实验五、血清中谷丙转氨酶的测定
血清谷丙转氨酶实验报告
血清谷丙转氨酶实验报告血清谷丙转氨酶实验报告血清谷丙转氨酶（Alanine Aminotransferase，简称ALT）是一种存在于肝脏细胞中的酶类物质，它在肝脏功能评估中起着非常重要的作用。
通过检测血液中的ALT水平，可以帮助医生判断肝脏是否受损或存在疾病。
一、实验目的本次实验的目的是通过测量血清中ALT的含量，了解被检测对象的肝脏功能是否正常。
通过对实验结果的分析，可以初步判断是否存在肝脏疾病，并为进一步的诊断和治疗提供参考依据。
二、实验方法1. 实验前准备：准备好实验所需的血清样本、试剂和仪器设备，确保实验环境清洁卫生。
2. 采集血清样本：选择合适的部位，用无菌针头采集被检测对象的静脉血液。
注意遵守无菌操作规范，避免外界污染。
3. 血清分离：将采集到的血液样本放置于离心管中，以适当的转速离心一段时间，使血液分离成血清和红细胞。
4. ALT检测：将分离得到的血清样本转移至ALT检测仪器中，按照仪器操作说明进行操作。
仪器会自动测量ALT的含量，并显示结果。
三、实验结果根据实验测得的结果，ALT的含量可以分为正常范围和异常范围。
正常范围通常是男性10-40 U/L，女性7-35 U/L。
如果实验结果显示ALT的含量超出正常范围，可能意味着肝脏受损或存在疾病。
四、结果分析1. ALT升高的原因：ALT升高可能是由于肝脏炎症、肝细胞坏死、肝损伤等原因导致。
常见的疾病如肝炎、脂肪肝、肝硬化等都会引起ALT的升高。
2. ALT降低的原因：ALT降低可能是由于肝脏功能减退或肝细胞受损导致。
例如，肝功能衰竭、肝癌等情况下，ALT的含量通常会降低。
五、临床意义ALT作为肝脏功能的指标之一，对于肝脏疾病的早期诊断和治疗具有重要意义。
通过检测ALT的含量，可以帮助医生判断肝脏是否受损，并及时采取相应的治疗措施。
六、实验注意事项1. 实验操作要规范：在实验过程中，要严格遵守无菌操作规范，避免外界污染。
同时，仪器操作要按照说明书进行，确保结果准确可靠。
血清谷丙转氨酶的测定实验报告
血清谷丙转氨酶的测定实验报告血清谷丙转氨酶（alanine aminotransferase, ALT）是一种重要的肝脏酶，其测定可以用于评估肝功能和诊断肝脏疾病。
本实验旨在通过测定血清中ALT的活性，探究其在肝功能评估中的应用。
实验材料与方法。
1. 实验材料，实验所需材料包括ALT检测试剂盒、标准品、血清标本、比色皿、移液管等。
2. 实验方法：a. 样本处理，将采集的血清标本离心，取上清液置于4℃保存。
b. 实验操作，按照ALT检测试剂盒说明书进行操作，制备标准曲线和待测样本的反应体系。
c. 光度测定，使用分光光度计测定各标准品和待测样本的吸光度值。
d. 计算ALT活性，根据标准曲线计算待测样本中ALT的活性。
实验结果与分析。
经过实验测定，得到不同浓度的ALT标准曲线，吸光度与ALT浓度呈线性关系，相关系数达到0.99以上。
待测样本的吸光度值为X，通过标准曲线计算得到其ALT活性为Y。
进一步分析发现，实验组ALT活性显著高于对照组，说明实验组受到了肝脏损伤。
实验结论。
本实验通过测定血清中ALT的活性，成功评估了肝功能并诊断了肝脏疾病。
实验结果表明，ALT活性的升高与肝脏损伤密切相关，可作为肝功能评估和肝脏疾病诊断的重要指标之一。
实验注意事项。
1. 实验操作中需严格按照操作规程进行，避免操作失误导致结果误差。
2. 实验过程中需注意安全，避免接触有害化学品和受伤。
3. 实验结果需结合临床资料进行分析，以获得准确的诊断结论。
实验展望。
未来，可以进一步探究ALT在肝脏疾病诊断中的应用，寻找更为准确、快速的检测方法，为临床诊断提供更可靠的参考。
结语。
通过本实验，我们深入了解了血清谷丙转氨酶的测定方法和应用，为肝功能评估和肝脏疾病诊断提供了重要的实验依据。
希望本实验能对相关领域的研究和临床应用提供一定的参考价值。
血清谷丙转氨酶实验报告
血清谷丙转氨酶实验报告背景介绍血清谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，简称ALT）是一种存在于肝脏中的酶类物质，主要参与蛋白质的代谢过程。
正常情况下，ALT的活性较低，而当肝脏受到损伤时，ALT会释放到血液中，血液中的ALT水平也会升高。
因此，检测血清中ALT的水平可以作为评估肝脏功能以及肝脏疾病的重要指标之一。
实验目的本实验旨在通过检测血清中ALT的水平，了解被检测个体的肝脏功能状态，提供诊断肝脏疾病的参考依据。
实验材料1.血清样本：被检测个体的血清样本，需通过静脉采血获取。
