豆粕品质的检测方法

豆粕品质的检测方法

一、评定指标

1、1：抗胰蛋白酶的活性：Trypsin Inhibitor Activity TIA大豆粕在0。01mol/LnaOH

浸泡1h过滤,滤液用PBPA水解.测胰蛋白酶活性TIU.

1、2：尿酶活性（Urease Activity UA）国际标准法（ISO）、PH增值法（ΔPH法）、扩

散法、酚红法。CHINA规定ΔPH《0。4 在0.02-0.2之间是优质豆粕.UA与TAI几

乎同步失活.在加热过度以前,TIA以全部失活.

1、3:蛋白质溶解度:(Protein Solubility)美国乔治大学:Dale & Araba (1987)以检

测豆粕是否加热过度.一定量的豆粕与0.2%NaOH溶液混合离心过滤,滤液凯氏测

氮.PS<70%,则加热过度,70-80%为适宜,测时其灵敏度不够,粒度影响,当粒度在

60-80目时方稳定.

1、4：有效赖氨酸:赖与精氨酸属热敏性AA,高温时Lys与还原糖发生Maillard反应.

测定法有:A染料结合法(DBL):二硝基氟苯(FDNB),三硝基磺酸(TNBS),酸性橙-12,

茚三酮发生特异性呈色反应.B 高效液相色谱法(HPLC)

1、5：蛋白质的水溶解度和氮的水溶解度：蛋的质的水溶解度（PDI）与氮的水溶解度

（NSI），二者只是与水混合后的搅拌强度不一样。PDI是8500r/min的速度搅拌

10min，NDI是120r/min搅拌30min。PDI测定豆粕的加热程度比UA和PS（NaOH）

灵敏，NSI在7-27.8%是可以接受。NSI低于10%则为加热过度。Balloun & Hgymard(1959):加热时间延长，NSI降低，加热过度，则大大降低，鸡的增重与饲

料报酬降低。

1、6考马氏亮蓝法：Kratzer(1989): 考马氏亮蓝对蛋白质考马氏亮蓝考马氏亮蓝显色

对AA不显色并与PS相关度好但考法测的实际值大大低于凯氏法测的蛋白质溶解

度。这可能与凯氏法将全部AA包括在蛋白质内的缘故。但考法较PS法测的时间短

的多，故考法更适合评价经受不同热处理时间后饲料中可溶性蛋白质的含量。

1、7：其它方法：橙黄G染色法（只能有限鉴定过分加热处理的大豆粕）、甲醛滴定法、

甲酚红染色法(每克豆粕吸收甲酚红的毫克数2-3mg为生豆粕,3.3-3.7mg为加工不

足,3.8-4mg为适当,4.3mg为加热过度)、颜色亨特色值。（Smith1981：颜色与蛋白

质有较高的相关性）

二、豆粕质量与生产性能

熱處理對大豆粕中可代謝能量之影響

生大豆粕中的可代謝能量要比經熱處理的大豆粕來得低（Hil l 及REn ner , 1960 ., 1963）。一般認定，含48 %粗蛋白的大豆粕，每公斤約含有2,440仟卡的可代謝能量（NRC）。含有10個單位胰蛋白酶抑制因子的大豆粕樣品，其每公斤應有2,575 仟卡的可代謝能量，但要是檢測出來的胰蛋白酶抑制因子大約在５個單位時，其可代謝能量可增至2,740 仟卡（M ian及Gar lic h，1987）。P ars on 等人曾做觀察，發現去穀大豆添餵燒烤用肉雞及火雞時，其真正斤提供之可代謝能量，分別為3,003 及3,292 仟卡。在107 ℃溫度下經10 ~ 13 分鐘熱處理之大豆薄片，其每公斤可代謝總能量為

3,130仟卡，但是熱處理過度（即在121℃的溫度下，經121分鐘的熱處理）的大豆薄片，其每公斤的可代謝總能則會降至2,700仟卡（Sib bal d,，1980）。

