全血丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)
乳酸脱氢酶(LDH)活性检测试剂盒说明书
乳酸脱氢酶(LDH )活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:BC0680规格:50T/24S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体30 mL×1瓶4℃保存试剂一液体25 mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1支-20℃保存试剂三液体25 mL×1瓶4℃保存试剂四液体60 mL×1瓶4℃保存标准品液体1 mL×1支4℃保存溶液的配制:1、试剂二:临用时加入1.3 mL 双蒸水充分溶解备用,配好后可分装成小管-20℃保存,可保存两周,禁止反复冻融;2、标准品:2 μmol/mL 丙酮酸钠溶液。
产品说明:LDH (EC 1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着NAD +/NADH 之间互变。
LDH 催化NAD +氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸进一步与2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中显棕红色,颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL )为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W ,超声3s ,间隔10s ,重复30次);8000g 4℃离心10min ,取上清,置冰上待测。
2、组织:按照组织质量(g ):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆。
丙酮酸激酶检测试剂盒测定原理
丙酮酸激酶检测试剂盒测定原理
具体的测定步骤如下:
1.样品准备:将待测样品(如血浆、血清、脑脊液等)收集到试管中。
2.加入试剂:向样品中加入适量的试剂盒中所提供的反应液,包括缓
冲液、辅酶、底物和酶测定物等。
3.反应催化:通过加入反应液,使丙酮酸与辅酶协同催化下,生成丙
酮酸脱氢酶并伴随着NADH的氧化,生成乳酸和NAD+。
反应方程式:
丙酮酸+NADH+H+->乳酸+NAD+
4.光度计测定:利用光度计测定在反应中,NADH的浓度的变化,NADH的浓度的变化可通过测量吸光度来表示。
在反应开始时,NADH的浓度较高,吸光度也较高,而反应过程中,
随着NADH的消耗,其浓度下降,吸光度也逐渐减小。
5.数据分析:将吸光度与时间建立标准曲线,通过与标准曲线进行比对,可以确定样品中丙酮酸激酶的活性。
注意事项:
1.实验过程需要在恒温条件下进行,以保证反应的稳定性。
2.标本的处理过程需要避光,以免光敏化反应的发生。
3.实验中要注意纯化试剂的选择,以减少因杂质引起的误差。
4.测试前要进行仪器的校准,确保测试结果的准确性。
总结:
丙酮酸激酶检测原理主要是通过测定丙酮酸脱氢酶催化下的丙酮酸形成乳酸的速率,间接反映出丙酮酸激酶的活性。
这种检测方法非常重要,可以帮助医生评估患者的病情和治疗效果,对提高脑卒中的诊断和治疗水平具有重要意义。
丙酮酸(pyruvic acid PA)含量测定试剂盒说明书
货号:QS2204 规格:50管/48样丙酮酸(pyruvic acid PA)含量测定试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义:丙酮酸通过乙酰CoA连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢,起着重要的枢纽作用。
测定原理:丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在碱性溶液中呈色。
自备实验用品及仪器:可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制:提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体5mL×1瓶,4℃避光保存;试剂二:液体25mL×1瓶,4℃保存。
丙酮酸提取:1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),静置30min, 8000g,25℃离心10min,取上清待测。
2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆,静置30min,8000g,25℃离心10min,取上清待测。
3、血清(浆)样品:按照血清(浆)体积(mL):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议取0.1mL血清(浆)加入1mL提取液),进行冰浴匀浆,静置30min, 8000g,25℃离心10min,取上清待测。
测定步骤:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至520nm,蒸馏水调零。
