镉对小鼠肝脏毒性作用的实验观察

镉对小鼠肝脏毒性作用的实验观察（综合设计实验）

镉对小鼠肝脏毒性作用的实验观察

一、实验研究依据实验目的与意义

肝脏是镉急性中毒损伤的主要靶器官之一。鼠急性中毒后，镉主要蓄积于肝脏。有文献报道，镉有很强的亲硫性。在肝脏中，镉易与

巯基结合从而诱导金属硫蛋白生成镉一硫蛋白【1】，因而金属硫蛋白对

急性镉中毒有应急保护作用【2】，但若镉在短期内大量转运到肝脏，便

导致肝内金属硫蛋白相对不足，不能与镉有效结合而引起肝功能障碍，

这可能是镉引起血清AST、ALT活性及MDA升高的原因之一。【3】有研究发现，染镉后，从外观上看，小鼠肝脏体积肿大，肝叶肿胀明显，肝叶间有粘连、边缘变钝，颜色紫黑，质地变硬。【3】镜下肝

实质细胞的肿胀、嗜酸性变、淋巴细胞浸润及核固缩等肝细胞损伤改

变。

本研究通过动物实验，了解镉对小鼠肝脏的毒性作用，并从氧化应激方面探讨其作用机制。

二、实验内容与方法

(1)、实验动物：健康成年清洁级昆明种小鼠40只，雌雄各半。

(2)、主要试剂与仪器：

●仪器：7230分光光度计；显徽镜；分析天平；SIGMA 2K15型冷冻高速

离心机；

●试剂：氯化镉(CdCI

2，A．R．)、HNO

3

-HClO

4

、蒸馏水、生理盐水

(3)、动物分组与染毒：体重18—25g的健康成年清洁级昆明种小鼠随机区组分

为4组，每组10只，雌雄各办临用前以生理盐水配制CdCI

2溶液，CdCI

2

染毒

剂量分别为0.5、 1.0、 2.0mg/kg，染毒组小鼠皮下注射氯化镉溶液(10ml／kg 体重)，对照组注射生理盐水(10ml／kg体重)，连续染毒三天。各组小鼠最后一次染毒24小时后摘眼球采血或断头取全血，4°下用3000r/min离心10分钟制备血清。小鼠处死后迅速摘出肝脏，生理盐水洗净、吸干、称重。血清用于AST、ALT生化指标测定，取部分肝脏用于SOD、MDA测定。

三、观察指标

1．AST、ALT活性的测定：AST、ALT检测试剂盒，比色法。

2．MDA测定采用：硫代巴比妥酸(TBA)法．以1,1,3,3—四乙氧基丙烷(TEP)为标准，单位以每克蛋白中与TBA反应物(TBARS)的μmol数表示。蛋

白质测定采用Lowry法，以小牛血清白蛋白为标准；MDA检测试剂盒，比色法。

3．SOD测定：SOD检测试剂盒，比色法。

4．肝重、体重、脏器系数：称重法。

5．肝匀浆蛋白质测定：考马氏亮蓝比色法

四、数据统计处理方法

各组检测指标计算均数、标准差，数据各组间比较采用F检验。

五、预期实验结果

1、随着CdCI

浓度的增长，AST、ALT的活性升高，提示镉对肝脏组织的损伤作

2

用。

的染毒浓度呈正相关，且有效应剂量关2、MDA测定的反应物TBARS与CdCI

2

系。

文献资料：

【1】刘杰.用转基因动物研究金属硫蛋白对镉毒性的左右[J].中华劳动卫生职业病杂志，1998,16(1):43.

【2】金慧英.急性镉中毒的肝脏损伤机制及金属硫蛋白的保护作用[J].

中华劳动卫生职业病杂志,1998,16(1):43.

【3】陈敏，等.镉对小鼠肝脏的毒作用机理探讨[J].江苏大学学报(医学版)，August 2002,12(4).

【4】Xie JM,Funakoshi T,Shimada H,et parative effects of chelating agents in pulmonary toxicity of systemic nickel in

mice[J].J Appl Toxicol,1996,16:317.

【5】谢吉民，胡继岳，朱卫华.等.新型螯合剂对镍致小鼠肝脏毒性的影响[J].中华劳动卫生职业病杂志.1997.15(6):325.

【6】谢吉民，胡继岳，朱卫华.等.几种二六代氨基甲酸盐解镍致小鼠肝肾毒性作用比较[J].江苏医药.1998.24(增刊):521.

【7】李宏,张文昌,汪家梨,黄凌群.镉的雌激素样作用及相关机制体内的实验. [J]毒理学杂志.2005.19(3):231.