花粉活力测定(精)
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法花粉是植物生殖过程中非常重要的一环,其生活力的测定对于植物繁殖和生长具有重要意义。
花粉生活力测定方法是通过一系列的实验和观察,来评估花粉的生长和发育能力,从而为植物的繁殖提供科学依据。
本文将介绍几种常见的花粉生活力测定方法,希望能够对相关领域的研究者和爱好者有所帮助。
首先,传统的花粉生活力测定方法是通过染色观察花粉管的生长情况。
首先,将采集到的花粉悬浮在含有营养液的培养基中,然后观察花粉管在一定时间内的生长情况,通过显微镜观察花粉管的长度和形态,从而评估花粉的生活力。
这种方法简单直观,但需要显微镜等设备,且操作较为繁琐。
其次,现代的花粉生活力测定方法中,常用的是荧光显微镜观察法。
通过将花粉与特定的荧光染料结合,使花粉在荧光显微镜下呈现出特定的荧光信号,从而可以清晰地观察花粉管的生长情况。
这种方法操作简便,观察效果明显,对于大规模的花粉生活力测定具有很大的优势。
另外,还有一种常见的花粉生活力测定方法是通过花粉萌发率来评估花粉的生活力。
这种方法是将采集到的花粉悬浮在含有营养液的培养基中,然后观察一定时间内花粉的萌发情况,通过统计萌发的花粉数量来评估花粉的生活力。
这种方法简单易行,可以在较短的时间内获取较为准确的结果。
除了上述几种方法外,还有一些新兴的花粉生活力测定方法,如分子生物学技术的应用、电子显微镜的观察等,这些方法在花粉生活力测定领域也取得了一些重要的进展。
综上所述,花粉生活力测定是植物繁殖和生长研究中的重要内容,而花粉生活力的准确测定则需要科学、准确的方法。
不同的方法各有优劣,研究者可以根据具体的实验目的和条件选择适合的方法进行花粉生活力的测定,从而为植物繁殖和生长研究提供可靠的数据支持。
希望本文介绍的几种常见的花粉生活力测定方法对相关领域的研究者和爱好者有所帮助,也希望在未来的研究中能够有更多更准确的花粉生活力测定方法被发展和应用。
花粉活力测定的3种办法
精心整理实验16?花粉活力的测定在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力的鉴定。
掌握花粉活力快速测定的方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
一、花粉萌发测定法【原理】水放???????1.用。
2.20℃条???????1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同,应依植物种类而改变培养条件。
???2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度,离体时间,环境条件等因素对花粉活力的影响。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发,本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。
二、碘-碘化钾染色测定法多数植物正常的成熟花粉粒呈球形,积累较多的淀粉,I2-KI溶液可将其染成蓝色。
发育不良的花粉常呈畸形,往往不含淀粉或积累淀粉较少,I2-KI溶液染色呈黄褐色。
因此,可用I2-KI溶液染色来测定花粉活力。
【器材与用具】???显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
???【试剂】-KI300ml。
???I2~3张片??基四氮唑)还原成红色的TTF(三苯基甲??)而使其本身着色,无活力的花粉呼吸作用较弱,TTC 的颜色变化不明显,故可根据花粉吸收TTC后的颜色变化判断花粉的生活力。
【器材与用具】显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;恒温箱;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
【试剂】0.5%TTC溶液:称取0.5gTTC放入烧杯中,加入少许95%酒精使其溶解,然后用蒸馏水稀释至100ml。
溶液避光保存,若发红时,则不能再用。
采集任何植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上,加1~2滴0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,置35℃恒温箱中,10~15min后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。