2、取300μL样本+100μL试剂一于1.5mL EP管中,混匀,静置2min,加入500μL试剂二,混匀,于520nm波长处测定管吸光值A。
丙酮酸含量计算:1、标准条件下测定回归方程为y = 0.0466x + 0.0675; x为丙酮酸含量(µg/mL),y为吸光值。
丙酮酸(PA)含量检测试剂盒说明书 微量法
丙酮酸(PA)含量检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC2205规格:100T/96S产品内容:提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体5mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体25mL×1瓶,4℃保存。
丙酮酸钠标准液,1mg/mL:液体1mL×1瓶,4℃保存产品说明:丙酮酸通过乙酰CoA连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢,起着重要的枢纽作用。
丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在碱性溶液中呈樱红色。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水。
操作步骤:一、丙酮酸提取:1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),静置30min,8000g,常温离心10min,取上清待测。
2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆,静置30min,8000g,常温离心10min,取上清待测。
3、血清(浆)样品:按照血清(浆)体积(mL):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议取0.1mL血清(浆)加入1mL提取液),进行冰浴匀浆,静置30min,8000g,常温离心10min,取上清待测。
4、标准品的准备:将标准品用蒸馏水稀释至100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.5625、0g/mL。
二、测定步骤:1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至520nm,蒸馏水调零。
2、在微量玻璃比色皿或96孔板中加入75L标准液或样本和25L试剂一,混匀,静置2min,加入125L试剂二,混匀,于520nm波长处测定吸光值A。
乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P比色法)
北京雷根生物技术有限公司
加入物(ml) 待测样品(血清、血浆、体液等) LDH 检测工作液
北京雷根生物技术有限公司
乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P 比色法)
简介:
乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH 或 LD)属于氧化还原酶,能够催化氢氧原 子或电子从一中底物转移到另一种底物上乳酸脱氢酶是糖酵解和糖异生的一个极其重要的 酶,含有锌离子,广泛分布于人和动物组织、植物和微生物中,能可逆的催化乳酸(L)和丙 酮酸(P)之间的氧化还原反应。乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P 比色法)是利用乳酸脱氢 酶催化上述逆反应,即丙酮酸+NADH+H+→乳酸+NAD+。在上述反应过程中,丙酮酸还 原成乳酸,同时 NADH 氧化成 NAD+,引起 340nm 处吸光度的下降。该 LD-P 法的优点 是:1、操作比二硝基苯肼比色法简单;2、重复性好;3、准确性比二硝基苯肼法好;4、
2、 处理后的样品应及时检测,否则 LD4 和 LD5 易失效。 3、 血清或肝素抗凝血浆检测效果较好,草酸类、EDTA 抗凝剂对 LDH 活性有抑制作用。
北京雷根生物技术有限公司
4、 避免使用溶血样本。 5、 为了您的安全和健康,请穿实验服幵戴一次性手套操作。
自动分析仪计算公式:LDH(U/L)=ΔA/min×(106/6220)×(296/10)=ΔA/min×4758.8 注意:如果待测样品加入 LDH 保护工作液,其结果应除以 0.9。
丙酮酸(PYR)测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)产品技术要求北京赛诺浦
丙酮酸(PYR)测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)适用范围:用于体外定量测定人体血清或血浆中丙酮酸的含量。
1.1 试剂盒包装规格试剂1:1×15mL,试剂2:1×5mL;试剂1:2×30mL,试剂2:2×10mL。
试剂1:2×54mL,试剂2:2×18mL;试剂1:3×45mL,试剂2:3×15mL;试剂1:4×54mL,试剂2:4×18mL;试剂1:2×300mL,试剂2:1×200mL;试剂1:1×9L,试剂2:1×3L。
校准品(选配):2×0.5mL,2×1mL(2水平)。