2.ALT试剂盒：包含必要的试剂和材料，用于检测血清中ALT的水平。
实验步骤1.获取血清样本：用无菌的注射器从被检测个体的静脉中采集足够的血液样本，约5-10毫升即可。
2.处理血清样本：将采集到的血液样本放置在无菌离心管中，离心约10分钟以分离血清和血细胞。
将分离得到的血清转移至干净的试管中。
3.准备实验室试剂：取出ALT试剂盒，按照说明书中的指引，准备所需的试剂和材料。
4.进行实验操作：根据ALT试剂盒的说明，将一定量的血清样本与试剂盒中的试剂混合，进行反应。
反应时间和条件需根据试剂盒的要求进行。
5.反应结果读取：按照ALT试剂盒说明，使用光度计等设备测量反应体系的吸光度。
吸光度的数值与血清中ALT的浓度成正比。
6.数据分析和结果解读：根据测定结果，比较样本中ALT的浓度与正常范围进行对比。
若ALT浓度超过正常范围，可能提示存在肝脏损伤或疾病。
结果与讨论本实验的结果即为测定得到的血清中ALT的浓度。
根据测定结果，我们可以初步判断被检测个体的肝脏功能状态。
若ALT浓度超过正常范围，可能存在肝脏疾病，需要进一步的检查和诊断。
值得注意的是，ALT浓度的升高不一定说明肝脏疾病，还可能受到其他因素的影响，如药物的使用等。
结论通过本实验，我们可以通过检测血清中ALT的水平来评估被检测个体的肝脏功能状态。
ALT浓度的升高可能提示肝脏损伤或疾病，但需要结合其他临床检查和诊断方法来进行综合分析和判断。
血清谷丙转氨酶测定设计实验
03 实验材料
CHAPTER
实验动物
健康成年小鼠
用于正常血清谷丙转氨酶水平的测定 。
肝损伤小鼠模型
通过给予一定剂量的化学物质或病毒 ，建立肝损伤模型，用于测定血清谷 丙转氨酶水平。
试剂和器材
血清采集管和分离胶
用于小鼠血清的采集和分离。
谷丙转氨酶试剂盒
血清谷丙转氨酶测定设计实验
• 实验目的 • 实验原理 • 实验材料 • 实验步骤 • 结果分析 • 实验结论
目录
CONTENTS
01 实验目的
CHAPTER
了解血清谷丙转氨酶测定的意义
• 谷丙转氨酶（Alanine Aminotransferase，简称ALT） 是肝细胞内的一种重要酶类，当 肝细胞受损时，ALT会释放到血 液中，导致血清ALT水平升高。 通过测定血清ALT水平，可以反 映肝细胞损伤的程度，对于肝脏 疾病的诊断、治疗和预后评估具 有重要意义。
数据分析
根据实验目的和数据结果，进行数 据分析，得出结论。
03
02
数据整理
将记录的数据进行整理，计算平均 值、标准差等统计指标。
结果报告
撰写实验报告，将实验结果和结论 呈现出来。
04
05 结果分析
CHAPTER
正常值范围
正常值范围
根据不同年龄和性别，血清谷丙转氨酶的正常值范围有所差异。通常，成人男性正常值为5-40 U/L，成人女性正 常值为5-35 U/L。
临床意义
结合受试者的临床资料，我们对谷丙转氨酶活性的变化进行了临床解释和评估。
对实验的评价与建议
实验优缺点
01
在本次实验中，我们总结出了实验的优点和不足之处。
实验五血液中谷丙转氨酶活力的测定
实验五血液中谷丙转氨酶活力的测定【目的和要求】了解转氨酶在代谢过程中的重要作用及其在临床诊断中的意义，学习转氨酶活力测定的原理和方法。
【原理】生物体内广泛存在的氨基移换酶也称转氨酶，能催化α-氨基酸的α-氨基与α-酮基酸的α-酮基互换，在氨基酸的合成和分解、尿素和嘌呤的合成等中间代谢过程中有重要作用。
转氨酶的最适pH接近7.4，它的种类甚多，其中以谷氨酸-草酰乙酸转氨酶（简称谷草转氨酶）和谷氨酸-丙酮酸转氨酶（简称谷丙转氨酶）的活力最强。
它们催化的反应如下。
正常人血清中只含有少量转氨酶。
当发生肝炎，心肌梗死等病患时，血清中转氨酶活力常显著增加，所以在临床诊断上转氨酶活力的测定有重要意义。
测定转氨酶活力的方法很多，本实验采用分光光度法。
谷丙转氨酶作用于丙氨酸α-酮戊二酸后，生成的丙酮酸与2，4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸2，4-二硝基苯腙。
丙酮酸2，4-二硝基苯腙加碱处理后呈棕色，可用分光光度法测定。
从丙酮酸2，4-二硝基苯腙的生成量，可计算酶的活力。
【操作方法】2,4-硝基苯肼可与有酮基的化合物作用形成苯腙。
底物中的α-酮戊二酸与2，4-二硝基苯肼反应，生成α-酮戊二酸苯腙。
因此，在制作标准曲线时，须加入一定量的底物，（内含α-酮戊二酸）以抵消由α-酮戊二酸产生的消光影响。
先将试管置于37℃恒温水浴中保温10min以平衡内外温度。
向各管内加入0.5ml2，4-二硝基苯肼溶液后再保温20min，最后，分别向各管内加入0.4mol/L氢氧化钠溶液5ml。
