五日生化需氧量的测定
五日生化需氧量(BOD5)的测定
五日生化需氧量（BOD 5）的测定1.用BOD 营养盐缓冲剂粉枕包2.选择样品体积。
详见样品容量3.用移液管轻轻搅匀样品。
向第4.向另一个BOD 瓶中加入稀释水。
这瓶就是稀释水空白。
准备稀释水。
详见稀释水准备。
选择。
一个BOD 瓶中加入最小采样量 注：如果最小采样量在3mL 左 的样品。
右，不需稀释直接测溶解氧。
再向另外4个BOD 瓶中加入不当测生活污水或沉降后的污水 同体积的样品。
做好标记，并等溶解氧浓度约为0mg/L 的样记录下每瓶水样的体积。
品时，这一步可以省略。
5.如果测试CBOD ，向每个瓶中6.向每个瓶中倒稀释水至瓶口7.小心地盖上瓶塞防止气泡。
按8.测试每个瓶中最初的溶解氧浓度。
使用电极、仪器或滴定 法。
若使用滴定法则需准备2套BOD 瓶。
记得测量稀释水空白的溶解氧 浓度。
加入2管硝化抑制剂（约 边缘，沿着瓶壁倒入以防产生 住瓶塞并上下颠倒瓶子数次以 0.16g ）。
阻止氮化合物的氧化， 气泡。
混匀液体。
结果是CBOD 。
9.小心地盖上瓶塞防止气泡。
10.在每个BOD 瓶上置一个塑 料盖。
将BOD 瓶置于20（±1）°C 的培养箱内培养5天。
11.5天后测每瓶中剩余溶解氧 12.计算BOD 值。
（详见计算方法——标准方法） 向每个 BOD 瓶内倒入稀释水作的浓度。
每瓶中剩余溶解氧的浓度至少 为水封。
应为1.0mg/L 。
稀释水准备•为了得到最好的结果，使用经过碱性高锰酸盐蒸馏的水。
•不要使用经离子交换柱所得的去离子水。
柱中的树脂(尤其是新柱)有时会释放有需氧量的有机物。
另外，细菌会在柱中滋生污染稀释水。
•在20°C条件下将蒸馏水储存在干净的容器里并放在培养箱中。
向容器中倒入蒸馏水至3/4体积，并摇晃容器使得空气进入水中饱和，或者较松地盖住容器并放置 24 小时或更久，以使氧气溶解。
•使用小型玻璃抽水泵或者气体压缩机使水中的空气饱和。
确保空气是经无菌过滤器过滤的。
五日生化需氧量(BOD5)的测定
五日生化需氧量(BOD5)的测定日生五需化量(氧od5)的测b定、实验目一的掌生活握污或工业水废水日五生需化量氧测的。
定二、实验原理生化氧需是指量在好氧件条下微生，物分解中的水机物有生物化的过程学中消所耗解溶氧的量此生化。
全程进过行时的间很，如在长02下℃养，培完此过成程1需00多。
天目国前外内都采20℃用养培天五为检验作标指，为五称生日需氧量(化od5b。
)分测别样品定培前养的溶解后氧二者之，差即为odb值，以氧5的g/l表示m 。
水样稀用释稀释，水定合确的倍数非适重常。
稀要释数倍大或太太，小五则培天养后余剩的溶解太氧多或太，甚至为少零都，不得能可到的靠果结。
释的稀程应使五天培养度中消耗所溶解的氧大2m于g/l而剩余,溶解氧在1g/l以上。
m此在前提件下，稀条释倍可数估以算，也可依据经验以法来值确定对于不。
含或含少生微的物水，废测在bod定时应进5行接种。
三实、验仪培器箱，大养玻瓶璃1，000m量筒，blo培养瓶d各，规的格(胖、肚刻)度液移管等。
、四实验试剂除测定溶解所需氧试的外，还需剂列下试剂：化钙溶液氯三，氯化溶铁，液酸镁溶硫液，酸盐磷缓冲溶液。
等、实验五骤1.步2.3.稀释的配制水使蒸：水的馏解氧为2溶℃0的时饱和解溶氧在这含有饱，和溶氧蒸解水中馏，每00lm0加入l上述种四液各溶1l。
m测定水的c污odn值或cdr。
值调节水ph值至样中性。
样水培液养配制的：()1据根得测的cod值计出算释稀数倍，一般时同3~做4种释稀倍。
数2)(用即吸虹把一些先释水引稀入1000lm量的中(约所需体积的筒1/)，3用再液移管吸所需取水的体积样，加量筒入。
移取中样水3()稀用释水释到所稀需的积体注意（本次：验实稀释的总体积为700m所），小心摇l匀将，配此的好样用虹吸法水入引带号编的2培个瓶养中，至全完充，满好盖盖，水子封。
此为一种稀第释倍的数培液(在养整操作个过程应免产生避气泡。
其)的几种余释稀倍数养液培，亦按法上作操。
五日生化需氧量的测定
实验七五日生化需氧量的测定生化需氧量(BOD)是指在规定的条件下，微生物分解水中某些可氧化物质(主要是有机物)的生物化学过程中消耗溶解氧的量，用以间接表示水中可被微生物降解的有机类物质的含量，是反映有机物污染的重要类别指标之一。
测定BOD 的方法有稀释接种法、微生物传感器法、活性污泥曝气降解法、库仑滴定法、测压法等。
本实验采用稀释接种法测定污水的BOD。
该方法也称五天培养法(BOD5)，即取一定量水样或稀释水样，在20℃±1℃培养五天，分别测定水样培养前、后的溶解氧，二者之差为BOD5值，以氧的mg/L表示，其相关内容参阅教材第二章第五节。
一、实验目的和要求1．掌握用稀释接种法测定BOD5的基本原理和操作技能。
2．复习第二章第五节中的相关内容，提出为保证测定准确度，应当控制好哪些条件。
二、仪器1．恒温培养箱。
2．5～20L细口玻璃瓶。
3．1000～2000mL量筒。
4．玻璃搅拌棒：棒长应比所用量筒高度长200mm，棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并有几个小孔的硬橡胶板。
