lb培养基配方与tb培养基配方

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培养基制备

培养基制备

培养基制备一、概述培养基是生物实验中必不可缺的基础设施,它为微生物、细胞等生物种群的繁殖和生长提供了必要的营养物质。

本文将介绍常用的培养基配方和制备方法,以及如何根据中国国情进行优化。

二、常用培养基1.大肠杆菌培养基(LB)配方:10克蛋白胨、5克酵母提取物、10克氯化钠、加水至1L。

特点:优点是制备方便、易于培养,多数菌株生长良好。

缺点是含有大量营养物质,若用于长期贮存菌株,容易导致突变风险增加。

2.液体麦康凯发酵培养基(BHI)配方:将500克肉汤蛋白胨培养基、10克氯化钠、2克二氢磷酸氢二钠、2克葡萄糖溶解在1L蒸馏水中。

特点:适合多种微生物的生长,包括厌氧微生物。

BHI较LB富含营养物质,可提供较好的生长环境,适合繁殖菌株。

3.青霉素酸糖盐地衣芽孢杆菌培养基(PDA)配方:20克琼脂、4克葡萄糖、0.75克潮霉素、0.125克青霉素钾盐、0.05克维生素B1、加水至1L。

特点:适用于分离和培养种类繁多的真菌、放线菌等微生物,能有效地防止杂菌的污染。

三、优化培养基由于中国的气候、温度等环境条件与西方国家有所不同,因此需要进行针对性的优化,以满足不同微生物的生长需求。

1.调整pH值许多微生物生存和生长所需的pH值范围在7.0-7.5之间。

但是,我们在制备培养基时应从当地水质的酸碱性入手,适当调整pH值,以便营养物质的有效吸收。

2.添加一些特殊成分在中国有些地区,水质有问题,例如含有高浓度的重金属和有机物污染,这些都会影响微生物的生长和繁殖。

因此,在制备培养基时,要添加些许抗菌剂和抗氧化剂,保证培养环境的纯净度和稳定性。

3.注意制备温度对于不同的菌株,其适宜的生长温度也有所不同。

在制备培养基时,应根据菌株的特点,以及所处的生态环境,调整制备温度,将传统的37度下的浸渍式消毒改为高温滤器灭菌法,避免纳米材料产生自拍。

四、结论在国内微生物学、生物医学和生物工程研究领域中,培养基是至关重要的实验基础设施。

培养基的配制

培养基的配制

其他的还有:
YGG培养基:酵母膏0.3 %,胰蛋白胨0.5 %,葡萄糖0.5 %,氯化钠0.5 %,pH自然;
YM培养基:酵母膏0.3 %,胰蛋白胨0.5 %,麦芽糖0.5 %,pH自然或9.0;
Yg培养基:酵母膏0.3 %,胰蛋白胨0.5%,半乳糖0.5%,pH9.0;
YG培养基:酵母膏0.3%,胰
固体培养基:液体培养基加2 %琼脂粉
SB培养基:每升培养基含细菌培养用胰化蛋白陈309,酵母提取物209,MoPs19,pH7.0。
SOC培养基:每升培养基含细菌培养用胰化蛋白脉209,酵母提取物59,NaCI0.59,250mmol/LKCI溶液10mlpH7.0。临用前加人Zmol/LMgC12溶液5ml和1mol/L葡萄糖溶液20ml。
TB培养基
将下列组分溶解在0.9L水中:
蛋白胨 12g
酵母提取物 24g
甘油 4ml
各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液(2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中,使终体积为100ml。高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌)。
SOB培养基
将下列组分溶解在0.9L水中:
蛋白胨 20g
酵母提取物 5g
氯化钠 0.5g
1 mol/L 氯化钾 2.5ml
用水补足体积到1L。分成100ml的小份,高压灭菌。培养基冷却到室温后,再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。
SOC培养基
成分、方法同SOB培养基的配制,只是在培养基冷却到室温后,除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外,再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖(18g葡萄糖溶于足够水中,再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌)。

实验室常用培养基配方及制备方法

实验室常用培养基配方及制备方法

实验室常用培养基配方及制备方法实验室中常用的培养基有很多种,不同的培养基适用于不同类型的微生物,如细菌、真菌或细胞系等。

下面将介绍几种常用培养基的配方及制备方法。

1. LB培养基(Luria-Bertani培养基)LB培养基常用于大肠杆菌等细菌的培养。

其配方如下:- Tryptone:10g/L- Yeast extract:5g/L-NaCl:10g/L将上述成分完全溶解于适量蒸馏水中,调节pH至7.0。

用自动过滤器过滤液体得到无菌的LB培养基。

分装后在121℃高压灭菌器中高压灭菌20分钟即可。

2. Sabouraud葡萄汁蘑菇培养基Sabouraud培养基常用于真菌的培养。

其配方如下:- Peptone:10g/L- Dextrose:40g/L将上述成分完全溶解于适量蒸馏水中,调节pH至5.6、用自动过滤器过滤液体得到无菌的Sabouraud培养基。

