华中农业大学生物化学本科试题库 第18章 基因工程基础
基因工程试卷2
华中农业大学本科课程考试评分标准考试课程与试卷类型：基因操作原理姓名：学年学期：学号：考试时间：班级：一、填空题（每小题2分，共30分）1.PCR技术应用广泛，以下不属于PCR应用的为 ___D_____：(A) 随机扩增多态性DNA(RAPD)； (B) 扩增片段长度多态性(AFLP)； (C) RACE； (D) S1 酶作图。
2.λ噬菌体线性 DNA 分子的两端各有一个____12_____个碱基组成的天然黏性末端。
3.PCR扩增有时会出现弥散的条带，以下原因阐述不正确的是___B______：(A) 退火温度过低； (B) 退火温度过高； (C) dNTP 浓度过高； (D) 循环次数过多。
4.下列哪一种酶作用时需要引物____B_____：(A) 末端转移酶； (B) 反转录酶；(C) DNA连接酶； (D) 限制酶。
5.Cosmid 实际上是由_λ噬菌体__和__质粒_____构成的杂合载体，也可以说是带有__cos__序列的质粒。
6.限制性内切酶的命名主要根据__来源菌株属名第一个字母，种名头两个字母以及菌株号、序号_____来确定，以下各种书写方式中哪种或哪几种是正确的____AC____：(A) Pst I;(B) KpnI； (C) Hin dIII; (D) Hind III; (E) T th111I; (F) Bsp1286I； (G) XbaI7.在分子克隆常用的E.coli菌株中Dam 和Dcm 甲基化酶都是有活性的，它们可在DNA的特定位点作甲基化修饰。
而许多限制性内切酶对甲基化是敏感的，一旦所识别的酶切位点被甲基化就不能切割该位点，如Cla I (AT/CGAT)。
请问Cla I不能切割以下哪个或哪些来自dam+ dcm+ E.coli菌株的DNA序列____C_____。
(A) ATCGATA； (B) ATCGATG；(C) ATCGATC； (D) ATCGATT。
华中农业大学生物化学本科试题库第18章基因工程基础
第 18 章基因工程根底单元自测题(一) 名词解释1. 遗传工程2.生物技术3.基因工程4.细胞工程5.蛋白质工程6.分子克隆7.载体8.转化和转染9.基因文库10. cDNA 文库(二) 填空1.自然界的常见基因转移方式有、、、。
2.不同DNA分子间发生的共价连接称为，有、两种方式。
3.基因工程的载体必需具备的条件有、、。
4.基因工程常用的载体DNA分子有、、和。
5.一个完整的DNA克隆过程应包括、、、、。
6.目的基因猎取的途径或来源有、、、。
7.基因工程过程中重组体直接筛选法的方式有、、。
8.基因克隆真核生物表达体系常见的有、、表达体系。
9.依据重组体DNA的性质不同，将重组体DNA导入受体细胞的方式有、、等。
10.假设M13的外源基因被插入到lac Z 基因内，则在含有X-gal 的培育基上生长时会消灭色菌落，假设在lac Z基因内无外源基因插入，在同样的条件下呈现色菌落。
11.当细胞与细胞或细菌通过菌毛相互接触时，就可以从一个细胞(细菌)转移到另一细胞(细菌)，这种类型的DNA转移称为作用。
12.重组DNA 技术中常用的工具酶有、、、。
(三) 选择题1.以下那种方式保证了免疫球蛋白的多样性?A.转化B. 转染C. 转位D. 转导2.微切割技术使目的基因可来源于以下那种物质?A.真核细胞染色体DNAB.人工合成DNAC. cDNAD. G-文库3．重组DNA 技术中常用的工具酶以下那项不是：A.限制性核酸内切酶B. DNA 连接酶C. DNA 聚合酶ID. RNA 聚合酶4．DNA 致癌病毒感染宿主细胞后，使之发生癌变是由于发生了：A. 转化B. 转导C. 接合D. 转座5.关于基因工程的表达，以下哪项是错误的?A.基因工程也称基因克隆B . 只有质粒DNA 可作为载体C . 重组体DNA 转化或转染宿主细胞D. 需获得目的基因6.有关质粒的表达，以下哪项是错误的?A.pB R322 含有β-半乳糖苷酶的α片段基因B.质粒较易转化C.质粒的遗传表型可作为转化子的筛选依据D.pB R322 的分子中仅有一个E.co R I 内切酶位点7.以下哪项不是重组DNA的连接方式?A.粘性末端与粘性末端的连接 B ．平端与平端的连接C . 粘性末端与平端的连接D . 人工接头连接8.有关噬菌体的表达哪项不符合?A.感染大肠杆菌时仅把D NA注入大肠杆菌内B.只有裂解一种生活方式C . 溶源和裂解两种生活方式可以相互转变D. 噬菌体是由外壳蛋白和D NA 组装而成9．D NA 克隆不包括以下哪项步骤?A. 选择一个适合的载体B . 重组体用融合法导入细胞C . 用连接酶连接载体D NA 和目的D NA，形成重组体D . 用载体的相应抗生素抗性筛选含重组体的细菌10.以下哪项不能作为表达载体导人真核细胞的方法?A.磷酸钙转染 B . 电穿孔 C . 脂质体转染 D . 氯化钙转染11.以下哪项不能作为基因工程重组体的筛选方法?A.PC R 技术B. 宿主菌的养分缺陷标志补救C . 抗药性标志选择 D. Southern 印迹12.关于转化错误的选项是：A.受体细胞获得的遗传表型B.外源D NA确定整合进受体细胞基因组C.自然界中较大的外源D NA转化几率较低D.自然界中较大的外源DNA 转化几率较高13．以下哪种酶是重组DNA 技术中最重要的?A. 反转录酶B. 碱性磷酸酶C. DNA 连接酶D. DNA 聚合酶I14．在分子生物学中，基因克隆主要指：A. DNA 的复制B. DNA 的转录C. DNA 的剪切D. RNA 的转录15．在分子生物学中，重组DNA 又称为：A. 酶工程B. 蛋白质工程C. 细胞工程D. 基因工程16.cDNA 是指：A.在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB.在体外经反转录合成的与DNA 互补的DNAC . 在体外经反转录合成的与RNA 互补的RNAD. 在体内经反转录合成的与RNA 互补的RNA17．聚合酶链式反响常常缩写为：A. PRCB. PERC. PC RD. B C R18.在DNA序列的状况下，猎取目的基因的最便利的方法是：A.人工化学合成B. 基因组文库法C. cDNA 文库法D. PCR 法19.用于PC R 反响的酶是：A.DNA 连接酶B. TaqDNA 聚合酶C. 逆转录酶D. 碱性磷酸酶20.在cDNA 技术中，所形成的发夹环可用A.限制性内切核酸酶切除B. 用3′外切核酸酶切除C. 用S1 核酸酶切除D. 用5′外切核酸酶切除21，cDNA 文库包括该种生物的A. 某些蛋白质的构造基因B. 全部蛋白质的构造基因C. 全部构造基因D. 内含子和调控区22.关于感受态细胞性质的描述，下面哪一种说法不正确?A.具有可诱导性B. 具有可转移性C. 细菌生长的任何时期都可以消灭D. 不同细菌消灭感受态的比例是不同的23.在简并引物的3′端尽量使用具有简并密码的氨基酸，这是由于A.Taq 酶具有确定的不准确性B. 便于排解错误碱基的掺人C. 易于退火D. 易于重组连接24.变色的酚中含有氧化物，这种酚不能用于DNA分别，缘由主要是A.氧化物会转变pH 值B.氧化物可使DNA 的磷酸二酯键断裂C. 氧化物同DNA 形成复合物D. 氧化物在DNA 分别后不易除去(四) 是非题1. 基因表达的最终产物都是蛋白质。
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基因工程试题一、名词解释(4 ‘*10)1.基因工程技术：按照人们的愿望，进行严密的设计，通过体外DNA 重组和转移等技术，有目的地改造生物种性，使现有物种在较短的时间内趋于完善，创造出新的生物类型。
2.感受态细胞：受体细胞经一些特殊方法(如CaC12、RbCl (KC1) 等化学试剂)处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性改变，成为能允许外源DNA 分子进入的细胞状态。
3.cDNA文库：从组织细胞中分离得到纯化的mRNA,然后以mRNA为模板，利用逆转录酶合成其互补DNA,再复制成双链cDNA片段，与适当载体连接后导入受体菌内，扩增，构建cDNA文库。