观察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的活力百分率。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法花粉生活力测定方法是一种评估人们对花粉过敏的程度和生活质量的指标。
它通过采用定量和定性的方法来测定人体对花粉的反应和影响,以便为患者提供相应的治疗和干预措施。
下面我将详细介绍花粉生活力测定方法的原理和步骤。
首先,花粉生活力测定方法需要进行花粉源的采集和制备。
花粉源可以是空气中的自然环境采集或人工培养的花粉。
采集后,需要将花粉样本进行处理和制备,包括去除杂质和保持花粉的活力。
其次,花粉生活力测定方法中常用的技术是皮试和血清学检测。
皮试是一种常用的检测方法,主要通过在患者皮肤表面划一道小口,然后将一定浓度的花粉溶液滴在皮肤上,观察皮肤是否出现过敏反应,如红肿、瘙痒等。
这种方法简单快捷,可以初步筛查患者的过敏反应。
血清学检测是通过采集患者的血液样本,检测血清中花粉特异性IgE抗体水平来评估过敏反应的程度。
常用的检测方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA),这些方法可以检测到血液中特定花粉过敏原的抗体水平,并根据抗体浓度的高低来评估患者的过敏程度。
除了皮试和血清学检测,还可以进行生活质量评估。
这是一种主观的方法,通常通过问卷调查的方式,询问患者对花粉过敏的影响程度和日常生活质量的变化。
问卷通常包括患者的症状、疾病活动、工作和学习能力、社交活动和睡眠质量等方面的评估,以便评估花粉过敏对患者生活的影响。
最后,花粉生活力测定方法可以通过统计分析和数据处理来得出评估结果。
根据皮试和血清学检测的结果、生活质量评估和患者的症状表现等,可以综合评估花粉过敏的程度和生活质量的变化。
这些评估结果可以帮助医生为患者制定个性化的治疗方案,包括药物治疗、免疫疗法和生活调整等。
综上所述,花粉生活力测定方法是评估人们对花粉过敏的程度和生活质量的一种指标。
通过采用皮试和血清学检测、生活质量评估等方法,可以全面分析患者的过敏反应和生活质量的变化,为患者提供针对性的治疗和干预措施。
这种方法对于花粉过敏的预防和管理具有重要的临床意义。
2实验二、花粉生活力测定
前 言
花粉生活力测定在育种 力 2.雄性不育系的鉴定
实验目的:
学习并初步掌握作物花粉生 活力测定的常用方法
测定方法:
(一)I-KI染色鉴定
(二)TTC染色鉴定
(三)花粉粒发芽鉴定
实验方法 I-KI染色鉴定:
正常的成熟花粉粒体积较大, 并含有大量的淀粉粒,遇I-KI 呈紫黑色,不正常的花粉粒体 系较小、有时畸形、染色浅或 不染色。
实验方法 TTC染色鉴定:
具有生活力的花粉中含有 脱氢酶,它能催化引物使脱下 的氢与TTC结合,生成红色化 合物甲替。凡有生活力的花粉 呈红色,生活力弱的呈浅红色, 无生活力的不显色或成黄色。
实验方法
花粉粒发芽鉴定:
在人工培养基上进 行发芽试验,可以比较 准确地判断花粉的生活 力。
实验步骤
I-KI染色鉴定:
2 .准备 TTC 染色和发芽试验的材料, 置培养箱保温; 3.调试显微镜,I-KI染色鉴定; 4.TTC染色鉴定、发芽率调查。
作业
实验三、作物花粉生活力测定 1.测定方法和原理: (一)I-KI染色鉴定:正常的成熟花粉粒体积较大,并含有大量的淀粉 粒,遇I-KI呈紫黑色,不正常的花粉粒体系较小、有时畸形、染色浅或 不染色。 (二)TTC染色鉴定:具有生活力的花粉中含有脱氢酶,它能催化底物 使脱下的氢与TTC(氯化三苯基四氮唑)结合,生成红色化合物甲替。 凡有生活力的花粉呈红色,生活力弱的呈浅红色,无生活力的不显色或 成黄色。 (三)花粉粒发芽鉴定:在人工培养基上进行发芽试验,可以比较准确 地判断花粉的生活力。 2.实验结果: 材料 I-IK染色率% TTC染色率% 发芽率%
用镊子夹一个花药于载玻片 上滴上一滴1%I-KI溶液 用镊子将花药夹碎并把碎片 去干净盖上盖玻片置显微 镜下观察。
实验:园艺植物花粉生活力测定
天竺葵柱头上的花粉粒
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
蒂氏荚蒾花粉(灰色) 其中一个已开始萌发
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
勿忘草的花粉 最小的花粉粒之一,直径只有0.005毫米
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
花锦葵属植物的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
