人体X—染色质的观察

1932年美国遗传学家H.J.Muller首先在 果蝇中发现了剂量补偿效应，并把它看作 是维持雌雄两性生物基因表达的一致所特 有的一种遗传效应。 剂量补偿效应：在XY型性别决定机制 的生物中，使性连锁基因在两种性别中有 相等或近乎相等的有效剂量的遗传效应。
进一步研究发现，所有哺乳类雌体细胞中都 有一条这种表现的X染色体； Lyon假说： 1961年由Lyon提出，又称单个活性X染色体假说。 1．正常雌性哺乳动物的体细胞中，两条X染色体中 只有一条有活性(activation X, Xa)，另一条失活 (inactivation X, Xi)； 2．失活是随机的； 3．失活发生在胚胎发育的早期； 4．杂合体雌性在伴性基因的作用上是嵌合体。
人类正常的男女体细胞中，分别有XY 和XX性染色体，女性的两条X染色体中， 在间期也有一条不表现活性而保持浓缩状态， 因此易于用适当的染料加以显示，成为便于 观察的X-染色质（Barr小体）。 在个别的雌或雄体中，有多于2条X染色 体时，在间期细胞内除一条外，其余都将形 成X-染色质，以维持剂量补偿。
实验三
人体x-染色质的观察
一. 实验目的
观察与区别X染色质：通过实验 初步掌握简易方法，识别其形态及所 在部位，为进一步研究人体染色质的 畸变与疾病提供参考条件。
二.实验原理
1949年Barr等发现，在雌猫的神经细 胞核间期有一个凝缩的深染小体，而在雄 性的细胞中没有。 后来了解，在雌体中的两条X染色体在 间期时有一条(或这条的大部分)处于凝集而 不活动状态，从而形成了这种X-染色质(或 称性染色质、Barr小体)。
九.参考文献
1.遗传学实验 高等教育出版社
2.遗传学实验方法和技术 高等教育出版社
★ X-染色质的形态：
1.结构致密的浓染小体，轮廓清楚； 2.大小约1u左右，常附着于核膜边缘或靠 近内侧； 3.其形状有微凸形、三角形、卵形、短棒 形及双球形；
FEMALE
MALE
三.实验材料
1.女性口腔颊部黏膜细胞
2.毛发根部细胞
四.实验仪器及试剂
仪器:
显微镜
试剂: 1M盐酸、蒸馏水、改良苯酚品红
五.实验方法和步骤
1.口腔颊部黏膜细胞的观察：
a.刮取口腔黏膜细胞: 漱口，用牙签从女性口腔两侧颊部刮取上皮黏膜 细胞，原位刮2-3次，分别涂抹在干净载片上，每 次可涂1-2片，涂抹范围约盖片大小(男性做对照)。 b.染色: 待稍干后，滴加1-2滴改良苯酚品红，染色10-15分 钟。
c.压片: 加盖片，覆以吸水纸，用手指轻度压片。 d.镜检: 镜下检测典型的可数细胞，标准是： ⑴ 核质呈网状或细颗粒状分布； ⑵ 核膜清晰、无缺损； ⑶ 染色适度； ⑷ 周围无杂质。
2．毛发根部细胞的观察：
拔取一根带有毛根的头发，自基部截取 2cm左右置载片上，再加一滴1M盐酸解离5-7 分钟，待毛根后鞘软化后拔去毛干，蒸馏水 清洗3-5次，滴加一滴染液染10-15分钟，吸取 多余的染料，再覆以盖片，隔一片吸水纸用 手指轻度加压后镜检。
六.实验结果
1.观察50个女性可数细胞，同时观察50个男 性者为对照，分别计算显示X-染色质细胞 所占的百分比。 2.观察中选绘4-5个典型细胞，示明X-染色质 的形态部位。
Barr小体
Barr小体
Detection of sex chromatin by Thionin stain ×400
七 .实验分析与Hale Waihona Puke Baidu论
1.分析此次实验成败的原因。
2. 此次实验有哪些地方可以改进?
八.思考题
为什么雄性的一条X-染色体不浓缩？ 它的合理的解释是什么？它的遗传学意义 是什么？