影响酶活性的因素实验设计解析
实验五影响酶活力的因素
实验10 影响酶活力的因素——正交实验法(碘量法测定酶活力)四个班,每班分16组两个同学一组目的要求:初步掌握正交实验设计法(简称正交法)的使用,运用正交法测定底物浓度、温度和pH这三种因素对酶活力的影响。
实验原理:酶反应受到多种因素的影响,如底物浓度、酶浓度、温度、pH值、激活剂和抑制剂等都能影响酶的反应速度。
这种多因素的实验可通过正交法即用—特制的表格——正交表来安排试验,计算和分析实验结果。
这样就能通过少量实验取得较好的效果。
实践证明正交法是一个多、好、快、省的方法,目前已广泛用于农业生产和科学实验中。
本实验运用正交法测定酶浓度、温度、PH值这三个因素对酶活性的影响,并求得在什么样的底物浓度、温度和pH值时酶的活性最大。
酶活力用硫代硫酸钠滴定法测定。
过氧化氢酶能把过氧化氢分解成水和氧,其活力大小以一定时间内一定量的酶所分解的过氧化氢量来表示。
被分解的过氧化氢量可用碘量法间接测定。
当酶促反应进行一定时间后,终止反应,然后以钼酸铵做催化剂,使未被分解的过氧化氢与碘化钾反应放出游离碘,再用硫代硫酸钠滴定碘。
其反应为:H2O2+2KI+H2SO4→I2+K2SO4+2H2OI2+Na2S2O4→2NaI+Na2S4O6反应完后,以样品溶液和空白溶液的滴定值之差求出被酶分解的过氧化氢量,即可计算出酶的活力。
实验器材:试管15毫升试管9*16=144支吸管1毫升2*16=32支吸管5毫升2*16=32支吸耳球16个漏斗1个研钵(或者搅碎机)1个(1台)恒温水浴锅3台铁架台16个蝴蝶夹16个酸碱两用滴定管16个100毫升的三角烧瓶3*16=48个烧杯500毫升18个(装好水放到恒温水浴锅里)实验所需药品:1. 0.01 mol/L 的过氧化氢溶液每组消耗50毫升,每班需16ⅹ50=800毫升1.1毫升过氧化氢溶液,用蒸馏水定容至1000毫升。
(用带盖白色试剂瓶分装10瓶。
分装1000毫升即可,其余3000用白色大试剂瓶装好备用)2. 1.8 mol/L 的硫酸溶液(每组消耗50毫升,每班需16ⅹ50=800毫升)共配4000毫升95毫升浓硫酸,用蒸馏水定容至1000毫升。
实验:影响酶活性的因素
contents
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 结果分析 • 实验总结与反思
01
实验目的
了解酶的作用
01
酶是生物体内重要的生物催化剂 ,能够加速生物体内的化学反应 ,对维持生物体的正常生理功能 至关重要。
02
通过实验,学生将了解酶的作用 机制以及其在生物体内的实际应 用,加深对酶的认识和理解。
数据记录与处理
01
数据记录
在实验过程中,及时记录各组反 应的进程数据,如反应时间、反 应物浓度等。
数据处理
02
03
结果分析
根据记录的数据,计算各组酶活 性,并分析不同因素对酶活性的 影响。
比较各组数据,分析温度、pH值、 抑制剂等因素对酶活性的影响, 得出结论。
04
结果分析
数据整理与图表制作
数据整理
激活剂
某些物质可以激活酶的活性, 增强酶的催化效率。
03
实验步骤
实验材料准备
01
02
03
04
酶溶液
选择一种已知活性的酶,制备 成一定浓度的酶溶液。
底物溶液
选择适当的底物,制备成一定 浓度的底物溶液。
缓冲液
选择适当的缓冲液,用于维持 反应体系的pH值稳定。
实验器具
试管、移液管、滴定管、计时 器等。
培养实验技能
实验过程中,我学会了如何精确控制实验条件,如 何进行数据记录和分析,提高了我的实验操作技能 。
增强团队合作能力
在实验过程中,我们需要小组合作完成实验 操作和数据记录,这锻炼了我的团队合作和 沟通能力。
实验不足与改进建议
实验操作不够规范
在实验过程中,我发现自己在某 些操作上不够规范,如试剂添加、 仪器使用等,需要在后续实验中 加强训练。
探究酶活性的实验设计
探究酶活性的实验设计酶活性是指酶在一定条件下催化反应的能力,影响酶活性的因素有很多,如温度、pH值、底物浓度等。
本文将探究酶活性的实验设计,通过实验方法和步骤的讲解,展示如何准确、科学地研究酶活性。
一、实验目的探究不同条件下酶活性的变化规律,分析影响酶活性的因素。