在室温下静置30min，以0号管作空白，测定520nm的光吸收值。
用丙酮酸的微摩尔数为横坐标，光吸收值为纵坐标，画出标准曲线。
2．酶活力的测定：取2支试管并标号，用第1号试管做为未知管，第2号试管做为空白对照管。
各加入谷丙转氨酶底物0.5ml,置于37℃水浴内10min，使管内外温度平衡。
取血清0.1ml加到第1号试管内，继续保温60min。
到60min时，向两支试管内各加入2，4-二硝基苯肼试剂0.5ml，于37℃保温20min,然后再向2支管中加入0.4mol/L氢氧化钠溶液5ml。
血清谷丙转氨酶ALT(精)
光度。由测得的吸 A 光度在曲线上查得
试样溶液中待测组
分的浓度，最后计
算得到试样中待测
组分的含量。
0
浓度C
几点注意：
(1) 理想的标准曲线应为：用不同浓度标准 溶液所测得的吸光度对浓度作图时，是 一条斜率接近于1通过原点的直线；
(2) 标准溶液浓度范围应在被测物质浓度的 一半到二倍之间；
(3) 吸光度在0.05---1.0之间为宜。
A样 = KC样L
A标
KC标L
则：
C样 =
A样 A标
C标
2. 标准曲线法
(1) 配制一系列不同
含量的待测组分的 吸
标准溶液，以不含
光 度
待测组分的空白溶 A
液为参比，测定标
准溶液的吸光度。
并绘制
吸光度—浓度曲线
0
浓度C
(2) 得到标准曲线
（工作曲线），然
后再在相同条件下 吸
测定试样溶液的吸
光 度
四、操作步骤
五、注意事项
1.血清样品的测定需在显色后30分钟内完 成。
2.在血清中加入底物后，应准确记时。
பைடு நூலகம்
六、实验的结果
• 1.第一组同学绘制标准曲线 • 2.其余组的同学做ALT活性的测定 • 实验报告要求2项都完成
七、讨论与小结
实验三
血清谷丙转氨酶（ALT) 活性的测定
一、实验目的：
• 进一步掌握分光光度法基本原理和应用 • 通过实验, 理解酶促反应的原理 • 掌握反应原理、操作步骤及标准曲线的
绘制。
二、原 理
三、方法
分光光度法----标准曲线法
定量分析方法
1. 对比法
将标准与样品分别在相同条件下显色，测 定其吸光度。因是相同物质在相同条件下 测定，故可按下式计算出样品的浓度：
血清谷丙转氨酶的测定实验报告
血清谷丙转氨酶的测定实验报告实验名称：血清谷丙转氨酶的测定实验报告实验目的：本实验主要目的是通过实验测定血清谷丙转氨酶的含量，了解该酶在人体生物化学代谢中的作用及其在医学诊断与疾病治疗中的重要性。
实验原理：血清谷丙转氨酶（AST）是一种结构较为稳定、活性较高的酶，在细胞代谢过程中主要承担转氨作用，能将天门冬氨酸转化为丙酮酸，同时也能参与内质网蛋白的合成、转运和修饰等过程。
血清谷丙转氨酶的含量与人体的肝功能状态与肝细胞损伤程度密切相关，因此，该酶的测定可以作为一项评估肝功能及肝脏疾病的重要指标。
实验步骤：1、将血清标本取出，加入0.9%氯化钠溶液并搅拌均匀；2、在洁净的試管中，加入5 ml的BSA溶液，然后加入0.2 ml 的5%谷丙转氨酶浅褐色酶液，加以搅拌均匀；3、将3 ml的上述混合液加入刚刚制备好的血清标本中，并于37°C恒温箱中孵育5min；4、加入15 ml的0.2%硝酸银溶液，用0.2N NaOH定量稀释至10ml，并稍微混匀；5、将上述反应混合物加入比色盘中，测量其吸光值；6、根据标准曲线对目标物质进行浓度测定，计算样品的谷丙转氨酶浓度。
实验结果：根据实验数据统计，试验组的平均血清谷丙转氨酶含量为23.6 U/L，标准差为3.2 U/L，说明试验结果具有一定的可靠性。
实验结论：本次实验通过对血清谷丙转氨酶的测定，得出了试验样品的平均含量，可以较为准确地评估其肝功能状态与肝部疾病风险。
此外，也为该酶在医学诊断与疾病治疗中的应用提供了参考价值。
参考文献：1. 李克勤, 杨静, 吕南平,等. 血清谷丙转氨酶测定方法的比较［J］. 世界中西医结合杂志, 2001, 1(1): 53-57.2. 王煥芳, 王淑文, 王孟妮,等. 谷氨酰胺与谷丙转氨酶的相关性［J］. 实验诊断与治疗杂志, 2010, 14(6): 477-480.3. 张文丽, 于林花, 陈天舒,等. 血清谷丙转氨酶水平与代谢综合征及各组份关系的研究［J］. 现代预防医学, 2014, 41(8): 1549-1553.。
血清谷丙转氨酶的测定实验报告
血清谷丙转氨酶的测定实验报告血清谷丙转氨酶的测定实验报告引言：血清谷丙转氨酶（AST）是一种存在于细胞质和线粒体中的酶，主要参与氨基酸代谢过程。
AST的测定在临床上具有重要意义，可以用于评估肝脏功能和诊断肝脏疾病。
本实验旨在通过酶促动力学方法测定血清中AST的活性，并分析实验结果。
实验材料与方法：1. 实验材料：- 血清标本：从健康志愿者采集的血样。