质控品(选配):2×0.5mL,2×1mL(2水平)。
1.2 试剂盒主要组成成分注:校准品和质控品存在批特异性,具体浓度见对应批次产品标签。
2.1 外观试剂1:无色澄清液体;试剂2:无色澄清液体。
校准品:无色至淡黄色澄清液体。
质控品:无色至淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不小于0.5。
2.4 分析灵敏度测定浓度在200µmol/L附近的样本时,吸光度变化值(ΔA)应不小于0.02。
2.5 线性在(30,1200)µmol/L线性范围内,线性相关系数r不小于0.990。
在(150,1200)µmol/L范围内的线性相对偏差不大于±10%;测定结果(30,150]µmol/L时线性绝对偏差不大于±15µmol/L。
2.6 重复性重复测试高低浓度的样本,所得结果的变异系数(CV%)应不大于8%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本,测定结果的批间相对极差应不大于10%。
2.8 准确度与已上市产品进行比对试验,在(30,1200)µmol/L范围内,与比对系统的相关系数r不小于0.975;在(100,1200)µmol/L区间内与比对系统的相对偏差应不大于±15%,(30,100] µmol/L区间内与比对系统的绝对偏差应不大于±15µmol/L。
丙酮酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)产品技术要求jiuqiang
丙酮酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)适用范围:用于体外定量测定人体血清中丙酮酸(PYR)的含量,临床主要用于糖尿病引起的酮症酸中毒的辅助诊断。
1.1包装规格包装规格见表1表1 包装规格1.2主要组成成分主要组成成分见表2。
表2 主要组成成分注:不同批号的校准品、质控品赋值有差异,具体赋值详见靶值单。
2.1 外观试剂1为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;试剂2为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;校准品为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;质控品为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;试剂盒标签标识清晰,外包装完整无损。
2.2 净含量试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白吸光度A340nm下测定空白吸光度应≥0.5000。
2.4 准确度回收试验:在临床样本中加入一定体积的校准品溶液,进行测定,回收率在90%~110%之间。
2.5 分析灵敏度样品浓度为200 µmol/L时,其吸光度变化在0.0400~0.1200之间。
2.6 线性区间在[30,1000]µmol/L区间内,线性相关系数r≥0.990,在[30,150]µmol/L区间内绝对偏差应不超过±15µm ol/L,在(150,1000]µmol/L区间内相对偏差应不超过±10%。
2.7 测量精密度2.7.1 重复性对高、低不同浓度的同一血清样本或质控品重复测定10次,其测定值的变异系数(CV%)应不大于10%。
2.7.2 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差(R)应不大于10%。
2.8 稳定性试剂盒在2℃~8℃密封避光保存,有效期为12个月。
在试剂盒有效期满后一个月以内,应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1的要求。
2.9 校准品溯源性按GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求,提供所有产品校准的来源、赋值过程以及测量不确定度,试剂盒校准品溯源至Sigma公司。
丙酮酸激酶检测试剂盒测定原理
丙酮酸激酶检测试剂盒测定原理丙酮酸激酶检测试剂盒是一种用于检测生物体内丙酮酸激酶含量的工具。
这种酶在人体内十分重要,是将糖类分解成能量的关键环节之一,也是糖尿病和肥胖等疾病的关键因素之一。
下面我将为大家分步骤地介绍丙酮酸激酶检测试剂盒的检测原理。
第一步,样品制备。
我们需要将要检测的血液、血清、血浆等样品加入一定的试剂中混合均匀,获得我们所需要的稀释后样品。
这里需要注意的是,样品的制备过程中需要去除可能存在的脂质、其他蛋白质、酶类等干扰因素。
第二步,反应系统的制备。
将试剂盒中所提供的所有试剂按一定比例混合,制成我们需要的反应系统。
反应系统包含两个方面:底物和酶标记物。
具体的,底物是指在酶的作用下,丙酮酸和ATP反应形成丙酮酸ADP,其中ADP是电子吸收素的辅因子,在波长340nm时较好吸收;酶标记物是取代分子中的二氢维生素K-3(又称香叶酸钠),是电化学发光素的前体物。
第三步,加样。
将制备好的稀释后样品加入反应系统中,进行反应。
反应的过程中,丙酮酸激酶与反应系统中的底物进行酶促反应,产生释放出的ADP,而此时体系中的酶标记物直接与ADP结合,生成复合物,这个复合物具有一定的电化学性质。