4.鸟枪法：指将某种生物体的全基因组或单一染色体切成大小适宜的 DNA 片段，分别连接到载体DNA上，转化受体细胞，形成一套重组兑隆，从中筛选出含有目的基因的期望重组子。
5.SD序列(Shine-Dalgarno):位于翻译起始密码了•上游的6-8个核苷酸序列(5’ UAAGGAGG 3’)，它通过识别大肠杆菌核糖体小亚基中的16S rRNA 3’端区域3’ AUUCCUCC 5’并与之专一性结合，将mRNA定位于核糖体上，从而启动翻译。
6.包涵体：胞内高效表达时，工程菌因大景合成异源蛋白质所形成的水不溶性积聚物。
7.复合转座子：是由两个重复序列夹着一个或多个结构基因如某些抗药性基因和其它基因组成。
存在于R因子及其它质粒中。
复合转座子两端的组件由IS和类IS组成。
8.菌落原位杂交：是将菌落或噬菌斑转到固相膜上，原位裂解细胞后使核酸固定在膜上，然后与探针杂交。
用标记的核酸探针，经放射自显影或非放射检测体系，在组织细胞间期染色体上对核酸进行定位和相对定量研究的一种手段。
9.RACE：是一种通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术，是以mRNA 为模板反转录成cDNA第一链后用PCR技术扩增出某个特异位点到3, 或5，端之间未知序列的方法。
10.连续式发酵：即在连续发酵反应器中，细胞的总数和培养液总体积同时维持恒定，前提是由培养液流出所造成的细胞损失正好为细菌分裂所产生的新细胞弥补。
基因工程试卷及答案
基因工程试卷及答案(1)(总4页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--一、名词解释1、基因治疗：是将目的基因放进特定载体中导入靶细胞或组织，通过替换或补偿引起疾病的基因，或者关闭或抑制异常表达的基因来克服疾病的治疗方法。
2、反义核酸：是指能与特定mRNA精确互补、特异阻断其翻译的RNA或DNA分子。
3、反义DNA：也称反义寡核苷酸或反义脱氧寡核苷酸，是一种人工合成的、能与mRNA互补的、用于抑制翻译的短小反义核酸分子。
4、同尾酶：指切割DNA可产生相同的黏性末端的限制酶5、转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。
6、ａ-互补：指半乳糖苷酶的两个无活性片段组合而成为功能完整的酶的过程。
7、转化：指将质粒或其他外源DNA导入处于感受态的宿主细胞，并使其获得新的表型的过程。
8、基因克隆：通过体外重组技术，将一段目的DNA经切割、连接插入适当载体，并导入受体细胞，扩增形成大量子代分子的过程。
9、核酶：是一类具有催化活性的RNA分子，具有核苷酸水解活性，可特异性剪切RNA分子，相当于RNA酶。
10、位点偏爱：某些限制酶对同一底物中的有些位点表现出偏爱性切割，即对不同位置的同一识别序列表现出不同的切割效率，这种现象称作为位点偏爱。
二、选择1.在( B )诱导下，目的蛋白与lacZ就会以融合蛋白的形式表达出来。
A. dNTP C. DMSO2.（ A ）可使表达蛋白避免被细胞内蛋白降解，或使表达的蛋白正确折叠，从而达到维护目的蛋白的目的。
A.分泌表达载体融合表达载体 C.组氨酸标签表达载体 D.内含肽表达载体的琼脂糖凝胶电泳方向为（ B ）A. 正极向负极B. 负极向正极C浓度高向浓度低. D. 浓度低向浓度高4.影响脉冲场凝胶电泳电泳分辨率的最关键因素是（D ）A.电场强度B. 缓冲液浓度C. 温度D.脉冲时间5.控制潜在RNA酶活性最重要的是（C）A.使用RNA酶抑制剂B.实验用具C.细致谨慎的操作D.温度控制6.酵母基因表达系统的宿主不具有以下哪一条件(B )A.安全无毒B.载体DNA转化频率低C. 发酵周期短D.蛋白质分泌能力好7. 酿酒酵母的附加体形表达载体有（D）的缺点A.蛋白分泌能力差B.无终止子C.不能独立复制D.无选择压力时不稳定8.（C）不能用大肠杆菌表达系统来生产。
基因工程试题及答案全集
作业一：一、名词解释：1、基因：是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。
2、基因组该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子3、操纵子:原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，转录生成一个mRNA，然后分别翻译成几种不同的蛋白质。
这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶，或共同完成某种功能。
这些结构基因与其上游的启动子，操纵基因共同构成转录单位，称操纵子。
4、启动子:是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，包括至少一个转录起始点。
在真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。
有时，将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。
5、增强子:是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV40病毒中发现的长约200bp的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中都发现了增强子。
增强子通常占100～200bp长度，也和启动子一样由若干组件构成，基本核心组件常为8～12bp，可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。
6、基因表达：是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子。
二、简答题1、说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。
答：限制性内切核酸酶采用三字母的命名原则,即属名+种名+株名的各一个首字母,再加上序号. 基本原则: 3-4个字母组成,方式是:属名+种名+株名+序号; 首字母: 取属名的第一个字母,且斜体大写;第二字母: 取种名的第一个字母,斜体小写;第三字母: (1)取种名的第二个字母,斜体小写;(2)若种名有词头,且已命名过限制酶,则取词头后的第一字母代替.第四字母: 若有株名,株名则作为第四字母,是否大小写,根据原来的情况而定,但用正体. 顺序号: 若在同一菌株中分离了几种限制酶,则按先后顺序冠以I,Ⅱ,Ⅲ,…等,用正体.2、什么是限制性内切核酸酶的星号活性？受哪些因素影向？答：Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性，但是这种特异性受特定条件的限制，即在一定环境条件下表现出来的特异性。
专题18基因工程-2023年高考真题和模拟题生物分项汇编(全国通用)(解析版)
专题18 基因工程2023年高考真题一、单选题1．（2023·湖南·统考高考真题）盐碱胁迫下植物应激反应产生的H2O2对细胞有毒害作用。
禾本科农作物AT1蛋白通过调节细胞膜上PIP2s蛋白磷酸化水平，影响H2O2的跨膜转运，如图所示。
下列叙述错误的是（）A．细胞膜上PIP2s蛋白高磷酸化水平是其提高H2O2外排能力所必需的B．PIP2s蛋白磷酸化被抑制，促进H2O2外排，从而减轻其对细胞的毒害C．敲除AT1基因或降低其表达可提高禾本科农作物的耐盐碱能力D．从特殊物种中发掘逆境胁迫相关基因是改良农作物抗逆性的有效途径1．B【分析】分析题图：AT1蛋白通过抑制PIP2s蛋白的磷酸化而抑制细胞内的H2O2排到细胞外，从而导致植物抗氧化胁迫能力减弱，进而引起细胞死亡。
AT1蛋白缺陷，可以提高PIP2s蛋白的磷酸化水平，促进细胞内的H2O2排到细胞外，从而提高植物抗氧化的胁迫能力，进而提高细胞的成活率。