5．溶解氧瓶：200～300mL，带有磨口玻璃塞，并具有供水封用的钟形口。
6．虹吸管：供分取水样和添加稀释水用。
三、试剂1．磷酸盐缓冲溶液：将8.58磷酸二氢钾(KH2PO4)，2. 75g磷酸氢二钾(K 2HPO4)，33.4g磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)和1.7g氯化铵(NH4C1)溶于水中，稀释至1000mL。
此溶液的pH 应为7.2。
2．硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁(MgSO4·7H2O)溶于水中，稀释至1000mL。
3．氯化钙溶液；将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释至1000mL。
4，氯化铁溶液；将0.25g氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水，稀释至1000mL。
5．盐酸溶液(0.5mol/L)：将40mL(ρ=1.18g/mL)盐酸溶于水，稀释至1000mL。
6．氢氧化钠溶液(0.5mol/L)：将20g氢氧化钠溶于水，稀释至1000mL。
实验五日生化需氧量的测定
1、记录与计算 a. 将每种水样测定结果及时记录在表1中。 b. 按下式计算五日生化需氧量
BOD 5 ( D1 D2 ) ( D3 D4 ) f1 f2
式中：BOD5－五日生化需氧量mg/L； D1 －样品在培养前的溶解氧mg/L； D2－样品 在培养后的溶解氧mg/L； D3－稀释水在培 养前的溶解氧mg/L；D －稀释水在培养后的 V4 V 溶解，mg/L； f1= V V ，f2= V V ，其中 V3为稀释水的体积（mL），V4为水样的体积 （mL）。
2．试剂 氯化钙溶液（27.5g/L）：溶解27.5gCaCl2于水中 稀释至1L。 三氯化铁溶液（0.25g/L）：溶解 0.25gFeCl3· 6H2O于水中，稀释至1L。 硫酸镁溶液（22.5g/L）：溶液 22.5MgSO4· 7H2O于水中，稀释至1L。 磷酸盐缓冲溶液（pH=7.2）：溶解8.5g KH2PO4, 21.75g K2HPO4, 33.4g Na2HPO4· 7H2O和 1.7g NH4Cl于约500mL水中，稀释至1L。 测定DO和CODMn所需试剂。
3
4
3
4
3
4
4．BOD2（二日生化需氧量）的测定与BOD5一 样，只是培养温度为30℃，培养时间为二天。 BOD2与BOD5之间换算有一关系式：
BOD
20 5
1.171 BOD
30 2
（二）CODMn的测定
方法原理： 在碱性加热条件下，用已知量并且是过量的 高锰酸钾，氧化海水中的需氧物质，然后在硫酸 酸性条件下，用碘化钾还原过量的高锰酸钾和二 氧化锰，所生成的游离碘用硫代硫酸钠标准溶液 滴定。
(3)
对特定海区水流流速是可测值，因此可并入 常数项，即令K1=k1/V，则（3）式可改写成：
五日生化需氧量的测定
实验七五日生化需氧量的测定生化需氧量(BOD)是指在规定的条件下，微生物分解水中某些可氧化物质(主要是有机物)的生物化学过程中消耗溶解氧的量，用以间接表示水中可被微生物降解的有机类物质的含量，是反映有机物污染的重要类别指标之一。
测定BOD 的方法有稀释接种法、微生物传感器法、活性污泥曝气降解法、库仑滴定法、测压法等。
本实验采用稀释接种法测定污水的BOD。
该方法也称五天培养法(BOD5)，即取一定量水样或稀释水样，在20℃±1℃培养五天，分别测定水样培养前、后的溶解氧，二者之差为BOD5值，以氧的mg/L表示，其相关容参阅教材第二章第五节。
一、实验目的和要求1．掌握用稀释接种法测定BOD5的基本原理和操作技能。
2．复习第二章第五节中的相关容，提出为保证测定准确度，应当控制好哪些条件。
二、仪器1．恒温培养箱。
2．5～20L细口玻璃瓶。
3．1000～2000mL量筒。
4．玻璃搅拌棒：棒长应比所用量筒高度长200mm，棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并有几个小孔的硬橡胶板。
5．溶解氧瓶：200～300mL，带有磨口玻璃塞，并具有供水封用的钟形口。
6．虹吸管：供分取水样和添加稀释水用。
三、试剂1．磷酸盐缓冲溶液：将8.58磷酸二氢钾(KH2PO4)，2. 75g磷酸氢二钾(K2HPO4)，33.4g磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)和1.7g氯化铵(NH4C1)溶于水中，稀释至1000mL。
此溶液的pH 应为7.2。
2．硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁(MgSO4·7H2O)溶于水中，稀释至1000mL。
3．氯化钙溶液；将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释至1000mL。