桦树的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
柳树花粉粒
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
染色者为发育不良、生活力弱的花粉。观察3~4个视野,
五、方法步骤:
(三)花粉生活力试验
3.取另一载玻片,加少量同种待测花粉,然后在花
粉上滴试剂Ⅰ和试剂Ⅱ各一滴,仔细搅匀,盖上盖
玻片,用镊子轻轻压实。经3~4分钟后,放在显微
镜下检查。
有生活力的花粉呈红色或玫瑰色,无生活力的 花粉为黄色或无色,连续观察3~4个视野,分别记 录有生活力及无生活力的花粉数。
银叶树花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
凤梨科植物的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
银叶树花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法
花粉生活力是指花粉颗粒的活力和生长能力,是衡量植物繁殖成功的重要指标。
花粉生活力测定方法是一种用来评估花粉质量和活力的技术手段,对于植物繁殖和种子生产具有重要意义。
传统的花粉生活力测定方法主要包括花粉染色观察法、花粉萌发率测定法和花
粉活力染色法。
花粉染色观察法是将花粉染色后在显微镜下观察其形态和数量,从而评估花粉的活力和质量。
花粉萌发率测定法则是将花粉培养在适宜的培养基上,观察其萌发情况以评估花粉的活力。
花粉活力染色法则是利用染色技术来观察花粉内部的活力指标,如线粒体和细胞核的活跃程度。
随着科学技术的发展,现代的花粉生活力测定方法也在不断完善和创新。
比如,利用生物技术手段对花粉进行基因测序和分析,可以更准确地评估花粉的生活力和遗传信息。
同时,利用先进的显微镜和成像技术,可以对花粉的微观结构和形态进行更精细的观察和分析。
花粉生活力测定方法的发展不仅有助于科学家和植物育种者更好地了解植物的
繁殖机制和生长规律,也为农业生产和生态保护提供了重要的技术支持。
通过准确评估花粉的生活力,可以选择出高质量的花粉进行人工授粉或者种子生产,从而提高植物的繁殖成功率和产量。
此外,对花粉生活力的准确测定也有助于保护植物遗传资源,促进植物多样性的保护和利用。
总之,花粉生活力测定方法是一项重要的植物科学技术,它为我们深入了解植
物繁殖机制和提高农业生产效率提供了重要的技术手段和支持。
随着科学技术的不断进步,相信花粉生活力测定方法将会在未来发挥更加重要的作用。
花粉活力测定的3种方法
欢迎阅读实验16?花粉活力的测定在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力的鉴定。
掌握花粉活力快速测定的方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
一、花粉萌发测定法90ml 水放???????1.用。
2.采集丝瓜、南瓜或其他葫芦科植物刚开放或将要开放的成熟花朵,将花粉洒落在涂有培养基的载玻片上,然后将载玻片放置于垫有湿滤纸的培养皿中,在25℃左右的恒温箱(或室温20℃条件下)中孵育,5~10min 后在显微镜下检查5个视野,统计其萌发率。
????【注意事项】???1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同,应依植物种类而改变培养条件。
???2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度,离体时间,环境条件等因素对花粉活力的影响。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发,本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。
-KI溶I2??????【试剂】-KI溶液:取300ml。
???I2贮于棕色瓶中备用。
【方法】采集水稻、小麦或玉米可育和不育植株的成熟花药,取一花药于载玻片上,加一滴蒸馏水,用镊子将花药捣碎,使花粉粒释放,再加1~2滴I2-KI溶液,盖上盖玻片,在显微镜下观察。
凡是被染成蓝色的为含有淀粉的活力较强的花粉粒,呈黄褐色的为发育不良的花粉粒。
观察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的育性。
??【注意事项】此法不能准确表示花粉的活力,也不适用于研究某一处理对花粉活力的影响。