【详解】A、由题图右侧的信息可知，AT1蛋白缺陷，可以促进PIP2s蛋白的磷酸化，进而促进H2O2排出膜外，A正确；B、据题图左侧的信息可知，AT1蛋白能够抑制PIP2s蛋白的磷酸化，减少了H2O2从细胞内输出到细胞外的量，导致抗氧化胁迫能力弱，不能减轻其对细胞的毒害，B错误；C、结合对A选项的分析可推测，敲除AT1基因或降低其表达，可提高禾本科农作物抗氧化胁迫的能力，进而提高其成活率，C正确；D、从特殊物种中发掘逆境胁迫相关基因，可通过基因工程技术改良农作物抗逆性，D正确。
故选B。
2．（2023·浙江·统考高考真题）某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。
实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。
为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。
第18讲 基因工程(讲义)原卷版
第18讲 基因工程考点01 基因工程★ 考向1 基因工程的理论基础1、基因工程的理论基础2、基因工程的基本操作程序（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR 技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，启动子在基因的首段，它是RNA 聚合酶的结合位点，能控制着转录的外源基因在受体细胞内表达理论 基础 ①基因是控制生物性状的遗传物质的结构和功能的基本单位。
②遗传信息的传递都遵循中心法则。
③生物界共用一套遗传密码。
重组DNA ： 载体+目的基因 复制转录 RNA 翻译 蛋白质基因拼接 ①DNA 的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸。
②DNA 分子都遵循碱基互补配对原则。
③双链DNA 分子的空间结构都是双螺旋结构。
开始；终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定。
分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术，个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
易错警示：辨析农杆菌转化法中的两次拼接与两次导入（1）两次拼接：第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的T-DNA中；第二次拼接指被插入目的基因的T-DNA被拼接到受体细胞染色体的DNA上。
（2）两次导入：第一次导入是将含目的基因的Ti质粒导入农杆菌；第二次导入是将含目的基因的T-DNA导入受体细胞。
3、DNA的粗提取与鉴定（1）原理：利用DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
《基因工程》各章内容及参考答案(42页).docx
复习题1 （包括分子生物学基础知识）（请各位同学将所有题目翻译成英文后再做!）一、解释下列名词1.Gene manipulation2.Promotor3.Cloning:4.Subcloning二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。
1.基因操作（Gene manipulation）的核心部分是基因克隆（gene cloning）, gene cloning的基本要点有（），（）和（）。
2.（）是遗传物质的基木单位，也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。
它可以是连续的，也可以是（）；可以是（），也可以是RNA；可以存在于染色体上，也可以（）3.基因操作并不是一个法律概念，除了包括基因克隆外，还包括基因的（）、（）、（）和（）等与基因研究相关的内容。
4.启动子（Promo（or）是指（）。
通常一个Gene是否表达，（）是关键的一步，是起决定作用的。
在转录过程屮，Promoter还是（）的结合位点。
5.原核生物的RNApolymerase主要由两部分组成：（）和（），其屮。
■因子并不参与RNA 的合成，它的作用主要是（）。
6.从（）到（）的这一段距离称为一个转录单位，或者一个转录产物，其屮可包括一个或者多个Gene。
7.转录终止子主要有两种，一种是（），另一种是（）。
8.重叠基因（Overlapping gene）是指（）,间隔基因（Interrupted gene）是指（）三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。
四、简答题：1.简述基因克隆的两个基本特征？参考答案：基因克隆的两个基本特征是一是强调外源核酸分子（一般情况下都是DNA）在不同宿主屮的繁殖，打破自然种的界限将来自于不相关物种的基因放入一个宿主中是基因操作的一个重要特征，基因操作的另一个重要特征是繁殖。
2.什么是gene cloning ?什么是亚克隆（subcloning） ?参考答案：基因克降：一定程度上等同于基因的分离，即从复杂的生物体基因组中，经过酶切，消化等步骤，分离带有目的基因的DNA片段。
华中农业大学生物化学考研试题库附答案 基因工程基础
第18章基因工程基础一、教学大纲基本要求用工具酶、克隆载体与表达系统；基因克隆的一般原理与过程，目的基因的分离，目的基因的克隆；克隆基因的表达；因表达的控制元件，外源基因在原核系统中的表达；外源基因在真核系统中的表达。
二、本章知识要点（一）基因工程概念基因工程是对携带遗传信息的分子进行设计和施工的分子工程，包括基因重组、克隆和表达。
基因工程的核心技术是DNA重组。
蛋白质工程是在基因工程基础上发展起来的，它是指通过对蛋白质已知结构与功能的认识，借助计算机辅助设计，利用基因定位诱变等技术改造蛋白质，以达到改进其某些性能的目的。
基因工程开辟了生物学研究的新纪元。
借助基因工程，分子生物学的发展达到空前的速度和规模，新的研究领域不断被开拓。
“人类基因组计划”是生物学历史上最巨大的科学工程；后基因组的时代已经到来。
基因工程带动了生物技术产业的兴起。
制药、化工、食品、农业和医疗保健业无不得益于基因工程。
基因工程帮助人类认识和改造生命世界，也帮助人类认识自己。
设计和创建新的基因、新的蛋白质和生物新的性状的时代。
（二）分子克隆的基本原理克隆(clone)意为无性繁殖系。
DNA克隆即将DNA的限制酶切片段插入克隆载体，导入宿主细胞，经无性繁殖，以获得相同的DNA扩增分子。
故DNA克隆为分子克隆。
1、ＤＮＡ限制酶与连接酶DNA分子克隆，即将DNA的限制片段插入克隆载体，导入宿主细胞，经无性繁殖，获得相同的DNA 扩增分子。
切割DNA分子需要用限制性核酸内切酶。
生物来源不同但识别序列与切割序列相同的限制酶，称为同裂酶(isoschizomers)；切割产生单链末端相同的限制酶，称为同尾酶(isocaudamers)。
相容（compatible ende）的限制片段可用DNA连接酶(DNA ligase)相连接。
平末端连接效率较低，利用接头(linker)、衔接物（adaptor）或在平末端加上互补均聚物可以帮助平末端连接。
基因工程原理练习题及其答案
基因工程复习题题型：名词解释（10个）30分；填空（每空1分） 20分；选择题（每题1分）10分；简答题（4个）20分；论述题（2个）20分。
第一章绪论1.名词解释：基因工程：按照预先设计好的蓝图，利用现代分子生物学技术，特别是酶学技术，对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造，将一种生物（供体）的基因转移到另外一种生物（受体）中去，从而实现受体生物的定向改造与改良。
遗传工程广义：指以改变生物有机体性状为目标，采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作，以改良品质或创造新品种。
包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。