第四步,清洗。
首先用洗板液清洗反应后的微孔板,去除未结合的底物和酶标记物;然后再用去离子水清洗,彻底去除阻碍我们检测的任何余量原料。
第五步,测定。
将清洗后的微孔板放入读板仪上进行检测。
读板仪将指定波长的光束照射到微孔板中,同时检测光源照射后反射回来的光强。
反应后样品中复合物产生的荧光值与丙酮酸激酶的含量呈正相关,我们便得以精确检测出丙酮酸激酶的含量。
综上所述,丙酮酸激酶检测试剂盒通过底物和酶标记物的酶促反应机制,精确检测生物体内的丙酮酸激酶含量。
它的成分和原理虽然看起来很复杂,但是在临床检测中却发挥了重要的作用。
乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求derui
乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒
(乳酸底物法)
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。
表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白
2.2.1试剂空白吸光度
试剂以生理盐水为空白时,在温度37℃、波长340nm、光径1.0 cm 条件下,吸光度≤0.50。
2.2.2试剂空白吸光度变化率
试剂以生理盐水为空白时,在温度37℃、波长340nm、光径1.0 cm 条件下,吸光度变化率≤0.002。
2.3分析灵敏度
试剂盒测试浓度为100U/L被测物时,吸光度变化率≥0.004。
2.4线性范围
2.4.1试剂盒在25 ~750U/L区间(范围)内,其回归系数r≥0.990。
2.4.2相对偏差或绝对偏差应符合表3 要求。
表3 相对偏差或绝对偏差
2.5精密度
2.5.1试剂盒重复性CV 值应≤5%。
2.5.2试剂盒批间相对极差(R)应≤10.0%。
2.6准确度
相对偏差(Bias%)应在参考物质靶值±10%以内。
2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求shouyi1
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清中乳酸脱氢酶的活性浓度。
1.1产品型号/规格1.2产品组成试剂1:L-乳酸55mmol/L。
试剂2:NAD+8.5mmol/L。
2.1 外观试剂1、2均为无色透明溶液;试剂盒各组分齐全、完整,液体无渗漏,包装标签文字符号清晰牢固不易脱落,外包装完整无破损。
2.2 装量液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于0.50。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,用生理盐水作为样品加入试剂测试时,试剂空白波光度变化率(ΔA/min)应不大于 0.002/min。
2.4 分析灵敏度测定246U/L乳酸脱氢酶时,吸光度的变化率在(0.0729±0.0104)/min 范围内。
2.5 准确度相对偏差应不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1 重复性用血清样品或质控样品重复测试所得的变异系数(CV)应不大于5.0%。
2.6.2批间差试剂(盒)批间相对极差应不大于6.0%。
2.7 线性区间测试血清样本,试剂线性在[10,1000]U/L(37℃)区间内:a) 线性相关系数|r|应不小于0.990;b) [10,100]U/L区间内,线性绝对偏差应不超过±10U/L;(100,1000]U/L 区间内,线性相对偏差应不超过±10%。
2.8稳定性原包装试剂2~8℃避光保存有效期12个月,到效期后的样品检测试剂空白、准确度、线性区间应符合2.3、2.5、2.7的要求。
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求haifeng
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)
适用范围:本产品适用于体外定量测定人血清中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。
1.1 产品规格
1.2 主要组成成分
2.1 外观
2.1.1试剂盒标签标识清晰,外包装完整无破损;
2.1.2试剂1为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;
2.1.3试剂2为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
2.2 净含量
净含量不低于标示值。
2.3 试剂空白
2.3.1空白吸光度
在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下,空白吸光度应小于0.5。
2.3.2空白吸光度变化率
在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下,空白吸光度变化率不大于0.002/min。
2.4 线性范围
(25,1000)U/L范围内,相关系数≥0.990;
(25,100]U/L范围内,线性绝对偏差应不超过±10U/L;