因为三核期退化的花粉已有淀粉积累,遇碘呈蓝色反应。
另外,含有淀粉而被杀死的花粉粒遇I2-KI也呈蓝色。
氯化三苯100ml【方法】?采集任何植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上,加1~2滴0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,置35℃恒温箱中,10~15min后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。
实验一 花粉生活力的测定
【思考题】 1 用染色法计算花粉生活力(3个视野)。用 发芽法计算花粉生活力(3个视野)。 2 同一品种花粉用不同方法测定时其生活力 高低的结果分析。
【实验方法与步骤】 鉴定花粉生活力的方法有很多,概括起来 不外下列几种:一是将待测花粉直接授粉, 最后计算结实数和结籽数;二是将花粉授 到柱头上,隔一定时间切下柱头,在显微 镜下观察花粉萌发情况,测定萌发率;三 是形态观察;四是染色观察;五是在人工 培养基上播种花粉,观察萌发率。
1 形态观察法 一般把具有品种典型性的花粉(指具有该 品种花粉粒的大小、形态和色泽等)作为 具有生活力的花粉,把小型的、皱缩的、 畸形的作为无生活力的花粉。 形态观察的具体方法是:首先将花粉置于 载玻片上,在显微镜下查看三个视野,要 求被检查的花粉粒总数达100粒以上,计算 正常花粉粒占总数的比率。此法简便易行 但准确性差,通常只用于测定新鲜花粉的 生活力。
通常花粉的形态、花粉中酶的活性以及积 累淀粉(淀粉质花粉)的多少与花粉生活 力密切相关,因此可以利用花粉的形态观 察、过氧化物酶、脱氢酶的活性高低、淀 扮的含量以及在人工培养基上花粉管萌发 的情况作为确定花粉生活力高低的标准。
【实验材料、主要仪器及试剂】 1 实验材料 各种园林植物的花粉。如百合、牡丹、凤仙花、 柳树、菊花、月季、凤仙花、紫茉莉等植物的花 粉。 2 主要仪器 载玻片、凹玻片、盖玻片、解剖针、毛笔、棉球、 显微镜、恒温温箱、瓷盘、镊子、培养皿、玻璃 棒、玻璃铅笔、凡士林、标签、冰箱。 3主要试剂 碘-碘化钾、氯化三苯基四氮唑、 Na2HPO4· 2H2O、KH2PO4、蔗糖或葡萄糖溶液、 H3BO3,Ca(NO3)2,MgSO4,KNO3。
(2)培养基发芽法 a.培养基的制备:在250 mL的烧杯中加 入90 mL蒸馏水,再加入1g的琼脂,在酒精 灯上加热,使之完全熔解,然后加入10g蔗 糖,制成10%的糖液(如有可能,可配置 不同含糖量的培养基,进行比较试验)。 注意用玻璃棒不断搅拌,使其融化均匀, 有条件时还可加入微量柱头渗出液、维生 素等以形成花粉粒发芽的最适环境条件。
育种实验-花粉生活力的测定2011春
三、方法
(二)花粉生活力试验 经贮存的花粉,在使用之前必须作生活力的测定以鉴 定其量。 测定花粉生活力的方法主要有三种。
活体萌发法
离体萌发法
染色法
1、花粉发芽法
人为的创造适合于花粉发芽的环境条件,以花粉发芽的情况 来鉴定花粉生活力的强弱。
(1)培养基的制作与接种
一般采用5~20%蔗糖或葡萄糖加1~2%琼脂,溶于蒸馏水中。 加热煮沸即可,将已配制好的培养基保持在40℃温度即不凝 固,用玻璃棒点一点培养基敷在载玻片的凹坑内,然后用头 发(接种针或解剖针)沾以少量花粉。条播(轻轻振动,使 花粉均匀地撒在培养基上),将载玻片放在垫有湿润棉花培 养皿内或倒扣在培养皿上,并贴上标签写明处理、种类、播 种日期,将培养皿放于(20_25℃)的恒温箱中培养。
表1 花 粉 生 活 力 观 察 记 载 表
种处 类理
花粉发芽率(或染色后具有生活力的花粉百分率) 时间 重复I 重复Ⅱ 重复Ⅲ 总 计
发 发 发 发 花 未 发 花 未 发 花 未 发 芽 芽 芽 芽 播 检 粉 发 芽 粉 发 芽 粉 发 芽 种 查 率 率 率 率 数 芽 数 数 芽 数 数 芽 数 % % % % 发 芽 法 染 色 法
本实验的主要目的是掌握花粉贮藏和花粉生活力测定的 方法。
二、材料及用具
材料:梨的花粉。 用具:显微镜、盖玻片、载玻片、凹式载玻 片、滴瓶、培养皿、天平、烧杯、 玻璃棒、微波炉
试剂:I-KI溶液、蒸馏水、蔗糖、琼脂等。
三、方法
(一)花粉贮藏 从发育良好的植株上采下将开的花朵、取出花药放 在纸上或培养皿中,放于干燥的室内阴干,令其开裂, 花药裂开后将花粉倒入小玻璃瓶或指形管中,口上塞 以棉花或橡皮塞,贴上写有品种名称的标签。再把花 粉瓶放于干燥器内,使花粉在空气相对湿度较低的条 件下(一般0~40%)保存;为了减少呼吸作用,可以 放在低温(0~4℃)黑暗的地方贮藏。
花粉生活力测定