熱處理對大豆粕中蛋白質之影響

過去幾年來，曾有多種方法被用來檢測大豆粕是否加熱過度而影響其飼養價值。這些方法當中，包括有藉由甲醛滴定、甲酚紅染色法，以及橘色─Ｇ染劑染色法（orange -

G dye binding），來測出其游離功能基（free functional group）的方法；及藉由凱氏法或Coomassie 藍色染劑染色法，來檢測其加熱後所產生具有螢光的衍生物，以及蛋白質的溶解度。

甲醛滴定法

Almquist 及Maurer （1953）曾建議採用甲醛滴定法來評鑑大頭粕是否熱處理過度，其檢測結果之資料詳列如表７。經蒸煮過之大豆蛋白，其功能基會降低。

甲酚紅染色法

本染色法曾由Olomucki 及Bornstein（1960）作過詳細的描述。其檢測步驟為，採取400 毫克的樣品，先經 1 mm 網目之篩網篩濾後，再置於10 公撮之甲醛紅溶液中，然後一齊加以振動一個時。本檢測法所用之甲醛染色液，係以 1 公撮含有0.2 公克溶於100 公撮（0.2%）酒精及9 公撮（0.1 N）鹽酸混合液之甲醛紅溶液稀釋調製而成。上述稀釋液經離心處理後，其上層部份再到入一裝有9 公撮（0.2 N）的氫氧化鈉溶液中，並測量其顏色的濃度。如果Ｘ＝大豆粕被染劑所吸收的量（mg），而Ａ＝在最適當濃度所吸收的染劑量（mmg）讀取。那麼Ｘ＝〔2.00－( 10 XA )〕。甲醛紅染色法與大豆粕熱處理間的相關性詳列如表８。

表７.以甲醛滴定作為大豆粕熱處理法的檢測指標

表８.大豆粕熱處理程度與紅染色法間的關係

橘色─Ｇ染劑染色法

Moran 等人（1963）曾就橘色染劑Ｇ染色法的檢測程序加以述說。大豆粕經高壓蒸煮後，其橘色─Ｇ染色值會隨之降低，但由他們研究所獲得之數字（詳如表９）顯示，此一檢測方法靈敏度並不很高。

螢光測定法

徐等人（1949）曾經提述過一種利用螢組檢測熱處理大豆粕抽出物的方法，人旦他們對於此項檢測方法的細節並未加說明。惟按Ewing （1963）所引述的檢測步驟，是將採得之雙份經細磨之大豆粕樣品（每份樣品為0.01公克），倒入裝有25 公撮0.01 M 濃度氫氧化鉀磷酸鹽溶液的50 公撮加蓋Er-lenmeyer 三角餅中，在pH 值 4.8 的狀況下，以機械方式振盪15 分鐘與予萃取。再用42 號Whatman 濾紙上述萃取液加以過濾，然後將過濾後之溶液，置於Coleman-12 型的螢光測定儀下，檢測並讀出其螢光值。在檢測螢光值前，螢光測定儀必需先予標準化校正，即在以每公撮0.10 mg 奎寧之標準受測液作校正測試時，其螢光值讀取數標準應為100。最後在作檢測時，需將萃取液適當地稀釋成幾種不同的濃度，並置於磷酸鹽的緩衝液中，再進行檢讀結果，而其檢測結果，係以相當於每公古大豆粕中所含奎寧硫化物微克量的螢光值來表示。Balloum 等人（1953）曾採用此種方法來檢測經高壓（磅／平方英吋）蒸煮過的大豆粕，並與使用尿素酶活性的檢測方法作過比較。尿素酶活性是用每以克加有尿素大豆粕所釋放出來氨的百萬分當量來測定；而螢光值則是以每公克大豆粕中所含奎寧硫化物的微克量來表示。由他們所測得而列於表10 的數字顯示，當大豆粕經過壓蒸煮至60 至90 分鐘時，其螢光值會有顯著的增加，也就是說大豆粕加熱處理時延長，會有引起雞隻生長減緩的情形。

表９.大豆粕加熱處理對其橘色─Ｇ染色法反應能力之影響