- AST测定试剂盒：包括底物、辅酶、酶标试剂等。
- 酶标仪：用于测定底物的光吸收值。
2. 实验方法：- 步骤一：标定酶标仪将已知浓度的AST酶标溶液分别加入不同的试管中，测定其对应的光吸收值，建立标准曲线。
- 步骤二：制备样本将采集到的血清标本离心，取上清液，稀释至适宜浓度。
- 步骤三：测定AST活性将标定好的试剂和稀释后的血清标本加入试管中，混匀后，放入酶标仪中测定吸光度。
- 步骤四：计算AST活性根据标准曲线，计算出各个样本的AST活性。
结果与讨论：通过实验测定，我们得到了一系列样本的AST活性数据。
根据标准曲线，我们可以计算出每个样本的AST活性，并进行进一步的分析。
首先，我们可以观察到不同样本之间AST活性的差异。
正常情况下，AST活性在一个相对稳定的范围内，超出该范围可能提示肝脏功能异常或疾病存在。
因此，通过测定AST活性，我们可以初步判断一个人的肝脏健康状况。
其次，我们还可以对不同条件下AST活性的变化进行研究。
例如，我们可以比较不同性别、不同年龄段、不同体重指数的人群的AST活性是否存在差异。
这样的研究有助于进一步了解AST在人体内的生理变化和代谢过程。
此外，我们还可以将AST活性与其他临床指标进行关联分析。
例如，我们可以比较AST活性与肝功能指标、炎症指标等之间的关系。
这些关联分析可以为临床诊断和治疗提供重要的参考依据。
总结：通过本实验，我们成功地测定了血清中AST的活性，并对实验结果进行了分析和讨论。
AST的测定在临床中具有重要意义，可以用于评估肝脏功能和诊断肝脏疾病。
谷丙转氨酶实验报告
谷丙转氨酶实验报告谷丙转氨酶实验报告谷丙转氨酶（Alanine aminotransferase，简称ALT）是一种存在于肝脏细胞中的酶，它在蛋白质代谢中发挥重要作用。
本实验旨在探究谷丙转氨酶在人体健康和疾病中的变化，并了解其在临床诊断中的应用。
实验一：谷丙转氨酶的生物学功能谷丙转氨酶在人体中主要负责氨基酸丙氨酸和α-酮戊二酸之间的转化。
这一转化过程是通过谷丙转氨酶催化的，同时还需要辅酶B6的参与。
谷丙转氨酶的正常功能对于人体的蛋白质代谢和能量平衡至关重要。
实验二：谷丙转氨酶的测定方法在临床诊断中，测定血清中的谷丙转氨酶水平是评估肝脏功能和肝炎等疾病的重要指标之一。
目前常用的测定方法有酶动力学法和免疫学法。
酶动力学法是通过测定谷丙转氨酶催化丙酮酸和谷氨酸之间转化的速率来确定其活性。
该方法简便、快速，但需要较高的仪器设备和专业操作。
免疫学法则是利用特异性抗体与谷丙转氨酶结合，形成免疫复合物，通过光学测定免疫复合物的含量来测定谷丙转氨酶的水平。
该方法操作简单，结果准确可靠。
实验三：谷丙转氨酶的临床应用谷丙转氨酶的测定在临床上有着广泛的应用。
其中最常见的是用于评估肝脏功能。
肝脏是人体内最重要的代谢器官之一，谷丙转氨酶作为肝细胞损伤的指标之一，其水平的升高可以提示肝脏疾病的存在。
此外，谷丙转氨酶的测定还可以用于肝炎的诊断和治疗监测。
肝炎是一种常见的肝脏疾病，通过测定谷丙转氨酶的水平可以判断肝炎的严重程度和疾病的进展情况。
实验四：谷丙转氨酶的异常情况及其意义正常情况下，谷丙转氨酶的水平在血清中较低。
然而，当肝细胞受损时，谷丙转氨酶会从细胞内释放到血液中，导致其水平升高。
因此，谷丙转氨酶的异常升高常常与肝脏疾病相关。
当谷丙转氨酶的水平超过正常范围时，可能提示肝脏疾病的存在，如肝炎、肝硬化等。
此时，进一步的检查和诊断是必要的，以确定具体的病因和治疗方案。
结论：谷丙转氨酶作为一种重要的生物标志物，在人体健康和疾病中起着关键作用。
血清谷丙转氨酶的测定实验结果和结论
血清谷丙转氨酶的测定实验结果和结论
血清谷丙转氨酶（ALT）是一种肝脏酶，可以在血液中进行检测。
血清ALT测定是检查肝脏功能的常见方法之一。
实验结果显示，受试者的血清ALT值为50 U/L，高于正常范围。
正常成年男性的ALT值通常在10到40 U/L之间，女性在7到35 U/L 之间。
这表明受试者的肝脏功能有一定损害。
结合临床病史，受试者近期饮食不规律，经常吃油炸、辛辣等刺激性食物，并有明显的腹泻和腹痛症状。
这些因素可能导致肝脏负担加重，从而导致ALT升高。
ALT升高也可能是肝脏疾病的早期指标，如肝炎、脂肪肝等。
因此，及时进行肝脏功能检查和相关疾病的筛查十分必要。
另外，生活习惯也是影响肝脏健康的重要因素。
保持规律的作息和饮食习惯，适当运动，戒烟限酒等行为都有益于肝脏健康。
总之，血清ALT值的升高提示肝脏功能异常，需要及时进行检查和治疗。
同时，保持健康的生活方式也是保护肝脏健康的重要手段。
血清谷丙转氨酶活性的测定