二、实验材料和设备1. 反应物料:酶溶液、底物溶液2. 实验器材:试管、移液管、计时器、恒温水浴、pH计、离心机等三、实验步骤1. 准备工作:a. 将酶溶液和底物溶液置于恒温水浴中,使其温度稳定在实验需要的温度(如37°C)。
b. 准备一系列不同pH值的缓冲液,确保在实验中能控制pH值。
c. 测量底物的浓度,并调整为实验所需的浓度。
2. 温度对酶活性的影响实验设计:a. 取若干试管,并标记好温度,如20°C、30°C、40°C等。
b. 向每个试管中加入相等体积的酶溶液和底物溶液。
c. 将试管放入恒温水浴中,分别加热或冷却到所标注的温度并保持一段时间。
d. 在预定时间间隔内,取出试管,通过添加某种试剂停止反应,并用比色法或浊度计等设备测定产物的生成量。
3. pH值对酶活性的影响实验设计:a. 取若干试管,并加入等体积的酶溶液和底物溶液。
b. 分别向每个试管中加入不同pH值的缓冲液,如pH=5、pH=7、pH=9等。
c. 将试管放置于恒温水浴中,保持一定时间。
d. 在适当时间内,用某种试剂停止反应,并通过测定反应产物的生成量来研究酶活性的变化。
4. 底物浓度对酶活性的影响实验设计:a. 在试管中加入等体积的酶溶液,且底物浓度分别设为1mol/L、0.5mol/L、0.2mol/L等。
b. 将试管放于恒温水浴中,反应一定时间。
c. 使用某种试剂停止反应,并测定生成的产物浓度。
d. 通过产物浓度的变化,探究底物浓度对酶活性的影响。
四、数据处理和分析1. 温度对酶活性的影响:a. 绘制反应速率随温度变化的曲线图,分析酶活性与温度的关系。
主题式实验教学设计案例
主题式实验教学设计案例一、题目。
请以“探究影响酶活性的因素”为主题,设计一个高中生物(人教版)的实验教学案例,包括教学目标、实验原理、实验材料、实验步骤、预期结果及结论、教学反思等内容。
二、解析。
1. 教学目标。
知识目标。
学生能够理解酶的活性概念,掌握影响酶活性的因素(如温度、pH等)。
能够阐述不同因素对酶活性影响的原理。
能力目标。
通过设计和进行实验,培养学生的实验设计能力、操作能力和观察分析能力。
学会控制实验变量,设置对照实验,提高科学探究能力。
情感目标。
培养学生严谨的科学态度和团队合作精神。
激发学生对生物学科的兴趣,增强探索生命奥秘的欲望。
2. 实验原理。
酶的活性可以用单位时间内底物的减少量或产物的增加量来表示。
以唾液淀粉酶为例,它可以催化淀粉水解为麦芽糖。
在适宜的温度和pH下,酶的活性最高,反应速度最快;当温度或pH偏离适宜范围时,酶的活性会降低,反应速度减慢。
淀粉遇碘液变蓝,而麦芽糖遇碘液不变蓝。
通过检测反应后溶液是否变蓝以及变蓝的程度,可以判断酶的活性。
3. 实验材料。
新鲜唾液(唾液淀粉酶的来源)。
可溶性淀粉溶液、碘液。
不同pH值的缓冲溶液(如pH = 3、pH = 5、pH = 7、pH = 9、pH = 11等)。
不同温度的水浴装置(如0℃、37℃、100℃等)。
试管、滴管、量筒等实验仪器。
4. 实验步骤。
探究温度对酶活性的影响。
取3支洁净的试管,编号为1、2、3。
在1号试管中加入2 mL可溶性淀粉溶液,然后将试管放入0℃的水浴锅中保温5分钟;在2号试管中加入2 mL可溶性淀粉溶液,放入37℃的水浴锅中保温5分钟;在3号试管中加入2 mL可溶性淀粉溶液,放入100℃的水浴锅中保温5分钟。
另取3支洁净的试管,编号为4、5、6。
向4号试管中加入1 mL新鲜唾液,放入0℃的水浴锅中保温5分钟;向5号试管中加入1 mL新鲜唾液,放入37℃的水浴锅中保温5分钟;向6号试管中加入1 mL新鲜唾液,放入100℃的水浴锅中保温5分钟。
酶活性因素实验报告
一、实验目的通过本实验,探究影响酶活性的因素,包括温度、pH值、底物浓度、酶浓度和抑制剂等,了解这些因素如何影响酶的催化效率,并掌握实验设计和数据分析的方法。
二、实验原理酶是一种生物催化剂,具有高效、专一和可调节的特性。
酶的活性受多种因素的影响,包括温度、pH值、底物浓度、酶浓度和抑制剂等。
本实验主要探究这些因素对酶活性的影响。
