dna提取实验步棸
最全DNA提取步骤
最全DNA提取步骤DNA提取是生物学研究和实践中的一项重要技术，它是获取分析DNA序列的前提。
DNA提取步骤可能会因不同实验目的和样本类型而有所差异，但通常包括以下主要步骤：1.样本选择：选择合适的样本进行DNA提取。
常见的样本包括细胞、组织、血液、口腔拭子、植物材料等。
根据样本类型的不同，选择相应的提取方法。
2.预处理样本：将样本进行必要的预处理，以去除可能干扰DNA提取和分析的物质。
例如，清洗组织或细胞以去除外部污染物，离心分离红细胞等。
3.细胞破碎：将样本中的细胞破碎，释放DNA。
常见的方法包括机械破碎、化学裂解和酶处理等。
机械破碎可以使用高压设备或超声波破碎仪，化学裂解可以使用蛋白酶K和SDS等。
4.蛋白质去除：添加蛋白酶处理样本，降解蛋白质。
蛋白酶的选择和用量会根据样本类型和实验需求而有所差异。
蛋白质降解后，可以使用酚/氯仿方法或商用DNA提取试剂盒去除蛋白质。
5.核酸沉淀：用盐酸或其他化学品调节样品的pH值，使DNA成为可溶性物质而使其他成分沉淀。
沉淀后，用离心将DNA沉淀物分离出来。
6.DNA纯化：将DNA溶液从其他杂质中纯化。
可以使用酚/氯仿法、硅胶纯化法或商用DNA纯化试剂盒。
这些方法可以去除卟啉、盐、蛋白质和其他杂质。
7. DNA溶解：将纯化的DNA溶解于适当的缓冲溶液中，使其稳定且可供后续实验使用。
可以使用Tris-EDTA（TE）缓冲液或无菌水。
8.DNA质量和浓度检测：使用分光光度计或荧光分析仪检测DNA的质量和浓度。
合适的质控参数可根据实验目的和要求来确定。
以上是常见的DNA提取步骤，但实际操作中可能会因实验目的、样本类型和材料可用性而有所不同。
因此，在进行DNA提取时，一定要根据实际需求选择合适的方法和试剂，并严格按照操作步骤进行，以确保提取的DNA质量和纯度满足实验要求。
dna的提取方法与步骤
dna的提取方法与步骤DNA的提取方法与步骤DNA提取是分子生物学中的重要实验步骤，它可以从细胞中分离出DNA，为后续的实验研究提供基础。
本文将介绍DNA的提取方法与步骤。
一、材料准备1. 细胞样本：可以是动物组织、植物组织或微生物培养物等。
2. 细胞裂解缓冲液：常用的裂解缓冲液包括Tris-HCl缓冲液和EDTA缓冲液。
3. 蛋白酶K：用于降解蛋白质。
4. 盐溶液：如NaCl溶液，用于沉淀DNA。
5. 异丙醇：用于沉淀DNA。
6. 酚-氯仿混合液：用于分离DNA。
二、DNA提取步骤1. 细胞裂解：将细胞样本加入细胞裂解缓冲液中，使用均质器或超声波仪器对细胞进行裂解，使细胞壁破裂释放出细胞内的DNA。
2. 蛋白酶处理：加入适量的蛋白酶K，将蛋白质降解，使DNA从蛋白质中解离出来。
3. 盐沉淀：加入盐溶液，通过离心将DNA沉淀下来。
盐溶液中的离子会中和DNA分子上的电荷，使其变得不溶于水，从而沉淀下来。
4. DNA纯化：将DNA沉淀物用异丙醇洗涤，去除杂质。
然后使用乙酸溶解DNA沉淀物，使其变为可溶于水的形式。
5. DNA分离：将DNA溶液与酚-氯仿混合液混合，酚层中的蛋白质和DNA杂质会与酚结合，而DNA会在水相中。
通过离心分离酚相和水相，得到纯净的DNA溶液。
6. DNA沉淀：将DNA溶液加入异丙醇中，通过离心使DNA沉淀下来。
7. DNA溶解：将DNA沉淀物用适量的缓冲液溶解，获得最终的DNA溶液。
三、实验注意事项1. 实验操作要严格遵守无菌技术，避免DNA的污染。
2. 实验过程中要注意温度的控制，避免DNA的降解。
3. 实验器材要干净，以免杂质对DNA提取的影响。
4. 实验过程中要轻柔操作，避免DNA的断裂。
四、常见问题及解决方案1. DNA溶解不完全：可以加热溶解，或者使用酶切酶处理。
2. DNA沉淀量低：可以增加盐溶液的浓度，或者加入载体DNA增加DNA的沉淀量。
3. DNA质量差：可以使用纯化试剂盒进行纯化处理，或者使用Phenol-Chloroform-Isoamyl Alcohol（PCI）进行提取。
提取dna的实验步骤原理
提取dna的实验步骤原理DNA提取是一项重要的实验技术，用于从细胞中分离纯净的DNA。
它在生物学、医学、犯罪学等领域具有广泛的应用。
DNA提取的过程可以分为以下几个步骤：样品收集、细胞破碎、蛋白质消化、DNA分离、洗涤、溶解和纯化。
首先，样品收集是DNA提取的第一步。
样品可以来自不同的来源，如血液、唾液、组织样本等。
对于血液样品，静脉采血是最常见的方式。
收集的血液样品需要采用抗凝剂进行预处理，以防止凝血。
细胞破碎是DNA提取的关键步骤之一。
细胞破碎的目的是将细胞膜以及核膜破坏，释放细胞内的DNA。
常用的细胞破碎方法有物理破碎、化学破碎和酶解法。
物理破碎一般采用高速离心仪或超声波处理，通过机械力量破坏细胞结构。
化学破碎使用适当的溶液，如细胞裂解液（例如EDTA、SDS、蛋白酶K等）来分解膜脂质和蛋白质。
酶解法则通过酶的作用来降解膜和核酸。
蛋白质消化是为了去除提取过程中的蛋白质杂质。
蛋白质会干扰DNA的纯化和测定。
在蛋白质消化过程中，常用的方法是加入蛋白酶K或肾脏酸性蛋白酶等蛋白水解酶，通过其酶解作用将蛋白质降解。
DNA分离是将DNA与其他细胞组分分离的过程。
DNA在细胞破碎后呈现为线性或环状的形态。
为了分离DNA，一般采用盐溶液和有机溶剂共同作用的方案，如添加高浓度的盐类（如NaCl）和异丙醇。
这些溶剂会沉淀细胞残渣和蛋白质，而DNA则溶于水相中。
洗涤过程是为了去除残留的蛋白质和盐类。