花粉萌发率变化图
冰箱保存 常温保存
天数
5
10
15
20
25
30
35
精品资料
六 结论(jiélùn)
柱状图:不同温度保存相同时间下,冰箱保 存的萌发(méngfā)率高于常温保存
随时间增长两者萌发(méngfā)率都呈下降趋 势
折线图:3-6天内冰箱保存萌发(méngfā)率 下降较快
出现平缓的趋势,可能是实验存在误差 没有达到预期的效果,冰箱保存应该生活力
精品资料
4、镜检 在显微镜下隔一定时间检查(jiǎnchá)一次(花粉发芽快的
经过几个小时即可观察到已经发芽,慢的需24小时以上),若 发现花粉已发芽时,就随机地在显微镜下取5个视野,记录花粉 粒总数和发芽数,算出平均值,将观察结果填入表内。
花粉发芽的标准,以花粉管伸长超出花粉直径为准。若花 粉发芽率在5%以下,为极弱,不能采用。 (花粉发芽率=发芽 花粉总数\花粉总数)培养过程要密切观察,不可使花粉管萌发 的太长,否则难以计数。
★ 培养基法能够统计出百分率,准确度高 ,但是操作相对复杂(fùzá),而且花粉发芽 条件与实际不完全相符易受培养基配方的 影响导致结果的偏差。
精品资料
配置培养基( 100ml水+1g+琼脂+0.01g硼酸+ 5-20g糖 ) 煮沸溶化
用玻棒分装与凹玻片中 播撒花粉
置于培养皿中20-25℃恒温培养数小时 保持(bǎochí)湿度
同期花粉萌发(méngfā)率对比图
萌发率
花粉生活力变化图
常温
冰箱 80.00%
60.00%
40.00%
20.00%
0.00% 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30 时间
实验二 花粉生活力的测定
实验二花粉生活力的测定一实验目的掌握花粉生活力鉴定的方法和原理二实验材料羽衣甘蓝、矮牵牛、三色堇等植物的花粉三仪器及药品载玻片、盖玻片、解剖针、镊子、标签、记号笔、显微镜、天平、烧杯、培养皿、玻璃棒、滴管、量筒、电炉、石棉网、烘箱蔗糖、琼脂、蒸馏水、磷酸二氢钾、磷酸二钠、TTC四实验原理花粉的形态、花粉中酶的活性以及积累淀粉的多少通常与其生活力密切相关,因此可利用花粉的形态观察过氧化物酶、脱氢酶活性的高低、淀粉的含量以及在人工培养基上花粉管萌发的情况作为鉴定花粉生活力高低的标准。
鉴定花粉生活力的方法很多,主要有1 直接鉴定法2 形态观察法3 染色观察法4 培养基发芽法五实验步骤花粉生活力的测定染色观察法——TTC染色1 配置TTC染色液,称取0.5gTTC溶于100ml磷酸盐缓冲液中,装入棕色瓶2 制片:取少量花粉于载玻片上,滴入1~2滴0.5%TTC染色液,用镊子搅拌均匀,盖上盖玻片,于35~40°C条件静置15~20min。
3 观察统计:在显微镜下观察三个不同视野。
凡被染成红色或玫瑰色都是有生活力的花粉.培养基发芽法——固体培养基1 配制培养法:取1g琼脂,5g蔗糖,量94ml蒸馏水,装入烧杯,加热使琼脂溶化,配成5%浓度培养基。
同法配置10%、15%、20%浓度的培养基。
2 制片:用滴管吸取少量培养基,趁热滴在载玻片上,使放置凝固。
3播种花粉:少量的花粉均匀撒播4培养与观察:将制好的片子放在垫有湿润滤纸的培养皿内,于20—22℃温箱中培养。
待花粉萌发后于显微镜下观察,并统计发芽率,观察是每片随机取三个视野,统计花粉总数,计算平均发芽率。
六作业及思考题同种植物材料培养基法测得的花粉生活力较低染色法测得的花粉生活力较高原因:因为用染色法时,只要是有活力的花粉粒就会被染上颜色,而有活力的花粉粒却不一定会萌发。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法花粉生活力是指花粉颗粒在一定条件下保持生活状态并完成受精的能力。
花粉生活力的测定对于植物的繁殖和育种具有重要意义。
下面将介绍几种常用的花粉生活力测定方法。
1. 离体培养法。
离体培养法是一种常用的花粉生活力测定方法。
首先需要收集新鲜花朵,取出花药,然后将花药中的花粉颗粒悬浮在含有营养物质的培养基上进行培养。
在适宜的温度和湿度条件下,观察花粉颗粒的萌发和生长情况,从而判断花粉的生活力。
这种方法简单易行,能够直观地观察花粉的生活状态。
2. 着色法。
着色法是另一种常用的花粉生活力测定方法。
该方法使用活性染料或染色剂对花粉颗粒进行染色,然后观察染色后的花粉颗粒对染色剂的反应情况。
通过观察染色颗粒的颜色变化和形态特征,可以判断花粉颗粒的生活力。
这种方法操作简便,结果直观,适用于大规模的花粉生活力测定。
3. 离体染色法。
离体染色法是一种较为精细的花粉生活力测定方法。
该方法首先将花粉颗粒置于含有染色剂的培养基中进行染色,然后观察染色颗粒的颜色变化和形态特征。