4，氯化铁溶液；将0.25g氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水，稀释至1000mL。
5．盐酸溶液(0.5mol/L)：将40mL(ρ=1.18g/mL)盐酸溶于水，稀释至1000mL。
6．氢氧化钠溶液(0.5mol/L)：将20g氢氧化钠溶于水，稀释至1000mL。
五日生化需氧量的测定分析
2.5.2
抑制硝化作用 水中有机物的生物氧化过程可分为两 个阶段，第一阶段主要是碳氢化合物被氧化， 称为碳化阶段，在20℃下约需20d才能完成， BOD测定的一般是该阶段的耗氧量。第二 阶段是含氮化合物及部分氨氧化为亚硝酸盐 及硝酸盐，称为硝化阶段，在20℃约需 100d 。对一般水样，测定BOD5时的硝化作 用并不显著。但对于生化处理的出水，因其 含有大量的硝化细菌，在测定BOD5时也包 括了部分含氮化合物的需氧量，因此需要加 入硝化抑制剂，抑制硝化作用对BOD5测定 的影响。可在每升稀释水样中加入2ml浓度 为500mg /L的丙烯基硫脲。
由高锰酸盐指数与一定的系数的乘积 求得的稀释倍数
高锰酸盐指数（mg/L）
＜5 5-10
系数
0.2 0.3
高锰酸盐指数（mg/L）
10-20 ＞20
系数
0.4、0.6 0.5、0.7、1.0
对地表水稀释倍数的确定，也同样如此。比如， 高锰酸盐指数的浓度为5-10mg/L之间时，我们可 以在系数0.2-0.3之间，再增加0.22，0.25，0.28等 几个系数。
2. 稀释接种法测定BOD5时需注意的问题
2.1 样品的采集及保存 采集样品时应充满并密封于瓶中，在0-4℃ 条件下进行保存，一般应在6h内进行分析。 若需要远距离转运，在任何情况下，贮存时 间不应超过24h。 2.2 时间的影响 样品中的BOD5浓度易随时间的变化而变化， 样品储存时间、测定过程时间和培养时间均 会对测定结果产生影响。这就要求我们在进 行BOD5的测定时需要严格控制培养时间和 样品储存时间。
上清液的接种量，按水样的性质确定。 啤酒厂： 接种量一般以7-8ml/L水为宜。 印染废水：上清液2ml/L,再加入7ml/L驯化接种液。 葡萄糖谷氨酸标准溶液：接种量一般以2-3ml/L水 为宜。
化验室测定水质五日生化需氧量操作规程
化验室测定水质五日生化需氧量操作规程一、实验目的测定水样的五日生化需氧量（BOD5），了解水样的有机物污染程度。
二、实验原理五日生化需氧量（BOD5）是指一定温度下，在条件适宜的细菌作用下，有机物被生物氧化所需的氧量。
实验中，将水样与添加细菌的琼脂糖培养液混合并置于恒温器内，五天后再测定混合液中的溶解氧浓度，根据溶解氧浓度差计算得到水样的BOD5值。
三、实验仪器和试剂1.恒温器：可控制温度为20±1℃。
2.恒温水浴槽：用于调节实验所需恒定温度。
3.溶解氧电极：用于测量水样中溶解氧浓度。
4.密封玻璃瓶：容量为300mL，用于混合水样和琼脂糖培养液。
5.搅拌器：用于溶解氧的均匀分布。
6.pH计：用于测量水样的酸碱度。
7.琼脂糖培养液：配制培养细菌的营养液。
四、实验步骤1.准备实验设备并调节恒定温度为20±1℃。
2.选取适当的密封玻璃瓶，并清洗干净。
3.取300mL水样并过滤，以去除不溶物。
4.在过滤的水样中测量初始溶解氧浓度，并记录。
5.在密封玻璃瓶中加入200mL过滤的水样和100mL琼脂糖培养液。
6.用搅拌器均匀混合水样和琼脂糖培养液。
7.将密封玻璃瓶置于恒温器内，保持20±1℃的温度。
8.在五天后取出密封玻璃瓶，使用溶解氧电极测量溶解氧浓度。
9.计算BOD5值：BOD5=初始溶解氧浓度-五天后溶解氧浓度。
五、实验注意事项1.实验环境应保持清洁，避免外界有机物污染。
2.水样和琼脂糖培养液的配制要准确，避免对实验结果产生干扰。
3.实验过程中应严格控制温度，以确保实验条件一致。
4.混合水样和琼脂糖培养液时要充分搅拌，确保溶解氧均匀分布。
5.溶解氧电极的使用要准确、标定和校准，以获得准确的溶解氧浓度值。
6.实验过程中应注意个人安全，避免接触有害物质。
六、实验结果记录和分析1.记录水样的初始溶解氧浓度和五天后的溶解氧浓度。
2.计算水样的BOD5值，并用于分析水样的有机物污染情况。
五日生化需氧量(BOD5)的测定
• 在已知两个容积相同（其差<1mL）的溶解氧 瓶内，用虹吸法加入部分稀释水（或接种稀 释水）；
• 再加入根据瓶容积和稀释比例计算出的水样 量；
• 然后用稀释水（或接种稀释水）使之刚好充 满后加塞。
• 注意不要将气泡留在瓶内。
直接稀释法实验步骤
根据 CODcr 值确 定稀 释倍 数
(NH4Cl)溶于水中，稀释至1000mL。此 溶液的pH应为7.2。
试剂
名称 氯化钙溶液 氯化铁溶液
(1+5)硫酸溶液
配制方法及浓度 将27.5g无水氯化钙溶于水， 稀释至1000mL。
将0.25g六水合氯化铁 （Fe3Cl ·6H2O）溶于水，稀 释至1000mL。
实验步骤
1. 水样预处理 2. 不稀释水样的测定 3．需经稀释水样的测定 4. 溶解氧(DO)的测定 5. BOD5测定结果计算 6. 硫代硫酸钠溶液标定 7．一般稀释水制备 8． 接种稀释液制备