三、实验材料与仪器材料:1. 淀粉酶2. 淀粉溶液3. 碘液4. 氢氧化钠溶液5. 硫酸溶液6. 底物缓冲液7. 酶缓冲液8. 抑制剂溶液仪器:1. 试管2. 烧杯3. 温度计4. pH计5. 移液器6. 恒温水浴箱四、实验方法与步骤1. 温度对酶活性的影响- 将淀粉酶溶液分别置于不同温度(0℃、25℃、37℃、50℃、75℃)的水浴中,恒温5分钟。
- 向每个试管中加入等量的淀粉溶液,摇匀。
- 在37℃下放置5分钟,使酶与底物充分反应。
- 向每个试管中加入碘液,观察颜色变化。
2. pH值对酶活性的影响- 将淀粉酶溶液分别置于不同pH值(2、4、6、8、10)的底物缓冲液中,恒温5分钟。
- 向每个试管中加入等量的淀粉溶液,摇匀。
- 在37℃下放置5分钟,使酶与底物充分反应。
- 向每个试管中加入碘液,观察颜色变化。
3. 底物浓度对酶活性的影响- 向一系列试管中加入不同浓度的淀粉溶液。
- 向每个试管中加入等量的淀粉酶溶液,摇匀。
- 在37℃下放置5分钟,使酶与底物充分反应。
- 向每个试管中加入碘液,观察颜色变化。
4. 酶浓度对酶活性的影响- 向一系列试管中加入不同浓度的淀粉酶溶液。
- 向每个试管中加入等量的淀粉溶液,摇匀。
- 在37℃下放置5分钟,使酶与底物充分反应。
- 向每个试管中加入碘液,观察颜色变化。
5. 抑制剂对酶活性的影响- 向一系列试管中加入不同浓度的抑制剂溶液。
- 向每个试管中加入等量的淀粉酶溶液和淀粉溶液,摇匀。
- 在37℃下放置5分钟,使酶与底物充分反应。
- 向每个试管中加入碘液,观察颜色变化。
探究影响酶活性的因素实验报告
探究影响酶活性的因素一、探究温度对酶活性的影响(一)实验原理(注:市售a-淀粉酶的最适温度约600C):1.淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。
2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖,麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。
(二)方法步骤:1、取3支试管,编上号(A、B、C),然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液;2、另取3支试管,编上号(a、b、c),然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液;3、将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组,A和a试管放入热水(约600C)、B和b放入沸水,C和c放入冰块中,维持各自的温度5min;思考题1、不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液,这是为什么4、分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中,摇匀后,维持各自的温度5min;5、在3支试管中各滴入1-2滴碘液,摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录;思考题2、在试管A、B、C中分别能观察到什么现象思考题3、通过上述实验,你能得出什么结论思考题4、在上述实验中,自变量是什么无关变量是什么思考题5、探究温度对酶活性的影响实验中是否可以用斐林试剂来检验实验结果为什么二、探究PH值对酶活性的影响(一)实验原理:思考题6、请依据下面所列实验操作步骤,写出该实验的实验原理。
步骤:用表格显示实验步骤:(注意操作顺序不能错)思考题7、请在上表中填入你所观察到的实验现象。
思考题8、通过上述实验,你能得出什么结论思考题9、在上述实验中,自变量是什么无关变量是什么思考题10、在设计“影响酶活性的条件”实验中最关键的一步是什么附加实验:思考题11、能否用淀粉酶探究PH对酶活性的影响1.(多选)在证明酶的催化作用受温度影响的实验时,有学生取两支试管分别将淀粉溶液与唾液混合后,分别将试管放在冰水、沸水中5min后,待试管冷却后分别加入3滴碘液,结果两支试管都变蓝,证明酶的催化作用需要适宜的温度。