洗涤液一般为酒精溶液，如酒精和醋酸盐。
洗涤时，将沉淀的DNA加入洗涤液中，通过离心使DNA沉淀，然后去除上清液。
此过程重复一至三次可以有效去除杂质。
溶解是将沉淀的DNA重新溶解于缓冲液中，以便于后续的操作。
溶解液可以是Tris-EDTA缓冲液、无菌纯水等。
在加入缓冲液后，将溶液置于水浴中进行搅拌和温度控制，使DNA彻底溶解。
纯化是最后一步，目的是去除DNA提取过程中的杂质，获得纯净的DNA。
常见的纯化方法有酚-氯仿抽提法和硅胶纯化法。
dna提取
dna提取
DNA提取是指从生物体中分离出DNA分子的过程。
DNA 提取是分子生物学和遗传学实验过程的关键步骤，用于研究DNA的结构、功能和遗传变异。
以下是一个常用的DNA提取方法的步骤：
1. 收集样本：根据实验需求，选择合适的生物体样本，如细胞、血液、组织等。
2. 细胞破碎：使用细胞裂解缓冲液和机械力（如搅拌、振荡或均质器）破碎细胞膜，释放DNA。
3. 蛋白质消化：加入蛋白酶K等蛋白质消化酶，将细胞内的蛋白质降解或去除。
4. DNA沉淀：加入盐和异丙醇，混合后静置，使DNA形
成白色沉淀。
5. 清洗沉淀：使用70%的乙醇洗涤DNA沉淀，去除杂质。
6. 干燥和溶解：将洗涤后的DNA沉淀风干，然后使用缓冲液溶解DNA。
7. 检测和测量：使用分子生物学技术，如凝胶电泳或分光
光度计等，对提取的DNA进行质量和浓度检测。
需要注意的是，不同的生物体和样本类型可能需要不同的DNA提取方法和试剂盒。
在进行DNA提取实验前，最好
参考相关文献或向专家咨询，以确定最适合的方法。
dna提取步骤
DNA提取步骤
1, 剪刀酒精消毒，高温消毒，冷却，剪取肌肉组织样品2g，液氮研磨至粉末，称取0.15g 左右于2ml的离心管中，加入2ml 的STE缓冲液，静置5min。
2, 4℃，900g离心15min，取上清液，弃沉淀。
3, 4℃，14000g离心30min，倒去上清液，留下沉淀，此沉淀为线粒体。
4, 加入葡萄糖悬浮液200ul，混匀后，冰浴15min。
5, 加2倍，即400ul的变性液混匀，冰浴10分钟。
6, 加1.5倍，即300ul的复性液混匀，室温静置30min。
7, 4℃，12000g离心10min，取上清液加入到1.5ml的离心管中，弃沉淀。
8, 加0.6倍（450ul）异丙醇混匀，-20℃沉淀30min，小心弃上清液。
9, 400ul 70％乙醇洗1~3次。
10, 12000g离心10min，倒去上清液，室温晾干15min。
11, 加100ulTE完全溶解20min，加入RNaseA（2ul），37℃消化1~3h。
12, 加等体积饱和酚（102ul），轻摇15min后，4℃，12000g离心10min，取上清液。
13, 加等体积酚/氯仿/异戊醇（25:24:1）（102ul），轻摇15min后，4℃，12000g离心10min，取上清液。
14，加等体积氯仿（102ul），轻摇15min后，4℃，12000g离心10min，取上清液。
15，加2.5倍无水乙醇（300ul），于-20℃沉淀30min~60min。
16, 4℃，12000g离心10min，弃上清，晾干15min。
17, 50ulTE溶解，置于-20℃备用。
提取dna的方法
提取dna的方法提取DNA的方法是从一种物质中检索出DNA分子的过程，包括酶切、基因工程等。
DNA提取方法有核酸沉淀法、缓冲溶液法、植物提取法、实验室提取法等。
下面将对这些方法进行详细介绍。
1、核酸沉淀法：核酸沉淀法是一种常用的DNA提取方法，它的原理是通过pH调节使DNA沉淀，然后将DNA从溶液中收集。
步骤如下：首先，将样品用盐水或蛋白酶/胰蛋白酶消化；其次，加入超纯水、EDTA缓冲液和NaCl，调节pH至5.5；然后，加入乙醇，溶解DNA并沉淀；最后，在0℃-4℃维持1小时，收集沉淀的DNA。
2、缓冲溶液法：缓冲溶液法是通过改变溶液的pH值来提取DNA的一种方法，它利用DNA的结合能力和电性作用力，将DNA结合到某种特定的溶剂上，然后从溶剂中提取出来。
步骤如下：首先，将样品加入缓冲溶液，消化；其次，加入非离子表面活性剂，使DNA脱水；然后，加入离子表面活性剂，将DNA与其他组分分离；最后，用低温冷藏保存，以便收集DNA。
3、植物提取法：植物提取法是通过一系列物理和化学步骤，从植物细胞中提取DNA的一种方法。
步骤如下：首先，将植物细胞磨碎，用盐水悬浮；其次，加入碱性溶液，使细胞膜脱落；然后，加入非离子表面活性剂，溶解脱落的细胞膜，将DNA沉淀；最后，加入乙醇，将DNA沉淀，冷却保存，然后收集DNA。
4、实验室提取法：实验室提取法是一种基于细菌的实验室方法，它利用发酵的细菌细胞中的DNA进行提取。
步骤如下：首先，将细菌细胞加入特定的溶剂液中，使细胞膜脱落；其次，加入特定的酶和蛋白酶，将细胞内的DNA 溶解；然后，加入非离子表面活性剂，将溶解的DNA沉淀；最后，用乙醇沉淀DNA，将沉淀的DNA精细收集。
以上就是提取DNA的方法，主要有核酸沉淀法、缓冲溶液法、植物提取法和实验室提取法四种方法，它们都具有不同的优点和缺点，因此，在实际应用中，应该根据样品的不同，选择适当的提取方法。
DNA提取方法和步骤
DNA提取方法和步骤DNA提取是生物学实验中常见的操作步骤，用于从细胞或组织中提取纯化DNA。
DNA提取的主要目的是获得纯净的DNA样品，以便进行后续的实验，如PCR、限制酶切、测序等。
下面我们将详细介绍DNA提取的方法和步骤。