调整 被测 水样 的pH
直接 稀释 法采 集稀 释水 2瓶
1瓶测溶解氧 1瓶放入培养箱
溶解氧(DO)的测定(碘量法)
• 用溶解氧瓶虹吸法采集2瓶空白水样；
• 用溶解氧瓶虹吸法采集2瓶被测水样， 分别测定当天的溶解氧和培养5天后的 溶解氧。
溶解氧的固定
虹吸法采集 水样转移到 溶解氧瓶
将移液管插
入液面下加 入1ml硫酸锰 溶液
0.02500mol/L。
试剂
名称
配制方法及浓度
氢氧化 将20g氢氧化钠溶于水,稀释至 钠溶液 1000 mL,浓度为0.5mol/L。
硫酸镁 将22.5g七水合硫酸镁(MgSO4.7H2O)溶 溶液 于水中，稀释至1000mL。
水中五日生化需氧量BOD5的测定
水中五日生化需氧量(BOD5)的测定水中五日生化需氧量（BOD5）的测定一、实验目的1.了解水中有机物污染的重要指标之一——五日生化需氧量的概念和意义。
2.掌握BOD5测定的基本原理和方法，熟悉实验操作流程。
3.学会使用稀释接种法进行BOD5的测定，掌握实验技巧和注意事项。
二、实验原理五日生化需氧量（BOD5）是指在一定条件下，水中有机物在微生物作用下进行生物化学反应所消耗的溶解氧量。
BOD5是反映水体有机物污染的重要指标，也是水环境监测中的重要参数。
BOD5的测定采用稀释接种法。
该方法是将水样进行稀释，然后接种到培养瓶中，在恒温条件下培养5天，然后测定培养前后水样中溶解氧的差值，从而计算出BOD5值。
三、实验步骤1.采样：选择有代表性的水样，用干净的玻璃瓶采集，避免污染。
采集的水样应具有代表性，且应满足实验所需的最低浓度要求。
2.稀释：将采集的水样用去离子水或蒸馏水稀释至适当的浓度，以便接种到培养瓶中。
稀释倍数应根据水样的BOD5值和实验要求确定。
3.接种：将稀释后的水样分别接种到含有适量营养盐的培养瓶中，每个浓度至少接种3个培养瓶。
接种时，应将培养瓶放入恒温器中，在20℃±1℃的条件下培养5天。
4.测定溶解氧：在培养前后分别测定每个培养瓶中溶解氧的含量。
可使用溶解氧仪或碘量法进行测定。
5.数据处理：根据培养前后溶解氧的差值和稀释倍数，计算出BOD5值。
可按照以下公式进行计算：BOD5 = (ΔDO/Δt) × (V/V0) × 1000其中，ΔDO/Δt为培养期间溶解氧的变化速率，V为接种的培养瓶体积，V0为原始水样的体积。
四、实验结果与分析1.结果记录：将实验测定的BOD5值记录在表格中，包括稀释倍数、培养前后溶解氧含量、BOD5值等。
2.结果分析：根据实验数据，分析水中有机物污染程度，比较不同稀释倍数下的BOD5值，探讨稀释倍数对BOD5测定的影响。
同时，还可以将实验结果与标准值进行比较，评估实验的准确性。
水质五日生化需氧量（BOD5）的测定
水质五日生化需氧量（BOD5）的测定中华人民共和国国家环境保护标准HJ 505—2009代替GB/T 7488-1987水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法警告：丙烯基硫脲属于有毒化合物，操作时应按规定要求佩带防护器具，避免接触皮肤和衣服；标准溶液的配制应在通风柜内进行操作；检测后的残渣残液应做妥善的安全处理。
1 适用范围本标准规定了测定水中五日生化需氧量（BOD5）的稀释与接种的方法。
本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD5）的测定。
方法的检出限为0.5mg/L，方法的测定下限为2mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000mg/L。
2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。
凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 7489 水质溶解氧的测定碘量法GB/T 11913 水质溶解氧的测定电化学探头法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范3 方法原理生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。
通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h 或(2+5)d±4h(先在0～4℃的暗处培养2d，接着在(20±1)℃的暗处培养5d，即培养(2+5)d)，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5 形式表示。
若样品中的有机物含量较多，BOD5 的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定；对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化处理等的废水，在测定BOD5 时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。
