实验三复方对乙酰氨基酚片的含量测定

实验三复方对乙酰氨基酚片的含量测定、目的要求1、掌握复方片剂中各成分含量测定的基本原理和操作方法2、掌握复方片剂的分析特点。

、基本原理复方对乙酰氨基酚片中含有对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸和咖啡因三种主成分各成分之间性质差异大。

乙酰水杨酸为芳酸类药物，具酸性，K a＝3.27×10-4，可用酸量法测定；对乙酰氨基酚为芳酰胺类药物，具酰胺基，呈中性，但具潜在芳伯氨基，可将其在酸性条件下水解后用重氮化法测定；咖啡因为黄嘌呤类生物碱，碱性极弱，K b ＝0.7×10-14，不能采用一般生物碱的含量测定方法，但可将其与碘发生定量沉淀以后，剩余的碘用硫代硫酸钠滴定从而求得咖啡因的含量。

反应式表示如下：1、乙酰水杨酸的测定原理等当点时，由于生成物水杨酸钠的水解，溶液呈微碱性，所以选用碱性区域变色的指示剂--酚酞2、对乙酰氨基酚的测定原理NaOHI2（剩余 ）+2Na 2S 2O 3 2NaI+Na 2 S 4O 6三、实验方法取本品 20 片，精密称定，研细备用。

（一）乙酰水杨酸的含量测定药典规定每片检品中含乙酰水杨酸应为 0.219g ～0.242g 。

精密称取上述细粉适量（约相当于乙酰水杨酸 0.4g ），置分液漏斗中，加水15ml ，摇匀，用 氯仿振摇提取 4 次（20ml ，10ml ，10ml ，10ml ），提取氯仿液用 同一分水 10ml 洗涤，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，残渣加 中性乙醇 （对酚酞 指示液显中性）20ml 溶解后，加酚酞指示液 3滴，用 0.1mol/L 氢氧化钠液滴定， 即得。

每1ml0.1mol/L 氢氧化钠液相当于 18.02mg 的 C 9H 8O 4。

按下式计算每片含乙酰水杨酸的克数其中： T －为滴定度； V －消耗滴定液体积； f-为滴定液浓度校正因子g / 片＝T V f W 称样量 W 平均片重＋ 2 I+KI+H 2SO 4 CH 3HI I 4 +KHSO 4二）对乙酰氨基酚的含量测定药典规定每片检品中含对乙酰氨基酚应为0.120g～0.132g。

精密称取上述细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚0.25g），置锥形瓶中，加稀硫酸25ml，缓缓加热回流60 分钟，冷却至室温，将析出的水杨酸滤过，滤渣与锥形瓶用盐酸液（1→2）40ml，分数次洗涤，每次5m1，合并滤液与洗液，加溴化钾3g 溶解后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3 处，在不低于20℃的温度下，用0.lmol/L 亚硝酸钠液迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管尖端提出液面，用少量的水将尖端洗涤，洗液并入溶液中继续缓缓滴定，至用细玻棒蘸取溶液少许，划过涂有含锌碘化钾淀粉指示液的白瓷板上，即显蓝色的条痕，停止滴定，5 分钟后再蘸取少许，划过一次，如仍显蓝色的条痕，即达终点。

每lml 的0.lmol/L 亚硝酸钠液相当于15.12mg 的C8H9NO2。

按下式计算每片含对乙酰氨基酚的克数：0.01512 VM NaNO2g /片T V f平均片重0.1 W平均片重W称W称样量平均片重式中：M N'aNO 2为亚硝酸钠液的实际浓度，0.1为亚硝酸钠液的理论浓度（三）咖啡因的含量测定药典规定每片检品中含咖啡因应为27.0～31.5mg。

精密称取上述细粉适量（约相当于咖啡因50mg），加稀硫酸5ml，振摇数分钟使咖啡因溶解，滤过，滤液置50ml 容量瓶中，滤器与滤渣用水洗涤三次，每次5m1，合并滤液与洗液，精密加0.lmol/L 碘液25m1，用水稀释至刻度，摇匀，在约25℃避光放置15 分钟，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液25m1 置碘量瓶中，用0.05mol/L 硫代硫酸钠液滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。