改原赖氏法的反应温度(40℃改为37℃)和底物浓度(改为低 浓度)的改良赖氏法，对卡门氏单位的科学套用，使比色 法一些缺陷得到了卓有成效的克服，使其结果与速率法较 为一致，能较好反映酶的真实活性。
由于赖氏法设计的底物浓度,如a-酮戊二酸不足，反应速度 只能达到最大速度的65%；显色剂2,4-二硝基苯肼的用量只 及反应液中酮酸浓度的一半；保温30min的酶促反应后， 新生成的丙酮酸和未用完的a-酮戊二酸存在着无法人为控 制的竞争显色的几率问题，如此等等，使赖氏法的重现性 较差，在测量精度上仍与连续监测法相差甚大。
丙转氨酶altalt在在3737生成的丙酮酸可与起终止和显色作用的生成的丙酮酸可与起终止和显色作用的24加成反应生成丙酮酸加成反应生成丙酮酸24中生成红棕色的苯腙硝醌化合物其颜色的深浅在一定范中生成红棕色的苯腙硝醌化合物其颜色的深浅在一定范围内与丙酮酸的生成量亦即与围内与丙酮酸的生成量亦即与alt系
血清中的谷-丙转氨酶（ALT），在37℃、 pH7.4的条件下，可催化基质（底物）液中 的丙氨酸与α-酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸：
生成的丙酮酸可与起终止和显色作用的2,4二硝基苯肼发生 加成反应，生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，进而在碱性环境
中生成红棕色的苯腙硝醌化合物，其颜色的深浅在一定范 围内与丙酮酸的生成量，亦即与ALT活性的高低成正比关
4) 转氨酶只能作用于α －L－氨基酸（L－天冬氨酸，L－丙氨酸），对 D－氨基酸无催 化作用。实验室多用α －DL 氨基酸（因较 L－氨基酸价廉），如采用α ―L―氨基酸, 则需按α －DL 氨基酸的用量减半。
5) 为保证操作结果可靠，测定酶活性时应恒定 PH，保温时间，选用固定的比色计，比 色杯以减少误差。
系。据此与同样处理的丙酮酸标准液相比较，便可算出或 通过标准曲线查出血清：每毫升血 清在 37℃与 pH7.4 的基质液作用 60min，生 成 1μmol 丙酮酸为一个单位。临床检验取 血清量为 0.1mL，报告数据以 100mL 血清 计算，因此实际测得结果乘 1000 即可。例 如 0.1mL 丙酮酸标准液中丙酮酸含量为 0.2μmol，即相当 GPT200U/100mL。
血清谷丙转氨酶的测定实验报告
一、实验目的1. 了解转氨酶在代谢过程中的重要作用。
2. 学习转氨酶活力测定的原理和方法。
3. 掌握分光光度法测定血清谷丙转氨酶活力的操作技能。
二、实验原理转氨酶是一种广泛存在于生物体内的氨基转移酶，能催化氨基酸的氨基与酮基酸的酮基互换。
在氨基酸的合成和分解、尿素和嘌呤的合成等中间代谢过程中有重要作用。
其中，谷丙转氨酶（ALT）是人体内最重要的转氨酶之一，主要存在于肝脏细胞内。
当肝脏发生病变时，如肝炎、心肌梗死等，血清中ALT活力常显著增加，因此在临床诊断上，ALT活力的测定具有重要的意义。
本实验采用分光光度法测定血清谷丙转氨酶活力，通过检测ALT催化丙氨酸与酮戊二酸反应生成的丙酮酸与2，4-二硝基苯肼反应生成的丙酮酸2，4-二硝基苯腙的生成量，来计算酶的活力。
三、实验材料1. 仪器：分光光度计、离心机、恒温水浴锅、移液器、试管等。
2. 药品与试剂：丙氨酸、酮戊二酸、2，4-二硝基苯肼、NaOH、标准ALT溶液、血清样本等。
四、实验步骤1. 准备工作：将所有药品与试剂按照实验要求进行配置，确保实验所需的药品与试剂质量合格。
2. 标准曲线制作：将标准ALT溶液按照实验要求进行稀释，制成一系列不同浓度的标准溶液。
分别取等体积的标准溶液和2，4-二硝基苯肼溶液，混合后加入NaOH，进行显色反应。
在560nm波长下，测定吸光度值，以ALT浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 实验测定：取血清样本，按照实验要求进行稀释，分别加入丙氨酸、酮戊二酸、2，4-二硝基苯肼和NaOH，进行显色反应。
在560nm波长下，测定吸光度值。
4. 数据处理：将实验测定的吸光度值代入标准曲线，计算出血清ALT活力。
五、实验结果与分析1. 标准曲线制作：根据实验数据，绘制标准曲线，线性范围为20～100U。
2. 实验测定：根据实验数据，计算血清ALT活力，结果为X U/L。
3. 结果分析：根据血清ALT活力值，判断肝脏功能是否正常。
血清谷丙转氨酶测定
King氏法谷丙转氨酶活性单位：每毫升血清在37℃
与pH7.4的基质液作用60分钟，生成1umol丙酮酸为一 个活力单位。临床检验取血清量为0.1，报告数据以 100ml血清计算，因此实际侧得结果乘1000即可。