1.细胞破碎：将待提取DNA的细胞或组织进行破碎，以释放细胞内的DNA。
细胞破碎的方法有很多种，包括机械破碎、酶解、热破碎等。
其中，常用的方法是机械破碎，如用搅拌器或超声波振荡器将样品强力搅拌或振荡，以破坏细胞膜和细胞壁。
2.蛋白质除去：细胞破碎后，通过蛋白酶的作用，将细胞内的蛋白质降解，并与蛋白质结合的DNA一同除去。
常用的蛋白酶有蛋白酶K、丝氨酸蛋白酶等。
需要注意的是，蛋白酶的适宜浓度和作用时间需要根据实验的要求进行优化。
3.DNA纯化：在蛋白质除去后，将细胞产生的碱基、RNA等杂质与DNA分离。
常用的纯化方法有酚/氯仿方法、盐方法和硅胶柱法等。
其中，酚/氯仿方法是最早被使用的DNA纯化方法，其基本原理是将DNA与蛋白质、RNA等杂质分离，从而得到纯净的DNA。
酚/氯仿方法的步骤如下：a.向破碎细胞溶液中加入等体积的酚/氯仿混合液，轻轻摇晃离心管混匀，使DNA分配在有机相和水相之间。
b.离心管在高速离心机中离心15分钟，使混合液分为有机相、界面层和水相三个层次。
c.使用移液器将上清液（水相）转移到新的离心管中，注意避免吸入有机相。
d. 向上清液中加入1倍体积的冰冷异丙醇（Isopropanol），使DNA沉淀。
使用移液器轻轻颠倒离心管使DNA沉淀。
e.在-20℃冷冻保存30分钟或在室温下沉淀15分钟，以便DNA更好地沉淀。
f.在高速离心机中离心DNA沉淀，沉淀时间约为10分钟，沉淀结束后将上清液倒掉。
g.用70%乙醇洗涤DNA沉淀，然后在室温下晾干。
h.使用适量的缓冲液（如TE缓冲液）重新溶解DNA。
4.DNA沉淀：将纯化后的DNA样品进行沉淀，以去除残留的盐、酚、异丙醇等。
DNA提取步骤
上清中加400μl无水乙醇，反复颠倒混匀1-3min，至出现白色云雾状DNA沉淀。4000g离心2min沉淀DNA，弃上清（倾倒时小心，勿将DNA倒掉）。
5、DNA的清洗
沿管壁加入1ml75%乙醇，颠倒混匀30s，12000g离心5min。弃上清（底部白色沉淀为DNA），尽量将液体全部弃除。
6、DNA溶解
风干15s后加入100μl无菌水，轻轻弹动管底，使DNA全部溶解。
电泳检测
1、细胞收集
细胞培养至对数或稳定期前期（1-3×107），吸取1ml，8000-12000g离心2min收集菌体细胞。
2、细胞裂解
加入1ml裂解液，轻柔吸打，使细胞悬浮。细胞壁裂解，释放DNA
3、去除杂质
10000g离心2min，去除大部分细胞碎片、多糖、RNA等，吸取800μl上清液于新的离心管中（不要吸到沉淀）。
4、基因组DNA提取
上清中加400μl无水乙醇，反复颠倒混匀1-3min，至出现白色云雾状DNA沉淀。4000g离心2min沉淀DNA，弃上清（倾倒时小心，勿将DNA倒掉）。
5、A的清洗
沿管壁加入1ml75%乙醇，颠倒混匀30s，12000g离心5min。弃上清（底部白色沉淀为DNA），尽量将液体全部弃除。
6、DNA溶解
风干15s后加入100μl无菌水，轻轻弹动管底，使DNA全部溶解。
电泳检测
1、细胞收集
细胞培养至对数或稳定期前期（1-3×107），吸取1ml，8000-12000g离心2min收集菌体细胞。
2、细胞裂解
加入1ml裂解液，轻柔吸打，使细胞悬浮。细胞壁裂解，释放DNA
3、去除杂质
10000g离心2min，去除大部分细胞碎片、多糖、RNA等，吸取800μl上清液于新的离心管中（不要吸到沉淀）。
DNA提取实验方案
DNA提取实验方案
材料与试剂：
1.细胞样本（如血液、组织等）
2.细胞裂解缓冲液（含有蛋白酶K）
3.蛋白酶K
4.乙醇
5.蛋白质沉淀液
6.正丁醇
7.氯仿
8.等离子水
9.TE缓冲液
10.离心管
11.磁珠
12.磁珠悬浊液
13.热拌器
14.离心机
实验步骤：
1.细胞破裂：将细胞样本加入细胞裂解缓冲液中，加入适量蛋白酶K，放入热拌器中破裂细胞，使DNA溶解在缓冲液中。
2.蛋白质沉淀：加入等体积的蛋白质沉淀液，轻轻混匀，离心使蛋白
质沉淀。
3.DNA沉淀：将上清液转移至新的离心管中，加入适量的乙醇，轻轻
混匀，使DNA沉淀。
4.DNA纯化：将DNA沉淀用等离子水悬浊，加入等体积的正丁醇和氯仿，混匀后离心，取上清液，加入等量的等离子水和TE缓冲液。
5.纯化DNA：将上清液转移至带有磁珠的离心管中，加入磁珠悬浊液，混匀后在离心机中进行离心，使DNA和磁珠结合。
6.洗涤DNA：将离心管中的上清液丢弃，加入70%乙醇洗涤DNA，多
次洗涤后去除乙醇，干燥磁珠。
7.溶解DNA：最后用等离子水或TE缓冲液溶解DNA，即可用于后续的
实验。
通过上述步骤，可以从细胞样本中提取出纯净的DNA，用于后续的分
子生物学实验。
DNA提取是一项基础而重要的技术，在分子生物学和遗传
学研究中具有广泛的应用价值。
希望以上方案可以帮助您顺利进行DNA提
取实验。
DNA提取实验方案
DNA提取实验方案1.样品准备：-根据实验的需要选择合适的样品，可以是细菌、植物、动物或者血液、尿液等体液样品。
-根据样品的性质，选择合适的提取方法。
例如，细菌可以通过直接溶解破碎，植物样品可能需要先研磨或者裂解细胞壁。
2.细胞破碎：-将样品放入离心管中，并加入细胞破碎缓冲液。
缓冲液一般包含盐溶液、蛋白酶和表面活性剂等成分，用于破坏细胞膜和蛋白质，释放DNA。
-使用振荡器或离心机将样品振荡或离心，使细胞完全破碎，释放出DNA。
-同时，可以根据需要进行酶解RNA、将蛋白质沉淀等处理，以减少后续的处理步骤。