通过观察染色颗粒的反应情况,可以准确地判断花粉颗粒的生活力。
这种方法需要较为精细的操作和观察,但结果准确可靠。
4. 离体培养-染色法。
离体培养-染色法是一种结合了离体培养和染色法的花粉生活力测定方法。
该方法首先将花粉颗粒进行离体培养,然后在培养基中加入染色剂进行染色,最后观察染色颗粒的反应情况。
通过结合离体培养和染色的方法,可以更准确地判断花粉颗粒的生活力。
这种方法需要较为复杂的操作,但结果具有较高的准确性。
总结。
花粉生活力的测定对于植物的繁殖和育种具有重要意义,而不同的测定方法各有优劣。
离体培养法简单易行,适用于初步的花粉生活力测定;着色法操作简便,适用于大规模的花粉生活力测定;离体染色法结果准确可靠,适用于精细的花粉生活力测定;离体培养-染色法结合了离体培养和染色的优点,结果具有较高的准确性。
选择合适的花粉生活力测定方法,可以为植物的育种工作提供有力的支持。
花粉活力测定实验报告
花粉活力测定实验报告
实验目的:
本实验旨在测定花粉活力,探究花粉活力与种子萌发率的相关性,并为进一步了解植物繁殖提供基础数据。
实验材料:
需要用到的材料有:钟形筛、山梨酸钠、花粉液、蒸馏水、苏木素、石蜡、显微镜、玻片、载玻片等。
实验步骤:
1.取50个种子,分别放置在两个装有10mL山梨酸钠液的钟形筛中,浸泡12小时,使其吸满山梨酸钠液,为后续实验做准备。
2.将钟形筛里的山梨酸钠液倒出,并加入2mL的花粉液,然后用提供的细铁丝轻轻将花粉液和种子混合均匀,将盖在钟形筛口上的细网状皮纸去掉,取下筛分别晾干。
3.取约4g石蜡,烧入沸水,制成石蜡板。
4.取刚才的花粉和种子混合物,用丙酮水溶液进行固定处理,将处理后待测物制成薄层切片,厚度约为5µm,并在普通显微镜下以40倍目镜下进行测定。
5.在测定器上,取一端已蒸发完的种子粘贴于载玻上,于另一角上滴几滴蒸馏水,将另一玻片压上,以便能观察到花粉在萌发过程中对种子萌发的影响。
实验结果:
通过实验,我们发现在花粉液与山梨酸钠液比例为1:10时,花粉萌发的能力较高。
实验结果表明,萌发率与花粉活力呈正比关系。
同时,我们还观察到花粉对萌发过程产生了显著的影响,使种子萌发率提高了约20%。
结论:
通过本次实验,我们深入了解了花粉活力测定的方法和实验步骤,比较水平地掌握了实验操作技术,得到了可靠的实验结果。
我们还发现花粉具有显著的萌发促进作用,为深入探究植物繁殖乃至生物学领域提供了重要参考数据,对于加深我们对植物学的认识也具有一定意义。
花粉生活力测定
2.2.3花粉生活力测定
对不同猕猴桃雄株的花粉生活力测定:先对新鲜花粉进行生活力测定,之后每三天间用染色观察法对猕猴桃花粉进行生活力测定(当生活力持续稳定的时候半个月测定一次,直至一年)。
三次重复,每个重复观察三个视野,计算其生活力,记录结果。
2.2.
3.1 染色法测定:采用TTC法[13]测定花粉生活力
原理:凡具有生活力的花粉,其呼吸作用过程中都有氧化还原作用,而无生活力的花粉则无此反应,因此,当TTC渗入有生活力的花粉时,其脱氢酶在催化去氢过程中与TTC结合,使无色的TTC变成TTF而呈红色。
方法:取少量花粉于载玻片上,滴0.5%TTC溶液1~2滴,用镊子搅拌均匀,盖上盖玻片,将此片置于35~40℃的条件下15-20min,在显微镜下观察不同的三个视野,凡被染成红色的均为有生活力的花粉粒。
观察三张片子,每片统计3个视野中花粉粒总数与着红色的花粉粒数。
不同处理花粉生活力观察记录表见表2。
花粉活力测定(精)
花粉活力测定一、实验原理:TTC 染色法—— TTC (2, 3, 5-三苯基氯化四氮唑的氧化态是无色的,可被氢还原成不溶性的红色三苯甲潛(TTF 。
用 TTC 的水溶液浸泡花粉,使之渗入花粉内,如果花粉具有生命力,其中的脱氢酶就可以将 TTC 作为受氢体使之还原成为红色的TTF ;如果花粉死亡便不能染色; 花粉生命力衰退或部分丧失生活力则染色较浅或局部被染色。
因此, 可以根据花粉染色的深浅程度可鉴定花粉的生命力。
培养基萌发法——常的成熟花粉粒具有较强的活力, 在适宜的培养条件下便能萌发和生长,在显微镜下可直接观察计算其萌发率,以确定其活力。
二、实验仪器:载玻片、盖玻片、显微镜、镊子、毛笔、滤纸、培养皿、三角瓶、天平、烧杯、恒温箱、量筒、吸管三、实验药品:0.5%TTC溶液、琼脂、硼酸、氯化钙、蒸馏水、蔗糖 (浓度分别为 5%、 10%、 15%、 20%四、实验步骤:TTC 法:将采集到的花粉 (虞美人、三色堇 , 取少许放在干洁的载玻片上, 加1~2滴 0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,并用清水做对照,置 37℃恒温箱中, 30min 后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。