(100,1000)U/L范围内,线性相对偏差应不超过±10%。
2.5 分析灵敏度
在产品说明书规定参数设定条件下,换算为测定浓度为300U/L的样本, 吸光度变化率△A/min应不小于0.015。
2.6 精密度
2.6.1批内重复性
CV≤5.0%。
2.6.2 批间差
相对极差R≤10.0%。
2.7 准确度
测定参考物质GBW(E)090593,测定结果应不超过标示值的±10%。
2.8 稳定性
未开封试剂2℃~8℃储存,可稳定12个月。
取到效期后2个月内产品进行检测,检测结果应满足2.4和2.7的规定。
丙酮酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)产品技术要求baiding
丙酮酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中丙酮酸的含量。
1.1规格校准品(选配):1×1mL;质控品(选配):水平1:1×1mL,水平2:1×1mL。
1.2组成:注:校准品靶值、质控品质控范围详见包装标签。
2.1 外观2.1.1试剂1:无色液体,无浑浊,无不溶物。
2.1.2试剂2:无色液体。
2.1.3校准品:无色至淡黄色液体。
2.1.4质控品:无色至淡黄色液体。
2.1.5包装外观应整洁,标签字迹清晰,不易脱落。
2.2 净含量液体试剂的净含量不低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度试剂空白吸光度≥0.5。
2.4 分析灵敏度样本浓度为200 μmol/L时,△A≥0.02。
2.5 线性区间在[30,1000] μmol/L范围内,线性相关系数r≥0.990;测试浓度在[30,100] μmol/L时,绝对偏差不超过±10 μmol/L,测试浓度在(100,1000] μmol/L时,相对偏差应不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1 批內精密度用高、中、低3个浓度的样本测试试剂盒,各重复测试10次,其变异系数(CV)应不大于10%。
2.6.2批间差用样本分别测试3个不同批次的试剂盒,每个批次测试3次,其相对极差(R)应不大于10%。
2.7 准确度回收率在85%-115%范围内。
2.8 质控品赋值有效性测试结果在质控范围内。
2.9 瓶内均匀性校准品和质控品瓶内均匀性(CV)应不大于10%。
2.10 量值溯源校准品量值溯源至公司内部工作校准品,并与北京九强生物技术股份有限公司生产的丙酮酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)比对验证。
2.11 稳定性2.11.1校准品开瓶稳定性校准品开瓶后2℃~8℃避光保存可稳定3天。
稳定期过后4小时内进行测试,测试结果与靶值的相对偏差不超过±10%。
2.11.2质控品开瓶稳定性质控品开瓶后2℃~8℃避光保存可稳定3天。
丙酮酸脱氢酶(Pyruvate dehydrogenase,PDH)试剂盒说明书
货号:MS2103 规格:100管/96样丙酮酸脱氢酶(Pyruvate dehydrogenase,PDH)试剂盒说明书微量法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义:PDH(EC 4.1.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)催化丙酮酸氧化脱羧的限速酶,催化丙酮酸脱梭生成羟乙基-TPP,把糖酵解和三羧酸循环连接起来。
测定原理:PDH催化丙酮酸脱氢,同时还原2,6-二氯酚靛酚(2,6-DCPIP),从而导致600nm光吸收的减少。
自备实验用品及仪器:可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:试剂一:100mL×1瓶,-20℃保存;试剂二:20mL×1瓶,-20℃保存;试剂三:1.5mL×1支,-20℃保存;试剂四:液体20mL×1瓶,4℃保存;试剂五:粉剂×1瓶,4℃保存;样本的前处理:组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:1、称取约0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
2、将匀浆600g,4℃离心5min。
3、弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
4、上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的PDH(此步可选做)。
5、在步骤④的沉淀中加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3秒,间隔10秒,重复30次),用于线粒体PDH活性测定。
测定步骤:1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至605nm,蒸馏水调零。
2、样本测定(1)在试剂五中加入19mL试剂四充分溶解,置于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本和190μL试剂五,混匀,立即记录605nm 处初始吸光值A1和 1min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂(盒)(乳酸底物法)产品技术要求新产业
乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂(盒)(乳酸底物法)
2.性能指标
2.1外观
试剂应为清澈透明的液体,无沉淀、悬浮物和絮状物。
2.2装量
试剂装量的装量应按表1,液体装量的最大允许负偏差应为5%。
2.3试剂空白
2.3.1试剂空白吸光度
试剂(盒)测试空白样本,在37℃±0.1℃、340 nm 波长、1 cm 光径条件下,试剂空白吸光度应≤0.300 Abs。
2.3.2试剂空白吸光度变化率
试剂(盒)测试空白样本,在37℃±0.1℃,340 nm 波长、1 cm 光径条件下,试剂空白吸光度变化率≤0.002 Abs/min。
2.4分析灵敏度
试剂(盒)测试245 U/L 的被测物时,吸光度变化率(ΔA/min)≥0.021 Abs/min。
2.5线性区间
试剂(盒)线性在(0.00,1000.00] U/L 区间内,应符合如下要求:
a) 线性相关系数r≥0.990;
b) (0.00,150.00] U/L 区间内,线性绝对偏差在±15.00 U/L 范围内;(150.00,1000.00] U/L
区间内,线性相对偏差在±10%范围内。
2.6精密度
2.6.1重复性
试剂(盒)测试活性在(200±20)U/L 范围内的样本时,变异系数CV≤4.0%。
2.6.2批间差
试剂(盒)测试活性在(200±20)U/L 范围内的样本时,相对极差R≤6.0%。
2.7准确度
测可溯源至有证参考物质的校准品,相对偏差 B 在±10%范围内。
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求baiding
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)
适用范围:本试剂用于体外定量测定人血清中乳酸脱氢酶的活性。
1.1产品型号
产品组成
2.1 外观
2.1.1 试剂1为无色透明液体,无混浊,无未溶解物。
2.1.2 试剂2为无色透明液体,无混浊,无未溶解物。
2.1.3 标签内容清晰,字迹牢固不易脱落。
2.2 试剂装量
液体试剂的净含量不少于标示值。
2.3 试剂空白
2.3.1 试剂空白吸光度
A≤0.50(光径1.0cm,340nm±20nm波长)。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率
ΔA/分≤0.002。
2.4 分析灵敏度
测定150U/L样本,吸光度变化在0.01/分~0.03/分范围内。
2.5 线性区间
2.5.1 [5,1000]U/L(37℃)。
在规定的线性范围内,测定值与样本浓度值的相关系数(r)应不低于0.990。
2.5.2 [5,50]U/L范围内,线性绝对偏差应不超过±5U/L;(50,1000]U/L范围内,线性相对偏差应不超过±10%。
2.6 精密度
2.6.1 重复性
变异系数CV≤5.0%。
2.6.2 批间差
批间相对极差≤6.0%。
2.7 准确度
相对偏差在±10%范围内(测试国家标准物质GBW(E)090593)。
2.8 稳定性
原装试剂2℃~8℃保存,有效期12个月,有效期满后2个月内测定结果应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、和2.7要求。
乳酸脱氢酶(LDH)比色法测试盒
Focusonyourresearch Serviceforlifescience乳酸脱氢酶(LDH)比色法测试盒货号:E-BC-K046-M方仪器:酶标仪(440-460nm)规格:96T(40sFocusonyourresearchServiceforlifescience基本信息用途本试剂盒合用于检测血清、血浆、胸水、组织、细胞等样本中LDH活力。
检测范围及敏捷度检测范围:6-1000U/L敏捷度:6U/L背景介绍乳酸脱氢酶(EC,LDH)是一种氧化复原酶,它催化丙酮酸和乳酸的互相转变,同时将NADH氧化成NAD+[1]。
LDH是一种四聚体分子,由两个亚基构成,分别为H亚基和M亚基[2]。
在组织损害或红细胞溶血后,细胞将LDH开释到血液中。
细胞外的LDH活性用于检测细胞损害或细胞死亡[3]。
检测原理以辅酶I为递氢体,LDH催化乳酸产生丙酮酸,丙酮酸与 2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,后者在碱性溶液中呈棕红色,颜色的深浅与丙酮酸的浓度呈正比,经过测定OD值,可计算LDH的活力。
本试剂盒测组织和细胞样本时,需测定总蛋白浓度,介绍使用 BCA法(货号:E-BC-K318-M)。
乳酸脱氢酶(LDH)比色法测试盒供给试剂和物件编号名称规格(size)保留方式(96T)(Storage)试剂一基质液5mL×1瓶2-8℃保留6个月(Reagent1)(SubstrateBuffer)试剂二辅酶I粉剂×1支2-8℃保留6个月(Reagent2)(CoenzymeI)试剂三显色剂5mL×1瓶2-8℃避光保留6(Reagent3)(ChromogenicAgent)个月试剂四碱溶液5mL×1瓶2-8℃保留6个月(Reagent4)(AlkaliReagent)试剂五2μmol/mL丙酮酸标准品1mL×1支2-8℃保留6个月(Reagent5)(2μmol/mLPyruvicAcidStandard)96孔酶标板1板96孔覆膜2张样本地点标志表1张注:试剂严格按上表中的保留条件保留,不一样试剂盒中的试剂不可以混用。
