类去头屑产品中已普遍采用抗真菌药物(如巯氧

吡啶锌ZPT、酮康唑、二硫花硒、各种植物提取物等)作为最主要的去屑成分。作为评价该类产品功效的试验指标，除头皮屑的严重度评分外，已将马拉色菌的检测作为功效评估的重要指标。

四、临床检测方法

方法一：头皮屑严重程度评分

在临床评估中，头皮屑严重度评分被认为是最早期、最直接和有效的评价指标，几乎所有的功效试验都将其列为首要的参考指标。关于头皮屑严重度评分方法目前没有具体的统一的评价标准，国外的研究中最常采用的是“黏着性头屑十级评分法”，即0级表示无头屑，1～2级为小片粉状灰白粗糙鳞屑，3～4级为小至中等大小屑片，5～6级为与头皮疏松相连的大而薄的屑片，7～8 级为大的黏着性屑片，9～10级为与头皮紧密附着的白至黄色的较厚鳞屑。试验中多将头皮分多个区域进行综合评分，或对皮屑最严重的区域评分，并以评分在某界定值以上作为受试者纳入的标准。

方法二：胶带法

采用高压灭菌后的一次性微孔透气胶带在患处粘贴取材，对所取标本分别滴加1 ~ 2滴美兰染液或派克墨水染液染色后，在显微镜下观察记录检出阳性率及染色效果。

美兰染液将孢子或菌丝染为深蓝色，派克墨水染液将孢子或菌丝染为浅蓝色。美兰染色后可见圆形或卵圆形的深蓝色孢子或菌丝，背景可见浅蓝色皮屑，未见脂滴、气泡等，孢子或菌丝与背景区分较明显。派克墨水染色后标本中可见圆形或卵圆形的浅蓝色孢子或菌丝，背景呈浅红色，皮屑不着色，可见脂滴、气泡等。两种染液对马拉色菌均上色迅速，可在滴加染液后立即观察。

方法三：培养法

在受试者头皮以无菌棉拭子蘸取适量生理盐水，反复擦洗头皮三次，擦洗下的头皮屑棉拭置lml生理盐水消毒离心管中，经震荡均匀后接种至含5％芝麻油的氯霉素沙堡氏葡萄糖琼脂培养皿(直径9cm)上，37℃恒温箱培养7-10天，所有生长出的菌落隔天观察菌落形态，并挑取培养基上生长的单菌落行美蓝染液或派克墨水染液染色，镜检，确定是否为马拉色菌。统一第八天计算每平方厘米头皮马拉色菌菌落数。