每片取 3个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的活力百分率。
培养基萌发法:1. 将培养基熔化后,用吸管蘸少许,涂布在载玻片上2. 将花粉(虞美人、三色堇洒落在涂有培养基的载玻片上,然后将载玻片放置于垫有湿滤纸的培养皿中,置于 25℃左右的恒温箱中, 24小时后在显微镜镜检,每片取3个视野,统计其萌发率。
五、实验结果:TTC 法:虞美人花粉活力—— 26.1%三色堇花粉活力—— 23%培养基萌发法:蔗糖浓度 5% 10% 15% 20%虞美人花粉活力 1.3% 0.79% 2.2% 9.6%三色堇花粉活力 8.7% 22.2% 46.9% 32.8%六、结果分析:1、 TTC 法:三色堇花粉染色在 30分钟时观察时基本没有染色, 50分钟左右观察,才有明显染色的划分出现,原因可能是花粉对 TTC 的敏感度不同2、培养基萌发法:不同糖浓度下花粉的萌发率不同,虞美人花粉在 20%的糖浓度下活力最强,三色堇花粉在 15%的糖浓度下活力最强。
园艺植物花粉的贮藏和生活力的测定(精)
2.培养法
(1)原理
正常的成熟花粉粒具有较强的活力,在适宜的培 养条件下便能萌发和生长,在显微镜下可直接观 察计算其萌发率,以确定其活力。
(2)方法步骤
①将培养基熔化后,用玻棒蘸少许,涂布在凹玻 片上,放入垫有湿润试纸的培养皿中,保湿备用。 ②在25℃左右的恒温箱中培养,5~10min后在显 微镜下检查5个视野,统计其萌发率。
6.置于干燥器内(干燥器底部放入适量的碳酸钙 或氯化钙)
7.将干燥器放于冰箱内(温度接近0℃而又是黑暗 的条件)贮藏备用。
(二)花粉生活力的测定 1.染色法—I-KI
(1)实验原理:碘遇淀粉变兰色,正常的花粉淀粉含量高 而不正常的花粉含量少,正常的染成兰色颜色较深; 生活力弱的染成淡兰色;无生活力的染色呈黄褐色 (2)方法步骤:在载玻片上放有少量测定花粉,然后在花 粉上滴一滴染色液,用玻棒将之混匀后,在显微镜下 镜检,每片观察5个视野,统计出具有生活力的花粉的 百分率
2-2南瓜的雄花和雌花
三、方法和步骤
(一)花粉的收集和贮藏 1.收集花粉的植株必须是健壮,并具有标准的特 征特性。 2.收集前一、二日将开放的花蕾(或花序)进行 套袋,以免其他花粉混入。
3.采集时应该选择将开放的花朵。
4.用镊子(镊子宜先用酒精浸洗,以免不同的花 粉混入)将花药取下。
花 粉
5.装入已消毒而且干燥的花粉瓶内
在载玻片上放有少量测定花粉然后在花粉上滴一滴染色液用玻棒将之混匀后在显微镜下镜检每片观察5个视野统计出具有生活力的花粉的百分率正常的成熟花粉粒具有较强的活力在适宜的培养条件下便能萌发和生长在显微镜下可直接观察计算其萌发率以确定其活力
实验二
园艺植物花粉的贮藏和生活力的测定
一、实验目的
花粉活力测定实验报告
一、实验目的1. 了解花粉活力测定的原理和方法。
2. 掌握花粉采集、处理和观察的基本技能。
3. 通过实验,了解不同条件下花粉活力的变化规律。
二、实验原理花粉活力是指花粉在正常条件下萌发的能力,是植物杂交、育种和生产的重要指标。
花粉活力测定方法主要有染色法和萌发法。
本实验采用萌发法测定花粉活力。
三、实验材料1. 植物材料:番茄、小麦、玉米等。
2. 试剂:TTC染色液、盐酸、蒸馏水等。
3. 仪器:显微镜、培养皿、移液器、酒精灯等。
四、实验步骤1. 花粉采集在植物开花期,选择花药饱满、颜色鲜亮的植株,用镊子轻轻取出花药,放入培养皿中。
2. 花粉处理将花药置于酒精灯火焰附近,用镊子轻轻敲打花药,使花粉散落。
用移液器将花粉收集到盛有盐酸的试管中,置于酒精灯上加热,使花粉与盐酸混合均匀。
3. 花粉染色将处理好的花粉溶液滴加到载玻片上,用移液器滴加TTC染色液,使花粉染色。
将载玻片置于显微镜下观察。
4. 花粉萌发将染色后的花粉载玻片置于适宜温度和湿度的培养箱中,观察花粉萌发情况。
以花粉管长度超过花粉粒直径为标准,记录萌发花粉的数量。
5. 数据处理计算萌发花粉的百分比,分析不同条件下花粉活力的变化规律。
五、实验结果与分析1. 不同植物花粉活力比较实验结果表明,不同植物花粉活力存在差异。
例如,番茄花粉活力较高,小麦花粉活力较低。
2. 不同处理方法对花粉活力的影响实验结果表明,加热处理、盐酸处理等对花粉活力有一定影响。
加热处理可以使花粉活力降低,盐酸处理可以使花粉活力提高。
3. 不同条件下花粉活力的变化规律实验结果表明,温度、湿度等因素对花粉活力有显著影响。
在一定范围内,温度升高,花粉活力降低;湿度增加,花粉活力提高。