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求shouyi
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清中乳酸脱氢酶的活性浓度。
1.1包装规格试剂1:3×80mL,试剂2:3×20mL;试剂1:4×60mL,试剂2:4×15mL;试剂1:6×40mL,试剂2:3×20mL;试剂1:2×80mL,试剂2:2×20mL;试剂1:1×60mL,剂2:1×15mL1.2产品组成试剂1:L-乳酸55mmol/L。
试剂2:NAD+8.5mmol/L。
2.1 外观试剂1、2均为无色透明溶液;试剂盒各组分齐全、完整,液体无渗漏,包装标签文字符号清晰牢固不易脱落,外包装完整无破损。
2.2 装量液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于0.50。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,用生理盐水作为样品加入试剂测试时,试剂空白波光度变化率(ΔA/min)应不大于 0.002/min。
2.4 分析灵敏度测定246U/L乳酸脱氢酶时,吸光度的变化率在(0.0729±0.0104)/min 范围内。
2.5 准确度相对偏差应不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1 重复性用血清样品或质控样品重复测试所得的变异系数(CV)应不大于5.0%。
2.6.2批间差试剂(盒)批间相对极差应不大于6.0%。
2.7 线性测试血清样本,试剂线性在[10,1000]U/L(37℃)区间内:a) 线性相关系数|r|应不小于0.990;b) [10,100]U/L区间内,线性绝对偏差应不超过±10U/L;(100,1000]U/L区间内,线性相对偏差应不超过±10%。
2.8稳定性原包装试剂2~8℃避光保存有效期12个月,到效期后的样品检测试剂空白、准确度、线性区间应符合2.3、2.5、2.7的要求。
乳酸脱氢酶测定试剂盒说明书
乳酸脱氢酶测定试剂盒说明书乳酸脱氢酶测定试剂盒(速率法)说明书【产品名称】通用名称:乳酸脱氢酶测定试剂盒(速率法)商品名称: 乳酸脱氢酶测定试剂盒(速率法)英文名称:LDH-L【包装规格】M-100462×50/2×10ml 4×50/4×10ml 1×100/1×20ml 2×100/2×20ml3×100/3×20ml 4×100/4×20ml 5×100/5×20ml 1×70/1×14ml R1/R22×70/2×14ml 3×70/3×14ml 4×70/4×14ml 5×70/5×14ml1×1000/1×200ml 1×5000/1×1000ml 1×10000/1×2000ml【预期用途】用于定量测定人血清,血浆中的乳酸脱氢酶(LDH)的活力。
乳酸脱氢酶在血清中由5种同功酶组成。
这些酶是以四聚体结构存在。
有两亚型,M-亚型主要发现在骨骼肌里,H-亚型主要发现在心肌里。
因为它们电泳时向正极移动的特性,同功酶分为LDH1, LDH2, LDH3, LDH4各LDH5。
LDH1 向正极移动最快。
亚型是:H4, H3M, H2M2, HM3和M4。
【检验原理】++LDHL-乳酸 + NAD 丙酮酸 + NADH + H ,,,,在340nm处,每分钟吸光度的增加跟样品中LDH的活力成正比。
【主要组成成份】N-甲基-D-葡萄糖胺缓冲液- --------------------------------325mmol/lL-乳酸 -----------------------------------------------------------50mmol/l氧化型辅酶I ----------------------------------------------------10.0 mmol/l【储存条件及有效期】储存在冰箱(+2? 至 +8?C) ,有效期至少一年。
全血丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)
ldhsolution编号名称cc0007磷酸缓冲盐溶液10pbs无钙镁北京雷根生物技术有限公司wwwleagenecomcs0001ack红细胞裂解液acklysisbufferdc0032masson三色染色液df0135多聚甲醛溶液4pfanr0001depc处理水01ps0013ripa裂解液强pw0082
组成:
名称
编号
TC0757 100T
Storage
试剂(A): 丙酮酸标准(100mmol/L)
1ml
4℃ 避光
试剂(B): 蛋白沉淀剂
6瓶Βιβλιοθήκη RT 避光试剂(C):
C1: NADH
2 支 -20℃ 避光
NADH solution
C2: NADH buffer
3ml
RT
按 C1:C2=1 支:1ml 的比例充分混合,即为 C1C2 液,4℃避光保
存 48h 有效
试剂(D): LDH solution