分装后在121℃高压灭菌器中高压灭菌20分钟即可。

3. DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle Medium)DMEM培养基常用于细胞系的培养。

其配方如下:-DMEM粉:每升DMEM培养基50g-细胞因子或血清等:根据实验要求添加将DMEM粉溶解于适量蒸馏水中,并根据实验要求添加适量的细胞因子或血清。

调节pH至7.2-7.4、用自动过滤器过滤液体得到无菌的DMEM 培养基。

分装后在121℃高压灭菌器中高压灭菌20分钟即可。

4.M9液体培养基M9液体培养基是一种常用于细菌的最小培养基,适用于检验细菌的营养需求。

其配方如下:-Na2HPO4:6g/L-KH2PO4:3g/L-NaCl:0.5g/L-NH4Cl:1g/L-MgSO4·7H2O:0.1g/L-CaCl2:0.01g/L将上述成分完全溶解于适量蒸馏水中,调节pH至7.0-7.4、用自动过滤器过滤液体得到无菌的M9液体培养基。

分装后在121℃高压灭菌器中高压灭菌20分钟即可。

常用培养基配方汇总

常用培养基配方汇总

常用培养基配方汇总培养基是微生物学和生物技术中常用的一种实验工具,用于培养和繁殖微生物。

不同的微生物需要不同的培养基来满足其生长和繁殖的需求。

以下是一些常用的培养基配方汇总。

1. LB培养基(Luria-Bertani培养基)LB培养基是最常用的培养基之一,适用于大多数细菌的培养。

其成分包括植物蛋白胨、酵母提取物、氯化钠和琼脂。

它提供了细菌所需的氨基酸、碳源和能量源。

配方:-植物蛋白胨:10g-酵母提取物:5g-氯化钠:10g-琼脂:15g-加水至1L,调节pH至7.02. 紫砂培养基(Sabouraud培养基)紫砂培养基是一种适用于真菌培养的培养基。

其成分包括葡萄糖、酵母提取物和琼脂。

它提供了真菌所需的碳源和能量源。

配方:-葡萄糖:40g-酵母提取物:10g-加水至1L,调节pH至5.63. TSB培养基(Tryptic Soy Broth培养基)TSB培养基是一种适用于多种微生物的通用培养基。

其成分包括植物蛋白胨、胨肽、大豆胨和琼脂。

它提供了微生物所需的氨基酸、碳源和能量源。

配方:-植物蛋白胨:17g-胨肽:3g-大豆胨:5g-琼脂:15g-加水至1L,调节pH至7.34. MRS培养基(De Man, Rogosa and Sharpe培养基)MRS培养基是一种适用于乳酸菌培养的培养基。

其成分包括蔗糖、氯化镁、氯化钠、蛋白胨、酵母提取物和琼脂。

它提供了乳酸菌所需的碳源、氮源和能量源。

配方:-蔗糖:50g-氯化镁:0.2g-氯化钠:5g-酵母提取物:10g-琼脂:15g-加水至1L,调节pH至6.25.R2A培养基R2A培养基是一种适用于水样中微生物培养的培养基。

其成分包括胨肽、葡萄糖、酵母提取物、琼脂和微量元素。

它提供了水样中微生物所需的氮源、碳源和能量源。

配方:-胨肽:0.5g-葡萄糖:0.5g-酵母提取物:0.5g-琼脂:15g-微量元素:1mL-加水至1L,调节pH至7.2以上是一些常用的培养基配方汇总,适用于不同类型的微生物培养。