狭义：基因工程。
克隆：无性(繁殖)系或纯系。
指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DNA分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。
2．什么是基因克隆及基本要点?3.举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件。
A) 限制性内切酶和DNA连接酶的发现（标志着DNA重组时代的开始）；B) 载体的使用；C) 1970年，逆转录酶及抗性标记的发现。
4.基因工程研究的主要内容是什么？基础研究：基因工程克隆载体的研究基因工程受体系统的研究目的基因的研究基因工程工具酶的研究基因工程新技术的研究应用研究：基因工程药物研究转基因动植物的研究在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究第二章基因克隆的工具酶1.名词解释：限制性核酸内切酶：一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。
回文结构：双链DNA中的一段倒置重复序列，当该序列的双链被打开后，可形成发夹结构。
同尾酶：来源不同、识别序列不同，但产生相同粘性末端的酶。
同裂酶：不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列黏性末端：DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合，这样的DNA末端，称为粘性末端。
平末端：DNA片段的末端是平齐的。
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第一章糖类单元自测题（一）名词解释1、单糖，2、还原糖，3、不对称碳原子，4、α-及β-异头物，5、蛋白聚糖，6、糖脎，7、改性淀粉，8、复合多糖，9、糖蛋白，10．糖胺聚糖（二）填空题1、判断一个糖的D-型和L-型是以碳原子上羟基的位置作依据。
2、糖苷是指糖的和醇、酚等化合物失水而形成的缩醛(或缩酮)等形式的化合物。
3、蔗糖是由一分子和一分子组成，它们之间通过糖苷键相连。
4、麦芽糖是由两分子组成，它们之间通过糖苷键相连。
5、乳糖是由一分子和一分子组成，它们之间通过糖苷键相连。
6、纤维素是由组成，它们之间通过糖昔键相连。
7、多糖的构象大致可分为、、和四种类型，决定其构象的主要因素是。
8、直链淀粉的构象为，纤维素的构象为。
9、人血液中含量最丰富的糖是，肝脏中含量最丰富的糖是，肌肉中含量最丰富的糖是。
10、糖胺聚糖是一类含和的杂多糖，其代表性化合物有、和等。
11、肽聚糖的基本结构是以与组成的多糖链为骨于，并与肽连接而成的杂多糖。
12、常用定量测定还原糖的试剂为试剂和试剂。
13、蛋白聚糖是由和共价结合形成的复合物。
14、自然界较重要的乙酰氨基糖有、和。
15、鉴别糖的普通方法为试验。
16、脂多糖一般由、和三部分组成。
17、糖肽的主要连接键有和。
18、直链淀粉遇碘呈色，支链淀粉遇碘呈色。
（三）选择题1、单选题（下列各题均有五个备选答案，试从其中选出一个）（1）环状结构的己醛糖其立体异构体的数目为( )(A)4 (B)3 (C)16 （D）32 （E）64（2）右图的结构式代表哪种糖?( )(A)α-D-吡喃葡萄糖(B)β-D-吡喃葡萄糖(C)α-D-呋喃葡萄糖(D)β-L-呋喃葡萄糖(E)α-D-呋喃果糖（3）、下列哪种糖不能生成糖脎?( )(A)葡萄糖(B)果糖(C)蔗糖(D)乳糖(E)麦芽糖（4）下图所示的结构式代表哪种糖胺聚糖?( )(A)几丁质(壳多糖) (B)硫酸软骨素(C)肝素(D)透明质酸(E)硫酸角质素（5）、下列物质中哪种不是糖胺聚糖?( )(A)果胶(B)硫酸软骨素(C)透明质酸(D)肝素(E)硫酸黏液素（6）糖胺聚糖中不含硫的是( )(A)透明质酸(B)硫酸软骨素(C)硫酸皮肤素(D)硫酸角质素(E)肝素（7）下图的结构式代表哪种糖?( )(B)β-D-葡萄糖(C)α-D-半乳糖(D)β-D-半乳糖(E)α-D-果糖2、多选题（下列各题均有四个备选答案，其中一个或几个是正确的，回答时以A、B、C、D、E表示）（1）. 下列单糖中哪些是酮糖?( )(1)核糖(2)核酮糖(3)葡萄糖(4)果糖（2）. 下列的单糖分类中，哪些是正确的?( )(1)甘油醛——三碳糖(2)赤藓糖——四碳糖(3)核糖——五碳(4)果糖——六碳糖（3）. 下列哪些糖没有变旋现象?( )(1)果糖(2)蔗糖(3)甘露糖(4)淀粉（4）. 下列四种情况中，哪些尿能和班乃德(Benedict)试剂呈阳性反应?( )(1)血中过高浓度的半乳糖溢人尿中(半乳糖血症)(2)正常膳食的人由于饮过量的含戊醛糖的混合酒造成尿中出现戊糖(戊糖尿)(3)尿中有过量的果糖(果糖尿)(4)实验室的技术员错把蔗糖加到尿的样液中（5）α-淀粉酶水解支链淀粉的结果是( )(1)完全水解成葡萄糖和麦芽糖(2)主要产物为糊精(3)使α-1，6糖苷键水解(4)在淀粉-1，6-葡萄糖苷酶存在时，完全水解成葡萄糖和麦芽糖（6）下列化合物中的哪些含有糖基?( )(1)A TP (2)NAD (3)RNA (4)乙酰CoA（7）有关糖原结构的下列叙述哪些是正确的?( )(1)有α-1，4糖苷键(2)有α-1，6糖苷键(3)糖原由α-D-葡萄糖组成(4)糖原是没有分支的分子(8) 下列有关多糖的叙述哪些是正确的?( )(1)它们是生物的主要能源(2)它们以线状或分支形式存在(3)它们是细菌细胞壁的重要结构单元(4)它们是信息分子(9) 肝素分子中主要含有下列哪些组分?( )(1)D-葡糖胺(2)D-乙酰半乳糖胺(3)L-艾杜糖醛酸(4)D-葡萄醛酸（四）是非题1．D-葡萄糖的对映体为L-葡萄糖，后者存在于自然界。
基因工程题库及答案汇编
基因工程题库及答案汇编一、填空题一、填空题1．基因工程是．基因工程是 年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
基因工程技术的诞生，使人们从简单地利用现存的生物资源进行诸如发酵、年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
基因工程技术的诞生，使人们从简单地利用现存的生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等传统的生物技术时代，走向 的时代。
的时代。
2．随着基因工程技术的诞生和发展，人类可以通过 、、 和和 等三种主要生产方式，大量取得过去等三种主要生产方式，大量取得过去只能从组织中提取的珍稀蛋白，用于研究或治病。
3．Cohen 等在等在 年构建了第一个有功能的重组年构建了第一个有功能的重组DNA 分子。
分子。
4．基因工程的两个基本特点是： (1) ，， (2) 。
5．基因克隆中三个基本要点是： ； 和 。
6． 年，美国斯坦福大学年，美国斯坦福大学年，美国斯坦福大学 等在等在等在 上发表了题为：上发表了题为：“将新的遗传信息插入SV40 病毒DNA 的生物化学方法：含有λ噬菌体基因和E ．coli 半乳糖操纵子的环状SV40 DNA ”的论文，标志着基因工程技术的诞生。
这一工作具有划时代的意义，但是他们并没有 。
7．克隆基因的主要目的有四：(1) ；； (2) ；；(3) ；； (4) 。
填空题答案答案1． 70；按人们的需要而定向地改造和创造具有新的遗传性品种。
2． 细菌发酵；真核细胞培养；乳腺生物反应器。
3． 1973 4． (1)分子水平上的操作；(2)细胞水平上的表达。