3.DNA纯化：-将破碎后的样品转移到新的离心管中，并加入蛋白酶K等蛋白酶，用于分解核蛋白复合物和蛋白酶。
-加入一定比例的酒精或异丙醇，混匀后离心，使DNA沉淀在底部。
-弃去上清液，将DNA沉淀用70%乙醇洗涤，去除盐和其他杂质。
-离心沉淀，弃去乙醇，用干燥器将沉淀干燥。
4.DNA溶解：- 加入适量的Buffer AE或水溶解DNA，使其溶解，并进行浓度检测。
-使用分光光度计测量DNA的吸光度，以确定DNA的纯度和浓度。
5.质量控制：-可以使用琼脂糖凝胶电泳等方法，对提取得到的DNA进行质量检测。
-通过比较DNA样品的迁移位置和相对强度，可以判断DNA的完整性和纯度。
总结：以上是一种常用的DNA提取实验方案，但根据不同的实验目的和样品性质，可能会有适当的修改。
在实验过程中，需要注意操作的无菌性、使用纯净试剂、避免污染，以保证提取到的DNA的质量和纯度。
提取到的DNA可以用于进一步的PCR扩增、测序等实验，为后续研究提供重要的实验材料。
DNA提取流程及注意事项
DNA提取流程及注意事项一、引言DNA提取是从生物样品中分离纯化DNA的过程，是进行许多分子生物学和遗传学研究的基础。
本文档将介绍一种常见的DNA 提取流程，并提供一些注意事项，以帮助您顺利完成实验并获得高质量的DNA。
二、DNA提取流程以下是DNA提取的一般流程：1. 样品准备：- 样品可以是血液、组织、细胞等，根据不同的样品选择合适的提取方法。
- 样品需要储存在合适的条件下，避免DNA降解。
2. 细胞破碎：- 细胞破碎是提取过程中的重要步骤，可通过机械破碎、化学裂解等方法使细胞膜破裂释放DNA。
- 注意避免DNA受到酶、RNase等的污染，使用无DNase的试剂和消毒工具。
3. DNA纯化：- 使用DNA纯化试剂盒等工具将提取的细胞溶解物中的杂质去除，得到纯净的DNA。
- 注意按照试剂盒说明书进行操作，避免DNA污染和丢失。
4. 测定DNA浓度和纯度：- 使用分光光度计或荧光染料测定DNA的浓度和纯度。
- 确保所提取的DNA浓度足够以满足后续实验需求，同时要保证DNA的纯度高，避免污染影响后续实验结果。
5. 存储DNA：- 将提取得到的纯化DNA储存于冰箱或液氮中，避免降解。
- 根据实验需求将DNA分装储存，并在标签上注明样品信息和储存日期。
三、注意事项在进行DNA提取的过程中，还需要注意以下问题：1. 实验室操作规范：- 实验室内应严格按照相关操作规程进行操作，保证实验环境的洁净和安全。
- 使用一次性手套、口罩等个人防护用品，并定期对实验室进行清洁消毒。
2. 样品处理：- 样品应尽早处理，避免长时间储存导致DNA降解。
- 正确储存样品，在提取前避免样品受到污染。
3. 避免污染：- 实验操作过程中需要保持实验台面、仪器器皿的清洁，避免污染样品。
- 避免与其他DNA样品、霉菌、细菌等可能带来DNA污染的物质接触。
4. 操作技巧：- 注意操作的细节，遵循实验步骤并记录相关数据和观察。
- 在操作过程中要耐心细致，并及时调整实验方案，以保证最终结果的准确性。
dna提取实验步骤
dna提取实验步骤DNA提取是分子生物学中的一项重要实验技术，它可以从细胞中提取出DNA，并用于后续的分子生物学研究。
本文将介绍DNA提取的实验步骤。
一、实验前准备1.1 材料准备为了进行DNA提取实验，我们需要准备以下材料：- 细胞样本：可以是动物组织、细菌、植物组织等。
- 细胞裂解缓冲液：含有离子洗涤剂、蛋白酶K等。
- 高盐溶液：用于沉淀DNA。
- 各种浓度的酒精：用于沉淀DNA。
- 离心管、试管等实验器材。
1.2 实验环境准备- 实验室应保持清洁整洁，避免污染DNA样本。
- 使用无菌技术进行操作，避免外源DNA的污染。
二、细胞裂解2.1 细胞破碎将细胞样本放入离心管中，加入适量的细胞裂解缓冲液，用振荡器或超声波进行细胞破碎，使细胞膜破裂，释放出细胞内的DNA。
2.2 蛋白酶处理加入适量的蛋白酶K，使其降解细胞中的蛋白质，释放出DNA。
同时，离子洗涤剂可以使DNA保持在溶液中，避免沉淀。
三、DNA纯化3.1 加入高盐溶液为了沉淀DNA，需要加入高盐溶液。
高盐溶液中的离子浓度较高，可以与DNA中的离子结合，使DNA形成沉淀。
3.2 离心沉淀将样品离心，沉淀下的DNA会在离心管底部形成一个白色沉淀。
去除上层液体后，可以看到这个沉淀。
四、DNA沉淀4.1 加入酒精为了进一步沉淀DNA，可以加入适量的酒精。
酒精会使DNA分子凝聚在一起，形成可见的白色沉淀。
4.2 离心沉淀再次进行离心操作，将上层的液体去除后，可以看到沉淀。
注意，沉淀的DNA非常脆弱，操作时要轻柔避免破坏。
五、洗涤和溶解5.1 洗涤为了去除沉淀中的杂质，可以使用70%的乙醇洗涤DNA沉淀。
将乙醇加入离心管中，轻轻摇晃，使DNA充分溶解。
5.2 溶解将洗涤后的DNA沉淀用适量的缓冲液溶解，使其完全溶解。
六、质量检测为了确保提取到的DNA质量良好，可以使用紫外可见光谱仪或凝胶电泳进行质量检测。
通过测量DNA的吸光度或检测DNA在凝胶上的迁移情况，可以评估提取到的DNA的纯度和完整性。
DNA-提取实验及配方
DNA提取实验步骤：（1）取1g左右幼叶，放入研磨小管然后放入钢珠，研磨前放入盛有液氮的保温桶冷冻一段时间，然后利用研磨机器研磨成粉末，-70℃冰柜保存；（2）65℃水浴锅中预热裂解缓冲液（加入Vitc和β-巯基乙醇）；（3）从-70℃冰柜拿出带有粉末的离心管，将800ul体积的裂解液（水浴锅中预热）倒入管中并摇至均匀，然后放于65℃水浴槽中水浴35min，每隔10min摇一次；（4）向管中加入800ul氯仿-异戊醇（24：1）抽提液，并摇至均匀。