lb培养基配方与tb培养基配方

lb培养基配方与tb培养基配方

lb培养基配方与tb培养基配方LB培养基和TB培养基这两种培养基名字有点像,它们之间的区别在哪呢首先是用途上,LB经常用来预培养菌种,而TB培养基则用于慢病毒载体等多种实验中,另外,两者的配方也是大有不同的;一起了解一下吧;TB培养基的配方去离子水加至 900 ml 胰蛋白胨 12 g 酵母提取物 24 g 甘油 4 ml摇动容器使溶质完全溶解,在 15 psi 1.05 kg/cm2高压下蒸汽灭菌 20 min ;当溶液冷却至60°C或60°C以下时加入100 ml无菌的 nol/L KH2PO4, nol/L K2HPO4该溶液的配置方法是:用90 ml 去离子水溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K 2HPO4,完全溶解后,用去离子水定容至 100 ml,在 15 psi 1.05 kg/cm2高压下蒸汽灭菌 20 min ;LB培养基的配方10g NaCl 10g 蛋白胨 5g酵母粉加去离子水至1L 调PH 分装灭菌即可用之配方区别:TB培养基,Terrific肉汤Terrific Broth,TB去离子水加至 900 ml胰蛋白胨 12 g,酵母提取物 24 g,甘油 4 ml摇动容器使溶质完全溶解,在 15 psi 1.05 kg/cm2高压下蒸汽灭菌 20 min ;当溶液冷却至60°C或60°C以下时加入100 ml无菌的 nol/L KH2PO4, nol/L K2HPO4该溶液的配置方法是:用90 ml 去离子水溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K 2HPO4,完全溶解后,用去离子水定容至 100 ml,在 15 psi 1.05 kg/cm2高压下蒸汽灭菌 20 min ;LB培养基的配方如下:胰蛋白胨Tryptone 10g/L酵母提取物Yeast extract 5g/L氯化钠NaCl 5g/L另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到该pH适合目前使用最广的原核表达菌种的生长其他区别:TB培养基是一种通用培养基,用于各种微生物的培养;LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求.培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌.最后,值得注意的是,LB配制好后,一定要在冷却前加好抗生素;配TB培养基时,最后分开灭菌,否则配出来的培养基容易因为营养缺失而发黑;好了,最后祝大家实验成功;。

细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法

细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法

细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法、常用培养基1、LB 培养基将下列组分溶解在0.9L 水中:蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用INNaOH (〜1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。

注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

2 、SOB 培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1mol/L 氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。

分成100ml的小份,高压灭菌。

培养基冷却到室温后,再在每100ml 的小份中加1ml 灭过菌的1mol/L 氯化镁。

3、SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制,只是在培养基冷却到室温后,除了在每100ml的小份中加1ml 灭过菌的1mol/L 氯化镁外,再加2ml 灭菌的1mol/L 葡萄糖(18g 葡萄糖溶于足够水中,再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌)。

4 、TB 培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。

冷却到60 C , 再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HPO4 的溶液(2.31g 的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中,使终体积为100ml。

高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌)。

5、2X Y培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用INNaOH (〜1ml )调整pH 至7.0,再补足水至1L 。

注:琼脂平板需添加琼脂粉 12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉 7g/L 。

6、YPD 培 养基将下列组分溶解在 0.9L 水中: 蛋白胨 20g 酵母提取物 10g 葡萄糖 20g用水补足体积为 1L 后,高压灭菌。

建议在高压灭菌之前,对色氨酸营养缺陷型每升培养基 添加1.6g 色氨酸,因为 YPD 培养基是色氨酸限制型培养基。

常用培养基配制

常用培养基配制

常用培养基参考文献1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用储存液参考文献1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用缓冲液10X 磷酸盐缓冲液(储存液) (PBS) /升终1 X浓度NaCl 80.0 g 137 mMKCl 2.0 g 2.7 mMNa2HPO414.4 g 100 mMKH2PO42.7 g 2 mMH2O 至800 mlHCl 至pH 7.4H2O 至1升20X SSC /升终1 X浓度NaCl 175.3 g 150 mMNa3citrate x H2O 88.2 g 15 mMH2O 至800 ml 1M HCl调节pH值至7.0Tricine 179.2 g 0.1 MSDS 10.0 g 0.1% (w/v) O 至1升H2稀释溶液的pH至8.350X TAE (Tris-醋酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱242.0 g 40 mM冰醋酸57.1 ml 20 mM0.5 M EDTA (pH 8.0) 100 ml 2% mMO 至1升H2稀释溶液的pH大约为~8.510X TBE (Tris-硼酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱108.0 g 90 mM硼酸55.0 g 90 mM0.5 M EDTA (pH 8.0) 40 ml 2% mMHO 至1升210X TPE (Tris-磷酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱108.0 g 90 mM磷酸(85%) 15.5 ml 23 mM0.5 M EDTA (pH 8.0) 40 ml 2% mMO 至1升H2TE (Tris-EDTA) 缓冲液pH 7.4, 7.6或8.0 /升终1 X浓度参考文献1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用缩写下面红色字体为赠送的个人总结模板,不需要的朋友下载后可以编辑删除xx年电气工程师个人年终总结模板根据防止人身事故和电气误操作事故专项整治工作要求,我班针对现阶段安全生产工作的特点和重点,为进一步加强落实安全工作,特制定了防止人身事故和防电气误操作事故的(两防)实施细则。

常用缓冲液及培养基配方

常用缓冲液及培养基配方

常用缓冲液及培养基配方LB液体培养基:加950ml蒸馏水溶解,用5N氢氧化钠调pH至7.0,定容至1000ml,高压灭菌后保存。

LB固体培养基:每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉,高压灭菌后保存。

SOB液体培养基Bacto-蛋白胨 20g酵母抽提物 5gNaCl 0.5g加950 ml水溶解,加入250mmol/L KCl 溶液10ml,用5 N NaOH调pH至7.0,定容至1000 ml,高压灭菌后保存。