5． 克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择6． 1972；P ．Berg ；Proc ．Natl ．Acad ．Sci ．USA ；证明体外重组的 DNA 分子具有生物学功能7． (1)扩增 DNA ； (2)获得基因产物；(3)研究基因表达调控；(4)改良生物的遗传性二、选择题(单选或多选) 1．因研究重组DNA 技术而获得诺贝尔奖的科学家是( ) (a)A ．Komberg (b)W ．Gilbert (c)P ．Berg (d) B ．McClintock 2．第一个作为重组DNA 载体的质粒是( ) (a) pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl8 3．第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是( ) (a)EcoRI (b)EcoB (c)EcoC (d)EcoR Ⅱ4．P Berg 构建SV40 二聚体时用了几种不同的酶，其中( )的作用是制造隐蔽的的作用是制造隐蔽的5’端。
华中农业大学《生物化学实验》试卷
华中农业大学《生物化学实验》试卷华中农业高校本科生课程考试试卷考试课程与试卷类型：植物生理学试验原理与技术（A）姓名：学年学期：2022－2022－1 学号：考试时光：2022－－班级：一、名词解释( 每题4 分, 共12分)1. 聚丙烯酰胺凝胶2. 离心技术3．可见光分光光度法/反相纸层析二、填空题( 每空2 分, 共42分)1. 反相纸层析法分别油菜不饱和脂肪酸的试验中,分别后的不饱和脂肪酸经红氨酸溶液显色后, 其终于产物色彩是（1）,从点样端起层析谱带所对应的脂肪酸依次是(2) 、（3）、（4）、（5）、（6）。
2. 圆盘聚丙烯酰胺凝胶电泳分别过氧化物酶同工酶的试验中, 电泳时上槽接电源（7）极,下槽接电源(8) 极, 电泳开头电流应调整至每管（9）mA, 非常钟后电流调整至每管(10) mA; 在上槽或样品中加入溴酚蓝是起（11）的作用。
3. 核酸提取过程中, 将含有DNA 的溶液置72℃处理3 分钟，其目的是（12）；在淀粉酶活性测定过程中将淀粉酶液置于70℃下处理15 分钟的目的是（13）。
4．在微量凯氏定氮法测定植物组织中的总氮和蛋白氮，有三个主要的试验阶段，它们分离是（14）、（15）和（16）。
在其次阶段，若收集三角瓶中的溶液色彩由_（17）变为（18），表明反应彻低。
第三阶段所用的标准浓度的滴定溶液名称是（19）。
5. DNA 提取研磨时加入的研磨缓冲液的NaCl浓度是（20），研磨时加入SDS的作用是（21）三、是非推断题(推断对错，对的标T，错的标F，每题2 分，共10 分)1．萌发的小麦种子中含有很高活性的淀粉酶，其中α－淀粉酶不耐热，在70℃快速钝化。
（）2．本学期测定还原性糖和可溶性蛋白含量时都用到了斐林试剂，这两个试验中所用的斐林试剂的配方是相同的。
（）3．DNA提取中，加入冷乙醇是为了使DNA分子复性变粗。
（）4．离心机使用中，要求同一台离心机所用的离心管都有相同的分量。
基因工程试题
基因工程试题A一、名词解释（每题2分，共20分）1、转染:2、质粒不亲和性:3、cDNA 文库:4、RACE:5、基因工程:6、RT-PCR7、插入失活:8、S-D 序列:9、穿梭质粒载体:10、多克隆位点:二、选择题（每题1分，共15分）1（）基因工程操作的三大基本元件是:(I 供体 II 受体 III 载体 IV 抗体 V 配体)Ａ I + II + IIIＢ I + III + IVＣ II + III + IVＤ II + IV + VＥ III + IV + V2（）基因工程的单元操作顺序是Ａ增，转，检，切，接Ｂ切，接，转，增，检Ｃ接，转，增，检，切Ｄ检，切，接，增，转Ｅ切，接，增，转，检3( )生物工程的上游技术是Ａ基因工程及分离工程Ｂ基因工程及发酵工程Ｃ基因工程及酶工程Ｄ基因工程及细胞工程Ｅ基因工程及蛋白质工程4( )下列对逆转录酶描述正确的是：A 依赖于RNA的DNA聚合酶或称为RNA指导的DNA聚合酶B 依赖于cDNA的DNA聚合酶或称为cDNA指导的DNA聚合酶C 依赖于DNA的DNA聚合酶或称为DNA指导的DNA聚合酶D 依赖于RNA的RNA聚合酶或称为rNA指导的RNA聚合酶5( )下列对限制性内切酶描述正确的是Ａ限制性内切酶可识别任一的DNA序列Ｂ使用限制性内切酶时，有时可出现星活性Ｃ限制性内切酶可识别碱基数不超过5个Ｄ限制性内切酶切割碱基序列产生都是黏性末端6 ( )T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是Ａ 2' -OH 和 5' -PＢ 2' -OH 和 3' -PＣ 3' -OH 和 2' -PＤ 3' -OH 和 5' -PＥ 5' -OH 和 3' -P7( )下列有关连接反应的叙述，错误的是Ａ连接反应的最佳温度为12—16℃Ｂ连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于 10%Ｃ连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mMＤ连接酶通常应过量 2-5 倍Ｅ DTT 在反应中可加也可不加8（）下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大"A质粒B黏粒C酵母人工染色体(YAC)Dλ噬菌体9（）载体的功能是(I 运送外源基因高效进入受体细胞 II 为外源基因提供复制能力 III 为外源基因提供整合能力)Ａ IＢ I + IIＣ I + IIIＤ II + IIIＥ I + II + III10( )考斯质粒（cosmid）是一种Ａ天然质粒载体Ｂ由入-DNA 的 cos 区与一质粒重组而成的载体Ｃ能裂解受体细胞的烈性载体Ｄ具有溶原性质的载体Ｅ能在受体细胞内复制并包装的载体11( )下列有关基因的描述，错误的是Ａ蛋白质是基因表达唯一的产物Ｂ基因是DNA链上具有编码功能的片段Ｃ基因也可以是RNAＤ基因突变不一定导致其表达产物改变结构12（）关于cDNA的最正确的提法是：A 同mRNA互补的单链DNAB 同mRNA互补的双链DNAC 以mRNA为模板合成的双链DNA D以上都正确13（）*一重组 DNA （ 6.2 kb ）的载体部分有两个 SmaI 酶切位点。
华中农业大学生物化学本科试题库2-16章(可编辑修改word版)
第二章脂类单元自测题（一）名词解释1．脂质2．必需脂肪酸3．相变温度4．鞘磷脂5．氢化6．神经节苷脂7．自由基8．活性氧9．血浆脂蛋白10．乳糜微粒11．极低密度脂蛋白12．低密度脂蛋白13．高密度脂蛋白14．糖脂15．生物膜（二）填空题：1.按化学组成的不同，可将脂质分为：、和三大类。
2.甘油三酯是由和所形成的酯；天然甘油三酯都是构型的。
3.磷脂可分为和两大类。
4.类固醇化合物的基本骨架结构是；萜类化合物的碳架结构可用来划分；有两个以上构成的化合物称为。
5.重要的甘油磷脂有、、、、、等。
6.蜡是和所形成的酯，因其烃链中不含，所以称为物质。
7.糖脂是指含或的脂质，根据与脂肪酸酯化的醇不同，糖脂可分和两类。
8.血浆脂蛋白主要由、、、组成。
9.血浆脂蛋白根据密度的不同可分为、、和四大类。
10.生物膜主要由、和物质组成，此外还有少量的和。
11.生物膜膜脂主要为和。
12.人类的必需脂肪酸主要是和。
13.磷酯酶C 水解磷脂生成和或等。
14.人体内二十碳四烯酸可由转变而来，二十碳五烯酸可由转变而来。
15.胆汁酸的立体构型具有和两个侧面，从而能降低油水界面的，促进脂类的消化和吸收。
（三）选择题：1.简单甘油脂是：A．含一个不对称碳原子B．不含不对称碳原子C．含二个不对称碳原子D．含三个不对称碳原子2．萜类化合物：A．是脂肪酸衍生物B．是异戊二烯衍生物C．是环戊烷多氢菲衍生物D．是磷脂衍生物3．磷脂酰乙醇胺中的亲脂成分是：A．乙醇胺B．磷酸C．脂肪酸D．甘油4.下列哪个术语用于脂肪的加碱水解？A．酯化B．乙酰化C．皂化D．卤化5．下列哪种物质不是甘油磷脂？A．神经节苷脂B．磷酯酰肌醇C．磷酯酰丝氨酸D．缩醛磷脂6．胆固醇是下列哪种物质的前体？A．辅酶Q B．维生素A C．维生素E D．维生素 D 7．在下列脂质中，哪种含胆碱？A．磷脂酸B．胆固醇C．神经节苷脂D．鞘磷酯8.血浆脂蛋白按密度大小（从低至高）的排列顺序是：A．HDL—LDL—CLDL—CM B．CM—VLDL—LDL—HDL C．CM—LDL—HDL—VLDL D．LDL—VLDL—HDL—CM9.人胆汁中含有的三种胆汁酸是：A．胆酸、甘氨胆酸、牛磺胆酸B．脱氧胆酸、鹅脱氧胆酸、胆酸C．脱氧胆酸、鹅脱氧胆酸、甘氨胆酸D．甘氨胆酸、脱氧胆酸、胆酸10．以下脂类中具有两亲性的是：A．三酰甘油B．胆固醇脂C．鞘糖脂D．脂肪酸11．指出下列化合物中的非脂类化合物：A．类胡罗卜素B．维生素E C．角沙稀D．苯12．下列化合物中哪种物质是胆固醇合成的直接前体？A．7-脱氢胆固醇B．鲨烯C．二十碳四烯酸D．类胡罗卜素13．前列腺素的母体化合物是：A．二十五碳三烯酸B．白三烯C．异戊二烯D．前列烷酸14．组成蜡的高级脂肪酸和醇都是含：A．不对称碳原子B．奇数碳原子C．偶数碳原子D．饱和支链碳原子15．下列脂蛋白中，含胆固醇最多的脂蛋白是：A．CM B．LDL C．VLDL D．HDL（四）是非题1.脂肪酸的性质与其链长和不饱和程度密切相关。