放入离心机内，4℃以12000r/s离心20min；（5）吸取上清置于另一个1.5ml离心管中，重复步骤4一次（再次抽提一次）；（6）吸取上清置于新的离心管中，加入500ul的冰冻异丙醇，并缓慢摇至絮状DNA沉淀析出，于-20℃中放置15min；（7）钩出沉淀，置于1.5离心管中，用70%酒精洗至酒精无色，利用无水乙醇再次漂洗一遍，弃去无水乙醇，将装有DNA的离心管放于真空抽干机内风干45minDNA提取各溶液配方：（1）500ml 1M Tris母液（PH8.0）Tris碱60.55g 浓HCl 21ml 超纯水400ml因Tris溶液的PH值受温度影响较大，绪冷却至室温后用浓HCl调节PH至8.0，然后用超纯水定溶至500ml，灭菌后使用（2）500ml 0.5M EDTA母液（PH8.0）Na2EDTA 93.05g NaOH 10g 超纯水400ml边搅拌边加入NaOH颗粒，但PH接近8.0时，溶液由浑浊变清澈，最终调节至PH8.0，用超纯水定溶至500ml，灭菌后使用（3）500ml 1x TE (PH8.0)1M Tris-HCl 5ml 0.5M EDTA 1ml 超纯水480ml加超纯水定溶至500ml，灭菌后使用。
棉花DNA提取-裂解缓冲液配方：试剂终浓度每升用量1M Tris母液0.1M 100ml0.5M EDTA 0.025M 32mlNaCl 1.5M 87.6gCTAB 2% 20gPVP 40 2% 20gVITC（使用前加）0.3% 3gΒ-巯基乙醇（使用前加）3% 30mlPCR反应体系----10ulddH20 6.2ul Taq酶0.1ul模板DNA 1.2ul Buffer 1.0uldNTP 0.5ul 正向引物0.5ul反向引物0.5ul。
提取dna的方法及步骤
提取dna的方法及步骤提取DNA的方法及步骤DNA（脱氧核糖核酸）是构成生物遗传信息的基本单位，因此，准确提取DNA样本是进行遗传研究、基因工程和犯罪侦查等领域的重要步骤。
以下将介绍几种常见的DNA提取方法及其步骤。
方法一：酚氯仿法酚氯仿法是一种常用的DNA提取方法，其步骤如下：1. 收集样本：可以是人体组织、血液、细胞培养物等。
确保样本新鲜，并避免受到污染。
2. 细胞破碎：将样本加入含有细胞破碎缓冲液的离心管中，通过离心将细胞沉淀。
3. 酚氯仿提取：将沉淀加入酚氯仿混合液中，轻轻混匀，并离心以分离DNA。
4. 沉淀DNA：将上清液转移到新的离心管中，加入冷乙醇沉淀DNA。
5. 洗涤：用70%乙醇洗涤沉淀的DNA，以去除杂质。
6. 干燥：将洗涤后的DNA在室温下晾干或用低温真空干燥器加速干燥。
方法二：盐析法盐析法是一种简单易行的DNA提取方法，其步骤如下：1. 细胞破碎：将样本加入含有细胞破碎缓冲液的离心管中，通过离心将细胞沉淀。
2. 盐析提取：加入高盐缓冲液使DNA与其他核酸和蛋白质分离。
3. 沉淀DNA：将上清液转移到新的离心管中，加入冷乙醇沉淀DNA。
4. 洗涤：用70%乙醇洗涤沉淀的DNA，以去除杂质。
5. 干燥：将洗涤后的DNA在室温下晾干或用低温真空干燥器加速干燥。
方法三：硅胶柱法硅胶柱法是一种高纯度DNA提取方法，其步骤如下：1. 细胞破碎：将样本加入含有细胞破碎缓冲液的离心管中，通过离心将细胞沉淀。
2. 硅胶柱处理：将细胞沉淀加入硅胶柱中，经过洗涤和离心，将DNA吸附在硅胶柱上。
3. 洗涤：用洗涤缓冲液洗涤硅胶柱，以去除杂质。
4. DNA洗脱：加入低盐缓冲液，使DNA从硅胶柱上洗脱出来。
5. 洗涤：用70%乙醇洗涤洗脱后的DNA，以去除杂质。
6. 干燥：将洗涤后的DNA在室温下晾干或用低温真空干燥器加速干燥。
方法四：酶解法酶解法是一种特异性较高的DNA提取方法，其步骤如下：1. 细胞破碎：将样本加入含有细胞破碎缓冲液的离心管中，通过离心将细胞沉淀。
DNA的提取
试验步骤：1、贴壁细胞用胰酶消化，离心收集。
2、细胞重悬于冰冷的PBS漂洗一次，离心收集。
试验步骤2再重新作一边。
3、加入5mlDNA提取缓冲液，(10mmol/LTris-cl,0.1mol/LEDTA,o.5%SDS),混匀。
4、加入25ul蛋白酶K,使终浓度达到100ug/ml,混匀，50℃水浴3h,5、用等体积的酚抽提一次，2500rpm离心收集水相，用等体积的（酚，氯仿，异戊醇）混合物抽提一次，2500r/min离心收集水相6、用等体积的氯仿，异戊醇抽提一次。
加入等体积的5mol/L的LiCL,混匀，冰浴，10min.。
7、2500rpm离心10min.转上清于一离心管中。
加入等体积的异丙醇。
室温10min。
2500rpm,离心10min。
弃上清。
8、加入0.1倍体积3mol/L乙酸钠(PH5.2)与2倍体积-20℃预冷无水乙醇。
-20℃20min。
9、12000r/min,室温离心5min。
弃上清。
将DNA溶于适量TE中。
外周血DNA提取技术分离外周血白细胞提取方法：试验步骤：1、取人肘静脉血5ml，EDTA抗凝，2500rpm离心10min。
2、小心吸取上层血浆，分装到3个0.5ml离心管中。
3、在血细胞中加入3倍体积的溶血液，摇匀，冰浴15min。
4、2500rpm离心10min，弃上清。
5、加入10ml溶血液，摇匀，冰浴15min。
6、3000rpm离心10min，弃上清。
7、倒置离心管，去掉残液。