使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。

SOC液体培养基SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。

麦康凯固体培养基每1000ml水中加52g培养基粉,煮沸溶解后分装,高压灭菌。

NA固体培养基加950ml蒸馏水溶解,调pH至7.0,定容至1000ml,高压灭菌后保存。

TB培养基:将下列组分溶解在0.9L水中:各组分溶解后高压灭菌。

冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。

高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。

溶液Ⅰ葡萄糖 2.25 g 50mmol/L1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 20mmol/L0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 10mmol/L调pH至8.0后,用水定容至250 ml,高压灭菌后保存。

溶液Ⅱ10 mol/L NaOH 2ml10% SDS 10ml用水定容至100 ml,现配现用。

溶液Ⅲ5 mol/L 醋酸钾 60ml冰醋酸 11.5ml水 28.5ml高压灭菌后保存。

高盐TE缓冲液10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0*0.1mmol/L EDTA, pH 8.0*1mol/L NaCl于室温保存(可在几年内保持稳定)CTAB抽提液2%(w/v)CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 *1.4mol/L NaCl于室温保存(可在几年内保持稳定)CTAB/NaCl 溶液(10% CTAB/0.7mol/L NaCl)在80ml H2O中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10一CTAB(十六烷基三乙基溴化铵),同时加热并搅拌。

LB培养基的制备

LB培养基的制备

LB培养基是一种近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基。

LB一般被解释为Luria-Bertani培养基,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源於英语的lysogeny broth,即溶菌肉汤。

LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。

它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl。

其中酵母提取物为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。

在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。

琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。

琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。

固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。

由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。

LB培养基的配方如下:酵母提取物 5g蛋白胨 10gNaCl 5g琼脂 15~20g水 1000mLpH 7.4~7.6三、器材酵母提取物,蛋白胨, NaCl,琼脂;1mol/L NaOH, 1mol/L HCl;试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸(pH 5.5~9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。

四、操作步骤1.称量按培养基配方比例依次准确地称取酵母提取物、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。

蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。

另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。

2.溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。

待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。

如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。

36种常用微生物培养基配制汇总之欧阳理创编

36种常用微生物培养基配制汇总之欧阳理创编

36种常用微生物培养基配制汇总之欧阳理创编微生物培养基是用于培养和繁殖微生物的营养液或固体基质。

不同的微生物对于营养成分的需求有所不同,因此有多种不同类型的培养基适用于不同的微生物。

以下是36种常用的微生物培养基的配制总结。

一、普通营养基1.爱德华氏琼脂培养基(Edward's Agar Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨10g,蔗糖10g,酵母提取物5g,琼脂15g,蒸馏水1L。

pH7.2-7.42.LB培养基(LB Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨10g,酵母膏5g,NaCl10g,琼脂15g,蒸馏水1L。

pH7.0。

3.NB培养基(NB Medium)配方:纯培养基成分:牛肉精20g,酵母浸膏10g,蔗糖10g,琼脂15g,蒸馏水1L。

pH7.2二、选择性培养基1.MacConkey琼脂培养基(MacConkey Agar Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨17g,胆盐16g,中性红紫晶1g,酸性红3.6g,琼脂15g,蒸馏水1L。

pH7.1-7.52.VR琼脂培养基(VR Agar Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨10g,蔗糖10g,酵母浸膏10g,苏木素2.5g,酚红0.025g,碳酸钠10g,氧化钴0.0025g,碳酸锌0.025g,维生素B10.025g,琼脂15g,蒸馏水1L。

pH6.83.XLD琼脂培养基(XLD Agar Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨3g,胆盐2g,蔗糖7.5g,腺苷鳖1g,素含色素蓝0.008g,溴酸钠0.0125g,菌落素1.5g,氧化铋1.5g,精盐75g,麦芽葡糖糖1g,琼脂15g,蒸馏水1L。

pH7.4三、富营养基1.TSA琼脂培养基(Tryptic Soy Agar Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨15g,酵母提取物5g,氯化钠5g,琼脂15g,蒸馏水1L。

pH7.32.BHI琼脂培养基(Brain Heart Infusion Agar Medium)配方:纯培养基成分:牛心脏粉15g,牛脑粉8g,葡萄糖2g,酵母浸膏5g,琼脂15g,蒸馏水1L。

培养基配方

培养基配方

培养基配方一、LB培养基:Yeast extract 5 g/LTryptone 10g/LNacl 10g/LPH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。

二、YEB培养基:Yeast extract1 g/LPeptone(或Tryptone) 5 g/LBeef extract 5 g/LSucrose 5 g/LMgSO4 2 mmol/LPH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。