此实验的不足之处是A.酶与淀粉不能在设置各自温度之前接触B.缺少温度为37℃的对照实验C.这两支试管都不应变蓝D.不能用碘液检验是否存在淀粉2.(多选)下图表示的是在最适温度下,反应物浓度对唾液淀粉酶所催化的化学反应速率的影响。
【精品】高中生物必修1《实验探究影响酶活性的因素》教案
探究影响酶活性的因素教案一、教学目标1知识目标:概述温度、pH的变化对酶活性的影响。
2能力目标:①通过探究影响酶活性的因素,发展学生的科学探究能力②培养学生观察、分析问题,解决问题的能力③培养学生实验操作能力④提高学生收集资料和语言表达能力。
3情感目标:①通过探究影响酶活性的因素,培养学生的探索精神、创新精神和合作精神②培养学生实事求是和严谨的科学态度③激发学生对生物科学的兴趣和热爱,培养学生理论联系实际。
二、教学重点和难点1.教学重点:设计探究实验方案,实验操作动手能力2.难点:影响酶活性因素的探究。
设计探究实验方案,实验操作动手能力三、课时安排:1课时四、教学过程:一、导入:播放“雕牌加酶洗衣粉”的广告视频,教师总结并导入新课:通过刚才的视频我们知道加酶洗衣粉的蛋白污渍去污能力比国家标准高了2倍,这主要是和什么有关?酶(确切的说是和酶的活性有关)。
细胞中几乎所有的化学反应都是由酶来催化的,那么环境条件的改变能否影响到酶的活性呢?今天我们就一起来探究影响酶活性的条件。
什么是酶的活性呢?(酶对化学反应的催化效率。
酶活性越高,催化效率越高,化学反应速率越快。
)下面我们来看一个雕牌洗衣粉包装袋背面的洗衣说明,在这个说明中你有什么疑问呢?加酶的洗衣粉的使用说明中为什么强调对温度的要求?二、师生互动探讨新课(1)展示资料:资料一:①洗前浸泡三十分钟,效果更佳②若衣服太脏,可适当增加用量③用温水浸泡效果更好,但水温不要超过60℃,实验证明:用加酶洗衣粉时,温水的洗涤效果要比冷水好资料二:当口腔中的唾液淀粉酶进入胃中以后,不再具有催化淀粉分解的功能。
胃中的蛋白酶随食糜进入小肠后也不再具有催化功能。
资料分析:资料一:洗衣粉的去污效果主要是和酶的活性有关,资料1中提到(不超过60摄氏度)说明酶的活性可能与温度有关。
我们再来看另外一个资料,从资料2中我们可以看出不同的酶需要不同的PH条件,说明酶的活性还可能与PH有关。
影响酶活性的因素实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除影响酶活性的因素实验报告篇一:实验报告-不同因素对酶的影响实验报告课程名称:生物化学实验(甲)指导老师:成绩:实验名称:酶的基本性质实验——底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度实验类型:分离鉴定实验同组学生姓名:一、实验目的和要求(必填)三、主要仪器设备(必填)五、实验数据记录和处理七、讨论、心得二、实验内容和原理(必填)四、操作方法和实验步骤六、实验结果与分析(必填)Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性一、实验目的和要求1.了解酶的专一性。
2.掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。
3.学会排除干扰因素,设计酶学实验。
二、实验基本原理酶是一种具有催化功能的蛋白质。
酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性,酶催化的反应(酶促反应)要比相应的没有催化剂的反应快103-1017倍。
酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性,即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用,对其他底物无催化反应。
根据各种酶对底物的选择程度不同,它们的专一性可以分为下列几种:1.相对专一性一种酶能够催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。
2.绝对专一性:有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物,而不作用于任何其他物质。