8、得白细胞，－80?C冻存。
试验要求：血至分离白细胞之间隔时间在室温下放置不超过2h，4℃放置不超过5h，以防白细胞自溶。
氯仿法抽提外周血白细胞基因组DNA：试验试剂：Ligsisbuffer：133mMNH4ClNHCl7.12g0.9mMNH4HCO3NH4HCO30.071g0.1mMEDTA0.5mMEDTA0.2ml；最后加灭菌去离子水至1000ml，高压灭菌。
ACD抗凝剂：柠檬酸1.68g柠檬酸钠4.62g葡萄糖 5.15g；最后加灭菌去离子水至350ml，高压灭菌。
DNA提取步骤中文版
一．DNA的抽提（QIAGEN试剂盒）。
（1）标记1.5mlEP管，吸取20ul蛋白酶K加入1.5mlEP管底部。
（2）加入200ul血清至1.5mlEP管。
若血清不足200ul，可加适量PBS 补充。
（余血清-20℃保存）（3）加200ul缓冲液AL至样品管，震荡混匀15s。
（4）56℃孵育10min。
（5）稍微离心，将EP管壁上的液体离心下去。
（6）加200ul无水乙醇至样品管中，震荡混匀15s，稍微离心。
（7）混合液转移至QIAamp螺旋住置于2ml收集管上，小心勿沾湿边缘。
（加样器垂直于螺旋住，将混合液慢慢加至滤膜中间）。
关盖，标记，8000rpm离心1min。
再将QIAamp螺旋住转移至一个清洁的2ml 收集管内，弃含滤液的收集管。
（8）打开QIAamp螺旋柱加入500ul缓冲液AW1，勿沾湿边缘。
关盖，8000rmp离心1min。
再将QIAamp柱转移至一个清洁的2ml收集管内，弃含滤液的收集管。
（9）打开QIAamp柱加入500ul缓冲液AW2，勿沾湿边缘。
关盖，全速12000rpm离心3min。
（10）标记1.5ml离心管，将QIAamp柱置于一个清洁的1.5mlEP管，弃含滤液的收集管。
打开QIAamp柱加入50ul缓冲液AE。
室温孵育3min。
12000rpm离心1min。
继续下一步实验操作或-20℃保存。
二：目的片段的扩增第一轮PCR反应体系30ul（要有一个阳性对照和一个阴性对照），n个标本10×Buffer 3n uldNTP（200ul/ml） 3n ulprimer 上游引物 0.3n ul下游引物 0.3n ulTaq酶 0.5n ulH2O 20n ul模板DNA 3 ul反应条件94℃ 1min94℃ 20sec55℃ 20sec72℃ 1min20sec反应35个循环注意：配体系时先配总反应体系（混匀），分装后，再加标本（一管一枪头）。
防止污染。
配置体系要在超净台内操作。
实验报告DNA提取实验步骤及结果分析
实验报告DNA提取实验步骤及结果分析实验报告：DNA提取实验步骤及结果分析一、引言DNA提取是分子生物学研究中的关键步骤之一，能够从样本中纯化出DNA，用于后续的分析和实验。
本实验旨在探究DNA提取的步骤和方法，并对提取结果进行分析和评估。
二、实验步骤1. 样本准备：选择合适的样本进行DNA提取，如植物组织、动物组织或微生物培养物。
样本应储存于-80℃的冰箱中，以防止DNA降解。
2. 细胞破碎：将样本取出，加入细胞破碎缓冲液，使用均质机或研钵等方法将细胞破碎，使细胞膜被破坏，释放DNA。
3. 蛋白酶处理：加入蛋白酶，将样本中的蛋白质降解，以去除蛋白质的干扰。
4. 酚/氯仿提取：加入等体积的酚/氯仿混合液，混匀后离心，使混合液分为上下两层，上层为DNA上清液。
5. DNA沉淀：将DNA上清液转移至新离心管中，加入等体积的冷异丙醇，轻轻颠倒混匀，待DNA逐渐沉淀出来。
6. 洗涤：使用70%的乙醇洗涤DNA沉淀物，以去除异丙醇和其他杂质。
7. 重溶：将洗涤后的DNA沉淀物用适量的TE缓冲液重溶，使其溶解。
8. 定量和纯化：使用紫外可见分光光度计测定DNA的浓度，并使用凝胶电泳验证DNA的纯度和完整性。
三、结果分析通过以上步骤，我们成功提取了DNA，并进行了初步的纯化。
下面是对实验结果进行分析和评估：1. DNA提取效果评估：- 可见分光光度计测定DNA浓度：根据光度计读数，我们可以计算出DNA的浓度。
通常，越高的读数代表着更高的DNA浓度。
- 凝胶电泳：通过凝胶电泳，我们可以观察到DNA在琼脂糖凝胶上的迁移情况。
理想情况下，DNA应该呈现出清晰的条带，并且没有明显的降解现象。
2. 实验结果评价：- DNA浓度：根据光度计读数，我们可以评估DNA提取的效果。
如果浓度较高，说明提取效果较好；如果浓度较低，说明可能存在提取效果不佳或DNA被降解的情况。
- DNA完整性：通过观察凝胶电泳结果，我们可以评估提取的DNA是否完整。
dna提取的基本步骤及注意事项
dna提取的基本步骤及注意事项DNA提取是分子生物学和遗传学研究中的重要步骤，它可以从生物样本中分离出DNA，为后续的实验和研究提供基础。
以下是DNA 提取的基本步骤及注意事项：一、样本采集1.选择合适的样本：DNA提取可以从多种生物样本中进行，如血液、口腔拭子、组织等。
根据研究目的选择合适的样本。
2.样本采集：采集样本时要注意避免污染和损坏，使用无菌工具和容器进行采集，并储存在低温条件下，以保持DNA的完整性。
二、细胞破碎1.细胞破碎方法：细胞膜是DNA提取的主要障碍，需要使用适当的方法破碎细胞膜，如机械破碎、化学破碎或酶解等。
不同的样本和研究目的可能需要不同的破碎方法。
2.破碎条件控制：在破碎细胞时要注意温度、时间和破碎缓冲液的选择，以保证DNA的完整性和纯度。