六、实验结论1. 本实验通过萌发法测定了不同植物花粉的活力,了解了不同条件下花粉活力的变化规律。
2. 实验结果表明,不同植物花粉活力存在差异,加热处理、盐酸处理等对花粉活力有显著影响。
3. 温度、湿度等因素对花粉活力有显著影响,在一定范围内,温度升高,花粉活力降低;湿度增加,花粉活力提高。
花粉活力的测定
活种子
死种子
四、注意事项
1、在切种子时,应垫在橡胶垫上,不可直接
在桌面上切,以防切伤桌面; 2、染色时间不可过长,否则不易区别染色与 否; 3、在使用切开的种子时,每粒种子每组只能
使用其中的一半,但两组可以交换使用各自
剩余的另一半。
三、实验步骤
1. 取一花药置于载玻片上,加一滴蒸馏水后,用
镊子将其充分捣碎,再加1~2滴I2-KI,盖上盖 玻片后于低倍镜下观察花粉成熟状况; 2. 取1~2滴花粉培养液于另一凹面载玻片的凹陷处, 再将花粉粒少许撒落于培养液中,盖上盖玻片
后放置30分钟左右,观察花粉管的萌发情况。
有活力的花粉
山茶花花粉管的萌发
二、实验材料、试剂及用具
1.仪器设备:培养皿、刀片、烧杯、镊子。
2.试剂:5%红墨水 3.材料:小麦种子
三、实验步骤
1、浸种:将待测小麦种子在 30 ~ 35 ℃温水中浸种6 小时左右,以 增强种胚的呼吸作用。
2、染色:取已吸胀的种子100粒,沿胚的中线切为两半,将一半置于 培养皿中(不能仅取50粒),加入 5% 红墨水(以淹没种子为度 ),染色 10 ~ 15 min (温度高时间可短些)(时间不宜太长,为 什么?)。 3、观察:染色后倒去红墨水,用水冲洗多次,至冲洗液无色为止。 检查种子死活,凡种胚不着色或着色很浅的为活种子;凡种胚与 胚乳着色程度相同的为死种子。可用沸水杀死的种子作对照观察 。 4、计算有生活力种子的百分率。
不能被染色或着色较浅;成熟花粉具有较强的活力, 在适宜的条件下就能萌发出花粉管。多种植物花粉 能在含10%蔗糖、100ppm硼酸的花粉培养基上萌 发,在显微镜下可观察花粉管的伸长。
二、实验材料、试剂及用具
1.仪器设备:显微镜、载玻片及盖玻片、解
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花粉活力测定
一、实验原理:
TTC 染色法—— TTC (2, 3, 5-三苯基氯化四氮唑的氧化态是无色的,可被氢还原成不溶性的红色三苯甲潛(TTF 。
用 TTC 的水溶液浸泡花粉,使之渗入花粉内,如果花粉具有生命力,其中的脱氢酶就可以将 TTC 作为受氢体使之还原成为红色的TTF ;如果花粉死亡便不能染色; 花粉生命力衰退或部分丧失生活力则染色较浅或局部被染色。
因此, 可以根据花粉染色的深浅程度可鉴定花粉的生命力。
培养基萌发法——常的成熟花粉粒具有较强的活力, 在适宜的培养条件下便能萌发和生长,在显微镜下可直接观察计算其萌发率,以确定其活力。
二、实验仪器:载玻片、盖玻片、显微镜、镊子、毛笔、滤纸、培养皿、三角瓶、天平、烧杯、恒温箱、量筒、吸管
三、实验药品:0.5%TTC溶液、琼脂、硼酸、氯化钙、蒸馏水、蔗糖 (浓度分别为 5%、 10%、 15%、 20%
四、实验步骤:
TTC 法:将采集到的花粉 (虞美人、三色堇 , 取少许放在干洁的载玻片上, 加
1~2滴 0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,并用清水做对照,置 37℃恒温箱中, 30min 后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。
每片取 3个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的活力百分率。
培养基萌发法:
1. 将培养基熔化后,用吸管蘸少许,涂布在载玻片上
2. 将花粉(虞美人、三色堇洒落在涂有培养基的载玻片上,然后将载玻片放置于垫有湿滤纸的培养皿中,置于 25℃左右的恒温箱中, 24小时后在显微镜镜检,每片取3个视野,统计其萌发率。
五、实验结果:
TTC 法:虞美人花粉活力—— 26.1%
三色堇花粉活力—— 23%
培养基萌发法:蔗糖浓度 5% 10% 15% 20%
虞美人花粉活力 1.3% 0.79% 2.2% 9.6%
三色堇花粉活力 8.7% 22.2% 46.9% 32.8%
六、结果分析:
1、 TTC 法:三色堇花粉染色在 30分钟时观察时基本没有染色, 50分钟左右观察,才有明显染色的划分出现,原因可能是花粉对 TTC 的敏感度不同
2、培养基萌发法:不同糖浓度下花粉的萌发率不同,虞美人花粉在 20%的糖浓度下活力最强,三色堇花粉在 15%的糖浓度下活力最强。