每lml 的0.1mol/L 碘液相当于5.305mg 的C8H10N4O2· H2O。

按下式计算每片含咖啡因的mg 数2 T V I 22 T V 空 V 样 M Na 2S 2O3 20 W 平均片重四、预习提要1. 采用三种方法分别测定乙酰水杨酸、对乙酰氨基酚、咖啡因含量的原理及有关问 题讨论。

2. 测定乙酰水杨酸、对乙酰氨基酚、咖啡因时，各自的取样量如何计算 ?3. 画出乙酰水杨酸提取及洗涤的装置草图。

4. 画出对乙酰氨基酚水解回流的装置草图及滴定装置图。

5.测定乙酰水杨酸时，加入中性乙醇的作用是什么？如何配制 ?6. 测定乙酰水杨酸时，为什么要提取？7. 测定对乙酰氨基酚时，加入 KBr 的作用是什么 ?如何控制到达近终点的一次滴8. 外指示剂指示终点的原理、方法及缺点。

如何尽可能克服这一缺点？9. 咖啡因能否采用一般含氮碱的方法测定之，为什么 ?10.咖啡因含量测定时，为什么要在滴定近终点时才加入淀粉指示液?过早加入会出现什么现象 ?如何掌握近终点 ? 11. 测定过程中如何防止碘 （I 2）的挥发 ?12. 计算三成份测定时的滴定度。

13. 请比较乙酰水杨酸的中国药典法即直接酸量法 （原料）和两步滴定法 （片剂 ）与本 法提取酸量法的优缺点。

附:复方对乙酰氨基酚片处方乙酚水杨酸 230g 对乙酰氨基酚 126g 咖啡因 30g 制成 1000 片实验指导复方对乙酰氨基酚片为一复方制剂。

所谓复方制剂指含有二种或二种以上 主成份W 称样量的制剂。

在分析复方制剂时，既应考虑赋形剂等附加成份的影响，又要考虑主成份之间的相互影响。

复方对乙酰氨基酚片中含有三种主成份，乙酰水杨酸、对乙酰氨基酚和咖啡因。

乙酰水杨酸为酸性，对乙酰氨基酚为中性，含潜在芳伯氨基，咖啡因为弱生物碱。

由于性质差异大，可以采用酸量法、水解后重氮化法、碘量法分别测定三者的含量，相互之间互不干扰。

通过本实验，应掌握复方制剂分析的特点及三种方法的原理和操作技能。

一、乙酰水杨酸的含量测定（一）提取酸量法乙酰水杨酸为酸性物质，采用酸量法测定时对乙酰氨基酚、咖啡因对它无干扰，但是处方中加入酒石酸或枸椽酸为稳定剂影响测定，故用氯仿提取以消除稳定剂的影响。

由于乙酰水杨酸易水解成水杨酸和醋酸，要多消耗氢氧化钠，所以应在中性乙醇中进行分析，并控制滴定温度在5~15℃，以防水解。

（二）操作要点与技能训练本实验进一步加强提取分离的技能训练。

1. 片剂的取样方法0.4（1）取样量计算W取样量W平均片重0.23（2）粉末制备及称量取15片或20片置称量纸或干燥洁净的小烧怀（预先称重）里精密称重（求得平均片重），置研钵中研细，不允许有大颗粒存在。