如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。
如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖,淀粉酶只作用于淀粉,而不作用于纤维素。
3.立体异构专一性有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种,而对另一种则全无作用。
如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。
本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。
采用benedict试剂检测反应产物。
benedict试剂是碱性硫酸铜溶液,具有一定的氧化能力,能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应,生成砖红色氧化亚铜沉淀。
na2co3+2h2o2naoh+h2co3cuso4+2+na2so4还原糖(—choor—c=o)+2cu(oh)2cu2o(砖红色或黄色)+2h2与benedict试剂无呈色反应。
生化设计性实验
1.淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。 2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖(淀粉水解过 程中,不同阶段的中间产物遇碘后,会呈现红褐色或红棕色。) 3 .酶的活性受环境pH的影响极为显著。因pH影响酶蛋白和底 物的解离状态,从而明显改变酶与底物的结合和催化作用。每一种 酶发挥作用的最佳条件要求最适pH,此时酶的活性最大。当其他条 件相同时,离最适pH越近,其活性越大,所催化的反应速率也最快。
影响酶活性的因素
生化一组4小组: 叶蓁、闵泽楚、赵泽楠、袁野
一、实验目的
观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的 变化。观察不同底物、温度、pH、激活剂与 抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响。
二、原理
1、影响酶活性的因素包括:底物类型、酶浓度、底 物浓度、产物浓度、抑制剂、激活剂、pH值、温 度等 2、淀粉在淀粉酶的作用下被降解成单糖,这种降解 过程是逐步进行的,降解的中间产物遇碘曾现不同 的颜色: 3、淀粉 → 红色糊精→ 无色糊精 → 麦芽糖 → 葡萄 糖 (紫蓝色)(红色) (无色) 所以根据水解液和碘反应的颜色,可以判断水解是否 已完全。
3
将a液加入到A试管,b液加入到 B试管,c液加入到C试管中, 摇匀
保温5min 600C 1000C 00C
4
5
滴入碘液,摇匀
2滴
2滴
2滴
6
观察现象并记录
实验三:pH对酶活性的影响
一、实验目的:
1.初步学会探索pH对酶活性的影响的方法。 2.探索淀粉酶在不同pH下催化淀粉水解的情况。
二、实验原理:
三、试剂和器材 1. 试 5~8磷酸盐缓冲液(配 制见实验课本207页) 2. 器材 试管、控温水浴锅、吸量管、滴管
四、实验步骤: 按照下表进行实验
探究影响酶活性的因素
1.探究温度对酶活性的影响(1)实验原理①反应原理:②鉴定原理:温度影响酶的活性,从而影响淀粉水解,滴加碘液,根据是否出现蓝色及蓝色的深浅来判断酶的活性。
(2)实验步骤取试管分组编号(1、2、3号)→加入等量可溶性淀粉溶液→分别控制温度(60 ℃、沸水、冰块)5 min →加等量淀粉酶溶液5 min →加等量碘液→观察溶液颜色。
[思考] ①在上述实验操作中先加入等量淀粉酶再分别控制温度可行吗?为什么?提示:不可行。
因为酶具有高效性,先加入酶液后,酶在常温下就可以发挥催化作用,影响实验结果。
②上述实验的实验结果是什么?提示:1号试管溶液(60 ℃)不变蓝色,2号、3号试管溶液变蓝色。
(3)实验结论:温度影响酶的活性。
2.探究pH 对酶活性的影响(1)实验原理 ①反应原理:H 2O 2――→过氧化氢酶2H 2O +O 2(反应式)。