三、N6D2培养基(2,4D浓度2mg/L):① N6大量母液1:20×大量元素(1L)50ml KNO356.6g(NH4)2SO49.26gKH2PO48g②N6大量母液2:40×大量元素(500ml) 25ml2·2H2O 3.32g③N6大量母液3:40×大量元素(500ml) 25ml MgSO4?7H2O 3.7g④B5微量元素I:100×微量元素(1L) 10ml溶液A:MnSO4?H2O 781mgZnSO4?7H2O 200mg溶于400ml无菌水溶液B:H 3BO3300mgKI 75mg溶于400ml无菌水然后缓慢将溶液A和溶液B混合,定容至1L⑤B5微量元素II:1000×微量元素(500ml) 1ml Na2MoO42O 125mgCuSO4·5H2O 12.5mgCoCl2·6H2O 12.5mg⑥B5维生素I:100×维生素(500ml) 10ml盐酸硫胺素 500mg盐酸吡哆醇 50mg烟酸 50mg⑦B5维生素II:100×维生素(500ml)10ml甘氨酸 100mg⑧200×铁盐(500ml) 5mlNa2-EDTA 3730mgFeSO4·7H2O 2780mg⑨ 2,4 D:100×2,4 D10ml200mg 2,4 D,先溶于1ml 无水乙醇中,再定容到1L。

查氏、TBS、LB培养基等培养基的制备

查氏、TBS、LB培养基等培养基的制备

1. 查氏培养基--Czapek–Dox Medium蔗糖 30 g,NaNO3 3 g,K2HPO4 1 g, KCl 0.5 g, MgSO4· 7H2O 0.5 g,FeSO4 · 7H2O 0.01 g,琼脂 15 g,水 1000 mL,并用氢氧化钠调节 pH 至7.2-7.4。

121℃灭菌 20 min,冷却后备用。

液体培养基不加琼脂,用于菌种的扩大培养。

成分:硝酸钠3g磷酸氢二钾1g硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.5g氯化钾0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂20g蒸馏水1000mL制法: 加热溶解,分装后121℃灭菌20min。

用途: 青霉、曲霉鉴定及保存菌种用。

2. TSB 培养基--牛肉膏蛋白胨培养基:(牛肉膏 5g, 蛋白胨 10g, NaCl 5g, H2O 1000mL, pH 调至 7.2 ~7.4。

)胰蛋白胨 15 g,大豆蛋白胨 5 g,NaCl 5 g,牛肉膏 5 g,琼脂 15 g,水 1000 mL,并用氢氧化钠调节 pH 至 7.2-7.4。

121℃灭菌 20 min,冷却后备用。

液液体培养基不加琼脂,用于菌种的扩大培养。

3. LB 培养基---细菌基础培养基(Tryptone 10g, Yeast extract 5g, NaCl 10g, 水1000mL, pH 调至7.2 ~7.4。

)胰蛋白胨 10 g,酵母提取物 5 g,NaCl 5 g,琼脂 15 g,水 1000 mL,并用氢氧化钠调节 pH 至 7.2-7.4。

121℃灭菌 20 min,冷却后备用。

液体培养基不加琼脂,用于菌种的扩大培养。

4、soc培养基---改良的LB培养基SOC培养基组份浓度:2% (W/V) Tryptone ,0.5% (W/V) Yeast Extract ,0.05% (W/V) NaCl ,2.5 mM KCl 10 mM MgCl2,20 mM glucose。

实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法Ampicillin (100 mg/ml)IPTG(24 mg/ml)X-Gal(20 mg/ml)LB培养基■组份浓度 100 mg/ml Ampicillin■配制量 50 ml■配制方法 1. 称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中。

2. 加入40 ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50 ml。

3. 用0.22 μm滤器过滤除菌。

4. 小份分装(1 ml/份)后,-20℃保存。

■组份浓度 24 mg/ml IPTG■配制量 50 ml■配制方法 1. 称量1.2 g IPTG置于50 ml离心管中。

2. 加入40 ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50 ml。

3. 用0.22 μm滤器过滤除菌。

4. 小份分装(1 ml/份)后,-20℃保存。

■组份浓度 20 mg/ml X-Gal■配制量 50 ml■配制方法 1. 称量1 g X-Gal置于50 ml离心管中。

2. 加入40 ml DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解后,定容至50 ml。

3. 小份分装(1 ml/份)后,-20℃避光保存。

■组份浓度 1%(W/V)Tryptone,0.5%(W/V)Yeast Extract,1%(W/V)NaCl■配制量 1 L■配制方法 1. 称量下列试剂,置于1 L烧杯中。

Tryptone 10 gYeast Extract 5 gNaCl 10 g2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 滴加5 N NaOH(约0.2 ml),调节pH值至7.0。

4. 加去离子水将培养基定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后,4℃保存。

TB培养基0.5%(W/V)Yeast Extract1%(W/V)NaCl0.1 mg/ml Ampicillin■配制量 1 L■配制方法 1. 称取下列试剂,置于1 L烧杯中。

Tryptone 10 gYeast Extract 5 gNaCl 10 g2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