按取样量的±10%为范围精密称定粉末量。

2. 定量提取①检查分液漏斗并检漏在提取前，首先要检查分液漏斗，注意漏斗塞及活塞是否严密、配套，尤其要注意上口活塞边上有无放气的小孔。

然后用少量提取溶剂振摇，检漏。

活塞用甘油淀粉糊润滑，因为与活塞直接接触的是与水不溶的有机溶剂氯仿。

②振摇方法参见实验三有关内容。

如有少量液体冲至漏斗玻管部分，应用少量氯仿冲洗使之回入漏斗中。

如果上口活塞有放气孔，只需将两孔对齐即可放气，然后错开两孔，再轻轻旋摇或振摇。

③分层将分液漏斗置分液漏斗架上，静置待分层后，打开玻塞（或对齐上口小孔），用少量水冲洗玻塞瓶口。

旋转活塞，缓缓放出下层液至接收器中（如下层液体需进一步用溶剂提取或洗涤时，可用另一分液漏斗接收之）。

因尽量将两相恰好分离。

分得的两相必要时可经过过滤或洗涤。

④提取次数及用量提取4 次，氯仿用量依次为20m1,10m1,10m1,10m1。

⑤提取及洗涤方法a.提取－洗涤过程中，不能让水层长时间地接触活塞部分，以免甘油淀粉糊被溶解而发生渗漏。

b.每次提取液都置第2 只分液漏斗经同一份水洗涤，洗涤液收集入锥形瓶，并合并洗涤液。

即经过四次提取，四次洗涤，然后将4 次提取--洗涤液合并入同一锥形瓶中。

3. 蒸除溶剂在水浴上蒸馏回收，蒸馏所得氯仿液应收集于磨口锥形瓶中，不能敞口蒸馏或敞口接收馏液。

4. 所加中性乙醇，是用酚酞为指示剂调配的。

5. 滴定温度控制在5~15℃，终点粉红色应保持30 秒不褪。

二、对乙酰氨基酚的含量测定（一）解释两个问题l. 复方对乙酰氨基酚片粉的水解 对乙酰氨基酚、阿斯匹林在酸性中水解，生成的产物有对氨基酚析出2. 加入 KBr 的作用 在盐酸条件下，重氮化反应过程为NaNO 2十 HCl →HNO 2+NaClHNO 2十HCl →NOCl 十H 2ONO +Cl -Ar NH 2 慢 Ar H N NO 反应速度取决于慢反应的一步即第一步。

根据质量作用定律，反应速度 =K[Ar一 NH 2]·[NO +]，亦即增大 Ar 一 NH 2和 NO +的浓度，都能加速反应。

由于反应强，成盐性增强，游离原形浓度下降，会使反应速度下降。

为了加快反应速度， 那么势必要增加另一个反应物 NO +的浓度，为此在溶液中加入 KBr ，KBr+HCl →HBr+KClHBr+HNO 2→NOBr +H 2O产生 NOBr 的平衡常数比产生 NOCl 的平衡常数要大 300 倍，亦即加入 KBr 后， 溶液中 NO +的浓度大大增加了，从而有效地增加了反应速度。

（二）操作要点及技能训练0.25 1.取样量计算 W 取样0.25 W 平均片重 取样 0.126 平均片重2.水解水解完全是本实验的关键。

如果水解不完全， 轻者含量偏低， 重者致使快速 滴定失效。

为确保水解完全，应在直火上 （2000瓦电炉）加热回流 40 分钟，若用 3000瓦以上的电炉，则应加石棉网，以免加热太猛烈使回流液冲出。

3. 滤过及滤渣洗涤（1）在此条件下对乙酰氨基酚水解产物对氨基酚溶于稀硫酸中，而乙酰水杨 酸的水解产物水杨酸不溶于酸而析出。

将回流液放冷至室温或用自来水冲洗外瓶 壁使之冷却，冷却过程中轻轻旋摇，以生成有利于过滤的大针形结晶。

Ar N N OH Ar N N NCl -所以使氮上电子云密度增大， 碱性增 ）和水杨酸（水杨酸不溶于水而沉淀个具斥电子基的化合物，(2)过滤时可采用上倾法过滤，即将上层液体置入漏斗，滤渣及锥形瓶用盐酸液(1→2)40m1 分数次洗涤，仍用上倾法过滤并将洗液并入滤液中，以免样品损失。

4. 滴定(1) 在200 或250m1 的烧杯中进行，烧怀置搅拌器上，在烧杯中加搅拌子一粒或二粒。

(2) 在酸式滴定管前加一小段滴管，用乳胶管连接。

(3) 按下限预先计算近终点加入量。

(4) 将滴定管尖端插入液面下约2/3 处，不低于20℃的温度下，用0.lmol/L 亚硝酸钠液迅速滴定，边滴边搅拌。

当滴至按下限计理论量前1~2m1，即至近终点时，将滴定管尖端提出液面;并用少量水将尖端上的样液洗净并入。

(5) 此时，应缓缓滴定，逐滴滴入并不断搅拌，因为这个反应为分子反应，尤其是近终点时反应物浓度小，速度更慢。