影响酶的活性,从而影响氧气的生成量,可用带火星的卫生香燃烧的情况来检验O 2产生量的多少。
(2)实验步骤取试管分组编号(1、2、3)→分别注入等量过氧化氢酶溶液→调节pH(分别加入等量的蒸馏水、5%的盐酸、5%的NaOH 溶液)→分别注入等量的3%的H 2O 2溶液→观察气泡产生→带火星的卫生香检验。
[思考] ①上述实验步骤中,调节pH 和注入等量3%的H 2O 2溶液能否调换?说明理由。
提示:不能调换。
酶与底物一接触,就会发生催化作用,使H 2O 2分解,影响实验结果。
②本实验观察到的实验现象是什么?提示:(3)实验结论:pH 能影响酶的活性。
角度一 以实验分析的形式,考查影响酶活性的因素1.(2013·江苏高考稍改动)为了探究温度、pH 对酶活性的影响,下列实验设计合理的是解析:选B过氧化氢受热易分解,不宜用过氧化氢酶探究温度对酶活性的影响,实验①不合理;蔗糖酶不能催化淀粉水解,实验③不合理;斐林试剂呈碱性,能与酸性物质发生反应,不适合用于探究pH对酶活性的影响,实验④不合理。
实验-酶的专一性及影响酶活性的因素-经典PPT课件
0.1
稀释唾液
0.5
0.5
0.5
0.5
混匀,37℃,保温(用反应板)
碘液(滴)
1
1
1
1
观察记录颜色
目录
目录
注意事项 1. 每次加试剂后都要摇匀,碘液不可滴在管壁上。
2. 加碘液要迅速,以保证反应时间相等。 3. 保温100℃的管应先冷却再加碘液,其它各管均
应置于相应温度下或取出后立即加碘液摇匀。 4. 表3和表4使用反应板。 5. 提前烧水,沸水浴时注意安全。
二实验原理一验证酶专一性的实验原理二验证温度ph激活剂和抑制剂影响酶活性的实验原理酶的专一性唾液淀粉酶只能催化淀粉水解最终产物为麦芽糖而不能催化其它糖如纤维素和蔗糖等水解
酶的专一性及影响 酶活性的因素
目录
一、实验目的 1. 掌握 验证酶的专一性及温度、pH、 激动剂和抑制剂对酶活性影响的实验方法。 2. 熟悉 验证酶的专一性及温度、pH、 激动剂和抑制剂对酶活性影响的实验原理。 3. 了解 实验设计的对照原则。
目录
目录
目录
2 . 显色原理 蔗糖与淀粉均无还原性,与班氏试剂呈阴性反应。 麦芽糖和蔗糖的水解产物葡萄糖和果糖皆可与班氏 试剂呈阳性反应(即在一定条件下使班氏试剂中二 价铜还原为一价铜生成砖红色沉淀)。
目录
(二)验证温度、pH、激活剂和抑制剂影响酶活性 的实验原理 淀粉水解为麦芽糖的反应过程经历以下几个 阶段,不同反应阶段的产物遇碘呈现不同颜色:
稀释唾液
1.0
1.0
1.0
混匀,37℃,保温5分钟(用反应板)
碘液(滴)
2
2
2
观察记录颜色
目录
目录
(四) 激动剂和抑制剂对唾液淀粉酶的影响
第8讲 影响酶活性的因素
pH为9
④7 +
70
58
D.尚需补充实验才能确定该酶是否能水 ⑤ 5 +
40
30
解其他反应物
注:+/-分别表示有/无添加,
反应物为Ⅰ型胶原蛋白。
解析:分析②③组可知,没有添加CaCl2,降解率为0,说明该酶的催化活性依赖于 CaCl2,A正确;分析①②变量可知,pH均为9,都添加了CaCl2,温度分别为90 ℃、 70 ℃,故自变量为温度,B正确;②组酶的活性最高,此时pH为9,温度为70 ℃, 但由于分组较少,不能说明最适温度为70 ℃,最适pH为9,C错误;该实验的反应 物为Ⅰ型胶原蛋白,要确定该酶能否水解其他反应物还需补充实验,D正确。
(1)实验设计思路 取 2 支试管(每支试管代表一个组),各加入等量的酶A溶液,再分别加等 量甲物质溶液、乙物质溶液 ,一段时间后,测定各试管中酶的活性。然后将各 试管中的溶液分别装入透析袋,放入蒸馏水中进行透析处理。透析后从透析袋中取 出酶液,再测定各自的酶活性。
(2)实验预期结果与结论 若出现结果①: 透析后,两组的酶活性均比透析前酶的活性高 。 结论①:甲、乙均为可逆抑制剂。 若出现结果②: 透析前后,两组的酶活性均不变 。 结论②:甲、乙均为不可逆抑制剂。 若出现结果③: 加甲物质溶液组,透析后酶活性比透析前高;加乙物质溶液组, 透析前后酶活性不变 。
1 mL (5 min)
1滴
1 mL (5 min)
1滴