五日生化需氧量的测定方法
五日生化需氧量的测定方法五日生化需氧量（BOD5）是一种常用的水质指标，用于评估水体中有机物的分解能力和水体的自净能力。
BOD5是指在特定条件下，水体中有机物被微生物降解所需的氧气量。
本文将介绍BOD5的测定方法及其原理。
BOD5的测定方法通常分为两种，即标准方法和快速测定法。
标准方法是指根据国际标准化组织（ISO）和美国环境保护署（EPA）等机构制定的标准方法进行测定。
而快速测定法是指利用生化仪器和生化传感器等现代技术，通过测量氧气的溶解量来快速测定BOD5。
标准方法的测定步骤如下：1. 取一定量的水样，通常为300毫升到1000毫升，然后用滤纸过滤去除悬浮物和颗粒物。
2. 将过滤后的水样分装到容器中，加入适量的培养液，培养液的主要成分为硫酸铵、硫酸钾和磷酸二氢钾等。
3. 在恒温条件下（通常为20℃），培养一定时间，一般为5天。
4. 在培养结束后，测定水样中的溶解氧量。
可以使用溶解氧仪或电极进行测定。
5. 计算BOD5的值，通常使用以下公式：BOD5 = (溶解氧初始浓度 - 溶解氧终浓度) × 8快速测定法是利用现代仪器设备测量水体中溶解氧的变化来快速测定BOD5。
这种方法主要有两种常用的测定仪器，即生化仪器和生化传感器。
1. 生化仪器是通过测量水样中氧气的溶解量来计算BOD5的值。
它通常由氧气电极、温度控制装置和数据处理系统组成。
在测定过程中，仪器会不断记录溶解氧的变化，并根据溶解氧的消耗速率计算BOD5的值。
2. 生化传感器是一种小型化的传感器，可以直接浸入水样中进行测量。
它通过测量水样中微生物代谢产生的电流来快速测定BOD5的值。
这种方法具有灵敏度高、响应快的特点，但需要事先进行校准和标定。
无论使用哪种方法，BOD5的测定都需要注意以下几点：1. 保持水样的原样性，避免在取样和处理过程中引入新的有机污染物。
2. 控制测定条件，如温度、pH值和光照等，以确保测定结果的准确性和可比性。
五日生化需氧量的测定
实验七五日生化需氧量的测定生化需氧量(BＯD)就是指在规定的条件下,微生物分解水中某些可氧化物质(主要就是有机物)的生物化学过程中消耗溶解氧的量,用以间接表示水中可被微生物降解的有机类物质的含量,就是反映有机物污染的重要类别指标之一。
测定BOＤ的方法有稀释接种法、微生物传感器法、活性污泥曝气降解法、库仑滴定法、测压法等。
本实验采用稀释接种法测定污水的BOＤ。
该方法也称五天培养法(ＢＯD５),即取一定量水样或稀释水样,在20℃±1℃培养五天,分别测定水样培养前、后的溶解氧,二者之差为BOD5值,以氧的mg/L表示,其相关内容参阅教材第二章第五节。
一、实验目的与要求1.掌握用稀释接种法测定ＢOD5的基本原理与操作技能。
２.复习第二章第五节中的相关内容,提出为保证测定准确度,应当控制好哪些条件。
二、仪器1.恒温培养箱。
2、5～20L细口玻璃瓶。
３.1０00～2０00mL量筒。
4.玻璃搅拌棒:棒长应比所用量筒高度长２０0mm,棒的底端固定一个直径比量筒直径略小,并有几个小孔的硬橡胶板。
5、溶解氧瓶:２00～3０0ｍＬ,带有磨口玻璃塞,并具有供水封用的钟形口。
6、虹吸管:供分取水样与添加稀释水用。
三、试剂1.磷酸盐缓冲溶液:将8.５8磷酸二氢钾(KH2ＰO4),２、7５g磷酸氢二钾(K 2HPＯ4),33.4g磷酸氢二钠(Na2HPO４·7H２Ｏ)与1.7ｇ氯化铵(NH4C1)溶于水中,稀释至1０00mL。
此溶液的pH 应为7、2。
2、硫酸镁溶液:将22.5ｇ硫酸镁(ＭｇSO４·７H2O)溶于水中,稀释至100０mL。
3、氯化钙溶液;将2７．5g无水氯化钙溶于水,稀释至1000mＬ。
4,氯化铁溶液;将0.２5g氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水,稀释至１００0mL。
5.盐酸溶液(0、5ｍol／Ｌ):将40mL(ρ=1.１8g/mＬ)盐酸溶于水,稀释至１0０0ｍL。
五日生化需氧量的测定
2.3. 温度的影响 温度与微生物的增长速率相关，直接影响 微生物的生长繁殖，进而影响BOD5的测定结 果。另外，温度的变化还会引起溶解氧的变 化。因此，应严格控制采样温度、样品储存 (chǔcún)温度、实验室温度及培养箱温度。
2.4 pH值的影响 水样的pH若超出6.5-7.5范围时，应加酸或碱 调节至此范围；稀释水和接种稀释水的pH值 应为7.2。
接种量一般以23mll水当废水中存在着难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时在其排污口的下游38km处取水样做为废水的驯化接种液同时加入适量表层土壤或生活污水使能适应该种废水的微生物大量繁殖
五日生化(shēnɡ huà)需氧量的 测定
稀释接种法
1.方法原理： 生化需氧量是指在规定(guīdìng)条件
精品资料
2.5.2 抑制硝化作用 水中有机物的生物氧化过程可分为两个阶段，