常用培养基配制方法

常用培养基配制方法

常用培养基配制方法:(1)基础盐培养基(MSM):(NH4)2SO42.0g,MgSO4·7H2O0.2g,CaCl2·2H2O 0.01g,FeSO4·7H2O0.001g,Na2HPO4·12H2O1.5g,KH2PO41.5g,蒸馏水1000 mL。

(2)LB培养基:蛋白胨10g,酵母提取物5g,氯化钠5g,蒸馏水1000 mL,pH7.5。

(3)高氏合成1号培养基:硝酸钾1g,磷酸氢二钾0.5g,硫酸镁0.5g,氯化钠0.5g,硫酸亚铁0.01g,可溶性淀粉20g,蒸馏水1000mL。

(4)查彼氏培养基:硝酸钠2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,蒸馏水1000mL。

(5)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂20 g,蒸馏水1000mL。

将无病马铃薯洗净去皮切碎,加蒸馏水1000mL,煮沸0.5 h,纱布过滤,滤液加蒸馏水补足1000mL,再加入葡萄糖,然后分装三角瓶灭菌备用。

(6)铵察氏琼脂培养基:氯化铵2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000 mL。

(7)克氏合成1号琼脂培养基:磷酸氢二钾1g,碳酸镁0.3g,氯化钠0.2 g,硝酸钾1g,硫酸亚铁0.01g,碳酸钙0.5g,葡萄糖20g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(8)葡萄糖天门冬素琼脂培养基:葡萄糖10g,天门冬素0.5g,磷酸氢二钾0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(9)葡萄糖酵母膏琼脂培养基:葡萄糖10g,酵母膏10g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(10)瓦氏肉汁琼脂培养基:蛋白胨5g,葡萄糖10g,牛肉膏10g,氯化钠5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(11)淀粉琼脂培养基:可溶性淀粉10g,碳酸镁1g,磷酸氢二钾0.3g,氯化钠0.5g,硝酸钠1g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

常用25种培养基详细配方

常用25种培养基详细配方

常用25种培养基详细配方以下是常用的25种培养基的详细配方:1. LB培养基(Luria-Bertani medium)-天然培养基:10g蛋白胨,5g酵母粉,10gNaCl,添加适量蒸馏水,pH值调至7.0。

- 固体培养基:添加15g agar。

2. TSA培养基(Tryptic Soy Agar)-17g蛋白胨,3g酵母提取物,5gNaCl,添加适量蒸馏水,pH值调至7.3-7.5- 固体培养基:添加15g agar。

3. NB培养基(Nutrient Broth)-8g蛋白胨,2g胰蛋白胨,5gNaCl,添加适量蒸馏水,pH值调至7.4 - 固体培养基:不添加agar。

4. R2A培养基(Reasoner's 2A medium)- 0.5g peptone,0.5g casein hydrolysate,0.5g yeast extract,0.5g glucose,0.5g soluble starch,0.3g dipotassium phosphate,0.05g magnesium sulfate,0.3g sodium pyruvate,10μg m anganese sulfate,添加适量蒸馏水,pH值调至7.2-7.4- 固体培养基:添加15g agar。

5. BHIS培养基(Brain Heart Infusion with 20% Sucrose)- 37.5g BHIS培养基,10g sucrose,添加适量蒸馏水,pH值调至7.5- 固体培养基:添加15g agar。

6. PDA培养基(Potato Dextrose Agar)-200g马铃薯,20g葡萄糖,添加适量蒸馏水,pH值调至5.6- 固体培养基:添加20g agar。

7. MRS培养基(de Man Rogosa Sharpe medium)- 10g peptone,10g beef extract,4g yeast extract,20g glucose,5g sodium acetate,2g dipotassium phosphate,0.02g magnesium sulfate,添加适量蒸馏水,pH值调至6.2-6.6- 固体培养基:添加20g agar。