不出现蓝色 蓝色
①
②
③
(4)实验结论:温度 过高、过低 都会影响酶的活性, 的活性高。
适宜
温度下酶
2.探究pH对酶活性的影响 (1)实验原理
过氧化氢酶 2H2O2
2H2O+O2↑。
实验9影响酶活性的因素
影响酶促反响的因素 ——温度、pH、激活剂及抑制剂
实验目的
1.学习酶的催化作用特点及影响酶活力的主要因素 2.学习测定酶活力的实验方法
实验原理
生物机体广泛存在各种不同功能的酶,催化不同的生物化 学反响:
过氧化氢酶能催化过氧化氢分解释放氧气和水;唾液淀粉酶 可将淀粉逐步水解成各种糊精、麦芽糖,用碘显色或本尼 迪试剂可以检验酶催化的水解反响产物,并比较反响速度, 从而衡量酶的比活性。通过试管颜色反响,可以定性研究 影响酶活性的因素。
Cl-可以使淀粉酶的活力增加,是其激活剂;而 Cu2+ 使淀粉酶的活力下降,是其抑制剂。
实验器材
材料:唾液
试剂:0.1% 蔗糖,0.1%淀粉, 1% 淀粉,0.2 mol/L Na2HPO4, 0.2 mol/L NaH2PO4, 1% NaCl, 1% CuSO4,1% Na2SO4,本尼迪试剂, 碘水,
实验操作与现象
一.酶的专一性
试
管
0.1% 淀粉(mL)
无酶对照 底物对照
1# 2# 3# 4# 备 注 2 - 2-
0.1% 蔗糖(mL)
- 2-2
唾液(mL)
- - 0.5 0.5
水(mL)
0.5 0.5 - -
现
象
在白瓷盘中滴加2滴碘液,反应开始时和反应结束后分别取两滴反应 液,观察显色反应(37 ℃反应10 分钟)。(此处可初步判断酶活力)
三 pH对酶活力的影响
试
管
1#
2# 3# 4# 5# 备注
0.2 M Na2HPO4(mL) 0.2 M NaH2PO4(mL) 反应体系 pH
1% 淀粉(mL) 温度预处理 唾液(mL) 反应监控
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
酶具高度的特异性。所谓特异性是指一种 酶能对一种化合物或一类化合物起催化作 用,而不能对别的物质发生催化反应。
本实验以唾液淀粉酶为例,此酶只能催化 淀粉的水解,最终产物为麦芽糖和少量的 葡萄糖 。
淀粉水解程度不同,遇碘呈色反应不同。因 此,可以通过呈色反应,了解淀粉水解的程 度,从而间接判断唾液淀粉酶活力的大小。 淀粉水解如下:
影响酶活性的因素
生化实验第五组 组员:林诗雯、伍晨楠、 段宇鑫、王雪翎、张艺
一、目的
1、了解pH对酶活性的影响。 2、了解淀粉的水解过程,与各个过程遇碘
的呈色现象。
二、原理
酶的活性受环境pH的影响极为显著。通常, 各种酶只有在一定的pH范围内才表现它的 活性。一种酶表现其活性最高时的pH值, 称为该酶的最适pH。低于或高于最适pH 时,酶的活性逐渐降低。
五、观察并记录实验现象
实验现象
解释结果
淀粉水解:淀粉 紫色糊精 红色糊精 麦芽糖及 少量葡萄糖
遇碘呈色: 蓝色 紫色 红色 无色
三、试剂与仪器
(一)试剂
蒸馏水 0.2%淀粉液 0.1mol/L柠檬酸 0.2mol/LNa2HPO4 pH8.0缓冲液 pH6.8缓冲液 pH5.0缓冲液 碘液
(二)仪器
控温水浴锅 白瓷板 试管、滴管、移液管(1-2ml)、锥形瓶
0.1mol/L柠檬酸 (mL) 9.70
4.55
0.55
取试管3支,编号,按下表进行操作
项目
试管编号
1
2
3
pH5.0的缓冲溶液(mL)
2
—
—
pH6.8的缓冲溶液(mL)
—
2
—
pH8.0的缓冲溶液(mL)
—
—
2
0.2%淀粉溶液(mL) 稀释唾液(mL)
检查淀粉水解程度
2
2
2
1
1
1
将上述各管溶液混匀后在37℃水浴中保温, 然后每隔1min,从2号管中取出1滴反应液置于白 瓷板上,用碘液检查淀粉水解程度,直至反应液 不再变色(为橙黄色),取出所有试管,冷却。
四、操作步骤
1.稀释唾液的制备:先用自来水漱口以清洁 口腔 ,然后取20mL蒸馏水含于口中,并 做咀嚼动作,2min后吐入小烧杯中,加倍 稀释备用。
附: pH 5.0、6.8、8.0三种缓冲液
2
6.8
3
8.0
0.2mol/LNa2HPO4 (mL) 10.30 15.45 19.45