第一阶段主要是碳氢化合物被氧化，称为碳化阶段， 在20℃下约需20d才能完成，BOD测定(cèdìng)的 一般是该阶段的耗氧量。第二阶段是含氮化合物及 部分氨氧化为亚硝酸盐及硝酸盐，称为硝化阶段， 在20℃约需100d 。对一般水样，测定 (cèdìng)BOD5时的硝化作用并不显著。但对于生 化处理的出水，因其含有大量的硝化细菌，在测定 (cèdìng)BOD5时也包括了部分含氮化合物的需氧 量，因此需要加入硝化抑制剂，抑制硝化作用对 BOD5测定(cèdìng)的影响。可在每升稀释水样中 加入2ml浓度为500mg /L的丙烯基硫脲。
为宜。
精品资料
当废水中存在着难于被一Байду номын сангаас生活污水中的 微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物 质时，在其排污口的下游3-8km处取水样做为 废水的驯化接种液，同时加入适量表层 (biǎocéng)土壤或生活污水，使能适应该种废 水的微生物大量繁殖。
五日生化需氧量(BOD5)的测定
混匀搅拌及赶走气泡
虹吸装瓶
送去培养
六、计 算
1. 采用“水质法”计算BOD5值
BOD5(O2,mg/L)＝
(D1 − D2 ) − (B1 − B2 ) × f1 f2
2. 采用“标准法”计算BOD5值
(未接种时)BOD5(O2,mg/L)＝
D1 − D2 f2
个培养瓶中，至完全充满，盖好盖子，水封。此为第一种稀释倍 数的培养液(在整个操作过程应避免产生气泡)。其余的几种稀释 倍数培养液，亦按上法操作。
4. 用培养瓶装两瓶稀释水作为空白培养。
5. 检查瓶子的编号，每一种稀释倍数中取一瓶及一瓶空白 液测当天溶解氧，其余各瓶水封后送入20℃培养箱中培 养5d。3. 数据记录稀释 倍数(n)
取样量 ｍＬ
测定 时间
滴定前 mL
滴定后 mL
滴定数 mL
空白
当天 /
五天
当天
五天
当天
五天
当天
五天 平均值
ΔＤO mg/L
BOD5mg/L 水质法 标准法
/
/
七、注意事项
1. 在配稀释水时应用含20℃时的饱和氧浓度的蒸馏水进行 配制，同时也需注意营养盐及菌种。
2. 配制培养液时，在混匀搅拌的同时赶走空气泡，并用虹 吸管进行装瓶。
水样用稀释水稀释，确定合适的倍数非常重要。稀释倍 数太大或太小，则五天培养后剩余的溶解氧太多或太少，甚 至为零，都不能得到可靠的结果。稀释的程度应使五天培养 中所消耗的溶解氧大于2mg/L,而剩余溶解氧在1mg/L以上。 在此前提条件下，稀释倍数可以估算，也可以依据经验值法 来确定。
对于不含或少含微生物的废水，在测定BOD5时应进行 接种。
五日生化需氧量的测定实验报告
五日生化需氧量的测定实验报告一、实验目的1.了解需氧量测定实验的基本原理和方法。
3.通过实验分析水样中生物氧需求的多少。
二、仪器与试剂1.生化需氧量测定仪；2.分光光度计；3.溶液：硫酸钾(K2Cr2O7)、银硫酸钠(Na2SO3)、硫酸铵(NH4)2SO4、氢氧化钠(NaOH)。
三、实验原理生化需氧量指的是指水中溶解有机物质在微生物的作用下被分解氧需氧气量的大小。
在水中，有机物质是通过微生物的作用分解为CO2和H2O等无机物质的，这个过程同时需要消耗氧气，也就增加了水体中的生化需氧量。
在实验室中，我们通过将样品与硫酸钾进行加热反应，将样品中的有机物质化成无机物质，消耗氧气的量就是样品中的生化氧需氧量。
态度这个实验需要先将溶液标定，以此作为参考。
四、实验步骤1.样品的准备。
取一定量的水样，将其过滤并去除泡沫和浮物。
样品中杂质过多会影响到溶液反应的准确性。
2.样品的消解。
取固定量的样品溶于一定量的硫酸钾中，并进行加热消解，以促使样品完全消解。
如需助溶，可以加入硫酸铵和氢氧化钠使其溶解。
3.样品的稀释。
将反应结束后的样品颜色稀释到原来的一半，使之成为一半深度。
4.生化需氧量的观测。
将稀释后的样品在实验装置中加入银硫酸钠(Na2SO3)的减少剂，样品中的铬酸根离子(Cr2O7)就会还原为三价铬离子(Cr3+)，同时，银离子与铬离子形成配合物(Ag2CrO4)，而这个配合物的颜色越深，说明样品中的铬酸根离子越多，也就说明水中的生化氧需氧量越高，颜色的深浅可以用分光光度计进行测定。
将上述的各个步骤和试剂全部加入到生化需氧量测定仪中进行反应，计算出生化需氧量。
五、实验结果与分析实验中我们分别测试了五个不同水样的生化需氧量。
我们使用分光光度计测量出生化需氧量的值，然后计算出每升水中的含氧量。
实验结果如下：|样品编号|生化需氧量||:-:|:-:||1|4.5mg/L||2|9.1mg/L||3|10.3mg/L||4|12.2mg/L||5|14.0mg/L|通过分析结果我们可以发现，每个水样的生化需氧量不同，样品5的生化需氧量最高，说明这个水样中的有机物质含量比其他水样高。
五日生化需氧量
五日生化需氧量（BOD5）测定稀释与接种法1、原理：将水样注满培养瓶，塞好后应不透气，将瓶颈置于恒温条件下培养5天。
培养前后分别测定溶解氧的浓度，由两者之差可算出每升水消耗掉氧的质量。
即BOD5值。
由于多数水样中含有较多的需氧氧物质，其需氧量往往超过水中可利用的溶解氧（DO）量，因此在培养前，需对水样进行稀释，使培养后剩余的溶解氧符合规定。
