硫酸新霉素可溶性粉引发SD大鼠肝肾损伤模型的建立

硫酸新霉素可溶性粉引发SD大鼠肝肾损伤模型的建立

赵艺涵;赵瑞平;杨婉莉;杜芳芳;张红英

【摘要】为建立硫酸新霉素引发SD大鼠肝肾损伤模型,将SpF级SD大鼠随机分为D30、D20、D10、L10、L5、L2、空白组7组,对D30、D20和D10组一次性灌胃不同剂量的硫酸新霉素溶液,对L10、L5、L2组连续7 d灌胃不同剂量的硫酸新霉素溶液;于试验第5、7、14天进行采血、采尿,检测血清中丙氨酸转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、血肌酐、尿酸的含量和尿液中尿液总蛋白的含量,在第14天测大鼠的肝肾脏器指数.结果显示,与对照组相比,一次性用药组检测结果肝肾损伤不如连续用药组,连续用药组用药5 d后L5组出现明显肝肾损伤(P<0.05),第14天L2和L5组仍有肝肾损伤(P<0.05),L5组较为严重.因此,用硫酸新霉素建立SD大鼠肝肾损伤模型以连续7 d用药5倍剂量为佳.

【期刊名称】《河北农业大学学报》

【年(卷),期】2019(042)002

【总页数】4页(P100-103)

【关键词】硫酸新霉素;肝肾损伤;大鼠模型;肝脏指标;肾脏指标

【作者】赵艺涵;赵瑞平;杨婉莉;杜芳芳;张红英

【作者单位】河南农业大学牧医工程学院,河南郑州 450000;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州 450000;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州 450000;河南省动物性食品安全重点实验室,河南郑州 450000;郑州市中兽药创制与评价重点实验室,河南郑州 450000;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州 450000;河南省动

物性食品安全重点实验室,河南郑州 450000;郑州市中兽药创制与评价重点实验室,河南郑州 450000

【正文语种】中文

【中图分类】Q71

自半个多世纪前，Waksman发现链霉素并成功应用于临床以来，至今为止发现的氨基糖苷类抗生素（Aminoglycosides，AGs）多达百种[1]。临床实践证明，此

类药物是治疗常见感染性疾病（上呼吸道感染、肺结核、肠道感染及淋病等性病）的优良药物，对革兰氏阴性杆菌的抗菌活性较强，抑菌作用不易受菌种接种量的影响。硫酸新霉素是一种兽医临床上广泛使用的氨基糖苷类抗生素，亦具有抗菌谱广、抗菌能力强和吸收排泄良好等特点，主要用于治疗细菌性疾病[2-3]。但AGs会引起不良反应——肾毒性，对肝脏有一定的损伤[4]。养殖场中使用各类抗生素等药

物频繁，长时间使用这些药物，易使动物产生耐药性，同时大量药物的蓄积产生的毒性对机体损伤较大[5]。

本试验以SD大鼠（Sprague dawley）为研究对象，灌胃不同的硫酸新霉素剂量

和给药时间，对检测的SD大鼠血清指标、尿液总蛋白与肝肾脏器指数进行比较，确定造成大鼠肝肾损伤的适宜剂量和给药方式，以期为临床保肝护肾药物研制建立动物模型提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 SPF级SD大鼠70只，体重（200±20）g左右，雄性，由河南省郑大实验动物中心提供。动物质量合格证号：41003100003162；动物生产许可

证号：SCXK(豫)2015-0004。

1.1.2 动物饲料鼠用全价颗粒饲料（经Co60照射灭菌），由河南省郑大实验动物中心提供。饲料生产许可证号：SCXK(豫)2015-0005；饲料质量合格证号：41000100002680。

1.1.3 试剂与仪器新霉素：硫酸新霉素可溶性粉，河南欧普生物科技有限公司，100 g：6.5 g（650万单位）；全自动生化分析仪AU5800（贝克曼库尔特公司）。

1.2 方法

将70只健康的SD大鼠随机分为7组，即一次性灌胃30倍剂量组（D30组，900 mg/kg）、一次性灌胃20倍剂量组（D20组，600 mg/kg）、一次性灌胃10倍剂量组（D10组，300 mg/kg）、连续7 d灌胃10倍剂量组（L10组，300mg/kg）、连续7 d灌胃5倍剂量组（L5组，150 mg/kg）、连续7 d灌胃

2倍剂量组（L2组，60 mg/kg）和空白组，空白组灌胃0.9%生理盐水，各组自

由饮水采食。在灌胃后的第5、7、10、14天进行采血、采尿，检测血清中丙氨

酸转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、尿

酸（UA）的含量和尿液中尿液总蛋白（PRO）的含量。第14天全部剖杀，观察

肝脏和肾脏形态，并称重，计算肝、肾指数。

肝脏指数=肝脏重量（g）/体重（kg）

肾脏指数=肾脏重量（g）/体重（kg）

1.3 分析数据所采用的统计方法

肝肾生化检测、肝肾器官指数测定的数据采用SPSS18.0进行统计分析。数据以

±s表示，用SPSS应用软件进行组间数据的显著性检验，确定用该药物进行大鼠

肝肾损伤造模的最佳剂量。（Oneway ANOVA法检验，组间用LSD法两两比较，P＜0.05则差异显著）。

2 结果与分析

2.1 硫酸新霉素可溶性粉对大鼠肝、肾指标的影响

试验第5天，与对照组相比，D30组只AST含量明显升高（P＜0.05）；D20组

只Scr含量明显升高（P＜0.05）；D10组只PRO含量明显降低（P＜0.05）；

L10、L5组ALT、BUN含量显著升高（P＜0.05），AST/ALT值与UA含量显著

降低（P＜0.05）；L2组ALT、BUN含量显著升高（P＜0.05），AST/ALT值与PRO含量显著降低（P＜0.05）。表明D30组出现肝损伤，D20组出现肾损伤；

L2、L5、L10组肝脏、肾脏均出现损伤，从各结果看L5组肝肾损伤最严重。结果见表1。

表1 用药5天大鼠肝、肾指标测定结果（±s）Table 1 Liver and kidney indices of rats determined after 5 days（±s）注：*表示与空白组比较差异显著（P＜

0.05）；-表示无结果。尿液总蛋白PRO/(g·L-

1)D3064.5±8.19293.50±7.78*6.58±0.7724.00±1.00117.50±19.09-

D2060.00±5.57221.67±9.296.66±0.3229.00±1.00*91.00±11.270.80±0.20

D1070.75±7.54278.50±3.547.86±0.7127.33±1.53131.33±9.810.27±0.13*L1 091.50±10.61*204.00±15.569.15±0.18*27.33±0.5875.00±16.97*1.29±0.08

L595.00±5.66*195.00±24.649.65±0.87*27.33±2.3169.67±6.11*0.58±0.09

L284.00±5.66*215.67±42.629.40±0.78*25.67±3.06147.33±26.100.45±0.17*对照组

61.33±1.53235.33±28.717.08±0.5324.00±1.73122.33±27.060.77±0.16组别Groups谷氨酸转氨酶ALT/ (U·L-1)谷草转氨酶AST/ (U·L-1)尿素氮BUN/ (mmol·L-1)血肌酐Scr/ (μmol·L-1)尿酸UA/ (μmol·L-1)

试验第7天，与对照组相比，D30组各指标无差异（P＞0.05）；D20组ALT、AST、BUN含量显著升高（P＜0.05）；D10组PRO含量显著升高（P＜0.05）；L10组AST、PRO含量显著升高（P＜0.05）；L5组BUN含量显著降低（P＜