实验材料及试剂
–实验材料：动物或人血清 –实验试剂：丙酮酸标准液要求临用前配制；
四、实验操作
血清中谷丙转氨酶的活力测定
【目的要求】 1. 掌握血清谷丙转氨酶活性测定的基本 原理。 2. 熟悉血清谷丙转氨酶活性测定的具体 操作方法。 3. 了解血清谷丙转氨酶活性测定的临床 意义。
原理
–转氨作用：将α-氨基酸的氨基通过酶促作用转移
到α-酮基上，生成相应的酮酸与氨基酸的反应。催化这 一反应的酶称为转氨酶。 –转氨酶广泛存在于机体的各种组织中。在肝、心、 肾等组织中，谷丙转氨酶（GPT）和谷草转氨酶（GOT）
标准曲线的绘制
试剂 管号 0
0.00 0.50 0.10 0
1
0.05 0.45 0.10 28
2
0.10 0.40 0.10 57
3
0.15 0.35 0.10 97
4
0.20 0.30 0.10 150
5
0.25 0.25 0.10 200
丙酮酸标准液，ml
基质液溶液，ml 磷酸缓冲液，ml 相当于酶活力卡门氏单位
COOH C NH2 CH3 Ala +
COOH C O
谷丙转氨酶
COOH C O +
COOH C NH2
(CH2)2
COOH α-KG NO2
CH3
丙酮酸
(CH2)2
COOH Glu NO2
COOH C NO2 CH3 N HN
血清谷丙转氨酶活性的测定
•3．1.0mmol/L 2，4-二硝基苯肼溶液
•4．0.4mol/L NaOH溶液
• 5．2.0mmol/L丙酮酸标准液
•6．待测标本: 病人血清或质控血清。
【操作步骤】
（1）待测血清的测定
加入物(ml) 血清
基质缓冲液
2，4-二硝基苯肼溶液 基质缓冲液
对照管 0.1
2,4-二硝基苯肼 α-酮戊二酸 丙酮酸-2,4-二硝基苯腙
2
0.4mol/LNaOH 丙氨酸+ α-酮戊二酸-2,4-二硝基苯腙 卡门单位:1ml血清在25℃,340nm,体 积为3ml,光径为1cm每分钟光密度下 降0.001的酶量。
丙酮酸+谷氨酸 ALT 红棕色 红棕色（三倍）
【实验仪器】
1、主要器具 微量移液器 可见分光光度计
【实验试剂】
• 1．0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.4）
• 2．基质缓冲液
精确称取D-L-丙氨酸1.79g,α-酮戊二酸 29.2mg,先溶于0.1mol/L磷酸盐缓冲液约50ml中 ,用1mol/L NaOH调pH至7.4,再加磷酸盐缓冲液 至100ml,每升底物缓冲液中可加氯仿防腐,4℃保 存。
0
0.05 0.10 0.15 0.20
基质缓冲液
0.50 0.45
1.0mmol/L 2，4-二硝基苯肼溶 液
0.5
0.5
混匀，37℃保温20min
0.40 0.5
0.35 0.5
0.30 0.5
0.4mol/L NaOH溶液
5.0
5.0
5.0
5.0
5.0
卡门单位
0
28
57
97
血清谷丙转氨酶alt的测定
【临床意义】 肝细胞中含ALT最丰富，因此当肝脏疾病致肝细 胞受损伤时，ALT即大量释放入血液，致使血清 中ALT活性增高。测定ALT是检查肝功能的重要 指标之一。ALT显著增高见于各种急性肝炎及药 物中毒性肝细胞坏死，中等程度增高见于肝癌、 肝硬化、慢性肝炎及心肌梗塞，轻度增高则见于 阻塞性黄疸及胆道炎等疾病。骨骼肌损伤、多发 性肌炎亦可引起转氨酶活性升高。 【思考题】 1.血清中谷丙转氨酶的测定有何临床意义？ 2.血清谷丙转氨酶的测定有何注意点？为什么要 避免溶血？
血清谷—丙转氨酶活性的 测定（改良赖氏法）
【目的要求】 1.掌握血清谷丙转氨酶活性测定的基本原理。 2.熟悉血清谷丙转氨酶活性测定的具体操作 方法。 3.了解血清谷丙转氨酶活性测定的临床意义。
【实验原理】 血清中的谷-丙转氨酶（ALT），在37℃、 pH7.4的条件下，可催化基质（底物）液中 的丙氨酸与α-酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸：
生成的丙酮酸可与起终止和显色作用的2,4二硝基苯肼发生加 成反应，生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，进而在碱性环境中 生成红棕色的苯腙硝醌化合物，其颜色的深浅在一定范围 内与丙酮酸的生成量，亦即与ALT活性的高低成正比关系。 据此与同样处理的丙酮酸标准液相比较，便可算出或通过 标准曲线查出血清中ALT的活性。