培养基配方1000

培养基配方1000

培养基配方LB:蛋白胨10g,NaCl5.0g,酵母膏10g, 琼脂20g,蒸馏水1000ml,pH7.2。

NA:蛋白胨5.0g,牛肉浸膏3.0g,葡萄糖2.5g,酵母粉1.0g,琼脂粉20g,蒸馏水1000ml pH7.0~7.2。

营养琼脂:牛肉膏 1g,酵母膏 2g,蛋白胨 5g,NaCL 5g,琼脂20g,加水1000ml,PH7。

TB:胰蛋白胨12g ,酵母膏24g 、甘油 4mL、蒸馏水1000ml,pH7.2~7.4。

琼脂20g。

0.17 MKH2PO4/0.72 MK2HPO4100mL(2.31gKH2PO4和2.54gK2HPO4定容至100mL)。

2×YT:蛋白胨 16g,酵母膏10g,NaCl5g、蒸馏水1000ml,pH7.0。

琼脂20g。

(重组大肠杆菌菌株的培养)YPD:蛋白胨 20g,酵母提取物 10g,葡萄糖 20g,琼脂20g,pH7.2±0.2。

(用于酵母菌)TSA:胰蛋白胨15g,大豆蛋白胨5g,NaCl 5g,琼脂20g ,蒸馏水1000ml,pH7.2~7.4。

YG培养基:酵母膏3,胰蛋白胨5,葡萄糖5,琼脂20g,蒸馏水1000ml, pH9。

R2A:酵母膏0.5g 示蛋白胨0.5g,酪蛋白胨0.5g,葡萄糖0.5g,淀粉0.5g,磷酸氢二钾0.3g,无水硫酸镁0.024g,丙酮酸钠0.3g,琼脂20g,纯化1000ml,PH值为7.2±0.2。

金氏B(KB):蛋白胨 20g,磷酸氢二钾 1.5g,硫酸镁 1.5g,琼脂 10g,无菌水1000ml。

pH7.2~7.4。

MRS:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母粉5g,柠檬酸二铵2g,磷酸氢二钾2g,乙酸钠5g,MgSO4 .7H2O 0.58g,MnSO4 4H2O 0.25g,葡萄糖20g,土温80 1.0ml,蒸馏水1000ml,PH 6.2-6.4,琼脂20g。

(用于乳酸菌培养)PTYG:胰蛋白胨T5g,大豆蛋白胨5g,酵母粉10g,葡萄糖10g,吐温80 1mL,琼脂20g,L-半胱氨酸盐酸盐0.05g,盐溶液4mL(无水氯化钙0.2g,K2HPO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,MgSO4 。

146种常见培养基的配方

146种常见培养基的配方

146种常见培养基的配方培养基是微生物学实验中常用的一种重要实验工具,通过调配合适的培养基,可以提供微生物生长所需的营养物质,从而促进微生物菌落的繁殖和生长。

下面将介绍一些常见的培养基配方,涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。

1.琼脂肉汤培养基(NB)-牛肉脱脂粉5g-酵母提取物2.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml2.大肠杆菌复合培养基(LB)-液体培养基-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g- 蒸馏水 1000ml-琼脂板-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml3. 肠杆菌选择性琼脂培养基(MacConkey琼脂培养基)-蛋白胨17g-紫胆汁盐1.5g-普鲁士蓝盐1.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml4. 脱氧胆盐琼脂培养基(Deoxycholate Agar)-脱氧胆酸钠20g-普鲁士蓝盐0.8g-蛋白胨7.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml5.阿米巴选择性琼脂培养基(KV培养基)- 鸡蛋清 20ml- 中性红溶液 12ml-NaCl0.5g-纤维素0.25g- 盐酸 1ml-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml6. 革兰氏阳性菌选择性琼脂培养基(Mannitol Salt Agar)-蔗糖10g-氯化钠75g-酵母提取物5g-麦芽提取物1g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml7. 维生素富集琼脂培养基(Burkholder's Basal Salt Medium)-NaNO31g-KCl0.5g-MgSO4·7H2O0.2g-CaCl2·2H2O0.02g-FeSO4·7H2O0.01g-琼脂14g- 蒸馏水 1000ml8. 三氯化铁琼脂培养基(Cetrimide Agar)-硫酸镁0.8g-氯化钴0.05g-氯化锌0.01g-氯化亚铁0.03g-三氯化铁0.03g-比色琼脂糖15g- 过滤蒸馏水 1000ml9. 库氏四甲基铵琼脂培养基(Chapman Agar)-高氯酸钠5g-脲7.5g-酵母提取物2g-海藻酸钠20g-紫胆汁盐0.25g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml10. 还原格兰氏琼脂培养基(Reduced Gram-negative Broth)-蛋氨酸0.5g-异亮氨酸0.5g-半胱氨酸0.5g-菜碱0.5g-胀氨酸0.5g-琼脂7g- 蒸馏水 1000ml这些是其中的一部分常见的培养基配方,涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。

LB配料

LB配料

实验室常用培养基的配制方法Ampicillin (100mg/ml)IPTG (24mg/ml)X-Gal (20mg/ml)LB培养基■组份浓度100mg/ml Ampicillin■配制量50ml■配制方法 1.称量5g Ampicillin置于50ml离心管中。

2.加入40ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50ml。

3.用0.22μm滤器过滤除菌。

4.小份分装(1ml/份)后,-20℃保存。

■组份浓度24mg/ml IPTG■配制量50ml■配制方法 1.称量1.2g IPTG置于50ml离心管中。

2.加入40ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50ml。

3.用0.22μm滤器过滤除菌。

4.小份分装(1ml/份)后,-20℃保存。

■组份浓度20mg/ml X-Gal■配制量50ml■配制方法 1.称量1g X-Gal置于50ml离心管中。

2.加入40ml DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解后,定容至50ml。

3.小份分装(1ml/份)后,-20℃避光保存。

■组份浓度1%(W/V)Tryptone,0.5%(W/V)Yeast Extract,1%(W/V)NaCl■配制量1L■配制方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中。