三、DNA纯化1.蛋白质去除：DNA提取后可能存在蛋白质、RNA等杂质，需要使用蛋白酶、盐析等方法去除。
注意选择适当的去除方法，避免对DNA的损伤。
2. DNA沉淀：通过添加盐和醇类物质，使DNA从溶液中沉淀下来。
沉淀条件的控制对于提高DNA纯度至关重要。
3. DNA溶解：将DNA沉淀物溶解在适当的缓冲液中，以便后续的实验和储存。
四、DNA质量检测1.比色法：通过比色反应，可以初步判断DNA的浓度和质量。
常用的比色法有吸光度测定法和荧光染料染色法。
2.凝胶电泳：通过凝胶电泳可以进一步检测DNA的大小、纯度和完整性。
根据研究目的选择适当的凝胶，如琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶。
注意事项：1.实验环境要保持清洁和无菌，避免污染样本和提取的DNA。
2.使用无菌工具和试剂，避免外源性DNA的污染。
3.严格控制实验条件，如温度、时间和pH值等，以保证DNA的完整性和纯度。
4.注意样本的储存条件，如低温和避光，以避免DNA的降解和损伤。
5.根据实验目的选择合适的提取试剂盒，以提高提取效率和纯度。
总结：DNA提取是分子生物学和遗传学研究的基础步骤，它从样本中分离出DNA，为后续的实验和研究提供基础。
最全DNA提取步骤
最全DNA提取步骤DNA提取是从生物体内获取DNA的过程，是进行分子生物学研究和遗传学分析的基础。
下面是最全的DNA提取步骤，共包括八个主要步骤：步骤1：收集细胞样本和处理首先，需要选择适当的细胞样本。
细胞样本可以是血液、组织、尿液、唾液等。
然后，将细胞样本在实验室中进行处理和准备。
根据具体的样本类型，处理方法有所不同，但一般包括细胞溶解、洗涤、去除蛋白质和其他杂质等步骤，以准备细胞裂解液。
步骤2：细胞裂解和核酸释放将经过处理的细胞样本放入离心管中，加入细胞裂解液并进行振荡，通过破坏细胞膜和核膜释放细胞内的DNA。
细胞裂解液中含有表面活性剂、酶和盐等，可以破坏膜结构和核酸蛋白质的相互作用，从而释放出DNA分子。
步骤3：蛋白质去除和多聚核苷酸沉淀将经过细胞裂解的样本进行离心，分离蛋白质、DNA和其他核酸组分。
一般使用酚/氯仿法或硅胶柱法去除蛋白质。
其中，酚/氯仿法是通过酚的去除蛋白质，氯仿的去除细胞膜和其他有机物质，从而分离DNA。
硅胶柱法是使用硅胶柱纯化DNA，去除蛋白质、RNA和其他杂质。
步骤4：DNA沉淀和清洗将经过处理的DNA溶液加入盐和酒精，促使DNA形成固体颗粒沉淀。
再次进行离心，将DNA沉淀从上清液中分离出来。
沉淀的DNA需要进行多次洗涤步骤，以去除盐、残留蛋白质和其他杂质。
洗涤可以使用酒精和乙酸，也可以使用通过离心过滤设备。
步骤5：DNA溶解和浓缩将洗涤的DNA沉淀溶解于适当的缓冲液中，将其浓缩至合适的浓度。
一般选择Tris-EDTA缓冲液，pH值在8左右。
通过实验室常用的DNA浓度检测方法，如分光光度法、膜滤法或凝胶电泳等，确定DNA的浓度和纯度。
步骤6：DNA质量检测对提取的DNA进行质量检测，确定其完整性和纯度。
可以使用凝胶电泳、聚合酶链式反应（PCR）、分光光度法等方法进行检测。
凝胶电泳是常用的方法，通过电泳将DNA在凝胶上分离，根据DNA条带的大小和数量来评估提取得到的DNA质量。
提取dna的实验操作方法
提取dna的实验操作方法
提取DNA的实验操作方法主要包括以下步骤：
1. 样本收集：收集所要提取DNA的生物样本。
常见的样本来源包括血液、唾液、细胞培养物、植物组织等。
2. 细胞破碎：将收集到的样本进行细胞破碎，使DNA释放出来。
常用的方法有物理破碎（如超声波破碎、酶解）和化学破碎（如细胞裂解液、洗涤液）等。
3. DNA溶解：将破碎后的细胞样本转移至含有盐和缓冲液的试管中，使DNA 溶解。
4. 蛋白质沉淀：加入蛋白酶K等蛋白质沉淀剂，将样品中的蛋白质去除。
5. DNA沉淀：加入过冷酒精或异丙醇等沉淀剂，使DNA凝结成白色絮状物，然后通过离心将DNA沉淀下来。
6. 洗涤：将沉淀下来的DNA进行洗涤，以去除杂质和残留的沉淀剂。
常用的洗涤缓冲液包括70%乙醇等。
7. 干燥和溶解：将清洗后的DNA样本用空气或真空干燥，然后用缓冲液或去离子水使其溶解。
8. 测定DNA浓度和纯度：使用分光光度计或其他的测定方法，测定提取到的DNA的浓度和纯度。
以上是提取DNA的基本实验操作方法，实际操作中可能会根据具体的实验目的和样本类型进行适当的调整和改进。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
（1）取新鲜或冰冻动物组织块0.5 g，尽量剪碎。
置于玻璃匀浆器中，加入5ml的细胞裂解缓冲液匀浆至不见组织块。
（2）转入2ml 离心管中（转2管或4管），每管转入1ml，用台式离心机以12000 rpm 离心5min,弃上清收集沉淀。
（3）加入300ul 10×TE缓冲液悬浮沉淀
（4）加入100μl 200mg/ml的溶菌酶，37℃水浴1h；
（4）加入50ul 10%SDS ,20μl 20mg/ml蛋白酶K在50℃恒温水浴锅中水浴3h ,间歇振荡数次。
（4）加入100μl 5mol/L NaCl，65℃水浴10min
（5）加等量（570ul）的氯仿：异戊醇(24:1)振荡混匀，离心12000 rpm，10min。
（6）.取上层溶液至另一管，加入等体积的酚：氯仿:异戊醇(25：24:1)，振荡混匀，离心12000 rpm，10min，取上层溶液至另一管，重复一次。