（本方法适用于测定BOD5≥2mg/L 最大不超过6000mg/L的水样）2、仪器：培养瓶、培养箱（能控制在20±1℃）、测定溶解氧仪。
（所有玻璃器皿均需消毒并防止沾污）3、试剂：分析时，只采用用公认的分析纯试剂和蒸馏水或同等纯度的水（全玻璃装置中蒸馏的水或去离子水）水中含铜不应高于0.01mg/L，并不应有氯、氯胺、苛性碱、有机物和酸类。
（1）盐溶液：下述溶液至少可稳定一个月,应贮存在玻璃瓶内,置于暗处。
一旦发现有生物滋长迹象,则应弃去不用。
A：磷酸盐缓冲溶液：将8.5克磷酸二氢钾、21.75克磷酸氢二钾、33.4克七水磷酸氢二钠和1.7克氯化铵溶于约500ml水中,稀释至1000ml并混合均匀。
此缓冲溶液的PH应为7.2。
B：22.5g/L硫酸镁溶液：将22.5g七水硫酸镁溶于水，稀释至1L。
C：27.5g/L氯化钙溶液：将27.5g无水氯化钙溶于水稀释至1L。
(若用水合氯化钙,要取相当的量)D：0.25g/L氯化铁溶液：将0.25g六水氯化铁溶于水，稀释至1L。
（2）接种水：污水处理厂出水。
（3）稀释水：取每种盐溶液1ml,加入约500ml水中,然后稀释至1000ml并混匀,将此溶液置于20℃下恒温,曝气1h以上,采取各种措施,使其不受污染,特别是不被有机物质、氧化或还原性物质或金属污染,确保溶解氧浓度不低于8mg/L。
此溶液的5日生化需氧量不得超过0.2mg/L。
此溶液应在8小时内使用。
（4）接种的稀释水：根据需要和接种水的来源，向每升稀释水中加1.0-5.0 ml接种水,接种的稀释水pH应为7.2，BOD5值以在0.3～1.0mg/L之间。
五日生化需氧量的测定方法
五日生化需氧量的测定方法一、原理生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在于水中的某些可氧化物质，主要是有机物质所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。
分别测定水样培养前的溶解氧含量和在20±1℃培养五天后的溶解氧含量，二者之差即为五日生化过程所消耗的氧量（BOD5）。
二、仪器1．恒温培养箱。
2．5-20L细口玻璃瓶。
3．1000-2000mL量筒。
4．玻璃搅棒：棒长应比所用量筒高度长20cm。
在棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并带有几个小孔的硬橡胶板。
5．溶解氧瓶：200-300mL，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。
6．虹吸管：供分取水样和添加稀释水用。
三、试剂1．磷酸盐缓冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4），21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4），33.4g磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）和1.7g 氯化铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至1000mL。
此溶液的pH应为7.2。
2．硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至1000mL。
3．氯化钙溶液：将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释至1000mL。
4．氯化铁溶液：将0.25g氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于水，稀释至1000mL。
5．盐酸溶液（0.5mol/L）:将40mL（ρ=1.18g/mL）盐酸溶于水中，稀释至100mL。
6．氢氧化钠溶液（0.5mol/L）：将20g氢氧化钠溶于水，稀释至1000mL。
7．亚硫酸钠溶液（c1/2Na2SO3=0.025mol/L）：将1.575g亚硫酸钠溶于水，稀释至1000mL。
此溶液不稳定，需每天配制。
8．葡萄糖-谷氨酸标准溶液：将葡萄糖（C6H12O6）和谷氨酸（HOOC－CH2－CH2－CHNH2－COOH）在103℃干燥1h，各称取150mg溶于水中，移入1000mL容量瓶内并稀释至标线,混合均匀。
此标准溶液临用前配制。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
三、仪器与试剂
恒温培养箱[（20+1）℃]。 20L细口玻璃瓶。 1000～2000mL量筒。 特制搅拌棒，在玻璃下端安装一个2mm厚，大小
硫酸镁溶液。称取22.5g硫酸镁（MgSO4·7H2O）,溶 于水中，稀释至1000mL。
磷酸盐溶液。称取8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）、 21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g磷酸氢二钠 （NaHPO4·7H2O）和1.7g氯化氨（NH4Cl），溶于约 500mL水中，稀释至1000mL并混合均匀，此缓冲溶 液的pH应为7.2。