华中农业大学生物化学本科试题库第章基因工程基础
第18章基因工程基础单元自测题(一) 名词解释1.遗传工程2.生物技术3.基因工程4.细胞工程5.蛋白质工程6.分子克隆7.载体8.转化和转染9.基因文库10. cDNA文库(二) 填空1．自然界的常见基因转移方式有、、、。
2．不同DNA分子间发生的共价连接称为，有、两种方式。
3．基因工程的载体必须具备的条件有、、。
4．基因工程常用的载体DNA分子有、、和。
5．一个完整的DNA克隆过程应包括、、、、。
6．目的基因获取的途径或来源有、、、。
7．基因工程过程中重组体直接筛选法的方式有、、。
8．基因克隆真核生物表达体系常见的有、、表达体系。
9．根据重组体DNA的性质不同，将重组体DNA导入受体细胞的方式有、、等。
10．如果M13的外源基因被插入到lac Z基因内，则在含有X-gal的培养基上生长时会出现色菌落，如果在lac Z 基因内无外源基因插入，在同样的条件下呈现色菌落。
11．当细胞与细胞或细菌通过菌毛相互接触时，就可以从一个细胞(细菌)转移到另一细胞(细菌)，这种类型的DNA 转移称为作用。
12．重组DNA技术中常用的工具酶有、、、。
(三) 选择题1．下列那种方式保证了免疫球蛋白的多样性?A. 转化B. 转染C. 转位D. 转导2．微切割技术使目的基因可来源于下列那种物质?A. 真核细胞染色体DNAB. 人工合成DNAC. cDNAD. G-文库3．重组DNA技术中常用的工具酶下列那项不是：A. 限制性核酸内切酶B. DNA连接酶C. DNA聚合酶ID. RNA聚合酶4．DNA致癌病毒感染宿主细胞后，使之发生癌变是因为发生了：A. 转化B. 转导C. 接合D. 转座5．关于基因工程的叙述，下列哪项是错误的?A. 基因工程也称基因克隆B . 只有质粒DNA可作为载体C . 重组体DNA转化或转染宿主细胞D. 需获得目的基因6．有关质粒的叙述，下列哪项是错误的?A. pB R322含有β-半乳糖苷酶的α片段基因B. 质粒较易转化C. 质粒的遗传表型可作为转化子的筛选依据D. pB R322的分子中仅有一个E.co R I 内切酶位点7．下列哪项不是重组DNA的连接方式?A. 粘性末端与粘性末端的连接 B ．平端与平端的连接C . 粘性末端与平端的连接D . 人工接头连接8．有关噬菌体的叙述哪项不符合?A. 感染大肠杆菌时仅把D NA注入大肠杆菌内B. 只有裂解一种生活方式C . 溶源和裂解两种生活方式可以相互转变D. 噬菌体是由外壳蛋白和D NA组装而成9．D NA克隆不包括下列哪项步骤?A. 选择一个适合的载体B . 重组体用融合法导入细胞C . 用连接酶连接载体D NA和目的D NA，形成重组体D . 用载体的相应抗生素抗性筛选含重组体的细菌10．下列哪项不能作为表达载体导人真核细胞的方法?A. 磷酸钙转染 B . 电穿孔 C . 脂质体转染 D . 氯化钙转染11. 下列哪项不能作为基因工程重组体的筛选方法?A. PC R技术B. 宿主菌的营养缺陷标志补救C . 抗药性标志选择 D. Southern印迹12．关于转化错误的是：A. 受体细胞获得新的遗传表型B. 外源D NA一定整合进受体细胞基因组C. 自然界中较大的外源D NA转化几率较低D. 自然界中较大的外源DNA转化几率较高13．下列哪种酶是重组DNA技术中最重要的?A. 反转录酶B. 碱性磷酸酶C. DNA连接酶D. DNA聚合酶I14．在分子生物学中，基因克隆主要指：A. DNA的复制B. DNA的转录C. DNA的剪切D. RNA的转录15．在分子生物学中，重组DNA又称为：A. 酶工程B. 蛋白质工程C. 细胞工程D. 基因工程16．cDNA是指：A. 在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB. 在体外经反转录合成的与DNA互补的DNAC . 在体外经反转录合成的与RNA互补的RNAD. 在体内经反转录合成的与RNA互补的RNA17．聚合酶链式反应常常缩写为：A. PRCB. PERC. PC RD. B C R18．在已知DNA序列的情况下，获取目的基因的最方便的方法是：A. 人工化学合成B. 基因组文库法C. cDNA文库法D. PCR法19．用于PC R反应的酶是：A. DNA连接酶B. TaqDNA聚合酶C. 逆转录酶D. 碱性磷酸酶20．在cDNA技术中，所形成的发夹环可用A. 限制性内切核酸酶切除B. 用3′外切核酸酶切除C. 用S1核酸酶切除D. 用5′外切核酸酶切除21，cDNA文库包括该种生物的A. 某些蛋白质的结构基因B. 所有蛋白质的结构基因C. 所有结构基因D. 内含子和调控区22．关于感受态细胞性质的描述，下面哪一种说法不正确?A. 具有可诱导性B. 具有可转移性C. 细菌生长的任何时期都可以出现D. 不同细菌出现感受态的比例是不同的23．在简并引物的3′端尽量使用具有简并密码的氨基酸，这是因为A. Taq酶具有一定的不精确性B. 便于排除错误碱基的掺人C. 易于退火D. 易于重组连接24．变色的酚中含有氧化物，这种酚不能用于DNA分离，原因主要是A. 氧化物会改变pH值B. 氧化物可使DNA的磷酸二酯键断裂C. 氧化物同DNA形成复合物D. 氧化物在DNA分离后不易除去(四) 是非题1. 基因表达的最终产物都是蛋白质。
基因工程试题库及答案
基因工程习题集一、名词解释：（20×4/）1、基因2、克隆3、基因定位4、PCR5、基因工程工具酶6、组织培养7、限制性核酸内切酶8、受体细胞9、生物技术 10、基因沉默11、重组DNA技术12、逆转录酶13、单克隆抗体14、核移植技术15、细胞融合16、胞内酶17、凝胶过滤18、固定化酶 19、蛋白质工程20、生物反应器二、单项选择题：(60×2/)1．下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（）A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交C．一种基因探针能检测水体中的各种病毒D．原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良2．在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（）A．用mRNA为模板逆转录合成DNA B．以4种脱氧核苷酸为原料人工合成C．将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选 D．由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA 3．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导人棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。
下列叙述不．正确的是（）A．基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的4．采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出转基因羊。