0.6ml -20℃ 避光
使用说明书
1份
操作步骤(仅供参考):
1、 配制蛋白沉淀工作液:取 1 瓶蛋白沉淀剂,直接加入蒸馏水至 100ml,充分混匀,即 为蛋白沉淀工作液。4℃避光保存,1 周有效。该试剂有一定腐蚀性,请小心操作。
2、 配制空白对照液:取配制好的蛋白沉淀工作液 1ml 加入 0.67ml 蒸馏水,混匀,即为空 白对照液。4℃避光保存,1 周有效。
参考区间:
空腹静脉血
0.03~0.1mmol/L
注意事项:
1、 配制好的 NADH solution,4℃保存,24h 有效。 2、 如果没有分光光度计,也可以使用酶标仪测定。 3、 抗凝剂用肝素钠-氟化钠较好。抗凝血样品置于冰浴中送检,尽快分离出血浆等。 4、 草酸抗凝剂对 LDH 有一定的抑制作用。 5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
4、 制备无蛋白上清液:静置 20min 以上,离心,取上清液(即无蛋白上清液)待用。上清 液应澄清,如果浑浊,转移上清液至一干净试管或离心管后,再次离心。
有效期:6 个月有效。
编号 CC0007
名称 磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)
ห้องสมุดไป่ตู้
北京雷根生物技术有限公司
CS0001 DC0032 DF0135 NR0001 PS0013 PW0082
ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) Masson 三色染色液 多聚甲醛溶液(4% PFA) DEPC 处理水(0.1%) RIPA 裂解液(强) 丽春红 S 染色液(1×Ponceau S)
计算: 全血丙酮酸(mmol/L)={(ΔA 测定−ΔA 空白)/(ΔA 标准−ΔA 空白}×0.05×D
也可根据 NADH 毫摩尔吸光度计算: 全血丙酮酸(mmol/L)=(ΔA 测定−ΔA 空白)×(1.56/6.22)×(D/1.0)
换算公式:丙酮酸(mg/dl)=丙酮酸(mmol/L)×8.8
存 48h 有效
试剂(D): LDH solution
0.6ml -20℃ 避光
使用说明书
1份
操作步骤(仅供参考):
1、 配制蛋白沉淀工作液:取 1 瓶蛋白沉淀剂,直接加入蒸馏水至 100ml,充分混匀,即 为蛋白沉淀工作液。4℃避光保存,1 周有效。该试剂有一定腐蚀性,请小心操作。
2、 配制空白对照液:取配制好的蛋白沉淀工作液 1ml 加入 0.67ml 蒸馏水,混匀,即为空 白对照液。4℃避光保存,1 周有效。
—
—
丙酮酸标准(1mmol/L)
—
167
—
无蛋白上清液
—
—
167
NADH solution
89
89
89
充分混匀,蒸馏水调零,于 340nm 处读取各管吸光度,分别
为 A 空白 1、A 标准 1、A 测定 1。
LDH solution
5
5
5
6、PA 检测:充分混匀,分光光度计检测的 340nm 吸光度,比色杯光径 1.0cm,室温孵 育 2min 后再读取各管吸光度,此后每隔 1min 读 1 次吸光度,直至读数稳定,分别为 A 空 白 2、A 标准 2、A 测定 2。
组成:
名称
编号
TC0757 100T
Storage
试剂(A): 丙酮酸标准(100mmol/L)
1ml
4℃ 避光
试剂(B): 蛋白沉淀剂
6瓶
RT 避光
试剂(C):
C1: NADH
2 支 -20℃ 避光
NADH solution
C2: NADH buffer
3ml
RT
按 C1:C2=1 支:1ml 的比例充分混合,即为 C1C2 液,4℃避光保
5、 加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免 产生气泡。如果样品中的 PA 浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
北京雷根生物技术有限公司
样品的检测最好能设置平行管。
加入物(μl)
空白管 标准管 测定管
空白对照液
167
北京雷根生物技术有限公司
全血丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)
简介:
全血丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)其检测原理是在 NADH 存在条件下,乳酸 脱氢酶(LDH)催化丙酮酸生成乳酸,同时生成 NAD+。在弱碱性条件下平衡偏向丙酮酸氧化 为乳酸的方向,驱动反应完成。通过分光光度比色法(分光光度计或自动分析仪)测定 340nm 处吸光度的下降速率,据此通过比色分析就可以计算出 PA 水平。该试剂盒可用于检测全血 血浆样品中内源性的丙酮酸含量。该试剂盒仅用于科研领域,丌宜用于临床诊断或其他用 途。
参考区间:
空腹静脉血
0.03~0.1mmol/L
注意事项:
1、 配制好的 NADH solution,4℃保存,24h 有效。 2、 如果没有分光光度计,也可以使用酶标仪测定。 3、 抗凝剂用肝素钠-氟化钠较好。抗凝血样品置于冰浴中送检,尽快分离出血浆等。 4、 草酸抗凝剂对 LDH 有一定的抑制作用。 5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。