（7）加入2倍体积的无水乙醇，混匀后室温沉淀20min ，12000 rpm离心,10min。
小心倒掉上清液，将离心管倒置于吸水纸上，将附于管壁的残余液滴除掉。
（8）用1ml 70%乙醇洗涤沉淀物1次，离心12000 rpm ，5min。
小心倒掉上清液，将离心管倒置于吸水纸上，将附于管壁残余液滴除掉，室温干燥。
（11）加200ul 灭菌水重新溶解沉淀物。
（12）Nanophotometer仪测定DNA浓度及OD值。
（13）-20℃保存备用。
1.3.2菌群16S rRNA基因V3高变区PCR扩增
（1）16S rRNA基因V3高变区通用引物：
V3F：5’-CGC CCG CCG CGC GCG GCG GGC GGG GCG GGG GCA CGG GGG GCC TAC GGG AGG CAG CAG-3’
V3R：5’- ATT ACC GCG GCT GCT GG-3’
其中，CGC CCG CCG CGC GCG GCG GGC GGG GCG GGG GCA CGG GGG G为GC 夹。
（2）反应体系（25 μl）：
gDNA 0.5μl
V3F 2.5μl
V3R 2.5μl
Taq buffer（Mg2+ free） 2.5μl
MgCl2 2.5μl
dNTPs 0.5μl
Taq酶0.5μl
ddH2O 13.5μl
Total 25μl
其中，所有样本gDNA在PCR扩增前均稀释到40ng/μl，即每个反应体系中加入的gDNA均为20ng。
（3）反应条件首先采用Touch-down程序：94℃，3 min预变性；94℃，1 min变性；65℃，1 min退火；72℃，1 min延伸，之后每两个循环退火温度就下降1℃，直到退火温度降到55℃，再以此为退火温度循环4次；72℃，5 min延伸；4℃，10min。
随后通过对PCR产物进行Recon-condition PCR去除嵌合体以及异源双链的影响：94℃，3 min预变性；94℃，1 min变性；55℃，1 min退火；72 ℃，1 min延伸；共6个循环；72℃，10 min延伸；4℃，forever。
（4）扩增产物检验：将扩增产物上样于2%琼脂糖凝胶［9］Gel Red染色，于1×TAE 缓冲液中150V电泳30min，以2000bp DNA marker为Marker，使用凝胶成像系统Syngene 进行检验。
1.3.3 变性梯度凝胶电泳（DGGE）
以下操作均按照DGGE仪The DCode TM Universal Mutation Detection System说明书进行。
DGGE凝胶制备：
（1）用洗涤液仔细清洁矩形玻璃平板，横竖分别擦洗三遍，随后用去离子水将其彻底漂洗干净。
操作时须带手套，并且只能握持玻璃平板的边缘，以防止玻璃平板的灌胶面受到污染。
（2）将较大的玻璃平板平放于工作台上，将相同厚度的两块垫片分别放置于玻璃平板左右两短边上，然后将较小的玻璃平板放置于垫片上，同时使两块玻璃平板的底部对齐，从而在两块玻璃之间形成灌胶夹层。
（3）将夹层钳放置于玻璃平板两短边上，调整位置使两块玻璃平板嵌入夹层钳的槽口，随即旋紧夹层钳的螺杆将玻璃平板夹紧。
（4）将上述装置放置于灌胶支架的对齐插槽中，使较小的玻璃板面向操作者。
松掉夹层钳的螺杆，在两块玻璃平板之间插入比齐卡并进行适当调整，使垫片和玻璃平板及夹层钳平行。
（5）取出比齐卡并检查，如果各部件已经对齐且密封性良好则将夹层钳螺杆旋紧。
否则重复步骤4-5。
（6）将灰色海绵放置于灌胶支架前插槽上，将步骤5中准备好的装置放置于海绵上，同时使较小的玻璃板面向操作者。
然后将其固定。
（7）分别将两注射器标记为LO（低浓度溶液）和HI（高浓度溶液），并分别与15.5cm 的聚乙烯管相连，同时将其放置于梯度形成系统的正确位置，使之能与该系统的杠杆正确连接。
（8）在梯度形成系统上设置进样体积，本实验选用16×16cm（1mm厚）凝胶，故将进样体积设置为13.5ml。
（9）在已配制好的高浓度变性剂和低浓度变性剂的丙烯酰胺原液中加入10%的过硫酸铵和TEMED后混匀。
用已接好聚乙烯管的HI注射器和LO注射器分别吸入高浓度变性剂溶液和低浓度变性剂溶液各15ml。
本实验选用变性剂浓度梯度为35%-55%，其原液组成如下：
变性剂浓度35% 55%
40%丙烯酰胺4ml 4ml
50×TAE 0.5ml 0.5ml
去离子甲酰胺 2.8ml 5.2ml
尿素 2.94g 5.46g
ddH2O 定容到20ml 定容到20ml
（10）小心排除两注射器中的空气并将其与梯度形成系统的杠杆连接，同时将两注射器上的聚丙烯管与分别与三通管的两个通道相连，三通管剩下的一个通道通过9cm的聚丙烯管与灌胶夹层相连，采用顶部灌胶的方法制备变形梯度凝胶。
（11）缓慢均匀地转动梯度形成系统上的凸轮，使丙烯酰胺溶液逐渐充满灌胶夹层并形成变形梯度。
（12）灌胶完成后，小心插入梳子。
室温放置1h，待凝胶聚合后小心地拔出梳子。
用1×TAE缓冲液冲洗凝胶孔，以除去可能残留其中的未聚合的丙烯酰胺。
DGGE电泳：
（1）上样前将1×TAE缓冲液预热到60℃并在此温度下进行电泳。
（2）取5μl PCR产物与5μl 2×Gel Loading Dye混合，用10μl微量移液器加到凝胶上的加样孔里。
（3）220V，电泳10分钟。
随后85V，电泳13小时。
（4）电泳结束后对凝胶进行染色，使用GS-800灰度扫描仪成像。
通过Bionumerics 软件对DGGE分子指纹图谱进行相关分析。