但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。
以下有关叙述，正确的是（）A．人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍B．可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵C．在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中D．人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA5.科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。
华中农业大学2006年本科课程考试试卷(生物化学)
华中农业大学2006年本科课程考试试卷（生物化学）一、填空题（将答案写在答题纸上。
每空1分，共20分）1、是酵解途径的限速酶，是柠檬酸循环的限速酶，而脂肪酸从头合成的限速酶是。
2、1分子葡萄糖经磷酸戊糖途径彻底氧化最多可以产生分子NADPH。
3、DNA复制和转录时，新生核酸链的增长方向都是从哪一端到哪一端:。
4、Glu的解离常数分别为pK1（α-COOH）=2.19，pK2（α-NH3+）=9.67，pK R （γ-COOH）=4.25，此氨基酸的等电点是。
5、脂肪酸的β－氧化包括________________、________________、________________和________________四个步骤。
6、两类核酸在细胞中的分布不同，DNA主要位于________________中，RNA主要位于________________中。
7、一种氨基酸与其专一性的tRNA结合，是由决定的。
8、在E.coli中，从游离氨基酸（aa）开始，合成一条由200个aa残基组成的多肽，至少约要消耗个高能磷酸键。
9、大肠杆菌RNA聚合酶全酶的亚基组成为α2ββ，σω，其中σ亚基的功能是。
10、核酸的主要组成是________________，________________和________________。
11、Cech T.R.和Altman S.因各自发现了________________而共同获得1989年的诺贝尔化学奖。
12、哺乳动物产生1分子尿素需要消耗________________个高能磷酸健。
二、判断题（正确的记“√”，错误的记“×”。
将答案写在答题纸上。
每题1分，共15分）1、在蛋白质生物合成中，所有的氨酰—tRNA都是首先进入核糖体的A部位。
2 真核细胞DNA聚合酶α没有3′→5′外切酶的活性，因此真核细胞染色体DNA复制的忠实性低于原核细胞。
3 Taq DNA聚合酶无校对的功能，因此它所催化的PCR反应，错误机会较大。
基因工程考试题库(便携版)资料
名词解释同裂酶（同切点酶）酸靶序列，这类酶称为同裂酶。
同尾酶：与同裂酶对应的一类限制性内切酶,靶序列也各不相同,但切割后都能产生相同的黏性末端,酶。
测序酶：是经修饰过的T7噬菌体DNA从外切核酸酶结构域中除去28个氨基酸，这样使得T7DNA全失去了3~-5~外切酶活性，只有5~-3~很强，测序时常用此酶。
与klenow相比优点是对长片段进行测序的理想用酶。
限制性核酸内切酶：是一类能识别和切割双链DNA列的核酸水解酶。
限制-修饰系统中的限制和修饰作用：限制-修饰系统中的限制作用指一定类型的细菌可以通过限制性酶的作用，破坏入侵的外源DNA(噬菌体DNA等)，使得外源DNA细胞(如宿主)自身的DNA分子合成后，通过修饰酶的作用，特定的位置上发生了甲基化而得到了修饰，坏，这就是限制-修饰系统中的修饰作用。
5. 限制性片段长度多态性（RFLP）：当DNA性内切酶的识别位点时，或当DNA因组DNA电泳区分，出现的这种DNA多态性称为限制性片段长度多态性。
6. 星号活性：条件下测定的。
当条件改变时，许多酶的识别位点会改变，与切割序列的非特异性，这种现象称为星号活性。
（“非最适的”条件例如高浓度的核酸内切限制酶、高浓度的甘油、Mn2+取代Mg2+以及高pH值等。
)克服星号活性的方法：DNA 样品的重新处理等。
7. 载体(vector): 在基因操作中携带外源基因进入受体细胞的工具。
克隆载体：主要用于扩增或保存DNA有：质粒载体、噬菌体载体、黏粒载体、人工染色体（YAC和BACYAC（酵母人工染色体）：是利用酿酒酵母的染色体的复制元件构建的载体，其工作环境也是在酿酒酵母中。
BAC（细菌人工染色体）：是基于大肠杆菌（E.coli）的F高通量低拷贝的质粒载体。
表达载体是可携带外源基因进入宿主细胞进行复制并进行转录、的载体。
病毒表达载体：是以病毒基因组序列为基础，构建成的真核基因转移工具。
T-载体：Taq酶的末端转移酶活性可在PCR产物的3’依赖于模板的A，根据这一特性，为方便进行PCR而开发出T-载体。
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第18章基因工程基础单元自测题(一) 名词解释1.遗传工程2.生物技术3.基因工程4.细胞工程5.蛋白质工程6.分子克隆7.载体8.转化和转染9.基因文库10. cDNA文库(二) 填空1．自然界的常见基因转移方式有、、、。
2．不同DNA分子间发生的共价连接称为，有、两种方式。
3．基因工程的载体必须具备的条件有、、。
4．基因工程常用的载体DNA分子有、、和。
5．一个完整的DNA克隆过程应包括、、、、。
6．目的基因获取的途径或来源有、、、。
7．基因工程过程中重组体直接筛选法的方式有、、。
8．基因克隆真核生物表达体系常见的有、、表达体系。
9．根据重组体DNA的性质不同，将重组体DNA导入受体细胞的方式有、、等。
10．如果M13的外源基因被插入到lac Z基因内，则在含有X-gal的培养基上生长时会出现色菌落，如果在lac Z 基因内无外源基因插入，在同样的条件下呈现色菌落。
11．当细胞与细胞或细菌通过菌毛相互接触时，就可以从一个细胞(细菌)转移到另一细胞(细菌)，这种类型的DNA 转移称为作用。
12．重组DNA技术中常用的工具酶有、、、。
(三) 选择题1．下列那种方式保证了免疫球蛋白的多样性?A. 转化B. 转染C. 转位D. 转导2．微切割技术使目的基因可来源于下列那种物质?A. 真核细胞染色体DNAB. 人工合成DNAC. cDNAD. G-文库3．重组DNA技术中常用的工具酶下列那项不是：A. 限制性核酸内切酶B. DNA连接酶C. DNA聚合酶ID. RNA聚合酶4．DNA致癌病毒感染宿主细胞后，使之发生癌变是因为发生了：A. 转化B. 转导C. 接合D. 转座5．关于基因工程的叙述，下列哪项是错误的?A. 基因工程也称基因克隆B . 只有质粒DNA可作为载体C . 重组体DNA转化或转染宿主细胞D. 需获得目的基因6．有关质粒的叙述，下列哪项是错误的?A. pB R322含有β-半乳糖苷酶的α片段基因B. 质粒较易转化C. 质粒的遗传表型可作为转化子的筛选依据D. pB R322的分子中仅有一个E.co R I 内切酶位点7．下列哪项不是重组DNA的连接方式?A. 粘性末端与粘性末端的连接 B ．平端与平端的连接C . 粘性末端与平端的连接D . 人工接头连接8．有关噬菌体的叙述哪项不符合?A. 感染大肠杆菌时仅把D NA注入大肠杆菌内B. 只有裂解一种生活方式C . 溶源和裂解两种生活方式可以相互转变D. 噬菌体是由外壳蛋白和D NA组装而成9．D NA克隆不包括下列哪项步骤?A. 选择一个适合的载体B . 重组体用融合法导入细胞C . 用连接酶连接载体D NA和目的D NA，形成重组体D . 用载体的相应抗生素抗性筛选含重组体的细菌10．下列哪项不能作为表达载体导人真核细胞的方法?A. 磷酸钙转染 B . 电穿孔 C . 脂质体转染 D . 氯化钙转染11. 下列哪项不能作为基因工程重组体的筛选方法?A. PC R技术B. 宿主菌的营养缺陷标志补救C . 抗药性标志选择 D. Southern印迹12．关于转化错误的是：A. 受体细胞获得新的遗传表型B. 