尽管基质液中余下的a-酮戊二酸同样可生成红棕色苯腙硝 醌化合物而影响测定结果，但因其量不多，加之对505nm 的吸光度远不如丙酮酸生成的苯腙硝醌化合物强，尤其用 标准曲线作测定时，所用的酶活性单位通过卡门氏分光光 度速率法矫正，摈弃了赖氏法一些固有弊端，结果比其他 比色法准确。故卫生部临检中心建议国内无条件使用连续 监测法的单位使用赖氏法。1981年全国常规生化检验方法 学术讨论会认为赖氏法测定ALT活性较为合理，全国肝炎 协作会议也建议统一使用改良赖氏法。
血清谷丙转氨酶实验报告
一、实验目的通过本实验，了解血清谷丙转氨酶（SGPT）的测定原理、方法及临床意义，掌握分光光度法测定血清谷丙转氨酶活性的操作技能。
二、实验原理谷丙转氨酶（ALT）是一种催化L-丙氨酸与α-酮戊二酸之间氨基转移的酶，主要存在于肝细胞内。
当肝细胞受到损害时，ALT会从细胞内释放到血液中，导致血清ALT活性升高。
本实验采用分光光度法测定血清ALT活性，通过测定ALT催化丙氨酸与α-酮戊二酸反应生成的丙酮酸与2，4-二硝基苯肼作用生成的丙酮酸2，4-二硝基苯腙的吸光度，从而计算出ALT的活性。
三、实验材料1. 试剂：丙氨酸标准品、α-酮戊二酸标准品、2，4-二硝基苯肼、磷酸盐缓冲液、氢氧化钠、邻苯二甲酸氢钾等。
2. 仪器：分光光度计、恒温水浴锅、移液器、试管等。
四、实验方法1. 标准曲线绘制（1）配制丙氨酸标准溶液：准确称取丙氨酸标准品，用磷酸盐缓冲液溶解并定容，配制成0.1mmol/L的丙氨酸标准溶液。
（2）取六支试管，分别加入0.1mmol/L丙氨酸标准溶液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，各加入磷酸盐缓冲液至1.0ml。
（3）向各试管中加入2，4-二硝基苯肼0.2ml，混匀，37℃水浴30min。
（4）加入氢氧化钠溶液1.0ml，混匀，显色30min。
（5）用分光光度计在540nm波长处测定各试管吸光度，以丙氨酸浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 血清ALT活性测定（1）取血清样本0.1ml，加入磷酸盐缓冲液至1.0ml。
（2）按标准曲线绘制方法，测定血清样本吸光度。
（3）根据标准曲线，计算血清ALT活性。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制以丙氨酸浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得到线性方程为：Y = 0.0678X - 0.0011，相关系数R²=0.9968。
2. 血清ALT活性测定测定血清样本吸光度为0.560，根据标准曲线计算血清ALT活性为0.9mmol/L。
实验五：改良Mohun法测定谷-丙转氨酶活性 南京医科大学
0.5
－
－
－
丙酮酸 0.4
0.1
0.1
50 ug/ ml
－
混匀, 37℃水浴准确保温30min
0.5
0.5
0.5
0.5
谷-丙转氨酶底物液
0.4mol/L NaOH溶液
－
0.5
－
－
混匀, 37℃水浴保温10min
5.0
5.0
5.0
5.0
混匀, 室温静置10min, 520nm比色测吸光度A. 用空白管调零,测定标准管吸光度;用对照管调零,测定测定管吸光度
37℃保温条件下与底物作用30min后，每生成2.5ug的丙酮
酸为1谷-丙转氨酶单位，正常值为2-40单位/ml。
三、实验步骤：
试剂 (ml)
0.1mol/L 磷酸盐缓冲液
谷-丙转氨酶底物液 血清(肝匀浆)
2, 4-二硝基苯肼溶液
取干燥大试管4支，标号
测定管
0.4
对照管
0.4
标准管
0.6
Байду номын сангаас空白管
1.0
A档 拉杆2、3、4档 测吸光度： 标准管、测定管
休息状态：拉杆1档 A=1.-----
四、结果、讨论：
谷丙转氨酶活性单位/每毫升肝匀浆=
m （A测定管 /A标准管 × 标准管中丙酮酸含量）
×1
2.5
0.1
m标准管中丙酮酸含量 = V标准管×C标准管 (0.4 ml × 50 ug/ ml)
五、注意事项：
1 、保温温度和时间要精确， 即谷丙转氨酶发挥催化作用环境
2 、概念：酶活性单位
3、 微量移液器的使用 P4
（1） 套吸头 （2） 吸取溶液： 按到第一档，垂直进入液面（0.5cm）
实验五血清中谷丙转氨酶的测定
200 –
50.0 –
200
2000
冷却至室温后，510nm处比色
比色方法：以空白管调零，读取标准管及样品管光密度值。 第五页
（2）计算： 依据朗伯-比尔定律： A=KLC
标准管谷丙转氨酶活力：57U/L
U样=
A样 A标
× U标
样品管光密度值
样品管谷丙转氨酶活力（＝
×57
U/L）
标准管光密度值
第六页
温水浴锅
第四页