Tryptone10gYeast Extract5gNaCl10g2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.滴加5N NaOH(约0.2ml),调节pH值至7.0。

4.加去离子水将培养基定容至1L。

5.高温高压灭菌后,4℃保存。

TB培养基0.5%(W/V)Yeast Extract1%(W/V)NaCl0.1mg/ml Ampicillin■配制量1L■配制方法 1.称取下列试剂,置于1L烧杯中。

Tryptone10gYeast Extract5gNaCl10g2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.滴加5N NaOH(约0.2ml),调节pH值至7.0。

LB培养基怎样配制

LB培养基怎样配制

LB培养基怎样配制之迟辟智美创作LB一般被解释为LuriaBertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤.LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(年夜肠杆菌)的经常使用培养基之一.LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化卵白胨和NaCl.酵母提取物:酵母经破壁后将其中卵白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成份的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总卵白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料.胰化卵白胨:一种优质卵白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等.酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;卵白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐.在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂.琼脂在经常使用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化.琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用.固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的分歧而有所分歧.由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖.LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化卵白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌.LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌.有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃.LB培养基用途:用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中年夜肠杆菌的保管和培养.LB培养基使用原理:卵白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂.LB培养基配制方法配制每升培养基,应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入:胰化卵白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温渡过高招致抗生素失效,并充沛摇匀.3.倒板:一般10ml倒1个板子.培养基倒入培养皿后,翻开盖子,在紫外下照1015分钟.4.保管:用封口胶封边,并颠倒放于4℃保管,一个月内使用. 配400ml的话成份按比例减少就行了,pH还是要按规定的.。

lb固体培养基的配方

lb固体培养基的配方

lb固体培养基的配方
lb固体培养的配方:
1.配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉
2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的lb固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。

3.倒板:一般10ml倒1个板子。

培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。

4.保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。

lb固体培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求。

肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基。

而lb培养基则是一种近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基。

两者都属于半合成培养基。

肉膏蛋白胨的培养基主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。

而lb固体培养基的主要成分是胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。

高氏合成一号培养基是一种用于培养放线菌的合成培养基。

培养基中的可溶性淀粉作为碳源和能源。

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lb培养基配方与tb培养基配方
LB培养基和TB培养基这两种培养基名字有点像,它们之间的区别在哪呢?首先是用途上,LB经常用来预培养菌种,而TB培养基则用于慢病毒载体等多种实验中,另外,两者的配方也是大有不同的。

一起了解一下吧。

TB培养基的配方
去离子水加至 900 ml 胰蛋白胨 12 g 酵母提取物 24 g 甘油 4 ml
摇动容器使溶质完全溶解,在 15 psi (1.05 kg/cm2)高压下蒸汽灭菌 20 min 。

当溶液冷却至60°C或60°C以下时加入100 ml无菌的0.17 nol/L KH2PO4,0.17 nol/L K2HPO4(该溶液的配置方法是:用90 ml 去离子水溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K 2HPO4,完全溶解后,用去离子水定容至 100 ml,在 15 psi (1.05 kg/cm2)高压下蒸汽灭菌 20 min 。

)
LB培养基的配方
10g NaCl 10g 蛋白胨 5g酵母粉加去离子水至1L 调PH 7.0-7.2 分装灭菌即可用之
配方区别:
TB培养基,Terrific肉汤(Terrific Broth,TB)
去离子水加至 900 ml
胰蛋白胨 12 g,
酵母提取物 24 g,
甘油 4 ml
摇动容器使溶质完全溶解,在 15 psi (1.05 kg/cm2)高压下蒸汽灭菌 20 min 。

当溶液冷却至60°C或60°C以下时加入100 ml无菌的0.17 nol/L KH2PO4,0.17 nol/L K2HPO4(该溶液的配置方法是:用90 ml 去离子水溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K 2HPO4,完全溶解后,用去离子水定容至 100 ml,在 15 psi (1.05 kg/cm2)高压下蒸汽灭菌 20 min 。

)
LB培养基的配方如下:
胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L
氯化钠(NaCl) 5g/L
另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4(该pH适合目前使用最广的原核表达菌种E.coli的生长)
其他区别:TB培养基是一种通用培养基,用于各种微生物的培养。

LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种
成倍扩增,达到使用要求.培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存
活和扩增的工程菌.
最后,值得注意的是,LB培养基配制好后,一定要在冷却前加好抗生素。

配TB培养基时,最后分开灭菌,否则配出来的培养基容易因为营养缺失而发黑。

好了,最后祝大家实验成功。

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