外源D NA一定整合进受体细胞基因组C. 自然界中较大的外源D NA转化几率较低D. 自然界中较大的外源DNA转化几率较高13．下列哪种酶是重组DNA技术中最重要的?A. 反转录酶B. 碱性磷酸酶C. DNA连接酶D. DNA聚合酶I14．在分子生物学中，基因克隆主要指：A. DNA的复制B. DNA的转录C. DNA的剪切D. RNA的转录15．在分子生物学中，重组DNA又称为：A. 酶工程B. 蛋白质工程C. 细胞工程D. 基因工程16．cDNA是指：A. 在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB. 在体外经反转录合成的与DNA互补的DNAC . 在体外经反转录合成的与RNA互补的RNAD. 在体内经反转录合成的与RNA互补的RNA17．聚合酶链式反应常常缩写为：A. PRCB. PERC. PC RD. B C R18．在已知DNA序列的情况下，获取目的基因的最方便的方法是：A. 人工化学合成B. 基因组文库法C. cDNA文库法D. PCR法19．用于PC R反应的酶是：A. DNA连接酶B. TaqDNA聚合酶C. 逆转录酶D. 碱性磷酸酶20．在cDNA技术中，所形成的发夹环可用A. 限制性内切核酸酶切除B. 用3′外切核酸酶切除C. 用S1核酸酶切除D. 用5′外切核酸酶切除21，cDNA文库包括该种生物的A. 某些蛋白质的结构基因B. 所有蛋白质的结构基因C. 所有结构基因D. 内含子和调控区22．关于感受态细胞性质的描述，下面哪一种说法不正确?A. 具有可诱导性B. 具有可转移性C. 细菌生长的任何时期都可以出现D. 不同细菌出现感受态的比例是不同的23．在简并引物的3′端尽量使用具有简并密码的氨基酸，这是因为A. Taq酶具有一定的不精确性B. 便于排除错误碱基的掺人C. 易于退火D. 易于重组连接24．变色的酚中含有氧化物，这种酚不能用于DNA分离，原因主要是A. 氧化物会改变pH值B. 氧化物可使DNA的磷酸二酯键断裂C. 氧化物同DNA形成复合物D. 氧化物在DNA分离后不易除去(四) 是非题1. 基因表达的最终产物都是蛋白质。
2．因为密码子是不重叠的，所以基因也是不重叠。
3．基因有两条链，与mRNA碱基序列相同(仅T代替了U)的链称为正链。
4．RNA是基因表达的第一产物。
5. 在细菌中，一些酶的合成有赖于这些酶的基因的连续表达。
6．原核生物中tRNA基因的转录是由RNA聚合酶Ⅲ完成。
7．毫无例外，从结构基因中的DNA序列可以推出相应的蛋白质序列。
8．蛋白质的氨基酸序列是由基因的编码区核苷酸序列决定的，只要将基因的编码序列转入细胞，就能合成相应的蛋白质。
9．利用基因工程的手段，包括基因的定点突变等改造蛋白质分子，使之具有更完善，更符合人类要求的功能，这种技术和学科被称之为蛋白质工程。
10．基因工程的特点是在分子水平上操作，在细胞水平上表达。
11．DNA连接酶常用来连接载体DNA和外源性DNA。
12．质粒不能在宿主细胞中独立自主地进行复制。
（五）问答题1．什么叫基因克隆?简述基因克隆的步骤。
2、基因克隆是如何使含有单个基因的DNA片段得到纯化的？3．简述重组DNA技术中目的基因的获取来源和途径。
4．简述互补筛选重组体质粒细菌的原理。
5．基因工程中重组体筛选的方法有哪些?6．基因工程E.coli表达体系的表达载体必须符合哪些标准?7．常用的真核表达体系有哪些？常用于细胞转染的方法有哪些？8．已知有一mRNA分子，你怎样才能使它翻译出相应的蛋白质？简述其过程。
9. 作为基因工程的载体必须具备哪些条件?10．简并引物设计的一般原则是什么?11．什么是蓝白斑筛选法？12. 什么是基因组文库(genomic library)?构建基因组文库，涉及哪些基本过程?它同遗传学上的基因库有什么不同? 13．什么是cDNA文库(complementDNAlibrary)?同基因组文库有何差别?14．自然界中具备理想条件的质粒载体为数不多，通常需要进行改造，请问质粒改造包括哪些基本内容?15．YAC克隆载体常出现哪些问题?六、参考答案(一)名词解释1．遗传工程是遗传学和工程学相结合的一门技术科学。
借用工程技术上的设计思想，在离体条件下，对生物细胞、细胞器、染色体或DNA分子进行按图施工的遗传操作，以求定向地改造生物的遗传性。
遗传工程的概念有广义和狭义之分。
2．生物技术又称生物工艺学，生物工程学。
是根据生物学、化学和工程学的原理进行工业规模的经营和开发微生物、动植物细胞及其亚细胞组分，进而利用生物体所具有的功能元件(如基因、蛋白质)等来提供商品或社会服务的一门综合性科学技术。
它包括基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程等。
3．基因工程(gene engineering)又称基因操作(gere emanipulation)、重组DNA(recombinant DNA)。
基因工程是以分子遗传学理论为基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因(DNA分子)，按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导人活细胞，以改变生物原有的遗传特性，获得新品种，生产新产品，或是研究基因的结构和功能。
4．细胞工程(cell engineering)应用细胞生物学的原理和方法，结合工程学的技术手段，按照人们预先的设计，有计划地改变或创造细胞遗传性的技术，以及在体外大量培养和繁殖细胞，或获得细胞产品，或利用细胞体本身的技术领域。
主要内容包括细胞融合、细胞拆合、染色体转移、基因转移、细胞或组织培养等。
由于所用细胞的来源不同，细胞工程又分为微生物细胞工程、植物细胞工程、动物细胞工程等。
5．蛋白质工程(protein engineering)是更广义上的包括酶工程在内的蛋白质修饰操作，通过对蛋白质及酶的化学修饰及基因改造获得具有特殊功能的非天然蛋白质的技术。
主要是根据蛋白质的结构和功能间的相互关系，利用基因工程技术，或用化学方法合成基因、改造基因，以便合成新的蛋白质，或改变蛋白质的活性、功能以及溶解性等。
6.克隆(clone)意为无性繁殖系。
DNA克隆即将DNA的限制酶切片段插入克隆载体，导入宿主细胞，经无性繁殖，以获得相同的DNA扩增分子。
故DNA克隆为分子克隆。
7.将外源DNA带入宿主细胞并进行复制的运载工具，称为载体（vector）。
克隆载体通常是由质粒、病毒或一段染色体DNA 改造而成。
8.转化和转染将外源DNA导入宿主细胞，从而改变细胞遗传性状，称为转化；将病毒DNA直接导入细跑，称为转染。
9.基因文库基因文库是指整套基因组DNA片段分子克隆的总体。
基因文库的构建包括基因组DNA的随机片段化、载体DNA的制备、重组体DNA的体外包装、重组噬菌体感染大肠杆菌、基因文库的鉴定和扩增等步骤。
10. cDNA文库细胞全部mRNA的cDNA克隆之总体，称为cDNA文库。
(二) 填空1．接合作用转化作用转导作用转座2．基因重组位点特异的重组同源重组3. 能独立复制便于检测可导入宿主细胞4．质粒DNA 噬菌体DNA 病毒DNA5. 目的基因的获取基因载体的选择与构建目的基因与载体的拼接重组体导入受体细胞筛选与鉴定出阳性克隆6．化学合成法基因组DNA cDNA 聚合酶链式反应7．抗药性标志选择标志补救分子杂交8．酵母昆虫哺乳动物细胞9．转化转染感染10．白蓝11．质粒DNA 接合作用12．限制性核酸内切酶DNA连接酶DNA聚合酶I 反转录酶(三) 选择题1. D2. A3. D4. A5. B6. A7. C8. B9. B 10. D 11. A 12. D13. C 14. A 15. D 16. A 17. C 18. D 19. B 20. C 21. C 22. C 23. B 24. B(四) 是非题：1．错2．错3．对4．对5．对6．错7．错8．错9．对10．对11．对12．错(五) 问答题1. 基因克隆(gene cloning)是指含有单一DNA重组体的无性系或指将DNA重组体引进受体细胞中，建立无性系的过程。