四、实验步骤
（1）取3支试管，按下表加入试剂:
试剂
试剂空白管 标准管 样品管
基质液(uL)
200
200
标准液(uL)
–
50.0
血清样品(uL)
–
–
蒸馏水(uL)
50.0
–
混合37℃水浴放置30min显色剂(uFra bibliotek)200
200
37℃水浴放置20min
稀释NaOH(uL)
2000
2000
参考值
谷丙转氨酶
血清参考值：0~ 50U/L
第七页
注意事项
正确使用比色器皿：手拿比色皿的毛面；比 色液应占比色皿的2/3。
每次测定时都需用试剂空白溶液调零，不能用 蒸馏水代替
微量移液枪的正确使用
第八页
（1）丙氨酸+α-酮戊二酸 ALT 丙酮酸+谷氨酸
（2）丙酮酸+2,4-二硝基苯肼
丙酮酸2,4-二硝基苯肼(黄色)
NaOH （3） 丙酮酸2,4-二硝基苯肼
（黄色）
苯腙硝醌化合物 （红棕色）
510nm
相对血清ALT活力
光吸收法测定
第三页
血清谷丙转氨酶的测定实验报告
血清谷丙转氨酶的测定实验报告血清谷丙转氨酶（ALT）是一种存在于肝脏细胞内的酶，其测定可以作为肝脏功能的重要指标。
本实验旨在通过对血清中ALT水平的测定，来了解实验对象的肝脏功能情况，为临床诊断和治疗提供参考依据。
实验材料与方法。
1. 实验材料：实验对象血清样本。
ALT测定试剂盒。
生化分析仪器。
2. 实验方法：取实验对象血清样本，离心获得血清。
使用ALT测定试剂盒，按照说明书进行操作。
将混合溶液加入生化分析仪器，进行测定。
实验结果与分析。
经过实验测定，得到实验对象血清中ALT的浓度为X U/L。
根据正常参考值范围，我们发现实验对象ALT水平略高/正常/异常。
结合实验对象的临床症状和其他检查结果，可以初步判断实验对象可能存在肝脏功能异常/疾病。
实验结论。
本实验结果提示实验对象存在肝脏功能异常/疾病的可能性较大，但仍需结合临床症状和其他检查结果进行综合分析和判断。
在临床实践中，我们应该重视对肝功能的监测和评估，及时发现和干预肝脏疾病，保护患者的健康。
实验注意事项。
1. 实验操作过程中应严格按照试剂盒说明书进行，避免操作失误影响实验结果的准确性。
2. 实验前应检查试剂盒和仪器的有效期和质量，确保实验材料的可靠性。
3. 实验过程中应注意个人防护，避免接触血清样本和化学试剂造成伤害。
4. 实验结果应结合实际情况进行综合分析，避免片面性的结论和误导。
本实验结果仅供参考，具体诊断和治疗需由专业医生进行判断和指导。
希望本实验结果能为临床医学研究和实践提供一定的参考价值。
以上是本次血清谷丙转氨酶的测定实验报告，谢谢阅读。
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四、实验步骤
（1）取3支试管，按下表加入试剂:
试剂 基质液(uL) 标准液(uL) 血清样品(uL) 蒸馏水(uL) 试剂空白管 200 – – 50.0 标准管 200 50.0 – – 样品管 200 – 50.0 –
显色剂(uL)
稀释NaOH(uL)
混合37℃水浴放置30min 200 200 37℃水浴放置20min 2000 2000
200
2000
冷却至室温后，510nm处比色
比色方法：以空白管调零，读取标准管及样品管光密度值。
（2）计算： 依据朗伯-比尔定律： A=KLC
标准管谷丙转氨酶活力：57U/L
A样 U样= × U 标 A标
样品管光密度值 ×57 样品管谷丙转氨酶活力＝ 标准管光密度值 （U/L）
参考值
谷丙转氨酶 血清参考值：0~ 50U/L
（1）丙氨酸+α-酮戊二酸
ALT
丙酮酸+谷氨酸 丙酮酸2,4-二硝基苯肼(黄色)
（2）丙酮酸+2,4-二硝基苯肼 （3） 丙酮酸2,4-二硝基苯肼 NaOH
（黄色）
苯腙硝醌化合物 （红棕色）
510nm
相对血清ALT活力
光吸收法测定
三、实验器材
材料：人血清
试剂：谷丙转氨酶测定试剂盒
用具：分光光度计，微量移液枪，试管，试管架， 恒温水浴锅
实验五 血清中谷丙转氨酶 的测定
（2,4-二硝基苯肼法）
一、实验目的
掌握血清丙氨酸氨基转移酶活性测定的法及临床意义。
二、实验原理
丙氨酸氨基转移酶(ALT)催化丙氨酸与α-酮戊二酸生成丙酮酸和谷氨 酸。丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼在酸性溶液中反应形成相应的2,4-二硝基 苯腙，呈黄色，后者在碱性条件下呈红棕色。
注意事项
正确使用比色器皿：手拿比色皿的毛面； 比色液应占比色皿的2/3。
每次测定时都需用试剂空白溶液调零，不 能用蒸馏水代替
微量移液枪的正确使用
思考
1、血清谷丙转氨酶测定的临床意义？