水体发生生物化学过程必须具备：
水体中存在能降解有机物的好氧微生物。对易降解的有 机物，如碳水化合物、脂肪酸、油脂等，一般微生物均 能将其降解，如硝基或硫酸取代芳烃等则必须进行生 物菌种驯化。
有足够的溶解氧。为此，实验用的稀释水要充分曝气以 达到氧的饱和或接近饱和。稀释还可以降低水中有机污 染物的浓度，使整个分解过程在有足够的溶解氧的条件 下进行。
用同样方法配置另两份稀释比水样。
3、对照样的配置 另取两个有编号的碘量瓶加入稀释水或接种稀释
水作为空白。
4、培养 将各稀释比的水样，稀释水（或接种稀释水）空
白各取一瓶放入20+1℃的培养箱内培养5d，培养 过程中需每天添加封口水。
5、溶解氧的测定 参见实验 “水中溶解氧的测定”。
用碘量法测定未经培养的各份稀释比的水样和空白 水样中的剩余溶解氧。
用同样方法测定经培养5d后，各份稀释水样和溶解 水样中的剩余溶解氧。
五、数据处理
根据公式计算BOD5，并以表格形式表示测定数据和结果。
BOD5（以O2计）（mg/L）=
[(D1-D2)-(B1-B2)]×
f1 f2
式中：
D1—稀释水样培养前的溶解氧量，mg/L；
D2—稀释水样培养5d后剩余溶解氧量，mg/L；
B1—稀释水（或接种稀释水）培养前的溶解氧量，mg/L；
四、实验步骤
1、水样的采集、存储和预处理 采集水样于适当大小的玻璃瓶中（根据水质情况而定），
用玻璃塞塞紧，且不留气泡。采样后，需在2h内测定；否 则，应在4℃或4℃以下保存，且应在采集后10h内测定。 用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调节pH值接近7。 游离氯大于0.10mg/L的水样，加亚硫酸钠或硫代硫酸钠除 去[见注意事项1]。 确定稀释倍数[见注意事项2]。
接种稀释水。取适量生活污水于20℃放置24~36h， 上层清液即为接种液，每升稀释水中加入1~3mL 接 种液即为接种稀释水。接种稀释水pH值应为7.2，其 BOD5值以在0.3～1.0mg/L之间为宜，接种稀释水配 制后应立即使用。对某些特殊工业废水最好加入专门 培养驯化过的菌种。
其他溶液。与碘量法测定溶解氧实验相同的硫酸锰溶 液、碱性碘化钾溶液、（1+5）硫酸、0.025mol硫代 硫酸钠标准溶液和1%的淀粉溶液（详见实验四“水 中溶解氧的测定”）。
实验六 五日生化需氧量的测定——BOD5
一、目的和要求
了解BOD5测定的意义及稀释与接种法测BOD5的 基本原理。
掌握本方法操作技能，如稀释水的制备、稀释倍 数选择、稀释水的校核和溶解氧的测定等。
二、原理
生化需氧量是指在好氧条件下，微生物分解存在水中的有 机物质的生物化学过程中所需的溶解氧量。
2、水样的稀释
根据确定的稀释倍数，用虹吸法把一定量的污水引入 1000mL量筒中，再沿壁慢慢加入所需稀释水（接种 稀释水），用特制搅拌棒在水面以下慢慢搅匀（不应 产生气泡），然后沿瓶壁慢慢倾入两个预先编号、体 积相同的(250mL)的碘量瓶中，直到充满后溢出少许 为止。盖严并水封，注意瓶内不有气泡。
和量筒相匹配的有孔橡皮片。 250~300mL碘量瓶，带有磨口玻璃塞并具有供水
封用的钟形口。 虹吸管，供分取水样和添加稀释水用。
氯化钙溶液。称取27.5g无水氯化钙，溶于水中，稀 释至1000mL。
三氯化铁溶液。称取0.25g三氯化铁（FeCl3·6H2O）， 溶于水中，稀释至1000mL。
葡萄糖-谷氨酸溶液。分别称取150mg葡萄糖和谷 氨酸（均于130℃烘过1h），溶于水中，稀释至 1000mL。
盐酸溶液，0.5mol/L。
氢氧化钠溶液，0.5mol/L。
稀释水。在20L玻璃瓶内加入18L水，控制水温在 20℃左右，用抽气或无油压缩机通入清洁空气 2~8h，使水中溶解氧饱和或接近饱和（20℃时溶 解氧大于8mg/L）。使用前，每升水中加入氯化钙 溶液、三氯化铁溶液、硫酸镁溶液和磷酸盐溶液各 1mL，混合均匀。稀释水pH值应为7.2，其BOD5值 应小于0.2mg/L。
根据参加反应的物质和最终生成的物质，可用下列的反应 式来概括生物化学反应过程：
酶
6C6H12O6+16O2+4NH3 微生物
4C5H7O2N+16CO2+28H2O
有机污染物
CO2+H2O+NH3 O2
微生物分解有机物是一个缓慢的过程，要把可分解 的有机物全部分解掉常需要20d以上的时间，微生物的活 动与温度有关，所以测定生化需氧量时，常以20℃作为 测定的标准温度。一般来说，在第5天消耗的氧量大约是 总需氧量的70%，为便于测定，目前国内外普遍采用 20℃培养5d所需溶解氧含量作为指标，单位以的mg/L表 示，简称BOD5。
有微生物生长所需的营养物质。本实验加入了一定量的 无机营养物物质，如磷盐酸、钙盐、镁盐和铁盐等。
稀释法测定BOD5是将水样经过适当稀释后，使其中含 有足够的溶解氧供微生物5d生化需氧的要求，将此水样 分成两份。一份测定培养前的溶解氧；另一份放入20℃ 恒温箱内培养5d后测定溶解氧，两者的差值即为BOD5。